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Acaricidal Activities of Polygonum aviculare Extracts against Tetranychus cinnabarinus and Their Effects on Enzyme Activities in the Mite

萹蓄提取物对朱砂叶螨的触杀活性及相关酶活性的影响


研究萹蓄不同溶剂提取物对朱砂叶螨的毒力,发现萹蓄氯仿提取物的杀螨活性最高,浓度为2 mg·mL - 1时,雌成螨48 h的校正死亡率可达89.95%,LC50为(0.715 3±0.125 3) mg·mL-1,明显高于石油醚、甲醇提取物(P<0.05)。对萹蓄氯仿提取物进一步萃取、柱层析分离,发现最终得到的19个流分中,第2,7,8,15,16,17,18流分杀螨效果较好,死亡率均达到70%以上,其中流分16的杀螨率达到87.12%。采用比色法测定第16流分对几种酶活性的影响,发现其对朱砂叶螨乙酰胆碱酯酶(AchE),Na +、K+ -ATPase,GSH-S-转移酶的活性均产生不同程度的影响。

This paper showed a study on acaricidal activities of the plant extracts from Polygonum aviculare against Tetranychus cinnabarinus and the effects on the activities of several relevant enzymes. The plant extracts were extracted using different solvents such as chloroform, petroleum ether and methanol. It was found that the corrected mortality of female adults could reach 89.95% (2 mg·mL-1) and the half lethal concentration (LC50) was (0.715 3±0.125 3) mg·mL-1 when using chloroform as the solvent, which exhibited best acaricidal activities among three solvent extracts (P<0.05). Through further extraction and column chromatography, we obtained 19 components from the chloroform extracts, and No.2, 7, 8, 15, 16, 17 and 18 components had acaricidal activities higher than 70%, among them, No.16 caused the mites the highest motality (87.12%). Furthermore, colorimetry assay showed that the component No.16 could affect the activity of acetylcholinesterase (AchE), Na+,K+ -ATPase, GSH-S-transferase (GSTs) of T. cinnabarinus.


全 文 :第 !" 卷 第 #$ 期
% $ # $ 年 #$ 月
林 业 科 学
&’()*+(, &(-.,) &(*(’,)
./01!"!*/1#$
2345!% $ # $
蓄提取物对朱砂叶螨的触杀活性
及相关酶活性的影响!
王有年#6李6青#!%6李照会%6师光禄#
"#1北京农学院生物技术系6农业部都市农业"北方#重点开放实验室6北京农业应用新技术重点实验室6北京 #$%%$"&
%1山东农业大学植保学院6泰安 %?#$#@#
摘6要!6研究蓄不同溶剂提取物对朱砂叶螨的毒力!发现蓄氯仿提取物的杀螨活性最高!浓度为% ;<’;-=#
时!雌成螨 !@ L 的校正死亡率可达 @717A_!-’A$为"$1?#A 8 g$1#%A 8# ;<’;-
=# !明显高于石油醚(甲醇提取物
