全 文 ：第 ww卷 第 u期
u s s {年 u 月
林 业 科 学
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∂²¯1ww o‘²1u
ƒ ¥¨qou s s {
我国部分兰属植物菌根真菌µ⁄‘„ Œ×≥序列分析 3
李潞滨t 胡 陶t 唐 征u 庄彩云t 刘振静t 杨 凯u 彭镇华t
kt q中国林业科学研究院林业研究所 国家林业局林木培育重点实验室 北京 tsss|t ~
u q北京农学院农业应用新技术北京市重点实验室 北京 tsuusyl
关键词 } 兰属植物 ~菌根真菌 ~µ⁄‘„ Œ×≥分析 ~瘤菌根菌 ~胶膜菌属
中图分类号 }≥zt{1{t 文献标识码 }„ 文章编号 }tsst p zw{{kuss{lsu p stys p sx
收稿日期 }ussz p sw p ux ∀
基金项目 }−|w{.项目kussw p w p uyl o−|w{.项目kussx p w p vzl o北京市属市管高校人才强教计划资助项目 ∀
3 杨凯为通讯作者 ∀
ρ∆ΝΑ ΙΤΣ Αναλψσισ οφ Μψχορρηιζαλ Φυνγι ιν Χψµβιδιυµ Πλαντσ
¬∏¥¬±t ‹∏פ²t פ±ª«¨ ±ªu «∏¤±ª≤¤¬¼∏±t ¬∏«¨ ±­¬±ªt ≠¤±ªŽ¤¬u °¨ ±ª«¨ ±«∏¤t
kt q ΚεψΛαβορατορψοφ Τρεε Βρεεδινγ ανδ Χυλτιϖατιον οφ ΣΑΦ Ρεσεαρχη Ινστιτυτε οφ ΦορεστρψoΧΑΦ Βειϕινγ tsss|t ~
u q ΚεψΛαβορατορψοφ Αγριχυλτυραλ Νεω Τεχηνολογψ ανδ Αππλιχατιον ιν Βειϕινγ o Βειϕινγ Αγριχυλτυραλ Χολλεγε Βειϕινγ tsuusyl
Αβστραχτ } µ⁄‘„ ¬±·¨µ±¤¯ ·µ¤±¶¦µ¬¥¨§¶³¤¦¨µ¤±¤¯¼¶¬¶kµ⁄‘„ Œ×≥l º¤¶∏¶¨§·²¶·∏§¼ §¬√¨ µ¶¬·¼ ²©tu µ¨³µ¨¶¨±·¤·¬√¨ °¼¦²µµ«¬½¤¯
•«¬½²¦·²±¬¤¶·µ¤¬±¶o º«¬¦« º¨ µ¨ ¬¶²¯¤·¨§©µ²° ≤«¬±¨ ¶¨ ²µ¦«¬§¶k Χψµβιδιυµ l §¬¶·µ¬¥∏·¨§¬± §¬©©¨µ¨±·¶¬·¨¶¤±§ ¥¨ ²¯±ª¨§·²
§¬©©¨µ¨±·¨ ¦²¯²ª¬¦·¼³¨¶q׫¨ …¯¤¶·µ¨¶∏¯·¶¬±§¬¦¤·¨§·«¤·¤¯¯·«¨¶¨ ¶·µ¤¬±¶¥¨ ²¯±ª¨§·² ∞³∏¯²µ«¬½¤²µ×∏¯¤¶±¨ ¯¯¤oº«¬¦« º¤¶©∏¯¯ ¼
¦²±¶¬¶·¨±·º¬·«¬§¨±·¬©¬¦¤·¬²± ¤¶ ∞³∏¯²µ«¬½¤ º¬·« °²µ³«²¯²ª¬¦¤¯ °¨ ·«²§q „§§¬·¬²±¤¯ ¼¯ o ¥¤¶¨§ ²± µ⁄‘„ Œ×≥ ¶¨ ∏´¨±¦¨ ¦¯∏¶·¨µ
¤±¤¯¼¶¬¶o§¨±§µ²ªµ¤° ²© Χψµβιδιυµ °¼¦²µµ«¬½¤¯ ¶·µ¤¬±¶¶«²º¨ §·«¤··«¨ §¬¶·µ¬¥∏·¨§ ±¨√¬µ²±°¨ ±·¶¤±§²µ¦«¬§¶¶³¨¦¬¨¶º¨ µ¨ ·º²
