全 文 ：第 !" 卷 第 # 期
$ % & % 年 # 月
林 业 科 学
’()*+,)- ’)./-* ’)+)(-*
/012!"!+02#
-345!$ % & %
松材线虫与拟松材线虫杂交及后代的致病性#
贲爱玲&!$6过6晔&6韩正敏&
"&2南京林业大学森林资源与环境学院6南京 $&%%78# $2南京晓庄学院生物化工与环境工程学院6南京 $&&&8&$
摘6要!6收集松材线虫 9 虫株与拟松材线虫 & 虫株进行生物学杂交!结果显示’ 松材线虫各虫株均能与拟松材线
虫杂交且杂交率均较高!但杂交后代中普遍存在线虫死亡率较高的现象& 用杂交后代线虫与未杂交亲本线虫分别
接种 $ 年生马尾松苗!结果表明杂交后代线虫对接种松苗的致病性小于其未杂交亲本线虫!从接种后萎蔫的松苗
中再分离线虫!杂交后代线虫再分离数远少于亲本线虫数&
关键词’6松材线虫# 拟松材线虫# 杂交# 致病性
中图分类号! ’8"7666文献标识码!-666文章编号!&%%& C8!##"$%&%#%8 C%&&! C%"
收稿日期’ $%%A C%$ C&$# 修回日期’ $%%A C%9 C$&&
基金项目’ 国家自然科学基金项目"7%#8$%$"$ &
#韩正敏为通讯作者&
L48%*<*[-0*"(8&0;&&(E/3,)6<+(+#-E1./-3&#)5/,-(<0’&7-0’"6&(*9*04 "10’&‘11)$%*(6
DLG -H1HG4&!$6;30 L^&6@FG mKLG4UHG&
"&!()*+,-R+,)7*9+,#$K L$0&*)$3+$-J)A+’+)4"#$%&$’ ()*+,-*./$&0+*,&-.6"#$%&$’ $&%%78#
$!=&)96+3&9#A#$K L$0&*)$3+$-#AL$’&$++*&$’ M96))A)4"#$%&$’ Z&#)W67#$’ /$&0+*,&-.6"#$%&$’ $&&&8&$
58)0%-90’6=7*,#26+A+$967,<.A)26&A7,HPSHVLRLGQVR0U=!<.A)26&A7,HG ?FQK04LGHTHQXFGS SHPQRHI3QH0G5=KLQKLRQKLQY0
P?LTHLPTFG ILTR0PPLS FGS YKFQHPSHVLRLGQHG ?FQK04LGHTHQXILQYLLG QKL1H\L1X0VP?RHG4FGS QKL?FRLGQPFRLHU?0RQFGQ
HGV0RUFQH0G V0RQFg0G0UX! L?HSLUHT! FGS T0GQR010VQKLSHPLFPL5,KLKXIRHSH[FQH0G YFPT0GS3TQLS ILQYLLG 9 HP01FQLP0V=!
<.A)26&A7,VR0USHVLRLGQT03GQRHLPFGS 0GLHP01FQL0V=!379*)$#-7,VR0U(KHGF5,KLRLP31QPPK0YLS QKFQF1GLUFQ0SL
HP01FQLP0V=!<.A)26&A7,YLRLP3TTLPPV31XTR0PPLS YHQK QKLHP01FQL0V=!379*)$#-7,FGS QKLRFQL0VKXIRHSH[FQH0G YFP
RL1VFQHWLKH4K! I3Q?FRQP0VQKLKXIRHS 0VP?RHG4YLRLG0QFI1LQ0P3RWHWL5,KLKXIRHS 0VP?RHG4FGS QKLHR?FRLGQPYLRL
HG0T31FQLS HG ?HGLP0VQY0jXLFRj01S 8&$7,3#,,)$&#$#5,KLRLP31QPF1P0PK0YLS QKFQQKL?FQK04LGHTHQX0VKXIRHS 0VP?RHG4
YFPYLF\LRQKFG QKLHR?FRLGQGLUFQ0SLP! FGS QKLG3UILRP0V0VP?RHG4GLUFQ0SLPRLHP01FQLS VR0U?HGLPYLRLPH4GHVHTFGQ1X
1LPPQKFG QKLHR?FRLGQP5
:&4 ;"%<)’6=7*,#26+A+$967,<.A)26&A7,# =7*,#26+A+$967,379*)$#-7,# KXIRHSH[FQH0G# ?FQK04LGHTHQX
66由于松材线虫"=7*,#26+A+$967,<.A)26&A7,$和拟
松材线虫"=!379*)$#-7,$亲缘关系极为相近!是否
能进行种间杂交并出现杂交后代的问题很早就引起
了人们的重视& 在死亡的松树里经常见到松材线虫
和拟松材线虫!它们时而混生!时而单独出现& 目前
松材线虫和拟松材线虫已被公认为 $ 个不同的种
"杨宝君!&A#9# 沈伯葵等!&AA7$& 二者在致病性和
分布上均有明显差异!松材线虫具有极强的致病性!
