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Effects of Different Treatments on Germination Characteristics of Five Legume Forage Seeds

不同处理方法对5种豆科牧草种子萌发特性的影响



全 文 :第20卷 第2期
 Vol.20  No.2
草 地 学 报
ACTA AGRESTIA SINICA
   2012年  3月
  Mar.  2012
不同处理方法对5种豆科牧草种子萌发特性的影响
贾 娟1a,刘 芳2a*,苏红田2,李青丰1,闫 敏2
(1.内蒙古农业大学,内蒙古 呼和浩特 010000;2.全国畜牧总站,北京 100125)
摘要:对胀果甘草(Glycyrrhiza inflata Batalin)、刺果甘草(Glycyrrhiza pallidiflora Maxim)、甘肃棘豆(Oxytro-
pis kansuensis Bunge)、镰形棘豆(Oxytropis falcata Bge)和密花棘豆(Oxytyopis imbricata Kom)5种豆科牧草进
行萌发特性研究,采用打破硬实的方法如划破种皮、98%浓硫酸对种子处理,以期探讨其适宜的发芽条件。结果表
明:通过切破种皮和浓硫酸处理可以有效地解除种子硬实。胀果甘草和甘肃棘豆分别经过98%的浓硫酸处理20
min和5min后,发芽率各自达到69%和75%(P<0.05);刺果甘草经过划破种皮,发芽率达到93%,是供试牧草种
子中发芽率最高的;镰形棘豆和密花棘豆的适宜处理方法都是切破种皮,发芽率分别达到了78%和77%(P<
0.01);对于5种牧草种子的温度条件,除了密花棘豆为30℃,其他4种均在20℃以下。
关键词:豆科牧草;种子;萌发;硬实
中图分类号:Q945.34;S567.71    文献标识码:A     文章编号:1007-0435(2012)02-0342-06
Effects of Different Treatments on Germination Characteristics
of Five Legume Forage Seeds
JIA Juan1a,LIU Fang2a*,SU Hong-tian2,LI Qing-feng1,YAN Min2
(1.Inner Mongolia Agriculture University,Hohhot,Inner Mongolia 010001,China;
2.National Animal Husdandry Service,Beijing 100125,China)
Abstract:Five legume forages(Glycyrrhiza inflata,Glycyrrhiza pallidiflora,Oxytropis kansuensis,
Oxytropis falcata,Oxytyopis imbricata)were investigated in this study.Different scarification methods
(cutting seed coats or immersing seeds with 98%sulfuric acid)for breaking seed dormancy were used.Re-
sults indicated that both impermeability and mechanical barrier of seed coat were key factors limiting seed
germination.The germination rates of Glycyrrhiza inflata and Oxytropis kansuensis seeds were signifi-
cantly improved with cutting seed coats or immersing in 98%sulfuric acid.The germination rates of Gly-
cyrrhiza inflata and Oxytropis kansuensi reached 69%and 75%after immersing 98%sulfuric acid for 20
min or 5min,respectively.The highest germination rate(93%)in Glycyrrhiza pallidiflora was obtained
with seed coat pierced.Cutting seed coat was the optimal breaking seed dormancy method for both Oxyt-
ropis falcata and Oxytyopis imbricata and the 78%and 77%germination rates were obtained,respective-
ly.The optimal temperature was at 30℃for Oxytyopis imbricata seed germination and under 20℃for
other four tested seeds germinations.
