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Effect of Methoxyfenozide on the Activities of Protective Enzymes in Larvaes of Lymantria dispar

甲氧虫酰肼对舞毒蛾幼虫保护酶活性的影响


测定甲氧虫酰肼(RH-2485)对舞毒蛾幼虫保护酶活性的影响。结果表明: 舞毒蛾2龄、4龄、6龄幼虫经甲氧虫酰肼处理后,其体内的酚氧化酶(PO)、超氧化物歧化酶(SOD)的活性均先被诱导后被抑制。甲氧虫酰肼对舞毒蛾4龄、6龄幼虫体内过氧化物酶(POD)也表现为先诱导后抑制的作用,其中在处理24 h时,对该酶的诱导作用最强,分别为同期对照的1. 603, 1. 805倍; 处理48 h后,对该酶的抑制作用最强,分别为同期对照的0. 858,0. 608倍,差异均极显著(P < 0.01); 但对2龄幼虫体内该酶具有明显的抑制作用,其中在处理24 h后,对该酶的抑制作用最强,为同期对照的0. 541倍,差异极显著(P <0.01)。甲氧虫酰肼对舞毒蛾幼虫体内几丁质酶也存在影响,其中对2龄幼虫体内该酶具有先诱导后抑制作用,对4龄、6龄幼虫体内该酶具有明显抑制作用。因此,甲氧虫酰肼能有效干扰舞毒蛾幼虫正常的生理代谢,从而起到毒杀作用。

In order to study the insecticidal activity and mechanism of methoxyfenozide (RH-2485),this paper measured effects of the chemical on the activities of protective enzymes in the larvals of Lymantria dispar. The results showed that the activities of phenoloxidase (PO) and superoxide dismutase(SOD) in the larvae treated with methoxyfenozide were first induced, and then inhibited. The activities of peroxidase (POD) was different at different instar of larvals in response to treatment of methoxyfenozide. The activities of POD in the 4th and 6th instar larvals were first induced, and then inhibited too. The highest activities of POD in the 4th and 6th instar larvals occurred in 24 h,and were 1.603 and 1.805 times of CK in the same instar. The lowest activities of POD in the 4th and 6th instar larvals occurred in 48 h after being treated with methoxyfenozide, and they were 0.858 and 0.608 times of CK in the same instar, these differences were significant (P<0.01). POD activities of 2nd instar larvaes were remarkably inhibited by methoxyfenozide treatment,and the lowest activities of POD arose in 24 h,with 0. 541 times of CK in the same instar, the difference was significant (P<0.01). The activities of chitinase activities showed different with different instar after treatment with methoxyfenozide, and the chitinase activities in the 2nd instar larvaes were first induced, and then inhibited. But the chitinase activities in the 4th instar larvae and 6th instar larvae were inhibited obviously. Therefore, it was shown that methoxyfenozide disturbed the insect regular metabolism in the larvaes, by which the chemical could efficiently poison L. dispar.


全 文 :第 !" 卷 第 # 期
$ % & & 年 # 月
林 业 科 学
’()*+,)- ’)./-* ’)+)(-*
/012!"!+02#
’345!$ % & &
甲氧虫酰肼对舞毒蛾幼虫保护酶活性的影响!