无论在野外还是人工接种条件下都能引起松树迅速
萎蔫& 而分布较广的拟松材线虫对松树通常不致病
或致病力极低!绝大多数拟松材线虫只出现于由其
他因素引起的枯死株或濒死株中 "&A8A# J3QFH!&A#%# 程瑚瑞等!&A#"# 杨宝君!&AA9#
胡凯基等!&AA!$&
不少学者对松材线虫与拟松材线虫种间杂交及
种下水平的交配潜力及其后代的致病性%宿主特异
性等 方 面 已 经 进 行 了 研 究& DRFFPTK "&AA!$!
@FlF3\HLYHT[等"&A##$报道一株西伯利亚拟松材线
虫与一种北美有尾尖突型松材线虫株系%德国拟松
材线虫株系与日本松材线虫株系%日本松材线虫株
系与法国拟松材线虫株系具有很高的杂交潜力!杂
交后代数量大!其中德国拟松材线虫株系与日本松
材线虫株系杂交能产生有致病能力的后代"秦复牛
等!$%%7 $# >H4F等"&AA$$以及 D01F等"&AA7$通过部分松材线
虫与拟松材线虫杂交 J& 代可育# 刘伟等"&AA!$用
6第 # 期 贲爱玲等’ 松材线虫与拟松材线虫杂交及后代的致病性
中国不同株系的松材线虫和拟松材线虫与其他国家
的松材线虫和拟松材线虫进行种间杂交试验!结果
表明种间杂交多数后代雌虫较难与父本回交产生子
代幼虫& 他们认为松材线虫和拟松材线虫虽然在人
工试验条件下能杂交成功!但由于种间杂交后代数
量少且不能连续下去!所以认为在自然条件下中国
的松材线虫不会通过与拟松材线虫的杂交而导致疫
区扩大& 季宏铁 "$%%!$报道来源于欧洲的部分拟
松材线虫群体可以与来源于北美洲的某些松材线虫
群体产生可育的杂交后代&
以上研究表明!不同来源的松材线虫和拟松材
线虫虫株之间的杂交可能出现不同的结果& 有的不
能产生后代!有的能够产生后代!有的产生畸形后代
等& 所以松材线虫和拟松材线虫种间杂交还需要进
一步考证!对解释近年来出现的拟松材线虫成片致
病!松材线虫和拟松材线虫虫株在形态上出现交叉
等不明现象有重要的帮助"方光明!&AA"# 姚晓华!
&AA"# 刘伟等!&AA9$& 本文用来自中国江苏宜兴的
拟松材线虫虫株和中国%美国%日本%韩国的松材线
虫虫株进行杂交!研究二者之间的交配能力!杂交后
代的生存能力以及杂交后代的致病性& 以明确在自
然界松材线虫是否会通过与拟松材线虫杂交!这对
松材线虫病流行规律研究及病害的防治有着重要的
意义&
&6材料与方法
=>=?供试线虫
供试线虫为’ 松材线虫 "无尾尖突型$ "简称
Dg$9 个株系!株系号及来源如下’ &$(KjDg&!从南
京溧水采集感病马尾松"8&$7,3#,,)$&#$#$!将采回
的木段劈成小木片后分离松材线虫# $$(KjDg$!从
浙江省采集感病马尾松!将采回的木段劈成小木片
后分离松材线虫# 7$NjDg&!从日本伍太先生提供的
感病木材中分离获得# !$-jDg!从美国进口包装材
中分离获得"江苏出入境检验检疫局提供$# 9$@j
Dg!从韩国进口的包装材中分离获得"江苏出入境
检验检疫局提供$& 拟松材线虫"有尾尖突型$ "简
称 DU$一个株系’ (KjDU!从江苏省宜兴市感病马
尾松分离获得&
所有 线 虫 均 用 贝 尔 曼 漏 斗 法 进 行 分 离
"DF3lFRS!&A#%$!并由本实验室显微镜鉴定后!挑取
7% 条雌%雄成虫放在长满灰葡萄孢"=)-*.-&,9&$+*+#$
的 M’-平板上!$9 b恒温箱中黑暗培养备用&
=>@?未交配雌线虫的获得
为确保种间交配而非种内交配!首先要获得线
虫的(未交配雌线虫)& 为此进行了以下探索’
&$ 真菌培养’ 在直径 9 TU小培养皿中加入
M’-培养基!再接入灰葡萄孢菌丝!待灰葡萄孢菌丝
长满培养皿时挑入 & 条大龄幼虫!培养 7 天后镜检
观察成虫性别&
$$ 少量真菌培养’ 在小培养皿中倒入含 &f&%
M’-的培养基!接入灰葡萄孢菌丝!待灰葡萄孢菌丝
生长 7" K!大约长到培养皿 &f9 大小时挑入 & 条大
龄幼虫培养&
7$ M’-培养’ 在小培养皿中倒入含 M’-的培
养基!不接灰葡萄孢!直接挑入 & 条大龄幼虫培养&
