全 文 ：植物科学学报　 ２０１４ꎬ ３２(２): １８１~１８８
Ｐｌａｎｔ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｊｏｕｒｎａｌ
　 　 ＤＯＩ: １０􀆰 ３７２４ / ＳＰ􀆰 Ｊ􀆰 １１４２􀆰 ２０１４􀆰 ２０１８１
４种地衣提取物抗氧化和抗肿瘤活性研究
王 慧ꎬ 王启林ꎬ 田 娇ꎬ 党悦方ꎬ 刘建利ꎬ 李 珊ꎬ 尚 姣ꎬ 房敏峰∗
(西部资源生物与现代生物技术教育部重点实验室ꎬ 西北大学生命科学学院ꎬ 西安 ７１００６９)
摘　 要: 本研究初步评估了 ４种药用地衣(太白茶、 金刷把、 黑石耳、 红石耳)不同溶剂提取物的抗氧化活性及其
粗多糖的抗肿瘤活性ꎮ 通过测定清除 ＤＰＰＨ自由基、 羟基自由基和还原能力ꎬ 对 ４种地衣不同溶剂提取物进行体
外抗氧化活性评价ꎬ 结果表明ꎬ 金刷把和黑石耳的甲醇提取相清除 ＤＰＰＨ 自由基能力高于其它溶剂提取相ꎬ 其
ＩＣ５０值(半抑制浓度)分别为 ０􀆰 ７８４７ ｍｇ / ｍＬ和 ０􀆰 ５５９５ ｍｇ / ｍＬꎻ 黑石耳甲醇提取相( ＩＣ５０ ＝ ０􀆰 ５７４７ ｍｇ / ｍＬ)清
除羟基自由基能力优于阳性对照物 Ｖｃ( ＩＣ５０ ＝ ０􀆰 ６１２６ ｍｇ / ｍＬ)ꎻ 黑石耳氯仿提取相、 金刷把乙酸乙酯提取相和
太白茶甲醇提取相清除羟基自由基能力与 Ｖｃ相当ꎻ ４种地衣甲醇提取相还原能力均较强ꎬ 且与其浓度呈较好的
量效关系ꎮ 利用 ＭＴＴ法分析 ４种地衣多糖对 ＨｅＬａ、 Ａ３７５和 Ｈｅｐ Ｇ２细胞体外生长增殖的抑制作用ꎬ 结果显示
黑石耳粗多糖对 Ｈｅｐ Ｇ２细胞的抑制作用较为突出( ＩＣ５０ ＝ ０􀆰 ２５６７ ｍｇ / ｍＬ)ꎬ 而金刷把抑制 ＨｅＬａ细胞的生长增
殖作用最强ꎬ 其 ＩＣ５０值为 ０􀆰 ４３３２ ｍｇ / ｍＬꎮ
关键词: 金刷把ꎻ 太白茶ꎻ 黑石耳ꎻ 红石耳ꎻ 抗氧化ꎻ 抗肿瘤
中图分类号: Ｑ９４６􀆰 ８　 　 　 　 　 文献标识码: Ａ　 　 　 　 　 文章编号: ２０９５￣０８３７(２０１４)０２￣０１８１￣０８
　 　 　 收稿日期: ２０１３￣０８￣１３ꎬ 修回日期: ２０１３￣０９￣１０ꎮ
　 基金项目: 国家自然科学基金(Ｊ１２１００６３)ꎻ 教育部重点实验室开放基金(ＺＳ１２０１２)ꎻ 中医药行业科研专项(２０１２０７００２)ꎮ
　 作者简介: 王慧(１９８８－)ꎬ 女ꎬ 硕士研究生ꎬ 主要从事中药资源生态研究(Ｅ￣ｍａｉｌ: ｘｂｄｘｙａｙａ＠１２６􀆰 ｃｏｍ)ꎮ
　 ∗通讯作者(Ａｕｔｈｏｒ ｆｏｒ ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｅｎｃｅ􀆰 Ｅ￣ｍａｉｌ: ｆｆｆ８８５＠１２６􀆰 ｃｏｍ)ꎮ
Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ａｎｄ Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ Ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｏｆ Ｅｘｔｒａｃｔｓ
Ｄｅｒｉｖｅｄ ｆｒｏｍ Ｆｏｕｒ Ｋｉｎｄｓ ｏｆ Ｌｉｃｈｅｎ
ＷＡＮＧ Ｈｕｉꎬ ＷＡＮＧ Ｑｉ￣Ｌｉｎꎬ ＴＩＡＮ Ｊｉａｏꎬ ＤＡＮＧ Ｙｕｅ￣Ｆａｎｇꎬ ＬＩＵ Ｊｉａｎ￣Ｌｉꎬ
ＬＩ Ｓｈａｎꎬ ＳＨＡＮＧ Ｊｉａｏꎬ ＦＡＮＧ Ｍｉｎ￣Ｆｅｎｇ∗
(Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ｒｅｓｏｕｒｃｅ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ａｎｄ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｉｎ Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｃｈｉｎａꎬ Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ
Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓꎬ Ｎｏｒｔｈｗｅｓｔ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬ Ｘｉ’ａｎ ７１００６９ꎬ Ｃｈｉｎａ)
Ａｂｓｔｒａｃｔ: Ｔｈｅ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ａｎｄ ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｏｆ ｖａｒｉｏｕｓ ｅｘｔｒａｃｔｓ ａｎｄ ｃｒｕｄｅ ｐｏｌｙｓａｃ￣
ｃｈａｒｉｄｅｓ ｄｅｒｉｖｅｄ ｆｒｏｍ ｆｏｕｒ ｋｉｎｄｓ ｏｆ ｍｅｄｉｃｉｎａｌ ｌｉｃｈｅｎ ｗｅｒｅ ｅｖａｌｕａｔｅｄ ｐｒｅｌｉｍｉｎａｒｉｌｙ ｉｎ ｔｈｉｓ ｓｔｕｄｙ.