¦µ∏¦¬¤¯ ©¤¦·²µ¶·«¤·¤©©¨¦·¨§·«¨ ¶³¨¦¬©¬¦¬·¼2µ¨ ¤¯·¬²± ¥¨·º¨ ±¨ ≤«¬±¨ ¶¨ ²µ¦«¬§¶kΧψµβιδιυµl ¶¼°¥¬²·¬¦°¼¦²µµ«¬½¤¨ ¤±§«²¶·¶q
Κεψ ωορδσ} Χψµβιδιυµ ~°¼¦²µµ«¬½¤¯2©∏±ª¬~µ⁄‘„ ¬±·¨µ±¤¯ ·µ¤±¶¦µ¬¥¨§¶³¤¦¨µ¤±¤¯¼¶¬¶~ Επυλορηιζα~ Τυλασνελλα
兰科k’µ¦«¬§¤¦¨¤¨ l 植物俗称兰花 o全世界约有 zss属 us sss多种及大量变种 o依其所属生态类型可分为
地生兰 !附生兰和腐生兰 v类 o作为一种重要的观赏花卉和药用植物资源 o在花卉和天然药物产业上有着巨
大的经济价值和利用潜力k罗毅波等 oussvl ∀兰科菌根真菌k²µ¦«¬§ °¼¦²µµ«¬½¤¨ l对于兰科植物具有重要意
义 o即兰科植物在自然生长状态下必须依赖与真菌建立共生关系才能完成正常生命活动k吴应祥 ot||vl o自
¬±®首次发现兰科植物根内有内生真菌以来k• ¶¨¶¬¨® ετ αλqot{wzl o对兰科菌根真菌及其与兰科植物间关系
的研究也不断开展k‹¤§¯ ¼¨ ετ αλqot|zu ~≤∏µµ¤« ετ αλqot|{z ~≤∏µµ¤« ετ αλqot||u ~¨¯°¨ µετ αλqot||x ~范黎
等 ousss ~פ¼¯²µετ αλqoussw ~颜容等 oussyl ∀
由于形态学方法在已被普遍认同的兰科共生丝核菌属真菌的进一步细化分属鉴定中具有较大的局限
性 o近年国外越来越多地将多种分子标记技术运用于兰科菌根真菌鉴定的研究kŽµ¬¶·¬¤±¶¨± ετ αλqousst ~
¦Ž¨±§µ¬¦® ετ αλqoussu ~≥¨ ²¯¶¶¨ ετ αλqoussu ~’·¨µ² ετ αλqoussu ~…²∏ª²∏µ¨ ετ αλqoussx ~׫¤° ετ αλqousst ~°²³¨
ετ αλqousst ~ ¬±ª ετ αλqoussv ~ °¨ µ¨¬µ¤ ετ αλqoussx¤~ ussx¥~ „±§¨µ¶¨± ετ αλqo t||u ~ ≥¨ ± ετ αλqo t||{ ~
¦≤²µ°¬¦® ετ αλqousswl o诸多此方面的工作表明了在兰科植物菌根真菌研究中广泛采用分子生物学技术手
段的可行性和必然趋势 ∀然而对于我国特有的 !广泛分布的地生型兰属k Χψµβιδιυµl植物 o却鲜见运用分子
生物学技术手段对与其共生的菌根真菌进行系统发生学比较研究的报导k李潞滨 ot||{l ∀本研究利用µ⁄‘„
Œ×≥技术对分离自 w种不同地理分布和生态型中国兰属植物的 tu株共生瘤菌根菌k Επυλορηιζαl进行了遗传多
样性分析研究 o将µ⁄‘„ Œ×≥分析结果和形态学分类结果进行了比较 o并在Œ×≥序列分析基础上对中国兰属植
物与菌根真菌间的专一性进行了初步探讨 ∀
1 材料与方法
t1t 供试菌株材料 Œ×≥分析的菌株材料为中国兰属植物 tu个共生菌根真菌菌株 o由中国林业科学研究院
林业研究所国家林业局林木培育实验室分离自 w种兰属植物即春兰k Χψµβιδιυµ γοερινγιιl !蕙兰k Χq φαβερψl !