Key words:Leguminous forage;Seeds;Germination;Dormancy
  我国是草种质资源丰富的国家,大量优良的野
生牧草种质资源是育种的基础。甘草属(Glycyr-
rhiza Fisch.)植物不仅是优良的饲用植物,其茎可
作为优质牧草应用于畜牧业,且被广泛应用于医药、
食品和日用化工领域。近年来,由于甘草(Glycyr-
rhiza uralensis)应用范围扩大,需求量增加,加剧了自
然资源的枯竭。为解决这一问题,各地都在进行人工
栽培[1]。作为甘草繁殖材料的种子,由于种皮坚硬,水
分很难透过,发芽率较低[2]。未加处理的甘草种子
发芽率不到20%,也有报道称发芽率不到10%[3~6]。
收稿日期:2011-10-25;修回日期:2011-12-30
基金项目:公益性行业(农业)科研专项“草原虫害监测预警及防控技术研究与示范”(201003079)资助
作者简介:贾娟(1987-),女,内蒙古临河人,硕士研究生,研究方向为牧草种子生理生化,E-mail:584440172@qq.com;刘芳(1971-),女,内
蒙古包头人,畜牧师,硕士,主要从事牧草种质资源保护和草产品质检工作,E-mail:Liufang011@sina.com;a并列第一作者a
represents that JIA JUAN and LIU Fang contributed equaly to this work as co-first authors;*通信作者 Author for correspon-
dence
第2期 贾娟等:不同处理方法对5种豆科牧草种子萌发特性的影响
  另外,棘豆属(Oxytropis)植物属于3大被子植物
之一的豆科(Leguminosae)[7],多有毒性,牲畜采食后
往往引起中毒甚至死亡,给畜牧业造成极大损失,关
于其毒性成分及中毒机理至今尚未明确[8]。该属植
物虽有毒性,但也有一定的药用价值,尤其在藏药中
称为草药之王。所以该属植物具有的活性特征是双
重性的[9]。从现有资料发现,对棘豆属药用植物药理
作用的研究非常缺乏,该属植物是否可作为固沙植物
的研究等也有待于相关专业人士去进行[10,11],而棘豆
属萌发特性方面的研究尚未见报道。
本研究针对影响甘草属和棘豆属中的胀果甘草
(Glycyrrhiza inflata Batalin)、刺果甘草(Glycyr-
rhiza pallidiflora Maxim)、甘肃棘豆(Oxytropis
kansuensis Bunge)、镰形棘豆(Oxytropis falcata
Bge)和密花棘豆(Oxytyopis imbricata Kom)5种
豆科牧草种子萌发的关键因素硬实现象进行了相应
的破除硬实处理,以期找到其最适的萌发条件,为今
后其他方面的研究提供参考依据。
1 材料与方法
1.1 材料、仪器和试剂
供试种子均来自国家草种质资源中心库,为不
同时期采集于我国不同地区的野生豆科草种,经干
燥后储存于中心库。采集地点、时间及原始发芽率
如表1所示。
表1 5种供试豆科植物种子来源
Table 1 Source of five tested leguminous seeds
种名
Chinese
name
学名
Scientific
name
采集年份
Colecting
time
采集地点
Colecting
site
原始发芽率
Original
germination rate/%
原始硬实率
Original
hardseed rate/%
入库年份
Storage
time
胀果甘草 Glycyrrhiza inflata  2005 新疆 Xinjiang  34  53  2006
刺果甘草 Glycyrrhiza pallidiflora  2009 吉林Jilin  4  87  2010
甘肃棘豆 Oxytropis kansuensis  2002 甘肃 Ganshu  9  74  2004
镰形棘豆 Oxytropis falcata  2003 甘肃 Ganshu  12  57  2005
密花棘豆 Oxytyopis imbricata  2007 甘肃 Ganshu  11  89  2009
  主要仪器为冷藏箱、培养箱、小刀和培养皿;所
用试剂为98%浓硫酸。
1.2 试验方法
各处理均采用纸上(TP)发芽,每个处理50粒
种子,重复3次。光照条件为8h光照+16h黑暗。
