全 文 :第 ww卷 第 tu期
u s s {年 tu 月
林 业 科 学
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高温胁迫下 tw个银杏品种的耐热性
曹福亮t 郑 军t 汪贵斌u 戴文圣u
kt q南京林业大学森林资源与环境学院 南京 utssvz ~ u1浙江林学院林业与生物技术学院 杭州 vttvssl
摘 要 } 以我国银杏主产区 tw个银杏栽培品种为材料 o利用生理生化测定及 ≥°≥≥统计分析对其耐热性进行研
究 ∀结果表明 }持续 z §wx ε 的高温胁迫能够有效区分不同银杏品种耐热性 ~生理生化测定结果的系统聚类与主
成分分析能够对不同银杏栽培品种的耐热性进行有效评价 ∀苏农佛手 !郯城 vss和新村 ty号为热敏感型 o耐热型
较差 o洞庭皇 t号 !郯城马铃 u号和大龙眼为耐热型 o耐热性较强 ∀银杏栽培品种耐热性与核形的相关性不大 ∀
关键词 } 银杏 ~高温胁迫 ~生理生化 ~耐热性
中图分类号 }≥zuu1vn y 文献标识码 } 文章编号 }tsst p zw{{kuss{ltu p ssvx p sw
收稿日期 }ussz p tt p s{ ∀
基金项目 }国家科技支撑计划课题/特种工业原料林培育技术0kussy
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svl ∀
Ηεατ Τολερανχε οφ Φουρτεεν Γινκγο Χυλτιϖαρσ υνδερ Ηεατ Στρεσσ
≤¤² ƒ∏¯¬¤±ªt «¨ ±ª∏±t • ¤±ª∏¬¥¬±u ⁄¤¬• ±¨¶«¨ ±ªu
kt qΧολλεγε οφ Φορεστ Ρεσουρχεσ ανδ Ενϖιρονµεντo Νανϕινγ Φορεστρψ Υνιϖερσιτψ Νανϕινγ utssvz ~
u qΧολλεγε οφ Φορεστ ανδ Βιοτεχηνολογψo Ζηεϕιανγ Φορεστψ Υνιϖερσιτψ Λιν. αν vttvssl
Αβστραχτ } ¤¨··²¯ µ¨¤±¦¨ ²©tw ¬±®ª²¦∏¯·¬√¤µ¶©µ²°·«¨ °¤¬± ³¯¤±·¬±ª¶¨¦·¬²±¬± ≤«¬±¤ º¤¶¬±√¨ ¶·¬ª¤·¨§∏¶¬±ª³«¼¶¬²¯²ª¬¦¤¯
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Κεψ ωορδσ} «¨¤·¶·µ¨¶¶~ Γινκγο βιλοβα~³«¼¶¬²¯²ª¼ ¤±§¥¬²¦«¨ °¬¶·µ¼~«¨¤··²¯ µ¨¤±¦¨
银杏k Γινκγο βιλοβαl为我国特有珍贵经济树种 ∀目前 o以种核为主要用途的银杏优良栽培品种主要分 x
大类 }长子 !佛指 !马铃 !梅核 !园子 ∀银杏喜欢温暖凉爽的气候环境 o热量因子是影响银杏栽培分布的最主
要因子 ∀曹福亮等kusszl调查发现 ws1z ε 为中国银杏主要产区的极端最高气温 ovx ε 以上高温成为银杏光
合作用重要的胁迫因子 o导致新稍生长减缓k张往祥 oussul ∀过度的高温会对银杏枝干造成灼伤 o导致叶缘
焦黄提前落叶 o极大影响银杏叶和种核的生产 ∀近年来 o由于/温室效应0的影响 o全球气温持续升高 o研究高
温对银杏生长发育的影响具有重要意义 ∀关于银杏的抗性生理已有部分研究k赵品福等 oussz ~朱宇林等 o
ussy ~ײ°°¤¶¬ετ αλqoussyl o但有关银杏耐热性的评价研究尚未见报道 ∀笔者对国内银杏主产区 v大类核用
品种部分优良栽培品种的耐热性进行研究 o以期提高银杏种质资源利用效率 o为银杏的资源评价及引种栽培
