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Two Different Pathways for the High-efficiency Plant Regeneration of Gloxinia

大岩桐高频再生体系建立的两种途径



全 文 :园  艺  学  报  2010, 37 (1) : 135 - 140
Acta Horticulturae Sinica
收稿日期 : 2009 - 06 - 18; 修回日期 : 2009 - 11 - 23
基金项目 : 西安市市容园林局基金项目 (XA081023) ; 甘肃省自然科学基金项目 (0803RJZA034) ; 西北农林科技大学人才专项
资金项目3 通讯作者 Author for correspondence ( E2mail: wangcy@ lzu1edu1cn)
大岩桐高频再生体系建立的两种途径
徐全乐 1, 3 , 谢亚红 2 , 刘文婷 2 , 阮美煜 3 , 胡 鑫 1, 3 , 贾海燕 3 , 王崇英 33
(1西北农林科技大学生命科学学院 , 陕西杨凌 712100; 2西安市园林研究所 , 西安 710065; 3兰州大学生命科学学院细
胞生物学研究所 , 兰州 730000)
摘  要 : 采用大岩桐 (S inning ia speciosa) 的叶片、叶柄和根外植体 , 经过两种途径建立大岩桐的高效
离体再生体系。第 1种途径是 : 外植体先形成愈伤组织 , 愈伤组织分化出不定芽 , 再生成不定根 , 进而形
成再生苗 ; 第 2种途径是 : 外植体先形成少量愈伤组织和根 , 再产生不定芽 , 进而形成再生苗。第 1种途
径所采用的培养基 MS +BA 210 mg·L - 1 +NAA 012 mg·L - 1 +蔗糖 30 g·L - 1 , 芽诱导率达到 99104% , 根
诱导率达到 98181% , 每块外植体分化的不定芽数达 5153个 ; 第 2种途径中以 MS +NAA 110 mg·L - 1 +蔗
糖 30 g·L - 1为最佳培养基 , 芽诱导率达到 90138% , 根诱导率达到 100% , 每块外植体分化的不定芽数达
2144个。在 3种外植体中以叶片的再生频率最高。经过连续的组织培养 , 在大岩桐的再生苗中得到了一些
表型变异植株 , 包括叶片形态的改变 , 植株叶序的改变以及花的改变。其中以叶序和花的改变最有价值 ,
可以为叶序调控机理和成花及花变异机理研究提供良好材料。
关键词 : 大岩桐 ; 再生途径 ; 组织培养 ; 自发突变 ; 叶序
中图分类号 : S 682  文献标识码 : A  文章编号 : 05132353X (2010) 0120135206
Two D ifferen t Pathways for the H igh2eff ic iency Plant Regenera tion of Glox in ia
XU Quan2le1, 3 , X IE Ya2hong2 , L IU W en2ting2 , RUAN Mei2yu3 , HU Xin1, 3 , J IA Hai2yan3 , and WANG
Chong2ying33
(1 College of L ife Sciences, N orthw est A & F U niversity, Yangling, Shaanxi 712100, China; 2 X ipian Institu te of Garden, X ipian
710065, China; 3 Institu te of Cell B iology, School of L ife Sciences, Lanzhou U niversity, Lanzhou 730000, Ch ina)
Abstract: Gloxinia was efficiently p lant2regenerated using its leaf, petiole and root segements as exp lants
via two different organ biogenesis pathways. In the first pathway, the three types of exp lants all first formed
callus and adventitious buds on Murashige and Skoog (MS) medium with 62benzylam inopurine (BA) andα2
naphthalene acetic acid (NAA ) , and the buds then p roduced roots after transformed onto the same medium.
The op timal hormone combination was 210 mg·L - 1 BA + 012 mg·L - 1 NAA, at which 99104% of the
exp lants p roduced buds, 5153 buds per exp lants at average, and 98181% of the buds formed roots. In the
second pathway, all the types of exp lants first p roduced callus and roots on MS medium with NAA alone, and
the roots later formed buds on the same medium. The op timal NAA level was 110 mg·L - 1 , at which
90138% of the exp lants p roduced buds, 2144 shoots per exp lant on average, and 100% of the root then
formed buds. The leaf exp lants appearred the best. In addition, some mutants with the changed phyllotaxy
was found after generations of subcuture. This mutant may be very useful for studying the molecular genetic
mechanism of p lant phyllotaxis patterning.