廖月枝&<严善春&<李小平$<曹传旺&
"&2东北林业大学林学院<哈尔滨 &C%%!%# $2大兴安岭塔河林业局<塔河 &IC$%%$
摘<要!<测定甲氧虫酰肼"JR@$!HC$对舞毒蛾幼虫保护酶活性的影响% 结果表明& 舞毒蛾 $ 龄(! 龄(I 龄幼虫经
甲氧虫酰肼处理后!其体内的酚氧化酶">n$(超氧化物歧化酶" ’nQ$的活性均先被诱导后被抑制% 甲氧虫酰肼对
舞毒蛾 ! 龄(I 龄幼虫体内过氧化物酶">nQ$也表现为先诱导后抑制的作用!其中在处理 $! D 时!对该酶的诱导作
用最强!分别为同期对照的 &2I%=! &2H%C 倍# 处理 !H D 后!对该酶的抑制作用最强!分别为同期对照的 %2HCH!%2
I%H 倍!差异均极显著"! ?%2%&$# 但对 $ 龄幼虫体内该酶具有明显的抑制作用!其中在处理 $! D 后!对该酶的抑
制作用最强!为同期对照的 %2C!& 倍!差异极显著"! ?%2%&$% 甲氧虫酰肼对舞毒蛾幼虫体内几丁质酶也存在影
响!其中对 $ 龄幼虫体内该酶具有先诱导后抑制作用!对 ! 龄(I 龄幼虫体内该酶具有明显抑制作用% 因此!甲氧虫
酰肼能有效干扰舞毒蛾幼虫正常的生理代谢!从而起到毒杀作用%
关键词&<甲氧虫酰肼# 舞毒蛾# 保护酶
中图分类号! q#IC2#<<<文献标识码!-<<<文章编号!&%%& F"!HH"$%&&#%# F%%#= F%"
收稿日期& $%&% F%& F$I# 修回日期& $%&% F%C F%=%
基金项目& 国家公益性行业科研专项"$%%#%!%$# F!$ %
! 严善春为通讯作者%
!))-7#’)8-#6’a<)-(’I$1-’(#6-*7#$,$#$-"’)G/’#-7#$,-!(I<%-"$(
4&/,&-"’)7#5(2’+0( .0&*(+
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M78LW38! 678 :D37 M7DM[M:385,D36W:MYM:M390V43B0mM8693">nQ$ X698MV3B37:6:8MV3B37:M79:6B0V16BY619M7 B3940793:0
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M79:6B16BY63678 I:D M79:6B16BY63X3B3M7DM[M:38 0[YM0L91Z5,D3B3V0B3! M:X699D0X7 :D6:E3:D0mZV370fM838M9:LB[38 :D3
M793W:B3TL16BE3:6[01M9EM7 :D316BY639! [ZXDMWD :D3WD3EMW61W0L18 3VMWM37:1Z40M907 =F1+3C0,F
;-< =’/1"&<<舞毒蛾"=:-0)/,+0 1+3C0,$是一种杂食性食叶害
虫!国外报道可取食 =%% 余种植物!我国文献记载可
取食 C%% 余种植物!严重危害农林植物!给农林业生
产造成了严重的经济损失"周贤等! $%%## 胡春祥!
$%%$# i09:MW./0&5! $%%H$% 非甾醇类蜕皮激素竞争
物以其独特的作用机制(良好的防治效果!对人类(
天敌及环境安全而备受瞩目 "+6k6T6X6! $%%C$!其
中甲氧虫酰肼 "E3:D0mZV370fM83$!又称 JRF$!HC!
是非甾醇类蜕皮激素竞争物中新型化合物!该化合
物能够模拟鳞翅目幼虫蜕皮激素功能!通过作用于
林 业 科 学 !" 卷<
蜕皮激素受体而导致昆虫致死性蜕皮 " ’L7 ./0&5!
$%%=# (6B1907 ./0&5! $%%&$# 该药剂对农作物鳞翅目
害虫有强的毒杀作用!对环境和非靶标生物具有较
高的安全性!已经成为替代有机磷和拟除虫菊酯类
杀虫 剂 防 治 棉 花 "L%33:C+4- 9445$( 玉 米 "5.0
-0:3$(蔬菜及其他农作物上多种鳞翅目害虫的理
想药 剂 " )BMT6B6Z./0&5! $%%C# 朱 丽 梅! $%%&#
’WD73M83B./0&5! $%%!# 顾秀慧等! $%%!$% OD37T等
"$%%$$研究发现蜕皮激素类似物 JRFC##$ 能诱导
云杉卷叶蛾"?$%,+3/%).4,0 ’4-+’.,0)0$I 龄幼虫几丁
质酶蛋白的表达% 虫酰肼及其衍生物 %C#= 对家蚕
"G%->:E-%,+$! 龄幼虫体内多酚氧氧化酶表现为
先诱导后抑制作用!对几丁质酶具有明显诱导作用
"司树 鼎等! $%%H $% 用虫酰肼 处 理 甜 菜 夜 蛾
""C%1%C/.,0 .E+740$自然种群和敏感种群幼虫后!自
然种群酚氧化酶(超氧化物歧化酶(过氧化物酶(几
丁质酶比活力均显著高于敏感种群 "周利琳等!