Ｔｈｅ ａｎｔｉｏｘｉｄａｔｉｏｎ ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｂｙ ＤＰＰＨ ｒａｄｉｃａｌ￣ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇꎬ ＯＨ􀅰 ｒａｄｉｃａｌ￣
ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇꎬ ａｎｄ ｒｅｄｕｃｉｎｇ ｐｏｗｅｒ. Ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｍｅｔｈａｎｏｌ ｅｘｔｒａｃｔｓ ｏｆ Ｌｅｔｈａｒｉｅｌｌａ
ｃｌａｄｏｎｉｏｉｄｅｓ ａｎｄ Ｕｍｂｉｌｉｃａｒｉａ ｔｏｒｎａｔａ ｈａｄ ｈｉｇｈｅｒ ＤＰＰＨ ｒａｄｉｃａｌ￣ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ ａｂｉｌｉｔｙ ( ＩＣ５０ ＝
０􀆰 ７８４７ ｍｇ / ｍＬ ａｎｄ ＩＣ５０ ＝ ０􀆰 ５５９５ ｍｇ / ｍＬꎬ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ) ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｏｆ ｏｔｈｅｒ ｅｘｔｒａｃｔｓꎻ ｔｈｅ ＯＨ􀅰
ｒａｄｉｃａｌ￣ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ ｃａｐａｃｉｔｙ ｏｆ ｔｈｅ ｍｅｔｈａｎｏｌ ｅｘｔｒａｃｔ ｏｆ Ｕｍｂｉｌｉｃａｒｉａ ｔｏｒｎａｔａ (ＩＣ５０ ＝ ０􀆰 ５７４７ ｍｇ/ ｍＬ)
ｗａｓ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ Ｖｃ ( ＩＣ５０ ＝ ０􀆰 ６１２６ ｍｇ / ｍＬ)ꎻ ｔｈｅ ＯＨ􀅰 ｒａｄｉｃａｌ￣ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ ｃａｐａｃｉｔｙ ｏｆ ｔｈｅ
ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ ｅｘｔｒａｃｔ ｏｆ Ｕｍｂｉｌｉｃａｒｉａ ｔｏｒｎａｔａꎬ ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ ｅｘｔｒａｃｔ ｏｆ Ｌｅｔｈａｒｉｅｌｌａ ｃｌａｄｏｎｉｏｉｄｅｓꎬ ａｎｄ
ｍｅｔｈａｎｏｌ ｅｘｔｒａｃｔ ｏｆ Ｔｈａｍｎｏｌｉａ ｓｕｂｕｌｉｆｏｒｍｉｓ ｗｅｒｅ ｅｑｕａｌ ｔｏ Ｖｃꎻ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｓ ｄｅｒｉｖｅｄ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｆｏｕｒ
ｌｉｃｈｅｎｓ ａｌｌ ｈａｄ ａ ｃｅｒｔａｉｎ ｄｅｇｒｅｅ ｏｆ ｒｅｄｕｃｉｎｇ ｐｏｗｅｒꎬ ｗｈｉｃｈ ｗｅｒｅ ｐｏｓｉｔｉｖｅｌｙ ｃｏｒｒｅｌａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｅ
ｑｕａｌｉｔｙ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｓ. Ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ ｏｆ ｔｈｅ ｆｏｕｒ ｌｉｃｈｅｎｓ ｅｘｈｉｂｉｔｅｄ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ
ａｎｔｉｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ａｇａｉｎｓｔ ＨｅＬａꎬ Ａ３７５ꎬ ａｎｄ Ｈｅｐ Ｇ２ ｃｅｌｌｓ ｂｙ ｔｈｅ ＭＴＴ ｍｅｔｈｏｄ. Ｔｈｅ ｃｒｕｄｅ
ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ｏｆ Ｕｍｂｉｌｉｃａｒｉａ ｔｏｒｎａｔａ ｅｘｈｉｂｉｔｅｄ ｔｈｅ ｍｏｓｔ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ａｎｔｉｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ
ａｇａｉｎｓｔ Ｈｅｐ Ｇ２ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｔｈｅ ｆｏｕｒ ｌｉｃｈｅｎｓ ( ＩＣ５０ ＝ ０􀆰 ２５６７ ｍｇ / ｍＬ)ꎻ ｔｈｅ ｃｒｕｄｅ ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ｏｆ
Ｌｅｔｈａｒｉｅｌｌａ ｃｌａｄｏｎｉｏｉｄｅｓ ｅｘｈｉｂｉｔｅｄ ｔｈｅ ｍｏｓｔ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ａｎｔｉｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ａｇａｉｎｓｔ ＨｅＬａ
ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｔｈｅ ｆｏｕｒ ｌｉｃｈｅｎｓ ( ＩＣ５０ ＝ ０􀆰 ４３３２ ｍｇ / ｍＬ) .
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ: Ｌｅｔｈａｒｉｅｌｌａ ｃｌａｄｏｎｉｏｉｄｅｓꎻ Ｔｈａｍｎｏｌｉａ ｓｕｂｕｌｉｆｏｒｍｉｓꎻ Ｕｍｂｉｌｉｃａｒｉａ ｔｏｒｎａｔａꎻ Ｕｍｂｉｌｉｃａｒｉａ
ｈｙｐｏｃｏｃｃｉｎｅａꎻ Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ａｃｔｉｖｉｔｙꎻ Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ ａｃｔｉｖｉｔｙ
　 　 地衣是一类菌藻共生的低等植物ꎬ 为世界广布
种ꎬ 约有 ５００ 余属 ２６０００ 种ꎬ 我国记录有 ２３２ 属
１７６６种ꎮ 地衣入药在我国具有悠久的历史ꎬ «诗
经»中就有关于松萝药用的记载ꎮ 据各种本草及有
关资料记载ꎬ 入药地衣已有 ２００ 种左右ꎮ 秦岭山
区蕴藏着丰富的地衣资源ꎬ 如红腹石耳、 长松萝、
金丝带等ꎬ 并具有重要的研究价值ꎮ 太白山药用地
衣在陕西民间应用广泛ꎬ 其中太白茶具有清热解
毒、 安神的功效ꎬ 主治咽喉疼痛、 腹痛、 消化不
良、 中暑、 阴虚潮热、 肺热咳嗽、 神经衰弱、 高血
压等症ꎻ 金刷把具有镇静、 消炎、 止痛的功效ꎬ 主
治精神分裂、 癫痫、 神经衰弱、 头晕目眩、 跌打损
伤等症ꎻ 黑石耳健胃消食、 理气止痛ꎬ 主治消化不
良等症ꎻ 红石耳健胃消食、 利水消胀[１]ꎬ 主治消化
不良、 腹疼、 痢疾、 小儿疳积、 妇女白带异常等症ꎮ
现代药理研究表明ꎬ 氧化损伤是引起机体衰
老、 老年痴呆、 帕金森症、 心脑血管疾病以及癌症
等多种疾病的重要原因[２ꎬ３]ꎮ 地衣主要含酚酸和多
糖两大类化学成分[４]ꎬ 在抗肿瘤、 抗氧化、 抗病
毒、 抑菌方面活性显著[５]ꎮ 而且地衣多糖还有良好
的抗肿瘤活性[６]ꎮ 张博等[７]采用细胞膜色谱结合
ＭＴＴ法发现ꎬ 金刷把乙醚萃取部位所得结晶 Ｇ 对
ＨｅＬａ细胞增殖具有抑制作用ꎬ ＩＣ５０为 １８􀆰 ４９ ｍｇ / Ｌꎻ
靳菊情等[８]研究发现ꎬ 黑石耳粗多糖对羟基自由
基和超氧阴离子自由基有较强的清除作用ꎬ ＥＣ５０
值分别为 １􀆰 ７２ ｍｇ / ｍＬ 和 ２􀆰 １２ ｍｇ / ｍＬꎮ 太白山
药用地衣具有较高的开发利用价值ꎬ 但有关其抗肿
瘤和抗氧化活性研究报道较少ꎬ 故本实验采用系统
预试法对太白山 ４ 种药用地衣(太白茶、 金刷把、
黑石耳和红石耳)不同溶剂提取物进行了抗氧化和抗
肿瘤活性分析ꎬ 以期为地衣资源开发利用提供依据ꎮ
１　 材料
１􀆰 １　 实验材料
４种药用地衣材料均采自太白山ꎬ 经西北大学
王玛丽教授鉴定ꎬ 太白茶为不完全地衣类植物雪地
茶 Ｔｈａｍｎｏｌｉａ ｓｕｂｕｌｉｆｏｒｍｉｓ (Ｅｈｒｈ.) Ｗ. Ｃｕｌｂ. 的枝
状体ꎻ 金刷把为梅衣科植物金丝刷 Ｌｅｔｈａｒｉｅｌｌａ ｃｌａ￣
ｄｏｎｉｏｉｄｅｓ (Ｎｙｌ.) Ｋｒｏｇ 的枝状体ꎻ 黑石耳为皮果
衣科植物裂叶石耳 Ｕｍｂｉｌｉｃａｒｉａ ｔｏｒｎａｔａ ( Ａｃｈ.)
