全 文 ：林业科学研究摇 圆园员猿袁圆远渊远冤院远愿员 远愿缘云燥则藻泽贼 砸藻泽藻葬则糟澡
摇 摇 文章编号院员园园员鄄员源怨愿渊圆园员猿冤园远鄄园远愿员鄄园缘
白蜡虫热激蛋白基因在低温胁迫下的表达分析
刘魏魏袁 杨摇 璞袁 陈晓鸣鄢
渊中国林业科学研究院资源昆虫研究所袁国家林业局资源昆虫培育与利用重点实验室袁云南 昆明摇 远缘园圆圆源冤
收稿日期院 圆园员猿鄄园缘鄄园缘
基金项目院 国家林业公益性行业科研专项 渊圆园员猿园源愿园愿冤尧国家自然科学基金青年基金 渊猿员园园园怨愿猿冤尧云南省应用基础研究基金
渊圆园员园在悦圆猿缘冤和中国林科院资源昆虫研究所中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金渊则蚤则蚤糟葬枣圆园园怨园源酝 原猿袁则蚤则蚤糟葬枣圆园员员园园远酝冤资助
作者简介院 刘魏魏渊员怨怨园要冤袁硕士研究生袁从事资源昆虫分子生物学研究袁耘鄄皂葬蚤造院造蚤怎憎憎泽噪岳 员远猿援 糟燥皂
鄢 通讯作者
摘要院白蜡虫对低温的高度耐受性对其生存尧繁殖及白蜡生产都至关重要遥 为探讨低温胁迫对白蜡虫 澡泽责 表达的影
响袁采用实时荧光定量 孕悦砸渊择砸栽鄄孕悦砸冤袁对白蜡虫二龄雄虫在低温胁迫下 苑 个不同的 澡泽责泽渊澡泽责圆员援 缘袁澡泽责圆员援 苑袁澡泽责源园袁
澡泽责远园袁澡泽责苑园袁澡泽糟苑园袁澡泽责怨园冤的基因表达情况进行了检测遥 结果发现袁除 澡泽糟苑园 外袁其余 澡泽责泽均能被低温不同程度地诱
导袁其中 澡泽责苑园尧澡泽责圆员援 苑 和 澡泽责怨园 的上调量十分显著遥 说明多数 澡泽责泽都与白蜡虫幼虫应对低温胁迫相关遥
关键词院澡泽责袁白蜡虫袁低温胁迫袁荧光定量
中图分类号院杂愿怨怨援 员 文献标识码院粤
耘曾责则藻泽泽蚤燥灶 粤灶葬造赠泽蚤泽 燥枣 匀藻葬贼 杂澡燥糟噪 孕则燥贼藻蚤灶 郧藻灶藻泽 蚤灶 耘则蚤糟藻则怎泽 责藻造葬
怎灶凿藻则 悦燥造凿 杂贼则藻泽泽
蕴陨哉 宰藻蚤鄄憎藻蚤袁 再粤晕郧 孕怎袁 悦匀耘晕 载蚤葬燥鄄皂蚤灶早
渊砸藻泽藻葬则糟澡 陨灶泽贼蚤贼怎贼藻 燥枣 砸藻泽燥怎则糟藻 陨灶泽藻糟贼泽袁 悦澡蚤灶藻泽藻 粤糟葬凿藻皂赠 燥枣 云燥则藻泽贼则赠曰 运藻赠 蕴葬遭燥则葬贼燥则赠 燥枣 悦怎造贼蚤增葬贼蚤灶早 葬灶凿 哉贼蚤造蚤扎葬贼蚤燥灶 燥枣 砸藻泽燥怎则糟藻泽 陨灶泽藻糟贼泽 燥枣
杂贼泽贼藻 云燥则藻泽贼则赠 粤凿皂蚤灶蚤泽贼则葬贼蚤燥灶袁 运怎灶皂蚤灶早摇 远缘园圆圆源袁 再怎灶灶葬灶袁 悦澡蚤灶葬冤
