全 文 ：作物学报 ACTA AGRONOMICA SINICA 2015, 41(1): 4248 http://zwxb.chinacrops.org/
ISSN 0496-3490; CODEN TSHPA9 E-mail: xbzw@chinajournal.net.cn
本研究由中央高校基本业务专项资金项目(XDJK 2014D016), 国家公益性行业(农业)科研专项(201403064)和国家现代农业产业技术体
系建设专项(CARS-22)资助。
通讯作者(Corresponding author): 余茂德, E-mail: yumd@163.com, Tel:023-68251309
第一作者联系方式: E-mail: lvruihua1987@163.com, Tel: 023-68251309
Received(收稿日期): 2014-04-02; Accepted(接受日期): 2014-09-30; Published online(网络出版日期): 2014-11-11.
URL: http://www.cnki.net/kcms/detail/11.1809.S.20141111.1558.020.html
DOI: 10.3724/SP.J.1006.2015.00042
果桑肥大性菌核病菌和油菜菌核病菌的交叉侵染、生物学特性及遗传
关系
吕蕊花 1 金筱耘 2 赵爱春 1 吉 洁 3 刘长英 1 李 军 1 蒲 龙 3
鲁 成 1 余茂德 1,
1 西南大学生物技术学院 / 家蚕基因组生物学国家重点实验室, 重庆 400716; 2 西南大学农学与生物科技学院, 重庆 400716; 3 四川
省南部县蚕桑局, 四川南部 637300
摘 要: 分别以果桑肥大性菌核病菌和油菜菌核病菌的子囊孢子交叉接种油菜和果桑。结果表明, 杯盘菌子囊孢子
能够侵染油菜, 同样, 核盘菌子囊孢子能够侵染果桑; 在受侵染的桑椹上 2种病菌均产生分生孢子梗和分生孢子, 而
在油菜上不产生。显微镜观察, 杯盘菌的子囊盘外囊被切面为圆胞组织结构, 核盘菌为角胞组织结构。SRAP分子标
记和聚类结果表明, 采自西南地区果桑上的杯盘菌和油菜上核盘菌基本各自聚在一类, 其中一个杯盘菌分离物和一
个核盘菌分离物聚在一类, 表现特别。2种寄主上的病菌子囊孢子能相互侵染, 因而果桑和油菜不能间套种植。
关键词: 果桑; 油菜; 菌核病菌; 交叉侵染; SRAP分子标记
Cross Infection, Biological Characteristics and Genetic Relationship between
Pathogens of Hypertrophy Sorosis Sclerotenisis from Mulberry and Sclerotinia
Stem Rot from Oilseed Rape
LÜ Rui-Hua1, JIN Xiao-Yun2, ZHAO Ai-Chun1, JI Jie3, LIU Chang-Ying1, LI Jun1, PU Long3, LU Cheng1,
and YU Mao-De1,
1 College of Biotechnology / State Key Laboratory of Silkworm Genome Biology, Southwest University, Chongqing 400716, China; 2 College of
Agronomy and Biotechnology, Southwest University, Chongqing 400716, China; 3 Nanbu County Bureau of Sericulture of Sichuan Province, Nanbu
637300, China
Abstract: The cross infection was studied between ascospores of Ciboria shiraiana causing hypertrophy sorosis sclerotenisis in
mulberry and Sclerotinia sclerotiorum causing Sclerotinia stem rot in oilseed rap. Inoculation results showed that ascospores of C.
shiraiana infected oilseed rape, and ascospores of S. sclerotiorum infected sorosis similarly. Conidia and conidiophores appeared
in the infected sorosis by C. shiraiana and S. sclerotiorum, but did not appear in the infected oilseed rape. The cross section
showed a structure of capsule ascus round cell in C. shiraiana under microscope, but the texture angularity in S. sclerotiorm.
Clustering based on SRAP of isolates from southwest areas showed C. shiraiana isolates from sorosis was classified into one
group, and S. sclerotiorm isoplates from oilseed rape into a second group, with an except where one C. shiraiana isolate and one S.
sclerotiorm isolate were clustered into an additional group. Cross infection of the two host plants by these two pathogen ascospores
suggests that intercropping or interplanting of mulberry and oilseed rape is not feasible where the two pathogens/diseases exist.