Ｄｅｌ. 的叶状体ꎻ 红石耳为石耳科植物红腹石耳
Ｕｍｂｉｌｉｃａｒｉａ ｈｙｐｏｃｏｃｃｉｎｅａ (Ｊａｔｔａ) Ｌｌａｎｏ的叶状体ꎮ
细胞株 ＨｅＬａ、 Ｈｅｐ Ｇ２和 Ａ３７５由第四军医大
学提供ꎮ
１􀆰 ２　 仪器与试剂
Ｕ￣３３１０紫外￣可见分光光度计(岛津)ꎻ μＱｕａｎｔ
酶联免疫标定仪(美国 Ｂｉｏ￣Ｔｅｋ)ꎻ 没食子酸对照
品购于成都普思生物科技有限公司 (批号:
０８０８２９０１)ꎻ 葡萄糖对照品购于中国药品生物制
品检定所(批号: １１０８３３￣２００９０４)ꎻ 其余试剂均
为分析纯ꎮ
２　 方法
２􀆰 １　 ４种地衣粗多糖及不同溶剂提取物的制备
２􀆰 １􀆰 １　 ４种地衣粗多糖的制备
分别称取太白茶、 金刷把、 黑石耳和红石耳的
干燥样品粉末 １ ｇꎬ 加入适量氯仿索氏提取至提取
液无色ꎻ 药渣用沸水连续提取 ２ 次ꎬ 每次 ２ ｈꎮ 滤
液合并后浓缩至 １０ ｍＬꎮ 加入乙醇使之沉淀并放入
冰箱静置 ２４ ｈꎬ 离心ꎻ 沉淀用无水乙醇、 丙酮分
别洗涤 ３ 次ꎬ Ｓｅｖａｇ 法脱蛋白ꎬ 即得到 ４ 种地衣
的粗多糖提取物ꎮ
２􀆰 １􀆰 ２　 ４种地衣不同溶剂提取物的制备
分别称取太白茶、 金刷把、 黑石耳和红石耳的
干燥样品粉末 １􀆰 ０ ｇꎬ 依次加入氯仿、 乙酸乙酯、
甲醇、 蒸馏水各 １００ ｍＬꎬ 梯度回流提取 １ ｈꎻ 提
取液减压蒸干并复溶于甲醇中ꎬ 即得到 ４种地衣的
氯仿提取物、 乙酸乙酯提取物、 甲醇提取物和水
提物ꎮ
２８１ 植 物 科 学 学 报 第 ３２卷　
２􀆰 ２　 ４种地衣不同溶剂提取物中粗多糖及总酚酸
含量测定
２􀆰 ２􀆰 １　 粗多糖中总糖含量测定
参照中华人民共和国国家标准 ＧＢ / Ｔ１５６７２￣
２００９“食用菌中总糖含量测定方法”对 ４ 种地衣不
同溶剂提取物中的总糖含量进行测定ꎮ 以葡萄糖为
对照品(１ ｍｇ / ｍＬ)制定标准曲线ꎬ 得到回归方程
ｙ ＝ ４􀆰 ４０８ｘ ＋ ０􀆰 １１６２ ( ｒ ＝ ０􀆰 ９９９６)ꎮ
２􀆰 ２􀆰 ２　 总酚酸含量测定
采用 Ｆｏｌｉｎ酚法对 ４ 种地衣不同溶剂提取物中
的总酚酸含量进行测定[９]ꎮ 以没食子酸为对照品
(０􀆰 ２ ｍｇ / ｍＬ)ꎬ 在 Ｕ￣３３１０ 紫外￣可见分光光度计
(岛津)上 ７６６ ｎｍ 处测定吸光值ꎬ 得到回归方程
ｙ ＝ ０􀆰 １４８ｘ ＋ ０􀆰 ００５３ ( ｒ ＝ ０􀆰 ９９９７)ꎬ 其中 ｘ 为
总酚酸含量(μｇ / ｍＬ)ꎬ ｙ为吸光度ꎻ 取各提取物样
品溶液 ０􀆰 ２ ｍＬꎬ 加入福林酚反应试剂进行反应ꎬ
分别测定其吸光值ꎬ 并根据标准曲线计算样品中总
酚酸含量ꎮ
２􀆰 ３　 ４种地衣粗多糖及不同溶剂提取物抗氧化活
性测定
２􀆰 ３􀆰 １　 清除 ＤＰＰＨ自由基能力的测定
采用 Ｍｏｈｓｅｎ法[１０]对 ４ 种地衣粗多糖及不同
溶剂提取物的抗氧化活性进行测定ꎮ 分别量取各样
品溶液 １ ｍＬ 于试管中ꎬ 并加入 ０􀆰 １ ｍｍｏｌ / Ｌ 的
ＤＰＰＨ甲醇溶液 ３􀆰 ０ ｍＬꎬ 充分混匀ꎬ 室温静置
２０ ｍｉｎ 后于 ５１５ ｎｍ处测定其吸光值ꎻ 以维生素 Ｃ
(Ｖｃ)和 ２ꎬ ６￣二叔丁基对甲苯酚(ＢＨＴ)作阳性对
照ꎮ ＤＰＰＨ自由基清除率 ＝ [１－(Ａ１－ Ａ２) / Ａ０]×
１００％ꎬ 其中 Ａ１为反应体系吸光值ꎬ Ａ０为阴性对照
吸光值ꎬ Ａ２为样品不加反应试剂的吸光值ꎮ 采用
ＳＰＳＳ １９􀆰 ０软件进行非线性回归方程拟合ꎬ 计算
ＤＰＰＨ自由基被清除一半时所需的样品浓度ꎬ 即
ＩＣ５０值ꎮ
２􀆰 ３􀆰 ２　 清除羟基自由基能力的测定
参考 Ｔｉａｎ 等[１１]的 Ｆｅｎｔｏｎ 反应法对 ４ 种地衣
粗多糖及不同溶剂提取物清除羟基自由基能力进行
测定ꎮ 分别量取 ０􀆰 １ ｍｏｌ / Ｌ ＰＢＳ ( ｐＨ７􀆰 ４ ) 和
１􀆰 ５ ｍｍｏｌ / Ｌ邻二氮菲 １ ｍＬꎬ 并加入各样品溶液
１ ｍＬꎬ 混匀ꎬ 再加入 １􀆰 ５ ｍｍｏｌ / Ｌ ＦｅＳＯ４ １ ｍＬ 和
０􀆰 ０１％(Ｗ/ Ｗ)Ｈ２Ｏ２ ０􀆰 ５ ｍＬꎬ ３７℃ 孵育 １ ｈꎬ 然
后于５３６ ｎｍ处测定吸光值 Ａꎮ 羟基自由基清除
率 ＝ (Ａ０－ Ａ１) / (Ａ２－ Ａ１) × １００％ꎬ 式中 Ａ０为反
应体系吸光值ꎬ Ａ１为甲醇和反应试剂的吸光值ꎬ
Ａ２为甲醇和反应试剂的吸光值(反应试剂中 Ｈ２Ｏ
代替 Ｈ２Ｏ２)ꎮ 采用 ＳＰＳＳ １９􀆰 ０ 软件进行非线性回