!$ 抗菌素抑制培养’ 在小培养皿的 M’-中加
入青霉素"&%% 万单位*U.C& $ "以杀死线虫体表细
菌$!挑入 & 条大龄幼虫!培养&
9$ 大豆蛋白培养’ 在小培养皿中倒入含大豆
蛋白胨的固体培养基"条大龄幼虫培养&
"$ 生理盐水培养’ 在装有生理盐水的小培养
皿中!挑入 & 条大龄幼虫培养&
8$ 液体培养基培养’ 在小培养皿中倒入 &f&%
马铃薯液体培养基!调节至 ?@!29 _92%"以抑制细
菌生长$!向小培养皿中挑入 & 条大龄幼虫培养&
#$ 无菌水培养’ 在小培养皿中倒入无菌水!挑
入 & 条大龄幼虫培养&
A$ 无菌水加菌丝培养’ 选注射用的小青霉素
瓶!每瓶加入 $ U.无菌蒸馏水!挑入 & _$ 根灰葡萄
孢菌丝!再挑入 & 条大龄幼虫培养&
=>A?杂交方法
&272&6松材线虫和拟松材线虫的杂交方法6在试
管中长满灰葡萄孢的 M’-斜面上接种已培养好的
单条未交配雌成虫和 7 条异种雄成虫!同时作反交
组合!每个组合重复 $% 次& $9 b恒温箱中黑暗培
养 &% 天后!用无菌水洗出各试管中线虫!镜检杂交
后代&
&272$6杂交后代的继代能力测定6为测定杂交后
代的继代能力!在试管中长满灰葡萄孢的 M’-斜面
上放入杂交试验后产生的杂交后代幼虫 7% 条!重复
7 次& 放入幼虫后!$9 b恒温箱中黑暗培养 &% 天!
用无菌水洗出各试管中线虫!镜检繁殖后代!计数后
代线虫数量和成虫雌雄比例&
&27276杂交后代的形态观察6采用热杀死法杀死
线虫’ 用无菌水洗出线虫!将杂交与继代培养的线
虫悬浮液转入离心管中!离心管放在 "9 b水浴锅中
& UHG 杀死线虫!立即向线虫悬浮液中加入等量浓
缩 $ 倍的 J-固定液"福尔马林p冰醋酸 e!p&$& 将
9&&
林 业 科 学 !" 卷6
固定后的杂交与繁殖后代线虫群体在显微镜下观
察!记录线虫形态及成虫的雌雄比等&
=>K?杂交后代线虫的接种测定
接种采用皮接法’ 用无菌解剖刀片在 $ 年生马
尾松苗茎中部的一侧切开长约 %29 TU的伤口!伤口
深达木质部!在伤口处夹入一小团无菌脱脂棉球!用
封口膜将马尾松苗与脱脂棉包扎起来!封口膜外再
用透明胶带包成一个小漏斗!将所有杂交组合后代
线虫悬浮液 %29 U.滴入脱脂棉!线虫接种量约为
7 %%% 条*U.C&!每个杂交组合接种 9 株!同时以蒸
馏水为对照& 在接种后的 $! K 内每隔 7 K 给脱脂
棉滴加适量蒸馏水保湿& 接种后!室内温度保持
$9 _7% b!观察马尾松苗的变化!当松苗嫩梢开始
萎蔫!针叶全部变黄时!将马尾松苗从土中拔出!洗
净根部后将整株剪碎!用无菌水浸泡洗出线虫!离心
收集线虫!显微镜检查线虫分离情况!计数分离线虫
数量&
$6结果与分析
@>=?未交配雌成虫培养方法研究
通过 A 种方法培养大龄幼虫!在 $9 b恒温箱黑
暗培养 7 天后!寻找线虫并在显微镜下观察!确定线
虫的性别供交配使用& A 种方法对于线虫的生长和
观察的难易程度各有不同"表 &$& 前 # 种方法都存
在一定缺陷!用灰葡萄孢培养不易找到线虫# 用培
养基直接培养容易被细菌覆盖# 用生理盐水或无菌
水培养线虫不生长或死亡& 只有无菌水加灰葡萄孢
菌丝培养!既能供给线虫营养!又不利于细菌生长繁
殖!还能容易地找到线虫!是一个较好的方法&
表 =?未交配雌成虫培养方法比较
B-8C=?!"#$-%*)"(1"%0’&#&0’"<"1"80-*(*(6 +&)0-.1&#-.&)(&#-0"<&
培养方法 LP31Q
真菌培养
J3G4F1T31QHWFQH0G
菌丝过密!找不到线虫&
(FG G0QVHGS GLUFQ0SLILTF3PLV3G4F1KX?KFLYFPQ00SLGPL5
少量真菌培养
-PUF1FU03GQ0VKX?KFLT31QHWFQH0G
细菌在 M’-上仍会生长!且与灰葡萄孢菌丝混合!难以观察到线虫&
EHVHT31QQ00IPLRWLQKLGLUFQ0SLILTF3PLIFTQLRHF4RLYYL1FGS YLRLUHgLS YHQK QKLKX?KFL0V=!