粤遭泽贼则葬糟贼院 栽澡藻 泽贼则燥灶早 贼燥造藻则葬灶糟藻 贼燥 造燥憎 贼藻皂责藻则葬贼怎则藻泽 蚤泽 糟则蚤贼蚤糟葬造 贼燥 贼澡藻 泽怎则增蚤增葬造袁 则藻责则燥凿怎糟贼蚤燥灶 葬灶凿 憎葬曾 责则燥凿怎糟贼蚤燥灶 燥枣
耘则蚤糟藻则怎泽 责藻造葬援 栽燥 蚤灶增藻泽贼蚤早葬贼藻 贼澡藻 藻枣枣藻糟贼泽 燥枣 糟燥造凿 泽贼则藻泽泽 燥灶 澡藻葬贼 泽澡燥糟噪 责则燥贼藻蚤灶 渊澡泽责冤 藻曾责则藻泽泽蚤燥灶 蚤灶 耘则蚤糟藻则怎泽 责藻造葬袁 贼澡藻
贼则葬灶泽糟则蚤责贼蚤燥灶葬造 藻曾责则藻泽泽蚤燥灶 责葬贼贼藻则灶 燥枣 苑 澡泽责泽 渊澡泽责圆员援 缘袁 澡泽责圆员援 苑袁 澡泽责源园袁 澡泽责远园袁 澡泽责苑园袁 澡泽糟苑园袁 葬灶凿 澡泽责怨园冤 蚤灶 泽藻糟鄄
燥灶凿鄄蚤灶泽贼葬则 皂葬造藻 造葬则增葬藻 憎葬泽 藻曾葬皂蚤灶藻凿 遭赠 择怎葬灶贼蚤贼葬贼蚤增藻 则藻葬造 贼蚤皂藻 孕悦砸 渊择砸栽鄄孕悦砸冤援 栽澡藻 则藻泽怎造贼泽 泽澡燥憎藻凿 贼澡葬贼 葬造造 贼澡藻
澡泽责泽 憎藻则藻 蚤灶凿怎糟蚤遭造藻 遭赠 糟燥造凿 泽贼则藻泽泽 藻曾糟藻责贼 澡泽糟苑园援 栽澡藻 藻曾责则藻泽泽蚤燥灶 燥枣 澡泽责圆员援 苑袁 澡泽责苑园 葬灶凿 澡泽责怨园 憎藻则藻 凿则葬泽贼蚤糟葬造造赠 怎责鄄
则藻早怎造葬贼藻凿援 栽澡藻 则藻泽怎造贼泽 蚤灶凿蚤糟葬贼藻凿 贼澡葬贼 皂葬灶赠 澡泽责泽 糟燥则则藻造葬贼藻 憎蚤贼澡 糟燥造凿鄄泽贼则藻泽泽 贼燥造藻则葬灶糟藻 蚤灶 耘则蚤糟藻则怎泽 责藻造葬援
运藻赠 憎燥则凿泽院 澡泽责袁 耘则蚤糟藻则怎泽 责藻造葬袁 糟燥造凿 泽贼则藻泽泽袁 则藻葬造 贼蚤皂藻 孕悦砸
热激蛋白渊匀藻葬贼 泽澡燥糟噪 责则燥贼藻蚤灶袁匀泽责冤是一类生物
体在受到高温等逆境胁迫后大量表达的蛋白袁是机
体自我保护的物质基础遥 匀泽责 作为分子伴侣袁在促
进蛋白质正确折叠 辕重折叠袁防止变性蛋白的聚集袁
降解错误折叠或凝集的蛋白质袁蛋白质的运输和组
装中起重要作用咱员暂 遥 多种不同的胁迫袁如化学物质袁
重金属袁紫外线袁病原物侵入袁均可诱导生物体产生
匀泽责咱圆 原 缘暂 遥 匀泽责普遍存在于原核和真核生物中咱远 原 愿暂 袁
分子量从几千道尔顿到几十万道尔顿不等袁进化上
高度保守尧分布广泛且呈多家族尧多成员的特点袁这
表明它在细胞功能中的重要性和作用机理的复杂
性遥 对昆虫 匀泽责产生尧变化的研究袁有助于了掌握昆
虫的生长发育与各影响因子变化之间的规律遥 但在
匀泽责与昆虫温度耐受性的研究中袁大部分报道集中
在 匀泽责与昆虫高温胁迫的关系方面袁而对 匀泽责 在昆
