全 文 ：第 !" 卷 第 #$ 期
% $ # $ 年 #$ 月
林 业 科 学
&’()*+(, &(-.,) &(*(’,)
./01!"!*/1#$
2345!% $ # $
水曲柳嫩茎尖直接再生芽苗及其离体保存的激素组合筛选
顾地周#6李玉梅%6姜云天#
"#1通化师范学院生物系6通化 #8!$$%& %1吉林师范大学生态环境研究所6四平 #8"$$$#
关键词%6 水曲柳& 嫩茎尖& 离体培养& 离体保存& 激素组合
中图分类号! &?#@1!"666文献标识码! ,666文章编号! #$$# =?!@@"%$#$##$ =$#?@ =$A
收稿日期% %$$7 =$@ =$"& 修回日期% %$#$ =$" =$#$
基金项目% 国家科技部)国家科技攻关计划引导项目* "%$$AF,?!#’# $
)(*(<’-#/#4!5#%(5:#56#/(I#6,-/&’-#/$4#5Y-5(<’-9F-7($ !*&/’1(9(/(5&’-#/
45#6N+3B-%$&/3B"(-5-9F-7($ !5($(5K&’-#/4#5H("B-9)*+"9’*5)(-%"
WJ DHKL/J#6-HOJ;MH%6GH9N"#1@":$%*9")*-.3+-6-50! U-)5’,$ Y-%9$6I)+G"%#+*06U-)5’,$ #8!$$%&
%1()#*+*,*"-.<&-6-5+&$6<)G+%-)9")*! e+6+) Y-%9$6I)+G"%#+*06F+:+)5 #8"$$$#
;,$’5&<’%6+LMTJU 4HRP/>/%$=+),#9$)?#’,%+&$ ZMSMJPMU 9PMQR09N4P4/P3SMMN 4LM/R4H;J;L/S;/NM3/;THN94H/NP>/S
+) G+*%-R09N4SM/SPL//4
SM/%$=+),#9$)?#’,%+&$ >S/;TJU 4HRPZ9P%YHR ##1!" 5;/0’-=# C(,,$1!A 5;/0’-=#ZH4L *" 9P4LMT9PH3
;MUHJ;! 9NU 4LMHNUJ34H/N S94M3/J0U SM93L 7#1@_5+LMRS/RMSL/S;/NM3/;THN94H/N >/SS//4HN4LMSMZ9P(F,$1%7 5;/0’-=# C*,,$1#$ 5;/0’-=# ZH4L #h!*"9P4LMT9PH3;MUHJ;! 4LMS//4HN+LM/R4H;J;L/S;/NM3/;THN94H/N >/SPL//4+) G+*%-RSMPMS[94H/N Z9P%YHR #A1@$ 5;/0’-=# CE+!1"# 5;/0’-=# ZH4L *"
9P4LMT9PH3;MUHJ;! H4PUH>MSMN4H94H/N S94MZ9P0/ZMS4L9N $1A_ 9NU 4LM+) G+*%-RSMPMS[94H/N RMSH/U 3/J0U SM93LMU 4/!%
;/N4LPJNUMSS//;4M;RMS94JSM5
=(0 >#53$%6/%$=+),#9$)?#’,%+&$& TJU 4HRP& +) G+*%-3J04JSM& +) G+*%-RSMPMS[94H/N& L/S;/NM3/;THN94H/N
66 水曲柳 "/%$=+),#9$)?#’,%+&$ # 属于木犀科
";6"$&"$"#白蜡树属"/%$=+),##!是我国东北地区重
要的珍贵硬阔树种之一!国家二级重点保护植物
"汪松等!%$$!#$ 主要分布于小兴安岭和长白山地
区!在俄罗斯远东地区(日本亦有分布$ 水曲柳与胡
桃楸 "e,56$)#9$)?#’,%+&$#(黄菠萝 "J’"6-?")?%-)
$9,%")#"#被称为我国东北珍贵的)三大硬阔树种*!