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分杀螨效果较好!死亡率均达到 ?$_以上!其中流分 #" 的杀螨率达到 @?1#%_$ 采用比色法测定第 #" 流分对几种
酶活性的影响!发现其对朱砂叶螨乙酰胆碱酯酶",3L)#!*9C(ECY,+:9PM!W&\=& =转移酶的活性均产生不同程
度的影响$
关键词%6朱砂叶螨& 蓄& 乙酰胆碱酯酶& *9C!ECY,+:9PM& W&\=& =转移酶
中图分类号! &?"?18666文献标识码!,666文章编号!#$$# =?!@@"%$#$##$ =$#$8 =$A
收稿日期% %$$7 =#$ =##& 修回日期% %$$7 =#% =$!$
基金项目% 国家自然科学基金项目"8$@?%$%7# & 北京市自然科学基金重点项目""$?#$$## & 北京市自然科学基金项目""$7%$$?# & 北京市
科委区县专项资金项目& 北京市教委平台建设项目& 北京市都市农业学科群项目"mE#$$#7$AA8# & 北京市属高校人才强教深化计划资助项目
":\I%$$7$A#"!:\I%$$7$"#8!# $
!师光禄为通讯作者$
;<&5-<-3&*;<’-K-’-($#4/$#6<$9)+"F-%)#"(&QU’5&<’$&9&-/$’
E&7("96%5)*%-99"8"(-9)*&/3B"(-5Q44(<’$#/Q/.06(;<’-K-’-($-/’"(M-’(
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;,$’5&<’%6+LHPR9RMSPL/ZMU 9P4JUV/N 939SH3HU90934H[H4HMP/>4LMR09N4MQ4S934P>S/;J-605-),9 $G+&,6$%"9<9HNP4
U"*%$)0&’,#&+))$8$%+),#9NU 4LMM>M34P/N 4LM934H[H4HMP/>PM[MS90SM0M[9N4MNKV;MP5+LMR09N4MQ4S934PZMSMMQ4S934MU JPHN<
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?! @! #A! #"! #? 9NU #@ 3/;R/NMN4PL9U 939SH3HU90934H[H4HMPLHLHM344LM934H[H4V/>
93M4V03L/0HNMP4MS9PM",3L)#! *9C!ECY,+:9PM! W&\Y&Y4S9NP>MS9PM"W&+P# />UM&+))$8$%+),#M
=(0 >#53$%6U"*%$)0&’,#&+))$8$%+),#& J-605-),9$G+&,6$%"& 93M4V03L/0HNMP4MS9PM",3L)#& *9C!ECY,+:9PM& W&\Y&Y
4S9NP>MS9PM
66朱砂叶螨 "U"*%$)0&’,#&+))$8$%+),##是一种世
界范围的重要经济害虫 "\9K9N "*$65!#7?!& \/"*
$65!#77?#!具有个体小(繁殖快(种群密度高(危害重
等特点"师光禄等!#77!& 李连昌等!#77%#!比其他
害螨更易对常规化学杀螨剂产生抗性!防治费用也
随着抗药性的逐年增加而加大!因此!寻找更加安全
的高效杀螨剂势在必行$ 植物源杀螨剂具有选择性
好(低毒(易降解(害螨不易产生抗性!对目标害螨的
天敌昆虫伤害较小等优点$ 近年来!从植物提取物
中筛选出高活性的物质!直接开发新的生物源杀螨
林 业 科 学 !" 卷6
剂!或以其为先导化合物合成新的更安全高效的农
药!已成为国内外农药研究开发领域的一个热点$
蓄"J-605-),9$G+&,6$%"#又名多茎蓄!为蓼
科":/0V全国各地!以河南(四川(浙江(山东(吉林(河北等地
产量较大!生于田野(路旁(水边和湿地$ 有关蓄
应用于医学方面的研究较多!但有关杀螨活性成分
的研究却鲜见报道$ 本文紧密结合当前生产实践!
系统研究了蓄植物杀螨活性成分及作用机制!为
开发植物源农药提供科学的理论依据$
#6材料与方法
?@?A材料
试材蓄"叶#购于北京某药店!经高速粉碎机
"型号 "%$%!北京环亚天元机械技术有限公司#粉碎
后过 !$ 目筛!放入冰箱"F’DY%?@i**!青岛海尔股
份有限公司#备用$ 朱砂叶螨源于室内饲养的敏感
品系!温度"%A g##d!相对湿度 I\f"A$ g#$#_!
光照 -vDf#@ Lv" L$ 所用试剂均为分析纯"北京
化工厂#$
?@DA方法
提取% 称取一定量的试材干粉!装入广口瓶内!
加入干粉 A 倍量的有机溶剂"石油醚(氯仿(甲醇#!