Keywords: Mulberry; Oilseed rape; Sclerotinia sclerotiorum; Cross contamination; SRAP molecular markers
果桑和油菜是2种重要的经济作物 , 然而果桑
菌核病(mulberry fruit sclerotiniosis)是制约果桑发展
的重要病害, 其发病率高达30%~90% [1]。果桑菌核
病分肥大性、小粒性和缩小性3种[2], 其中果桑肥大
性菌核病的发病率最高。而且油菜菌核病也已成为
油菜的第一大病害 , 有的发病率高达80%以上 , 病
第 1期 吕蕊花等: 果桑肥大性菌核病菌和油菜菌核病菌的交叉侵染、生物学特性及遗传关系 43
株减产可达10%~73%, 严重影响油菜的产量和品质,
给我国油菜生产造成很大的经济损失[3]。果桑菌核
病菌和油菜菌核病菌(Sclerotinia sclerotiorum in oil-
seed rape)的主要感染时期均在开花期, 引起这2种
病害的病原菌均属于核盘菌科(Sclerotiniaceae)。加
之菌核在土壤表面的存活力可长达8年以上[4], 因此,
研究菌核病在果桑和油菜之间是否相互传染, 及其
传染能力如何, 对其综合防控具有重要参考价值。
1959年杨新美[5]用从被感染的油菜植株分离的菌核
病菌与从二月兰、甘蓝、冬葵、芥菜、苦菜等12种
植物上分离的菌核病菌的菌丝作室内交互接种试验,
除了红兰花与油菜外, 其余植物病菌都能与油菜菌
核病菌的菌丝互相感染。郭文信等[6]通过多年研究
发现 , 油菜茬种大豆 , 菌核病发病率10%~25%, 大
豆茬种油菜, 菌核病发病率10%~25%, 小麦茬种油
菜, 菌核病发病率4%~5%, 在菌核病的防治方面轮
作是经济有效的方法。果桑肥大性菌核病菌[Ciboria
shiraiana (P. Hennings) Whetzel)]和油菜菌核病菌菌
[Sclerotinia sclerotiorum (Lib.) De Bary in oilseed
rape]同属于核盘菌科(Sclerotiniaceae)。但是果桑肥
大性菌核病菌归为杯盘菌属(Ciboria), 桑实杯盘菌
(Ciboria shiraiana); 油菜菌核病菌属于核盘菌属
(Sclerotinia), 核盘菌[Sclerotinia sclerotiorum (Lib.)
de Bary][7], 在长江流域, 果桑和油菜的开花期几乎
都为2月下旬至3月下旬, 植株被菌核病菌感染的初
始传染源均为子囊孢子 [8-11], 最易侵染的器官是桑
树雌花和油菜花瓣和叶片。
本研究用纯化的果桑肥大性菌核病菌与油菜菌
核病菌的子囊孢子为研究对象, 将两种病原进行交
叉接种实验, 观察其相互传染特性, 分析其流行性
学关系, 旨在为两大经济作物在菌核病防控领域提
供参考依据。
1 材料与方法
1.1 果桑肥大性菌核病菌、油菜菌核病菌及其子
囊孢子的获得
果桑肥大性菌核病菌从西南大学果桑资源圃的
果桑品种嘉陵30 (属于广东桑种 , Morus atropur-
purea Roxb.)病果分离获得, 菌株编号为 CCTCCAF
2014019, 登记保存于中国典型培养物保藏中心, 接
种所用的果桑品种为大十 , 属于广东桑种 , Morus
atropurpurea Roxb.。
将人工培养条件下产生的成熟菌核常规消毒 ,
转至水分饱和的河沙中, 于4℃冰箱中放置6周[12-14]。
取出后在15℃、相对湿度>90%的条件下培养至子实
体长出, 参照方中达[15]的方法对子囊盘进行表面消
毒。在超净工作台里用匀浆器研磨子囊盘, 使子囊
盘里面的子囊孢子释放出来, 用血细胞计数板调节
