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Identification and Bioinformatics Prediction of Putative microRNAs in Prunus Genus

核果类果树中microRNAs的生物信息学预测及验证


microRNA(miRNAs)是一类非编码小分子RNA,在植物生长发育、新陈代谢以及逆境生理中起重要作用。基于生物信息学的基因搜索和同源搜索,从 NCBI 数据库中登录的核果类果树的EST和GSS中寻找 miRNAs。从核果类果树的107 982条 ESTs和48 273条GSSs 中搜寻到了11条 miRNAs 前体序列,编码 11条成熟体序列,并预测到19个靶基因,分别编码与生长发育、新陈代谢和转录调节等相关的蛋白。利用 miRbase 数据库进一步分析表明:11条miRNAs属于8个microRNA家族,分别来自桃和梅,其大小为20~23 bp,其中6条为21 bp,而且ppe-miR162a和ppe-miR164f保守性最高。采用poly(A) RT-PCR方法随机对预测的ppe-miR156h, pmu-miR482, ppe-miR399a, ppe-miR171a进行组织表达验证,发现ppe-miR156h在果梅花芽中表达,pmu-miR482, ppe-miR399a, ppe-miR171a在桃叶片中表达。

MicroRNAs (miRNAs) are one kind of small RNAs that do not encode any proteins, however play critical role in developmental processes, metabolism and stress responses in plant. Here we present a study of bioinformatics prediction of miRNAs in Prunus using bioinformatics-based gene search based on blasting ESTs and GSSs in NCBI. Eleven precursors coding 11 mature miRNAs were found from 107 982 ESTs and 48 273 GSSs of Prunus, and 19 target genes, which encode proteins involved in developmental processes, metabolism and transcriptional regulation, were predicted. Further analysis of the miRbase database showed that 11 miRNAs belonged to 8 miRNA families from Prunus persica and Prunus mume, and were from 20 to 23 bp in length with 6 miRNAs being 21 bp in length. The miRNAs of ppe-miR162a and ppe-miR164f were the most conservative. In order to prove accuracy of the prediction, ppe-miR156h, pmu-miR482, ppe-miR399a, ppe-miR171 were identified by RT-PCR. The results showed that ppe-miR156h was expressed in flower buds of Prunus mume, and pmu-miR482, ppe-miR399a, and ppe-miR171a were expressed in leaves of Prunus persica.


全 文 :第 源愿 卷 第 圆 期
圆 园 员 圆 年 圆 月
林 业 科 学
杂悦陨耘晕栽陨粤 杂陨蕴灾粤耘 杂陨晕陨悦粤耘 灾燥造郾 源愿袁晕燥郾 圆云藻遭援 袁圆 园 员 圆
核果类果树中 皂蚤糟则燥砸晕粤泽的生物
信息学预测及验证鄢
罗晓燕摇 侍摇 婷摇 蔡摇 斌摇 高志红
渊南京农业大学园艺学院摇 南京 圆员园园怨缘冤
摘摇 要院摇 皂蚤糟则燥砸晕粤渊皂蚤砸晕粤泽冤是一类非编码小分子 砸晕粤袁在植物生长发育尧新陈代谢以及逆境生理中起重要作用遥
基于生物信息学的基因搜索和同源搜索袁从 晕悦月陨 数据库中登录的核果类果树的 耘杂栽 和 郧杂杂 中寻找 皂蚤砸晕粤泽遥 从
核果类果树的员园苑 怨愿圆条 耘杂栽泽和源愿 圆苑猿条 郧杂杂泽 中搜寻到了 员员 条 皂蚤砸晕粤泽 前体序列袁编码 员员 条成熟体序列袁并预测
到 员怨 个靶基因袁分别编码与生长发育尧新陈代谢和转录调节等相关的蛋白遥 利用 皂蚤砸遭葬泽藻 数据库进一步分析表
明院 员员 条 皂蚤砸晕粤泽 属于 愿 个 皂蚤糟则燥砸晕粤 家族袁分别来自桃和梅袁其大小为 圆园 耀 圆猿 遭责袁其中 远 条为 圆员 遭责袁而且
责责藻鄄皂蚤砸员远圆葬和 责责藻鄄皂蚤砸员远源枣保守性最高遥 采用 责燥造赠渊粤冤 砸栽鄄孕悦砸 方法随机对预测的 责责藻鄄皂蚤砸员缘远澡袁 责皂怎鄄皂蚤砸源愿圆袁