1.2.1 直接置于不同温度培养箱中发芽 将5种
草种分别用蒸馏水湿润后不作其他处理,分别置于
不同温度(20℃,25℃,30℃,20~30℃)培养箱中
进行发芽率测定。
1.2.2 擦破种皮后置于不同温度培养箱中发芽 
用小刀划破种皮后将种子置于不同温度(20℃,
25℃,30℃,20~30℃)培养箱中进行发芽率测定。
1.2.3 浓硫酸处理不同时间的发芽率 将种子用
浓硫酸(98%)分别浸泡5,15,20,40和60min后,
用清水冲洗干净种子,置于20℃培养箱中进行发芽
率测定。
1.3 观察与统计
种子移入培养箱后第3d开始记录,每24h记
录1次,统计每日正常发芽粒数,直至无萌发种子出
现为止。在末次计数中参照《牧草种子检验规
程》[12]和《国际种子检验规程(2001)》[13]中类似植物
的鉴定标准将种子和幼苗归类[14],记录正常幼苗
数、不正常幼苗数、硬实种子数和死种子数。
种子发芽率的测定:发芽率 (%)=n/N×
100%。式中:n为发芽种子粒数,N 为供试种子数;
初次计数时间是适宜条件下种子达到50%发芽率
的天数[15],末次计数时间是适宜条件下,种子发芽
率超过80%后,再延后7d的时间。
1.4 数据处理
用Excel 2003整理观察记录5种豆科牧草种
子的每日发芽数、发芽时间和发芽率[15]。用统计软
件SPSS 17.0进行4种不同处理对种子发芽率影响
的差异显著性分析。
2 结果与分析
2.1 种子的萌发特性和硬实率
2种甘草属和3种棘豆属植物中,除了胀果甘
草在20~30℃变温条件下的发芽率比较高以外,其
他4种植物种子的发芽率普遍较低而且硬实率较
高。其中胀果甘草的硬实率在23%~27%之间,镰
343
草 地 学 报 第20卷
形棘豆在60%左右,其他3种种子的硬实率均在
80%左右,可见这几种种子存在着严重的硬实现象,
因此提高发芽的关键因素是破除硬实。5种供试种
子发芽率和硬实率的情况分别如图1和图2所示。
2.2 不同温度条件下擦破种皮对发芽率的影响
由图3及表2可知,经切破种皮处理后,不同温
度条件下种子发芽率均有不同程度的提高,硬实率
相应的下降,都降至0%。不同种子不同温度条件
下最高发芽率为:在20~30℃变温条件下,甘肃棘
豆发芽率由9%提高到59%,硬实率由84%降至
0%;在25℃条件下镰形棘豆发芽率由18%提高到
78%,硬实率由56%降至0%;胀果干草发芽率由
49%提高到62%,硬实率由27%降至0%;刺果干
草发芽率由13%提高到93%,硬实率由82%降至
0%;在30℃条件下,密花棘豆发芽率由7%提高到
77%,硬实率由81%降至0%。所以,切破种皮对提
高种子发芽率的影响非常显著(P<0.05)。
2.3 98%浓硫酸处理不同时间对发芽率的影响
5种植物种子经过浓硫酸处理不同时间后在最
适温度的条件下发芽率都有明显的升高。其中最明
显的是甘肃棘豆在浓硫酸处理5min后,发芽率由
7%提高至75%,比机械擦破种皮发芽率高16%,之
后处理时间越长发芽率越低;密花棘豆发芽率由
9%提高至73%,比机械擦破种皮的处理方法低
4%;镰形棘豆经过浓硫酸处理20min后发芽率达
到最高,由18%提高到了74%,也低于机械破除种
皮处理;而胀果甘草经过浓硫酸处理20min后,发
芽率最高达69%;刺果甘草经过浓硫酸处理60min
后,发芽率最高达42%。不同时间的浓硫酸处理对
发芽率的影响详见表3。
由表3可知,经过浓硫酸处理后5种种子的发
芽率均有不同程度的变化。胀果甘草在浓硫酸处理
40min内,发芽率均有所提高,其中处理20min后
的发芽率最高(69%),而在处理60min后的发芽率
却有所下降。虽然用浓硫酸处理种子可以增加种皮
的通透性,使种子易于吸水膨胀,从而提高种子的发
443
第2期 贾娟等:不同处理方法对5种豆科牧草种子萌发特性的影响
图3 切破种皮前后供试种子在不同温度条件下发芽率变化
Fig.3 Germination rate of tested seeds after cutting seed coat at different temperatures
表2 切破种皮处理后5种供试种子发芽率
Table 2 Germination rate of tested seeds after cutting seed coat %
处理方法
Treatment
胀果甘草
Glycyrrhiza
inflata
刺果甘草
Glycyrrhiza
pallidiflora