归方程拟合ꎬ 计算羟基自由基被清除一半时所需样
品的浓度ꎬ 即 ＩＣ５０值ꎮ
２􀆰 ３􀆰 ３　 还原能力的测定
参照孙晓春和闫桂琴[１２]的方法对 ４ 种地衣粗
多糖及不同溶剂提取物的还原能力进行测定ꎮ 分别
取各样品溶液和 Ｖｃ 溶液 １􀆰 ０ ｍＬꎬ 并加入
０􀆰 ２ ｍｏｌ / Ｌ 磷酸缓冲液(ｐＨ６􀆰 ８)２􀆰 ５ ｍＬ 及 １％铁
氰化钾溶液 ２􀆰 ５ ｍＬꎬ 混匀ꎬ ５０℃ 水浴孵育
２０ ｍｉｎꎻ 待其冷却后加入 １０％ ＴＣＡ ２􀆰 ５ ｍＬꎬ
３０００ ｒ / ｍｉｎ离心 １０ ｍｉｎꎻ 取上清液 ２􀆰 ０ ｍＬꎬ 依次
加入蒸馏水 ２􀆰 ０ ｍＬ 和 ０􀆰 １％ 三氯化铁溶液
０􀆰 ５ ｍＬꎬ 混匀ꎬ 放置 １０ ｍｉｎ 后于 ７００ ｎｍ 处测定
吸光值ꎮ
２􀆰 ４　 ４种地衣粗多糖抗肿瘤活性的测定
将受试细胞 ＨｅＬａ、 Ｈｅｐ Ｇ２和 Ａ３７５分别接种
到含有 １０％胎牛血清的 ＲＰＭＩ １６４０ 培养液 (ｐＨ
７􀆰 ０ ~ ７􀆰 ５)中ꎬ 置 ３７℃ 恒温培养箱ꎬ 在 ５％ ＣＯ２
及饱和湿度的条件下传代培养ꎮ
采用 ＭＴＴ法对 ４ 种地衣粗多糖抗肿瘤活性进
行测定ꎮ 取对数生长期的受试细胞ꎬ 调整细胞密度
为 ５ × １０７ / Ｌꎬ 接种于 ９６ 孔板ꎮ 实验组加入不同
体积的受试样品溶液(１０ ｍｇ / ｍＬ)ꎬ 使最终质量浓
度分 别 为 ５、 １０、 ２０、 ５０、 １００、 ２００、 ４００、
８００ μｇ / ｍＬꎻ 同时设置对照组和调零孔ꎻ 每组设置
３个平行孔ꎮ 恒温培养 ４８ ｈ 后ꎬ 更换培养液ꎬ 并
逐孔加入 ２０ μＬ新配制的ＭＴＴ溶液(５ ｇ / Ｌ)ꎬ 继续
培养 ４ ｈꎬ 将上清液吸出ꎬ 弃去ꎬ 每孔加入 １５０ μＬ
ＤＭＳＯꎬ 震荡 １０ ｍｉｎ 后ꎬ 于 ４９０ ｎｍ 处测定吸光
值(Ａ)ꎮ 细胞抑制率 ＝ (１ － 实验组 Ａ 值 /对照组
Ａ０值) × １００％ꎬ 若抑制率为正值表示受试样品对
细胞生长增殖有抑制作用ꎬ 反之ꎬ 表示受试样品对
细胞生长增殖有促进作用[２]ꎮ
３　 结果与分析
３􀆰 １　 ４种地衣提取物中粗多糖及总酚酸的含量
分别采用苯酚￣硫酸法与 Ｆｏｌｉｎ酚法测定 ４种地
衣不同溶剂提取物粗多糖中总糖及总酚酸含量ꎬ 结
果显示 (表 １)ꎬ 黑石耳提取物中总糖含量最高
(３８􀆰 ０７％)ꎬ 金刷把和红石耳次之ꎬ 总糖含量分别为
３８１　 第 ２期　 　 　 　 　 　 　 　 王 慧等: ４种地衣提取物抗氧化和抗肿瘤活性研究
３５􀆰 ７５％和 ３１􀆰 ５７％ꎬ 太白茶含量最低ꎬ 为 １９􀆰 ６１％ꎻ
金刷把和红石耳中总酚酸成分主要集中在乙酸乙酯提
取相ꎬ 含量分别为 １２８􀆰 ５０ ｍｇ/ ｇ 和 １４１􀆰 ２８ ｍｇ/ ｇꎬ
而太白茶(８７􀆰 ２８ ｍｇ/ ｇ)与黑石耳中(２５８􀆰 ７９ ｍｇ/ ｇ)
总酚酸成分主要集中在甲醇提取相ꎮ
３􀆰 ２　 ４种地衣粗多糖及不同溶剂提取物抗氧化活
性分析
３􀆰 ２􀆰 １　 清除 ＤＰＰＨ自由基能力
１ꎬ１￣二苯基￣２￣三硝基苯肼(ＤＰＰＨ)在有机溶剂中
是一种稳定的以氮为中心的自由基ꎬ 当 ＤＰＰＨ溶液中
加入自由基清除剂时ꎬ ＤＰＰＨ的孤电子被配对ꎬ 溶液
颜色变浅ꎬ Ａ５１７数值变小ꎬ 且与 ＤＰＰＨ自由基清除程
度线性相关ꎮ 采用 Ｍｏｈｓｅｎ 法对 ４ 种地衣粗多糖及
不同溶剂提取物清除 ＤＰＰＨ 自由基能力进行了
测定ꎬ 结果表明ꎬ 对颜色的消除作用反映了 ４
种地衣各样品清除 ＤＰＰＨ 自由基的能力ꎬ 颜色
越浅表示对 ＤＰＰＨ 自由基的清除能力越强ꎬ
ＩＣ５０值越大ꎮ 从表 ２ 中可以看出ꎬ 太白茶乙酸
乙酯提取相清除 ＤＰＰＨ 自由基能力最强ꎬ 其 ＩＣ５０
值为 ０􀆰 ９３５８ ｍｇ / ｍＬꎻ 金刷把和黑石耳甲醇提取
相也表现出较强的清除 ＤＰＰＨ自由基能力ꎬ 其 ＩＣ５０
值分别为 ０􀆰 ７８４７ ｍｇ / ｍＬ 和 ０􀆰 ５５９５ ｍｇ / ｍＬꎻ 红
石耳氯仿提取相清除 ＤＰＰＨ 自由基能力 ( ＩＣ５０ ＝
０􀆰 ８１６２ ｍｇ / ｍＬ)也高于其它溶剂提取相ꎮ
３􀆰 ２􀆰 ２　 清除羟基自由基能力
在活性氧自由基中ꎬ 羟基是最活跃的自由基ꎬ
它能够使与其接触的生物分子发生氧化损伤ꎬ 从而
导致衰老、 诱发各种疾病等[１３ꎬ１４]ꎮ 采用 Ｆｅｎｔｏｎ 反
应对 ４种地衣多糖及不同溶剂提取物清除羟基自由
基能力的分析结果表明(表 ３)ꎬ 这些多糖及提取物