奠定基础 ∀
t 材料与方法
111 试验材料
所有试验材料均来自江苏省邳州市银杏种质基因库 o包括目前国内银杏主要栽培区的 v大类核用品种
k佛手 !马铃 !梅核l的 tw个名优栽培品种k表 tl ∀
211 试验方法
试验于 ussz年在南京林业大学生物技术楼人工气候室内进行 o{月初选取长势相当 o健壮无病害的当
年生苗移入 2uxs2≥型人工气候室中进行 wx ε 阶段高温胁迫 kz }ss ) tt }ss o室温 ws ε ~tt }ss ) tx }ss o
室温 wx ε ~tx }ss ) t| }ss o室温 ws ε ~t| }ss ) 第 u天早上 z }ss o室温 vx ε l o在处理前通过控制施水 o使盆
中土壤湿度基本保持一致 ∀对不同栽培品种功能叶片进行生理生化测定 ∀相对电导率用电导仪测定法测定
表 1 14 个银杏栽培品种编号 !核形及原产地
Ταβ .1 Χοδε , νυχλευστψπεσ ανδ οριγιν λοχυσ οφ φουρτεεν Γινκγο χυλτιϖαρσ
编号
q
栽培品种
¬±®ª²¦∏¯·¬√¤µ¶
原产地
µ¬ª¬± ²¯¦∏¶
核形
∏¦¯ ∏¨¶·¼³¨¶
编号
q
栽培品种
¬±®ª²¦∏¯·¬√¤µ¶
原产地
µ¬ª¬± ²¯¦∏¶
核形
∏¦¯ ∏¨¶·¼³¨¶
t 洞庭皇 t号⁄²±ª·¬±ª«∏¤±ª2t
江苏农学院
¬¤±ª¶∏ªµ¬¦∏¯·∏µ¨ ≤²¯¯¨ ª¨
佛手
ƒ²¶«²∏ {
大马铃k绿仁l
⁄¤°¤¯¬±ªk¯ |µ¨±l
郯城县花园
∏¤¼∏¤±oפ±¦«¨ ±ª
马铃
¤¯¬±ª
u 洞庭皇 v号⁄²±ª·¬±ª«∏¤±ª2v
江苏农学院
¬¤±ª¶∏ªµ¬¦∏¯·∏µ¨ ≤²¯¯¨ ª¨
佛手
ƒ²¶«²∏ |
郯城 vss
פ±¦«¨ ±ª2vss
郯城县花园
∏¤¼∏¤±oפ±¦«¨ ±ª
马铃
¤¯¬±ª
v 苏农佛手≥∏±²±ª©²¶«²∏
江苏农学院
¬¤±ª¶∏ªµ¬¦∏¯·∏µ¨ ≤²¯¯¨ ª¨
佛手
ƒ²¶«²∏ ts
大龙眼
⁄¤¯²±ª¼¤±
安徽省全椒县
±∏¤±¬¤²o±«∏¬
梅核
¬Ǭ
w 西 u号÷¬¤±ª¬¬2u
延安农委
≠¤±. ¤± ªµ¬¦∏¯·∏µ¨ ≤²°°¬·¨¨
佛手
ƒ²¶«²∏ tt
鸭屁股
≠¤³¬ª∏
吴县洞庭东山镇
⁄²±ª·¬±ª§²±ª¶«¤±o• ∏¬¬¤±
佛手
ƒ²¶«²∏
x 铁马 t号׬¨°¤2t
铁富镇宋庄村
׬¨©∏o≥²±ª½«∏¤±ª
马铃
¤¯¬±ª tu
新村 |号
÷¬±¦∏±2|
郯城县新村
÷¬±¦∏±oפ±¦«¨ ±ª
佛手
ƒ²¶«²∏
y 郯城马铃 t号פ±¦«¨ ±ª°¤¯¬±ª2t
郯城县新村
÷¬±¦∏±oפ±¦«¨ ±ª
马铃
¤¯¬±ª tv
郯城 usu
פ±¦«¨ ±ª2usu
郯城县
פ±¦«¨ ±ª
梅核
¬Ǭ
z 郯城马铃 u号פ±¦«¨ ±ª°¤¯¬±ª2u
郯城县新村
÷¬±¦∏±oפ±¦«¨ ±ª
马铃
¤¯¬±ª tw
新村 ty号
÷¬±¦∏±2ty
郯城县新村
÷¬±¦∏±oפ±¦«¨ ±ª
梅核
¬Ǭ
k舍戈 ot||t ~≤«¨ ±ot|{xl ~丙二醛k⁄l摩尔质量浓度用硫代巴比妥酸显色法测定k中国科学院上海植物生
理研究所 ot|||l ~游离脯氨酸k°µ²l采用磺基水杨酸提取法测定k朱广廉等 ot|{vl ~超氧化物歧化酶k≥⁄l活
性用
×光还原法测定k中国科学院上海植物生理研究所 ot|||l ∀以上测定均重复 v次 ∀数据分析用 ≥°≥≥
ts1s软件 ∀利用测定的生理生化指标数据进行方差分析 !相关性分析 !因子k主成分l分析及聚类分析 o聚类
分析时应用最小方差法进行系统聚类k卢纹岱 ousssl ∀