$%%#$% 然而尚未见利用甲氧虫酰肼防治森林害虫
舞毒蛾的研究报道% 为了深入了解甲氧虫酰肼对舞
毒蛾的杀虫活性及作用机制!本文研究了该药剂对
舞毒蛾不同龄期幼虫的毒杀效果及对其体内酶活性
的影响!为其在林业上的应用提供一定的理论依据%
&<材料与方法
>K>?供试材料
舞毒蛾卵于 $%%# 年 = 月采自东北林业大学哈尔滨
示范林场!该地未使用任何药剂防治% 将采回的卵在室
内孵化!幼虫用健康无药剂污染的成年白桦"G./4&0
C&0/:C$:&0$叶片饲养!每天观察并更换新鲜叶片!及时清
理幼虫的排泄物和食物残渣% 恒温饲养条件& 温度"$C
w&$r!相对湿度 I%]GH%]!光周期 &I.yHQ%
>KJ?毒力测定
采用浸叶法% 在预试验的基础上!用清水将 $!]
甲氧虫酰肼悬浮剂稀释成系列浓度梯度!其中 $ 龄幼
虫选用的浓度为 $!!H!$2"!$2!!%2#!%2$!%2& ET’.F&#
!龄和 I 龄幼虫选用的浓度为 $!%!$!!H!$2"!%2#!%2=!
%2& ET’.F&# 以清水作对照% 将未接触过药剂的白桦
叶片在稀释好的药液中浸 &% 9后取出!在阴凉处晾干%
用蘸有充足水分的脱脂棉裹住叶柄!放入透气性良好
的透明养虫瓶"直径 # WE!高 &! WE$中!然后接入大小
一致的舞毒蛾 $ 龄(! 龄和 I 龄幼虫!每瓶各放入 &C
头!各龄均重复 !次% 置于恒温养虫室内饲养!分别于
!H!"$!#I D后检查死亡数% 用毛笔轻触无反应或不能
活动的视为死亡%
>KL?试虫处理
采用叶片药膜法% 用甲氧虫酰肼 .(C%剂量处
理白桦叶片!饲喂健康(大小一致!且饥饿 &$ D 的
$ 龄(! 龄和 I 龄幼虫!其中 $ 龄幼虫每养虫瓶放
=% 头!! 龄幼虫放 &C 头!I 龄幼虫放 &% 头!处理方
法和饲养条件同 &2$!以清水处理作对照% 分别于
处理后 I!&$ !$!!=I 和 !H D!取活试虫!储存于
FH% r冰箱用于制备酶液%
>KM?保护酶活性测定
&2!2&<酚氧化酶活性测定<从 FH% r超低温冰箱
中取出不同处理时间(大小一致的舞毒蛾 $ 龄幼虫
&% 头(! 龄幼虫 C 头和 I 龄幼虫 = 头!解冻!经缓冲
液漂 洗 后! 置 于 玻 璃 匀 浆 器 中! 加 入 $ E.
%2$ E01’.F&!4R"2% 磷酸缓冲液!冰浴条件下充分
匀浆 $ G= EM7!$ r!&% %%% B’EM7 F&下离心 &C EM7!
取上清液为待测酶液% 酶活测定参考周利琳等
"$%%# $ 方 法 进 行% 在 试 管 中 分 别 加 入 $ E.