墨兰 k Χq σινενσεl !多花兰 k Χqφλοριβυνδυµ l o经形态学初步鉴定为属于广义兰科共生丝核菌 k ’µ¦«¬§
Ρηιζοχτονιαl的瘤菌根菌k表 tl ∀
表 1 ΙΤΣ分析供试兰属植物及菌根真菌
Ταβ .1 Στατιστιχσ οφ Χψµβιδιυµ µψχορρηιζαεφορ ΙΤΣ αναλψσισ
编号
‘²q
兰花
’µ¦«¬§¶
产地
°µ²§∏¦¬±ª¤µ¨¤
生态型
∞¦²·¼³¨
分离菌株
¼¦²µµ«¬½¤¯ ©∏±ª∏¶
Œ×≥序列
Š¨ ±…¤±®¤¦¦¨¶¶¬²±
t 惠兰 Χq φαβερψ 河南确山 ±∏¨¶«¤±o ‹ ±¨¤± 地生兰 × µ¨µ¨¶·µ¬¤¯ ²µ¦«¬§ 豫惠 ≤‹su÷u p t ∞ƒv|vyux
u 惠兰 Χq φαβερψ 河南确山 ±∏¨¶«¤±o ‹ ±¨¤± 地生兰 × µ¨µ¨¶·µ¬¤¯ ²µ¦«¬§ 豫惠 ≤‹su÷u p u ∞ƒv|vyuy
v 春兰 Χq γοερινγιι 河南确山 ±∏¨¶«¤±o ‹ ±¨¤± 地生兰 × µ¨µ¨¶·µ¬¤¯ ²µ¦«¬§ 豫春 ≤Šsv ∞ƒtuzy{u
w 春兰 Χq γοερινγιι 湖北罗田 ∏²·¬¤±o ‹∏¥¨¬ 地生兰 × µ¨µ¨¶·µ¬¤¯ ²µ¦«¬§ 湖 t ≤Šs{ p t ∞ƒv|vyuz
x 春兰 Χq γοερινγιι 湖北罗田 ∏²·¬¤±o‹∏¥¨¬ 地生兰 × µ¨µ¨¶·µ¬¤¯ ²µ¦«¬§ 湖 t ≤Šs{ p u ∞ƒv|vyu{
y 春兰 Χq γοερινγιι 四川江津 ¬¤±ª­¬±o≥¬¦«∏¤± 地生兰 × µ¨µ¨¶·µ¬¤¯ ²µ¦«¬§ 春新 ux≤Štx÷v ∞ƒv|vyvt
z 墨兰 Χq σινενσε 四川江津 ¬¤±ª­¬±o≥¬¦«∏¤± 地生兰 × µ¨µ¨¶·µ¬¤¯ ²µ¦«¬§ 墨 v ≤≥sy p t ∞ƒv|vyuw
{ 墨兰 Χq σινενσε 四川江津 ¬¤±ª­¬±o≥¬¦«∏¤± 地生兰 × µ¨µ¨¶·µ¬¤¯ ²µ¦«¬§ 墨 v ≤≥sy p u ∞ƒv|vyuv
| 墨兰 Χq σινενσε 四川江津 ¬¤±ª­¬±o≥¬¦«∏¤± 地生兰 × µ¨µ¨¶·µ¬¤¯ ²µ¦«¬§ 墨 v ≤≥s| ∞ƒv|vyuu
ts 多花兰 Χq φλοριβυνδυµ 四川江津 ¬¤±ª­¬±o≥¬¦«∏¤± 附生兰 „§±¤¶¦¨±·²µ¦«¬§ 神 ≤ƒsz ∞ƒv|vyut
tt 多花兰 Χq φλοριβυνδυµ 云南腾冲 × ±¨ª¦«²±ªo ≠∏±±¤± 附生兰 „§±¤¶¦¨±·²µ¦«¬§ ≤y ≤‹sy÷t p t ∞ƒv|vyu|
tu 多花兰 Χq φλοριβυνδυµ 云南腾冲 × ±¨ª¦«²±ªo ≠∏±±¤± 附生兰 „§±¤¶¦¨±·²µ¦«¬§ ≤y ≤‹sy÷t p u ∞ƒv|vyvs