表 2 高温胁迫下 14 个银杏栽培品种的生理生化指标
Ταβ .2 Πηψσιολογιχαλ ανδ βιοχηεµιχαλινδεξ οφ φουρτεεν Γινκγο χυλτιϖαρσιν τηε ηεατ στρεσσ
品种
编号
²q
相对电
导率
∞¯ ¦¨·µ¬¦¤¯
¦²±§∏¦·¬2
√¬·¼Πh
相对
含水率
¨¯¤·¬√¨
º¤·¨µ
¦²±·¨±·Πh
超氧物
歧化酶
≥∏³¨µ²¬¬§¨
§¬¶°∏·¤¶¨
k≥⁄lΠk±°²¯#
°¬±ptªp tl
丙二醛
¤¯²±§¬¤¯2
§¨«¼§¨
k⁄lΠ
k±°²¯#ªptl
脯氨酸
°µ²¯¬±¨
k°µ²lΠkΛª#
ªptƒ • l
品种
编号
²q
相对电
导率
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√¬·¼Πh
相对
含水率
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超氧物
歧化酶
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丙二醛
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k⁄lΠ
k±°²¯#ªptl
脯氨酸
°µ²¯¬±¨
k°µ²lΠkΛª#
ªptƒ • l
t uu1xw zv1|{ ww1|z t1uv tsz1ss { uv1us zs1{y vs1{s s1x| yu1w{
u u{1{| y|1zz xy1ws t1xv z|1|t | xw1y| xv1y{ {u1|t s1us y{1wt
v v{1ys x{1yw |u1sx t1zz z{1w| ts t|1{u zw1xv us1u| s1yw ttt1{v
w uu1{y y|1y{ vs1vx t1sz x|1{{ tt uu1xu zs1|w wv1tw s1z{ w{1zx
x us1ss y|1sy xt1vz s1zv {u1xt tu us1v| zt1uv zy1|z s1xz yx1wt
y uu1wt zv1zv vx1vz s1yx wy1xu tv t|1sx zt1ut z{1vw s1v| {s1u|
z tz1xs y|1{v vx1{v s1xz ts|1uv tw wv1t{ x{1{z {x1yx t1tv yv1uu
u 结果与分析
211 高温胁迫下 14个银杏品种的耐热性生理生化指标测定
高温胁迫下 otw个银杏栽培品种的相对电导率 !相对含水率 !丙二醛摩尔质量浓度 !游离脯氨酸含量和
超氧化物歧化酶活性如表 u ∀持续高温胁迫后 o不同银杏栽培品种的相对电导率差异较大 o差异极显著k Π
s1stl ∀郯城 vss号相对电导率最高 o为 xw1y| h o其次为新村 ty号kwv1t{ h l ~苏农佛手和洞庭皇 v号相对
较大 o分别为 v{1ys h !u{1{| h ~郯城马铃 u 号相对电导率最低 o仅为 tz1xs h o其次为郯城 usu 号 o为
t|1sx h o相对电导率最高的郯城 vss号为最低的郯城马铃 u号的 v1tv倍 ∀高温胁迫后 o不同银杏栽培品种
的相对含水率差异达到极显著水平k Π s1stl ∀最高为洞庭皇 t号 o达 zv1|{ h o郯城马铃 t号亦较高 o达
zv1zv h o最低郯城 vss号为 xv1y{ h ∀高温胁迫后 o不同银杏栽培品种的超氧化物歧化酶活性的差异极显著
kΠ s1stl ∀其中苏农佛手为最高 o达到 |u1sx ±°²¯#°¬±ptªp t o其次为新村 ty号k{x1yx ±°²¯#°¬±ptªptl ~最