9&$+*+#!
M’-培养
M’-ULSH3UT31QHWFQH0G
线虫能存活!但线虫体表的细菌也在培养基上生长!细菌覆盖线虫难以观察&
EHVHT31QQ00IPLRWLQKLGLUFQ0SLILTF3PLIFTQLRH3UFGS GLUFQ0SLYLRL4R0YHG4YL1! FGS GLUFQ0SLP
YLRLT0WLRLS IXIFTQLRHF5
抗菌素抑制培养
-GQHIH0QHTPULSH3UT31QHWFQH0G
细菌在培养基上生长!细菌覆盖线虫难以观察&
EHVHT31QQ00IPLRWLQKLGLUFQ0SLILTF3PLIFTQLRH3U YLRL4R0YHG4YL1! GLUFQ0SLPYLRLT0WLRLS IX
IFTQLRHF5
大豆蛋白培养
’0X?R0QLHG T31QHWFQH0G
培养基颜色过深!细菌在培养基表面!线虫不易观察&
EHVHT31QQ00IPLRWLQKLGLUFQ0SLPILTF3PLULSH3U YFPSFR\ RLS FGS GLUFQ0SLPYLRLT0WLRLS IX
IFTQLRHF5
生理盐水培养
MKXPH0104HTF1PF1HGLT31QHWFQH0G
培养 & 天后线虫全部死亡&
+LUFQ0SLPSHLS FVQLR0GLSFX5
液体培养基培养
P013QH0G ULSH3UT31QHWFQH0G
液体浑浊!有细菌污染物产生!线虫不生长&
(031S G0Q4R0Y! GLUFQ0SLFGS 1H]3HS YFPU3SSX5
无菌水培养
’QLRH1LYFQLRT31QHWFQH0G
线虫略有长大!可能因为没有营养供应!生长缓慢!但很容易观察到线虫&
dIPLRWFQH0G 0VQKLGLUFQ0SLYFPLFPX! I3QGLUFQ0SL4R0YQK P10Y1X5
无菌水加菌丝培养
’QLRH1LYFQLRFSS V3G4F1KX?KFLT31QHWFQH0G
线虫活力强!能发育为成虫!并且易于观察&
+LUFQ0SLPYFP4R0YHG4WLRXYL1! FGS YLRLLFPH1X0IPLRWLS5
@>@?松材线虫和拟松材线虫杂交结果
松材线虫与拟松材线虫杂交!经 &% 天培养后分
离观察!记录杂交的后代数量!后代的存活情况及成
虫的雌雄比!结果见表 $& 结果表明各株系的松材
线虫与拟松材线虫可以杂交且杂交率均较高!由此
可初步判断 $ 个异种线虫之间可以进行杂交& (Kj
DU与 (KjDg& 的杂交组合正交 "雌虫为拟松材线
虫$杂交率达到 A72#o!反交"雌虫为松材线虫$率
比正交杂交率小!正交的子代中!雌成虫比例是雄虫
比例的 &% 倍多!而反交中雄虫比例是雌虫比例的近
$ 倍& (KjDU与 (KjDg$ 的杂交组合正交率高于反交
率!正反交后代雌虫数都明显高于雄虫!成虫比例相
近& (KjDU与 NjDg& 的杂交组合中!正反交率最相
近!说明拟松材线虫和日本松材线虫杂交!无论谁做
母本!其产生后代的能力都相似& (KjDU和 -jDg的
组合正反交都有较高的杂交率!但是正交中成虫比例
大于 9%o!这是所有杂交组合中唯一的成虫比例大
于幼虫的一组!有可能是因为这个杂交组合产生的后
代幼虫发育的比较快!反交的成虫比例仅在 $%o左
右!雌虫比例是雄虫比例的近 " 倍& (KjDU和 @jDg
"&&
6第 # 期 贲爱玲等’ 松材线虫与拟松材线虫杂交及后代的致病性
的杂交组合中!镜检时发现很多线虫已经死亡& 反交
杂交率明显小于正交!且 &% 天镜检时没有发现成虫!
