全 文 ：园 　艺 　学 　报 　2007, 34 (1) : 47 - 52
Acta Horticulturae Sinica
收稿日期 : 2006 - 04 - 01; 修回日期 : 2006 - 11 - 21
基金项目 : 国家自然科学基金项目 (30370988) ; 云南省科技厅攻关项目 (2003NG13)3 通讯作者 Author for correspondence ( E2mail: ywteng@ zju1edu1cn; shuqun@public1km1vn1cn)
中国红皮砂梨品种的 SSR标记分析
张　东 1 , 舒　群 23 , 滕元文 13 , 仇明华 2 , 鲍　露 1 , 胡红菊 3
(1 浙江大学园艺系 , 农业部园艺植物生长发育与生物技术重点开放实验室 , 杭州 310029; 2 云南省农业科学院园艺研
究所 , 昆明 650205; 3 湖北省农业科学院果树茶叶研究所 , 武汉 430209)
摘 　要 : 采用 SSR ( Simp le sequence repeat) 标记技术对 29个砂梨品种或类型 (主要为红皮型 ) 做了鉴
定 , 并对其亲缘关系进行了分析。6对 SSR引物 (BGA35、KU10、BGT23b、NH004a、NH011b和 NH015a)
均扩增出了较多的等位基因。NH004a位点的等位基因数、有效等位基因、杂合度和香农多样性指数都较高 ,
显示了良好的品种鉴定能力。除 3对品种或类型可能为同物异名或芽变类型无法区分开外 , 6对引物组合可
以成功地鉴定其它品种。聚类分析可以将 29个砂梨品种 (类型 ) 明显分成 4个组。第Ⅰ组全部来自云南 , 其
中包括 2个绿皮砂梨品种 , 其余为红皮砂梨 , 说明该组内红皮砂梨的祖先可能与这些绿皮砂梨亲缘关系很近。
在第 Ⅱ、Ⅲ组中 , 来自四川会理的红梨品种和云南的红梨品种交叉组合 , 可能是两地间品种交流的历史反映。
第 Ⅳ组中来自四川会理的 ‘香酥梨 ’、‘栽秧梨 ’, 原产云南弥渡的 ‘弥渡香酥梨 ’以及原产云南丽江的
‘长水火把梨’相互间及与其它梨的亲缘关系均较远。分布在云南各地的火把梨可能有不同的起源。
关键词 : 砂梨 ; SSR; 品种鉴定 ; 亲缘关系
中图分类号 : S 66112　　文献标识码 : A　　文章编号 : 05132353X (2007) 0120047206
S im ple Sequence Repea t Ana lysis on Genetic A ssessm en t of Ch inese Red
Sk inned Sand Pear Cultivars
ZHANG Dong1 , SHU Qun23 , TENG Yuan2wen13 , Q IU M ing2hua2 , BAO Lu1 , and HU Hong2ju3
(1D epartm ent of Horticu lture, Zhejiang U niversity, the S tate A gricultural M inistry Labora tory of Horticultural P lant Grow th,
D evelopm ent & B iotechnology, Hangzhou 310029, Ch ina; 2 Institu te of Horticulture, Yunnan A cadem y of A gricultural Sciences,
Kunm ing 650205, Ch ina; 3 Institu te of F riu t and Tea, Hubei A cadem y of A gricu ltura l Sciences, W uhan 430209, China)
Abstract: A total of 29 sand pear germp lasm (mainly red skinned) native to southwest of China were
subjected to simp le sequence repeat ( SSR ) analysis. Six pairs of SSR p rimers (BGA35, KU10, BGT23b,
NH004a, NH011b and NH015a) could generate a large number of alleles. The p rimer NH004a, which p ro2
duced the highest allele numbers and the most effective alleles, and high heterozygosity and Shannon informa2
tion index, showed the best identification power. U sing six pairs of SSR p rimers, all accessions or types could
be distinguished excep t for three pairs of cultivars, which m ight belong to the synonymy cases or bud mutants.
