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Molecular Cloning and Expression Analysis of the Flowering-regulating Transcription Factor PrSOC1 Gene in Tree Peony

牡丹开花调控转录因子基因PrSOC1的克隆与表达分析



全 文 :园 艺 学 报 , ( ): – 2014 41 11 2259 2267 http: // www. ahs. ac. cn
Acta Horticulturae Sinica E-mail: yuanyixuebao@126.com
收稿日期:2014–05–25;修回日期:2014–09–04
基金项目:国家‘863’计划项目(2011AA10020703);中国农业科学院科技创新工程项目;国家公益性行业(农业)科研专项(201203071);
中国农业科学院院所基金项目(2014JB02-001)
牡丹开花调控转录因子基因PrSOC1 的克隆与
表达分析
刘传娇 1,2,王顺利 1,薛璟祺 1,朱富勇 1,任秀霞 1,李名扬 2,张秀新 1,*
(1 中国农业科学院蔬菜花卉研究所,农业部园艺作物生物学与种质创制重点实验室,北京 100081;2 西南大学园艺
园林学院,重庆市花卉工程技术研究中心,重庆 400716)
摘 要:以紫斑牡丹(Paeonia rockii)花芽为试验材料,采用 RT-PCR 的方法克隆得到 1 个牡丹开花
调控的重要转录因子 SUPPRESSOR OF OVEREXPRESSION OF CONSTANS1(SOC1)基因的同源基因
PrSOC1,其 cDNA 开放阅读框长度为 678 bp,3′非编码区为 421 bp,编码 225 个氨基酸,GenBank 登录
号为 KJ427808。序列比对和结构域分析表明,此蛋白包含典型的 MADS-box 和 K-box 结构域,C 末端还
含有一个保守性很高的基序—SOC1 MOTIF,与葡萄中的 SOC1 蛋白最为相似。系统进化树分析表明,
PrSOC1 与葡萄 VvSOC1 的亲缘关系最近,属于 MADS 基因家族中的 SOC1/TM3 亚家族。半定量 RT-PCR
表明,PrSOC1 基因在紫斑牡丹花芽中的表达量最高,根、茎、叶片中次之,种子中最少。在不同品种牡
丹的花芽中,PrSOC1 和其光周期途径上游的 CO 家族基因 PsCOL4 的表达量没有显著的品种间差异,推
测 PrSOC1 具有很高的保守性,可能是参与牡丹成花的重要基因。利用原核表达系统成功表达了 PrSOC1
蛋白,并构建了 PrSOC1 的植物超表达载体,为进一步研究 PrSOC1 的功能奠定了基础。
关键词:牡丹;PrSOC1;半定量 RT-PCR;原核表达
中图分类号:S 685.11 文献标志码:A 文章编号:0513-353X(2014)11-2259-09

Molecular Cloning and Expression Analysis of the Flowering-regulating
Transcription Factor PrSOC1 Gene in Tree Peony
LIU Chuan-jiao1,2,WANG Shun-li1,XUE Jing-qi1,ZHU Fu-yong1,REN Xiu-xia1,LI Ming-yang2,
and ZHANG Xiu-xin1,*
(1Key Laboratory of Biology and Genetic Improvement of Horticultural Crops,Ministry of Agriculture,China,Institute of
Vegetables and Flowers,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Beijing 100081,China;2College of Horticulture and
Landscape Architecture,Southwest University,Chongqing Engineering Research Center for Floriculture,Chongqing
400716,China)
Abstract:One important homologous flowering-regulating transcription factor gene SUPPRESSOR
OF OVEREXPRESSION OF CONSTANS1(SOC1)was obtained from tree peony(Paeonia rockii)by
RT-PCR. It was designated as PrSOC1 and GenBank accession number was KJ427808. The open reading
frame(ORF)of PrSOC1 was 678 bp,with 421 bp in the 3′ UTR,and could encode 225 amino acids.