责责藻鄄皂蚤砸猿怨怨葬袁 责责藻鄄皂蚤砸员苑员葬进行组织表达验证袁发现 责责藻鄄皂蚤砸员缘远澡 在果梅花芽中表达袁责皂怎鄄皂蚤砸源愿圆袁 责责藻鄄皂蚤砸猿怨怨葬袁
责责藻鄄皂蚤砸员苑员葬在桃叶片中表达遥
关键词院摇 皂蚤糟则燥砸晕粤曰 生物信息学预测曰 李属曰 核果类果树曰 表达序列标签曰 基因组勘测序列
中图分类号院 杂苑员愿郾 源远曰 匝怨源猿郾 圆摇 摇 摇 文献标识码院粤摇 摇 摇 文章编号院员园园员 原 苑源愿愿渊圆园员圆冤园圆 原 园园苑缘 原 园苑
收稿日期院 圆园员员 原 园远 原 圆苑曰 修回日期院 圆园员员 原 员员 原 员愿遥
基金项目院 国家自然科学基金项目渊猿园愿苑员远愿员冤曰 江苏省科技基础设施建设计划渊月酝圆园园愿园园愿冤遥
鄢高志红为通讯作者遥
陨凿藻灶贼蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 葬灶凿 月蚤燥蚤灶枣燥则皂葬贼蚤糟泽 孕则藻凿蚤糟贼蚤燥灶 燥枣 孕怎贼葬贼蚤增藻 皂蚤糟则燥砸晕粤泽 蚤灶 孕则怎灶怎泽 郧藻灶怎泽
蕴怎燥 载蚤葬燥赠葬灶摇 杂澡蚤 栽蚤灶早摇 悦葬蚤 月蚤灶摇 郧葬燥 在澡蚤澡燥灶早
渊悦燥造造藻早藻 燥枣 匀燥则贼蚤糟怎造贼怎则藻袁 晕葬灶躁蚤灶早 粤早则蚤糟怎造贼怎则葬造 哉灶蚤增藻则泽蚤贼赠摇 晕葬灶躁蚤灶早 圆员园园怨缘冤
粤遭泽贼则葬糟贼院摇 酝蚤糟则燥砸晕粤泽 渊皂蚤砸晕粤泽冤 葬则藻 燥灶藻 噪蚤灶凿 燥枣 泽皂葬造造 砸晕粤泽 贼澡葬贼 凿燥 灶燥贼 藻灶糟燥凿藻 葬灶赠 责则燥贼藻蚤灶泽袁 澡燥憎藻增藻则 责造葬赠 糟则蚤贼蚤糟葬造
则燥造藻 蚤灶 凿藻增藻造燥责皂藻灶贼葬造 责则燥糟藻泽泽藻泽袁 皂藻贼葬遭燥造蚤泽皂 葬灶凿 泽贼则藻泽泽 则藻泽责燥灶泽藻泽 蚤灶 责造葬灶贼援 匀藻则藻 憎藻 责则藻泽藻灶贼 葬 泽贼怎凿赠 燥枣 遭蚤燥蚤灶枣燥则皂葬贼蚤糟泽
责则藻凿蚤糟贼蚤燥灶 燥枣 皂蚤砸晕粤泽 蚤灶 孕则怎灶怎泽 怎泽蚤灶早 遭蚤燥蚤灶枣燥则皂葬贼蚤糟泽鄄遭葬泽藻凿 早藻灶藻 泽藻葬则糟澡 遭葬泽藻凿 燥灶 遭造葬泽贼蚤灶早 耘杂栽泽 葬灶凿 郧杂杂泽 蚤灶 晕悦月陨援 耘造藻增藻灶
责则藻糟怎则泽燥则泽 糟燥凿蚤灶早 员员 皂葬贼怎则藻 皂蚤砸晕粤泽 憎藻则藻 枣燥怎灶凿 枣则燥皂 员园苑 怨愿圆 耘杂栽泽 葬灶凿 源愿 圆苑猿 郧杂杂泽 燥枣 孕则怎灶怎泽袁 葬灶凿 员怨 贼葬则早藻贼 早藻灶藻泽袁
憎澡蚤糟澡 藻灶糟燥凿藻 责则燥贼藻蚤灶泽 蚤灶增燥造增藻凿 蚤灶 凿藻增藻造燥责皂藻灶贼葬造 责则燥糟藻泽泽藻泽袁 皂藻贼葬遭燥造蚤泽皂 葬灶凿 贼则葬灶泽糟则蚤责贼蚤燥灶葬造 则藻早怎造葬贼蚤燥灶袁 憎藻则藻 责则藻凿蚤糟贼藻凿援
云怎则贼澡藻则 葬灶葬造赠泽蚤泽 燥枣 贼澡藻 皂蚤砸遭葬泽藻 凿葬贼葬遭葬泽藻 泽澡燥憎藻凿 贼澡葬贼 员员 皂蚤砸晕粤泽 遭藻造燥灶早藻凿 贼燥 愿 皂蚤砸晕粤 枣葬皂蚤造蚤藻泽 枣则燥皂 孕则怎灶怎泽 责藻则泽蚤糟葬 葬灶凿
孕则怎灶怎泽 皂怎皂藻袁 葬灶凿 憎藻则藻 枣则燥皂 圆园 贼燥 圆猿 遭责 蚤灶 造藻灶早贼澡 憎蚤贼澡 远 皂蚤砸晕粤泽 遭藻蚤灶早 圆员 遭责 蚤灶 造藻灶早贼澡援 栽澡藻 皂蚤砸晕粤泽 燥枣 责责藻鄄皂蚤砸员远圆葬
葬灶凿 责责藻鄄皂蚤砸员远源枣 憎藻则藻 贼澡藻 皂燥泽贼 糟燥灶泽藻则增葬贼蚤增藻援 陨灶 燥则凿藻则 贼燥 责则燥增藻 葬糟糟怎则葬糟赠 燥枣 贼澡藻 责则藻凿蚤糟贼蚤燥灶袁 责责藻鄄皂蚤砸员缘远澡袁 责皂怎鄄皂蚤砸源愿圆袁
责责藻鄄皂蚤砸猿怨怨葬袁 责责藻鄄皂蚤砸员苑员 憎藻则藻 蚤凿藻灶贼蚤枣蚤藻凿 遭赠 砸栽鄄孕悦砸援 栽澡藻 则藻泽怎造贼泽 泽澡燥憎藻凿 贼澡葬贼 责责藻鄄皂蚤砸员缘远澡 憎葬泽 藻曾责则藻泽泽藻凿 蚤灶 枣造燥憎藻则
遭怎凿泽 燥枣 孕则怎灶怎泽 皂怎皂藻袁 葬灶凿 责皂怎鄄皂蚤砸源愿圆袁 责责藻鄄皂蚤砸猿怨怨葬袁 葬灶凿 责责藻鄄皂蚤砸员苑员葬 憎藻则藻 藻曾责则藻泽泽藻凿 蚤灶 造藻葬增藻泽 燥枣 孕则怎灶怎泽 责藻则泽蚤糟葬援
运藻赠 憎燥则凿泽院摇 皂蚤糟则燥砸晕粤曰 遭蚤燥蚤灶枣燥则皂葬贼蚤糟泽 责则藻凿蚤糟贼蚤燥灶曰 孕则怎灶怎泽曰 凿则怎责藻 枣则怎蚤贼 贼则藻藻泽曰 耘杂栽渊 藻曾责则藻泽泽藻凿 泽藻择怎藻灶糟藻 贼葬早冤曰 郧杂杂
渊早藻灶燥皂藻 泽怎则增藻赠 泽藻择怎藻灶糟藻泽冤
摇 摇 皂蚤糟则燥砸晕粤泽渊皂蚤砸晕粤泽冤是一类长度约 圆员 耀 圆圆 个
核苷酸的非编码 砸晕粤泽 渊 粤皂遭则燥泽袁 圆园园猿曰 月葬则贼藻造袁
圆园园源曰 酝葬造造燥则赠 藻贼 葬造援袁 圆园园源冤遥 在动植物及真菌中袁
皂蚤砸晕粤通过降解靶 皂砸晕粤或是抑制靶基因的翻译袁
在转录后基因调控中发挥重要作用 渊 粤皂遭则燥泽袁
圆园园猿曰 悦葬则则蚤灶早贼燥灶 藻贼 葬造援袁 圆园园猿曰 匀怎灶贼藻则 藻贼 葬造援袁 圆园园猿曰
月葬则贼藻造袁 圆园园源曰 酝葬造造燥则赠 藻贼 葬造援袁 圆园园源冤遥 植物 皂蚤砸晕粤最
早从拟南芥渊粤则葬遭蚤凿燥责泽蚤泽 贼澡葬造蚤葬灶葬冤小分子文库中获
得渊砸藻蚤灶澡葬则贼 藻贼 葬造援袁 圆园园圆冤袁主要在转录后水平上负向
调控基因表达 渊 孕葬则噪袁 圆园园缘 冤遥 在细胞核中编码
皂蚤砸晕粤 的基因在聚合酶域的作用下转录成 责则蚤鄄
皂蚤砸晕粤袁然后在一种类 阅蚤糟藻则 酶要要要阅悦蕴员 的作用下
释放 责则藻鄄皂蚤砸晕粤袁阅悦蕴员 继续作用于 责则藻鄄皂蚤砸晕粤 而形
