全 文 ：第 vz卷 第 u期
u s s t年 v 月
林 业 科 学
≥≤Œ∞‘׌„ ≥Œ∂ „∞ ≥Œ‘Œ≤„∞
∂²¯1vz o‘²1u
¤µqou s s t
板栗优良品种k无性系l苗木分子标记鉴别研究 3
翁尧富tl 陈 源ul 赵勇春wl
k浙江省林业厅林木种苗站 杭州 vtssusl
郑康乐vl
k中国水稻研究所 杭州 vtsssyl
黄少甫xl
k中国林业科学研究院亚热带林业研究所 富阳 vttwssl
摘 要 } 利用 • „°⁄标记对浙江省林木良种审定委员会审定k认定l和通过省级鉴定的 {个板栗品种及无性
系进行指纹分析 o鉴别出各板栗品种k无性系l ∀实验过程中对 y{w个随机寡核苷酸引物进行了重复筛选 o经
筛选共获得 |个稳定的 • „°⁄标记 o构建了板栗的 ⁄‘„指纹图谱 ∀经过大量的实验 o确定了鉴别板栗优良品
种k无性系l的较为理想的实验程序 o获得了 • „°⁄良好的重复性 o建立了较完整的板栗 • „°⁄分析的技术体
系 o用大田苗进行初步验证 o结果可靠 ∀
关键词 } 板栗 o品种k无性系l鉴别 o随机扩增多态性 ⁄‘„k• „°⁄l o⁄‘„指纹图谱
收稿日期 }usss2su2tw ∀
基金项目 }浙江省科委重点攻关课题 o项目编号 |yttsuts{ ∀
3 陈 源为执笔人 ∀tl !ul !vl !wl !xl为作者顺序 ∀参加研究工作的还有余杭市长乐林场张建忠 ∀
∆ΝΑ ΦΙΝΓΕΡΠΡΙΝΤΙΝΓ ΟΦ ΧΑΣΤΑΝΕΑ ΜΟΛΛΙΣΣΙΜΑ ΕΛΙΤΕ
ς ΑΡΙΕΤΨ kΧΛΟΝΕl ΣΕΕ∆ΛΙΝΓΣ
• ±¨ª ≠¤²©∏tl ≤«¨ ± ≠∏¤±ul «¤² ≠²±ª¦«∏±wl
k Σεεδ ανδ Σεεδλινγ Στατιον οφ Ζηεϕιανγ Φορεστρψ ∆επαρτµεντ Ηανγζηου vtssusl
«¨ ±ªŽ¤±ª¯ v¨l
kΧηινα Νατιοναλ Ριχε Ρεσεαρχη Ινστιτυτε Ηανγζηου vtsssyl
‹∏¤±ª≥«¤²©∏xl
k Συβτροπιχαλ ΦορεστρψΙνστιτυτε o ΧΑΦ Φυψανγ vttwssl
Αβστραχτ} • „°⁄) ) ) ¥¤¶¨§©¬±ª¨µ³µ¬±·¬±ª º¤¶¦¤µµ¬¨§²∏·©²µ{ √¤µ¬¨·¬¨¶¤±§¦¯²±¨ ¶²© Χαστανεα µολλισσιµα º«¬¦««¤§
¥¨ ±¨ ¤³³µ²√¨ §¥¼·«¨ «¨­¬¤±ªŒ±¶³¨¦·¬²± ≤²°°¬·¨¨²©≥∏³¨µ¬²µ×µ¨¨≥³¨¦¬¨¶q∞¤¦«²©·«¨ √¤µ¬¨·¬¨¶k¦¯²±¨ ¶l º¤¶¬§¨±·¬©¬¨§
¥¼©¬±ª¨µ³µ¬±·¶q‘¬±¨ • „°⁄ °¤µ®¨µ¶º¨ µ¨ ²¥·¤¬±¨ §©µ²°µ¨³¨¤·¨§¶¦µ¨ ±¨¬±ª²©y{wµ¤±§²° ²¯¬ª²±∏¦¯¨ ²·¬§¨ ³µ¬°¨ µ¶¤±§⁄‘„