低为大龙眼 o仅为 us1u| ±°²¯#°¬±ptªp t o其次为 西 u号 vs1vx ±°²¯#°¬±ptªp t ∀高温胁迫后 o不同银杏栽培
品种的丙二醛k⁄l摩尔质量浓度的差异达到极显著水平k Π s1stl o栽培品种苏农佛手为最高 o达到 t1zz
±°²¯#ªpt o其次为洞庭皇 v号kt1xv ±°²¯#ªptl o最低为郯城 vss o仅为 s1us ±°²¯#ªpt o其次为郯城 usu o其丙二
yv 林 业 科 学 ww卷
醛为 s1v| ±°²¯#ªpt ∀银杏鲜叶游离脯氨酸含量大龙眼最高为 ttt1{v Λª#ªptƒ • o郯城马铃 u号 !洞庭皇 t号
次之 o分别为 ts|1uv !tsz1ss Λª#ªptƒ • ~最低为郯城马铃 t号达 wy1xu Λª#ªptƒ • !其次为鸭屁股kw{1zx Λª#
ªptƒ • l o方差分析表明 }不同银杏栽培品种的游离脯氨酸含量的差异达到极显著水平k Π s1stl ∀
212 14个银杏品种的耐热性主成分分析
相对电导率 !相对含水率 !丙二醛摩尔质量浓度 !超氧化物歧化酶活性和游离脯氨酸含量 x个指标因子
k主成分l分析结果见表 v ∀第 t主成分对相对电导率和超氧化物歧化酶活性有较大的正载荷 o而同相对含
水率有较大的负载荷 o相关分析表明相对含水率 !相对电导率与超氧化物歧化酶活性呈显著负相关 o相关系
数分别为 p s1|v !p s1zv o相对电导率和超氧化物歧化酶活性两者呈显著正相关 o相关系数为 s1yx ∀第 u主
成分负荷系数绝对值较大的为游离脯氨酸含量 o第 v主成分负荷系数绝对值较大的为丙二醛摩尔质量浓度 ∀
由此可以对 v个因子进行命名 o第 t因子主要包括相对电导率 !超氧化物歧化酶活性和相对含水率 o第 u因
子是游离脯氨酸含量 o第 v因子是丙二醛摩尔质量浓度 ∀其中第 t主因子累积贡献率达 xv1tv| h o第 u主因
子累积贡献率达 ut1xuu h o第 v主因子累积贡献率达 ty1vvx h ∀v个主因子累积贡献率达 |s1||y h ∀根据
有关因子得分系数获得主成分表达式 o进而得到 tw个银杏栽培品种的新变量k表 wl ∀主成分表达式 }主成
分 t s1vzz ≅相对电导率 p s1wsu ≅相对含水率 n s1vvx ≅超氧化物歧化酶活性 p s1szv ≅丙二醛摩尔质量浓
度 n s1ts| ≅游离脯氨酸含量 ~主成分 u s1suv ≅相对电导率 p s1s{ ≅ 相对含水率 n s1sw| ≅ 超氧化物歧化
酶活性 p s1sxx ≅丙二醛摩尔质量浓度 n t1sux ≅游离脯氨酸含量 ~主成分 v p s1sxv ≅相对电导率 p s1s{s
≅相对含水率 n s1svu ≅超氧化物歧化酶活性 n t1st ≅丙二醛摩尔质量浓度 p s1sxx ≅游离脯氨酸含量 ∀
表 3 总方差分解及有关因子得分系数
Ταβ .3 Τοταλ ϖαριανχε εξπλαινεδ ανδ χοµ πονεντ σχορε χοεφφιχιεντ µ ατριξ
主成分因子
°µ¬±¦¬³¤¯
¤±¤¯¼¶¨¶
©¤¦·²µ¶
相关矩阵的特征值 ¤·µ¬¬ ¬¨ª¨ ±√¤¯∏¨ 有关因子得分系数 ≤²°³²±¨ ±·¶¦²µ¨ ¦²¨©©¬¦¬¨±·°¤·µ¬¬
特征值
∞¬ª¨ ±√¤¯∏¨
贡献率
°µ²³²µ·¬²±Πh
累计贡献率
≤∏°∏¯¤·¬√ Π¨h
相对电导率
∞¯ ¦¨·µ¬¦¤¯
¦²±§∏¦·¬√¬·¼
相对含水率
¨¯¤·¬√¨ º¤·¨µ
¦²±·¨±·
超氧物歧化酶
≥∏³¨µ²¬¬§¨
§¬¶°∏·¤¶¨k≥⁄l
丙二醛
¤¯²±§¬¤¯§¨«¼§¨
k⁄l
脯氨酸
°µ²¯¬±¨