Key words: S inn ing ia speciosa; regeneration pathway; tissue culture; spontaneous mutantion; phyllo2
taxis
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大岩桐 (S inn ing ia speciosa) 又名落雪泥 , 原产巴西 , 为苦苣苔科苦苣苔属多年生肉质草本植物
(韦三立 , 2000; 程广有 , 2001)。因其叶大对生 , 全株密披绒毛 , 花冠钟形 , 花大艳美而被广泛种
植。但是由于单瓣品种大岩桐的花柱与花药不等高 , 不能自花授粉 , 种子繁殖成本高 , 难以保持原有
的优良特性 (王鸿鹤 等 , 1999; 李爱华和熊春玲 , 2003) ; 而常规的块茎分割、枝插和叶插等方法繁
殖系数低 , 耗时长 , 因此组织培养就成为大岩桐快速繁殖的重要手段。目前国内已有较多大岩桐组织
培养成功的相关报道 (刘本叶 等 , 1995; 黄小荣 等 , 2001; 袁正仿 等 , 2001; 曹桂萍和王建美 ,
2002; 秦丽 等 , 2007; 侯卓婕和傅玉兰 , 2008; 任如意 等 , 2008) , 但这些报道多采用单一的外植体
和较复杂的培养基配方 , 需多次继代培养 , 并且其再生过程均为外植体先形成愈伤组织和不定芽 , 再
继代培养形成根。
本研究中通过叶片、叶柄和根 3种外植体 , 采用不同的培养基配方 , 经过两种不同的途径 , 建立
了大岩桐的高效离体再生体系 , 两种再生途径在愈伤组织诱导、芽分化和根分化的过程中分别只采用
了一种培养基 , 极大地简化了培养过程。
1 材料与方法
111 再生植株的获得
2006年 5月上旬 , 于兰州市花卉市场购买深红色单瓣大岩桐 (S inn ing ia speciosa) , 在兰州大学细
胞生物学研究所进行相关试验。将大岩桐块根种在营养土中 , 待长至 4~6片叶片时取其叶片、叶柄
及根 , 依次用 70%乙醇浸泡 30 s, 011%升汞浸泡 10 m in, 然后用无菌蒸馏水冲洗 3次。将灭菌的叶
片外植体剪为 015 cm ×015 cm大小 , 叶柄及须根外植体剪为 015 cm长 , 分别接种于含有 BA 210
mg·L - 1和 NAA 012 mg·L - 1的 MS培养基 (Murashige & Skoog, 1962 ) 以及只含有 NAA ( 0101、
011、110、210和 510 mg·L - 1 ) 的 MS培养基上。
所有培养基均添加 3%蔗糖和 017%琼脂 , 用 NaOH调至 pH 518, 并于 120 ℃湿热灭菌 20 m in。
培养条件为 : 光照 24μmol·m - 2 ·s- 1 , 16 h·d - 1 , 温度 (25 ±2) ℃。每个培养瓶中接种至少 6块
外植体 , 每种处理至少 5瓶。45 d后统计形成不定芽的外植体数和每块外植体上形成的不定芽数。65
d左右统计形成不定根的不定芽数。
112 再生苗的移栽
当不定芽生长至大约 2 cm高时 , 对其进行分割 , 将分割后具有不定根的不定芽移栽到蛭石 ∶泥炭
土 ∶珍珠岩 (1∶1∶1) 的混合基质中 , 覆盖塑料薄膜以保持相对湿度 , 弱光下生长 10 d后移至自然条
件下生长。
113 连续的组织培养
取无菌再生苗的叶片 , 将其剪为 015 cm ×015 cm大小 , 接种于附加 BA 210 mg·L - 1和 NAA 012
mg·L - 1的 MS培养基上。培养条件同上。
以上试验至少重复 2次。
2 结果与分析
211 大岩桐两种高频再生体系的建立
在含有 BA 210 mg·L - 1和 NAA 012 mg·L - 1的 MS培养基上生长约 15 d时 , 叶柄外植体生成质
地疏松的哑铃状愈伤组织块 (图 1, A )、叶片外植体生成大量颗粒状愈伤组织 (图 1, E) ; 大约 30
d后这些愈伤组织分化为不定芽 (图 1, B、F) , 其分化率分别为 61111%和 99104% (表 1)。上述不
定芽在相同的培养基上继续生长 , 可见有不定根形成 (图 1, G)。这种先形成愈伤组织 , 再分化为
不定芽 , 生成不定根 , 形成再生植株的分化途径称之为途径 A。
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 1期 徐全乐等 : 大岩桐高频再生体系建立的两种途径  
图 1 大岩桐 3种不同的外植体的两条再生途径及组培苗的变异情况
A~G: 培养基为 MS +BA 210 mg·L - 1 +NAA 012 mg·L - 1。A: 叶柄外植体形成哑铃状愈伤组织 ; B: 叶柄外植体愈伤组织
上形成不定芽 ; C: 根外植体生成不定根 ; D: 根外植体分化出不定根上生成不定芽 ; E: 叶片外植体形成大量愈伤组织 ;
F: 叶片外植体愈伤组织分化不定芽 ; G: 再生苗。H~M: 培养基为 MS +NAA。H: 叶片外植体 15 d时形成少量愈伤组织
和较短的不定根 ; I: 叶片外植体由不定根分化出不定芽 ; J: 叶柄外植体 15 d时形成较长的不定根 ; K: 叶柄外植体分化