室温下"%A g%# d分别浸提 8 次!每次 8 ‘A 天!分
别合并 8 种提取液并减压浓缩至膏状后!称质量$
萃取% 称取蓄氯仿提取物 #A 溶解!装入分液漏斗中!用甲醇萃取 8 次!合并萃取
液并减压浓缩至稠膏状!称量$ 柱层析% 称取萃取
物 #$$ 倍量的硅胶"#$$ ‘%$$ 目# !与适量的洗脱
液混匀!迅速注入层析柱中!并用橡胶锤轻敲柱壁!
同时!打开底端的旋塞!使溶液缓慢下移!硅胶颗粒
紧密沉集在柱底$ 取萃取物 ? <用少量初始洗脱液
溶解!待柱内溶液表面距硅胶表面 # 3;左右时!将
待分离物质沿柱内壁注入!待需分离物质移动到硅
胶表面以下时!覆盖一层石英砂!然后分别用石油
醚(氯仿(甲醇溶剂系统进行洗脱& 流速为 #$
;-’;HN =#!每流分收集 A$ ;-!经薄层层析 "+-’#
后!置于碘蒸气中进行检测!做好标记$ 将相同成分
者合并!最终得到 #7 个流分!分别减压浓缩后进行
生物活性测定$
生测采用玻片浸渍法 "a,2!#7@$#!用双面胶
条将健康活泼(大小一致的 8$ 头雌成螨粘于载玻片
的一端!于药液中浸 A P后取出!并用滤纸吸掉螨体
周围多余药液!处理后置于室温"%A g##d下!!@ L
后观察其死亡情况!接触动者为活!不动者为死!按
,TT/4公式计算校正死亡率 ",TT/S4!#7@?#$ 症状
观察采用叶碟浸渍法 "朱丽梅等!%$$%#%将洗净的
平展的大豆叶片于水培养台上!每一叶片挑入成螨
8$ 头以上!待成螨稳定后!夹取叶片浸入药液
"% ;<’;-=## 中 A P!以清水处理为对照$ 叶片边
缘用湿棉条围住!以防螨体逃逸$ 每 #% L 观察 # 次
成螨的活动及反应状况!共观察 ! 次$
酶液制备% 将试螨用触杀方法处理!分别取处
理后的 @!#"!%!!8%!!$!!@ L 的雌成螨 #A$ 头!加
$1%A ;-生 理 盐 水 在 冰 浴 中 匀 浆 后! #$ $$$
S’;HN =#!! d下离心 #A ;HN !取上清液备用& 蛋白
质含量测定采用考马斯亮蓝 WY%A$ 法 "慕立义!
#77##$ 加酶液 $1# ;-于 A ;-考马斯亮蓝 WY%A$
试剂中混匀!%A d水浴中恒温加热 % ;HN!于 A7A N;
波长处比色测定 2D值!然后根据标准曲线得出蛋
白质含量$ 乙酰胆碱酯酶",3L)#!*9C(ECY,+:9PM
及 W&\=& =转移酶均参照慕立义"#77##的有关方
法进行酶活性测定$
%6结果与分析
D@?A蓄提取物对朱砂叶螨的触杀作用
蓄 8 种溶剂的提取率分别为甲醇 "##1@" g
$1A"#_ k氯仿 "%1"A g$18@#_ k石油醚 "#1A" g
$1$@#_$ 将石油醚(氯仿和甲醇提取物分别配制成
浓度为 % ;<’;-=#药液!对害螨进行毒力测定 "表
##!结果表明% !@ L 后!蓄氯仿提取物的触杀活性
明显大于其余 % 种有机溶剂提取物"Jq$1$A#!对朱
砂叶螨的触杀效果达到 @717A_$ 为此选择蓄的氯
仿提取物作进一步的萃取与纯化$
表 ?A蓄不同溶剂提取物的提取率及其对
朱砂叶螨的触杀作用!
