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The mass Production and Application of Nosema Locustae Against Grasshoppers

蝗虫微孢子虫大量增殖与治蝗应用研究



全 文 :第
V o l
.
2
2 卷 第 2 期
N o
.
2

A C T A
地 学 报
A G R E S T IA S IN C A
1 9 9 4 年
1 9 9 4
蝗虫微饱子虫大量增殖与治蝗应用研究 ‘
王丽英
余晓光
(北京农业大学植保系 , 北京 , 1 0 0 0 9 4 )
(新疆虫鼠害测报中心站 生防组 , 乌鲁木齐 , 83 0 0 0 1)
摘要 : 探索蝗虫微抱子虫在蝗虫体内增殖特性 , 用相差显微镜检查病死蝗虫体内病原物具
有两种发育阶段 : 裂殖生殖期和抱子形成期 。 病虫在抱子形成期死亡则能获得较高产抱量 , 可见
产饱量与病虫致死时间有关 。 接种病原浓度和寄主虫龄 又影响致死时间 , 因而影 响饱子产量 。 选
择适宜接种病原浓度和寄主虫龄是获得较高抱子产量的重要因子 。 利用微抱子虫治蝗在蝗虫低
密度下施用 , 可以控制蝗害在经济闺值以下 , 高虫 口 密度下与少量化学农药混用也能收到治蝗效
果 。
关键词 : 蝗虫微抱子虫 ; 微抱子虫大量增殖 ; 生物防治
1 前言
蝗虫微抱子虫在国外 已研制成生物杀虫剂 , 其病原物经 口感染 , 在人工施用时不受湿度
等环境条件限制 , 病原又常常可经卵传播 , 一旦引入害虫种群中 , 有可能发挥较长期 的控制
作用 。作为微生物杀虫剂的使用在国内试验利用微抱子虫防治草原蝗虫也取得较大进展 , 摸
清其病原物增殖特性 ,提高产抱量 , 降低成本为工厂化生产奠定了基础 。 这方面的工作 国外
已有些报导 (F u x a 等 , 1 9 7 9 ; L a i等 , 1 9 8 3 : W ils o n , 1 9 7 6 ) , 但这都局限于以鳞翅 目昆虫为
增殖寄主 。蝗虫微抱子虫 ( N os e m a L oc us tae )寄主为直翅 目 , 属不全变态 , 生活周期较长 。 早
期英 国学 者曾认为微抱子虫 虽从飞蝗 ( L oc us ta m 行g ra tor 故 m 心ra tor i厉d es )体 内分离 出
来 , 但 增 殖 速 度 低 , 不 可 能 用 于 生 物 防 治 (Can ni n g , 19 6 2 ) , 美 国 学 者 用 双 带 黑 蝗
(对七za n o P lu s b i二it ta tu s )和异黑蝗 ( 人了‘la n o Plu s d if fe r e n t ia lis )做增殖寄主 , 平均单头抱子
产量由 4 X IO 9 提高到 6 X IOg , 从而发展成商品化生产 (H e n r y , 1 9 8 5 ) 。
黑蝗属蝗虫在我国分布极少 。 而东亚飞蝗 (L oc us ta m 心ra tor 山 m an l 。。行 )每年发生面
积大数量多 , 用其做增殖寄主虫源易得且室内饲养较容 易 。研究微抱子虫在群体饲养的东亚
飞蝗虫 中增殖特性及寄主虫龄和接种病原浓度与抱子产量的关 系 , 并用其生产的抱子防治
草原蝗虫 , 取得 明显效果 。 本文报道这方面的试验结果 。
2 材料和方法
2
.
1 材料 蝗虫微饱子虫 (N os e m a zoc us tae )引自美 国经东亚飞蝗增殖 , 东亚飞蝗系采 自
河北蝗卵 , 室内传代饲养做试虫 。
2
.