©¬±ª¨µ³µ¬±·¶º¨ µ¨ °¤§¨ ©²µ¤¯¯·«¨ ∏¶¨§√¤µ¬¨·¬¨¶k¦¯²±¨ ¶l q≥·¤¥¯¨¤°³¯¬©¬¦¤·¬²± º¤¶²¥·¤¬±¨ §·«µ²∏ª«°²§¬©¬¦¤·¬²± ²© ¬¨³¨µ¬2
°¨ ±·¤¯ ¦²±§¬·¬²±¶¤±§¤¦²°³¯ ·¨¨·¨¦«±¬¦¤¯ ¶¼¶·¨° º¤¶ ¶¨·¤¥¯¬¶«¨§©²µ©¬±ª¨µ³µ¬±·¬±ª²© Χαστανεα µολλισσιµαq°µ¨ ¬¯°¬±¤µ¼µ¨2
¶∏¯·¶©²µ√¨ µ¬©¬¦¤·¬²± ²©¦²°°¨ µ¬¦¬¤¯ ¶¨ §¨¬¯¬±ª¶¶«²º¨ §·«¤··«¨¶¨ ©¬±ª¨µ³µ¬±·¶º¨ µ¨ µ¨ ¬¯¤¥¯¨q
Κεψ ωορδσ} Χαστανεα µολλισσιµαo∂¤µ¬¨·¼ k¦¯²±¨ l ¬§¨±·¬©¬¦¤·¬²±o •¤±§²° ¤°³¯¬©¬¨§³²¯¼°²µ³«¬¶°¬¦⁄‘„ o⁄‘„ ©¬±ª¨µ2
³µ¬±·¬±ª
板栗是我国特产 o它是我国利用最早的经济树种之一 ∀近年来 o我省板栗发展迅速 o板栗苗需求量
很大 o由于板栗苗采用嫁接繁殖 o落叶后从外形上很难区分各品种k无性系l ∀一些不法分子乱用接穗或
不嫁接 o甚至砍一刀形成愈伤组织假冒嫁接苗等手段迷惑买主 ∀由于板栗生产周期较长 o待结果时发现
品种不真实 o已给买方造成了巨大的经济损失 ∀因此 o板栗品种k无性系l苗木的分子标记鉴别已成为生
产上的迫切需要 ∀随着分子生物学的发展 o分子标记技术为板栗品k无性系l的鉴别提供了一种有力的
工具 ∀由于在大部分林木种及种以下的不同层次上均存在着明显的遗传差异 o因此总能找到一些特殊
的而又不受发育阶段或环境条件影响的遗传特征 ∀ • „°⁄标记可以直接从基因水平上研究板栗的遗传
变异 o从而对品种或无性系加以确切的鉴别 ∀本研究选用 {个板栗品种k无性系l o利用 • „°⁄技术构建
其基因组指纹图谱 o并有效地鉴别板栗品种k无性系l ∀
t 材料和方法
111 材料
实验材料为浙江省诸暨市林业科学研究所采集的短刺板红和长刺板红 o浙江省桐庐县板栗研究所
采集的石丰2xu !金丰2wz o桐选 wv号 !桐选 vu号 !三门2w和江山2t ∀短刺板红和长刺板红为浙江省林木
良种委员会审定的品种 o石丰2xu和金丰2wz为浙江省林木良种委员会认定的品种 o桐选 wv号和桐选 vu
号为浙江省林木良种委员会认定的无性系 o三门2w和江山2t为通过省级鉴定的无性系 ∀其特性见表 t ∀
实验以板栗冬芽为材料 ∀每个品种k无性系l选取 v个样品 o所用的随机引物购自 ’°¨ µ²±公司 oפ´ 酶购
自中国农业大学农业生物技术国家重点实验室 o§‘×°购自上海生物工程公司 ∀
表 1 板栗品种(无性系)的特性
Ταβ .1 Χηαραχτεριστιχσ οφ Χαστανεα µολλισσιµα ϖαριετιεσ(χλονεσ)
品种k无性系l∂¤µ¬¨·¬¨¶k¦¯²±¨ ¶l 特性 ≤«¤µ¤¦·¨µ¬¶·¬¦¶
短刺板红 ⁄∏¤± ¦¬¥¤± «²±ª