B&,C?AQU’5&<’5&’(&/36#5’&*-’0 #43-44(5(/’(U’5&<’$
45#6/."F-%)#"(&&9&-/$’E.%-99"8"(-9)*
提取物 )Q4S934Ph
"% ;<’;-=# #
提取率
)Q4S934H/N S94Mh_
死亡率
X/S490H4Vh_
石油醚提取物
:M4S/0MJ;M4LMSMQ4S934
#1A" g$5$7 !71A# g%57? T
氯仿提取物 ’L0/S/>/S;MQ4S934 %1"A g$58% @717A g8578 9
甲醇提取物 XM4L9N/0MQ4S934 ##1@" g#5$A #81"# g?58A 3
66!表中数据为 8 次试验重复结果"平均值 g标准误# !同一列的
不同字母表示差异显著"Jq$1$A# !下同$ .90JMP9SM;M9N g&)/>
4LSMMUM4MS;HN94H/NP!4LM;M9N ZH4LHN 4LMP9;M3/0J;N N/4>/0/ZMU TV4LM
P9;M0M4MS9SMPHH39N40VUH>MSMN494A_ 0M[M0/>3/N>HUMN3M!4LMP9;M
TM0/Z5
D@DA萃取物对朱砂叶螨的触杀作用
将触杀效果较好的氯仿提取物用甲醇和石油醚
进行萃取分离 "表 % # $ 其萃取率为% 石油醚
!$#
6第 #$ 期 王有年等% 蓄提取物对朱砂叶螨的触杀活性及相关酶活性的影响
"A@1!% g#1!$#_ k甲醇 "8%1@@ g%18%#_ k中间
不溶物"@1?$ g$1"@#_& 萃取物生物测定结果表
明% 中间不溶物杀螨率为"@!1$$ gA18%#_!明显高
于甲醇萃取物 " !$1?! g%1"! #_和石油醚萃取物
"8%1"7 g#18%#_ "J q$1$A#!由此可确定蓄的
杀螨活性物质主要存在于中间不溶物中$
表 DA不同萃取物萃取率及其对朱砂叶螨的触杀作用
B&,CDAQU’5&<’5&’(&/36#5’&*-’0 #4<"*#5#4#56(U’5&<’$
45#6/."F-%)#"(&&9&-/$’E.%-99"8"(-9)*
萃取物 )Q4S934Ph
"% ;<’;-=# #
萃取率
)Q4S934H/N S94Mh_
死亡率
X/S490H4Vh_
石油醚萃取物
:M4S/0MJ;M4LMSMQ4S934
A@1!% g#5!$ 8%1"7 g#58%3
中间不溶物(NUHP3MSR4HT0MPJTP49N3M @1?$ g$5"@ @!1$$ gA58%9
甲醇萃取物XM4L9N/0MQ4S934 8%1@@ g%58% !$1?! g%5"!T
D@EA最佳流分及其生物活性测定
对柱层析分离及 +-’检测后得到的 #7 个流分
"表 8#进行生物测定!结果表明% 流分 %!?!@!#A!