Twenty nine pear accessions could be divided into four major group s obviously based on the UPGMA cluster a2
nalysis. Group Ⅰ consisted of cultivars all native to Yunnan p rovince, including two green and nine red
skinned sand pears, inferring a near genetic relationship between the red and green skinned pears. In group s
Ⅱand Ⅲ, the red skinned pears from Huili County of Sichuan Province and from Yunnan Province m ingled to2
gether, which m ight suggest cultivar movement from Yuannan to Sichuan. In group Ⅳ, not only were Xiangsu2
li and Zaiyangli from Huili County of Sichuan Province, M idu Xiangsuli and Changshui Huobali native to Yun2
nan Province not closely clustered, but also were far from other group s. Huobali pear types distributed in Yun2
nan and Sichuan p rovinces m ight have different origins. The results above indicates large genetic diversity of
germp lasm resources of red skinned sand pear cultivars in China.
Key words: Sand pear; SSR; Cultivar identification; Genetic relationship
园 　　艺 　　学 　　报 34卷
红色果皮的梨品种相对较少。过去记载的红色梨品种主要集中在秋子梨、西洋梨和白梨等系统中
( Kajiura, 1978)。随着对中国梨属植物的深入调查 , 在砂梨资源中发现了珍贵的红皮梨类型 (张文
炳 等 , 1993, 1997)。这些红皮砂梨资源主要分布在云南省及四川省的南部 (陶磅 等 , 2004)。张
文炳等 (1997) 描述了收集于云南各地区的 14个红色梨品种和类型。位于湖北农业科学院果树茶叶
研究所的中国砂梨种质资源圃和云南省农业科学院园艺研究所分别保存了一些红皮砂梨的品种和类
型。然而 , 对于所收集的红皮砂梨品种和类型缺乏品种鉴定和亲缘关系方面的研究 , 限制了对它们的
正确评价和合理利用。所以鉴定红皮砂梨品种 , 揭示它们间的亲缘关系具有非常重要的意义。
利用分子标记技术对红皮砂梨品种进行鉴定和揭示亲缘关系的研究尚未见报道。由于 SSR ( Sim2
p le sequence repeat) 标记具有高多态性、共显性、标记带型简单以及覆盖整个基因组等特点 ( Powell
et al. , 1996 ) , 在梨品种鉴定和亲缘关系等研究领域得到了有效地应用 ( Kimura et al. , 2002;
Yamamoto et al. , 2002)。本研究利用 SSR标记技术对原产于中国西南地区的红皮砂梨进行鉴定 , 并
揭示红皮砂梨品种或类型间的亲缘关系 , 为这些资源的合理保存和利用提供理论支持。
1　材料与方法
111　试验材料
本试验所用品种和类型的幼叶采自湖北省果树茶叶研究所中国砂梨种质资源圃 (H IFT)、中国农
业科学院果树研究所国家梨种质资源圃 (CPGR)、云南省农业科学院园艺科学研究所 ( YNH I) 和中
国农业科学院郑州果树研究所 ( ZZF I) (表 1)。
表 1　本研究所用梨的品种和类型
Table 1　Accession s used in th is study
编号
No.