均具有清除羟基自由基的活性ꎮ 其中ꎬ 金刷把不
同溶剂提取相清除羟基自由基能力大小为乙酸乙
酯 >氯仿 >甲醇 >水ꎬ 其 ＩＣ５０值均大于阳性对照
物 ＢＨＴ和 Ｖｃꎻ 红石耳乙酸乙酯提取相清除羟基
自由基能力最强( ＩＣ５０ ＝ ２􀆰 １９４１ ｍｇ / ｇ)ꎬ 而太白
茶与黑石耳甲醇提取相清除羟基自由基能力最强ꎬ
ＩＣ５０值分别为 ０􀆰 ６４５５ ｍｇ / ｇ和 ０􀆰 ５７４７ ｍｇ / ｇꎮ 金刷
把乙酸乙酯提取相、 太白茶甲醇相及黑石耳氯仿提
取相清除羟基自由基能力与 Ｖｃ 相当ꎬ 但黑石耳甲
醇提取相清除羟基自由基能力优于阳性对照物 Ｖｃꎬ
是较强的羟基自由基(ＯＨ􀅰)清除剂ꎬ 可用于预防
和改善氧化损伤ꎮ
表 １　 ４种地衣不同溶剂提取物中总糖及总酚酸含量
Ｔａｂｌｅ １　 Ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｔｏｔａｌ ｐｈｅｎｏｌｓ ａｎｄ ｓｕｇａｒ ｏｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｅｘｔｒａｃｔｓ ｆｒｏｍ ｆｏｕｒ ｌｉｃｈｅｎｓ
地衣
Ｌｉｃｈｅｎｓ
总酚酸　 Ｔｏｔａｌ ｐｈｅｎｏｌｉｃ ａｃｉｄ (ｍｇ / ｇ)
氯仿 Ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ 乙酸乙酯 Ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ 甲醇 Ｍｅｔｈａｎｏｌ 水 Ｗａｔｅｒ
总糖(％)
Ｔｏｔａｌ ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ
金刷把 Ｌ. ｃｌａｄｏｎｉｏｉｄｅｓ ７３􀆰 ２６ ± ０􀆰 ０５ １２８􀆰 ５０ ± ０􀆰 ０８ ５９􀆰 １８ ± ０􀆰 ０４ ６􀆰 １４ ± ０􀆰 ０２ ３５􀆰 ７５ ± ２􀆰 ２６
太白茶 Ｔ􀆰 ｓｕｂｕｌｉｆｏｒｍｉｓ ７９􀆰 ４０ ± ０􀆰 ０６ ４４􀆰 ４３ ± ０􀆰 ０４ ８７􀆰 ２８ ± ０􀆰 ０４ ３６􀆰 ３８ ± ０􀆰 ０３ １９􀆰 ６１ ± １􀆰 ６２
黑石耳 Ｕ􀆰 ｔｏｒｎａｔａ ４１􀆰 ０５ ± ０􀆰 ０３ ５８􀆰 ６８ ± ０􀆰 ０８ ２５８􀆰 ７９ ± ０􀆰 ０４ ２０􀆰 ２８ ± ０􀆰 ０３ ３８􀆰 ０７ ± １􀆰 ０９
红石耳 Ｕ􀆰 ｈｙｐｏｃｏｃｃｉｎｅａ ２９􀆰 ８ ５ ± ０􀆰 ０２ １４１􀆰 ２８ ± ０􀆰 ０４ ４７􀆰 ２５ ± ０􀆰 ０２ １６􀆰 ５０ ± ０􀆰 ０５ ３１􀆰 ５７ ± ２􀆰 ４１
表 ２　 ４种地衣不同溶剂提取物及粗多糖清除 ＤＰＰＨ自由基能力( ＩＣ５０)
Ｔａｂｌｅ ２　 ＩＣ５０ ｖａｌｕｅｓ ｏｆ ＤＰＰＨ ｒａｄｉｃａｌ￣ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ ｃａｐａｃｉｔｙ ｏｆ ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ ａｎｄ
ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｅｘｔｒａｃｔｓ ｄｅｒｉｖｅｄ ｆｒｏｍ ｆｏｕｒ ｌｉｃｈｅｎｓ
不同溶剂提取相及粗多糖
Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｅｘｔｒａｃｔｓ ａｎｄ
ｃｒｕｄｅ ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ
金刷把(ｍｇ / ｍＬ)
Ｌ. ｃｌａｄｏｎｉｏｉｄｅｓ
太白茶(ｍｇ / ｍＬ)
Ｔ. ｓｕｂｕｌｉｆｏｒｍｉｓ
黑石耳(ｍｇ / ｍＬ)
Ｕ. ｔｏｒｎａｔａ
红石耳(ｍｇ / ｍＬ)
Ｕ. ｈｙｐｏｃｏｃｃｉｎｅａ
氯仿 Ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ １􀆰 ８３８３ ４􀆰 ６０７３ １􀆰 ３８２３ ０􀆰 ８１６２
乙酸乙酯 Ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ ０􀆰 ７８９４ ０􀆰 ９３５８ ２􀆰 ０４５０ １􀆰 ０４２５
甲醇 Ｍｅｔｈａｎｏｌ ０􀆰 ７８４７ ０􀆰 ９４５６ ０􀆰 ５５９５ ０􀆰 ９４５９