2 试验方法
2. 2. 1 蝗虫微袍子虫的大量增殖
国家自然科学基金资助项 目
草 地 学 报 1 9 9 4 年
¹ 寄主致死时间与病原发育阶段的关系
将微抱子虫抱子液稀释成 1又 105 抱子 / m l, 取 10川滴于直径 l om m 麦苗 叶片上 , 凉干
后喂饲本室传代饲养的东亚飞蝗 4 龄蝗蛹每头一片 , 共约 10 头 , 24 h 后将麦苗 叶片全部吃
光的蝗蛹用做试虫 , 置于大塑料筒 内饲养 , 30 C 士 1 , 湿度 70 % , 昼夜光照 , 以麦苗加麦鼓为
饲料 , 每天观察记载死亡虫数 , 在接种后第 10 天收集病死虫尸 , 并在相差显微镜下检查病死
虫尸中病原物发育情况 。
º 接种病原浓度与致死时间和抱子产量的关系
采用 1只 10 5 、 l x l护 、 l x l了 和 l x 10s 饱子 / m l不同浓度的抱子液 , 用微量吸液器吸取
1如1滴于麦苗 叶片上 , 凉干后单头喂饲 4 龄蝗蛹 , 将叶片吃光者做试虫 。 置于小塑料筒内单
头饲养 。饲养条件同¹ , 每处理接种 20 头分 3组 , 每天观察记载病死虫 , 单头称体重 , 用血球
计数板测抱子产量 。
» 寄主虫龄与致死时间和抱子产量的关系
选取 2 、 3 、 4 和 5 龄蝗蛹 , 单头喂饲 l x l护 抱子 / m l, 方法同º , 每夭观察记载病死虫 , 单
头称体重 , 测抱子产量 。
¼收获期与抱子产量的关系
采用 1 x l护 抱子 / m l喷于麦叶片上 , 稍凉干后喂饲 4一 5 龄蝗蛹 , 24h 后换新鲜饲料喂
饲于长方形铁纱养虫笼 中 ( 30 火 3 0 又 so e m ) , 30 0 一 40 0 头 /笼 , 每批 40 0 0 头 , 恒温 3O C 士 1 ,
湿度 70 % , 昼夜光照 , 10 一40 天收集病死虫尸 , 在一 20 ℃冰箱贮存 。
袍子提取 : 将冷冻病虫尸用绞肉机碾碎经尼龙沙布过滤后差速离心即得粗提纯抱子 ,经
血球计数板计数 , 测抱子产量 , 一 20 C 保存 。
2. 2
.
2 田间试验
¹ 袍子麦鼓毒饵配制 : 由粮油加工厂特殊加工 , 具有厚淀粉层麦鼓 (直径 3一 4m m ) , 用
自制抱子麦数毒饵配制器配制 , 其含水量 10 一 12 % 。
º 抱子麦鼓毒饵撒施 : 在运 一 n 农用飞机 内装有齿槽可调式精量撒播器 , 撒播有效喷
幅 20 m , 飞行高度 7 一10 m , 飞行速度 170 ( 士 5) 公里 /时 。
» 田间设计及调查
试验以优势种蝗虫 , 意大利蝗 ( C a lli Pta m u s i ta li c u s )和戟纹蝗虫 ( D o c i o s ta u r u s k r a u ss i
)为防治对象 , 采用 0 . 38 一 1 . 5 只 1护 抱子 /亩 的不同抱子浓度或与马拉硫磷农药混用 , 在蝗
蛹 2一 4 龄时施用 , 每处理 10 0 0 亩 , 设调查样区 4 个 , 每个样区设调查样点 30 个 , 另设对照
区 。 每个调查样点固定放置 1/ l o m Z 白色圆环 ,调查时数圆环 内蝗虫头数 , 按 A b bot t 公式计
算校正虫 口减退率 。
3 结果与分析
3
.
1 微袍子 虫在群体饲养蝗 虫中的增殖特性
3
.
1
.