梨品种或类型
Cultivars or lines
原产地
O rigin
红色果皮
Red skin
采集地
Samp ling source
1 满天红 (幸水 ×火把梨 )Mantianhong ( Kousui ×Huobali) 河南郑州 Zhengzhou, Henan 是 Yes YNH I
2 美人酥 (幸水 ×火把梨 )Meirensu ( Kousui ×Huobali) 河南郑州 Zhengzhou, Henan 是 Yes YNH I
3 雄古火把梨 1号 Xionggu Huobali 1 云南丽江 L ijiang, Yunnan 是 Yes H IFT
4 会理 2号 Huili 2 四川会理 Huili, Sichuan 是 Yes YNH I
5 索美 Suomei 云南丽江 L ijiang, Yunnan 否 No ZZF I
6 宝珠梨 Baozhuli 云南呈贡 Chenggong, Yunnan 否 No CPGR
7 会理 1号 Huili 1 四川会理 Huili, Sichuan 是 Yes YNH I
8 长水火把梨 Changshui Huobali 云南丽江 L ijiang, Yunnan 是 Yes H IFT
9 丽江面梨 L ijiangM ianli 云南丽江 L ijiang, Yunnan 是 Yes H IFT
10 雄古火把梨 2号 Xionggu Huobali 2 云南丽江 L ijiang, Yunnan 是 Yes H IFT
11 砚山红梨 Yanshan Hongli 云南砚山 Yanshan, Yunnan 是 Yes YNH I
12 云红梨 2号 Yunhongli 2 云南文山 W enshan, Yunnan 是 Yes H IFT
13 文山红梨 W enshan Hongli 云南文山 W enshan, Yunnan 是 Yes H IFT
14 丽江白梨 L ijiang Baili 云南丽江 L ijiang, Yunnan 否 No ZZF I
15 云红梨 1号 Yunhongli 1 云南砚山 Yanshan, Yunnan 是 Yes ZZF I
16 弥渡火把梨 M idu Huobali 云南弥渡 M idu, Yunnan 是 Yes H IFT
17 弥渡香酥梨 M idu Xiangsuli 云南弥渡 M idu, Yunnan 是 Yes H IFT
18 瓢形火把梨 Piaoxing Huobali 四川会理 Huili, Sichuan 是 Yes YNH I
19 弥渡小红梨 M idu Xiaohongli 云南弥渡 M idu, Yunnan 是 Yes H IFT
20 老鸦梨 Laoyali 四川会理 Huili, Sichuan 是 Yes YNH I
21 文山红雪梨 W enshan Hongxueli 云南文山 W enshan, Yunnan 是 Yes ZZF I
22 彩面鸭梨 Caim ian Yali 四川会理 Huili, Sichuan 是 Yes YNH I
23 香酥梨 Xiangsuli 四川会理 Huili, Sichuan 是 Yes YNH I
24 大理火把梨 Dali Huobali 云南大理 Dali, Yunnan 是 Yes H IFT
25 栽秧梨 Zaiyangli 四川会理 Huili, Sichuan 是 Yes YNH I
26 大理胭脂梨 Dali Yanzhili 云南大理 Dali, Yunnan 是 Yes H IFT
27 长把火把梨 Changba Huobali 四川会理 Huili, Sichuan 是 Yes YNH I
28 火把梨 Huobali 云南武定 W uding, Yunnan 是 Yes H IFT
29 巍山红雪梨 W eishan Hongxueli 云南巍山 W eishan, Yunnan 是 Yes YNH I
84
　1期 张 　东等 : 中国红皮砂梨品种的 SSR标记分析 　
112　试验方法
11211　DNA提取 　采用改良 SDS法从幼叶中提
取总基因组 DNA, 提取结束后 , 采用分光光度计
(Beckman DU800, USA ) 将 DNA 浓度调整为 10
ng/μL。所用的BGA35、NH011b、BGT23b、NH0
15a、KU10和 NH004a (表 2) 是从 Yamamoto等
(2002) 开发的梨属植物 SSR系列引物中选出的
被证明多态性好、分辨率高的引物 ( Kimura et
al. , 2002) , 由 InvitrogenTM公司合成。
11212　PCR扩增 　反应体系总体积为 20μL, 其
中包括 110μL (10 ng/μL) 模板 DNA、210μL 10
×buffer (MgCl2终浓度为 115 mmol/L )、210μL