的不定根上形成不定芽 ; L: 根外植体培养 15 d时产生不定根 ; M: 根外植体分化出的不定根上形成不定芽。N、O: 叶
序由野生型对生变为轮生 (N顶面观 , O侧面观 ) ; P: 野生型花 ; Q: 组培苗产生具有两轮萼片的同源异型花。
F ig. 1 D ifferen t pa thways for regenera tion of leaf, petiole and root explan ts of glox in ia and m utan tion s of regenera ted plan tlets
A - G: On MS medium containing BA 210 mg·L - 1 and NAA 012 mg·L - 1. A: Dumbbell2shaped calli from petiole exp lant; B: Calli from
petiole exp lant differentiated into adventitious buds; C: Adventitious roots formed from root exp lant; D: Adventitious buds with adventitious
roots; E: Calli formed from leaf surface; F: Calli from leaf surface differentiated into adventitious buds; G: Regenerated p lantlet.
H - M: On MS medium containing only different concentrations of NAA; H: L ittle calli and adventitious roots formed from leaf exp lant that
cultured for 15 d; I: Adventitious buds formed from leaf exp lant; J: Adventitious roots formed from petiole exp lant; K: Adventitious buds
formed on adventitious roots from a petiole exp lant; L: Adventitious roots formed from root exp lant; M: Adventitious buds formed on
adventitious root from root exp lant. N, O: Phyllotaxy of gloxinia changed from opposite to whorled ( ap ical view, side view) ; P: Flower
of wild type; Q: Homeotic flower with two rounds of petals from regenerated p lantlet.
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园   艺   学   报 37卷
当叶片和叶柄外植体在只含有 NAA (110、210、510 mg·L - 1 ) 的培养基上生长约 15 d时 , 叶片
外植体形成少量愈伤组织和大量不定根 (图 1, H) , 叶柄外植体则只形成大量不定根 (图 1, J) ; 大
约 45 d时可见不定芽生成 (图 1, I、K)。上述这种先形成少量愈伤组织和不定根 , 再分化出不定芽
而形成再生植株的分化途径称之为途径 B。
而根外植体接种在上述任一培养基上时 , 15 d左右可见不定根 (图 1, C、L ) 和少量的愈伤组
织形成 ; 约 30 d可见不定芽的分化 (图 1, D、M )。也就是说 , 大岩桐的根外植体只存在一种分化
途径 , 即途径 B。
在分化途径 A中 , 叶片的芽分化频率和每块外植体上的再生芽数明显高于叶柄外植体 (表 1) ,
其芽诱导率可以达到 99104% , 根诱导率达到 98181% , 每块外植体上再生的不定芽数为 5153。在分
化途径 B中 , 叶片外植体在含有 0101和 0110 mg·L - 1 NAA的 MS培养基上不能分化出再生芽 , 而在
含有 1100 mg·L - 1 NAA的 MS培养基上具有最高的诱导频率 , 达到 90%以上 ; 相反 , 叶柄外植体在
含高于 2100 mg·L - 1 NAA的培养基上不能分化出再生芽 , 在含有 0110 mg·L - 1 NAA的培养基上具有
最高的诱导频率 , 达到 52100% (表 1) ; 根外植体的最高诱导频率为 57114% (表 1)。因此 , 途径 A
可能更适合于大岩桐的再生 , 而叶片外植体是建立大岩桐再生体系的最适外植体。
表 1 大岩桐叶片、叶柄和根外植体在不同再生途径中的分化频率
Table 1 Regenera tion eff ic iency of leaf, petiole and root explan ts a t d ifferen t pa thways respectively
途径
Method
BA /
(mg·L - 1 )
NAA /