#"!#?!#@ 对朱砂叶螨的触杀效果较好!均达到 ?$_
以上!其中在 % ;<’;-=#时!流分 #" 的杀螨效果最
好!达到了 @?1#%_& 且由于其得率较高!因此选择
该物质进行后续研究$
将所得流分 #" 配制成 A 个不同浓度的药液
"$1A!#!%!!!@ ;<’;-=# #进行生物活性测定!分别
求出毒力回归方程"0fA1%?$ % C#1$$8 @=#及致死
中量 -’A$"$17@@ ;<’;-
=# #!可见其有较好的生物
活性$ 药液浓度为 % ;<’;-=#时!!@ L 后害螨死亡
率达到 @?1#%_!适于后续酶活性的进一步研究$
因此选择 % ;<’;-=#这一药剂浓度进行症状观察及
酶的活性测定$
表 EA柱层析各流分对朱砂叶螨成螨的触杀作用
B&,CEAQU’5&<’5&’(&/36#5’&*-’0 #445&<’-#/$#4<"5#6&’#95&%"0 (U’5&<’#4/."F-%)#"(&&9&-/$’E.F-&99&9*-*
流分
(P/094H/N >S934H/N
分离率
(P/094H/N S94Mh_
校正死亡率
X/S490H4Vh_
流分
(P/094H/N >S934H/N
分离率
(P/094H/N S94Mh_
校正死亡率
X/S490H4Vh_
# %1?? "71A% g?58" T ## $1"? ##1%7 g#A5?8 9T
% #1"@ ?"1"# g?5%" 9 #% $1!7 !1?% g$5%# 9T
8 %1$! 8@1AA g#!5$8 9T3 #8 #1#! %?1@8 g$5#7 9T
! $1"@ 8@1!7 g85?? 9T3 #! $17@ "?1!A g?5$@ T3
A #1$% 8"1@" g"5%A 9T3 #A %1%@ ?#1@? g?58" T
" $1!% !?1$@ g858$ 9T #" %%18% @?1#% g$5$! 9T
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@ 81%8 ?"17! g#85%? T #@ A1!@ ?A1"@ g!5#% T3
7 %1#% A@1A$ g?5#@ 9T3 #7 #!1%8 "#177 g"5%% 9
#$ $1!A #A1!" g75%# 9T3 + + +
D@FA症状观察
用流分 #" "% ;<’;-=# #及清水处理雌成螨进
行症状观察!发现 $ ‘#% L 间!处理组害螨表现十分
兴奋!四处爬动!并急剧产卵!而对照组则缓慢爬动!
正常取食叶片& #% ‘%! L 间!处理组试螨背部体液
开始外渗!四处窜动!产卵量有所下降!而对照组行
为正常!并开始产卵& %! ‘8" L 间!处理组试螨体液
仍保持外渗状态!身体开始收缩!对照组则正常爬
动!未见异常& 8" ‘!@ L 间!处理组试螨身体逐渐收
缩至死亡!对照组则身体饱满!活动正常$ 经流分
#" 处理后!表现的症状与神经毒剂有相似之处!如
兴奋(抽搐等!由此推测!该活性物质可能对神经系
统有一定的作用$
D@GA乙酰胆碱酯酶的活力测定
将流分 #" "% ;<’;-=# #和清水分别喷施于朱
砂叶螨体表!作为处理组和对照组!经测定两者乙酰
胆碱酯比活力变化如图 # 所示% @ L 时!处理组比活
力为$1$$7 @ b’;<=#!是对照组的 $1%# 倍!低于对
照"Jq$1$##& #" ‘!@ L 间!对照组比活力分别是
处理组的 %1@8!#1?A!#17!!%1!?!$1?$? 倍$ #" ‘!$
L 间!处理组比活力均低于对照组$ 可见!流分 #"
对朱砂叶螨的乙酰胆碱酯酶具有一定的抑制作用$
图 #6蓄活性物质对朱砂叶螨乙酰胆碱酯酶
活性的影响
aH<5#6)>M34/>4LMMQ4S934P/>JM$G+&,6$%"
/N 4LM934H[H4V/>,3L)/>UM&+))$8$%+),#
D@SA]& d&=dL;B!&$(的活力测定
从图 % 可以看出% 害螨经流分 #" 处理后!*9C!
ECY,+:9PM比活力变化趋势与对照 "清水#基本相
A$#
林 业 科 学 !" 卷6
同!@!#"!8%!!$ L 变化不大& %! L 和 !@ L 时!对照
组的比活力分别为处理组的 81#@ 倍和 #@ 倍!抑制
效果显著$
图 %6蓄活性物质对朱砂叶螨 *9C!