t1u 菌株 ⁄‘„提取 用 °⁄„培养基培养分离得到的菌根真菌 ou{ ε 培养 w §o用接种针刮取一个培养皿培
养的菌根真菌约 s1u ªo加入 t °⁄‘„提取缓冲液ktss °°²¯#pt ×µ¬¶o³‹ {1x ~tss °°²¯#pt ‘¤≤¯ ~xs °°²¯#
pt ∞⁄ׄ ~u h ≥⁄≥l o充分研磨 oyx ε 水浴 vs °¬±~加入等体积苯酚Β氯仿ktΒtl轻轻混匀 x °¬±~每分钟
ts sss转离心 ts °¬±o取上清液于一新离心管中 ~加入 zs h体积的异丙醇沉淀 ⁄‘„ o⁄‘„用 zs h乙醇冲洗 u
次 ~将 ⁄‘„溶解在 xss °×∞缓冲液中 o加入 u ˏ• ‘„酶 ovz ε vs °¬±~加入等体积苯酚Β氯仿ktΒtl轻轻混
匀 ~每分钟 ts sss转离心 ts °¬±o取上清液于一新离心管中 ~加入等体积氯仿 o轻轻混匀 ~每分钟 ts sss转
离心 ts °¬±o取上清液于一新离心管中 ~加入 zs h体积的无水乙醇沉淀 ⁄‘„ o⁄‘„ 用 zs h乙醇冲洗 u次 ~
⁄‘„溶解在 t ≅ ×∞缓冲液中 ow ε 备用k庄彩云等 ousszl ∀
t1v 菌株µ⁄‘„ Œ×≥区段的 °≤• 扩增 !产物纯化及测序 兰花菌根真菌µ⁄‘„ Œ×≥区段 °≤• 扩增和测序引物
为 Œ×≥ p °tkxχ p ×≤≤ Š×„ ŠŠ× Š„„ ≤≤× Š≤Š Šl oŒ×≥ p °u kxχ p ×≤≤ ×≤≤ Š≤× ×„× ×Š„ ×„× Š≤l kŠ¤µ§¨¶ ετ
αλqot||vl ∀
°≤• 反应体系的组成为 }tss °°²¯#pt ×µ¬¶p ‹≤¯ oxs °°²¯#pt Ž≤¯ ot ˜ פ´ ⁄‘„聚合酶 ou1x °°²¯#pt
ª≤¯ u ou1x °°²¯#pt §‘×°¶ow Λ°²¯#pt引物 otss ±ª⁄‘„模板 ∀
°≤• 反应循环参数为 }预变性 |y ε ou °¬±~变性 |w ε ows ¶~退火 ys ε ows ¶~延伸 zu ε owx ¶~进行 vx
个反应循环 ~延伸 zu ε ox °¬±∀
°≤• 产物经 °≤• 产物试剂盒纯化后与 ³⁄p t{×kפŽ¤•¤l载体连接 o转化大肠杆菌 ⁄‹ p xΑo选取阳性克
隆由上海生工公司测序 ∀
t1w Œ×≥序列排序及系统分析 Œ×≥t和 Œ×≥u序列的起止范围参照 Š¨ ±…¤±®中已有兰科植物菌根真菌的 Œ×≥
范围确定 ∀用 ⁄‘„„‘软件对所获 Œ×≥序列进行系统分析 o用最适全局排序选项进行成对同源性比对 ~
’¥¶¨µ√¨ §⁄¬√¨ µª¨±¦¼法构建系统树 ∀
2 结果
u1t µ⁄‘„ Œ×≥区段的 °≤• 扩增及测序结果 用引物 Œ×≥ p °t和 Œ×≥ p °u扩增 tu个中国兰属植物菌根真