虫应对低温胁迫中的作用研究不多遥
白蜡虫 渊 耘则蚤糟藻则怎泽 责藻造葬 悦澡葬增葬灶灶藻泽泽冤袁属半翅目
林摇 业摇 科摇 学摇 研摇 究 第 圆远 卷
渊 匀藻皂蚤责贼藻则葬 冤 蚧 总 科 渊 悦燥糟糟燥蚤凿藻葬 冤 白 蜡 蚧 属
渊耘则蚤糟藻则怎泽冤袁是我国一种具有重要经济价值的资源昆
虫遥 广泛分布于 员愿毅晕 到 源圆毅晕袁覆盖亚热带袁暖温
带袁温带地区遥 在长春袁最低气温低于 原 猿园益袁最低
月平均气温约 原 员猿益袁白蜡虫仍可以生存和繁衍后
代咱怨暂 遥 与大多数昆虫相比袁白蜡虫具有更强的生态
适应性和环境可塑性遥 白蜡虫对极端低温的高度耐
受性对其在不同气候带中能否稳定建立和进一步扩
大种群袁以及白蜡生产都是非常重要的袁并且还提供
了一种研究昆虫对低温胁迫适应性机制的材
料咱员园 原 员员暂 遥 目前袁对白蜡虫的大部分研究都集中在白
蜡生产及相关生态学咱员圆 原 员猿暂 袁而其对极端温度适应性
的分子机制尚未研究遥 鉴于 匀泽责在许多昆虫应对不
利环境中都起着重要作用袁推测 匀泽责 也可能参与白
蜡虫的温度适应性遥 因此袁在本实验室所构建的白
蜡虫转录组中 苑 个不同的 澡泽责泽渊 澡泽责圆员援 缘袁澡泽责圆员援 苑袁
澡泽责源园袁澡泽责远园袁澡泽责苑园袁澡泽糟苑园袁澡泽责怨园冤基因核心序列的基
础上袁采用实时荧光定量 孕悦砸渊择砸栽鄄孕悦砸冤法袁对白蜡
虫在低温胁迫下 匀泽责基因表达情况进行了检测遥 研
究结果将有助于了解 匀泽责在白蜡虫对抗逆境胁迫中
的作用机制袁进一步从分子水平上理解白蜡虫的适
应性和种群多样性袁为研究其它昆虫应对温度胁迫
的分子机制提重要参考遥
员摇 实验材料和方法
员援 员摇 供试昆虫
因为二龄期为白蜡虫雄虫发育中寿命最长的时
期袁因此袁本实验所用白蜡虫为二龄雄虫遥 采自昆明
资源昆虫研究所人工大棚渊员园圆援 苑猿毅耘尧圆缘援 园源毅晕冤内
女贞树上袁经查阅尧参考大量相关文献袁并分析白蜡
虫具体的温度耐受性特点后袁将低温处理设置为 缘
原圆园益袁缘益为一个温度梯度遥
员援 圆摇 试虫的低温处理
将女贞树枝条上的二龄雄虫剪下袁装入 员园 皂蕴
离心管袁放于冰箱中袁分别进行 缘益尧园益尧 原 缘益尧
原 员园益尧 原 员缘益尧 原 圆园益的低温处理 员 澡遥 以置于
圆缘益的白蜡虫为对照遥 将每个处理后的白蜡虫从枝
条上剥离袁分别装入 员援 缘 皂蕴 离心管中袁每管虫体 缘园
员园园 皂早遥 用 阅耘孕悦 处理水漂洗虫体 猿 遍袁吸水纸
吸干后加入 员 皂蕴 栽砸陨扎燥造 试剂袁将虫体研磨成匀浆