ECY,+:9PM活性的影响
aH<5%6)>M34/>4LMMQ4S934P/>JM$G+&,6$%"/N 4LM
*9C!ECY,+:9PM934H[H4V/>UM&+))$8$%+),#
D@TA对谷胱甘肽 H)H转移酶活性的影响
谷胱甘肽 =& =转移酶是螨类体内最活跃的解
毒酶系之一!它能催化有毒的亲电化合物与内源性
的还原型谷胱甘肽发生共轭反应!进行解毒代谢$
由图 8 可知!@!%!!8%!!$ L 时!组分 #" 对谷胱甘
肽 =& =转移酶活性具有一定的抑制作用!对照组
比活力分别是处理组的 #1%7!#1%"!#1%7!#18% 倍&
!@ L时!对照组是处理组的 $1A%$ 从整体情况来看!
谷胱甘肽 =& =转移酶是受抑制的$
图 86蓄活性物质对朱砂叶螨 W&+P酶活性的影响
aH<586)>M34/>4LMMQ4S934P/>JM$G+&,6$%"/N
4LMW&+P934H[H4V/>UM&+))$8$%+),#
86讨论
通过提取(萃取!柱层析以及色(光谱技术!对扁
蓄的杀螨活性成分进行了初步分离提纯!发现此成
分对朱砂叶螨乙酰胆碱酯酶 ",3L)#!*9C(ECY
,+:9PM!W&\=& =转移酶的活性均产生了不同程度
的影响$ 大多数杀螨剂是通过干扰神经系统来发挥
致死作用的!而且其中毒特征多表现为颤栗(痉挛(
麻痹或是其他行为发生改变$ 神经细胞间的化学信
息传递主要依靠神经传递素的合成与分解!已经报
道了许多被公认的神经传递素!如乙酰胆碱(伽马氨
基丁酸(真硝胺等!其中已有一些被证明为杀螨剂的
靶标"DM^MVPMS"*$65!#77!#$ 笔者所观察到害螨施
药后的症状与上述神经毒剂的症状有相似之处!因
此选择神经系统中 % 个重要酶系!即乙酰胆碱酯酶
与 *9C!ECY,+:9PM% 种酶的活性进行测定$ 乙酰
胆碱存在于突触间隙中并可被乙酰胆碱酯酶分解!
从而终止神经兴奋的传导!一旦该酶被一定程度的
抑制!会促使昆虫过度兴奋后死亡 "林忠莲等!
%$$##$ 本研究结果表明% 蓄提取物流分 #" 对乙
酰胆碱酯酶的活性具有明显的抑制作用!#"!!$!
!@ L后均可见到明显的抑制效果"图 ##$ 神经细胞
的离子组成不同于周围介质!它取决于细胞膜对不
同离子的渗透性(周围介质中这些离子的浓度以及
在细胞膜上离子泵的的活性 "林忠莲等!%$$# #$
*9C!ECY,+:9PM广泛分布于细胞膜及内质网等膜
成分之中!与 *9C!EC的传递有关!该酶受抑制时!
膜对离子的通透性降低!*9C流受抑制!引起膜内
*9C浓度升高!造成神经膜处于持续的兴奋状态!继
而引发神经系统功能紊乱!最终导致昆虫死亡 "张
宗炳!#7@% #$ 试验结果表明!药剂处理后的害螨
*9C!ECY,+:9PM活性在 !$ ‘!@ L 时间段内变化明
显!与乙酰胆碱酯酶出现的时间段相同!且与观察到
的与之相应症状出现的时间段也基本相符!由此可
推断!活性物质可能通过对这 % 种酶活性的影响!引
起神经传递的阻断从而导致螨体死亡& 谷胱甘肽 =
& =转移酶能催化生物体内的还原型谷胱甘肽
"W&\#与外源化合物的亲电子基团发生轭合!最终
形成硫醚氨酸排出体外!其活性的升高可作为动物
组织损伤的敏感指标 "沈同等!#77$& 深见顺一!