* 通信作者 Author for correspondence(E-mail:zhangxiuxin@caas.cn)
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Sequence alignment and motif analysis showed that the deduced amino acids contained typical MADS-box
and K-box domain,and a highly conserved motif named SOC1 MOTIF near the carboxy terminus. The
phylogenetic analysis showed that it has close relationship with Vitis vinifera,and belongs to SOC1/TM3
subfamily of MADS-box superfamily. The results of semi-quantitative RT-PCR revealed that the highest
expression levels were appeared in the flower-bud of Paeonia rockii,followed by root,shoot and leaves,
and the lowest in the seed. The expression patterns of PrSOC1 and PsCOL4 from flower-buds was not
significant differences in different varieties. It was deduced that PrSOC1 was much conserved in tree
peony and it may play important role in flowering of tree peony. PrSOC1 was successfully expressed in the
E.coli cell and the plant expression vector was constructed. The results will afford useful information for
study PrSOC1 gene function.
Key words:tree peony;PrSOC1;semi-quantitative RT-PCR;prokaryotic expression

牡丹原产于中国,属于芍药属牡丹组(Sect. Moutan DC.),共包括 9 个种。作为重要的观赏和
药用植物的紫斑牡丹(Paeonia rockii)主要分布在甘肃中部,参与了栽培品种的形成(李嘉珏,1999)。
紫斑牡丹具有种子结实量大的特点,也因此被广泛用于杂交育种的亲本。然而牡丹童期较长,一般
5 年以上才能开花,这也成为牡丹杂交育种的一个瓶颈。研究牡丹开花的分子机理,可为以后开展
牡丹分子育种奠定理论基础,加速牡丹育种进程。
SOC1 广泛存在于被子植物中(Cseke et al.,2003;Ferrario et al.,2004;Zhong et al.,2012),
其编码的蛋白属于典型的 MIKC 型蛋白,含有保守的 MADS-box、K-box 和非保守的 I 区、C 区
(Theissen et al.,1996),且 C 末端还具有保守的 SOC1 MOTIF 结构域,因此被划入 MADS/TM3 亚
家族(Nakamura et al.,2005)。SOC1 不仅参与营养器官发育,且在营养生长向生殖生长转变过程中
起重要作用(Lee et al.,2000;郭余龙,2008),不仅参与花器官形态建成,也可调控植物开花时间
(Melzer et al.,2008),能够整合来自光周期途径、春化途径、自主途径和赤霉素途径的开花信号,
并与其它基因互作,实现成花诱导(Simpson & Dean,2002;Parcy,2005;孙晓茜 等,2011)。在
光周期途径中,SOC1 能够被上游的 CO 基因激活,进而诱导下游基因的表达,促进开花,而 SOC1
的突变可以抑制 35S::CO 拟南芥植株的早花表型(Lee et al.,2000;Onouchi et al.,2000)。研究发
现在牡丹花芽发育早期,大量表达的 CO 类似基因 PsCOL4(GenBank 登录号为 KF113358)会合成
较多的 PsCOL4 蛋白,促使下游基因 SOC1 的表达,最终调控牡丹开花(王顺利 等,2014)。鉴于
SOC1 基因在植物成花诱导中的重要作用,目前已从多种植物中克隆出 SOC1 的同源基因,如葡萄
(Vitis vinifera)、草莓(Fragaria vesca)、大豆(Glycine max)等(Sreekantan & Thomas,2006;Zhong
et al.,2012;Lei et al.,2013)。然而作为重要观花植物的牡丹却没有关于 SOC1 基因的报道。
本研究中以紫斑牡丹为试验材料,利用 RT-PCR 的方法,克隆得到了 SOC1 基因的全长 cDNA
序列,同时采用半定量 RT-PCR 探讨其在紫斑牡丹不同组织、不同品种中的表达情况,并构建了原
核表达体系,在大肠杆菌中成功诱导表达了 PrSOC1,同时构建了其植物超表达载体,这为进一步