215 mmol/L dNTPs、110μL p rimer (10 pmoles)、 表 2　SSR引物的序列及扩增的长度范围Table 2　SSR pr im er sequences and a llele size ranges引物Primers 序列Sequences 等位基因的大小Allele size ranges(bp)BGA35 F AGAGGGAGAAAGGCGATT 121～160R GCTTCATCACCGTCTGCTKU10 F AGTATGTGACCACCCCGATGTT 222～274R AGAGTCGGTTGGGAAATGATTGBGT23b F CACATTCAAAGATTAAGAT 192～215R ACTCAGCCTTTTTTTCCCACNH004a F AGGATGGGACGAGTT TAGAG 78～126R CCACATCTCTCAACCTACCANH011b F TGGTTCACATAGAGAGAGAGAGAGA 160～240R TTTGCCGTTGGACCGAGCNH015a F TTGTGCCCTTTTTCCTACC 105～180R CTTTGATGTTACCCCTTGCTG
012μL Taq polymerase ( Takara B iotechnology Company, Japan) 和 1318μL ddH2 O。扩增反应程序随引
物的不同而不同 , NH011b、NH015a和 NH004a等 3对 SSR引物采用一般的扩增程序 : 94℃预变性 2
m in, 94℃变性 1 m in, 55℃退火 1 m in和 72℃延伸 2 m in, 共 35个循环。对于 BGA35、BGT23b、
KU10则为变温扩增程序 : 94℃预变性 2 m in, 94℃变性 1 m in, 60℃退火 1 m in和 72℃延伸 2 m in,
10个循环 , 每个循环降 015℃, 随后以 94℃预变性 2 m in, 94℃变性 5 m in, 55℃退火 1 m in和 72℃
延伸 2 m in, 再进行 35个循环 ( Kimura et al. , 2002)。
扩增结束后 , 先将 PCR产物于 110%的琼脂糖胶上检测 , 如扩增片段大小为 100～200 bp左右 , 表
明扩增成功 , 扩增产物和变性液 (二甲苯青 1 mg, 溴酚蓝 1 mg, 015 mol/L EDTA, 溶于去离子甲酰胺 )
以等体积混合 , 于 94℃ 5 m in进行变性 (Vos et al. , 1995) , 随后立即置于冰上或保存于 4℃备用。
11213　凝胶电泳及数据分析 　取 5μL经热变性后的混合液于 6%聚丙烯酰胺凝胶中电泳 110 h (75
W ) , 参照 Bassam等 (1991) 的方法进行银染。将重复性好且清晰的条带进行记录 (有无条带分别
记为 1和 0) , 然后根据 Nei和 L i (1979) 的方法计算 D ice相似系数 , 建立相似矩阵 , 采用 NTSYS2pc
程序 , 以非加权数据分析法 (UPGMA ) 生成系统树。对不同的 SSR谱带 (等位基因 ) 以字母顺序命
名 , 采用 POPGENE version 1131软件计算不同 SSR位点的等位基因数 ( no )、每个 SSR位点的有效等
位基因数 ( ne )、观察杂合度 (Ho )、期望杂合度 (He ) 和香农多样性指数 ( I)。
2　结果与分析
　　6对 SSR引物均能产生较多的多态性谱带 (等
位基因 ) , 其中以 NH004a最多 , KU10和 BGA35a
只分别产生了 7个等位基因 (表 3)。而有效等位
基因数也以 NH004a产生最多。对于每个品种或类
型 , 每对引物一般产生 1或 2个等位基因 (图 1)。
除了 3对品种或类型无法区别以外 , 利用 6对引物
组合可以鉴定所有的品种和类型。本研究中 , 各位
点 He 为 012861～018699, 平均为 016788。Ho 为
012069～110000, 平均为 016839。 I在各位点为
016918 ～211674, 均值为 115005 (表 3)。 表 3　红皮砂梨的 SSR位点特征Table 3　The character iza tion of polym orph ic SSRloc i of red sk inned sand pears位点Locus no ne Ho He IBGT23b 9 113912 012069 012861 016918NH011b 8 219561 016897 016733 113875BGA35a 7 313911 019655 017175 113962KU10 7 211674 018621 018699 211674NH015a 11 315940 013793 017344 115431NH004a 12 414973 110000 017913 118169Mean 9 219995 016839 016788 115005
94
园 　　艺 　　学 　　报 34卷
图 1　以 NH011b为引物的扩增产物于 610%聚丙烯酰胺凝胶电泳图
箭头 A: ‘长把火把梨’的特殊谱带 ; 箭头 B: ‘栽秧梨’的特殊谱带。材料编号见表 1。
F ig. 1　610% PAGE gel electrophoresis of am plif ica tion products w ith NH011b pr im er
A rrow A: The specific band of Changba Huobali; A rrow B: The specific band of Zaiyangli. Numbers refer to the cultivars listed in Table 1.