后袁用 孕葬则葬枣蚤造皂封口膜封住管口袁振荡混匀袁保存于
原 苑园益超低温冰箱以备提取 砸晕粤遥
员援 猿摇 白蜡虫总 砸晕粤的提取尧定量及 糟阅晕粤的合成
按照 栽砸陨扎燥造渊 陨灶增蚤贼则燥早藻灶袁美国冤试剂的使用说明
提取白蜡虫二龄雄虫的总 砸晕粤袁用 员豫琼脂糖凝胶
电泳检测 砸晕粤 的完整性袁并用 月陨韵晕粤晕韵 超微量紫
外可见分光光度计渊栽澡藻则皂燥 杂糟蚤藻灶贼蚤枣蚤糟袁上海冤测定其
浓度和纯度遥
将每个温度处理的总 砸晕粤 浓度用 阅耘孕悦 水稀
释至相同浓度遥
将 砸晕粤浓度定量后袁所有处理均取相同量的总
砸晕粤袁按照 择砸栽鄄孕悦砸 的 酝鄄酝蕴灾 第一链合成系统试
剂盒渊陨灶增蚤贼则燥早藻灶袁美国冤的操作说明袁反转录 糟阅晕粤第
一链遥
员援 源摇 引物的设计与合成
在本实验室构建的白蜡虫转录组 澡泽责 基因核心
序列的基础上袁采用 孕则蚤皂藻则 孕则藻皂蚤藻则 缘渊 增藻则泽蚤燥灶 缘援 园园冤
软件设计各个 澡泽责以及内参基因 茁鄄葬糟贼蚤灶 的荧光定量
引物袁如表 员 所示袁引物的合成委托南京金斯瑞生物
技术有限公司遥
表 员摇 荧光定量引物
基因 缘忆寅猿忆 引物序列
澡泽责圆员援 缘 云 郧粤栽粤粤悦郧粤郧栽栽悦粤郧悦粤郧悦粤栽
砸 栽郧郧粤栽粤悦郧郧栽粤栽栽栽郧粤郧郧栽郧
澡泽责圆员援 苑 云 郧悦悦粤粤栽栽悦粤悦粤悦郧栽悦郧栽栽粤悦
砸 悦郧郧粤郧悦粤粤悦粤粤栽悦郧粤栽粤郧郧粤
澡泽责源园 云 郧悦悦粤悦粤栽栽栽郧悦悦悦粤粤栽栽悦栽栽
砸 悦悦粤悦悦悦粤粤栽悦悦粤粤栽粤栽悦郧栽悦
澡泽责远园 云 栽栽郧悦郧粤粤栽粤粤悦粤悦郧粤粤悦郧粤郧
砸 栽郧郧粤栽栽郧郧悦栽悦悦栽栽栽粤悦栽郧粤栽
澡泽责苑园 云 悦栽悦郧栽郧郧栽粤栽悦悦悦栽悦粤粤粤栽悦
砸 悦悦栽悦悦栽栽栽郧粤悦粤郧栽悦栽栽悦悦栽
澡泽糟苑园 云 粤悦郧郧栽粤栽栽栽栽郧粤粤栽郧栽郧粤郧栽
砸 栽悦栽栽悦粤粤悦郧郧栽郧悦栽悦栽栽悦粤栽
澡泽责怨园 云 悦郧栽郧悦郧栽悦郧栽郧栽粤栽栽悦粤栽栽
砸 悦栽栽悦郧栽郧郧粤栽郧悦悦悦粤粤悦栽栽
茁鄄葬糟贼蚤灶 云 悦悦粤悦郧粤郧粤悦郧粤悦悦栽粤悦粤粤栽
砸 悦郧粤栽悦悦粤栽粤悦郧郧粤郧栽粤悦栽
员援 缘摇 荧光定量
在 悦云载怨远 实时定量 孕悦砸仪渊月蚤燥鄄砸葬凿袁美国冤上进
行相对定量遥 每个样品重复 猿 次遥 反应体系为 圆园
滋蕴院 杂泽燥云葬泽贼 耘增葬郧则藻藻灶 杂怎责藻则皂蚤曾 渊 月蚤燥鄄砸葬凿袁 美国冤 员园
滋蕴袁正向尧反向引物渊圆园 滋皂燥造窑蕴 原员冤各 员 滋蕴袁糟阅晕粤 圆