研究牡丹 SOC1 同源基因的功能及其在成花诱导中的作用奠定了基础。
1 材料与方法
1.1 试验材料
以 6 年生紫斑牡丹(Peaoni rockii)和中原牡丹栽培品种‘紫罗兰、‘朝阳红、‘洛阳红、‘赵
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粉及日本牡丹(P. suffruticosa Andr.)栽培品种‘吉野川’为试验材料,均栽种于国农业科学院蔬
菜花卉研究所牡丹资源圃中。于 2013 年 8 月收取 6 年生紫斑牡丹根、茎、叶、花芽和种子,2013
年 10 月收取 6 个品种的花芽,液氮速冻后保存于–80 ℃备用。
1.2 试验方法
1.2.1 RNA的提取和 cDNA的合成
花芽总 RNA 的提取参照 Li 等(2010)和 Wang 等(2012a)的报道。选取 1 μL 花芽总 RNA,
利用 NanoDrop ND-1000 分光光度计测定浓度,并判断其质量。然后取 1 μg 高质量的 RNA,利用
OligodT 和随机引物来合成 cDNA 链,具体步骤参照 Promega 的 M-MLV Reverse Transcriptase 说明
书进行(Promega,M1701,USA)。
1.2.2 引物设计与 PCR反应体系
根据本实验室已经克隆得到的 SOC1 基因 5′的部分序列,利用 Primer 5.0 软件设计了一对进行
3′RACE 扩增的正向引物:PrSOC1-2F:5′-ATGTCCGAGCAAGAAAGAGTC-3′;PrSOC1-3F:
5′-TTGAGCAACTAAAAGAAAAGG-3′。以上述反转录的 cDNA 为模板进行 3′RACE 扩增(利用
TaKaRa 公司的 3′-Full RACE Core Set Ver.2.0 试剂盒进行),反应体系均为 50 μL。首先进行 Outer PCR
反应:94 ℃预变性 3 min;94 ℃变性 30 s,58 ℃退火 30 s,72 ℃延伸 1 min,35 个循环;72 ℃延伸
10 min。然后以 Outer PCR 的反应产物为模板进行 Inner PCR 反应:94 ℃预变性 3 min;94 ℃变性
30 s,52.2 ℃退火 45 s,72 ℃延伸 1 min,35 个循环;72 ℃延伸 10 min。然后利用 BioEidt 7.0 对 3RACE
扩增所得序列与已经得到的 SOC1 基因片段进行拼接,并预测其 ORF,再根据所预测的 ORF 序列
重新设计了 1 对特异引物,进行 ORF 扩增验证。引物:PrSOC1-1 F:5′-ATGGTGAGAGGGAAGA
CTC-3′;PrSOC1-1 R:5′-TTAGTTCTGCAATATAACGC-3′。PCR 反应体系为 30 μL。94 ℃预变性 4
min;94 ℃变性 45 s,51.6 ℃退火 45 s,72 ℃延伸 1 min,35 个循环;72 ℃延伸 10 min。
扩增产物以 1%琼脂糖凝胶电泳检测,目标条带用北京全式金生物科技有限公司 EasyPure Quick
Gel Extraction Kit 试剂盒进行回收,回收产物经过连接到 pGEM-T 载体、转化大肠杆菌 TRANS 10
感受态细胞、Amp 抗性和 X-gal/IPTG 蓝白斑筛选、阳性克隆 PCR 检测,最后随机选取 3 个阳性克
隆送至北京华大基因公司测序。
1.2.3 序列分析与系统进化树的构建
利用 BioEidt 7.0 软件对克隆得到的 cDNA 序列进行翻译,用 ProtParam(http://web.expasy.org/
protparam)计算蛋白分子量及等电点,用 ProtScale(http://web. expasy. org/protscale)分析蛋白的疏
水性;利用 ExPaSy PSORT 在线工具(http://psort. hgc. jp/)进行亚细胞定位,用 TMHMM Server v.2.0
(http://www.cbs. dtu. dk/services/TMHMM/)进行跨膜结构域预测,分别用 ExPaSy SOPMA(http://
npsa-pbil. ibcp. fr/cgi-bin/)和 SWISS-MODEL(http://swissmodel. expasy. org/)在线工具进行蛋白
质二、三级结构预测;利用 NCBI 的 protein blast 进行相似蛋白搜索,并下载相似性 > 50%的蛋白
序列;利用 DANMAN 5.0 进行氨基酸序列比对,用 MEGA 4.1 构建系统进化树(Wang et al.,2011)。
1.2.4 半定量 RT-PCR反应
根据半定量 RT-PCR 引物设计原则,设计了 1 对引物 SqPrSOC1-1F:5′-CGAGGTTGCCCTTAT
CATC-3′,SqPrSOC1-1R:5′-AGGTTTCTGCTTCACGCTT-3′,其扩增子的长度为 179 bp。PsCOL4
和 Actin(GenBank 登录号 JN 105298)基因的半定量 RT-PCR 引物参照王顺利等(2014)的文献。
半定量 RT-PCR 反应体系为 30 μL。94 ℃预变性 3 min;94 ℃变性 1 min,57 ℃退火 30 s,72 ℃延伸
1 min,35 个循环;72 ℃延伸 10 min。最后利用 EXCEL 软件来计算 PrSOC1 和 PsCOL4 在不同组织
和不同品种中的表达量,应用 SAS 软件进行显著性差异分析。每个 PCR 反应至少做 3 次重复。