但继续培养 7% 天后出现成虫!说明这一组合的杂交
后代幼虫发育迟缓!杂交后代可育性低&
表 @?松材线虫和拟松材线虫的种间杂交结果!
B-8C@?H&)/.0"10’&’48%*<*[-0*"(8&0;&&(E/3,)6<+(+#-./-3&#)5/,
杂交组合
@XIRHSH[FQH0G
&* c7+
杂交率
>FQL0VKXIRHSH[FQH0Gfo
杂交后代平均成虫比例
>FQL0VHUF40fo
* + 总计 ,0QF1
杂交后代死亡率
>FQL0VKXIRHSPSLFQKfo
(KjDUc(KjDg& A75# % &27 &A27 7&27
(KjDg& c(KjDU 8%2" "28 &&2% &828 &82"
(KjDUc(KjDg$ #928 &!2! 82$ $&2" ""28
(KjDg$ c(KjDU "%2% $$28 !2" $827 9%2%
(KjDUcNjDg& ""28 &A27 "2" $92A &A2%
NjDg& c(KjDU "72$ $%2% #2% $#2% 7"2#
(KjDUc-jDg #92% 9&2% 72% 9!2% &92%
-jDgc(KjDU 892% $%2A 72& $!2% $92%
(KjDUc@jDg 892% !728 9 !#28 792%
@jDgc(KjDU !82! %2% %2% %2% $&2&
66"杂交率 e产生后代试管数f重复试管数 c&%%o# 平均成虫比例 e后代平均雌虫"雄虫$f后代总数 c&%%o& >FQL0VKXIRHSH[FQH0G e/HQR0
G3UILRP0VKXIRHSfQ0QF1WHQR0G3UILRP0VKXIRHSH[FQH0G c&%%o# >FQH00VHUF40eJLUF1"UF1L$ 0VP?RHG4G3UILRPfQ0QF10VP?RHG4G3UILRPc&%%o5
@>A?杂交后代的繁殖情况
线虫杂交后代在 $9 b恒温箱中黑暗培养 &% 天
后!镜检繁殖后代的线虫数量!结果发现试管中的线
虫数量远远大于原有线虫数量"表 7$& 从表 7 中可
以看出!所有杂交组合都能繁殖产生后代且后代雌
雄比例正常!说明松材线虫和拟松材线虫可以杂交
且它们产生的后代可育& 国外的松材线虫和中国拟
松材线虫也能相互杂交!甚至比本地杂交后代繁殖
能力更强& 如本试验中的美国松材线虫虫株和日本
松材线虫虫株!他们与中国宜兴拟松材线虫虫株的
杂交率和繁殖率都大于中国浙江松材线虫虫株!并
且后代的死亡率也较低&
表 A?种间杂交后代继代情况
B-8CA?H&$%"杂交组合
@XIRHSH[FQH0G
* c+
每试管中
后代平均
线虫数量
G3UILR
繁殖率
>L?R0S3TLS
RFQLfo
后代成虫
雌雄比例
>FQL0VVLUF1L
FGS UF1L0V
RL?R0S3TQH0G
*p+
(KjDUc(KjDg& A$" &%% $p&
(KjDg& c(KjDU #%7 &%% $p&
(KjDUc(KjDg$ "A! &%% $p7
(KjDg$ c(KjDU 9&8 &%% $p$
(KjDUcNjDg& A$& &%% &p&
NjDg& c(KjDU 897 &%% &p&
(KjDUc-jDg & 7&! &%% &p&
-jDgc(KjDU 9$$ &%% &p&
(KjDUc@jDg $%" &%% &p&
@jDgc(KjDU &## &%% 9p!