适应性强 o早熟 !高产 o果实大而均一 o宜加工 ∀ •¬§¨ ¤§¤³·¤¥¬¯¬·¼ o¨¤µ¯¼ °¤·∏µ¬·¼o«¬ª«¼¬¨ §¯o¯¤µª¨ ±∏·¶
º¬·«∏±¬©²µ° ¶¬½¨ o¶∏¬·¤¥¯¨©²µ³µ²¦¨¶¶¬±ªq
长刺板红 ≤«¤±ª¦¬¥¤± «²±ª

适应性强 o高产 o果实大而均一 o宜加工 o耐贮藏 ∀ •¬§¨ ¤§¤³·¤¥¬¯¬·¼o«¬ª«¼¬¨ §¯o¯¤µª¨ ±∏·¶º¬·«∏±¬©²µ°
¶¬½¨ o¶∏¬·¤¥¯¨©²µ³µ²¦¨¶¶¬±ªo¶∏¬·¤¥¯¨©²µ¶·²µ¤ª¨ q
金丰2wz ¬± ©¨ ±ª2wz 早熟 o果实大 o蛋白质含量高 ∀ ∞¤µ¯¼ °¤·∏µ¬·¼ o¯¤µª¨ ±∏·¶o«¬ª«³µ²·¨¬± ¦²±·¨±·q
石丰2xu ≥«¬©¨ ±ª2xu 糖份高 ∀ ‹¬ª«¶∏ª¤µ¦²±·¨±·q
桐选 wv号 ײ±ª¬∏¤±2wv 果实较大 o耐贮藏 o糖份较高 ∀¤µª¨µ±∏·¶o¶∏¬·¤¥¯¨©²µ¶·²µ¤ª¨ o«¬ª«¨µ¶∏ª¤µ¦²±·¨±·q
桐选 vu号 ײ±ª¬∏¤±2vu 果糯性好 o耐贮藏 ∀ Š²²§ª¯∏·¬±²∏¶o¶∏¬·¤¥¯¨©²µ¶·²µ¤ª¨ q
三门2w ≥¤± ° ±¨2w 糖份高 o味道好 o耐贮藏 ∀ ‹¬ª«¶∏ª¤µ¦²±·¨±·oª²²§·¤¶·¨o¶∏¬·¤¥¯¨©²µ¶·²µ¤ª¨ q
江山2t ¬¤±ª¶«¤±2t 果粒适中 o糯性好 ∀ ‘∏·¶º¬·« ° §¨¬∏° ¶¬½¨ oª²²§ª¯∏·¬±²∏¶q
112 方法
t1u1t 板栗 ⁄‘„提取纯化 板栗 ⁄‘„提取参考 ∏µµ¤¼等的方法 o取板栗冬芽k剥去苞片l于液氮中研
磨成粉末 o用 ≤ׄ…提取液提取 o然后用等体积的饱和酚 !氯仿和异戊醇抽提两次 o无水乙醇沉淀 ⁄‘„ o
最后提取的 ⁄‘„溶于 ×∞缓冲液中 ∀
t1u1u • „°⁄分析 本研究参考了标准的方法 o结合板栗的特点 o建立了板栗 • „°⁄分析的技术体系 ∀
扩增反应在 us ˏ的体系中进行 o其中含有 tss °°²¯Π×µ¬¶2‹≤¯ oxss °°²¯ΠŽ≤¯ ous °°²¯Πª≤¯ u os1st h
Š¨ ¤¯·¬± o§‘×°为 tss Λ°²¯Πou ˏ°µ¬°¨ µow1{ ˏ§¬ov ˏ⁄‘„ os1u Λ×¤´ 酶 ∀扩增反应在 °¨ µ®¬±2∞¯²°¨ µ|yss
型 ⁄‘„扩增仪上进行 ∀实验程序为 }首先在 |w ε 预变性 u °¬±o再按 |w ε vs ¶¨¦!ws ε vs ¶¨¦!zu ε t1x
°¬±扩增 v{个循环 o最后在 zu ε 延伸 z °¬±∀扩增产物在 t1s h琼脂糖凝胶中电泳 o经 ∞…染色后在紫外
灯下观察照相 ∀每个品种k无性系l设 v个重复 o个别情况因为泳道不够 o只有 u个重复 ∀
u 结果分析
211 • „°⁄扩增结果
对 y{w个 • „°⁄随机引物的初筛和复筛 o共获得 y个有稳定多态且带型清晰的引物 o共扩增出 |个