(mg·L - 1 )
外植体类型
Exp lant type
外植体数
Exp lant number
芽诱导率 /%
Bud induction efficiency
根诱导率 /%
Root induction efficiency
每块外植体生成的芽数
Bud formation per exp lants
A 210 0120 叶片 Leaf 311 99104 ±2154a 98181 ±1168a 5153 ±2150a
叶柄 Petiole 90 61111 ±19124c 100a 2118 ±1147c
B 210 0120 根 Root 35 57114 ±12160c 85171 ±4127bc 3100 ±1183b
0 0101 叶片 Leaf 120 0f 0e 0e
叶柄 Petiole 95 10153 ±5127e 15179 ±6195d 1150 ±0153d
根 Root 45 33133 ±9162d 100a 1133 ±0158d
0 0110 叶片 Leaf 110 0f 11143 ±3178d 0e
叶柄 Petiole 125 52100 ±14142c 68100 ±12186c 1130 ±0167d
0 1100 叶片 Leaf 120 90138 ±11179ab 100a 2144 ±1182c
叶柄 Petiole 120 12150 ±7122e 91167 ±4117b 1133 ±0152d
根 Root 30 50100 ±14144c 100a 1167 ±0158cd
0 2100 叶片 Leaf 153 78127 ±21138b 100a 3111 ±1166b
叶柄 Petiole 90 0f 77178 ±9162c 0e
0 5100 叶片 Leaf 132 31175 ±34129d 100a 1188 ±1125cd
叶柄 Petiole 60 0f 91167 ±8134b 0e
  注 : 差异显著水平为 0105。
  Note: The significant difference is 0105.
212 连续组织培养引起大岩桐表型改变
在经过连续的组织培养后 , 大多数再生苗与野生型大岩桐表型一致 , 但有一些再生苗的表型发生
了变异 , 比如叶片顶端凹陷 , 叶柄上着生两个叶片 , 叶片上产生异源突起 , 主脉一分为二 , 叶序由对
生变为轮生 (图 1, N、O) , 出现两轮萼片 (图 1, Q) 等。
3 讨论
本研究建立了大岩桐两种不同的再生途径 , 而且两种途径的最高分化频率均超过了 90% , 是高
频的离体再生体系。在已有的报道中 (刘本叶 等 , 1995; 黄小荣 等 , 2001; 袁正仿 等 , 2001; 曹桂
萍和王建美 , 2002; 秦丽 等 , 2007; 侯卓婕和傅玉兰 , 2008; 任如意 等 , 2008) , 大岩桐的再生途径
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 1期 徐全乐等 : 大岩桐高频再生体系建立的两种途径  
均为外植体先诱导愈伤组织 , 再经过芽分化和根的分化形成再生苗 ; 这与本研究中建立的途径 A类
似。途径 A培养基中的植物生长调节剂配比以 BA为主 NAA为辅 , 途径 B中只有 NAA。细胞分裂素
的主要生理作用之一为诱导芽分化 ; 生长素为诱导根分化。在途径 A中所采用的较高的细胞分裂素
和较低的生长素浓度 , 有利于芽的分化 , 从而形成了先生成芽再形成根的分化途径。至于不更换培养
基而一步生根 , 可能是随着培养时间的延长 , 培养基中局部的植物生长调节剂浓度消耗而引起细胞分
裂素浓度降低 , 使得培养条件转为利于根的形成。本研究中建立的先生根再生芽的分化途径 B , 在大
岩桐的组织培养中为首次报道。类似的分化途径在山萮菜的组织培养中有过报道 (周国英 等 ,
2000) , 这可能与两者都是宿根植物有关。当培养基中添加的植物生长调节剂诱导外植体形成不定根
后 , 这种不定根和块根的作用类似而形成不定芽。此外 , 也可能由于 NAA不断消耗 , 内源细胞分裂
素促进了芽的生成。
组织培养引起表型变异的现象已有许多报道 (Larkin & Scowcroft, 1981)。在本试验中大岩桐再
生苗经过连续的组织培养以后 , 发现了一些有意义的表型突变 , 包括叶序的改变和花的同源异型现
象。目前已报道的叶序相关突变体集中在拟南芥、玉米、烟草、金鱼草和番茄等模式植物中 (徐全
乐和胡鑫 , 2009) , 它们主要是通过 EMS诱导 , T2DNA插入等一些手段得到的 , 只有 aberrant phyllo2
taxy ( abphy l) (Jackson & Hake, 1999) 来自于自发的突变 , 而从组织培养引起的叶序突变尚未见报
道。同时 , 上述所提到的这些叶序的突变体 , 它们的叶序变化绝大部分是不规则的 , 其表型改变具有
多效性 (Reinhardt, 2005)。本研究得到的规则变化的叶序突变体 , 可以为叶序调控机理的研究提供
良好的材料来源。在大岩桐叶序突变体中还发现了花的同源异型现象 , 即花萼由野生型的一轮变为两
轮 (图 1, O)。根据花器官调控的 ‘ABC’模型 , 植物花的 4轮器官的特征受到 3类基因 A、B、C