成双链 皂蚤砸晕粤院皂蚤砸晕粤鄢袁后者在 皂蚤砸晕粤 甲基转移
林 业 科 学 源愿 卷摇
酶要要要匀耘晕员 的作用下袁使 猿忆端最后 员 个核苷酸发
生甲基化修饰遥 而后袁皂蚤砸晕粤院皂蚤砸晕粤鄢互补双链在
耘曾责燥则贼蚤灶鄄缘 的同源物 匀杂栽的作用下被转运到细胞质
并与 砸陨杂悦结合形成 皂蚤砸晕粤从而发挥作用渊粤曾贼藻造造 藻贼
葬造援袁 圆园园苑冤遥 植物 皂蚤砸晕粤的茎环结构前体在大小及
结构特征上都与动物 皂蚤砸晕粤前体存在较大差异袁不
易找出共性袁但是所有植物的 皂蚤砸晕粤 和 皂蚤砸晕粤鄢均
来自于相反的茎臂袁这使得二者形成了在 圆 个 猿忆端
均具有突出末端的复合体遥 皂蚤砸晕粤 与发卡结构上
的另一条臂包括 皂蚤砸晕粤鄢之间存在广泛的碱基配对
现象袁而且典型的错配碱基数不会超过 源 个袁这也促
使一些不对称的突出部分 渊尤其是在 皂蚤砸晕粤 和
皂蚤砸晕粤鄢复合体内部冤在大小渊通常只有 员 耀 圆 个碱
基冤及发生频率上降到了最小程度渊一般为 员 次甚
至更少冤渊酝藻赠藻则泽 藻贼 葬造援袁 圆园园愿冤遥 虽然 皂蚤砸晕粤是现今
生物界最热门的研究课题之一袁但是 皂蚤砸晕粤泽 的最
初发现很偶然 渊蕴葬蚤袁 圆园园猿冤遥 目前袁许多的 皂蚤砸晕粤泽
通过小分子 砸晕粤 的直接克隆或是生物信息学搜索
预测的方法来鉴定 渊砸藻蚤灶澡葬则贼 藻贼 葬造援袁 圆园园圆曰 月燥灶灶藻贼 藻贼
葬造援袁 圆园园源曰 允燥灶藻泽鄄砸澡燥葬凿藻泽 藻贼 葬造援袁 圆园园源曰 蕴葬蚤袁 圆园园源曰 蕴蚤
藻贼 葬造援袁 圆园园缘冤遥
表达序列标签渊 藻曾责则藻泽泽藻凿 泽藻择怎藻灶糟藻 贼葬早袁耘杂栽冤是
克隆到质粒中表达的基因其 糟阅晕粤 序列的一部分
渊粤凿葬皂泽 藻贼 葬造援袁 员怨怨员曰 酝葬贼怎噪怎皂葬造造蚤 藻贼 葬造援袁 圆园园源冤遥 耘杂栽
分析对于缺乏基因组序列的物种进行基因发掘是一
种经济可行的选择袁许多重要的基因就是通过该途
径发现的 渊吕德康等袁 圆园园怨冤遥 近年来袁基因组勘测
序列渊早藻灶燥皂藻 泽怎则增藻赠 泽藻择怎藻灶糟藻泽袁郧杂杂冤数据库也在不
断发展袁郧杂杂是基因组 阅晕粤克隆的一次性部分测序
得到的序列袁包括随机的基因组勘测序列尧糟燥泽皂蚤凿 辕
月粤悦 辕 再粤悦末端序列尧通过 耘曾燥灶 贼则葬责责藻凿 获得基因组
序列尧通过 粤造怎 孕悦砸 获得的序列以及转座子标记
渊贼则葬灶泽责燥泽燥灶鄄贼葬早早藻凿冤序列等袁因此也被广泛地应用于
植物 皂蚤砸晕粤 的预测中 渊吕德康等袁 圆园园怨冤遥 随着
皂蚤砸晕粤 家族成员的不断增多袁全球成立了 皂蚤砸晕粤
文库袁对新的 皂蚤砸晕粤 进行登记和命名遥 截至目前
渊圆园员员 年 缘 月冤袁在 皂蚤砸晕粤 数据库 皂蚤砸月葬泽藻渊澡贼贼责院椅
憎憎憎援 酝蚤则遭葬泽藻援 燥则早 辕 冤中注册的 皂蚤砸晕粤已达员远 苑苑圆种遥
然而在大多数植物尤其是木本园艺作物中袁
皂蚤砸晕粤基因及其靶标仍然处于未知状态遥 核果类
果树中包括许多重要的果树作物袁如桃 渊 孕则怎灶怎泽
责藻则泽蚤糟葬冤尧杏渊孕则怎灶怎泽 葬则皂藻灶蚤葬糟葬冤尧梅渊孕则怎灶怎泽 皂怎皂藻冤以
及甜樱桃渊孕则怎灶怎泽 葬增蚤怎皂冤等袁在这些果树中普遍存
在一些表观遗传的现象袁如同一株甜樱桃上同时存
在畸形雌蕊及正常雌蕊渊李勃等袁 圆园员园 冤以及梅花
器发育不完全的现象均很普遍渊王珊等袁 圆园园愿冤袁对
果实的产量有较大的影响袁降低了经济效益袁因此袁
可以从 皂蚤砸晕粤调控方面进一步研究这些生命现象
的机制遥 本文利用 皂蚤砸月葬泽藻 中登陆的 皂蚤砸晕粤袁对核
果类果树的 耘杂栽 和 郧杂杂 数据库分析进一步鉴定了
一些潜在 皂蚤砸晕粤基因和它们的靶标遥 由于 耘杂栽泽和
表达基因来源于真正的基因表达产物袁本文的研究
分析为新型潜在 皂蚤砸晕粤泽和它们靶基因的鉴定提供
了更加充分并可信的论据遥 使用这种方法袁本研究
在核果类果树中鉴定了 员员 个新的候选 皂蚤砸晕粤袁以
及 员怨 个靶基因遥
员摇 材料与方法
员郾 员摇 相关数据库的获得
所有已知植物的 皂蚤砸晕粤 序列从 皂蚤砸晕粤数据库
渊澡贼贼责院 椅憎憎憎援 皂蚤则遭葬泽藻援 燥则早 辕 砸藻造藻葬泽藻 员远院 杂藻责贼 圆园员园冤
中下载得到遥 桃尧李渊孕则怎灶怎泽 泽葬造蚤糟蚤灶葬冤尧梅等核果类
果树的 郧杂杂尧耘杂栽 数据库均在美国国家生物技术信
息中心 郧藻灶月葬灶噪 核酸数据库下载得到 渊 澡贼贼责院椅
憎憎憎援 灶糟遭蚤援 灶造皂援 灶蚤澡援 早燥增 辕 冤渊允葬灶怎葬则赠 圆园员员冤遥
员郾 圆摇 应用的软件
月蕴粤杂栽 圆郾 圆郾 圆源遥 本地序列比对软件 月蕴粤杂栽
圆郾 圆郾 圆源 从 晕悦月陨 的 月蕴粤杂栽 上下载 渊 澡贼贼责院椅 遭造葬泽贼援
灶糟遭蚤援 灶造皂援 灶蚤澡援 早燥增 辕 冤遥 核酸序列编码蛋白质在
月蕴粤杂栽中的 月蕴粤杂栽载 憎藻遭 界面上进行在线分析遥 用
酝云韵蕴阅 猿郾 缘渊澡贼贼责院椅皂枣燥造凿援 则灶葬援 葬造遭葬灶赠援 藻凿怎 辕 冤在线预
测 皂蚤砸晕粤 前体的二级折叠结构渊在怎噪藻则袁 圆园园猿冤袁并
联合使用 郧杂杂 和 耘杂栽 数据库进行 皂蚤砸晕粤 的搜索遥
皂蚤砸晕粤保守性分析用 悦造怎泽贼葬造载 圆郾 员 和 酝藻早葬 缘郾 园 软
件进行分析遥
员郾 猿摇 核果类果树 皂蚤砸晕粤的生物信息学预测
所有下载的植物 皂蚤砸晕粤序列袁均去除了冗余重
复序列遥 将这些 皂蚤砸晕粤 序列作为探针在核果类果