素有)东北木材三宝*的美称$ 水曲柳树形优美!树
冠宽大!而且抗性较强!具有较高的景观价值!其树
皮入药!中药称 )秦皮*!具有较高的药用价值$ 小
兴安岭和长白山林区作为水曲柳的中心分布区和主
要生产基地之一!由于开发历史较早!加之长期的过
度采伐和不合理利用!目前已经难以见到优质大径
用材$
为了更好(更合理地开发利用水曲柳这一珍贵
树种资源!在保护现有野生水曲柳资源的同时!可大
力营造人工水曲柳林$ 目前!水曲柳主要靠种子繁
殖!但对于筛选出的优良品系来说!通过建立种子
园!生产种子应用于育苗造林!需时太长$ 无性繁殖
是优良品系资源直接利用的优良途径!但是其中的
扦插和嫁接途径本身繁殖系数较低!而且对于水曲
柳来说!这些方法难度更大!在生产上应用不现实
"沈海龙等!%$$A#$ 而同属于无性繁殖体系的组织
培养方法!却具有繁殖系数大(繁殖速度快的特点$
水曲柳组织培养研究仅见少量报道!主要集中在未
成熟胚的离体培养 "张惠君等!%$$8#(下胚轴不定
芽诱导 "谭燕双等!%$$8 #(腋芽培养 "张丽杰等!
%$$?#(体细胞胚与合子胚发生的细胞学研究"孔冬
梅等!%$$"#等方面!这些研究结果都比较初步!尚
未达到实际生产性应用的水平$ 本试验应用均匀设
计法对水曲柳嫩茎尖直接再生芽苗(芽苗生根及试
管苗保存的培养基进行筛选!旨在筛选适宜的水曲
柳嫩茎尖组织培养及其种质试管保存的培养方案!
以便为水曲柳的离体快繁及工厂化育苗开辟一条适
宜的途径$
?A材料与方法
#1#6水曲柳外植体材料的处理6%$$A 年 8 月!于
6第 #$ 期 顾地周% 水曲柳嫩茎尖直接再生芽苗及其离体保存的激素组合筛选
吉林省通化白鸡腰国家级自然保护区采水曲柳休眠
枝!在实验室内水培促使腋芽萌发$ 待休眠芽萌发
并长至 #1$ 3;时!将茎尖剪下!在超净工作台上用
?A_酒精涮洗 #A P!再用 8_的次氯酸钠溶液浸泡
#$ ;HN!然后无菌水冲洗 " 次$ 用无菌滤纸吸干表
面水分后!切除灭菌剂损伤的部分后留 8 ‘A ;;作
为外植体备用$
#1%6水曲柳嫩茎尖直接再生芽苗诱导培养的激素
组合的筛选6以 *" "由对比试验可知 *" 较其他常
用培养基诱导的芽苗整齐且速度快#为基本培养基
"曹孜义等! %$$% #!添加蔗糖 %$ <’-=#!琼脂粉
?1$ <’-=#!再附加不同质量浓度的细胞分裂素 %WHR
"异戊烯基腺嘌呤 # "由预试验确定为 @18" ‘
##1@" 5;/0’-=##和生长素 (,,"由预试验确定为
$1!A ‘$1@? 5;/0’-=# #!高压灭菌前调节 R\为
"1$!外植体在温度"%! g%# d(光照强度 %#1" 5;/0
’;=%P=#(光照周期每天 #! L 条件下培养$ 为提高
水曲柳再生芽苗的速度和诱导率!采用均匀设计法
"顾地周等!%$$@9& %$$79#!每个处理接种茎尖数为
#$ 个!重复 8 次!选用 b@ "@
% #均匀表!考察 %YHR 和
(,,不同质量浓度交叉配比对诱导率的影响$ 嫩茎
尖培养 !$ 天统计诱导率!筛选最适合水曲柳嫩茎尖
基部芽苗的诱导培养的激素组合$
#186水曲柳再生芽苗生根培养的激素组合的筛选
以 #h!*" 为基本培养基"由对比试验可知 #h!*" 较
其他培养基生的根粗壮#!加入蔗糖 #$ <’-=#!琼脂
?1$ <’-=#!并附加不同浓度的 (,,"由预试验确定
为 $1A? ‘#1?8 5;/0’-=# #((F,"由预试验确定为