滋蕴袁凿凿匀圆韵 远 滋蕴遥 反应程序为院怨缘益 猿 皂蚤灶曰怨缘益 员园 泽尧缘缘益 圆园 泽尧读板记录 悦栽 值袁源园 个循环遥 反应完成后袁
系统在 远缘益 怨缘益袁每次升温 园援 缘益袁生成熔解曲线遥
员援 远摇 数据分析
采用 圆 原 驻驻悦栽法咱员源暂 袁以白蜡虫的 茁鄄葬糟贼蚤灶 为内参基
因袁计算每个 澡泽责 皂砸晕粤 相对含量遥 采用 阅孕杂 数据
处理软件袁蕴杂阅法渊 造藻葬泽贼 泽蚤早灶蚤枣蚤糟葬灶贼 凿蚤枣枣藻则藻灶糟藻袁最小显
圆愿远
第 远 期 刘魏魏袁等院白蜡虫热激蛋白基因在低温胁迫下的表达分析
著差法冤袁在 孕 约 园援 园员 的水平进行差异显著性
分析咱员缘暂 遥
圆摇 结果与分析
圆援 员摇 白蜡虫总 砸晕粤的质量
将提取的白蜡虫总 砸晕粤 进行琼脂糖凝胶电泳
后显示出 员愿杂尧圆愿杂两条明亮清晰尧无弥散的条带袁且
点样孔无残留遥 超微量紫外可见分光光度计检测表
明总 砸晕粤样品的 粤圆远园 辕 粤圆愿园比值在 员援 愿 圆援 园 之间遥
说明提取的白蜡虫总 砸晕粤 完整性好尧纯度高袁可以
用于后续实验遥
圆援 圆摇 低温胁迫下白蜡虫二龄雄虫 澡泽责泽 基因表达
变化
摇 摇 白蜡虫的 澡泽责 和 茁鄄葬糟贼蚤灶 荧光定量 孕悦砸 反应的
融解曲线均呈单峰袁说明产物单一袁为特异性扩增遥
荧光定量 孕悦砸 结果显示袁除 澡泽糟苑园 外袁其它 远 个
澡泽责泽在白蜡虫应对低温胁迫时袁与对照组渊圆缘益冤相
比袁均有显著差异渊孕 约园援 园员冤遥 其中 澡泽责苑园尧澡泽责圆员援 苑 和
澡泽责怨园 的 皂砸晕粤的上调量十分显著袁澡泽责苑园尧澡泽责圆员援 苑 在
原员园益的上调量最大袁分别是对照组的 愿园援 苑园 和
缘愿郾 园缘倍曰澡泽责怨园在 原员缘益时增加最多袁是对照组的 员员援
远怨倍遥 澡泽责源园尧澡泽责远园 和 澡泽责圆员援 缘 皂砸晕粤 表达量也有显
著增加袁其中 澡泽责源园和 澡泽责远园在 原员园益时袁分别有 源援 愿愿
和圆援 远源倍的增加量曰澡泽责圆员援 缘在 原员缘益时上调最大袁为
员郾 怨源倍遥 而 澡泽糟苑园 在白蜡虫二龄雄虫的低温胁迫中
是下调表达的袁不能被低温诱导渊图 员冤遥
猿摇 讨论
在白蜡虫二龄雄虫中袁除 澡泽糟苑园 外袁其它 远 个 澡泽责泽
均能被低温不同程度地诱导袁其中 澡泽责圆员援 苑尧澡泽责苑园 和
澡泽责怨园在白蜡虫应对低温胁迫中尤为敏感遥 在其它的
许多昆虫中袁也有与此一致的结果遥 例如袁在两种斑
潜蝇 蕴蚤则蚤燥皂赠扎葬 澡怎蚤凿燥遭则藻灶泽蚤泽 和 蕴蚤则蚤燥皂赠扎葬 泽葬贼蚤增葬藻 中袁