多态片段 o片段大小在 xss¥³至 txss¥³之间变化 o平均每个引物产生 t1x个多态片段 ∀y个多态引物名
称 !碱基序列及其标记名称见表 u ~各品种k无系性l的特异性的 • „°⁄扩增谱带见图 t ∗ x ∀
212 板栗品种(无性系)的鉴别
u1u1t 用 t个引物可以鉴别的品种k无性系l }长刺板红 !三门2w和桐选 vu号有各自特异的分子标记 ∀
在引物 ’°Œy的指纹图谱中 o长刺板红比其它品种k无性系l多 t条约 {xs ¥³的带 o即特异标记为 ’°Œy2
{xs ∀同样在引物 ’°Œy的指纹图谱中 o三门2w比其它品种k无性系l多 t条约 y|s ¥³的带 o即它的特异标
ux 林 业 科 学 vz卷
表 2 多态引物名称及标记名称
Ταβ .2 Πολψµορπηισµιχ πριµερσ ανδ µαρκερσ
引物名称
°µ¬°¨ µ
碱基序列
…¤¶¨ ¶¨ ∏´¨ ±¦¨
标记序号
‘∏°¥¨µ²© °¤µ®¨µ¶
标记名称
¤µ®¨µ¶
’°⁄us „≤≤≤ŠŠ×≤„≤ t ’°⁄us ) zxs
’°Œy „„ŠŠ≤ŠŠ≤„Š u ’°Œy ) y|s
v ’°Œy ) {xs
’°≠tz Š„≤Š×ŠŠ×Š„ w ’°≠tz ) ttxs
’°ts ≤≤Š„≤„„„≤≤ x ’°ts ) yvs
y ’°ts ) zxs
z ’°ts ) tsss
’°„Žtz ≤„Š≤ŠŠ×≤„≤ { ’°„Žtz ) {xs
’°„Žus ׊„׊Š≤Š×≤ | ’°„Žus ) ttss
记为 ’°Œy2y|s ∀在引物 ’°ts的指纹图谱
中 o桐选 vu号比其它品种k无性系l少 t条
约 tsss ¥³ 的带 o即它的特异标记为
’°ts2tsss ∀特异分子标记鉴别品种见表
v ∀
u1u1u 用 u个引物组合可以鉴别的品种
k无性系l }三门2w !桐选 wv号和桐选 vu号
在引物 ’°ts的指纹图谱中比其它品种
k无性系l多 t条约 yvs ¥³的带 o而桐选 vu
号在同种引物 ’°ts 中有特异标记
’°ts2tsss o可以区别于三门2w和桐选 wv
号 o但三门2w可以利用它在 ’°Œy指纹图谱
图 t 板栗的 • „°⁄指纹图谱k引物 ’°≠tzl
ƒ¬ªqt • „°⁄©¬±ª¨µ³µ¬±·¶²© Χαστανεα µολλισσιµα k°µ¬°¨ µ’°≠tzl
图 u 板栗的 • „°⁄指纹图谱k引物 ’°„Žtzl
ƒ¬ªqu • „°⁄©¬±ª¨µ³µ¬±·¶²© Χαστανεα µολλισσιµα k°µ¬°¨ µ’°„Žtzl
图 v 板栗的 • „°⁄指纹图谱k引物 ’°tsl
ƒ¬ªqv • „°⁄©¬±ª¨µ³µ¬±·¶²© Χαστανεα µολλισσιµα k°µ¬°¨ µ’°tsl
vx 第 u期 翁尧富等 }板栗优良品种k无性系l苗木分子标记鉴别研究
图 w 板栗的 • „°⁄指纹图谱k引物 ’°„Žusl
ƒ¬ªqw • „°⁄©¬±ª¨µ³µ¬±·¶²© Χαστανεα µολλισσιµα k°µ¬°¨ µ’°„Žusl