$187 ‘$1A7 5;/0’-=# #和 *,,"由预试验确定为
$1## ‘$1!# 5;/0’-=# #!高压灭菌前调节 R\为
"1$!将 %1$ ‘81$ 3;的组培苗在温度"%! g%# d(
光照强度 #@ 5;/0’;=%P=#(光照周期每天 #% L 条件
下培养$ 为了提高水曲柳组培苗的生根率!选用
b#$"#$
8#均匀表!每个处理接种茎段数为 #$ 个!重
复 8 次!考察生长素 (,,!(F,和 *,,不同质量浓
度交叉配比对生根率的影响$ 组培苗培养 8A 天统
计生根率!筛选最适合水曲柳组培苗生根培养的激
素组合$
#1!6水曲柳单芽试管保存培养的激素组合的筛选
采用)激素超量*的方法!即通过加入过量的细胞分
裂素 %YHR 抑制单芽基部芽苗分化!并促使缓慢生长
的方法在试管内保存水曲柳种质$ 以 *" 为基本培
养基!加入蔗糖 %$ <’-=#!并附加不同质量浓度的
%YHR "由预试验确定为 #%18$ ‘#A1@$ 5;/0’-=# #和
E+"由预试验确定为 A1## ‘@188 5;/0’-=##$ 在温
度为"%% g%# d!光照强度 #@ 5;/0’;=%P=#!光照
周期每天 @ L 条件下对水曲柳单芽进行试管保存$
为了降低芽苗分化率和单芽生长速度!选用 b@ "@
% #
均匀表!每个处理数为 #$ 个!重复 8 次!考察不同质
量浓度的 %YHR 和 E+交叉配比对水曲柳单芽分化及
生长的影响!保存 #% 个月统计分化率!筛选最合适
的试管保存培养的激素组合$
#1A6数据处理与分析6采用均匀设计法进行初步
规律设计性试验!数据分析处理应用均匀设计软件
"bNH>/S;DMPHDA结果与分析
%1#6*" 培养基中不同质量浓度 %YHR 和 (,,配比对
水曲柳嫩茎尖基部直接再生芽苗的影响6*" 培养
基中不同质量浓度 %YHR 和 (,,配比对水曲柳嫩茎
尖直接再生芽苗影响的试验所得数据"表 ##经均匀
设计软件分析处理后"表 %#可知% /*k/"$1$#!%!A# !表
明回归方程有意义$ 对各方程项进行显著性检验可
知% 各方程项对 X影响均显著$ 根据回归方程求出
X的最优组合为% K# f##1@"!K% f$1!A!在此组合
基础上求得最优解% 0f@817!此解为回归方程的解
析解!需按公式 Xf0g,!’#"其中 ,!为正态分布的
双侧分位数!#为剩余标准差#计算出优化值区间估
计为 Xf@817 g@1A7!即?A18#_‘7%1!7_$ 因 %YHR
超过 ##1@" 5;/0’-=#时芽苗诱导率降低$ 通过计
算各方程项对回归的贡献值和贡献率分别为%
I"## f#%"!I"## hbf!$1@_& I"%# f7A1#!I"%# hIf
8$1@_!说明 %YHR 对芽苗诱导率 X的贡献大于 (,,$
表 ?A水曲柳嫩茎尖直接再生芽苗诱导培养的
激素组合的 ec "c
D #均匀设计试验结果
B&,C?Aec "c
D # e/-4#563($-9/’($’5($+*’#43-44(5(/’
"#56#/(<#6,-/&’-#/$4#5$"##’5(9(/(5&’-#/
45#6,+3’-%#4H("B-9)*+"9’*5)(-%"
处理号
*/1
因素 a934/SPh"5;/0’-=# #
K# K%
%YHR (,,
诱导率 X
(NUJ34H/N S94Mh_
# @18" $1"8 ""1A
% @1@" $1@? "81!