k°µ²l
°≤t u1yxz xv1tv| xv1tv| s1vzz p s1wsu s1vvx p s1szv s1ts|
°≤u t1szy ut1xuu zw1yyt s1suv p s1s{s s1sw| p s1sxx t1sux
°≤v s1{tz ty1vvx |s1||y p s1sxv s1s{s s1svu t1sts p s1sxx
°≤w s1v|v z1{yy |{1{yu
°≤x s1sxz t1tv{ tss
213 14个银杏品种的耐热性聚类分析
表 4 14 个银杏栽培品种 3 个因子(主成分)得分的新变量
Ταβ .4 Νεω ϖαριαβλεσ οφ τηρεε χοµ πονεντ σχορεσ οφ φουρτεεν Γινκγο χυλτιϖαρσ
品种编号
²q
主成分 t
°≤t
主成分 u
°≤u
主成分 v
°≤v
品种编号
²q
主成分 t
°≤t
主成分 u
°≤u
主成分 v
°≤v
t x1v|y tsy1wtt t1xus { p u1yxw ys1v{w u1x{w
u ts1vvy z|1yzs v1ssx | vw1uxy zt1tvx s1w{{
v vs1uwu {t1syu v1syu ts p v1xw| tts1sz{ s1sxz
w p u1zzz xz1zxz v1tut tt p s1vt| wy1{{u v1|y|
x x1|uz {t1|{x u1vs{ tu tt1|uy yx1xxy w1sx|
y p w1vt| wv1||z v1|ws tv tv1xuu {s1{xy v1tzu
z u1v|v ts{1xst s1vzw tw u{1ttw yx1ut| u1{uy
利用最小方差法 o对 tw个银杏栽
培品种高温胁迫下测定的相对电导
率 !相对含水率 !超氧化物歧化酶活
性 !丙二醛摩尔质量浓度和游离脯氨
酸含量进行聚类分析k图 tl o结合利
用主成分表达式得到的 tw个银杏栽
培品种 v个因子k主成分l得分的新变
量k表 wl o将 tw个银杏栽培品种分为
w类 o即热敏感 !热中等敏感 !中等耐
热和较耐热 w个等级 o耐热性依次增
强 ∀热敏感型包括苏农佛手 !郯城 vss !新村 ty号 o耐热性最差 ~热中等敏感型包括洞庭皇 v号 !铁马 t号 !新
村 |号 !郯城 usu ~中等耐热型包括 西 u号 !大马铃k绿仁l !郯城马铃 t号 !鸭屁股 ~耐热型包括洞庭皇 t
号 !郯城马铃 u号 !大龙眼 o耐热性最强 ∀
v 讨论
银杏喜温暖凉爽的气候环境 o试验中 tw个银杏栽培品种分属于佛手 !马铃 !梅核 v大类核形品种 o经过 z
§!wx ε 高温胁迫 o不同栽培品种表现耐热性差异 ∀如高温胁迫使银杏的膜透性增加 o相对电导率较大的栽
培品种耐热性较差 ~叶片相对含水率的变化可以部分反映植物抗热能力k¨√¬·ot||sl o高温胁迫后 o相对含
zv 第 tu期 曹福亮等 }高温胁迫下 tw个银杏品种的耐热性
图 t tw个银杏栽培品种耐热性聚类分析树状图
ƒ¬ªqt ≤¯ ∏¶·¨µ§¨±§µ²ªµ¤° ²©«¨¤··²¯ µ¨¤±¦¨ ²©©²∏µ·¨ ±¨
¬±®ª²¦∏¯·¬√¤µ¶
水率越低说明银杏栽培品种耐热性越差 ~丙二醛摩尔质量
浓度的高低与植物在逆境中的受伤害程度成正相关k周智
彬等 oussx ~ ¯¬ετ αλqoussxl o高温胁迫后 o丙二醛摩尔质量
浓度越高说明银杏栽培品种耐热性越差 ~高温胁迫自由基
产生和超氧化物歧化酶等抗氧化酶清除自由基的平衡被打
破 o产生脂质过氧化 o积累自由基产物丙二醛k马晓娣等 o
ussw ~⁄¤¶«¨ ®ot|{tl ∀脯氨酸被认为是植物逆境胁迫的产