　　根据 D ice相似系数 , 采用 UPGMA法进行聚
类得到的梨系统关系树 (图 2) 可以分成 4个大
组。第 Ⅰ组包括 11个品种 , 全部来自云南 , 可以
进一步分成 3个亚组。其中第 1亚组由两个绿皮
梨 (来自呈贡的 ‘宝珠梨 ’和丽江的 ‘丽江白
梨 ’) 先以相似系数 0193聚合 , 再和几个红皮砂
梨聚在一起。这些红皮砂梨包括原产文山县的
‘文山红梨’、‘文山红雪梨 ’和 ‘云红梨 2号 ’,
原产砚山县的 ‘云红梨 1号 ’和 ‘砚山红梨 ’,
它们之间的相似系数非常高 , 均在 0192左右。从
SSR图谱来看 , ‘云红梨 1号 ’与 ‘砚山红梨 ’
在 6个 SSR位点上均有完全相同的谱带 , 同样的
情况还出现在采自湖北省果树茶叶研究所中国砂
梨种质资源圃的 ‘云红梨 2号 ’与采自中国农业
科学院郑州果树研究所的 ‘文山红雪梨 ’间。另
外一个亚组包括了绿皮梨品种 ‘索美 ’、红皮梨
品种 ‘雄古火把梨 1号 ’和 ‘雄古火把梨 2号 ’。
三者均原产于丽江 , 它们间的相似系数也较高 ,
其中 ‘雄古火把梨 1号 ’和 ‘雄古火把梨 2号 ’
间为 0189, 它们与 ‘索美 ’的相似系数为 0176。
‘丽江面梨’相对独立成一个亚组。
第 Ⅱ组包括了来自云南大理和四川会理的品
种 , 其中云南大理的 ‘弥渡小红梨 ’起到了连接
图 2　采用 UPGM A方法生成的 29个砂梨品种的系统关系树
F ig. 2　The phylogenetic tree of 29 sand pear cultivars
( ma in ly red sk inned) ba sed on UPGM A cluster ana lysis
第 Ⅰ组和本组其它品种的作用。本组也可以明显地区分成两个亚组。一个亚组中四川会理的 ‘瓢形
火把梨 ’先与大理弥渡的 ‘弥渡火把梨 ’以 0185的高相似系数相聚 , 再与 ‘会理 2号 ’聚为一个亚
组。另外一个亚组也是会理的品种和大理的品种交叉组合。在本组中云南武定的 ‘火把梨 ’和原产
大理的 ‘大理火把梨 ’的相似系数为 1, 在系统树中并列在一起。
同第 Ⅱ组一样 , 第 Ⅲ组也是云南大理和四川会理的品种混合的组。来自四川会理的 ‘长把火把
梨 ’与云南的 ‘大理胭脂梨 ’先聚在了一起 , 然后与来自四川会理的 ‘老鸦梨 ’再聚合形成一个与
第 Ⅱ组亲缘关系较远的大组。
第 Ⅳ组中相互间亲缘关系较远。除了人工育成的 ‘美人酥 ’和 ‘满天红 ’以 0186的相似系数聚
在一起外 , 其余的云南丽江的 ‘长水火把梨 ’、云南大理弥渡的 ‘弥渡香酥梨 ’、四川会理的 ‘栽
05
　1期 张 　东等 : 中国红皮砂梨品种的 SSR标记分析 　
秧梨 ’和 ‘香酥梨 ’相对独立 , 没有再进一步聚
合。这些品种与其它梨的亲缘关系也较远。
本研究中共有 8个来自各地的火把梨 , 它们
分散在不同的组中 (图 2)。除了来自云南武定的
‘火把梨 ’和 ‘大理火把梨 ’相似系数为 1外 ,
相互间的相似系数从最低的 013200 ( ‘雄古火把
梨 2号 ’与 ‘瓢形火把梨 ’) 到 018889 ( ‘雄古
火把梨 1号 ’与 ‘雄古火把梨 2号 ’) (表 4)。