8 718" $1A? ?$1A
! 71@" $1@# "?1?
A #$18" $1A# ?!1"
" #$1@" $1?A ?#17
? ##18" $1!A @A1A
@ ##1@" $1"7 ?"1%
66为了避免 %YHR 在 ##18" ‘##1@" 5;/0’-=#之间
有较高芽苗诱导率的峰值!又以 %YHR 为 ##18"!
##1!#! ##1!"! ##1A#! ##1A"! ##1"#! ##1""! ##1?#!
7?#
林 业 科 学 !" 卷6
##1?"! ##1@# 和 ##1@" 5;/0’ -=#! (,,
$1!A 5;/0’-=#做了 ## 个处理的试验!发现 %YHR 在
##1!" 5;/0’-=#时芽苗诱导率最高且诱导速度快$
因此!将水曲柳嫩茎尖接种到附加 %YHR ##1!" 5;/0’
-=#和 (,,$1!A 5;/0’-=#的 *" 培养基上进行芽苗
诱导培养的验证试验!重复 8 次!培养 #! 天!基部产
生少量颗粒状突起& 继续培养至 %A 天!大量颗粒状
突起聚集成团!培养至 8@ 天!部分突起变为锥形突
起!并逐渐伸长为芽苗形成丛生芽团"图 #9#!芽苗
诱导率达 7#1@_以上!在估计区间内!且比表 # 中 @
个处理的诱导率均高$ 因此!水曲柳嫩茎尖直接再
生芽苗的适宜诱导培养方案为% *" C%YHR ##1!"
5;/0’-=# C(,,$1!A 5;/0’-=#$
%1%6#h!*" 培养基中不同质量浓度生长素配比对
水曲柳组培苗生根的影响6#h!*" 培养基中不同质
量浓度生长素配比对水曲柳组培苗生根影响的试验
所得数据"表 8#经均匀设计软件分析处理后"表 %#
可知!/*k/"$1$#!%!?# !回归方程显著$ 对各方程项进
行显著性检验可知% K% 和 K8 方程项对 X影响均显
著$ 根据回归方程求出 X的最优组合为% K% f
$187!K8 f$1##!在此组合基础上求得最优解% 0f
7@1!!此解为回归方程的解析解!按公式 Xf0g,!’#
计算出优化值区间估计为 Xf7@1! " g"17@ #!即
7#1!%_‘#$A18@_$ 通过计算各方程项对回归的
贡献值和贡献率"按偏回归平方和降序排列#分别
为% I"8# f"7%! I"8# hb f@!1$_& I"%# f###!
I"%# hIf#81!_!说明 *,,对组培苗生根率 X的贡
献大于 (F,!又因 (F,和 *,,均与生根率呈负相
关!猜测 (F,低于 $187 5;/0’-=# 和 *,,低于
$1## 5;/0’-=#时有较高的生根率!又以 (F,为 $!
$1$!! $1$7! $1#!! $1#7! $1%!! $1%7! $18! 和
$187 5;/0’-=#!*,,为 $!$1$A 和$1#$ 5;/0’-=#做
了 7 个处理的试验!发现 (F,在 $1%7 5;/0’-=#和
*,,$1#$ 5;/0’-=#时组培苗生根率最高$ 因此!当
水曲柳嫩茎尖诱导产生的芽苗长至 %1$ ‘81$ 3;时!