菌菌株的µ⁄‘„ Œ×≥区段 o获得约 yvs ¥³产物k图 t为部分菌株的µ⁄‘„ Œ×≥区段 °≤• 产物电泳结果l ∀tu个
菌株的µ⁄‘„ Œ×≥区段 °≤• 产物测序后获得 Œ×≥区段的全序列 oŒ×≥区域长度为 yu{ ∗ ywu ¥³oŒ×≥t长度为 tzs
∗ t{y ¥³o变异位点共 y{个 oŒ×≥u长度 uzu ∗ u{x ¥³o变异位点 yw个 ∀
u1u µ⁄‘„ Œ×≥序列的 …¯¤¶·比对结果 将分离所得 tu个中国兰属植物菌根真菌菌株的 µ⁄‘„ Œ×≥序列在
Š¨ ±…¤±®中进行了同源比对 o所得结果见表 u ∀
u1v µ⁄‘„ Œ×≥序列聚类结果 tu个中国兰属植物菌根真菌菌株的µ⁄‘„ Œ×≥序列聚类结果见图 u ∀
tyt 第 u期 李潞滨等 }我国部分兰属植物菌根真菌µ⁄‘„ Œ×≥序列分析
图 t 菌株的µ⁄‘„ Œ×≥区段 °≤• 产物电泳结果
ƒ¬ªqt ∞¯ ¦¨·µ²³«²µ¨¶¬¶µ¨¶∏¯·²©¶·µ¤¬±¶. µ⁄‘„
Œ×≥ ¶¨¦·¬²± °≤• ³µ²§∏¦·¬²±
表 2 兰属植物菌根真菌 ρ∆ΝΑ ΙΤΣ序列 Βλαστ比对结果 ≠
Ταβ .2 Βλαστ ρεσυλτσ οφ Χψµβιδιυµ µψχορρηιζαεφυνγι ρ∆ΝΑ ΙΤΣ σεθυενχε
菌株编号
≥·µ¤¬±¶‘²q
Š…中相似克隆
≥¨ °¥¯¤¥¯¨¦¯²±¨ ¬± Š…
Š…中相似克隆对应菌名
ƒ∏±ª∏¶²©¶¨ °¥¯¤¥¯¨¦¯²±¨ ¬± Š…
相似度
Œ§¨ ±·¬·¬¨¶
豫惠 ≤‹su÷u p t „≠vzvuyy Τυλασνελλᶳqtst Œ⁄¶€ x||Πytx k|z h l oŠ¤³¶€ tΠytx ks h l
豫惠 ≤‹su÷u p u „≠vzvuyy Τυλασνελλᶳqtst Œ⁄¶€ ystΠyty k|z h l oŠ¤³¶€ uΠyty ks h l
豫春 ≤Šsv „≠ywv{sw Τυλασνελλα χαλοσπορα Œ⁄¶€ xzwΠx|z k|y h l oŠ¤³¶€ |Πx|z kt h l
湖 t ≤Šs{ p t „vtvww{ Επυλορηιζᶳq Œ⁄¶€ ytvΠytz k|| h l oŠ¤³¶€ sΠytz ks h l
湖 t ≤Šs{ p u „vtvww{ Επυλορηιζᶳq Œ⁄¶€ ytyΠyus k|| h l oŠ¤³¶€ sΠyus ks h l
春新 ux≤Štx÷v „≠vzvu|{ Τυλασνελλα χαλοσπορα Œ⁄¶€ yttΠyuu k|{ h l oŠ¤³¶€ uΠyuu ks h l
墨 v ≤≥sy p t „vtvwxt Επυλορηιζᶳq Œ⁄¶€ yt{Πyvv k|z h l oŠ¤³¶€ sΠyvv ks h l
墨 v ≤≥sy p u „vtvwxt Επυλορηιζᶳq Œ⁄¶€ yusΠyvv k|z h l oŠ¤³¶€ sΠyvv ks h l