@>K?杂交后代的形态观察
镜检松材线虫和拟松材线虫各虫株杂交后代时
发现部分线虫形态出现变异& 成虫的变异具体的表
现为!雄虫无交合刺或交合伞不发育# 雌虫尾部缢
缩或弯折& 正交和反交后代雌虫尾尖突平均长度相
似!但长短各异!不稳定&
@>O?杂交后代的致病性测定
用各杂交组合的线虫后代接种 $ 年生马尾松
苗!所有杂交组合能使松苗发生萎蔫现象!并且最终
表现出松材线虫病的典型症状& 用无菌水浸泡萎蔫
松苗分离线虫!结果见表 !& 杂交组合 (KjDg& c(Kj
表 K?各线虫杂交后代接种马尾松的致病性情况
B-8CK?7-0’"6&(*9*04 "10’&(&#-0"<&’48%*<)
*("9/.-0&<0" 21.),,&#")#)
杂交组合
@XIRHSH[FQH0G
* c+
接种松
苗株数
+3UILR0V
HG0T31FQLS
?HGL
萎蔫株数
+3UILR0V
YH1QLS ?HGL
发病率
>FQL0V
SHPLFPLfo
每株再
分离线虫数
+LUFQ0SL
RLHP01FQLS
VR0U0GL
YH1QLS ?HGL
(KjDUc(KjDg& 9 ! #% $##
(KjDg& c(KjDU 9 9 &%% $7&
(KjDUc(KjDg$ 9 ! #% $!!
(KjDg$ c(KjDU 9 9 &%% $A$
(KjDUcNjDg& 9 9 &%% $9A
NjDg& c(KjDU 9 9 &%% 7%&
(KjDUc-jDg 9 $ !% &A9
-jDgc(KjDU 9 $ !% &$"
(KjDUc@jDg 9 ! #% A!
@jDgc(KjDU 9 $ !% !!
(KjDg& 9 9 &%% & &"&
(KjDg$ 9 9 &%% #$7
NjDg& 9 9 &%% "99
@jDg 9 9 &%% #!A
-jDg 9 7 "% "8#
(KjDU 9 % % #
无菌水 (Z 9 % % %
8&&
林 业 科 学 !" 卷6
DU!(KjDg$ c(KjDU!(KjDUcNjDg&!NjDg& c(KjDU
的杂交后代线虫接种后发病率较高& 即南京溧水松
材线虫虫株%浙江松材线虫虫株%日本松材线虫虫株
与拟松材线虫杂交的后代对松苗致病性较强& 美国
松材线虫虫株与拟松材线虫虫株杂交的后代!即杂
交组合 (KjDUc-jDg!-jDgc(KjDU接种后对松苗
的致病性最弱& 所有杂交后代接种后再分离到的线
虫数都远少于未杂交的亲本松材线虫& 将这些再分
离线虫用 M’-培养的灰葡萄孢人工继代培养后在
显微镜下观察发现 "8o左右的线虫活力较差!死亡
率远高于亲本线虫&
76结论与讨论
尽管本试验中!不同的杂交组合都会产生一些
不正常的个体!这些畸形的个体有的不能产生后代!
有的会很快死亡!但还有一部分杂交后代是正常的!
甚至有的组合还有杂交优势存在& 虽然杂交后代的
活力较低!死亡率较高!但接种结果表明!部分活力
强的杂交后代能在松苗内繁殖后代!对松苗存在一
定的致病性&
刘伟等"&AA!$发现松材线虫的杂交率远低于
松材线虫的繁殖率!所以认为在野外松材线虫会选
择与自己种群进行繁殖!而不会与拟松材线虫杂交
来扩大种群& 本试验的结果表明拟松材线虫和松材
线虫能成功杂交!杂交率都大于 9%o!而且它们产
生的后代也可育!这就不能排除松材线虫在野外会
与拟松材线虫进行杂交的可能&
DF3lFRS"&A#%$发现法国海岸松"8!2&$#,-+*$上
有松材线虫为害!但虫株的成熟雌虫具有拟松材线
虫的形态特征!人工接种可诱发海岸松等幼苗产生
强烈的病理反应!认为这些虫株属于松材线虫& 而
虫& 季宏铁"$%%!$也认为!法国虫株应为拟松材线
虫!只是它的雌虫尾尖突相对亚洲分离物稍短且对
黑松 "8!-67$@+*’&$ 幼苗有较强的致病性& 而
=HG4VHL1S 等"&A#7$首次从美国明尼苏达州的香脂
冷杉"5@&+,@#A,#3+#$上分离到松材线虫类似物具
有类似拟松材线虫的尾尖突和尾形!研究者也称之
为 (<) 形松材线虫& 在美国佛蒙特! DLR4SFK1
"&A##$从欧洲落叶松" O#*&松材线虫%拟松材线虫特征的交合刺及阴门盖的一
个虫株!该虫株的尾呈指形或否& 用此分离物与欧
洲赤松"8!,.A0+,-*&,$上得到的松材线虫交叉接种证
实两者对落叶松及松树具有致病性& 而在加拿大魁
北克的香脂冷杉上也得到类似于美国香脂冷杉的虫
株& 在日本!类似于美国香脂冷杉上得到的(<)型虫株&
在我国!马承铸等"&AA"$报道在上海佘山发现
了类似于 =HG4VHL1S 发现的 <型松材线虫株系& 此
松材线虫株系是从佘山的濒死黑松上分离到的!这
些线虫株系雌虫尾尖突长度达到 $29 _"2% )U!