将其切下接种到附加 (F,$1%7 5;/0’-=#和 *,,
$1#$ 5;/0’-=#的#h!*"培养基上进行生根培养的验
证试验!重复 8 次!培养 #$ 天发现茎段基部切口处有
8 ‘A 个独立的锥形颗粒出现!继续培养至 %$ 天!锥形
状颗粒逐渐伸长为肉质的不定根"图 #T#!培养至 8$
天!不定根可生长至"1$$ 3;以上!生根率达 771A_$
在估计区间内!且比表 8 所列 #$ 个处理的生根率均
高$ 可见!水曲柳组培苗的适宜生根培养方案为% #h
!*" C(F,$1%7 5;/0’-
=# C*,,$1#$ 5;/0’-=#$
表 DA水曲柳嫩茎尖组培及试管苗保存各阶段的回归分析结果!
B&,CDA1(95($$-#/&/&*0$-$5($+*’#4,+3’-%<+*’+5(&/3-’$-9F-7($ <#/$(5K&’-#/
#4H+"9’*5)(-%" -/K&5-#+$<+*’+5($’&9($
培养阶段
’J04JSMP49回归方程
IM样本容量
&9;R0M39R93H4V
"Y#
复相关系数
XJ04HR0M3/SSM094H/N
3/M>H3HMN4"!#
剩余标准差
IMPHUJ90P49NU9SU
UM[H94H/N" F#
检验值
+MP4[90JM
"/*#
临界值
’SH4H390[90JM
茎尖基部芽苗诱导 XfA%1@ C81"#K# =%"1%K% @ $17"A % %1#8$ 8!1$# /"$1$#!%!A# f#81%?
&L//4PSM/>TJU 4HRP
组培苗的生根 Xf#%" =!?1#K% =@A1$K8 #$ $17@8 A %1$$$ #$81!$ /"$1$#!%!?# f71A!?
I//4HNPL//4P
试管苗的保存 Xf#!A =71"!K# C#1#%K% @ $177@ 8 $1@!! ?8@17$ /"$1$#!%!A# f#81%?
:MPMS[94H/N +) G+*%-
66! !f$1$#
%186*" 培养基中不同质量浓度 %YHR 和 E+配比对
水曲柳单芽试管保存的影响6*" 培养基中不同质
量浓度 %YHR 和 E+配比对水曲柳单芽试管保存的影
响实验所得数据"表 !#经均匀设计软件分析处理后
"表 %#可知!/*k/"$1$#!%!A# !回归方程显著$ 对各方
程项进行显著性检验可知% 各方程项对 X影响均显
著$ 根据回归方程和研究目的 "反向优化#求出 X
的最优组合为% K# f#A1@$!K% fA1##!在此组合基
础上求得最优解% 0f=#1A$!即视为 0f$1$$!此解
为回归方程的解析解!按公式 Xf0g,!’#计算出优
化值区间估计为 Xf$ g81!$!即 $ ‘#17$_$ 通过
计算各方程项对回归的贡献值和贡献率"按偏回归
平方和降序排列 # 分别为% I"## f@7A!I"## hbf
@A1#_& I"%# f##17!I"%# hIf#1#8_!说明 %YHR 对
单芽基部芽苗分化率 X的贡献远远大于 E+!又因
E+反向优化可视为与分化率呈负相关!猜测 E+低
于 A1## 5;/0’-=#时有更低的分化率!又以 E+为 $!
$1##! $1"#! #1##! #1"#! %1##! %1"#! 81##! 81"#!