水 Ｗａｔｅｒ ８􀆰 ３２００ ３􀆰 ２０００ ５􀆰 ４６７８ ５􀆰 １４２８
粗多糖 Ｃｒｕｄｅ ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ０􀆰 ７１９６ ２􀆰 ６７０２ ０􀆰 ９５３３ ０􀆰 ８９７１
Ｖｃ ０􀆰 ０１１７ ０􀆰 ０１１７ ０􀆰 ０１１７ ０􀆰 ０１１７
ＢＨＴ Ｂｕｔｙｌａｔｅｄ ｈｙｄｒｏｘｙｔｏｌｕｅｎｅ ０􀆰 ０５３４ ０􀆰 ０５３４ ０􀆰 ０５３４ ０􀆰 ０５３４
４８１ 植 物 科 学 学 报 第 ３２卷　
３􀆰 ２􀆰 ３　 还原能力
还原能力是评估抗氧化剂活性的一个重要指
标ꎮ 样品还原能力越强ꎬ 吸光值越大ꎮ 从图 １和图
２可以看出ꎬ ４种地衣不同溶剂提取物及粗多糖的
还原活性均低于阳性对照药物 ＢＨＴꎬ 并与其浓度
呈较好的量效关系ꎻ ４种地衣粗多糖及不同溶剂提
取物的甲醇提取相还原能力都高于其它溶剂提取
相ꎻ 黑石耳和红石耳还原能力大小为 ＢＨＴ > 甲醇
>氯仿 >乙酸乙酯 >水ꎮ
３􀆰 ３　 ４ 种地衣粗多糖对 ＨｅＬａ、 Ａ３７５ 和 Ｈｅｐ Ｇ２
细胞体外增殖的影响
太白茶、 金刷把、 黑石耳和红石耳中粗多糖
对 ＨｅＬａ、 Ａ３７５ 和 Ｈｅｐ Ｇ２ 细胞体外增殖均有一
定的影响ꎮ 由图 ３ 可知ꎬ 低浓度的太白茶粗多糖
表 ３　 ４种地衣不同溶剂提取物及粗多糖清除羟基自由基能力( ＩＣ５０)
Ｔａｂｌｅ ３　 ＩＣ５０ ｖａｌｕｅｓ ｏｆ ｈｙｄｒｏｘｙｌ ｒａｄｉｃａｌ￣ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ ｃａｐａｃｉｔｙ ｏｆ ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ
ａｎｄ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｅｘｔｒａｃｔｓ ｆｒｏｍ ｆｏｕｒ ｌｉｃｈｅｎｓ
不同溶剂提取相及粗多糖
Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｅｘｔｒａｃｔｓ ａｎｄ
ｃｒｕｄｅ ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ
金刷把(ｍｇ / ｍＬ)
Ｌ. ｃｌａｄｏｎｉｏｉｄｅｓ
太白茶(ｍｇ / ｍＬ)
Ｔ. ｓｕｂｕｌｉｆｏｒｍｉｓ
黑石耳(ｍｇ / ｍＬ)
Ｕ. ｔｏｒｎａｔａ
红石耳(ｍｇ / ｍＬ)
Ｕ. ｈｙｐｏｃｏｃｃｉｎｅａ
氯仿 Ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ ０􀆰 ７９０８ ０􀆰 ８４２８ ０􀆰 ６１５１ ２􀆰 ２９９７
乙酸乙酯 Ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ ０􀆰 ６３３４ ０􀆰 ７５７０ ４􀆰 １９２６ ２􀆰 １９４１
甲醇 Ｍｅｔｈａｎｏｌ １􀆰 １２０６ ０􀆰 ６４５５ ０􀆰 ５７４７ ３􀆰 ２４７１
水 Ｗａｔｅｒ ５􀆰 ０３７６ ８􀆰 ５６６７ １􀆰 ６８２３ ２􀆰 ３９３４
粗多糖 Ｃｒｕｄｅ ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ２􀆰 ２０６３ ３􀆰 ７２６６ ３􀆰 ０３０３ ２􀆰 ０９７１
Ｖｃ ０􀆰 ６１２６ ０􀆰 ６１２６ ０􀆰 ６１２６ ０􀆰 ６１２６
ＢＨＴ Ｂｕｔｙｌａｔｅｄ ｈｙｄｒｏｘｙｔｏｌｕｅｎｅ ０􀆰 ５２３２ ０􀆰 ５２３２ ０􀆰 ５２３２ ０􀆰 ５２３２
１. 氯仿提取物ꎻ ２. 乙酸乙酯提取物ꎻ ３. 甲醇提取物ꎻ ４. 水提物ꎻ ５. ＢＨＴꎮ
１. Ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎꎻ ２. Ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎꎻ ３. Ｍｅｔｈａｎｏｌ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎꎻ ４. Ｗａｔｅｒ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎꎻ ５. Ｂｕｔｙｌａｔｅｄ
ｈｙｄｒｏｘｙｔｏｌｕｅｎｅ.