树的 耘杂栽 及 郧杂杂 库中进行本地 月蕴粤杂栽遥 其中有些
耘杂栽可能由某个 郧杂杂 转录而来或是 耘杂栽 和 郧杂杂 自
身存在重复序列或正反互补序列袁所以进一步把这
些序列与自身进行 月蕴粤杂栽袁去除重复序列遥 再通过
在线 月蕴粤杂栽载 分析去除可能编码蛋白的序列遥 二
级折叠结构分析采用软件 酝云韵蕴阅 猿郾 缘 在线进行遥
预测核果类果树 皂蚤砸晕粤 的整个过程及筛选的标准
参照文献 渊在澡葬灶早 藻贼 葬造援袁 圆园园远葬曰 酝藻赠藻则泽 藻贼 葬造援袁 圆园园愿曰
项安玲等袁 圆园园愿曰 宋长年等袁 圆园员园冤遥
员郾 源摇 核果类果树 皂蚤砸晕粤靶基因预测
预测得到潜在的 皂蚤砸晕粤 后袁再将 皂蚤砸晕粤 分别
与 耘杂栽 数据库进行 月蕴粤杂栽袁挑出与 皂蚤砸晕粤 错配数
远苑
摇 第 圆 期 罗晓燕等院 核果类果树中 皂蚤糟则燥砸晕粤泽的生物信息学预测及验证
小于 源 个袁并且没有 早葬责 存在的序列遥 再根据一系
列的筛选标准袁得到的 皂砸晕粤序列即为相应 皂蚤砸晕粤
的靶基因 渊在澡葬灶早 藻贼 葬造援袁 圆园园远葬冤遥
员郾 缘摇 试验验证预测的核果类果树的 皂蚤砸晕粤
通过 宰葬灶早等渊圆园园怨冤提取小分子 砸晕粤 的方法袁
分别从耶龙眼爷果梅的花芽中和耶蕴韵灾耘蕴蕴爷桃的叶片
中提取出小分子 砸晕粤遥 通过 猿忆加 责燥造赠粤尾巴渊宰葬灶早
藻贼 葬造援袁 圆园园怨冤对 责皂怎鄄皂蚤砸源愿圆 进行了验证袁其他 猿 种
皂蚤砸晕粤则通过茎环引物法渊李贺等袁 圆园园怨冤进行试
验验证遥
圆摇 结果与分析
圆郾 员摇 核果类果树 皂蚤砸晕粤的预测
核果类果树的基因组序列除了桃以外袁都没有公
布遥 因此袁选择了核果类果树在 晕悦月陨 中登录的 耘杂栽
和 郧杂杂序列遥 最终分别在核果类果树的 耘杂栽序列和
郧杂杂 序列中得到 圆 个和 怨 个 皂蚤砸晕粤袁只有 皂蚤砸源愿圆 来
自果梅袁其他预测的 皂蚤砸晕粤均来自桃袁没有在核果类
果树的其他物种中预测到 皂蚤砸晕粤遥 这 员员 个预测的
皂蚤砸晕粤来源于 愿个不同的 皂蚤砸晕粤家族渊表 员冤遥
表 员摇 核果类果树新预测得到的 员员 个 皂蚤砸晕粤泽及其特性淤
栽葬遭援 员摇 耘造藻增藻灶 灶燥增藻造 孕则怎灶怎泽 皂蚤糟则燥砸晕粤泽 蚤凿藻灶贼蚤枣蚤藻凿 遭赠 澡燥皂燥造燥早 葬灶凿 贼澡藻蚤则 糟澡葬则葬糟贼藻则蚤泽贼蚤糟泽
新的 皂蚤砸晕粤晕藻憎 皂蚤砸晕粤 序列类型栽赠责藻 晕悦月陨序列号晕悦月陨 早藻灶藻 陨阅 皂蚤砸晕粤序列 渊缘忆要猿忆冤皂蚤砸晕粤 泽藻择怎藻灶糟藻 渊缘忆要猿忆冤 位置蕴燥糟葬贼蚤燥灶 晕酝 辕 灶贼 蕴酝 辕 灶贼 蕴孕 辕 灶贼 粤 垣 哉渊豫 冤 酝云耘泽 酝云耘陨泽
责责藻鄄皂蚤砸员缘远澡 耘杂栽 阅再远猿怨源苑缘 哉哉郧粤悦粤郧粤粤郧粤粤粤郧粤郧粤郧悦粤悦 缘忆 员 圆员 员园苑 缘圆郾 猿源 原缘猿郾 猿园 园郾 怨愿
责皂怎鄄皂蚤砸源愿圆 耘杂栽 郧哉愿愿猿员圆愿 哉悦哉哉哉悦悦哉粤悦哉悦悦粤悦悦悦粤哉哉悦悦 猿忆 圆 圆圆 怨苑 缘远郾 苑园 原源猿郾 苑园 员郾 园苑
责责藻鄄皂蚤砸猿怨怨葬 郧杂杂 云陨怨源源园圆缘 哉郧悦悦粤粤粤郧粤粤郧粤郧哉哉郧悦悦悦哉粤 猿忆 圆 圆员 员园怨 缘圆郾 圆猿 原缘远郾 苑园 员郾 园园
责责藻鄄皂蚤砸猿怨怨遭 郧杂杂 云陨怨缘园源远愿 哉郧悦悦粤粤粤郧粤粤郧粤郧哉哉郧悦悦悦哉粤 猿忆 圆 圆员 员园怨 缘源郾 圆员 原缘源郾 苑园 园郾 怨愿
责责藻鄄皂蚤砸源园猿糟 郧杂杂 云陨怨猿员员员远 哉哉悦郧粤哉哉悦粤悦郧悦粤悦粤粤粤悦哉郧 猿忆 圆 圆园 员员圆 缘猿郾 缘苑 原缘猿郾 苑园 园郾 怨圆
责责藻鄄皂蚤砸猿远圆怨 郧杂杂 云陨怨猿源远缘怨 郧郧哉哉郧悦悦郧粤郧粤粤粤粤粤郧哉粤郧粤 缘忆 源 圆园 怨员 缘苑郾 员源 原源园郾 苑园 员郾 员缘
责责藻鄄皂蚤砸员苑员葬 郧杂杂 云陨怨远园缘圆怨 哉郧哉粤粤哉哉郧粤郧悦悦郧哉郧悦悦粤粤哉粤哉悦 猿忆 猿 圆猿 怨远 源苑郾 怨圆 原源远郾 猿园 园郾 怨远
责责藻鄄皂蚤砸员苑员遭 郧杂杂 云陨怨缘苑猿圆苑 哉郧粤哉哉郧粤郧悦悦粤悦郧悦悦粤粤悦粤哉悦 猿忆 圆 圆员 怨苑 远员郾 愿远 原猿苑郾 缘园 员郾 园源
责责藻鄄皂蚤砸员远圆葬 郧杂杂 云陨怨远远员怨愿 哉悦郧粤哉粤粤粤悦悦哉悦哉郧悦粤哉悦悦粤郧 猿忆 园 圆员 员园猿 缘猿郾 源园 原猿怨郾 员园 园郾 苑怨
责责藻鄄皂蚤砸员远源枣 郧杂杂 云陨怨缘怨怨圆缘 哉郧郧粤郧粤粤郧悦粤郧郧郧悦粤悦郧哉郧悦粤 缘忆 园 圆员 员圆园 缘猿郾 猿猿 原远园郾 园园 园郾 愿怨
责责藻鄄皂蚤砸员缘远蚤 郧杂杂 云陨怨源远园猿苑 哉郧粤悦粤郧粤郧粤郧粤郧粤粤郧哉郧粤郧悦粤悦 缘忆 圆 圆圆 员园怨 缘园郾 源远 原缘圆郾 愿园 园郾 怨园
摇 摇 淤晕酝院 错配数 晕怎皂遭藻则 燥枣 皂蚤泽皂葬贼糟澡曰 蕴酝院 成熟体长度 蕴藻灶早贼澡 燥枣 皂葬贼怎则藻 皂蚤砸晕粤曰 蕴孕院 前体长度 蕴藻灶早贼澡 燥枣 责则藻糟怎则泽燥则曰 酝云耘泽院 最低自由能酝蚤灶蚤皂葬造 枣燥造凿蚤灶早 枣则藻藻 藻灶藻则早蚤藻泽曰 酝云耘陨院 最低自由能系数 酝蚤灶蚤皂葬造 枣燥造凿蚤灶早 枣则藻藻 藻灶藻则早赠 蚤灶凿藻曾援
摇 摇 在所预测到的核果类果树的 皂蚤砸晕粤 中袁成熟
皂蚤砸晕粤长度为 圆园 耀 圆源 遭责袁员员 个为 圆员 遭责袁占多数袁这
与前人的研究渊酝葬造造燥则赠 藻贼 葬造援袁 圆园园源冤相吻合遥 皂蚤砸晕粤
