免费文献传递   相关文献

RAPD Analysis on the Genetic Relationsh ips of Tea Cultivars Grown inSichuan

四川主栽茶品种亲缘关系的RAPD分析



全 文 :园  艺  学  报  2007, 34 (1) : 242 - 244
Acta Horticulturae Sinica
收稿日期 : 2006 - 04 - 11; 修回日期 : 2006 - 10 - 25
基金项目 : 四川省 ‘十一五’攻关项目3 共同第一作者 Theses authors contributed equally to this work; 3 3 通讯作者 Author for correspondence ( E2mail: guinian5612
@ sina1com1cn)
四川主栽茶品种亲缘关系的 RAPD分析
王雪萍 1 , 马炳田 23 , 齐桂年 13 3 , 田 鸿 1 , 方倡友 3 , 张泽岑 1 , 尹旭敏 1
(1 四川农业大学林学园艺学院 , 四川雅安 625014; 2 四川农业大学水稻研究所 , 成都 611130; 3 四川省雅安市雨城
区农业局 , 四川雅安 625000)
摘  要 : 利用 RAPD标记对四川主要产茶区具代表性的 36份茶树栽培品种的亲缘关系进行分析。从
50条引物中筛选出扩增效果良好的 16条 , 共扩增出 167条谱带 , 其中 , 多态性带为 158条 (占 94161% ) ,
遗传距离的变异范围在 01149~01679之间。UPGMA聚类结果将 36份茶树栽培品种分为 3个复合组和 2个
独立组 , 聚类结果与茶树品种的来源有关。
关键词 : 茶树 ; RAPD; 亲缘关系 ; UPGMA
中图分类号 : S 57111  文献标识码 : A  文章编号 : 05132353X (2007) 0120242203
RAPD Ana lysis on the Genetic Rela tion sh ips of Tea Cultivars Grown in
S ichuan
WANG Xue2p ing1 , MA B ing2tian23 , Q I Gui2nian13 3 , TIAN Hong1 , FANG Chang2you3 , ZHANG Ze2cen1 ,
and YIN Xu2m in1
(1 College of Forestry and Horticu ltura l, S ichuan A gricu ltura l U niversity, Yapian, S ichuan 625014, Ch ina; 2 R ice R esearch Institu2
te, S ichuan A gricu ltura l U niversity, Chengdu 611130, China; 3D istrict of Yucheng A gricu ltura l A dm inistra tion, Yapian, S ichuan
625000, Ch ina)
Abstract: The genetic relationship of 36 tea cultivars grown in Sichuan was studied by RAPD technique.
Sixteen p rimers selected from 50 random p rimerswere used to amp lify 36 tea samp les, and a total of 167 DNA
bands were amp lified, among which 158 (94161% ) were polymorphic. Genetic distances between the culti2
vars varied from 01149 to 01679. UPGMA cluster analysis of 167 bands amp lified by 16 p rimers was made.
The result showed that 36 tea cultivars tested could be classified into 3 comp lex group s and 2 simp le group s. It
was found that there was a certain correlation between the results and the derivation of tea cultivars.
Key words: Tea p lant; Cam ellia sinensis; RAPD; Genetic relationship; UPGMA
四川有着丰富的茶 [ Cam ellia sinensis (L. ) O. Kuntze ] 资源 , 从中也选育出了一些具有优良特
性的栽培品种。但是从 DNA水平对四川茶树种质资源及栽培品种进行研究的报道很少。作者对四川
主要产茶区具代表性的 36份茶树栽培品种进行 RAPD分析 , 以期为进一步选育茶树良种提供依据。
1 材料与方法
供试材料取自四川农业大学茶树品种园、省级名山良种场示范基地品种园以及草坝全义茶场品种
园。取茶树的幼嫩夏稍 , 采用硅胶干燥法带回实验室。基因组 DNA 的提取参考 CTAB法 (黄建安
等 , 2003) 并加以改进。PCR扩增反应在 PTC2200基因扩增仪上进行 , 采用 25μL反应体系 , 其中含