1 寄主致死时间与病原发育阶段的关系
图 1 表 明 4 龄蝗蛹接种 1 又 10 8 抱子 / m 128 天后全部死亡 。 接种后第 10 天开始收病死
虫 , 共收 85 头 , 其中 16 天 以前死亡 47 头 , 占总死亡虫尸的 5 % ,镜检病原正处于裂殖生殖
时期 , 抱子极少或抱子不成熟 。 第 18 一2 天死亡的虫尸 2 头 , 占 20 % , 全部为成熟抱子 , 裂
殖体和不成熟抱子极少 。 可见早期病死虫尸体内病原多处于裂殖生殖时期 , 产生袍子量少 ,
第 2 期 王丽英等 : 蝗虫微抱子虫大量增殖与治蝗应用研究
而病虫死亡时间拖后 , 体 内产生的病原则处于抱子成熟期产生抱子量多 。
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0 1 0 1一 1 6 15 2 0 2 2 2一 2 8接种后天数 ( 天 )氏y Pos t 一 t r ea tm e ” r
图 1 蝗虫不同致死时间与病原发育阶段的关系
F ig
.
1 R e la t io n s h ip b e tw e e n th e t im i n g o f m o r t a lit y
a n d t h e d e v e lo p m e n t s t a g e o f N
.
LD
c u s t a e
M 裂殖生殖时期 (Sc h iz o g o n y ) S 泡子 形成时期 ( S p o r o g o n y )
3
.
1
.
2 接种病原浓度与致死时间和抱子产量的关系
T a b le
表 1 接种病原浓度与致死时间和抱子产量关系
R e la t io n s hi p b e tw e e n le t ha l t im e
, y ie ld a n d in o e u la t io n d o s e o f N
.
L o ‘u s za 尸
接种浓度
(抱子 / m l)
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C o n C e fl t ra t lo n
(
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检查头数
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平均 致死
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(抱子数 / 头 ) (饱子数 / 克 )
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2
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8 又 1 0 9
4
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1 只 1 0 9
1
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3 X 1 0 9
0
.
3 X 1 0 9
1
.
8 火 1 0 9
2
.
4 丫 1 0 9
1
.
2 X 1 0 9
0
.
5 只 1 0 9
由表 1 看出 , 接种 1 x 1 0 6一 1 又 1 0 8 抱子 / m l , 平均单头产饱量有随接种病原浓度降低而
增高的趋势 。接种病原浓度愈低 , 平均致死时间也愈长 , 从 1 3 . 1一 36 . 2 天接种浓度与致死时
间呈负相关 ( r 一 0 . 97 01 ) , 致死时间拉的愈长 , 虫体重也增高 , 平均体重 0 . 60 一 1 . 89 克 / 头 ,
二者呈正相关 ( r 一 0 . 9 3 1 3 ) 。 在一定致死时间范围内 ( 13 . 1一 23 . 0 天 ) , 虫体重与抱子产量呈
正相关 ( r 一 0 . 9 5 07 ) 。可见 , 接种浓度影响寄主致死时间 , 因而影响产抱量 , 本实验结果表明 ,
接种浓度为 1 义 1 0 6 抱子 / m l能获得较高产抱量 。
草 地 学 报 1 9 9 4 年
表 2 接种不同虫龄与致死时间和抱子产量关系
T a b le 2 R e la tio n s h ip be t w e e n le th a l t im e
, y ie ld o fN
.
Lo
c u st a e a n d in s t a r s
接种虫龄
(龄别 )
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检查头数
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平均抱子产量
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(抱子数 / 克 )
S P 0 re S
2 1
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.
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1 9
1 9
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.
6 0
1 9 0
1
.
0 X 1 0 9
1
.
2 X 1 0 9
3
.
4 X 1 0 9
2
.
4 丫 1 0 ,
1
.
6 又 10 9
1
.
5 只 10 9
2
.
2 又 10 9
1
.