!1##! !1"# 和 A1## 5;/0’ -=#! %YHR 为
#A1@$ 5;/0’-=#做了 #% 个处理的试验!发现 E+在
!1"# 5;/0’-=#时水曲柳单芽基部分化率最低$ 所
以!将水曲柳嫩茎尖诱导产生的单芽体切下接种到
$@#
6第 #$ 期 顾地周% 水曲柳嫩茎尖直接再生芽苗及其离体保存的激素组合筛选
附加 %YHR #A1@$ 5;/0’-=#和 E+!1"# 5;/0’-=#的
*" 培养基上进行单芽试管保存的验证试验!重复 8
次!保存 #% 个月统计的分化率仅为 #1%_!继续保
存至 !% 个月后!测其平均分化率为 $1A_以下!在
估计区间内!且比所有试验 X值都低$
表 EA水曲柳再生芽苗生根培养的生长素的 e?b "?b
E #
均匀设计试验结果
B&,CEAe?b "?b
E # e/-4#563($-9/’($’5($+*’#4&+U-/
<#6,-/&’-#/$4#55##’-/9 #4H.+"9’*5)(-%"
处理号
*/1
因素 a934/SPh"5;/0’-=# #
K#
(,,
K%
(F,
K8
*,,
生根率 X
I//4HN<
S94Mh_
# $1A? $1A7 $1!# "!1A
% $1@" $187 $1%# @@1$
8 #1#A $1A! $1## 7#1$
! #1!! $1!! $18" ??1$
A #1?8 $1!7 $1#" 7$1A
" $1A? $1!7 $1#" @71A
? $1@" $1!! $18# ?@1$
@ #1#A $1A! $1## 781?
7 #1!! $187 $1%# 7$1$
#$ #1?8 $1A7 $1%" ?81$
66因此!水曲柳单芽体的最佳试管保存培养的适
宜方案为% *" C%YHR#A1@$ 5;/0’-
=# CE+!1"#
666
5;/0’-=#$ 采用此培养基!在常温条件下!保存时
间长达 !% 个月以上!芽苗生长极其缓慢且形态( 质
量等均无明显变化"图 #3#$
表 FA水曲柳芽苗试管保存培养的激素组合的 ec "c
D #
均匀设计试验结果
B&,CFAec "c
D # e/-4#563($-9/’($’5($+*’#4’"(
"#56#/(<#6,-/&’-#/$4#5$"##’%5($(5K&’-#/
-9F-7($ #4H.+"9’*5)(-%"
处理号
*/1
因素 a934/SPh"5;/0’-=# #
K#
%YHR
K%
E+
分化率 X
DH>MSMN4H94H/N
S94Mh_
# #%18$ "1!7 8!1A
% #%1@$ @188 8#1$
8 #818$ "1$8 %!1$
! #81@$ ?1@? %$1$
A #!18$ A1A? #81A
" #!1@$ ?1!# ##1A
? #A18$ A1## %1!
@ #A1@$ "17A #1A
66 解除保存后的单芽转接至 *" C%YHR 71@!
5;/0’-=# C(,,$1!A 5;/0’-=#培养基上进行单芽
基部直接再生芽苗培养!培养 %A 天后!单芽基部分
化出大量粗壮的芽苗!且生长旺盛!形态和发育均未
出现异常"图 #U#!萌发率达 7A_以上$
图 #6水曲柳离体培养各培养阶段的培养物形态
aH<5#6+LM;/SRL/3J04JSMP+) G+*%-3J04JSMHN [9SH/JPP49/M9$)?#’,%+&$
95嫩茎尖基部直接再生芽苗的诱导培养 &L//4PSMS/; TJU 4HRP& T5生根培养 ’J04H[94MU >/SS//4HN<& 35种质试管保存
WMS;R09P;RSMPMS[94H/N +) G+*%-& U5解除保存后生长情况 WS/Z4L PH4J94H/N SM0M9PMU >S/;RSMPMS[94H/N5
EA结论与讨论
本研究应用均匀设计法筛选出适宜水曲柳嫩茎
尖离体培养和离体保存的激素组合方案!该法具有
试验次数少(因素的水平可以适当调整等优点!大大
缩短试验的摸索时间$
在水曲柳嫩茎尖直接再生芽苗的诱导培养基筛
选试验中!当 %YHR 质量浓度低于 @18" 5;/0’-=#时
嫩茎基部几乎不分化芽苗!超过 ##1@" 5;/0’-=#时
芽苗诱导率下降!诱导率均在 !81A_以下!说明过
高的 %YHR 浓度对嫩茎基部直接再生芽苗起抑制作
用$ (,,质量浓度低于 $1!A 5;/0’-=#时嫩茎基部
产生的芽苗生长极其缓慢!超过 $1@? 5;/0’-=#时
嫩芽基部产生大量愈伤组织& 生根培养基筛选试验
结果表明!在 #h! *" 培养基中附加较低浓度的 (F,
和 *,,!加快生根速度!可能是低浓度的生长素促
进根原基的形成$
植物种质保存研究对于生物多样性保护和新品
种选育均具有十分重要的意义$ 目前!国内外已有
很多关于植物种质保存方面的报道!大多数采取低
温处理(玻璃化(包埋(低温结合弱光照等方法 "钱
剑林等! %$$!& &L9Z^V"*$65! %$$?& ,3MU/"*$6M!