#77!#$ 这种高效的解毒代谢体系在生物体与外界
不良环境因子的适应过程中很可能发挥重要作用$
从本研究结果来看!处理组酶活性受到抑制可能会
影响朱砂叶螨的正常解毒代谢!从而导致有毒物质
在螨体内积累!引起死亡$
近年来!有关蓄的报道多局限于临床医学方
面!例如 EH;等"#77!#从蓄中分得黄芪甙(蓄
甙(槲皮甙(杨梅树皮甙$ 郑旭东等"#777T#从蓄
"乌蓼 #中分离得到 A 个黄酮类物质$ .VP/3LHN9
"#77@#从蓄的地上部分分得 b<09NHN "山萘酚 =
8 =2=阿拉伯糖昔#(山萘酚(杨梅素(杨梅素 =8 =
2="半乳糖# % 及 % 个未知黄酮类化合物$ 于兆海
等 " %$$% # 从中分离得到 @ 种物质$ 赵爱华等
"%$$%#从蓄丙酮提取物中分离到 #$ 个化合物$
"$#
6第 #$ 期 王有年等% 蓄提取物对朱砂叶螨的触杀活性及相关酶活性的影响
陈晓虎等"%$$!#从乙酸乙酯部位分离到 #8 个化合
物$ 郑旭东等"#7779#从蓄的挥发油分离到 4=
莰酮(芳樟醇(匙叶桉油烯醇(莰烯$ ,0Y\9KH;H等
"%$$% # 从  蓄 丙 酮 提 取 物 中 分 离 到 "Y
;M4L/QVR0J;T9虫 " V"6+&-G"%:$ $%9+5"%$ #( 小 菜 蛾 " J6,*"6$
=06-#*"6$#(菜青虫"J+"%+#%$:$"#的杀虫活性!但有关
蓄对朱砂叶螨的杀螨活性尚未见报道$ 本研究利
用相似相容原理!从蓄中分离出了杀螨活性物质!
并对朱砂叶螨的生物活性及几个重要酶的影响进行
了初步测定!为该活性物质的结构鉴定(作用机制的
深入研究及新型植物源农药的开发等工作奠定了良
好的基础$
参 考 文 献
陈晓虎!陈道峰5%$$!5蓄的化学成分研究5中国中药杂志!%7"7# %
7#@ =7#75
李连昌!李利贞!范永亮!等5#77%5中国枣树害虫5北京% 中国农业出
版社5
林忠莲!张立力5%$$#5磷化氢对谷蠢和玉米象成虫体内乙酰胆碱酯
酶的影响5郑州工程学院学报!%%"!# % 8A =!#5
慕立义5#77#5植物化学保护方法5北京% 中国农业出版社5
深见顺一! 上杉康彦! 石皓造富! 等5#77#5农药实验法+++杀菌剂
篇5李树正! 程天恩! 译5北京% 农业出版社5
沈6同! 王镜岩5#77$5生物化学5北京% 高等教育出版社5
师光禄!郑王义!党泽普!等5#77!5果树害虫5北京% 中国农业出
版社5
于兆海!孙6结5%$$%5蓄的化学成分研究5中草药!88 "" # % !7A
=!775
张宗炳5#7@%5昆虫毒理学的新进展5北京% 北京大学出版社5
赵爱华!赵勤实!林中文!等5%$$%5蓄的化学成分研究5天然产物
研究与开发!#!"A# % %7 =8%
郑旭东!胡浩斌!郑尚珍!等5#77795庆阳乌蓼挥发油成分的研究5西
北师范大学学报%自然科学版!8A"8# % "@ =?$5
郑旭东!苏跃增5#777T5庆阳乌蓼中黄酮类化合物的研究5西北师范
大学学报% 自然科学版!8A"%# % !? =!75
朱丽梅!倪钰萍!黄春霞!等5%$$%5螨的综合测试方法的研究5南京农
专学报!#?"## % #8 =#?5
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HNPM34H3HUM5G,;X/P] ’/N4S/0,PP/3! 8"%# % 8$% =8$85
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!责任编辑6朱乾坤"
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