图 １　 ４种地衣不同溶剂提取物的还原能力
Ｆｉｇ. １　 Ｒｅｄｕｃｉｎｇ ｐｏｗｅｒ ｏｆ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｅｘｔｒａｃｔｓ ｆｒｏｍ ｆｏｕｒ ｌｉｃｈｅｎｓ
５８１　 第 ２期　 　 　 　 　 　 　 　 王 慧等: ４种地衣提取物抗氧化和抗肿瘤活性研究
１. 金刷把ꎻ ２. 太白茶ꎻ ３. 黑石耳ꎻ ４. 红石耳ꎻ ５. ＢＨＴꎮ
１. Ｌｅｔｈａｒｉｅｌｌａ ｃｌａｄｏｎｉｏｉｄｅｓꎻ ２. Ｔｈａｍｎｏｌｉａ ｓｕｂｕｌｉｆｏｒｍｉｓꎻ ３.
Ｕｍｂｉｌｉｃａｒｉａ ｔｏｒｎａｔａꎻ ４. Ｕｍｂｉｌｉｃａｒｉａ ｈｙｐｏｃｏｃｃｉｎｅａꎻ ５. ＢＨＴ.
图 ２　 ４种地衣多糖的还原能力
Ｆｉｇ. ２　 Ｒｅｄｕｃｉｎｇ ｐｏｗｅｒ ｏｆ ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ
ｆｒｏｍ ｆｏｕｒ ｌｉｃｈｅｎｓ
(５ ~ ５０ μｇ / ｍＬ)可促进ＨｅＬａ细胞的生长增殖ꎬ 而高
浓度时(１００ ~ ８００ μｇ / ｍＬ)则抑制 ＨｅＬａ细胞的生长
增殖ꎬ 其 ＩＣ５０为 ０􀆰 ４９４３ ｍｇ/ ｍＬꎻ 金刷把粗多糖在实
验梯度浓度范围(５ ~ ８００ μｇ / ｍＬ)内ꎬ 均对 ＨｅＬａ细
胞的生长增殖有抑制作用ꎬ ＩＣ５０值为 ０􀆰 ４３３２ ｍｇ/ ｍＬꎻ
黑石耳粗多糖浓度在 １０ μｇ / ｍＬ以下表现为促进增
殖ꎬ １０ μｇ / ｍＬ 以上表现为抑制作用ꎬ 其 ＩＣ５０值为
０􀆰 ５２４１ ｍｇ/ ｍＬꎻ 红石耳粗多糖浓度大于 １００ μｇ / ｍＬ
时ꎬ 对 ＨｅＬａ 细胞的生长有抑制作用ꎬ ＩＣ５０值为
０􀆰 ６４４０ ｍｇ / ｍＬꎮ 从表 ４可以看出ꎬ 除黑石耳粗多
糖对 Ｈｅｐ Ｇ２ 细胞的抑制作用较为突出外( ＩＣ５０ ＝
０􀆰 ２５６７ ｍｇ / ｍＬ)ꎬ 其它 ３种地衣粗多糖均对 Ａ３７５
和 Ｈｅｐ Ｇ２细胞体外生长增殖有一定的促进作用ꎮ
另外ꎬ ４种地衣粗多糖中ꎬ 金刷把粗多糖对 ＨｅＬａ细
胞生长增殖的抑制作用最好ꎬ 其浓度为 １０ μｇ / ｍＬ
时即表现出了抑制作用ꎮ
４　 讨论
４􀆰 １　 地衣中总酚酸含量与抗氧化活性的关系
近年来ꎬ 从植物中寻找清除自由基的有效成分
已引起国内外学者的广泛关注ꎬ 因为植物多酚类物
质能够提供活泼氢原子ꎬ 有效地清除氧自由基ꎮ 目
前ꎬ 关于总酚酸含量与抗氧化活性之间的关系有两
种观点ꎬ 一种认为总酚酸含量与其抗氧化活性之间
图 ３　 ４种地衣多糖对 ＨｅＬａ细胞的抑制率
Ｆｉｇ. ３　 Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ ｆｒｏｍ ｆｏｕｒ ｌｉｃｈｅｎｓ ｏｎ ｔｈｅ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ ＨｅＬａ ｃｅｌｌｓ
６８１ 植 物 科 学 学 报 第 ３２卷　
表 ４　 ４种地衣粗多糖对 Ａ３７５和 Ｈｅｐ Ｇ２细胞增殖的影响(抑制率)
Ｔａｂｌｅ ２　 Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ ｆｒｏｍ ｆｏｕｒ ｌｉｃｈｅｎｓ ｏｎ ｔｈｅ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ Ａ３７５ ａｎｄ Ｈｅｐ Ｇ２ ｃｅｌｌｓ
粗多糖浓度 (μｇ / ｍＬ)
Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｃｒｕｄｅ
ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ
金刷把(％)
Ｌ. ｃｌａｄｏｎｉｏｉｄｅｓ
黑石耳(％)
Ｕ. ｔｏｒｎａｔａ
红石耳 (％)
Ｕ. ｈｙｐｏｃｏｃｃｉｎｅａ
太白茶(％)
Ｔ. ｓｕｂｕｌｉｆｏｒｍｉｓ
Ａ３７５ Ｈｅｐ Ｇ２ Ａ３７５ Ｈｅｐ Ｇ２ Ａ３７５ Ｈｅｐ Ｇ２ Ａ３７５ Ｈｅｐ Ｇ２
８００ ２１􀆰 ００ ４３􀆰 ８３ ５６􀆰 ９２ ６７􀆰 ６０ ８􀆰 １３ ５８􀆰 ２２ ４０􀆰 ５４ ４８􀆰 １１
４００ １７􀆰 ４２ ３２􀆰 ４０ ４２􀆰 ３６ ５９􀆰 ３５ －１６􀆰 ５１ ３８􀆰 ７０ ３３􀆰 ４２ ３９􀆰 ７０
２００ ９􀆰 ０９ ２３􀆰 ８１ ３２􀆰 ４２ ４６􀆰 ９７ －２０􀆰 ４５ ２６􀆰 ３９ １９􀆰 ９０ ２４􀆰 ３７
１００ －１􀆰 ０７ １２􀆰 ６０％ １８􀆰 ９９ ３２􀆰 ６６ －３０􀆰 ２６ ２０􀆰 １０ ８􀆰 ４２ １３􀆰 ８５
５０ －２１􀆰 ２３ ８􀆰 ８１％ －８􀆰 ４２ ２２􀆰 ３７ －３９􀆰 ３５ ９􀆰 ６１ －４􀆰 ０６ ０􀆰 ５４
２０ －２６􀆰 ３４ ３􀆰 ８７％ １８􀆰 ５０ １３􀆰 ７０ －４３􀆰 ３４ ２􀆰 ６７ －１７􀆰 １２ －２􀆰 ５７
１０ －３１􀆰 ６６ －３􀆰 ７５％ －１２􀆰 ５９ ８􀆰 １１ －５７􀆰 １２ －２􀆰 ０７ －２０􀆰 ９９ －６􀆰 ０７