表 4　各地 8个火把梨间的 D ice相似系数
Table 4　D icepis sim ilar ity coeff ic ien ts for 8 Huoba li
pear cultivars from d ifferen t places
编号
No. 27 8 24 28 18 17 3
8 014348
24 015217 015217
28 015217 015217 110000
18 014615 014800 016400 016400
17 014167 014348 016087 016087 0184623
3 015600 013333 015000 015000 015185 014800
10 015385 013200 014800 014800 015000 014615 018889
3　讨论
等位基因数的多少和杂合度的高低可以反映 SSR标记鉴别植物基因型的能力 ( Zhebentyayeta et
al. , 2003)。本研究所检测的 SSR位点的平均等位基因数为 9, 少于 Kimura等 (2002) 的 1418, 可能
与我们所检测的材料数少有关。本研究中各位点的平均杂合度 (Ho ) 为 0168, 这与 Kimura等 (2002)
计算出的 0163很接近 , 说明所选用的 6个 SSR位点具有很高的杂合性 , 非常适合于红皮砂梨品种的
鉴定。从各位点产生的等位基因数、有效等位基因数、杂合度和香农多样性指数等综合判断 ,
NH004a为最有效的鉴定红皮砂梨品种的位点。这些指标也同时反映了本研究所用红梨材料具有很高
的遗传多样性。Kimura等 (2002) 采用 9个梨 SSR引物鉴定了 6个梨属种共 60个梨品种和类型 , 鉴
别出两个同物异名和两个同名异物品种。本研究中发现 3对品种或类型可能为同物异名或芽变类型 ,
无法区分开 , 分别为 ‘云红梨 1号 ’与 ‘砚山红梨 ’、‘云红梨 2号 ’与 ‘文山红雪梨 ’、‘火把梨 ’
与 ‘大理火把梨 ’ (图 2)。‘云红梨 1号 ’是于 1984年在云南省文山州砚山县发现的 ‘砚山红梨 ’
基础上 , 经多年观察试验所选育出的红色梨品种 (陶磅 等 , 2003)。本研究所用的 SSR不能将它们
区分开 , 说明它们之间在遗传上没有差异或差异不在所检测的 SSR位点之内。‘云红梨 2号 ’与‘文
山红雪梨 ’分别采自湖北省果树茶叶研究所中国砂梨种质资源圃和中国农业科学院郑州果树研究所 ,
均原产于文山县 , 应该为同物异名。武定的 ‘火把梨 ’与 ‘大理火把梨 ’在湖北省果树茶叶研究所
中国砂梨种质资源圃作为两个品种保存 , 从本试验结果看它们应该为同一品种。
火把梨是著名的云南红皮砂梨品种 , 一般意义上所指的火把梨原产云南大理 , 即中国砂梨种质资
源圃保存的 ‘大理火把梨 ’, 而武定的 ‘火把梨 ’应该是从大理引种过去的。其余称为火把梨的品
种 , 包括四川会理的 ‘长把火把梨 ’和 ‘瓢形火把梨 ’、丽江的 ‘长水火把梨 ’和 ‘雄古火把梨 1
号、2号 ’及大理弥渡县的 ‘弥渡火把梨 ’等则与 ‘大理火把梨 ’的遗传相似性较低 (表 4)。不仅