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1.2.5 原核表达载体构建及融合蛋白诱导
设计带有 EcoRⅠ和 NdeⅠ双酶切位点的扩增 PrSOC1 全长的原核表达引物 pPrSOC1-1F:5′-AC
CCATATGATGGTGAGAGGGAAGACT-3′;SqrSOC1-1R:5′-ACCGAATTCTTAGTTCTGCAATATAA
CGC-3′。以测序正确的 pGEM-T-PrSOC1 为模板,克隆 PrSOC1。经过与 pET-28α 重组、转化、鉴
定、测序,最后将测序正确的重组质粒转化大肠杆菌 BL 21(DE3)。取菌液 PCR 鉴定为阳性克隆的
菌落进行原核表达(Li et al.,2010;Wang et al.,2012b)。
1.2.6 植物超表达载体的构建
设计带有 XbaⅠ和 EcoRⅠ双酶切位点的扩增 PrSOC1 全长的引物 SOC1-2301G-T1F:5′-
GCGTCTAGAATGGTGAGAGGGAAGACT-3′、SOC1-2301G-T1R:5′-GGCGAATTCTTAGTTCTGC
AATATAACGC-3′。然后对表达载体 pCAMBIA2301G 质粒和己构建好的 pGEM-T-PrSOC1 质粒分别
进行双酶切,酶切产物经琼脂糖凝胶电泳回收相应大小的片段。用 T4 连接酶将目的基因编码框连
接到载体 pCAMBIA2301G 骨架内,转化大肠杆菌 TOP10,涂布在含 Kan 的 LB 平板上 37 ℃倒置过
夜培养,挑取单克隆进行 PCR 检测,选取阳性克隆进行扩大培养,提取质粒进行双酶切鉴定,再随
机选取 3 个阳性克隆送至北京华大基因公司,进行测序。
2 结果与分析
2.1 PrSOC1 同源基因的克隆
以紫斑牡丹花芽的 cDNA 为模板,根据本实验室已经克隆得到的 SOC1 基因片段设计特异引物
进行 3′端的扩增,测序结果表明 3′端为 449 bp(图 1,A),且含有 Ploy A 结构。将该序列与 454 转
录组测序所得 SOC1 片段拼接后,重新设计引物进行 ORF 验证,得到一个 678 bp 的含有完整 ORF
的 cDNA 序列(图 1,B),序列分析表明牡丹 SOC1 基因编码 225 个氨基酸。蛋白 NCBI blast 分析
发现克隆得到的氨基酸序列与葡萄(Vitis vinifera)中 SOC1 同源蛋白相似性高达 72%,因此将基因
命名为 PrSOC1。预测分子量为 25.584 kD,理论等电点为 5.41,属于亲水蛋白。亚细胞定位预测其
有 99.99%的几率定位于细胞核内,跨膜结构域预测结果表明其位于膜内。GenBank 登录号为
KJ427808。


图 1 牡丹 PrSOC1 基因的 3′-RACE PCR 产物(A)和开放阅读框 PCR 产物(B)的琼脂糖凝胶电泳图
Fig. 1 PCR amplification result on agarose gel of 3′RACE(A)and ORF of PrSOC1(B)

2.2 牡丹PrSOC1 编码氨基酸的同源性分析
氨基酸比对(图 2)发现,PrSOC1 含有典型的 MADS-box 和 K-box 结构域,属于 MADS 基因
家族中的 TypeⅡ型(Alvarez-Buylla et al.,2000),其 MADS-box 和 K-box 的下游还分别含有非保守
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的 I 区和半保守的 C 区,因此又称其为 MIKC 基因(Theissen et al.,1996),也称为 MEF-2 转录因
子。有研究发现 SOC1/TM3 亚家族基因在 C 区具有一个保守性很高的基序,即 SOC1/MOTIF
(Nakamura et al.,2005)。比对发现 PrSOC1 的 C 区也有 11 个氨基酸高度保守,因此将 PrSOC1 划
入 SOC1/TM3 亚家族中(图 2)。推断 PrSOC1 是具有生物功能的 SOC1 基因。
ExPaSy SOPMA 蛋白二级结构分析表明 PrSOC1 包含 59.11%的 α–螺旋、4%的 β–转角、9.78%
的延伸链和 27.11%的无规则卷曲。SWISS-MODEL 蛋白三级结构分析结果表明,PrSOC1 蛋白的三
级结构相与拟南芥和葡萄非常相似(图 3),具有两性 α–螺旋和 MADS-box 蛋白二聚体(Han et al.,
2003)。PrSOC1 通过介导蛋白质之间的相互作用来调控目标基因的表达(Pollock & Treisman,1991)。