５ －３６􀆰 １２ －５􀆰 ５８％ －２１􀆰 ４１ ３􀆰 ３５ －６２􀆰 ２２ －５􀆰 ４６ －２４􀆰 ２ －９􀆰 ７１
ＩＣ５０(ｍｇ / ｍＬ) １􀆰 ７４９ ０􀆰 ９８０２ ０􀆰 ５３２１ ０􀆰 ２５６７ ０􀆰 ９１５３ ０􀆰 ５８０３ １􀆰 ０１３ ０􀆰 ７０９２
有显著相关性ꎬ 而另一种认为总酚酸含量与其抗氧
化活性之间没有相关性ꎮ 本研究的分析结果与第二
种观点一致ꎬ 即 ４种地衣不同溶剂提取物中总酚酸
含量与其抗氧化能力之间没有相关性ꎬ 其原因可能
是地衣提取物中还存在其它一些抗氧化成分(如色
素等)ꎬ 起抗氧化作用的不仅仅是总酚酸类ꎬ 而是
多种抗氧化成分共同作用的结果ꎻ 此外ꎬ 采用
Ｆｏｌｉｎ酚法测定的总酚酸含量是一个相对值ꎬ 不同
酚类成分具有不同的结构ꎬ 从而具有不同的抗氧化
活性ꎮ 有研究表明[１７]ꎬ 采用不同抗氧化评价体系ꎬ
不同溶剂提取物的抗氧化活性高低顺序存在差异ꎬ
由此可见ꎬ 在进行抗氧化剂筛选时应该采用多种方
法来综合评价植物药用成分的抗氧化能力ꎬ 其结果
才较为准确、 可靠ꎮ
４􀆰 ２　 地衣粗多糖与抗氧化活性的关系
本实验对 ４种地衣粗多糖含量及其抗氧化活性
进行了测定ꎬ 结果表明黑石耳总糖含量最高
(３８􀆰 ０７％)ꎬ 并且 ４种地衣多糖均有一定程度的抗
氧化活性ꎬ 其中金刷把粗多糖清除 ＤＰＰＨ 自由基
能力较为突出ꎮ 因多糖的生物活性及其功能直接或
间接受其分子结构和空间构象的影响ꎬ 如取代、 降
解等分子修饰都有可能影响其生物学活性[１８]ꎬ ４
种地衣粗多糖含量与其抗氧化活性之间并不存在剂
量依赖关系ꎮ
４􀆰 ３　 地衣粗多糖与抗肿瘤活性的关系
Ｓｙｌｗｉａ等[１９]研究发现ꎬ 多糖可以通过抗氧化
清除自由基作用产生抗肿瘤活性ꎬ 本实验金刷把粗
多糖具有较强的清除 ＤＰＰＨ 自由基和清除羟基自
由基活性ꎬ 为金刷把粗多糖进行体内抗肿瘤活性研
究提供了新思路ꎮ 除多糖外ꎬ 地衣酸对抗肿瘤活性
的研究也备受关注ꎮ 早在 ３０ 年前ꎬ 就已经发现松
萝酸有抗 Ｌｅｗｉｓ肺癌的活性ꎬ 进一步的研究结果也
表明ꎬ 松萝酸对小鼠 Ｓ１８０肉瘤具有显著的抑制作
用ꎬ 即松萝酸有较强的抗癌活性[２０]ꎮ 除黑石耳外
其它 ３种地衣中均含有松萝酸ꎬ 因此地衣抗肿瘤活
性研究应该关注地衣酸和地衣多糖两大类成分ꎬ 并
进一步采用现代分子生物学手段阐明地衣抗肿瘤活
性的物质基础及其遗传机制ꎬ 为地衣药用资源的开
发研究提供理论依据ꎮ
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[１６] 　 Ｍａｔｅｏｓ￣Ｐａｒｉｃｉｏ Ｉꎬ Ｍａｔｅｏｓ￣Ｐｅｉｎａｄｏ Ｃꎬ Ｊｉｍｅｎｅｚ￣
Ｅｓｃｒｉｇ Ａ. Ｍｕｌｔｉｆｏｎｃｔｉｏｎａｌ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｐｏｌ￣
ｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ｆｒａｃｔｉｏｎｓ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｓｏｙｂｅａｎ ｂｙｐｒｏｄｕｃｔ
ｏｋａｒａ[ Ｊ] . Ｃａｒｂｏｈｙｄｒ Ｐｏｌｙｍꎬ ２０１０ꎬ ８２: ２４５ －
２５０.
[１７] 　 Ｏｚｓｏｙ Ｎꎬ Ｃａｎ Ａꎬ Ｙａｎａｒｄａｇ Ｒꎬ Ｃｈｅｎ ＳＫꎬ Ｔｓａｉ
Ｍ. Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ Ｓｍｉｌａｘ ｅｘｃｅｌｓａ Ｌ. ｌｅａｖｅｓ
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[１９] 　 Ｓｙｌｗｉａ Ｆꎬ Ｚｅｎｏｎ Ｊꎬ Ｊａｃｅｋ Ｎꎬ Ｐａｔｒｉｃｉａ ＡＡꎬ Ｆｅｒ￣
ｎａｎｄｏ Ｔꎬ Ｈａｎｎａ Ｌꎬ Ｍａｒｉａ Ｌꎬ Ｍｉｌａｎ Ｓꎬ Ｓｉｍｏｎ Ｔꎬ
Ｓｈｅｌａ Ｇ. Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌ ｐｒｏ￣
ｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｗｉｔｈ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｂｅｒｒｉｅｓ ａｎｄ ｃｏｒｒｅｌａ￣
ｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ｔｈｅｉｒ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ｌｅｖｅｌｓ ｂｙ ａｄｖａｎｃｅｄ ａｎａ￣
ｌｙｔｉｃａｌ ｍｅｔｈｏｄｓ[Ｊ] . Ｊ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔ Ｂｉｏｍｅｄꎬ ２０１２ꎬ
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(责任编辑: 刘艳玲)
８８１ 植 物 科 学 学 报 第 ３２卷