在形态上与拟松材线虫十分相似& 但此株系对黑松
有较强的致病性!且群体间杂交结果表明此株系可
与典 型 的 松 材 线 虫 株 系 杂 交 并 产 生 后 代&
方光明"&AA"$报道江西省德兴市马尾松大量死亡!
经林业部%江西省森防站%江西农业大学等专家实地
调查并经症状观察和分离培养鉴定为拟松材线虫
引起&
季宏铁"$%%!$在进行松材线虫与拟松材线虫
的生物学杂交研究时!发现无论是正交还是反交!
松材线虫种内杂交J& 代数量并没有显著差异!试验
中也观察到一些组合的J& 死亡率很高!甚至有些组
合的 J& 代全部死亡# 用来源于法国和俄罗斯的各 &
个拟松材线虫群体不但能与拟松材线虫杂交产生可
育后代!而且可以与来源于北美的部分松材线虫群
体杂交产生可育后代!表明一些欧洲拟松材线虫群
体!似乎处于松材线虫和拟松材线虫之间&
这些迹象均表明!松材线虫和拟松材线虫能够
杂交!并且在一些地区已经形成群体& 松材线虫和
拟松材线虫在野外如果能够杂交!在研究病害流行
学!在进行病害的诊断和执行检验工作时!都应该考
虑这一现象的存在&
参 考 文 献
程瑚瑞!林茂松!钱汝驹5&A#"5松材线虫的形态诊断和致病性的研
究5南京农业大学学报! A"$$ ’ 99 C9A5
方光明5&AA"5拟松材线虫导致马尾松萎蔫5江西林业科技! $7"&$ ’
7&5
胡凯基!王秋丽!杨宝君5&AA!5松材线虫和拟松材线虫不同株系致
病性的研究5林业科学研究! 8"!$ ’ 7#& C7#95
季宏铁5$%%!5松材线虫 "=7*,#26+A+$967,<.A)26&A7,$与拟松材线虫
"=!379*)$#-7,$生物学杂交研究5南京’ 南京农业大学植物保
护学院硕士学位论文5
刘6伟!杨宝君5&AA!5松材线虫和拟松材线虫的杂交遗传差异研
究5林业科学研究! 8"9$ ’ !"A C!875
刘6伟!杨宝君5&AA95松材线虫和拟松材线虫雄虫交合伞形状的
比较5林业科学研究! #"$$ ’ $$7 C$$95
马承铸!钱振宫!顾真荣!等5&AA"5上海佘山发现黑松松材线虫
"=7*,#26+A+$967,*.A)26&A7,$ Z型株系5上海农业学报! &$ "& $ ’
9" C"%5
秦复牛!潘沧桑5$%%75松材线虫病研究进展5安徽农业大学学报!
7%"!$ ’ 78% C78"5
沈伯葵!胡兹苓!包6宏5&AA75松材中两种重要线虫比较的研究5
#&&
6第 # 期 贲爱玲等’ 松材线虫与拟松材线虫杂交及后代的致病性
林业科学!$A"!$ ’ 7!9 C7!A5
杨宝君5&AA95松材线虫和拟线虫在木材和真菌上生产的研究(杨
宝君!朱克恭!周元生!等5中国松材线虫病的流行与治理5北
京’ 中国林业出版社! 7" C!&5
杨宝君5&A#95松树上线虫的鉴定5林业科学! $&"7$ ’ 7%9 C7%A5
姚晓华5&AA"5江西拟松材线虫分布简报5江西林业科技! $7
"&$ ’ 7%5
DF3lFRS M5&A#%5,KRLLGLYP?LTHLP0V=7*,#26+A+$967,"+LUFQ0SF’
,X1LGTKHSF$ FGS 0IPLRWFQH0GP0G QKL4LG3P5>LW3LEL+LUFQ0104HL!
7"$$ ’ &"8 C&885
DLR4SFK1E>5&A##5)U?FTQ0V?HGLY00S GLUFQ0SLHG +0RQK -ULRHTF’
?RLPLGQFGS V3Q3RL5N03RGF10V+LUFQ0104X! $%"$$ ’ $"% C$"95
D01F>)! D0PTKLRQ<5&AA75MHGLY00S +LUFQ0SLP?LTHLPT0U?1Lg’
)GQLRIRLLSHG4 ?0QLGQHF1 FGS TKR0U0P0UL G3UILR5 N03RGF1 0V
+LUFQ0104X! $9"$$ ’ $$8 C$7#5
DRFFPTK @5&AA!5)GQRFFGS HGQLRP?LTHVHTTR0PPHG4Lg?LRHULGQPYHQK F
;LRUFG FGS F ’HILRHFG HP01FQL0V=7*,#26+A+$967,379*)$#-7,
" +LUFQ0SF’ -?KL1LGTK0HSHSFL$ FGS RL1FQLS =7*,#26+A+$967,
P?LTHLP5+FTKRHTKQLG D1FQSLPEL3QPTKLG MV1FG[LGP(K3Q[SHLGPQLP!