子囊孢子的浓度, 在光学显微镜下面观察子囊和子
囊孢子的形态特征。
油菜菌核病菌由西南大学农学与生物科技学院
重庆市油菜工程技术研究中心提供[16], 油菜菌核病
子囊孢子参照分离果桑肥大性菌核病菌子囊孢子的
方法获得。接种所用的油菜品种为中双10号。
1.2 果桑肥大性菌核病菌与油菜菌核病菌子囊
盘外囊被的解剖结构横切观察
子囊盘被解剖结构是分属的重要特征 [7]。于
2014年2月对本实验室纯化的果桑肥大性菌核病菌,
经有性培养获得子囊盘外囊盘被进行切片显微观
察。油菜菌核病菌也按照前述方法进行子囊盘外囊
盘被的切片显微观察。
1.3 果桑肥大性菌核病菌与油菜菌核病菌子囊
孢子交叉试验
2012年1月开始盆栽油菜苗, 2月移栽至人工气
候箱。将配制好的果桑肥大性菌核病菌的子囊孢子
液(×105孢子 mL–1)采用针刺法接种到油菜叶片、茎
干上, 以保鲜膜包裹保湿, 25℃、85%湿度条件下培
养, 观察其发病症状, 以接种油菜菌核病菌子囊孢
子液的植株为阳性对照, 接种无菌水的油菜植株为
阴性对照。
2013 年 2 月中旬, 当桑树冬芽脱苞, 叶片刚开
始露出冬芽时, 用硫酸纸袋将其套住以排除外界干
扰。3月初, 用配制好的油菜菌核病菌的子囊孢子液
(×105孢子 mL–1)采用喷雾法接种刚萌发的桑果, 以
保鲜膜包裹保湿。以接种果桑肥大性菌核病菌子囊
孢子的桑椹为阳性对照, 以接种无菌水的桑椹为阴
性对照, 观察、记录、拍照。
1.4 SRAP分子标记
采集重庆市北碚区斑竹村西大油菜试验地
(Sclerotinia 1)、北碚区斑竹村西大桑树资源圃
(Ciboria 2)、西南大学后山新桑园(Ciboria 3)、四川
省南部县楠木镇五村果桑园(Ciboria 4)、重庆市北碚
区歇马镇西大油菜试验地(Sclerotinia 5)、四川省南
部县碧龙乡二村油菜地(Sclerotinia 6)、四川省南部
县楠木镇五村油菜地(Sclerotinia 7)、涪陵区焦石镇
悦来村果桑园(Ciboria 8)、涪陵区百胜镇齐曲村果桑
园(Ciboria 9)。参照方中达的方法[15]培养, 并鉴定所
44 作 物 学 报 第 41卷
有菌株的形态学、生理生化特性。采用改良的 CTAB
法 [17]提取其基因组并扩增每种材料的 LSU rRNA,
从分子生物学方面进行鉴定, 分离出果桑肥大性菌
核病菌和油菜菌核病菌, 用作 SRAP 分子标记的供
试材料。SRAP-PCR 所用的正向引物、反向引物如
表1所示, 由北京六合华大基因有限公司合成。PCR
程序为95℃预变性1 min, 94℃变性45 s, 35℃退火
45 s, 72℃延伸1 min, 6个循环; 94℃变性45 s, 57℃退
火45 s, 72℃延伸45 s, 32个循环; 最后72℃延伸10
min, 4℃保温。扩增产物经12%变性聚丙烯酰胺凝胶
(聚丙烯酰胺∶甲叉双丙烯酰胺=29∶1)以150 V 电
压预电泳20 min, 每个样孔点样2 μL, 150 V恒压电
泳210~240 min, 结束后银染。
对获得的可重复的 DNA 条带在同一迁移率上,
有带的计为“1”, 无带的计为“0”, 采用 NTSYS-pc
2.1e版本软件按照 SAHN进行聚类分析。
表 1 SRAP引物编号与序列
Table 1 List of SRAP primers and their sequences
引物编号
Primer name
引物序列
Primer sequence (5–3)
引物编号
Primer name
引物序列
Primer sequence (5–3)
Me1 TGAGTCCAAACCGGAAT Em1 GACTGCGTACGAATTTGC