图 x 板栗的 • „°⁄指纹图谱k引物 ’°⁄usl
ƒ¬ªqx • „°⁄©¬±ª¨µ³µ¬±·¶²© Χαστανεα µολλισσιµα k°µ¬°¨ µ’°⁄usl
图 t ∗ x中第 t ∗ v条泳道为长刺板红 ~第 w ∗ y条泳道为石丰2xu ~第 z ∗ |条泳道为三门2w ~第 ts ∗ tu条泳道为酮选 wv号 ~第 tv ∗ tx条
泳道为江山2t ~第 ty ∗ t{条泳道为金丰2wz ~第 t| ∗ ut条泳道为短刺板红 ~第 uu ∗ uvkuwl条泳道为酮选 vu号 ∀图 t ∗ x中  是分子量
标记 ∀ ƒ¬ªt ∗ x o¤±¨ ¶t ∗ v }≤«¤±ª¦¬¥¤±«²±ª~¤±¨ ¶w ∗ y }≥«¬©¨ ±2xu ~¤±¨ ¶z ∗ | }≥¤± °¨ ±2w ~¤±¨ ¶ts ∗ tu }ײ±ª¬∏¤±2wv ~¤±¨ ¶tv ∗ tx }¬¤±ª¶«¤±2
t ~¤±¨ ¶ty ∗ t{ }¬±©¨ ±2wz ~¤±¨ ¶t| ∗ ut }⁄∏¤± ¦¬¥¤±«²±ª~¤±¨ ¶uu ∗ uvkuwl }ײ±ª¬∏¤±2vu q }²¯ ¦¨∏¯¤µº¨ ¬ª«·q
中的特异分子标记 ’°Œy2y|s区别于桐选 wv号 o所以引物组合 ’°tsΠ’°Œy可以鉴别桐选 wv号 ∀长刺板
红 !三门2w !桐选 wv号和短刺板红在 ’°≠tz的指纹图谱中比其它品种k无性系l多 t条约 ttxs ¥³的带 o
而长刺板红 !三门2w和桐选 wv号在 ’°„Žtz的指纹图谱中比其它品种k无性系l少 t条约 {xs ¥³的带 o
所以引物组合 ’°≠tzΠ’°„Žtz可以鉴别短刺板红 ∀石丰2xu !江山2t和金丰2wz在 ’°ts的指纹图谱中
比其它品种k无性系l多 t条约 zxs ¥³的带 o而在 ’°„Žus的指纹图谱中比其它品种k无性系l少 t条约
ttss ¥³的带 ~但石丰2xu !江山2t和短刺板红在 ’°⁄us的指纹图谱中比其它品种k无性系l多 t条约 zxs
¥³的带 o所以引物组合 ’°tsΠ’°⁄us可以鉴别金丰2wz !短刺板红及k石丰2xu !江山2tl o另一组引物组合
’°„ŽusΠ’°⁄us也可以鉴别金丰2wz !短刺板红及k石丰2xu !江山2tl ∀石丰2xu与江山2t的主要谱带完全
相同 o虽然经过 yss多个引物的筛选仍未能分开 o可能这两个品种是同物异名 ∀
引物组合鉴别品种见表 w ∀
213 验证结果
用当地的大田苗k每个品种或无性系 us株l进行初步验证 o结果显示 o短刺板红苗中有 t{株苗的图
谱与标准图谱一致 o准确率为 |s h ~长刺板红苗中 tz株苗的图谱与标准图谱一致 o准确率为 {x h ~金丰2
wz !桐选 wv号 !桐选 vu号 !三门2w !石丰2xu和江山2t各有 tz株苗 !ty株苗 !ty株苗 !t{株苗和 tz株苗的
图谱与标准图谱一致 o准确率分别为 {x h !{s h !{s h !|s h !{x h ∀因此 o{个板栗品种k无性系l大田苗