!" "&$$ ’ $8" C$#&5
J3QFHZ5 &A#%5 M0?31FQH0G SXGFUHTP0V=7*,#6+A+$967,A&’$&9)A7,
"+LUFQ0SF’ -?KL1LGTK0HSHFL$ FGS =!379*)$#-7,HG ?HGLPLLSHG45
-??1*GQm001! &9’ !9# C!"!5
@FlF3\HLYHT[M,! ,5&A##5*g?LRHULGQF1TR0PPHG40VPL1LTQLS
HP01FQLP 0V =7*,#26+A+$967, <.A)26&A7, FGS =7*,#26+A+$967,
379*)$#-7,5MKXQ0?FQK0104X! 8# "&&$ ’ &9%8 C&9%#5
"+LUFQ0SL’ -?KLGTK0HSHFL$ IX B)$)96#37, #A-+3#-7,
"(01L0?1LRF’ (LRFUIXTHSFL$5+LUFQ0104HTF! &#"$$ ’ &9A C&"$5
"+LUFQ0SF’ -?KL1LGTK0HSHSFL$ VR0U?HGLY00S FGS HQPIH0104XFGS
?FQK04LGHTHQXQ0?HGLQRLLP5+LUFQ0104HTF! $9"7$ ’ 797 C7"&5
>H4F*! DLTKLGIFTK Z! =LIPQLRN<5&AA$5,Fg0G0UHTRL1FQH0GPKH?P0V
=7*,#26+A+$967,<.A)26&A7,FGS =!379*)$#-7,IFPLS 0G HGQLRP?LTHVHT
FGS HGQRFP?LTHVHT TR0PPjKXIRHSH[FQH0G FGS E+- FGF1XPHP5
J3GSFULGQF1FGS -??1HLS +LUFQ0104X! &9’ 7A& C7A95
=HG4VHL1S -! Z0GS0*5&A#75(0U?FRHP0G 0VQKL?HGL
Y00S GLUFQ0SL! =7*,#26+A+$967,<.A)26&A7,! VR0U?HGLFGS IF1PFU
VHR5*3R0?LFG N03RGF10VJ0RLPQMFQK0104X! &7’ 7%" C7$%5
!责任编辑6朱乾坤"
欢迎订阅 @]== 年$林业科学%
.林业科学/是中国林学会主办%中国科协主管的林业综合性学术期刊!创刊于 &A99 年& 代表中国林业
科学研究和林业科技期刊的最高水平& 在三届(国家期刊奖)评选中!两次荣获中国期刊最高奖+++(国家
期刊奖)!一次名列(国家期刊奖提名奖)第 & 名& 目前已被 (-%-N%m>%N’,%(’(E等国内外 $% 多个重要检
索系统与数据库收录&
主要刊登林业及相关领域的最新科研成果!及时反映国家林业建设重点和热点!评述学术动向!开展学
术讨论!促进国内外学术交流& 内容包括森林培育%森林生态%林木遗传育种%森林保护%森林经理%森林与环
境%生物多样性保护%野生动植物保护与利用%园林植物与观赏园艺%经济林%水土保持与荒漠化治理%森林工
程%木材科学与技术%林产化学加工工程%林业经济%林业可持续发展及林业宏观决策研究等方面& 以学术论
文%研究报告%综述为主!还设有学术问题讨论%研究简报%植物新品种与良种等栏目& 读者对象为国内外从
事林业及相关领域研究的科技人员%管理人员以及高等院校的师生& 本刊接受英文稿件"附中文摘要$&
月刊!每月 $9 日出版!大 &" 开!每期 &$# 页& 单价’$9 元!全年’7%% 元& 国内外公开发行& 国内统一刊
号’(+&& C&A%#f’!邮发代号 #$ C"#国际刊号’)’’+&%%& C8!##!发行代号’D可以直接向编辑部订阅&
联系地址!北京万寿山后中国林学会.林业科学/编辑部
邮编!&%%%A&66电话!"%&%$"$##A#$%6"$###98A
期刊网址!KQ?’ffYYY51HGXL\Lg3L5GLQ
,E#-*.’1HGX\gvV0RLPQRX5FT5TG
期刊博客!KQ?’ffI1045PHGF5T0U5TGf1HGX\g
A&&