澡泽责怨园尧澡泽责苑园尧澡泽责源园 和 澡泽责圆园均既能被高温和低温所诱
导袁其中 澡泽责苑园 和 澡泽责圆园 对温度比其它家族更为敏
感咱员远 原 员苑暂 遥 对烟粉虱 月藻皂蚤泽蚤葬 贼葬遭葬糟蚤 的高温耐受性与
匀泽责基因的研究发现袁澡泽责圆园和 澡泽责苑园 在烟粉虱的高温
耐受中起着关键作用咱员愿暂 遥 澡泽责怨园 在蒲氏钩蝠蛾 栽澡蚤贼鄄
葬则燥凿藻泽 责怎蚤的低温胁迫中发挥重要作用咱员怨暂 遥
本实验所检测的白蜡虫 澡泽责苑园 是典型的胞质诱
导型 澡泽责苑园渊澡泽责苑园冤袁大部分 澡泽责苑园 是没有内含子的袁
白蜡虫 澡泽责圆员援 苑 为物种特异性 泽澡泽责袁物种特异性 泽澡泽责
大多也无内含子咱圆园暂 遥 这种无内含子的结构可使白
蜡虫 澡泽责圆员援 苑 和 澡泽责苑园 在胁迫应答中无需进行 皂砸鄄
晕粤的拼接袁转录一旦启动袁便能产生成熟的 皂砸晕粤袁
从而能够进行快速转录袁优先翻译袁防止应激原对其
皂砸晕粤前体的影响袁使之能在细胞内快速地选择性
积聚袁以便在应对各种不利的环境刺激时发挥重要
作用遥 在本研究中袁澡泽责怨园 也能被低温胁迫显著诱
导袁推测此白蜡虫 澡泽责怨园 也是诱导型 澡泽责袁无内含子袁
但还需对其做全长克隆等进一步的研究遥
本实验所检测的白蜡虫 澡泽糟苑园 为胞质组成型
澡泽责苑园渊澡泽糟苑园冤 咱圆园暂 袁相比 澡泽责苑园袁澡泽糟苑园 基因有内含子袁
在许多昆虫中是组成型表达的袁在受胁迫时没有显
著改变咱圆员暂 遥 如在嗜眠摇蚊 孕燥造赠责藻凿蚤造怎皂 增葬灶凿藻则责造葬灶噪蚤
和谷实夜蛾 匀藻造蚤糟燥增藻则责葬 扎藻葬 中袁澡泽糟苑园 不能被热激诱
导咱圆圆 原 圆猿暂 曰在黑腹果蝇 阅则燥泽燥责澡蚤造葬 皂藻造葬灶燥早葬泽贼藻则 和二化
螟 悦澡蚤造燥 泽怎责责则藻泽泽葬造蚤泽 中袁 澡泽糟苑园 不 能 被 低 温 诱
导咱圆源 原 圆缘暂 袁本实验有与此相似的结果遥
白蜡虫 澡泽责圆员援 缘 为同源性 泽澡泽责咱圆园暂 袁同源性 泽澡泽责
在序列尧基因结构和功能方面都高度保守袁且至少有
员 个内含子遥 它们在生物体中是组成型表达袁不被
环境胁迫所诱导袁但参与机体的基础代谢过程咱圆远暂 遥
如家蚕 月燥皂遭赠曾 皂燥则蚤中的同源性 泽澡泽责 遭皂圆员援 源 在常温
下为组成型表达袁不能被热激诱导咱圆苑暂 遥 而本实验
中袁澡泽责圆员援 缘 白蜡虫二龄雄虫应对低温胁迫中显著增
多袁这可能是白蜡虫应对极端温度的一种保护性
应答遥
白蜡虫 澡泽责源园 和 澡泽责远园 均能被低温胁迫所诱导遥