的决定 ; 而 A基因 (主要是 A P1、A P2、LUG) 本身足以决定萼片的形成 (白书农 , 2003) , 因此推
测 , 这里出现的大岩桐的同源异型花可能与 A基因的功能缺失有关。类似的现象在重瓣大岩桐中曾
有过报道 , 庞基良等 (2003) 发现了 6种同源异型花 , 主要集中于花瓣的变化 , 推测可能是与 B基
因的功能缺失有关。对于这些同源异型花的研究和分析将有助于进一步深入了解成花和花变异的规
律 , 单瓣大岩桐可能与重瓣大岩桐一样 , 是研究花形态建成的良好材料之一。
References
Bai Shu2nong. 2003. The formation of lateral organs. Plant developmental biology. Beijing: Peking University Press. ( in Chinese)
白书农. 2003. 侧生气管的形成. 植物发育生物学. 北京 : 北京大学出版社.
Cao Gui2p ing, W ang jian2mei. 2002. The study on tissue culture and rap id p ropagation of glixinia. Shandong Agricultural Sciences, 5: 16,
22. ( in Chinese)
曹桂萍 , 王建美. 2002. 大岩桐的组织培养与快速繁殖研究. 山东农业科学 , 5: 16, 22.
Cheng Guang2you. 2001. Techniques of tissue culture on concinnous and famous flowers. Beijing: Scientific and Technical Documents
Publishing House. ( in Chinese)
程广有. 2001. 名优花卉的组织培养技术. 北京 : 科学技术文献出版社.
Hou Zhuo2jie, Fu Yu2lan. 2008. Plant growth hormonepis influence on isolated culture of S inningina speciosa. Chinese Agriculrural Science
Bulletin, 24 (3) : 78 - 81. ( in Chinese)
侯卓婕 , 傅玉兰. 2008. 植物生长调节剂对大岩桐离体培养的影响. 中国农学通报 , 24 (3) : 78 - 81.
Huang Xiao2rong, Cai L ing, Su Xuan. 2001. Tissue culture of gloxinia. Guangxi Forestry Science, 30 (3) : 132 - 133. ( in Chinese)
黄小荣 , 蔡 玲 , 苏 煊. 2001. 大岩桐的组织培养. 广西林业科学 , 30 (3) : 132 - 133.
Jackson D, Hake S. 1999. Control of phyllotaxis in maize by the abphyl1 gene. Development, 126: 315 - 323.
Larkin P J, Scowcroft W R. 1981. Somaclond variation - A novel source of variability from cell cultures for p lant imp rovement. Theor App
Genet, 67: 249 - 255.
L i A i2hua, Xiong Chun2ling. 2003. Tissue culture and rap id p ropagation of S inningia speciosa. Hubei Forestry Science and Technology, 124:
931
园   艺   学   报 37卷
5 - 6. ( in Chinese)
李爱华 , 熊春玲. 2003. 大岩桐的组织培养及快速繁殖. 湖北林业科技 , 124: 5 - 6.
L iu Ben2ye, Zhang Yan2p ing, Zhang Xi2chun, W u J iang2yun, Zhang L i2mei, Zhang J ian2guang. 1995. Studies on p lantlet regeneration of
S inningia speciosa Benth. et Hook through leaf culture. B iotechnology, 5 (2) : 22 - 24. ( in Chinese)
刘本叶 , 张艳萍 , 张喜春 , 吴绛云 , 张丽梅 , 张建光. 1995. 大岩桐叶片培养再生植株的研究. 生物技术 , 5 (2) : 22 - 24.
Murashige T, Skoog F. 1962. A revised medium for rap id growth and bioassay with tobacco tissue cultures. Physiol Plant, 15: 473 - 497.