初步验证准确率在 {s h ∗ |s h之间 o表明研究结果可靠 ∀
wx 林 业 科 学 vz卷
表 3 特异分子标记鉴别品种
Ταβ .3 Ιδεντιφψινγ ϖαριετιεσ υσινγ σπεχιφιχ µολεχυλαρ µαρκερσ
品种k无性系l名称
∂¤µ¬¨·¬¨¶k¦¯²±¨ ¶l
引物名称
°µ¬° µ¨
多态性
°²¯¼°²µ³«¬¶°¬¦
特异分子标记
≥³¨¦¬©¬¦°²¯ ¦¨∏¯¤µ°¤µ®¨µ¶
长刺板红 ’°Œy 多一条带 ’°Œ) {xs
≤«¤±ª¦¬¥¤± «²±ª „± ¤§§¬·¬²±¤¯ ¥¤±§
三门2w ’°Œy 多一条带 ’°Œy ) y|s
≥¤± ° ±¨2w „± ¤§§¬·¬²±¤¯ ¥¤±§
桐选 vu号 ’°ts 少一条带 ’°ts ) tsss
ײ±ª¬∏¤±2vu ²¶¶²©¤¥¤±§
表 4 引物组合鉴别品种
Ταβ .4 Ιδεντιφψινγ ϖαριετιεσ υσινγ πριµερ χοµβινατιονσ
品种k无性系l名称
∂¤µ¬¨·¬¨¶k¦¯²±¨ ¶l
引物组合
°µ¬°¨ µ¶¦²°¥¬±¤·¬²±¶
桐选 wv号 ’°tsΠ’°Œy
ײ±ª¬∏¤±2wv
金丰2wz ’°tsΠ’°⁄us
¬± ©¨ ±ª2wz ’°„ŽusΠ’°⁄us
短刺板红 ’°≠tzΠ’°„Žtz
⁄∏¤± ¦¬¥¤± «²±ª ’°tsΠ’°⁄us
’°„ŽusΠ’°⁄us
石丰2xu o江山2t ’°tsΠ’°⁄us
≥«¬©¨ ±ª2xu o¬¤±ª¶«¤±2t ’°„ŽusΠ’°⁄us
v 结果讨论
本研究的结果表明 o在板栗品种k无性系l间存在着广泛的遗传多态性 ∀利用 • „°⁄标记可以把亲
缘关系很近的浙江省 {个板栗主栽品种k无性系l的基因型区分开来 o根据 • „°⁄标记遗传差异达到了
鉴别板栗品种k无性系l苗木的目的 o具有重要的实用价值 ∀在现有的基础上 o如果再筛选并增加某些板
栗的特异性谱带 o则会进一步提高板栗品种k无性系l鉴别的准确率 ∀
本研究针对当前林木种苗工作的实际 o采用 • „°⁄技术进行浙江省主要经济品种板栗的 ⁄‘„分子
标记鉴别研究 o为今后开展板栗新品种k无性系l及其它名特优经济林木 !花卉等品种鉴别和新品种保护
打下了良好的基础 ∀
• „°⁄技术应用于品种k无性系l的鉴别及指纹图谱的构建 o不仅具有快速 !方便 !直观等特点 o而且
成本低 o为板栗苗木的鉴别提供了一个有效 !可靠的方法 o拓宽了种苗检验的内容 o为修订新的种苗检验
标准提供了一条崭新的途径 ∀
利用分子标记不但能对板栗进行苗期鉴别 o避免假苗坑农 o同时为选育新品种提供从 ⁄‘„水平上
进行分析的一种高新技术 ∀
参 考 文 献
陈 洪 o朱立煌 o徐吉臣等 1 • „°⁄标记构建水稻分子连锁图 1 植物学报 ot||x ovz }yzz ∗ y{w
郭旺珍 o张天真 o潘家驹等 1我国棉花主栽品种的 • „°⁄指纹图谱研究 1 农业生物技术学报 ot||y owkul }tu| ∗ tvw