图 2 PrSOC1 基因的推导氨基酸序列与其他植物 SOC1 的多序列比对
Fig. 2 Alignments of the PrSOC1 deduced amino acid sequences with other SOC1 proteins from plants

2.3 牡丹PrSOC1 系统进化分析
为进一步分析牡丹 PrSOC1 与其它植物 SOC1 同源蛋白的系统进化关系,选取了 MADS 家族的
18 个不同成员构建 SOC1 的系统进化树(图 3);考虑到 SOC1/TM3 亚家族基因在进化关系上与
AGL6-like 类基因较为接近(Theissen et al.,2000),同时采用了 4 个 AGL6-like 蛋白作为外类群。
结果表明,SOC1/TM3 同源蛋白和 AGL6-like 蛋白各聚为一枝,PrSOC1 与其他物种编码的 SOC1
蛋白聚为一枝,与葡萄 VvSOC1 聚在一起。这进一步验证了 PrSOC1 基因属于 SOC1/TM3 亚家族,
同时也表明其与葡萄的亲缘关系最近。
2.4 PrSOC1 基因在牡丹不同组织器官和不同品种中的表达分析
分析结果表明,PrSOC1 在紫斑牡丹根、茎、叶、花芽和种子中都有表达,但表达量存在一定
的差异(图 4),在种子中的表达量最低,在花芽中最高,推测 PrSOC1 可能在牡丹的多个组织器官
中发挥作用,且与花芽的发育关系密切。
为了探究 PrSOC1 在不同牡丹品种花芽中的表达情况,选取了‘紫罗兰’、‘朝阳红’、‘洛阳红’、
‘赵粉’、‘吉野川’和紫斑牡丹的花芽进行表达分析(图 5)。结果表明,不同品种花芽中 PrSOC1
的表达量无显著差异。由于 SOC1 可以经过长日照途径被其上游基因 CO 诱导表达,进而促进植物
开花(An et al.,2004),因此同时对上述 6 个品种进行了 CO 类似基因 PsCOL4 的表达分析,结果
发现 PsCOL4 的表达在品种间也没有显著差异,但略低于 SOC1。

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图 3 牡丹 PrSOC1 与其他物种 SOC1 蛋白的系统进化分析
自展值(1 ~ 1 000)标记各个节点,AGL6-like 蛋白作为外类群。
Fig. 3 Phylogenetic evolutionary analysis of SOC1 proteins
Boot-strap values from 1 000-replicates were indicated at each node and AGL6-like proteins were used as out-group.








图 5 不同品种牡丹花芽中 PrSOC1 和 PsCOL4 的相对表达量
Fig. 5 Relative expression level of PrSOC1 and PsCOL4 gene in
different varieties of tree peony buds by
semi-quantitative RT-PCR
图 4 紫斑牡丹不同组织中 PrSOC1 的相对表达量
Fig. 4 Relative expression level of PrSOC1 gene in different
tissues of P. rockii by semi-quantitative RT-PCR
2.5 原核表达载体构建和SDS-PAGE分析
表达载体 pET-28a-PrSOC1 双酶切鉴定表明,目的基因已经成功连接到 pET-28a 载体上(图 6,
A)。重组质粒经再次测序表明,插入片段与克隆序列完全一致。SDS-PAGE 电泳(图 6,B)结果
表明,在分子量 28 kD 的位置存在 1 条融合蛋白诱导表达的条带。除去 His-Tag 标签蛋白,目的蛋
11 期 刘传娇等:牡丹开花调控转录因子基因 PrSOC1 的克隆与表达分析 2265
白的分子量与紫斑牡丹 PrSOC1 蛋白的分子量理论值相符,而对应诱导的转化空载体未出现目的蛋
白带。表明重组质粒 pET-28a-PrSOC1 在大肠杆菌 BL 21(DE3)中成功表达了 PrSOC1 蛋白。