如此 , 大部分火把梨之间的相似系数也都不是很高 (表 4)。说明分布于不同地区的这些火把梨的起
源不同。值得关注的是四川会理的 ‘瓢形火把梨 ’和 ‘长把火把梨 ’分别与云南大理的 ‘弥渡火把
梨 ’和 ‘大理胭脂梨 ’聚在一起 (图 2)。其它来自四川会理的红梨品种也没有独立的聚在一起 , 而
是和云南的红梨品种交叉组合。四川会理和云南省交界 , 两地间的交流非常频繁 , 会理的这些红梨有
可能是从云南引种过去的 (张文炳 ———原云南省农业科学院园艺研究所研究员 , 私人通信 )。
同样地 , 在第Ⅰ组 (图 2) 中不同来源地的品种聚在一起形成亚组也可能反映了梨传播的历史。一
般认为 ‘宝珠梨’原产云南呈贡 , 但也有本品种自大理宝珠寺传来而得名之说 (吴耕民 , 1993)。在本
研究中 , 它和来自与大理相邻的丽江地区的 ‘丽江白梨’的相似系数高达 0193, 在系统树中紧密聚合
在一起 , 显示了非常近的亲缘关系。产于云南东南部文山地区的系列红梨与 ‘宝珠梨’和 ‘丽江白梨’
聚成第Ⅰ组中的第 1亚组 , 也反映了这些红皮砂梨或其祖先可能来源于大理或丽江地区。
本研究中的红皮砂梨地方品种聚成了不同的大组 (图 2) , 显示了很广的遗传多样性 , 同时也说
明了它们起源的非单一性。这也可以从某些红皮梨品种间非常低的相似系数得以证明 , 如 ‘栽秧梨 ’
15
园 　　艺 　　学 　　报 34卷
与‘丽江面梨 ’两者之间的相似系数仅为 0126。第 Ⅰ组中来自丽江的绿皮砂梨 ‘宝珠梨 ’、‘丽江白
梨 ’和 ‘索美 ’分别与红皮砂梨相互交错聚合 , 说明这些绿皮砂梨和红皮砂梨有很近的亲缘关系。
自然界中 , 西洋梨和秋子梨红色品种一般起源于绿色品种的芽变 (Reimer, 1951; Kajiura, 1978; 焦言
英 等 , 1999) , 上述结果也表明红皮砂梨很可能缘于绿皮砂梨的芽变。
‘美人酥 ’和 ‘满天红 ’是以 ‘幸水 ’为母本 , ‘火把梨 ’为父本杂交育成的品种 (Vos et al. ,
1995) , 其相似系数为 0186, 这与它们的背景一致性相吻合。但是它们并没有和父本 ‘火把梨 ’聚在
一起 , 相似系数仅为 0150, 可能是由于其母本 ‘幸水 ’属于日本梨系统 , 与中国梨亲缘较远所致。
在所有样品中 , 来自四川会理的 ‘香酥梨 ’、‘栽秧梨 ’, 原产云南弥渡的 ‘弥渡香酥梨 ’以及
原产云南丽江的 ‘长水火把梨 ’, 与其它梨的关系较远。充分说明了红皮砂梨遗传背景的复杂性。
综上所述 , 本研究利用 SSR标记技术成功鉴定了原产云南省和来自四川省的红皮砂梨品种或类
型 , 鉴别出 3对同物异名或芽变品种。我们的结果也揭示了红皮砂梨之间的亲缘关系和丰富的遗传多
样性。上述结果为准确保存和合理利用这些红皮砂梨资源提供了理论依据。
References
Bassam B J, Caetano2Anolles G, Gresshoff P M. 1991. Fast and sensitive silver staining of DNA in polyacrylam ide gels. Analytical B iochem istry,
　　 195: 80 - 83.