甘肃棘豆
Oxytropis
kansuensis
镰形棘豆
Oxytropis
falcata
密花棘豆
Oxytyopis
imbricata
切破种皮Cutting seed coat 20℃ 62a 93a 27c  78a 70b
对照CK 20℃ 49c  13c  7c  18c  9c
切破种皮Cutting seed coat 20~30℃ 60a 86b  59a 62b  63c
对照CK 20~30℃ 55c  9c  9c  16c  9c
切破种皮Cutting seed coat 25℃ 46b  84b  59a 73a 75a
对照CK 25℃ 45c  7c -- 12c  10c
切破种皮Cutting seed coat 30℃ 29c  76c  56b  55c  77a
对照CK 30℃ -- 14c -- 16c  7c
  注:各列间不同小写字母间代表0.05水平下差异显著,下同
Note:Different smal letters in each column mean significant differences at the 0.05level,the same as below
表3 浓硫酸处理后5种供试种子发芽率
Table 3 Germination rate of tested seeds after immersing in 98%sulfuric acid %
处理时间
Treated
time
胀果甘草
Glycyrrhiza
inflata
刺果甘草
Glycyrrhiza
pallidiflora
甘肃棘豆
Oxytropis
kansuensis
镰形棘豆
Oxytropis
falcata
密花棘豆
Oxytyopis
imbricata
5分钟5min  61a 9c  75a 55c  73a
15分钟15min  65a 11c  68a 62b  64b
20分钟20min  69a 14c  63b  74a 58c
40分钟40min  65a 23c  57c  62b  54c
60分钟60min  42c  42a 53c  47c  30c
对照(0分钟)CK(0min) 49c  13c  7c  18c  9c
芽势和发芽率[16]。但是由于浓硫酸属于有害性液
体,所以如果对种子处理时间长会损害到种子的胚,
导致种子的死亡率和不正常率也很高。因此,在处
理种子的过程中需谨慎。对于刺果甘草,由表3可
知浓硫酸处理的时间越长会越好,在浓硫酸处理15
min之内的发芽率反而会比未处理时的发芽率低。
3种棘豆属的种子在浓硫酸处理前后有明显的差
异,甘肃棘豆和密花棘豆在浓硫酸处理5min是最
有利的,发芽率均达到了74%左右,如果处理时间
超过5min,对种子的发芽会起到相反的效果;只有
镰形棘豆在经过浓硫酸处理20min后发芽率还可
以达到74%,但20min是最大限度。
3 讨论与结论
3.1 硬实是影响5种供试种子萌发的主要因素
硬实是植物中普遍存在的现象。从本试验图2
中可以明显的看出供试种子存在着严重的硬实现
象。硬实种子的种皮具有发达的角质层和广泛发育
的栅状细胞和骨状石细胞(特别是种脐的细微机
543
草 地 学 报 第20卷
构),透水和透气性极弱,导致发芽缓慢和发芽不整
齐。硬实性因植物种类、成熟度、成熟条件和贮藏时
间不同而有很大变化[17]。针对这种硬实现象,根据
部分资料显示有多种破除硬实的方法,大体可分为
物理、化学和生物3类,这些方法通过改善种皮的通
透性,促进气体交换和水分进入,消除机械限制而促
进萌发。物理方法有机械损伤、低温和高温处理以
及干湿交错处理等;化学方法有酸蚀、碱液浸泡和有
机溶剂处理等[18]。
综合判断出供试种子的硬实现象是阻碍种子萌
发的主要问题,种皮的透性和机械束缚作用是抑制
萌发的主要因子,其他限制因子还需要进一步的研
究。但是,这一处理方法还需依据供试种子的数量
而分情况采取。种子数量少时,可以用刀刻法在种
壳上割痕,或在砂纸上摩擦,或在研钵中将种子与粗
砂混匀研磨,只要避开胚轴和胚根的部位,造成种皮
损伤则可;数量多时则以机械摩擦为宜,通常用小型
种子摩擦机或电动磨米机去除种皮。碾磨程度以破
皮而不伤种仁为好[18]。许多研究表明,机械损伤种
皮是处理硬实最有效的方法[19~22]。
用硫酸和硝酸等强酸处理可以腐蚀局部种皮,
打破栅栏组织的屏障,使种壳变薄并消除珠孔等部
位的堵塞物,增大种皮的透性[23,24]。尽管酸处理在