墨 v ≤≥s| „vtvwxt Επυλορηιζα ¶³q Εαvα Œ⁄¶€ ytxΠyvs k|z h l oŠ¤³¶€ tΠyvs ks h l
神 ≤ƒsz „≠ywv{sw Τυλασνελλα χαλοσπορα Œ⁄¶€ x{xΠx|t k|{ h l oŠ¤³¶€ tΠx|t ks h l
≤y≤‹sy÷t p u „vtvwwy Επυλορηιζᶳq Œ⁄¶€ yvzΠyws k|| h l oŠ¤³¶€ sΠyws ks h l
≤y≤‹sy÷t p t „vtvwwy Επυλορηιζᶳq Œ⁄¶€ yv{Πyws k|| h l oŠ¤³¶€ sΠyws ks h l
≠ Š…}Š¨ ±…¤±®~Œ⁄¶}相似度 Œ§¨±·¬·¬¨¶q
图 u 兰属植物菌根真菌µ⁄‘„ Œ×≥序列聚类图
ƒ¬ªqu ⁄¨ ±§µ²ªµ¤° ²© Χψµβιδιυµ °¼¦²µµ«¬½¤¨
©∏±ª¬¥¤¶¨§²±µ⁄‘„ Œ×≥ ¶¨ ∏´¨ ±¦¨ ¦¯∏¶·¨µ¤±¤¯¼¶¬¶
3 分析与讨论
v1t µ⁄‘„ Œ×≥序列的 …¯¤¶·比对结果讨论 对分获菌株的
µ⁄‘„ Œ×≥序列在 Š¨ ±…¤±®中进行 …¯¤¶·同源性比对 o结果显
示本次研究中的 tu个兰属植物菌根真菌菌株与新加坡的
¬±ª等kussvl !美国的 …²∏ª²∏µ¨ 等kussxl和 ¦≤²µ°¬¦®等
kusswl已报道的分离自兰属植物的瘤菌根菌属或胶膜菌属
k Τυλασνελλαl真菌之间的同源相似度达 |y h ∗ || h k表 ul o
Œ×≥序列分析与已有的相关研究结果相吻合 ∀
对于被广泛认同的可与兰科共生的属于无性态半知菌
范畴的广义丝核菌属菌根真菌 o²²µ¨ kt|{|l !≤∏µµ¤«等
kt||ul 和 „±§¨µ¶¨± kt||yl等以真菌桶孔隔膜超微结构特征
等形态学鉴定标准已对其进行了细化分属 o其中无性态的
瘤菌根菌属真菌与有性态的胶膜菌属真菌被确认为同一真
菌 u种不同的存在形式 ∀
本次所获 tu个菌株与 Š¨ ±…¤±®中已报道的瘤菌根菌
属或胶膜菌属真菌之间有着高度的同源性k|y h ∗ || h l o
…¯¤¶·比对与形态学鉴定所获结论是一致的 o以分子生物学
uyt 林 业 科 学 ww卷
和形态学 u种手段展开鉴定研究的结果得到了充分的相互印证 ∀以菌丝体桶孔隔膜超微结构特征等为依据
形态学方法结合菌株µ⁄‘„ Œ×≥序列分析的分子生物学技术手段 o可以大大提高开展兰科菌根真菌鉴定研究
的科学性和准确性 ∀
v1u µ⁄‘„ Œ×≥序列聚类结果讨论 tu个菌株的µ⁄‘„ Œ×≥区段 °≤• 产物的测序表明 o中国兰属植物菌根真
菌之间的µ⁄‘„ Œ×≥t !Œ×≥u区段序列具有高度同源性的同时 o也存在着较丰富的长度多态性信息 o可以有效地