图 6 重组载体 pET-28α-PrSOC1 双酶切鉴定(A)及其诱导蛋白 SDS-PAGE 分析(B)
Fig. 6 Double digestion and the induced protein of recombined vector pET-28α-PrSOC1 was
identified by agarose gel electrophoresis(A)and SDS-PAGE(B)

2.6 植物超表达载体构建结果分析
表达载体PrSOC1-230lG双酶切鉴定表明,
可以从重组质粒中酶切出与目的片段大小一致
的条带(图 7)。重组质粒经再次测序表明,插
入片段与克隆序列完全一致。表明该基因的植
物超表达载体 PrSOC1-2301G 构建成功。
3 讨论
适时开花是被子植物有性繁殖的重要前
提。植物经过长期的发育进化,形成了一套复
杂而精细的基因调控网络,以确保植株能在最
佳时间开花(鲜登宇 等,2013)。SOC1 是光
周期途径、春化途径、自主途径和赤霉素途径中的整合因子,过表达 SOC1 可以促使拟南芥提前开
花(Borner et al.,2000;Lee et al.,2000;Samach et al.,2000;Michaels & Amasino,2001;Moon et
al.,2003;Yoo et al.,2005)。同时,SOC1 还参与冷响应信号和开花调节之间的反馈回路。SOC1
蛋白可与抗寒基因 CBF 的启动子直接结合以抑制 CBF 表达,从而促进开花;而 CBF 的过表达可以
增加 FLC 的转录水平,进而实现对春化途径中 FLC 的下游靶基因 SOC1 的负调控,以延迟开花(Seo
et al.,2009)。本试验从紫斑牡丹中克隆得到了 1 个成花调控网络中的 PrSOC1 基因,氨基酸结构分
析表明,PrSOC1 含有典型的 MADS-box、K-box 结构域和 MOTIF 保守基序,属于 MADS 超级基因
家族中的 TM3 亚家族。系统进化分析表明,PrSOC1 蛋白与与葡萄 SOC1 同源蛋白 VvSOC1 聚为一
枝,而 VvSOC1 是一个调控葡萄开花的重要基因。三级结构预测其结构与拟南芥 AtSOC1 和葡萄
VvSOC1 相似,因此推测牡丹中的 PrSOC1 也是一个开花整合因子,可以调控牡丹开花。
图 7 植物表达载体 PrSOC1-230lG 双酶切鉴定
Fig. 7 Electrophoresis results of digestion with restriction
enzyme of plant expression vector PrSOC1-230lG
PrSOC1 在紫斑牡丹花芽中的表达量最高,在根、茎、叶中表达量略低,在种子中表达量最低。

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这与草莓 FaSOC1 的表达(Lei et al.,2013)一致,但与拟南芥 AtSOC1 的表达略有不同,在拟南芥
中 AtSOC1 在根、茎、叶片、花蕾、花器官中都有表达,在叶部和茎顶端的表达最强,在根中的表
达量较低(Lee et a1.,2000)。在木本植物月季中,相对于其它组织,RhSOC1 在顶芽中的表达量最
高(李晶晶,2011)。这表明 SOC1 在不同物种之间的表达存在一定的差异,推测可能是不同植物的
种间差异和取样时植物的发育状态不同导致。在对牡丹不同品种的花芽中 PrSOC1 和 PsCOL4 的表
达研究中发现,二者在不同品种中的表达量均较高(与种子中 PrSOC1 和 PsCOL4 的表达量相比),
但并无明显的种间差异。研究发现在梅花顶芽中从 5 月底到 8 月底 PmSOC1 的表达量也保持在较高
水平(李晶晶,2011)。推测其原因为 2013 年 10 月北京地区露地温度还比较高,花芽分化还未停止,
代谢活动也比较活跃,因此这两个参与成花的基因的表达量均较高。
PrSOC1 在体外的成功表达,可以用于后期 SOC1 抗体的制备,进一步在蛋白水平上研究 PrSOC1
的表达情况。植物超表达载体 PrSOC1-230lG 的构建,为研究 PrSOC1 的功能奠定了基础。

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