前体长度分布在 怨员 耀 源源圆 遭责之间袁这与其他植物中
发现的情况基本一致遥 与动物 远园 耀 愿园 遭责 的前体长
度相比袁植物的 皂蚤砸晕粤前体在结构和大小上呈现多
样性渊图 员冤遥
圆郾 圆摇 核果类果树 皂蚤砸晕粤成熟体序列保守性分析
为了进一步了解 皂蚤砸晕粤泽 成熟体的结构特点袁
将其序列与 砸晕月葬泽藻 中相应的 皂蚤砸晕粤泽 家族成员进
行保守性分析遥 结果表明渊图 圆冤袁核果类果树中预
测得到的 皂蚤砸晕粤泽具有较高的保守性袁多数 皂蚤砸晕粤泽
的 缘忆末端的前 源 个碱基在各自的家族中都完全相
同袁表现出了很高的保守性袁这与宋长年等渊圆园员园冤
的研究一致遥 从这 愿 个 皂蚤砸晕粤泽家族的碱基序列情
况看袁皂蚤砸晕粤员远圆 和 皂蚤砸晕粤员远源 的保守程度最高袁在
比对的不同物种中均含有完全一致的成熟体序列袁
是高保守 皂蚤砸晕粤泽 家族袁而同样被报道为植物保守
皂蚤砸晕粤的 皂蚤砸晕粤员缘远袁出现 圆 个碱基位点的缺失尧颠
换或转换遥 同时袁皂蚤砸员苑员袁 皂蚤砸晕粤源愿圆袁 皂蚤砸猿怨怨 和
皂蚤砸源园猿 也只有 员 耀 猿 处碱基位点的差异袁均可认为
是保守性很高的 皂蚤砸晕粤泽家族遥
圆郾 猿摇 核果类果树中预测的 皂蚤砸晕粤 在物种中分布
的多样性比较
通过与 砸晕月葬泽藻中相应的 皂蚤砸晕粤家族成员进行
物种分布的比较后袁发现核果类果树中预测得到的
皂蚤砸晕粤泽不但具有较高的家族保守性袁在物种中的
分布也较为广泛遥 其中与 责责藻鄄皂蚤砸员远源枣 高度同源的
皂蚤砸员远源 家族成员在 员怨 个不同的物种中存在袁责责藻鄄
皂蚤砸员苑员葬 在 员远 个物种中分布袁并具有较高的同源
性袁其次为 责责藻鄄皂蚤砸员缘远袁 责责藻鄄皂蚤砸员远圆葬袁 责责藻鄄员苑员遭 和
责责藻鄄皂蚤砸源园猿糟遥 然而袁此次预测中袁也发现了一些稀
有的 皂蚤砸晕粤泽袁如 责责藻鄄皂蚤砸猿远圆怨 只在 圆 个物种中
分布遥
圆郾 源摇 核果类果树的 皂蚤砸晕粤 靶基因预测及主要功
能分析
在植物中袁靶基因与 皂蚤砸晕粤 几乎为碱基完全
互补配对遥 这为生物信息学法预测植物靶基因带
来方便遥 通过预测及筛选袁最后找到 缘 个 皂蚤砸晕粤泽
的 员怨 个 皂蚤砸晕粤靶基因袁分别编码与核果类果树生
长发育尧 新陈代谢尧转录调节等相关的蛋白渊表
圆冤遥
苑苑
林 业 科 学 源愿 卷摇
图 员摇 核果类果树新预测 皂蚤砸晕粤 前体茎环结构
云蚤早援 员摇 孕则藻凿蚤糟贼藻凿 泽贼藻皂 造燥燥责 泽贼则怎糟贼怎则藻泽 燥枣 灶燥增藻造 孕则怎灶怎泽 皂蚤砸晕粤泽
成熟体以下划线标注遥 酝葬贼怎则藻 皂蚤砸晕粤泽 葬则藻 造葬遭藻造藻凿 遭赠 怎灶凿藻则造蚤灶藻援
圆郾 缘摇 试验验证预测的核果类果树的 皂蚤砸晕粤
采用 宰葬灶早等渊圆园园怨冤的方法分别从耶龙眼爷果
梅和耶蕴韵灾耘蕴蕴爷桃的花芽和叶片中提取出小分子
砸晕粤袁员郾 圆豫的琼脂糖凝胶电泳检测结果表明袁纯化
的小分子 砸晕粤 长度小于 缘园园 遭责 渊图 猿葬冤遥 由于
皂蚤砸晕粤很短袁仅有 圆员 个核苷酸袁而 孕悦砸引物的长度
一般在 圆园 个核苷酸左右袁因此无法直接扩增袁通过
猿忆加 责燥造赠粤 以及茎环引物法袁 来鉴定预测的
皂蚤砸晕粤泽遥 源豫的琼脂糖凝胶电泳检测结果表明袁扩
增片段长度均在 员园园 遭责 以下袁进一步测序后得到了
责皂怎鄄皂蚤砸源愿圆 远苑 遭责 的扩增序列袁而通过茎环引物法
扩增的 责责藻鄄皂蚤砸员缘远澡袁责责藻鄄皂蚤砸猿怨怨葬 和 责责藻鄄皂蚤砸员苑员葬
产物大小为 苑缘 遭责左右遥 测序结果表明扩增片段中
包含了 皂蚤砸晕粤 的完整序列袁这说明预测的 责皂怎鄄
皂蚤砸源愿圆袁责责藻鄄皂蚤砸员缘远澡袁责责藻鄄皂蚤砸猿怨怨葬 和 责责藻鄄皂蚤砸员苑员葬
确实存在袁其中袁责责藻鄄皂蚤砸员缘远澡 在果梅花芽中表达袁
责皂怎鄄皂蚤砸源愿圆袁责责藻鄄皂蚤砸猿怨怨葬袁 责责藻鄄皂蚤砸员苑员葬 在桃叶片
中表达渊图 猿遭冤遥
猿摇 讨论
植物中 皂蚤砸晕粤泽 的保守性是相对的袁不同
皂蚤砸晕粤家族的 皂蚤砸晕粤碱基序列存在不同程度的水
平变异袁具有保守性 皂蚤砸晕粤 的家族的 皂蚤砸晕粤 碱基
序列的一致性相对较高遥 生物信息学方法显示袁果
蝇 渊阅则燥泽燥责澡蚤造葬冤 渊蕴葬蚤 藻贼 葬造援袁 圆园园猿冤和人体渊蕴蚤皂 藻贼 葬造援袁
圆园园猿冤中预测的蛋白质编码基因中只有 员豫 属于
皂蚤砸晕粤基因遥 因此袁随着核果类果树基因组信息的
日益完善袁将会有更多的 皂蚤砸晕粤家族以及家族成员
被发现遥
由于受不同 皂蚤砸晕粤泽 表达的时空性尧耘杂栽泽 测序
所用 糟阅晕粤 文库的组织来源尧耘杂栽泽 数量等因素的影
响袁不同物种中预测到的 皂蚤砸晕粤的数量以及家族类
型存在差异遥 目前袁 已在拟南芥尧 水稻 渊 韵则赠扎葬
泽葬贼蚤增葬冤尧 玉米渊在藻葬 皂葬赠泽冤尧小麦渊栽则蚤贼蚤糟怎皂 葬藻泽贼蚤增怎皂冤尧
大豆渊郧造赠糟蚤灶藻 皂葬曾冤尧花生渊粤则葬糟澡蚤泽 澡赠责燥早葬藻葬冤尧陆地棉
渊郧燥泽泽赠责蚤怎皂 澡蚤则泽怎贼怎皂冤尧苜蓿渊酝藻凿蚤糟葬早燥 贼则怎灶糟葬贼怎造葬冤尧
甘蔗 渊 杂葬糟糟澡葬则怎皂 燥枣枣蚤糟蚤灶葬则怎皂 冤尧 毛 果 杨 渊 孕燥责怎造怎泽
贼则蚤糟澡燥糟葬则责葬冤尧马铃薯渊 杂燥造葬灶怎皂 贼怎遭藻则燥泽怎皂冤 渊郭强等袁
圆园园苑冤尧苔藓 渊 孕澡赠泽糟燥皂蚤贼则藻造造葬 责葬贼藻灶泽冤 渊 澡贼贼责院椅憎憎憎援
酝蚤则遭葬泽藻援 燥则早 辕 冤 以及园艺植物草莓 渊 云则葬早葬则蚤葬 伊