Pang J i2liang, W ang L i2lin, Hu J iang2qin, L iang Hai2man, L iW en2an. 2003. Floral homeotic variants of in vitro seedlings in S inningia spe2
ciosa H iern. Acta B iologiae Experimentalis Sinica, 36 (1) : 76 - 81. ( in Chinese)
庞基良 , 王利琳 , 胡江琴 , 粱海曼 , 李文安. 2003. 重瓣紫蓝大岩桐组培苗的花同源异型现象. 实验生物学报 , 36 ( 1 ) : 76 -
81.
Q in L i, Hu Xue2mei, L iao Q ing, Gao Yan, Sha Hong, Duolikun Shabire, He B in, Zhang Fu2chun. 2007. The establishment and op tim iza2
tion of tissue culture system of S inningia speciosa. Xinjiang Agricultural Sciences, 44 (3) : 336 - 339. ( in Chinese)
秦 丽 , 胡雪梅 , 廖 青 , 高 燕 , 沙  红 , 多里坤 ·沙比尔 , 贺  宾 , 张富春. 2007. 观赏植物大岩桐 ( S inningia speciosa )
组织培养体系的建立和优化. 新疆农业科学 , 44 (3) : 336 - 339.
Reinhardt D. 2005. Phyllotaxis - A new chap ter in an old tale about beauty and magic numbers. Curr Op in Plant B iol, 8: 487 - 493.
Ren Ru2yi, Zhao J in2liang, Zong Xian2chun, Zhang Xiao2jun. 2008. Tissue culture with leaves of S inningia speciosa and histological observa2
tion. Northern Horticulture, 6: 183 - 185. ( in Chinese)
任如意 , 赵金良 , 宗宪春 , 张晓军. 2008. 大岩桐叶片组织培养及其组织学观察. 北方园艺 , 6: 183 - 185.
W ang Hong2he, Ge Xin, Xu Q i2jiang, W u Jiang2yun. 1999. In vitro induction of polyp loid p lants from colchine2treated S inningia speciosa.
Journal of Trop ical and Subtrop ical Botany, 7 (3) : 237 - 242. ( in Chinese)
王鸿鹤 , 葛 欣 , 徐启江 , 吴绛云. 1999. 秋水仙碱诱导重瓣大岩桐多倍体的研究. 热带亚热带植物学报 , 7 (3) : 237 - 242.
W ei San2li. 2000. Tissue culture of flower p lants. Beijing: China Forestry Publishing House. ( in Chinese)
韦三立. 2000. 花卉组织培养. 北京 : 中国林业出版社.
Xu Quan2le, Hu Xin. 2009. Phyllotaxy initiation and influencing factors in p lant. Plant Physiology Communications, 45 (4) : 405 - 412. ( in
Chinese)
徐全乐 , 胡 鑫. 2009. 植物叶序的发生和影响因素. 植物生理学通讯 , 45 (4) : 405 - 412.
Yuan Zheng2fang, Kong L ing2bao, Zhao Xing2bing, Zhang Su2feng, He Yong, N ie Kai2yong. 2001. The rap id p ropagation and culture under2
glass of S inningia hybrida Hort. Journal of Xinyang Teachers College: Natural Science Edition, 14 (4) : 456 - 458. ( in Chinese)
袁正仿 , 孔令葆 , 赵兴兵 , 张苏锋 , 何 永 , 聂凯勇. 2001. 大岩桐的组培快繁和温室栽培. 信阳师范学院学报 : 自然科学版 ,
14 (4) : 456 - 458.
Zhou Guo2ying, L iu Jun2ang, Zhou De2m ing. 2000. Tissue culture of W asabia japonica Matsum. Journal of Central South Forestry University,
20 (1) : 65 - 67. ( in Chinese)
周国英 , 刘君昂 , 周德明. 2000. 山萮菜组织培养的研究. 中南林学院学报 , 20 (1) : 65 - 67.
征订
《园艺学报》2009年增刊———庆祝中国园艺学会创建
80周年暨第 11次全国会员代表大会
论文摘要集出版发行
本期论文摘要集共收录果树、蔬菜、西瓜甜瓜和观赏植物方面论文摘要 202篇 , 其中果树 76篇 , 蔬菜 78篇 , 西
瓜甜瓜 23篇 , 观赏植物 25篇 , 内容涉及种质资源、遗传育种、分子生物学、栽培技术、生理生化、贮藏保鲜等。
每册定价 45元。欲购者请与 《园艺学报 》编辑部联系。
编辑部地址 : 北京市海淀区中关村南大街 12号 中国农业科学院蔬菜花卉研究所 《园艺学报 》编辑部 ;
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