目前有关昆虫 澡泽责远园 的研究袁以线粒体 澡泽责远园 居
多咱圆愿尧圆圆暂 遥 澡泽责远园 在线粒体中比在胞质中的含量丰
富袁本实验中的 藻责 原 澡泽责远园 片段袁经过 月造葬泽贼曾 比对袁发
现也是线粒体 澡泽责远园遥 对昆虫 澡泽责源园 家族的报道比
其它 澡泽责家族成员相对较少袁因此昆虫的 澡泽责源园 有待
进一步的研究遥
总之袁多数昆虫在自然生存条件下都会遭遇低
温的胁迫袁白蜡虫作为一种重要的经济昆虫袁分布广
泛袁由于引种和人为干扰因素袁实验室白蜡虫会出现
发育不整齐的现象袁实验室培育的白蜡虫一些个体
圆 月份进入二龄幼虫袁源 月进入成虫期袁因此也会面
临低温胁迫袁作为机体在各种胁迫条件下诱导合成
的 澡泽责是当今生物抗逆生理学研究的一个重要内
容遥 本研究检测了 缘 个 澡泽责 家族的 苑 个 澡泽责 成员在
白蜡虫二龄雄虫低温胁迫中的表达动态袁结果将有
助于进一步了解白蜡虫幼虫及其它昆虫温度适应的
分子机制遥
猿愿远
林摇 业摇 科摇 学摇 研摇 究 第 圆远 卷
注院字母表示与对照渊圆缘益冤相比差异达极显著水平渊孕 约 园援 园员冤遥
图 员摇 低温胁迫对白蜡虫二龄雄虫 澡泽责泽表达的影响
源愿远
第 远 期 刘魏魏袁等院白蜡虫热激蛋白基因在低温胁迫下的表达分析
参考文献院
咱员暂 郧藻贼澡蚤灶早 酝 允袁 杂葬皂遭则燥燥噪 允援 孕则燥贼藻蚤灶 枣燥造凿蚤灶早 蚤灶 贼澡藻 糟藻造造 咱 允暂 援 晕葬贼怎则藻袁
员怨怨圆袁 猿缘缘院 猿猿 原 源缘
咱圆暂 孕造葬灶藻造造佼 砸袁 匀藻则则藻则燥 韵袁 酝葬则贼侏灶藻扎鄄郧怎蚤贼葬则贼藻 允 蕴袁 藻贼 葬造援 悦燥皂责葬则葬贼蚤增藻
藻枣枣藻糟贼泽 燥枣 遭怎贼赠造 遭藻灶扎赠造 责澡贼澡葬造葬贼藻 渊 月月孕冤 葬灶凿 凿蚤 渊 圆鄄藻贼澡赠造澡藻曾赠造 冤
责澡贼澡葬造葬贼藻 渊 阅耘匀孕冤 燥灶 贼澡藻 葬择怎葬贼蚤糟 造葬则增葬藻 燥枣 悦澡蚤则燥灶燥皂怎泽 则蚤责葬则蚤怎泽
遭葬泽藻凿 燥灶 早藻灶藻 藻曾责则藻泽泽蚤燥灶 葬泽泽葬赠泽 则藻造葬贼藻凿 贼燥 贼澡藻 藻灶凿燥糟则蚤灶藻 泽赠泽贼藻皂袁 贼澡藻
泽贼则藻泽泽 则藻泽责燥灶泽藻 葬灶凿 则蚤遭燥泽燥皂藻泽 咱允暂援 粤择怎葬贼蚤糟 栽燥曾蚤糟燥造燥早赠袁 圆园员员袁 员园缘院
远圆 原 苑园
咱猿暂 在澡葬灶早 在袁 在澡葬灶早 匝援 酝燥造藻糟怎造葬则 糟造燥灶蚤灶早袁 糟澡葬则葬糟贼藻则蚤扎葬贼蚤燥灶 葬灶凿 藻曾责则藻泽鄄
泽蚤燥灶 燥枣 澡藻葬贼 泽澡燥糟噪 责则燥贼藻蚤灶 苑园 早藻灶藻 枣则燥皂 贼澡藻 燥赠泽贼藻则 悦则葬泽泽燥泽贼则藻葬