葬灶葬灶葬泽泽葬冤渊李贺等袁 圆园园怨冤尧苹果渊酝葬造怎泽 凿燥皂藻泽贼蚤糟葬冤
渊再怎 藻贼 葬造援袁 圆园员员冤尧柑橘渊悦蚤贼则怎泽 葬藻泽贼蚤增怎皂冤渊杂燥灶早 藻贼 葬造援袁
圆园园怨冤及葡萄渊灾蚤贼蚤泽 增蚤灶蚤枣藻则葬冤渊宰葬灶早 藻贼 葬造援袁 圆园员员冤等物
种中发现大量的 皂蚤砸晕粤遥 但是这些多为模式植物
或是基因组测序结束的物种袁对于基因信息量较少
的植物袁进行生物信息学的相关研究还较为困难袁如
本研究预测的核果类果树中除桃和梅的 耘杂栽 和 郧杂杂
愿苑
摇 第 圆 期 罗晓燕等院 核果类果树中 皂蚤糟则燥砸晕粤泽的生物信息学预测及验证
图 圆摇 核果类果树中 员园 个 皂蚤砸晕粤家族成员渊员员 个 皂蚤砸晕粤成熟体冤的多样性比较
云蚤早援 圆摇 粤造蚤早灶皂藻灶贼泽 燥枣 员员 责则藻增蚤燥怎泽造赠 噪灶燥憎灶 孕则怎灶怎泽 皂葬贼怎则藻 皂蚤砸晕粤泽
序列相对较多外袁其他物种在 晕悦月陨 中登录的信息
量少之又少袁这不仅使 皂蚤砸晕粤 的预测量降低袁而且
使靶基因预测难以实施遥 采用先进的测序技术如
泽燥造藻曾葬测序技术等对基因组序列未知的树种进行分
析袁尤其是对于特殊的生理时期和逆境生理研究具
有重要的应用前景遥
皂蚤砸晕粤及其靶基因控制着生物体内多种生理
和代谢过程袁植物中袁皂蚤砸晕粤 调控根尧茎尧叶和花的
发育袁营养生长向生殖生长的转化以及生物或非生
物的应激胁迫反应等渊在澡葬灶早 藻贼 葬造援袁 圆园园远遭冤遥 在预测
的 员员 个核果类果树的 皂蚤砸晕粤 中袁其中 缘 个调控 员怨
个已知靶蛋白分别执行不同的功能遥 在前人的研究
中袁皂蚤砸员缘远 家族大多数靶向 杂月孕 转录因子 渊 允燥灶藻泽鄄
砸澡燥葬凿藻泽 藻贼 葬造援袁 圆园园源曰 砸葬躁葬早燥责葬造葬灶 藻贼 葬造援袁 圆园园远曰
酝燥造凿燥增葬灶 藻贼 葬造援袁 圆园员园冤袁其中 皂蚤砸员缘远澡编码富含脯氨
酸蛋白尧氨基酸透性酶和咖啡酸氧甲基转移酶袁
皂蚤砸员缘远蚤编码锌指蛋白遥 咖啡酸氧甲基转移酶是木
质素合成过程中的关键酶之一袁可使咖啡酸尧
怨苑
林 业 科 学 源愿 卷摇
摇 摇 摇 摇 表 圆摇 核果类果树中新预测的 皂蚤砸晕粤靶基因
栽葬遭援 圆摇 孕燥贼藻灶贼蚤葬造 贼葬则早藻贼 早藻灶藻泽 燥枣 贼澡藻 蚤凿藻灶贼蚤枣蚤藻凿 皂蚤砸晕粤 枣葬皂蚤造赠 蚤灶 孕则怎灶怎泽
新的 皂蚤糟则燥砸晕粤晕藻憎 皂蚤砸晕粤 靶基因渊登录号冤栽葬则早藻贼 早藻灶藻 陨阅 靶蛋白栽葬则早藻贼 责则燥贼藻蚤灶 蛋白功能孕则燥贼藻蚤灶 枣怎灶糟贼蚤燥灶
皂蚤砸员缘远澡 悦灾园员苑圆圆圆 富含脯氨酸蛋白孕则燥造蚤灶藻鄄则蚤糟澡 葬泽泽燥糟蚤葬贼藻凿 责则燥贼藻蚤灶
耘载园源猿员猿缘袁 耘郧园员怨愿员圆袁 悦晕苑猿猿圆员员 氨基酸透性酶粤皂蚤灶燥 葬糟蚤凿 责藻则皂藻葬泽藻 氨基酸的运输粤皂蚤灶燥 葬糟蚤凿 贼则葬灶泽责燥则贼
粤粤匝远苑猿源苑 咖啡酸氧甲基转移酶悦葬枣枣藻蚤糟 葬糟蚤凿 猿鄄韵鄄皂藻贼澡赠造贼则葬灶泽枣藻则葬泽藻 木质素的合成蕴蚤早灶蚤灶 遭蚤燥泽赠灶贼澡藻泽蚤泽
皂蚤砸猿怨怨葬 云郧怨怨源猿愿怨袁 云杂猿圆缘猿怨园袁 阅悦缘怨怨苑苑员袁粤酝愿员远苑缘园袁 月允缘缘怨缘猿愿 磷酸盐转移酶孕澡燥泽责澡葬贼藻 贼则葬灶泽枣藻则葬泽藻 代谢酝藻贼葬遭燥造蚤泽皂
皂蚤砸员缘远蚤 悦陨缘苑猿苑怨猿 假设蛋白 孕怎贼葬贼蚤增藻 责则燥贼藻蚤灶
悦云园猿怨圆苑远 锌指蛋白 在蚤灶糟 枣蚤灶早藻则 责则燥贼藻蚤灶 转录因子 栽则葬灶泽糟则蚤责贼蚤燥灶 枣葬糟贼燥则
皂蚤砸员远源枣 耘蕴源员苑园远愿袁 耘匀苑愿员园苑圆袁 阅灾苑猿苑源圆员袁耘耘园怨猿苑怨园袁 阅运源远愿员苑猿袁 郧栽怨苑愿愿圆远 晕粤悦结构域蛋白晕粤悦 凿燥皂葬蚤灶 责则燥贼藻蚤灶 转录因子栽则葬灶泽糟则蚤责贼蚤燥灶 枣葬糟贼燥则
皂蚤砸员远圆葬 阅灾员员源远缘园 假设蛋白 孕怎贼葬贼蚤增藻 责则燥贼藻蚤灶
图 猿摇 核果类果树新预测的 皂蚤砸晕粤琼脂糖电泳
云蚤早援 猿摇 粤早葬则燥泽藻 藻造藻糟贼则燥责澡燥则藻泽蚤泽 燥枣 孕则怎灶怎泽 灶燥增藻造 皂蚤砸晕粤
葬郾 核果类果树的小分子 砸晕粤 提取电泳图谱 员郾 耶龙眼爷梅花
芽曰 圆郾 耶蕴韵灾耘蕴蕴爷桃叶片曰 酝郾 圆 园园园 遭责 阅晕粤 造葬凿凿藻则遥
遭郾 核果类果树新预测 皂蚤砸晕粤 砸栽鄄孕悦砸 鉴定 摇 员郾 梅 责皂怎鄄
皂蚤砸源愿圆曰 圆郾 桃 责责藻鄄皂蚤砸员缘远澡曰 猿郾 桃 责责藻鄄皂蚤砸员苑员葬曰 源郾 桃 责责藻鄄
皂蚤砸猿怨怨葬曰 酝郾 圆 园园园 遭责 阅晕粤 造葬凿凿藻则遥
葬郾 耘造藻糟贼则燥责澡燥则藻泽蚤泽 燥枣 造燥憎 皂燥造藻糟怎造葬则 憎藻蚤早澡贼 砸晕粤 蚤泽燥造葬贼藻凿 枣则燥皂
孕则怎灶怎泽摇 员郾 云造燥憎藻则 遭怎凿 燥枣 孕郾 皂怎皂藻 耶 蕴燥灶早赠葬灶爷曰圆郾 蕴藻葬枣 燥枣 孕郾
责藻则泽蚤糟葬 耶蕴韵灾耘蕴蕴爷 曰 酝郾 圆 园园园 遭责 阅晕粤 造葬凿凿藻则援
遭郾 阅藻贼藻糟贼蚤燥灶 燥枣 孕则怎灶怎泽 灶燥增藻造 皂蚤砸晕粤 遭赠 砸栽鄄孕悦砸摇 员援 孕郾 皂怎皂藻
责皂怎鄄皂蚤砸源愿圆曰 圆郾 孕援 责藻则泽蚤糟葬 责责藻鄄皂蚤砸员缘远澡曰 猿援 孕援 责藻则泽蚤糟葬 责责藻鄄
皂蚤砸员苑员葬曰 源援 孕援 责藻则泽蚤糟葬 责责藻鄄皂蚤砸猿怨怨葬曰 酝援 圆 园园园 遭责 阅晕粤
造葬凿凿藻则援
缘 原羟基松柏醛和 缘 原羟基松柏醇甲基化分别生成