%2$ E01’.F&!4R"2% 磷酸缓冲液!%2= E.酶液!立
即混匀!在 =" r水浴锅中预保温 C EM7!然后加入
%2C E.%2%! E01’.F&邻苯二酚!于 =" r振荡反应
C EM7!再加入 %2= E.C] ’Q’ 溶液"十二烷基硫酸
钠的 去 离 子 蒸 馏 水 溶 液 $ 终 止 反 应% 以
%2$ E01’.F&!4R"2% 磷酸缓冲液为对照!于 !&$ 7E
处测定 nQ值% 酶比活力用nQ’ETF& EM7 F&表示%
蛋白质含量测定采用考马斯亮蓝 PF$C% 法
"AB68V0B8!&#"I$% 每个处理均平行重复 = 次%
&2!2$<超氧化物歧化酶活性测定<从超低温冰箱
中分别取出处理好的舞毒蛾 $ 龄幼虫 &% 头(! 龄幼
虫 C 头和 I 龄幼虫 = 头!解冻!经缓冲液漂洗后!置
于玻璃匀浆器中!加入 = E.%2%C E01’.F&!4R"2%
磷酸缓冲液 "含 &] >/>( %2%!] 苯基硫脲和
%2%& E01’.F& *Q,-$!冰浴条件下充分匀浆 $ G
= EM7!! r!&% %%% B’EM7 F&下离心 &C EM7!取上清液
为待测酶液% 酶活测定参考 A36LWD6E4 等 "&#"&$
方法并略作修改% 在试管中加入 = E.反应液"含
C% EE01’.F&!4R"2% 磷酸缓冲液!&= EE01’.F&甲
硫氨酸!&% EE01’.F& *Q,-!"C ’E01’.F& 氮蓝四
唑$和 %2%C E.酶液!最后加 %2I E.! ’E01’.F&
核黄素!以不加酶液管作为最大光还原管!! %%% 1m
下光照 $% EM7 后!立即避光!以未光照的相同反应
管为 对 照 管! 迅 速 测 定 -CI% 值% 酶 比 活 力 用
nQ’ETF&EM7 F&表示% 蛋白质含量测定采用考马斯
亮蓝 PF$C% 法% 每处理均平行重复 = 次%
&2!2=<过氧化物酶活性测定<酶液制备同 &2!2$%
酶活性测定参考 ’ME07 等"&#"!$方法并略作修改%
!#
<第 # 期 廖月枝等& 甲氧虫酰肼对舞毒蛾幼虫保护酶活性的影响
在试管中分别加入 &2H E.%2& E01’.F&!4RI2%
磷酸缓冲液!& E.%2&]愈创木酚!%2= E.酶液和
& E.%2%H]R$n$!混匀!反应 $% EM7!以蒸馏水为
对照! 于 !"% 7E 处 测 定 nQ值% 酶 比 活 力 用
nQ’ETF& EM7 F&表示% 蛋白质含量测定采用考马斯
亮蓝 PF$C% 法% 每个处理均平行重复 = 次%
&2!2!<几丁质酶活性测定<从超低温冰箱中分别
取出处理好的舞毒蛾 $ 龄幼虫 &% 头(! 龄幼虫 C 头
和 I 龄幼虫 = 头!解冻!经缓冲液漂洗后!置于玻璃
匀浆器中!加入 = E.%2& E01’.F&!4RI2I 磷酸缓
冲液! 冰浴 条件下充分匀 浆 $ G= EM7! ! r!
&% %%% B’EM7 F&下离心 &C EM7!取上清液为待测酶
液% 酶活性测定参考周利琳等 "$%%#$方法% 在试
管中分别加入 &2% E.酶液!&2% E.%2C]胶体几
丁质和 &2C E.%2& E01’.F&!4RI2I 磷酸缓冲
液!混匀!于 =" r恒温水浴反应 I% EM7!随后加入
%2C E. 0^1M7 F酚试剂甲!并于 &%% r加热 &% EM7%
冷却后于 ! r!&% %%% B’EM7 F&离心 &C EM7!以除去
未分解的几丁质!取上清液% 以 %2& E01’.F&!