澡燥灶早噪燥灶早藻灶泽蚤泽 则藻泽责燥灶凿蚤灶早 贼燥 贼澡藻则皂葬造 泽贼则藻泽泽 葬灶凿 藻曾责燥泽怎则藻 燥枣 悦怎圆 垣 葬灶凿
皂葬造葬糟澡蚤贼藻 早则藻藻灶 咱允暂 援 郧藻灶藻袁 圆园员圆袁 源怨苑院 员苑圆 原 员愿园
咱源暂 杂葬灶早 宰袁 酝葬 宰 匀袁 匝蚤怎 蕴袁 藻贼 葬造援 栽澡藻 蚤灶增燥造增藻皂藻灶贼 燥枣 澡藻葬贼 泽澡燥糟噪 责则燥鄄
贼藻蚤灶 葬灶凿 糟赠贼燥糟澡则燥皂藻 孕源缘园 早藻灶藻泽 蚤灶 则藻泽责燥灶泽藻 贼燥 哉灾鄄粤 藻曾责燥泽怎则藻 蚤灶 贼澡藻
遭藻藻贼造藻 栽则蚤遭燥造蚤怎皂 糟葬泽贼葬灶藻怎皂咱允暂 援 允燥怎则灶葬造 燥枣 陨灶泽藻糟贼 孕澡赠泽蚤燥造燥早赠袁 圆园员圆袁
缘愿院 愿猿园 原 愿猿远
咱缘暂 月怎则噪藻 郧 砸袁 酝燥则葬灶 晕 粤援 砸藻泽责燥灶泽藻泽 燥枣 贼澡藻 责藻葬 葬责澡蚤凿 贼则葬灶泽糟则蚤责贼燥皂藻 贼燥
蚤灶枣藻糟贼蚤燥灶 遭赠 枣葬糟怎造贼葬贼蚤增藻 泽赠皂遭蚤燥灶贼泽 咱 允暂 援 陨灶泽藻糟贼 酝燥造藻糟怎造葬则 月蚤燥造燥早赠袁
圆园员员袁 圆园院 猿缘苑 原 猿远缘
咱远暂 运葬灶葬早葬泽葬遭葬蚤 砸袁 运则蚤泽澡灶葬皂怎则贼澡赠 运袁 阅则怎澡葬灶 蕴 允袁 藻贼 葬造援 云燥则糟藻凿 藻曾鄄
责则藻泽泽蚤燥灶 燥枣 澡藻葬贼 泽澡燥糟噪 责则燥贼藻蚤灶 圆苑 渊匀泽责圆苑冤 则藻增藻则泽藻泽 孕鄄早造赠糟燥责则燥贼藻蚤灶
渊粤月悦月员冤鄄皂藻凿蚤葬贼藻凿 凿则怎早 藻枣枣造怎曾 葬灶凿 酝阅砸员 早藻灶藻 藻曾责则藻泽泽蚤燥灶 蚤灶 粤凿则蚤鄄
葬皂赠糟蚤灶鄄则藻泽蚤泽贼葬灶贼 澡怎皂葬灶 遭则藻葬泽贼 糟葬灶糟藻则 糟藻造造泽咱允暂 援 允燥怎则灶葬造 燥枣 月蚤燥造燥早蚤糟葬造
悦澡藻皂蚤泽贼则赠袁 圆园员员袁 圆愿远院 猿猿圆愿怨 原 猿猿猿园园
咱苑暂 月葬则怎葬澡 运袁 晕燥则燥怎扎蚤贼葬造造葬遭 孕袁 杂澡蚤澡葬燥 蕴袁 藻贼 葬造援 云藻藻凿蚤灶早 贼则怎灶糟葬贼藻凿 澡藻葬贼
泽澡燥糟噪 责则燥贼藻蚤灶 苑园泽 责则燥贼藻糟贼 粤则贼藻皂蚤葬 枣则葬灶糟蚤泽糟葬灶葬 葬早葬蚤灶泽贼 增蚤则怎造藻灶贼 灾蚤遭则蚤燥
糟葬皂责遭藻造造蚤蚤 糟澡葬造造藻灶早藻 咱允暂 援 云蚤泽澡 驭 杂澡藻造造枣蚤泽澡 陨皂皂怎灶燥造燥早赠袁 圆园员猿袁 猿源
渊员冤院 员愿猿 原 员怨员
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