50 ng模板 DNA , 012μmol/L引物 , 各 012 mmol/L dNTPs, 110 U Taq聚合酶 , 1 ×缓冲液 (含 115
 1期 王雪萍等 : 四川主栽茶品种亲缘关系的 RAPD分析  
mmol/L MgCl2 )。94℃预变性 5 m in; 94℃变性 50 s, 36℃退火 40 s, 72℃延伸 90 s, 循环 41次 ; 最后
72℃延伸 7 m in。扩增产物用 115%琼脂糖电泳 , 于凝胶成像系统中照相。对筛选出的引物用同样的
反应体系和程序重复 2~3次 , 只取重复性好的用于分析。扩增产物的记录和分析参照陈亮等 (1998,
2002) 的方法。
2 结果分析与讨论
211 引物筛选
采用 50条 RAPD随机引物对供试样品进行扩增 , 有 16条引物能够产生稳定的扩增条带 , 36份
材料共扩增出 167条带 , 其中引物 S1、S2、S3、S10、S16、S20、S91、S93、S111扩增出的条带均为
多态性条带。各引物扩增平均表现的多态性为 94161%。
212 RAPD扩增多态性的聚类分析
36份材料经 16条引物扩增后的二元数据 , 利用 DPS软件进行分析 , 遗传距离的变异范围在 01149
~01679之间。当以遗传距离 01385来划分时可将 36份材料聚成 3个复合组和 2个独立组 (图 1) , 其
图 1 36个茶树品种的分子系统树状图
F ig. 1 M olecular phylogenetic dendrogram of 36 tea cultivars
342
园   艺   学   报 34卷
中 , 第 1类主要包括原产四川的茶树品种 ; 第 2类包括原产浙江和福建的茶树品种 ; 第 3类包括原产
湖南、广东、安徽、江苏的茶树品种。表明茶树品种的 RAPD聚类分析结果与其地域分布和来源有
关。南江 3号、黔湄 502则游离在这 3大类之外 , 分别单独聚为一类 , 显示了其独特的遗传特性。
从川茶群体种中选育出的早白尖 5号、南江 4号、名山白毫、名山早先聚为一类后再和蜀永 307
聚为一类 ; 从蒙山群体种中选育出的蒙山 9号、11号、23号和原产福建的黔湄 419聚为一类。这些
品种在遗传距离 01341时组成了主要由来源于四川的茶树品种聚成的第 1类。
从福鼎大白茶与云南大叶种自然杂交后代中选育出的青峰、迎霜 , 从福鼎有性后代中选育出的茂
绿 , 从福鼎和云大自然杂交后代中选出的浙农 117, 这 4个品种皆与福鼎大白茶有着直接的联系从而
和福鼎聚在了一类 ; 平阳特早和从平阳群体与云大自然杂交后代中选育出碧云聚为一类 ; 从福选 9号
变异的个体单株中选育出的名选 213和福选 9号聚为一类。这些聚类结果与茶树品种的来源有关。最
终 , 这些主要包括原产浙江和福建的茶树品种聚成第 2类。
原产湖南的东湖早、槠叶齐聚为一类 ; 在广东从阿萨姆种中驯化选择出的英红 1号、英红 2号聚
为一类 ; 从云南大叶种实生后代中选育出的锡茶 11号和从江苏宜兴种中选育出的锡茶 5号之间的遗
传距离虽然较远 , 但还是同时聚在了第 3类 , 说明环境条件对茶树品种遗传特性有一定的影响。这些
品种最终与凫早 2号在遗传距离为 01385时构成了以湖南、广东、安徽、江苏茶树品种为主的第 3
类。
References
Chen L iang, Yamaguchi Satoshi, W ang Ping2sheng, Xu Mei, SongW ei2xi, Tong Q i2qing. 2002. Genetic polymorphism and molecular phylogeny
analysis of section tea based on RAPD markers. Journal of Tea Science, 22 (1) : 19 - 24. ( in Chinese)
  陈 亮 , 山口聪 , 王平盛 , 许 玫 , 宋维希 , 童启庆. 2002. 利用 RAPD进行茶组植物遗传多样性和分子系统学分析. 茶叶科学 ,
22 (1) : 19 - 24.
Chen L iang, Yang Ya2jun, Yu Fu2lian, Gao Q i2kang, Chen Da2m ing. 1998. Genetic diversity of 15 tea [ Cam ellia sinensis (L. ) O. Kuntze ]
cultivars using RAPD markers. Journal of Tea Science, 18 (1) : 21 - 27. ( in Chinese)
陈 亮 , 杨亚军 , 虞富莲 , 高其康 , 陈大明. 1998. 15个茶树品种遗传多样性的 RAPD分析. 茶叶科学 , 18 (1) : 21 - 27.
Huang J ian2an, Huang Yi2huan, Luo Jun2wu, W ang Kun2bo, Zhou L i2hua. 2003. Efficient methods for genom ic DNA extraction from tea p lant.
Journal of Hunan Agricultural University (National Sciences) , 29 (5) : 403 - 407. ( in Chinese)
  黄建安 , 黄意欢 , 罗军武 , 王坤波 , 周李华. 2003. 茶树基因组的高效提取方法. 湖南农业大学学报 (自然科学版 ) , 29 (5) : 403
   - 407.
442