4RI2I磷酸缓冲液为对照!于 !%% 7E处测定 nQ值%
根据 +F乙酰氨基葡萄糖"+-QP$标准曲线计算几
丁质酶比活力!其单位用’E01’ETF&EM7 F&表示% 蛋
白质含量测定采用考马斯亮蓝 PF$C% 法% 每个处
理均平行重复 = 次%
>KN?数据统计分析
>n.n软件处理分析毒力测定结果!计算致死
中浓度".(C%$及其 #C]置信区间# 采用 ’>’’ &=2%
软件进行方差分析!差异显著性检验采用 .’Q方
法!显著水平为 "d%2%C 或 "d%2%&%
$<结果与分析
JK>?甲氧虫酰肼对舞毒蛾幼虫毒力的测定
甲氧虫酰肼对舞毒蛾幼虫不同龄期的致死中
浓度".(C% $及其 #C]置信区间见表 &% 从表 & 可
以看出& 甲氧虫酰肼对舞毒蛾 $!!!I 龄幼虫均表
现出较 高的 活性!其 .(C% 分别 为 $2!! &&2" 和
$&2% ET’.F& "!H D$ !表明 $ 龄幼虫对甲氧虫酰肼
最为敏感!随着舞毒蛾幼虫龄期的增长!所需药量
逐渐增加# 随着处理时间的延长!.(C%逐渐降低%
本试验选择处理 !H D 的 .(C%作为试验剂量处理舞
毒蛾 $!!!I 龄幼虫!来测定甲氧虫酰肼对其体内
酶活性的影响%
表 >?甲氧虫酰肼对舞毒蛾幼虫的毒性
5&+@>?5’a$7$#< ’)%-#6’a<)-(’I$1-#’ #6-B&/,&-’)7K.0&*(+
处理时间
,B36:E37:
:ME3bD
$ 龄幼虫 $78 M79:6B16BY63 ! 龄幼虫 !:D M79:6B16BY63 I 龄幼虫 I:D M79:6B16BY63
.(C% b"ET’.
F& $ #C] (. .(C% b"ET’.
F& $ #C] (. .(C% b"ET’.
F& $ #C] (.
!H $2! $2% G$2H &&2" H2= G&"5% $&2% &=2! G=I5$
"$ $2& &2I G$2C C2$ =2I G"5I &%2% I2I G&C5"
#I &2! %2# G&2# $2# $2% G!5& !2I =2% G"5&
JKJ?甲氧虫酰肼对舞毒蛾幼虫酚氧化酶活性的
影响
甲氧虫酰肼能明显影响舞毒蛾幼虫体内酚氧化
酶活性% 从表 $ 中可以看出& 舞毒蛾 $!!!I 龄幼虫
经甲氧虫酰肼处理后!其体内的酚氧化酶均表现为
先被诱导后被抑制作用% 处理 &$ D 后!药剂对 $!I
龄幼虫体内该酶的诱导作用最强!分别为同期对照
的 &2$%"!&2#$I 倍!随着处理时间的延长!该酶活性
逐渐被抑制"!?%2%&$# 在处理后 I G=I D!处理组
! 龄幼虫体内该酶活性明显升高!=I D 时达到最高!
为同期对照的 &2$"% 倍!!H D 后明显低于对照组"!
?%2%&$!说明该药剂对舞毒蛾不同龄期幼虫体内
酚氧化酶的诱导或抑制作用存在一定的时间效应%
甲氧虫酰肼通过模拟蜕皮激素功能!短期处理能诱
导舞毒蛾幼虫体内酚氧化酶活性升高!增强虫体自
身防御能力!但随着处理时间的延长!药剂在虫体内
富集量的提高!该酶活性逐渐被抑制!说明酚氧化酶
活性与药剂的浓度及处理时间存在一定的相关性%
JKL?甲氧虫酰肼对舞毒蛾幼虫超氧化物歧化酶活
性的影响
从表 = 中可以看出& 甲氧虫酰肼对舞毒蛾 $!!!
I 龄幼虫体内超氧化物歧化酶具有先诱导后抑制作
用% 处理后 I D!对 $ 龄幼虫体内该酶的诱导作用最
强!为同期对照的 &2$!& 倍% 处理后 &$ D!对 I 龄幼
虫体内该酶诱导作用最强!为同期对照的 &2$%" 倍!