%$$A#$ 还有利用植物生长调节剂的不同作用机
理!采取)矮化延缓生长*的方法对植物种质进行保
存"艾鹏飞等!%$$!& 顾地周等!%$$@T& 顾地周等!
%$$7T#$ 本研究对水曲柳试管苗的保存采取)激素
#@#
林 业 科 学 !" 卷6
超量*的方法!即在 *" 培养基中添加 #A1@$ 5;/0’
-=#%YHR 并辅以 !1"# 5;/0’-=#的 E+对水曲柳单芽
体进行保存!这种方法可保存水曲柳单芽体达 !% 个
月以上!这可能是过量的激素抑制细胞的分裂!从而
导致分化率下降等原因$ 通过对解除保存的水曲柳
单芽进行再次诱导芽苗培养试验表明% 解除保存后
的单芽很快再次分化出大量粗壮的芽苗!形态和发
育均未见异常$ 这说明采取)激素超量*法保存水
曲柳试管苗是切实可行的$ 本试验成功建立水曲柳
高效离体快繁和种质试管保存体系!为水曲柳这一
珍贵树种资源的开发利用(工厂化育苗和种质资源
保存奠定基础$
参 考 文 献
艾鹏飞!罗正荣5%$$!5柿和君迁子试管苗缓慢生长法保存及其遗传
稳定性研究5园艺学报!8#"!# % !!# =!!"5
曹孜义!刘国民5%$$%5实用植物组织培养技术教程5兰州% 甘肃科
学技术出版社5
顾地周!朱俊义!姜云天!等5%$$@95东北刺人参组培快繁培养基的
筛选5林业科学研究!%#""# % @"? =@?$5
顾地周!孙忠林!何晓燕!等5%$$@T5牛皮杜鹃的组培快繁及种质试
管保存技术5园艺学报!8A"!# % "$8 ="$"5
顾地周!高捍东!顾美影!等5%$$795笃斯越桔离体培养及植株再生
体系的建立5林业科学研究!%%"%# % %%" =%%75
顾地周!罗6微!曹6逊!等5%$$7T5松毛翠的离体快繁体系建立及
种质试管保存5林业科学!!A"?# % #!$ =#!!5
孔冬梅!沈海龙!冯丹丹!等5%$$"5水曲柳体细胞胚与合子胚发生
的细胞学研究5林业科学!!%"#%# % #8$ =#885
钱剑林!朱旭东!田松青!等5%$$!5东方百合. &/ST/NNM/试管成球和
低温处理的初步探讨5园艺学报!8#""# % @%@5
沈海龙!赵6霞!邢朝斌!等5%$$A5水曲柳扦插繁殖影响因子的分
析5东北林业大学学报!88"8# % A ="5
谭燕双!沈海龙5%$$85水曲柳下胚轴的组织培养和植株再生5植物
生理学通讯!87""# % "%85
汪6松!解6焱5%$$!5中国物种红色名录5# 卷5北京% 高等教育
出版社!8$! =!"!5
张惠君!罗凤霞5%$$85水曲柳未成熟胚的离体培养5林业科学!
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张丽杰!张丽玮!冯丹丹!等5%$$?5水曲柳腋芽离体快繁研究初报5
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,!责任编辑6王艳娜"
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