惠东威 o陈受宜 1 • „°⁄技术及其应用 1 生物工程进展 ot||u otukyl }t ∗ x
王冰冰 o孙宝启 1 • „°⁄技术进展及其在小麦遗传育种中的应用k综述l1 农业生物技术学报 ot||z oxkvl }uuz ∗ uvu
闫文昭 o王大一 o李晋涛等 1uu个甘薯品种k系l遗传背景的 • „°⁄图谱分析 1 农业生物技术学报 ot||z oxktl }ws ∗ wy
尹佟明 o朱立煌 o黄敏仁等 1利用 • „°⁄标记和单株树大配子体构建马尾松的分子标记连锁图谱 1 植物学报 ot||z ov|kzl }t ∗ y
尹佟明 o韩正敏 o黄敏仁等 1林木 • „°⁄分析及实验条件的优化 1 南京林业大学学报 ot|||
张超良 o孙世孟等 1 • „°⁄技术在 tu个玉米骨干自交系快速鉴定中的应用 1 作物学报 ot||{ ouwkyl }zt{ ∗ zuu
ײµµ¨¶„  qŒ§¨±·¬©¼¬±ªµ²¶¨ ¦∏¯·¬√¤µ¶∏¶¬±ªµ¤±§²° ¤°³¯¬©¬¨§³²¯¼°²µ³«¬¦⁄‘„ °¤µ®¨µ¶q‹²µ·q≥¦¬¨±¦¨ ot||v ou{kwl }vvv ∗ vvw
²§«¬ „ o≠¨Š ‘o• ¨¨ §¨ ± ‘ƒ ¤±§• ¬¨¶¦«…Œq„ ≥¬°³¯¨¤±§∞©©¬¦¬¨±· ·¨«²§©²µ⁄‘„ ∞¬·µ¤¦·¬²±©µ²° Šµ¤³¨ √¬±¨ ≤∏¯·¬√¤µ¶¤±§√¬·¬¶≥³¨¦¬¨¶q°¯ ¤±·²¯ q
…¬²¯ q• ³¨qot||w otuktl }y ∗ tv
∏µµ¤¼  Š ¤±§×«²°³¶²± • ƒ q•¤³¬§¬¶²¯¤·¬²± ²©«¬ª« °²¯ ¦¨∏¯¤µº ¬¨ª«·³¯¤±·⁄‘„ q‘∏¦q„¦¬§¶• ¶¨ot|{s o{ }wvut ∗ wvux
•«²±§¤q‹²±¨ ¼¦∏·o…µ∏±² • q≥ q≥²¥µ¤¯ o°¤∏¯ Ž¨¬° o¤±§¤° ¶¨∞Œµ√¬±¨ q„ •¤³¬§⁄‘„ ∞¬·µ¤¦·¬²±  ·¨«²§©²µ≥∏ª¤µ¦¤±¨ ¤±§¬·¶• ¨¯¤·¬√¨ ¶q°¯¤±·²¯ q…¬²¯ q
• ³¨qot||u otsktl }yy ∗ zu
≥∏¨ °²µ¨¥¶®¬oŠµ¤±·…¤¬¯¨ ¼ ¤±§ …¨ µ±¤µ§ • …¤∏° q²§¬©¬¦¤·¬²± ²©¤ ≤ׄ… ⁄‘„ ∞¬·µ¤¦·¬²± °µ²·²¦²¯ ©²µ°¯¤±·¶≤²±·¤¬±¬±ª ‹¬ª«°²¯¼¶¤¦¦«¤µ¬§¨ ¤±§°²¯¼2
³«¨ ±²¯ ≤²°³²±¨ ±·¶q°¯¤±·²¯ q…¬²¯ q• ³¨qot||z otxktl }{ ∗ tx
• ¨¨ §¨ ± ‘ƒ o¤°¥ • ≤ qŒ§¨±·¬©¬¦¤·¬²± ²©¤³³¯¨¦∏¯·¬√¤µ¶¥¼¬¶²½¼°¨ ³«¨ ±²·¼³¨¶qq„°¨ µq≥²¦q‹²µ·q≥¦¬qot|{x otts }xs| ∗ xtx
xx 第 u期 翁尧富等 }板栗优良品种k无性系l苗木分子标记鉴别研究