$! D 后!处理组 ! 龄幼虫体内该酶活性最高!为同期
对照的 &2$I& 倍% 处理后 =I D!处理组该酶活性均
明显低于对照组!处理时间越长!甲氧虫酰肼对不同
龄期幼虫体内该酶抑制作用越强"!?%2%&$% 上述
结果表明舞毒蛾幼虫龄期的不同!其体内该酶对药
剂的敏感性存在一定的差异!其中 $ 龄幼虫体内该
酶对药剂反应最为敏感!短期内酶活性能迅速提高!
以减轻有毒自由基对虫体的毒害% 但随着处理时间
的延长!药剂在虫体内富集量的增大及虫体自身防
C#
林 业 科 学 !" 卷<
卫能力下降!该酶活性逐渐降低!对有害自由基的消 除能力也逐渐下降%
表 J?不同处理时间甲氧虫酰肼对舞毒蛾幼虫酚氧化酶活性的影响!
5&+@J?!))-7#’)%-#6’a<)-(’I$1-’(96-(’B’a$1&"--(I<%-"&7#$,$#< $(B&/,&-’)
7K.0&*(+$))-/-(##$%-&)#-/#/-&#%-(#
处理
,B36:E37:
时间
,ME3bD
$ 龄幼虫 $78 M79:6B16BY63 ! 龄幼虫 !:D M79:6B16BY63 I 龄幼虫 I:D M79:6B16BY63
比活力 -W:MYM:Zb
"nQ’ETF&EM7 F& $
比值
J6:M0
比活力 -W:MYM:Zb
"nQ’ETF&EM7 F& $
比值
J6:M0
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表 L?不同处理时间甲氧虫酰肼对舞毒蛾幼虫超氧化物歧化酶活性的影响
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JKM?甲氧虫酰肼对舞毒蛾幼虫过氧化物酶活性的
影响
不同的处理时间!甲氧虫酰肼能明显抑制舞毒
蛾 $ 龄幼虫体内过氧化物酶活性!处理 $! D 后!对
该酶 抑 制 作 用 最 强! 为 同 期 对 照 的 %2C!& 倍
"!?%2%&$%但是!对 !!I 龄幼虫体内该酶表现为先
诱导后抑制作用!其中!处理后 $! D!对该酶的诱导
作用最强!分别为同期对照的 &2I%=!&2H%C 倍"!?
%2%&$# =I D 时!处理组该酶活性逐渐降低!!H D后
达到最低!分别为同期对照的 %2HCH!%2I%H 倍"!?
%2%&$"表 !$% 说明甲氧虫酰肼对舞毒蛾幼虫体内
过氧化物酶活性的影响存在一定的龄期差异!其中!
对低龄幼虫体内该酶的抑制作用较强%
JKN?甲氧虫酰肼对舞毒蛾幼虫几丁质酶活性的影响
甲氧虫酰肼对舞毒蛾幼虫体内几丁质酶存在明
显影响% 从表 C 中可以看出& 处理 I D 时!甲氧虫酰
肼对 $ 龄幼虫体内该酶的影响与对照组相比无明显
差异# &$ D 后!处理组该酶活性明显升高!为同期对
照的 &2$"! 倍# $! D 后!该酶活性明显被抑制!与对
照组相比!差异均极显著 "!?%2%&$% 舞毒蛾 !!I
龄幼虫经甲氧虫酰肼处理后!其体内该酶活性均明
显被抑制!均在处理 $! D 后!处理组该酶活性达到
最低!分别为同期对照的 %2C&&!%2$CI 倍!差异均极
显著"!?%2%&$!这说明甲氧虫酰肼对舞毒蛾幼虫
体内该酶的影响也存在一定的龄期差异!对高龄幼
虫体内该酶的抑制作用强于低龄幼虫%
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<第 # 期 廖月枝等& 甲氧虫酰肼对舞毒蛾幼虫保护酶活性的影响
表 M?不同处理时间甲氧虫酰肼对舞毒蛾幼虫过氧化物酶活性的影响
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表 N?不同处理时间甲氧虫酰肼对舞毒蛾幼虫几丁质酶活性的影响
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=<结论与讨论
本研究结果表明甲氧虫酰肼通过模拟蜕皮激素
功能!能有效改变舞毒蛾 $!!!I 龄幼虫体内保护酶
活性!干扰幼虫正常的生理代谢!起到毒杀作用%
酚氧化酶">n$是昆虫表皮鞣化的重要酶系!在
昆虫体壁硬化和黑化过程中起着重要作用% 它参与
黑色素的形成(角质硬化(伤口愈合!阻止微生物和
异物的入侵!对昆虫的成活至关重要"OLV316:0./0&5!