解除硬实性种子休眠中有诸多优点,但也存在着一
些问题:处理时间较难控制,特别是对于种皮较薄的
种子,如果处理时间过长,就会损伤种子;处理后冲
洗要彻底,不然易造成酸害;未处理好的硬粒种子要
反复处理,虫害较严重但仍有萌发能力的种子,硫酸
容易通过伤口使这些种子丧失发芽能力[18]。因此,
浓硫酸的适度处理时间应使种皮结构受到破坏而又
未伤及胚时为最好,此时可增加种皮通透性,有利于
种子吸水膨胀而提高牧草种子的发芽率[25]。本试
验中5种供试种子经过浓硫酸处理后发芽率都有了
不同程度的变化。其中,与切破种皮的处理方法综
合比较,胀果甘草和甘肃棘豆发芽率的变化要相对
显著一些(P<0.05)。胀果甘草和甘肃棘豆分别用
浓硫酸处理20min和5min后,发芽率都达到了本
次试验中2种处理后的较高发芽率。同时,本试验
表明硫酸处理能有效破除几种供试种子的休眠。但
其效果则因物种、处理时间不同而异。如刺果甘草
种子经硫酸处理40min时,硬实率仍然较高,不正
常种苗和死种子的数量也极少,都不超过5%,处理
时间越长效果越好,本试验中甚至做到处理时间
140min后,发芽率达到了89%,由于不正常达到了
8%,要高于机械损伤达到最高发芽率93%时的不
正常种苗数,所以本试验中选取机械损伤为刺果甘
草的最佳处理办法。但是其他4种植物种子经硫酸
处理40min即形成大量的死种子和不正常种苗,这
可能是因为刺果甘草种子较大,种皮相对较厚,较耐
酸蚀所致。在许多其他的报道中都没有看到过某种
种子可以经过浓硫酸处理超过1.5h的,孙群等报
道硫酸处理60min可使甘草种子的发芽率达到
80.7%[10];王秀英等报道硫酸处理70min可使甘
草种子的发芽率达到90.04%[26];形成这种差异的原
因:一方面可能是研究所采用试验材料的差异所造
成,另一方面可能与处理时的具体操作有关,尤其是
硫酸处理完毕后是否用水完全洗去残留的酸液,对结
果可能影响较大。
表4 2种有效处理后5种供试种子发芽率
Table 4 Germination rate of tested seeds with two different treatments %
处理方法(20℃)
Treatment
胀果甘草
Glycyrrhiza
inflata
刺果甘草
Glycyrrhiza
pallidiflora
甘肃棘豆
Oxytropis
kansuensis
镰形棘豆
Oxytropis
falcata
密花棘豆
Oxytyopis
imbricata
对照CK  49c  13c  7c  18c  9c
切破种皮处理
Cutting seed coat
62a 93a 27c  78a 70a
98%浓硫酸处理
Immersing in 98%sulfuric acid
69a 42c  75a 74a 64c
3.2 供试种子的适宜萌发条件
经过破除硬实后在各恒温条件下和变温条件下
相比较可以发现(表4),5种种子各在恒温条件
20℃和30℃下发芽率较高。切破种皮以及用98%
的浓硫酸处理为最佳处理方法。但是浓硫酸属于有
害性液体,处理时间如果过于长会对种子的胚造成
极大的损伤从而使死亡率和不正常率提高很多,如
甘肃棘豆和镰形棘豆经过98%的浓硫酸处理60
min后死亡率及不正常率之和都达到了50%左右,
所以用浓硫酸处理时一定要控制好处理时间的适宜
643
第2期 贾娟等:不同处理方法对5种豆科牧草种子萌发特性的影响
度。5种供试种子的适宜萌发条件分别为:在20℃
恒温条件下,胀果甘草经98%浓硫酸处理20min;
刺果甘草和镰形棘豆均为切破种皮;甘肃棘豆经
98%浓硫酸处理5min;密花棘豆切破种皮后在
30℃恒温发芽箱中发芽。
3.3 供试种子的发芽率与入库时的状况密切相关
供试种子入库保存时间最长种子已达6年,随
着保存时间的延长,种子的生活力会下降。入库时
种子的质量状况如种子成熟的程度、收获时的天气
状况及是否存在机械损伤等都会对种子的发芽率产
生影响。同时,贮藏条件也是影响种子发芽的另一
重要因素,种子干燥后在密闭容器中贮藏可延长其
寿命[27]。种质管理者应注意种子入库前记录的相
关信息,方便今后进一步的研究。
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(责任编辑 刘云霞)
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