J iao Yan2ying, Zhao Gui2m in, Chen J i2zhong. 1999. ‘Hongnanguo’ - a new mutation cultivar originated from‘Nanguoli’. China Fruits, (3) :
　　22. ( in Chinese)
　　焦言英 , 赵桂敏 , 陈继忠. 1999. 南果梨芽变新品种红南果梨. 中国果树 , (3) : 22.
Kajiura I. 1978. Red pear. Agriculture and Horticulture, 53 (10) : 1229 - 1234. ( in Japanese)
Kimura T, Shi Y Z, ShodaM, Kotobuki K, Matsuta N, Hayashi T, Ban Y, Yamamoto T. 2002. Identification of A sian pear varieties by SSR
　　analysis. B reeding Science, 52: 115 - 121.
Nei M, L iW H. 1979. Mathematicalmodel for studying genetic variation in term s of restriction endonucleases. Proeedings of the NationalAcademy
of Sciences of United States of America, 76: 5269 - 5273.
PowellW , Machray G, Provan J. 1996. Polymorphism revealed by simp le sequence repeats. Trends in Plant Science, 1 (7) : 215 - 222.
Reimer F C. 1951. A genetical bud mutation in the pear. J. Heredity, 42: 93 - 94.
Tao Pang, Shu Qun, W ang J ian2jun, Zhang W en2bing. 2004. Present situation and p rospect of research and utilization on red pear germp lasm
　　 resources. Southwest China Journal of Agricultural Sciences, (47) : 409 - 412. ( in Chinese)
　　陶　磅 , 舒　群 , 王建军 , 张文炳. 2004. 红色梨资源研究和开发利用的现状与展望. 西南农业学报 , (47) : 409 - 412.
Tao Pang, Shu Qun, ZhangWen2bing. 2003. A new red pear variety with high quality, late ripening and long storage life—‘Yunhong 1’. Acta
Horticulturae Sinica, 30 (4) : 497. ( in Chinese)
　　陶　磅 , 舒　群 , 张文炳. 2003. 晚熟、耐贮红梨新品种 ‘云红梨 1号’. 园艺学报 , 30 (4) : 497.
Vos P, Hogers R, B leekerM, ReijansM, van de Lee T, HornesM, Frijters A, Pot J, Peleman J, KuiperM, Zabeau M. 1995. AFLP: a new
　　 technique for DNA fingerp rinting. Nucleic Acids Research, 23: 4407 - 4414.
W u Geng2m in. 1993. Pomology in temperate zone of China. Zhejiang: Zhejiang Scientific and Technological Press: 145 - 169. ( in Chinese)
　　吴耕民. 1993. 中国温带落叶果树栽培学. 浙江 : 浙江科学技术出版社 : 145 - 169.
Yamamoto T, Kimura T, Sawamura Y, Manabe T, Kotobuki K, Hayashi T, Ban Y, Matsuta N. 2002. Simp le sequence repeats for genetic
　　analysis in pear. Euphytica, 124: 129 - 137.
ZhangW en2bing, Zhang Jun2ru. 1993. Resources of red pear cultivars in the subtrop ical region of Yunnan Province. China Fruits, (4) : 16
　　 - 17. ( in Chinese)
　　张文炳 , 张浚如. 1993. 云南亚热带地区的红色梨品种资源. 中国果树 , (4) : 16 - 17.
ZhangWen2bing, Zhang Jun2ru, L i Xue2lin, Shu Qun, Zeng Ya2wen. 1997. Red pear germplasm resources in Yunnan and their utilization. South
China Fruits, 26 (5) : 38 - 39. ( in Chinese)
　　张文炳 , 张浚如 , 李学林 , 舒　群 , 曾亚文. 1997. 云南红皮梨种质资源及其利用. 中国南方果树 , 26 (5) : 38 - 39.
Zhebentyayeva T N, Reighard G L, Gorina V M, Abbott A G. 2003. Simp le sequence repeat ( SSR) analysis for assessment of genetic variability
　　in ap ricot germp lasm. Theoretical and App lied Genetics, 106: 435 - 444.
25