$%%!# 罗万春等! $%%C# ’LTLE6B67! $%%$$% 它通常
以无活性的酚氧化酶原" 4B04D37010mM8693!4B0>n$的
形式存在于昆虫体内!通过特异性蛋白酶来激活
"O0L ./0&5! $%%C$% ;L13B等"&###$研究表明 $% F
羟基蜕皮酮 " $%*$ 能调节冈比亚按蚊 "8)%C$.&.3
70->+0.$细胞内酚氧化酶原基因的表达# 烟草天蛾
"T0)14#0 3.E/0$幼虫在头壳裂开后!蜕皮激素滴度
下降时!酚氧化酶原被激活变为有活性的酚氧化酶!
导致黑色素的合成"RMBLE6./0&5!$%%#$% $% F羟基
蜕皮酮能抑制亚洲玉米螟 "]3/,+)+0 ’4,)0#0&+3$ C 龄
幼虫体内 >n活性"冯从经等! $%%!$% 本研究结果
表明& 用甲氧虫酰肼处理舞毒蛾幼虫后!在 I G&$
D!$ 龄幼虫体内 >n活性被激活# I G=I D!! 龄幼虫
体内该酶活性被激活# I G$! D!I 龄幼虫体内该酶
活性被激活!且均明显高于对照组% 这可能是因为
甲氧虫酰肼模拟了蜕皮激素的作用!低剂量甲氧虫
酰肼激活了舞毒蛾幼虫体内酚氧化酶原活性!从而
使 >n活性升高!这也与处理组幼虫表皮表现出明
显暗淡(黑化相对应% 但随着处理时间的延长!该酶
活性逐渐被抑制!可能与该药剂难以与蜕皮激素受
体分离!持续诱导蜕皮反应!抑制了后续基因及相关
酶系的表达有关"刘永杰等! $%%"$% 随着处理时间
的延长!处理组试虫表现出不能完成蜕皮(新的表皮
不能硬化的症状!与酚氧化酶低于正常水平的表达
也相符合% 另外酚氧化酶活性也可能与该药剂在虫
体内的富集量及虫体自身生理机能有关%
生物体在逆境条件下!细胞内自由基产生与清
除平衡受到破坏!引起 n’ F$ (单线态氧 "
&n$ $(过氧
化氢"R$n$$(羟自由基"Rn’$等增加!这些自由基
"#
林 业 科 学 !" 卷<
具有很强的氧化能力!对许多生物功能分子具有破
坏作用"李周直等! &##!$% ’nQ和 >nQ是生物体
内普遍存在的防御氧化损伤的重要酶类!其中 ’nQ
能清除 n’ F$ 形成 R$n$!R$n$ 能与 n
’ F
$ 形成毒性
更强的 Rn’!但 >nQ能分解 R$n$!从而使自由基
维持在一个很低水平!防止自由基毒害"刘井兰等!