通过兰属植物菌根真菌之间的µ⁄‘„ Œ×≥区段序列差异来鉴别兰属植物菌根真菌 ∀
从本研究 tu个菌株的µ⁄‘„ Œ×≥序列聚类分析结果可见k图 ul o从产于四川江津的墨兰分离出的菌株墨
v ≤≥sy p t !墨 v ≤≥sy p u和墨 v ≤≥s|聚在一起k∞ƒv|vyuu !∞ƒv|vyuv !∞ƒv|vyuw序列间只有 w个碱基出现差
异l再与同一产地春兰分离的菌株春新 ux≤Štx÷v聚在一起 ~从采集自云南腾冲的附生多花兰中分离的菌株
≤y ≤‹sy÷t p t !≤y ≤‹sy÷t p u聚在一起k∞ƒv|vyu| !∞ƒv|vyvs序列间只有 t个碱基出现差异l ~从采集自湖北
罗田地生春兰分离出的菌株湖 t ≤Šs{ p t和湖 t ≤Šs{ p u聚在一起 ok∞ƒv|vyuz !∞ƒv|vyu{序列间有 w个碱基
出现差异l ~从采集自河南确山的蕙兰中分离菌株间豫惠 ≤‹su÷u p t和豫惠 ≤‹su÷u p u聚在一起 o序列间有
tu个碱基出现差异k∞ƒv|vyux o ∞ƒv|vyuyl o这 u菌株聚在一起后再与分离自同一采集地的春兰菌株豫春
≤Šsv聚在一起 ~这些菌株的聚类关系均与兰花寄主的地理分布和所属种相关 o只有从产自四川江津的附生
多花兰中分离的神 ≤ƒsz菌株与寄主地理分布 !所属种的关系不一致 ∀从不同产地兰花菌根真菌 µ⁄‘„ Œ×≥
序列多样性上分析 o多样性呈现从南方到北方逐渐增大的趋势 o说明兰花产地环境的复杂程度直接影响兰花
菌根真菌的多样性 ∀
这些结果说明兰花地理分布 !所属种是影响中国兰属植物菌根真菌与兰花间专一性关系的关键性因素 ∀
参 考 文 献
范 黎 o郭顺星 o肖培根 qusss1 密花石斛等六种兰科植物菌根的显微结构研究 q植物学通报 otzktl }zv p z|1
李潞滨 qt||{1 中国兰菌根研究 q北京林业大学博士学位论文 otu p ut q
罗毅波 o贾建生 o王春玲 o等 qussv1 中国兰科植物保育的现状和展望 q生物多样性 ottktl }zs p zz q
吴应祥 qt||v1 中国兰花 qu版 q北京 }中国林业出版社 oyx p zy q
颜 容 o刘红霞 o蔡怀兆页 o等 qussy1 独花兰菌根的初步研究 q北京林业大学学报 ou{kul }ttu p ttz1
庄彩云 o李潞滨 o胡 陶 o等 qussz1 适用于µ⁄‘„ Œ×≥分析的兰属植物菌根真菌培养及 ⁄‘„提取方法 q北京农学院学报 ouukvl }w p y q
„±§¨µ¶¨± × ƒ qt||u q„ ≤«¨¦®2¯¬¶·²© Ρηιζοχτονια ³¨¬·«¨¶q¼¦²·¤¬²±oxt }wvz p wxz q