4 丫 10 9
17.6258
用相同抱子液接种 2一 4 不同虫龄 , 其平均单头产饱量有随虫龄增高而增大的趋势 。 虫
龄愈小对微抱子虫愈敏感 , 因而平均致死时间缩短体重减轻抱子产量也低 。 5 龄虫由于对微
抱子敏感性降低 , 虽然平均致死时间拉长 , 尽管体重有所增加 , 但产饱量反而下降 , 可见选择
4 龄虫接种较易得到较高抱子产量 。
3
.
1
.
3 收获期与抱子产量的关系
大量增殖蝗虫微抱子虫在何时收集病死虫尸是获得较高抱子产量的另一重要因素 。 检
查两批不同时期收获的病死虫尸并测定其产抱量 , 结果见表 3 。
表 3 不同收获期与抱子产量的关系
T a ble 3 Y ie ld o fN
.
lo c u s ta e in g r a s s ho p p e r a t 1 0 to 4 0 d a y
s a ft e r in o e u la t io n
接种
批数
T im e
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接种后不同 病虫 病虫 平均单头
收获期 (天 ) 头数 体重 (克 ) 体重 (克 )
H a v e s t t im e N o
.
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v e r a g e
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e ig h t
In o e u la t 一o n lo e u s t lo e u s t (g r a m
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饱子总产量
(抱子数 )
T o t a l
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单头产量
(抱子数 )
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单头最 高产量
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早(n = 1 0 ) 士(n = 1 0 )
体重
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抱子数
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体重
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抱子数
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2 1 ~ 3 0 5 8 7
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2 00
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17 0 0
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.
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4 只 10 1 2
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5
.
6 又 10 9 3 . 2 8 2 丫 1 0 ] 0 2 . 1 9 8 . 7 X 1 0 9
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4 火 10 1 2
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.
1 又 10 12
1
.
0 X 10 12
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.
5 X 10 9
7
.
1 只 10 9
9
.
9 X 10 9 3
,
4 2 1
.
9 5 又 10 1 0 2 . 2 5 . 2 又 1 0 9
由表 3 看出 ,接种后 10 一 20 天收获的病虫尸产抱量较低 , 20 天以上收获病虫尸的产抱
量较高 (4 一 7 又 10 9 袍子 /头 ) , 30 一 4 0 天收获的产抱量最高 (5 一 9 又 1 0 9 抱子 / 头) 。
3
.
2 田 间应用效果
在新疆草场上 , 自 1 9 8 8 一 1 9 9 2 年连续 4 年进行小面积和大面积田 间试验 , 结果见表 4 。
由表 4 看 出 , 不同抱子用量治蝗效果不同 , 高于 0 . 5 又 10 9 饱子 /亩 , 校 正虫 口 减退 率可达
50 %左右 . 而加入少量农药则有助于提高虫口减退率 。
第 2 期 王丽英等 : 蝗虫微饱子虫大量增殖与治蝗应用研究 5 3
表 4 微抱子虫防治新孤草原蝗虫的效果
T a b le 4 E ffe e t o f N
.
L o c u s t a e o n g r a s s h o p p e r o f r a n g la n d in X in Jia n g
防治后 28 天
2 8 d a y s a fte
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年份
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面积 (亩 )
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59 马拉硫磷
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3
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.
0 2
7 1
.
4
4 讨论
提高蝗虫微饱子虫产抱量在国外采用筛选具有高产抱量潜能的增殖寄主 。 我们筛选到
的东亚飞蝗增殖寄主在初期单头产抱量也不高 , 近年来经进一步探索其增殖特性 , 摸索出适
宜的病原接种浓度 、寄主虫龄和收获期等 , 使单头产抱量提高到 6 火 1 0 9 抱子以上达到工厂
化生产水平 , 并总结出生产流程 , 其示意图如下 :
——30 一 4 0 天— 一二些玉 卜[ 宜夔受红〕二竺卫圣玉 卜口塾匿互口二望望主 , 巨逗互口令。”l酒;嚼翻一竺i聆创弓黯霏一. 抱华液浓缩 ,一{ 分装塑料桶 一⋯低二: ⋯} 一 乙 U 七 !