$%%I# 张巍等! $%%H$% 蒋志胜等"$%%=$发现光活
化杀虫剂 "F三噻吩处理淡色库蚊 "?4&.EC+C+.)3
C0&.)3$后!’nQ(>nQ活性均表现出不同程度的增
强!但随后活性均低于对照!均在近紫外光作用下的
第 = 小时对这 $ 种酶抑制作用最强% 本研究发现甲
氧虫酰肼作为蜕皮激素类杀虫剂处理舞毒蛾幼虫
后!$ 龄幼虫体内的 ’nQ(! 龄和 I 龄幼虫体内 ’nQ
及 >nQ均表现为先被诱导后被抑制作用!这表明舞
毒蛾幼虫在不断受到甲氧虫酰肼选择压力的不利环
境下!’nQ和 >nQ活性迅速提高!以减轻这些自由
基对虫体的毒害!但随着甲氧虫酰肼在幼虫体内富
集量的增大!这 $ 种酶活性逐渐降低!造成虫体内自
由基的产生和清除之间失去了平衡!自身防卫能力
下降!从而引起虫体发病甚至死亡% 不同的处理时
间!甲氧虫酰肼对舞毒蛾 $ 龄幼虫体内 >nQ具有明
显的抑制作用!表明甲氧虫酰肼对低龄幼虫的毒害
更强!这与笔者利用甲氧虫酰肼对不同龄期幼虫的
毒力测定结果相一致% 以上说明甲氧虫酰肼对虫体
的毒力与昆虫保护酶系统存在一定的相关性%
几丁质是昆虫表皮和中肠围食膜的重要组成成
分!昆虫生长发育的各个时期都需要一定量的几丁
质!每一阶段都必须维持在一定的水平!过量或缺乏
都将对昆虫造成致命的影响!而几丁质酶的表达水
平对昆虫几丁质的代谢起着重要的调节作用"吴青
君等!$%%"$% 有研究表明几丁质酶活性的增强!使
得几丁质分解代谢加快!破坏了体内原有的几丁质
分解与合成的动态平衡!干扰了蜕皮过程中表皮几
丁质的沉积!导致几丁质含量的减少!从而干扰新表
皮的形成!而几丁质酶活性的降低!会造成新表皮的
前体物质形成缓慢!导致发育历期的延长 "吴青君
等!&##H$% iB6E3B等 "&##=$研究表明& $% F羟基
蜕皮酮能诱导烟草天蛾"T0)14#0 3.E/0$C 龄幼虫几
丁质酶基因表达% OD37T等"$%%=$发现虫酰肼能诱
导云杉卷叶蛾"?$%,+3/%).4,0 ’4-+’.,0)0$几丁质酶在
表皮中表达!处理后的幼虫早期即能检测到几丁质
酶!且表达高峰早于对照组% 周利琳等"$%%#$研究
发现甜菜夜蛾虫酰肼汰选种群几丁质酶比活力均比
敏感种群和自然种群高% 本研究表明甲氧虫酰肼能
明显影响舞毒蛾 $!!!I 龄幼虫体内几丁质酶活性!
破坏几丁质在幼虫体内的平衡!导致幼虫体内几丁
质含量失衡!从而影响它们的生长发育%
参 考 文 献
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=%"!$ & !% F!=5
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的研究5昆虫学报!=""!$ & =## F!%=5
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!="I$ & "C$ F"CI5
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抑制作用5昆虫学报!!H"&$ & =I F!&5
司树鼎!王开运!张文成!等5$%%H5虫酰肼及其衍生物 %C#= 对家蚕
的毒性及作用机理5昆虫学报!C&"&&$ & &&C" F&&I=5
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应用5昆虫知识!=""C$ & =&! F=&"5
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探5昆虫学报!!&"&$ & !$ F!H5
张<巍!张志罡!付秀芹!等5$%%H5转 A:基因水稻对稻纵卷叶螟幼
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C&"&%$ & &%$$ F&%$"5
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究5植物检疫!$="!$ & " F#5
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$="I$ & C% FC$5
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/中国农业科学0中(英文版由农业部主管(中国农业科学院主办% 主要刊登农牧业基础科学和应用基础科学研究论文(
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信所授予*百种中国杰出学术期刊+称号#$%%H 年获中国科技信息研究所*精品科技期刊+称号!及武汉大学中国科学评价中
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中位居*农业综合类核心期刊表+首位% $%&% 年 & 月起中文版改为半月刊!将有更多最新农业科研成果通过/中国农业科学0
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