物 o在逆境胁迫下植物体内游离脯氨酸积累是一个普遍现
象k赵福庚等 ot|||l o高温胁迫后脯氨酸含量越高说明品种
耐热性越强 ∀试验所选生理生化指标均为耐热性鉴定中得
到普遍认可的k马晓娣等 oussw ~ ¯ °¨ ¶¨¯°¤±¬ ετ αλqoussyl o
经方差分析具有差异显著性 o能够有效区分不同茶花品种
耐热性 o但不同生理生化指标所测得结果不尽一致 ∀通过
应用 ≥°≥≥统计分析方法 o将不同生理生化指标测定结果进
行系统聚类 o结合耐热性主成分分析 o综合考虑各种因素 o
有效减少单一指标的试验误差 ∀
银杏核用品种以种核为主要用途 o依据核形系数k种核长Π种核宽l可以将其分为 x个类型k何风仁 o
t|{| ~郭善基 ot||vl ∀其中核形系数在 t1xs ∗ t1zx o呈长卵形为佛指 o核形系数在 t1vx ∗ t1xs o呈广卵形为马
铃 o核形系数在 t1tx ∗ t1vx o呈近广椭圆形为梅核 otw个银杏栽培品种耐热性主成分分析及聚类分析表明 }
就核形与耐热性关系而言 o耐热性最强的 v个银杏栽培品种洞庭皇 t号 !郯城马铃 u号 !大龙眼分别为佛手 !
马铃和梅核 o而耐热性最差的银杏栽培品种郯城 vss !新村 ty号和苏农佛手分别为马铃 !梅核和佛手 ov大类
核形品种都在耐热和热敏的银杏栽培品种中有分布 ∀可见 o银杏栽培品种耐热性与其核形相关性不大 ∀银
杏耐热性与其他形态特征是否具有一定相关性 o有待进一步研究 ∀
参 考 文 献
曹福亮 qussz1中国银杏志 q北京 }中国林业出版社 q
郭善基 qt||v1 中国果树志#银杏卷 q北京 }中国林业出版社 ox{ p ys q
何风仁 qt|{|1 银杏的栽培 q南京 }江苏科学技术出版社 q
卢纹岱 qusss1 ≥°≥≥ ts1s ©²µº¬±§²º¶统计分析 q北京 }电子工业出版社 q
马晓娣 o彭惠茹 o汪 矛 o等 qussw1 作物耐热性评价 q植物学通报 outkwl }wtt p wt{ q
舍 戈 qt||t1 未结冰低温胁迫下小麦叶细胞质膜透性的变化进程及性质 q植物生理学报 otzkvl }u|x p vss q
赵福庚 o刘友良 qt|||1 胁迫条件下高等植物体内 °µ²代谢及调节的研究进展 q植物学通报 otykxl }xws p xwy q
张往祥 qussu1环境因子对银杏光合作用的影响 q南京 }南京林业大学硕士学位论文 q
赵品福 o潘寿根 o方旭平 o等 qussz1 气温对银杏生长量影响的调查研究 q林业实用技术 oy }y p z q
朱宇林 o曹福亮 o汪贵斌 o等 qussy1 ≤§!°¥胁迫对银杏光合特性的影响 q西北林学院学报 outktl }wz p xs q
朱广廉 o邓兴旺 o左卫能 qt|{v1 植物体内游离氨基酸的测定 q植物生理学通讯 otyktl }vx p v{ q
中国科学院上海植物生理研究所 qt|||1 上海市植物生理学会 q现代植物生理学实验指南 q北京 }科学出版社 q
周智彬 o徐新文 o杨兰英 qussx1 三种固沙植物对高温胁迫的生理响应及其抗热性研究 q干旱区地理 ou{kyl }{uw p {u| q
¯¬
o∞∏±2²² o¨ 2¨≠²¨ ∏³° qussx1∞©©¨¦·¶²©·¨°³¨µ¤·∏µ¨ ²± ²¬¬§¤·¬√¨¶·µ¨¶¶§¨©¨ ±¶¨ ¶¼¶·¨°¶o¯¬³¬§³¨µ²¬¬§¤·¬²± ¤±§ ¬¯³²¬¼ª¨ ±¤¶¨ ¤¦·¬√¬·¼¬± °«¤¯¤¨ ±²³¶¬¶q
°¯¤±·°«¼¶¬²¯²ª¼ ¤±§
¬²¦«¨ °¬¶·µ¼owv }utv p uuv q
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