„±§¨µ¶¨± × ƒ qt||y q„ ¦²°³¤µ¤·¬√¨ ·¤¬²±²°¬¦¶·∏§¼ ²© Ρηιζοχτονια ¶¨±¶∏ ¤¯·² °¨³¯²¼¬±ª °²µ³«²¯²ª¬¦¤¯ o∏¯·µ¤¶·µ∏¦·∏µ¤¯ ¤±§ °²¯ ¦¨∏¯¤µ°¨ ·«²§¶q¼¦²¯ • ¶¨otss
k|l }tttz p ttu{ q
…²∏ª²∏µ¨ o…²∏ª²∏µ¨ ⁄ ≥ qussx qŒ×≥2• ƒ° ¤±§¶¨ ∏´¨ ±¦¨ ¤±¤¯¼¶¬¶²© ±¨§²³«¼·¨¶©µ²° ΑχιαντηυσoΧαλαδενια ¤±§ Πτεροστψλισ k’µ¦«¬§¤¦¨¤¨ l ¬± ¶²∏·«¨¤¶·¨µ±
±∏¨ ±¨¶¯¤±§q ¼¦²¯ • ¶¨ots|k°·wl }wxu p ys q
≤∏µµ¤« • ≥ o≥«¨µ¥∏µ±¨ • qt||u q≥ ³¨·¤¯ ∏¯·µ¤¶·µ∏¦·∏µ¨ ²©¶²°¨©∏±ª¤¯ ±¨§²³«¼·¨¶©µ²° ¥²µ¨¤¯ ²µ¦«¬§°¼¦²µµ«¬½¤¶q ¼¦²¯²ª¬¦¤¯ • ¶¨¨¤µ¦«o|y }x{v p x{z q
≤∏µµ¤« • ≥ o¨¯° µ¨≤ ⁄o≥¬ª«·oετ αλqt|{z q‘¨ º µ¨¦²µ§¶¤±§±¨ º ·¤¬¤²©©∏±ª¬©µ²°·«¨ °¼¦²µµ«¬½¤¨ ²©·¨µµ¨¶·µ¬¤¯ ²µ¦«¬§¶²© „¯ ¥¨µ·¤q≤¤± …²·oyx }uwzv p
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׫¤° ƒ ≠ o«¤±ª ÷ ≥ qusst q„¥¶·µ¤¦·¶©²µ·«¨ vµ§Œ±·¨µ±¤·¬²±¤¯ ≤²±©¨µ¨±¦¨ ²± ¼¦²µµ«¬½¤kŒ≤’ ŒŒŒl o„§¨ ¤¯¬§¨ ouwz p ux{ q
Š¤µ§¨¶ o…µ∏±¶× ⁄qt||v qŒ×≥ ³µ¬° µ¨º¬·« ±¨«¤±¦¨§¶³¨¦¬©¬¦¬·¼©²µ¥¤¶¬§¬²°¼¦¨·¨¶}„³³¯¬¦¤·¬²±·²·«¨ ¬§¨±·¬©¬¦¤·¬²± ²© µψχορζηιζαε ¤±§µ∏¶·¶q²¯ ∞¦²¯ ou }ttv
p tt{ q
‹¤§¯ ¼¨ Š o• ¬¯¯¬¤°¶²± …qt|zu qƒ ¤¨·∏µ¨¶²© °¼¦²µµ«¬½¤¯ ¬±©¨¦·¬²±¬± ¶²°¨ ¤¯¤¼¤± ²µ¦«¬§¶q ‘¨º °«¼·²¯ ozt }tttt p ttt{ q
Žµ¬¶·¬¤±¶¨± Ž„ oפ¼¯²µ⁄qusst qŒ§¨±·¬©¬¦¤·¬²±²©°¼¦²µµ«¬½¤¯ ©∏±ª¬©µ²°¶¬±ª¯¨³¨ ²¯·²±¶²© ∆αχτψλορηιζα µαϕαλισk’µ¦«¬§¤¦¨¤¨ l ∏¶¬±ª¶¬±ª¯ 2¨¶·µ¤±§¦²±©²µ°¤·¬²±
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k责任编辑 朱乾坤l
wyt 林 业 科 学 ww卷