草 地 学 报 1 9 9 4 年54
以东亚飞蝗做增殖寄主 , 其虫体大且饲料易得 , 采用 30 火 40 x 5 0c m 的养虫笼单笼可养
4 0 0 ~ 5 0 0 头 , 2 0 个饲养笼可饲养蝗虫 8 0 0 0一 1 0 0 0 0 头 。 按 目前推荐使用浓度 0 . 5一 1 x 1 0 ,
抱子 /亩计算 , 1 头蝗虫生产的抱子量可 以防治 5 ~ 10 亩草场 , 可见成本很低 。
微抱子虫病原感染寄主不受湿度限制 , 与麦鼓混用制成抱子麦鼓饵剂 , 在虫 口密度较低
的草场上施用可以减少蝗虫虫 口 密度在经济阑值以下 , 在虫 口 密度较高的地块可与低剂量
化学农药混用也能收到治蝗效果 。
全国微抱子虫治蝗协作组给予本项目大力支持 , 谨此致谢 。
参 考 文 献
1
2
3
4
5
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4
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2 3 7 一 2 4 7
T h e m a s s P r o d u c tio n a n d A PPlic a tio n o f N o se m a
L o e u s ta e A g a in s t G r a ss h o PPe r s
W
a n g L iyin g
(D e Pa r tm e n t o f Pla n t Pr o t e e tio n
B e ijin g A g r
.
U n iv
. ,
B e ijin g
,
1 0 0 0 9 4 )
Y u X ia o g u a n g
(X in ii
n a g C o m m a n d Po s t o f
G r a s s ho p p e r a n d R o d e n t s C o n t r o l
,
8 3 0 0 0 1 )
A b s tr a e t
:
In o r ie n t a l m ig r a t o r y lo e u s t
,
L o c u s t a m ig r a t o r i a m a n ile n s i s (M e y e n )
, th e p a t ho g e n ie m i
-
e r o s p o r id ia
,
N
o s em a lo c u s ta e
,
p a s s e s t w o d e v e lo p m e n t a l s t a g e s
, s e h iz o g o n y a n d s p o r o g o n y
,
w h ie h e a n be
o b s e r v e d u n d e r p h a s e e o n t r a s t m ie r o s e o p e
.
Se h iz o g o n ie s o e e u r m a in ly in e a r lie r m o r bid e o r p s e s
, a n d p r o
-
d u e e fe w s p o r e s o n ly ; w hile s p o r o g o n ie s a r e m a in ly in la t e r m o r b id e o r p s e s a n d p r o d u e e m u e h m o r e
s p o r e s
.
T h e d e a th tim e o f th e in fe et e d h o st s r e la t e s d ir e e tly t o th e in o e u la tin g d o s a g e a n d t he h o s t a g e in
-
o e u la t e d
,
w h l eh p e rfo rm t h e ke y fa e t o r s o f m a s s p r o p a g a tio n o f t he m ie r o sp o r id ia
.
T h e w h e a t

b r a n ba it s t r e a t e d w ith N
.
lo c u st a e w e r e p r o v e d t o b e s u e e e s s fu l t o r e d u e e th e g r a s sh o p p e r
p o p u la tio n u n d e r E T L w h e n th e d e n s ity o f t he n a t u r a l p o p u la tio n 15 lo w
.
T h e w h e a t

b r a n ba it s t r e a te d
w ith N
.
lo c u s t a e in e o r p o r a t e d w it h lo w d o s a g e s o f e he m ie a l in s e e tie id e s w e r e p r o v e d t o be e ffe e tiv e t o eo n
-
t r o l t he h ig h

d e n sity g r a s s ho p p e r s
.
K e y w o r d s
:
N
o se m a lo c u s t a e ; M
le r o s p o r id ia ; L o e u s t a n d G r a s s ho p p e r ; B io lo g ie a l e o n t r o l