阿魏酸尧芥子醛和芥子醇袁参与 杂 原 木质素的合成
渊李波等袁 圆园员园冤遥 皂蚤砸猿怨怨葬 编码磷酸盐转移酶袁与
前人报道渊酝燥造凿燥增葬灶 藻贼 葬造援袁 圆园员园冤一致遥 皂蚤砸员远源枣 编
码 晕粤悦结构域蛋白袁晕粤悦基因参与植物许多生长发
育阶段袁如侧根的形成 渊载蚤藻 藻贼 葬造援袁 圆园园园冤尧叶片与组
织的衰老 渊 郧怎燥 藻贼 葬造援袁 圆园园远 冤尧花原基的形成
渊杂葬遭造燥憎泽噪蚤 藻贼 葬造援袁 员怨怨愿冤尧对生物与非生物环境的胁
迫反应等 渊匀藻早藻凿怎泽 藻贼 葬造援袁 圆园园猿冤袁以及果皮衰老
渊樊晶等袁 圆园园愿冤遥
综上所述袁本研究新鉴定的 员员 条 皂蚤砸晕粤泽袁有 缘
条 皂蚤砸晕粤泽靶定 员怨 个功能基因袁分别编码与核果类
果树生长发育尧 新陈代谢尧转录调节等相关的蛋白遥
由此说明袁皂蚤砸晕粤泽在基因表达中的作用是广泛的遥
随着更多的 皂蚤砸晕粤泽 被发现袁及其调节功能研究的
逐步深入袁皂蚤砸晕粤泽 在基因表达调控中的重要作用
将会越来越明显遥
参 考 文 献
樊摇 晶袁 李正国袁 高摇 雪袁 等援 圆园园愿援 脐橙 悦泽晕粤悦 基因的克隆及其
在果 实 贮 藏 过 程 中 的 表 达 分 析援 园 艺 学 报袁 猿缘
渊员圆冤院 员愿园猿 原 员愿园愿援
郭摇 强袁 项安玲袁 杨摇 清袁等援 圆园园苑援 利用 耘杂栽及生物信息学方法挖
掘 马 铃 薯 中 皂蚤砸晕粤 及 其 靶 基 因援 科 学 通 报袁
缘圆渊员源冤院 员远缘远 原 员远远源援
李摇 波袁 倪志勇袁 王摇 娟袁 等援 圆园员园援 木质素生物合成关键酶咖啡
酸 原 韵 原甲基转移酶基因渊悦韵酝栽冤的研究进展援 分子植物育种袁
愿渊员冤院 员员苑 原 员圆源援
李摇 勃袁 李淑平袁 谢兆森袁 等援 圆园员园援 上海和烟台地区甜樱桃生物学
特性及花芽分化进程研究援 果树学报袁 圆苑渊猿冤院 猿源怨 原 猿缘源援
李摇 贺袁 张志宏袁 高秀岩袁 等援 圆园园怨援 草莓 皂蚤糟则燥砸晕粤 的 砸栽鄄孕悦砸 鉴
定援 中国农业科学袁 源圆渊源冤院 员源远缘 原 员源苑圆援
吕德康袁 葛摇 瑛袁 柏摇 锡袁 等援 圆园园怨援 生物信息学在植物 皂蚤砸晕粤 研
究中的应用援 生物信息学袁 苑渊圆冤院 员员猿 原 员员远袁员猿远援
宋长年袁 贾启东袁 王摇 晨袁 等援 圆园员园援 猿圆 种果树 皂蚤糟则燥砸晕粤的生物信
息学预测与分析援 园艺学报袁 猿苑渊远冤院 愿远怨 原 愿苑怨援
王摇 珊袁 蔡斌华袁 章摇 镇袁 等援 圆园园愿援 果梅完全花与不完全花的差异
蛋白分析援 植物遗传资源学报袁 怨渊源冤院 源远缘 原 源远愿援
项安玲袁 黄思齐袁 杨志敏援 圆园园愿援 芸苔属渊月则葬泽泽蚤糟葬冤植物中 皂蚤糟则燥砸晕粤
的生物信息学预测与分析援 中国生物化学与分子生物学报袁 圆源
渊猿冤院 圆源源 原 圆缘远援
粤凿葬皂泽 酝 阅袁 运藻造造藻赠 允 酝袁 郧燥糟葬赠灶藻 允 阅袁 藻贼 葬造援 员怨怨员援 悦燥皂责造藻皂藻灶贼葬则赠
阅晕粤 泽藻择怎藻灶糟蚤灶早院 藻曾责则藻泽泽藻凿 泽藻择怎藻灶糟藻 贼葬早泽 葬灶凿 澡怎皂葬灶 早藻灶燥皂藻
责则燥躁藻糟贼援 杂糟蚤藻灶糟藻袁 圆缘圆渊缘园员猿冤院 员远缘员 原 员远缘远援
粤皂遭则燥泽 灾援 圆园园猿援 粤 怎灶蚤枣燥则皂 泽赠泽贼藻皂 枣燥则 皂蚤糟则燥砸晕粤 葬灶灶燥贼葬贼蚤燥灶援 砸晕粤袁 怨
渊猿冤院 圆苑苑 原 圆苑怨援
粤曾贼藻造造 酝 允袁 杂灶赠凿藻则 允 粤袁 月葬则贼藻造 阅 孕援 圆园园苑援 悦燥皂皂燥灶 枣怎灶糟贼蚤燥灶泽 枣燥则 凿蚤增藻则泽藻
泽皂葬造造 砸晕粤泽 燥枣 造葬灶凿 责造葬灶贼泽援 孕造葬灶贼 悦藻造造袁 员怨渊远冤院 员苑缘园 原 员苑远怨援
月葬则贼藻造 阅 孕援 圆园园源援 酝蚤糟则燥砸晕粤泽院 早藻灶燥皂蚤糟泽袁 遭蚤燥早藻灶藻泽蚤泽袁 皂藻糟澡葬灶蚤泽皂袁 葬灶凿
园愿
摇 第 圆 期 罗晓燕等院 核果类果树中 皂蚤糟则燥砸晕粤泽的生物信息学预测及验证
枣怎灶糟贼蚤燥灶援 悦藻造造袁 员员远渊圆冤院 圆愿员 原 圆怨苑援
月燥灶灶藻贼 耘袁 宰怎赠贼泽 允袁 砸燥怎扎佴 孕袁 藻贼 葬造援 圆园园源援 阅藻贼藻糟贼蚤燥灶 燥枣 怨员 责燥贼藻灶贼蚤葬造
糟燥灶泽藻则增藻凿 责造葬灶贼 皂蚤糟则燥砸晕粤泽 蚤灶 粤则葬遭蚤凿燥责泽蚤泽 贼澡葬造蚤葬灶葬 葬灶凿 韵则赠扎葬 泽葬贼蚤增葬
蚤凿藻灶贼蚤枣蚤藻泽 蚤皂责燥则贼葬灶贼 贼葬则早藻贼 早藻灶藻泽援 孕则燥糟藻藻凿蚤灶早泽 燥枣 贼澡藻 晕葬贼蚤燥灶葬造
粤糟葬凿藻皂赠 燥枣 杂糟蚤藻灶糟藻泽袁 员园员渊猿员冤院 员员缘员员 原 员员缘员远援
悦葬则则蚤灶早贼燥灶 允 悦袁 粤皂遭则燥泽 灾援 圆园园猿援 砸燥造藻 燥枣 皂蚤糟则燥砸晕粤泽 蚤灶 责造葬灶贼 葬灶凿
葬灶蚤皂葬造 凿藻增藻造燥责皂藻灶贼援 杂糟蚤藻灶糟藻袁 猿园员渊缘远猿员冤院 猿猿远 原 猿猿愿援
郧怎燥 再燥灶早枣藻灶早袁 郧葬灶 杂怎泽澡藻灶早援 圆园园远援 粤贼晕粤孕袁 葬 晕粤悦 枣葬皂蚤造赠 贼则葬灶泽糟则蚤责贼蚤燥灶
枣葬糟贼燥则袁 澡葬泽 葬灶 蚤皂责燥则贼葬灶贼 则燥造藻 蚤灶 造藻葬枣 泽藻灶藻泽糟藻灶糟藻援 孕造葬灶贼 允燥怎灶葬造袁 源远
渊源冤院 远园员 原 远员圆援
匀藻早藻凿怎泽 阅袁 再怎 酝袁 月葬造凿憎蚤灶 阅袁 藻贼 葬造援 圆园园猿援 酝燥造藻糟怎造葬则 糟澡葬则葬糟贼藻则蚤扎葬贼蚤燥灶
燥枣 月则葬泽泽蚤糟葬 灶葬责怎泽 晕粤悦 凿燥皂葬蚤灶 贼则葬灶泽糟则蚤责贼蚤燥灶葬造 葬糟贼蚤增葬贼燥则泽 蚤灶凿怎糟藻凿 蚤灶
则藻泽责燥灶泽藻 贼燥 遭蚤燥贼蚤糟 葬灶凿 葬遭蚤燥贼蚤糟 泽贼则藻泽泽援 孕造葬灶贼 酝燥造藻糟怎造葬则 月蚤燥造燥早赠袁
缘猿渊猿冤院 猿愿猿 原 猿怨苑援
匀怎灶贼藻则 悦袁 孕燥藻贼澡蚤早 砸 杂援 圆园园猿援 酝蚤泽泽蚤灶早 造蚤灶噪泽院 皂蚤砸晕粤泽 葬灶凿 责造葬灶贼
凿藻增藻造燥责皂藻灶贼援 悦怎则则藻灶贼 韵责蚤灶蚤燥灶 蚤灶 郧藻灶藻贼蚤糟泽 驭 阅藻增藻造燥责皂藻灶贼袁 员猿渊源冤院
猿苑圆 原 猿苑愿援
允燥灶藻泽鄄砸澡燥葬凿藻泽 酝 宰袁 月葬则贼藻造 阅 孕援 圆园园源援 悦燥皂责怎贼葬贼蚤燥灶葬造 蚤凿藻灶贼蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 燥枣
责造葬灶贼 皂蚤糟则燥砸晕粤泽 葬灶凿 贼澡藻蚤则 贼葬则早藻贼泽袁 蚤灶糟造怎凿蚤灶早 葬 泽贼则藻泽泽鄄蚤灶凿怎糟藻凿
皂蚤砸晕粤援 酝燥造藻糟怎造葬则 悦藻造造袁 员源渊远冤院 苑愿苑 原 苑怨怨援
蕴葬蚤 耘 悦援 圆园园猿援 酝蚤糟则燥砸晕粤泽院 砸怎灶贼泽 燥枣 贼澡藻 早藻灶燥皂藻 葬泽泽藻则贼 贼澡藻皂泽藻造增藻泽援
悦怎则则藻灶贼 月蚤燥造燥早赠袁 员猿渊圆猿冤院 砸怨圆缘 原 砸怨猿远援
蕴葬蚤 耘 悦援 圆园园源援 孕则藻凿蚤糟贼蚤灶早 葬灶凿 增葬造蚤凿葬贼蚤灶早 皂蚤糟则燥砸晕粤 贼葬则早藻贼泽援 郧藻灶燥皂藻
月蚤燥造燥早赠袁 缘渊怨冤院 员员缘援
蕴葬蚤 耘 悦袁 栽燥皂葬灶糟葬噪 孕袁 宰蚤造造蚤葬皂泽 砸 宰袁 藻贼 葬造援 圆园园猿援 悦燥皂责怎贼葬贼蚤燥灶葬造
蚤凿藻灶贼蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 燥枣 阅则燥泽燥责澡蚤造葬 皂蚤糟则燥砸晕粤 早藻灶藻泽援 郧藻灶燥皂藻 月蚤燥造燥早赠袁 源
渊苑冤院 砸源圆援
蕴蚤 再葬灶早袁 蕴蚤 宰藻蚤袁 允蚤灶 再燥怎曾蚤灶援 圆园园缘援 悦燥皂责怎贼葬贼蚤燥灶葬造 蚤凿藻灶贼蚤枣蚤糟葬贼蚤燥灶 燥枣
灶燥增藻造 枣葬皂蚤造赠 皂藻皂遭藻则泽 燥枣 皂蚤糟则燥砸晕粤 早藻灶藻泽 蚤灶 粤则葬遭蚤凿燥责泽蚤泽 贼澡葬造蚤葬灶葬
葬灶凿 韵则赠扎葬 泽葬贼蚤增葬援 粤糟贼葬 月蚤燥糟澡蚤皂蚤糟葬 耘贼 月蚤燥责澡赠泽蚤糟葬 杂蚤灶蚤糟葬袁 猿苑 渊圆冤院
苑缘 原 愿苑援
蕴蚤皂 蕴 孕袁 郧造葬泽灶藻则 酝 耘袁 再藻噪贼葬 杂袁 藻贼 葬造援 圆园园猿援 灾藻则贼藻遭则葬贼藻 皂蚤糟则燥砸晕粤
早藻灶藻泽援 杂糟蚤藻灶糟藻袁 圆怨怨渊缘远员圆冤院 员缘源园 原 员缘源园援
酝葬造造燥则赠 粤 悦袁 灾葬怎糟澡藻则藻贼 匀援 圆园园源援 酝蚤糟则燥砸晕粤泽院 泽燥皂藻贼澡蚤灶早 蚤皂责燥则贼葬灶贼
遭藻贼憎藻藻灶 贼澡藻 早藻灶藻泽援 悦怎则则藻灶贼 韵责蚤灶蚤燥灶 蚤灶 孕造葬灶贼 月蚤燥造燥早赠袁 苑渊圆冤院 员圆园 原
员圆缘援
酝葬贼怎噪怎皂葬造造蚤 蕴 运袁 郧则藻枣藻灶泽贼藻贼贼藻 允 允袁 杂燥灶泽贼藻早葬则凿 栽 杂袁 藻贼 葬造援 圆园园源援 耘杂栽鄄
孕粤郧耘 鄄 皂葬灶葬早蚤灶早 葬灶凿 葬灶葬造赠扎蚤灶早 耘杂栽 凿葬贼葬援 月蚤燥蚤灶枣燥则皂葬贼蚤糟泽袁 圆园渊圆冤院
圆愿远 原 圆愿愿援
酝藻赠藻则泽 月 悦袁 粤曾贼藻造造 酝 允袁 月葬则贼藻造 月袁 藻贼 葬造援 圆园园愿援 悦则蚤贼藻则蚤葬 枣燥则 葬灶灶燥贼葬贼蚤燥灶 燥枣
责造葬灶贼 皂蚤糟则燥砸晕粤泽援 栽澡藻 孕造葬灶贼 悦藻造造袁 圆园渊员圆冤院 猿员愿远 原 猿员怨园援
酝燥造凿燥增葬灶 阅袁 杂责则蚤早早泽 粤袁 再葬灶早 允袁 藻贼 葬造援 圆园员园援 匀赠责燥曾蚤葬鄄则藻泽责燥灶泽蚤增藻
皂蚤糟则燥砸晕粤泽 葬灶凿 贼则葬灶泽鄄葬糟贼蚤灶早 泽皂葬造造 蚤灶贼藻则枣藻则蚤灶早 砸晕粤泽 蚤灶 粤则葬遭蚤凿燥责泽蚤泽援
允燥怎则灶葬造 燥枣 耘曾责藻则蚤皂藻灶贼葬造 月燥贼葬灶赠袁 远员渊员冤院 员远缘援
孕葬则噪 酝 再援 圆园园缘援 晕怎糟造藻葬则 责则燥糟藻泽泽蚤灶早 葬灶凿 藻曾责燥则贼 燥枣 皂蚤糟则燥砸晕粤泽 蚤灶
粤则葬遭蚤凿燥责泽蚤泽援 孕则燥糟藻藻凿蚤灶早泽 燥枣 贼澡藻 晕葬贼蚤燥灶葬造 粤糟葬凿藻皂赠 燥枣 杂糟蚤藻灶糟藻泽袁 员园圆
渊员园冤院 猿远怨员 原 猿远怨远援
砸葬躁葬早燥责葬造葬灶 砸袁 灾葬怎糟澡藻则藻贼 匀袁 栽则藻躁燥 允袁 藻贼 葬造援 圆园园远援 粤 凿蚤增藻则泽藻 葬灶凿
藻增燥造怎贼蚤燥灶葬则蚤造赠 枣造怎蚤凿 泽藻贼 燥枣 皂蚤糟则燥砸晕粤泽 蚤灶 粤则葬遭蚤凿燥责泽蚤泽 贼澡葬造蚤葬灶葬援 郧藻灶藻泽
驭 阅藻增藻造燥责皂藻灶贼袁 圆园院 猿源园苑 原 猿源圆缘援
砸藻蚤灶澡葬则贼 月 允袁 宰藻蚤灶泽贼藻蚤灶 耘 郧袁 砸澡燥葬凿藻泽 酝 宰袁 藻贼 葬造援 圆园园圆援 酝蚤糟则燥砸晕粤泽
蚤灶 责造葬灶贼泽援 郧藻灶藻泽 驭 阅藻增藻造燥责皂藻灶贼袁 员远渊员猿冤院 员远员远 原 员远圆远援
杂葬遭造燥憎泽噪蚤 砸 宰袁 酝藻赠藻则燥憎蚤贼扎 耘 酝援 员怨怨愿援 粤 澡燥皂燥造燥早 燥枣 晕韵 粤孕陨悦粤蕴
酝耘砸陨杂栽耘酝 蚤泽 葬灶 蚤皂皂藻凿蚤葬贼藻 贼葬则早藻贼 燥枣 贼澡藻 枣造燥则葬造 澡燥皂藻燥贼蚤糟 早藻灶藻泽
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