Me2 TGAGTCCAAACCGGACC Em2 GACTGAGTACGAATTGAC
Me3 TGAGTCCAAACCGGAAG Em3 GACTGCGTACGAATTTGA
Me4 TGAGTCCAAACCGGTAA Em4 GACTGCGTACGAATTGCA
Me5 TGAGTCCAAACCGGTCC Em5 GACTGCGTACGAATTATG
Me6 TGAGTCCAAACCGGTGT Em6 GACTGCGTACGAATTTAG
Me7 TGAGTCCAAACCGGTCA Em7 GACTGCGTACGAATTCAA
Em8 GACTGCGTACGAATTGTC Me8 TGAGTCCAAACCGGTGC
Em9 GACTGCGTACGAATTCGA
2 结果与分析
2.1 果桑肥大性菌核病菌与油菜菌核病菌无性
繁殖特征
果桑肥大性菌核病菌与油菜菌核病菌在 PDA培
养基上均为可生长 , 呈现白色有隔菌丝 , 多核 , 紧
贴培养基生长。当菌丝生长到培养基周边时, 相互
聚集缠绕形成15~22个菌丝团 , 通过复杂的生理生
化结合形成坚硬的菌核。在形成菌核的过程中, 菌
丝团上面出现无色液体, 当坚硬的菌核形成时菌核
上面的液体消失。果桑菌核病菌的菌核分布在 PDA
培养基的外周外缘 , 靠近培养皿壁 , 菌核直径为
2.1~3.5 mm (图1-A)。油菜菌核病菌菌核分布在 PDA
培养基的外周内, 距离培养皿壁1~2 cm, 菌核直径
为1.8~3.0 mm (图1-E)。
2.2 果桑肥大性菌核病菌与油菜菌核病菌有性
繁殖特征
果桑肥大性菌核病菌与油菜菌核病菌的菌核均
在低温诱导后第4天萌发出柄, 2周之后柄的顶端膨大
形成子囊盘。果桑肥大性菌核病菌的子囊盘为杯状或
盘状, 直径为5~12 mm, 柄高9~24 mm, 子实层褐色
(图1-B, C); 油菜菌核病菌子囊盘圆盘状, 子实层米
色, 淡褐色, 直径为2~7 mm, 柄高为4~7 mm (图-F,
G)。2种病原菌子实层均含有子囊和侧丝, 每个子囊
里面均含有8个椭圆形的子囊孢子, 子囊孢子在子囊
内靠近顶端呈线性排列。本实验分离纯化获得的果桑
肥大性菌核病菌子囊孢子的形态与《中国桑树栽培
学》[18]和《日本桑树病害图说》[19]描述的一致。
2.3 果桑肥大性菌核病菌与油菜菌核病菌子囊
盘外囊被的解剖结构横切观察结果
图 1 所示, 果桑肥大性菌核病菌子囊盘外囊被
的横切细胞解剖结构是由圆胞组织构成(图 1-D), 油
菜菌核病菌子囊盘外囊盘被的横切细胞解剖结构则
是由角胞组织组成(图 1-H)。试验表明, 我们使用的
果桑肥大性菌核病菌纯化菌株与油菜菌核病菌纯化
菌株的细胞解剖结构, 显现出杯盘菌属和核盘菌属
重要的分类特征。
2.4 果桑肥大性菌核病菌与油菜菌核病菌子囊
孢子交叉感染试验
2.4.1 以果桑肥大性菌核病菌子囊孢子传染油菜
油菜经人工接种果桑肥大性菌核病菌子囊孢子,
在25℃条件下培养5 d 后表现出典型的油菜菌核病
特征, 茎干、叶片呈水渍状, 开始腐烂, 上面长满白
色絮状菌丝(图2-A); 第10天时, 茎干、叶片病斑面
第 1期 吕蕊花等: 果桑肥大性菌核病菌和油菜菌核病菌的交叉侵染、生物学特性及遗传关系 45
图 1 果桑肥大性菌核病菌与油菜菌核病菌无性生殖阶段和有性生殖阶段生长差异
Fig. 1 Differences of asexual and sexual reproduction between pathogens of hypertrophy sorosis sclerotenisis from mulberry and
sclerotinia stemrot from oilseed rape
A~D: 果桑肥大性菌核病菌无性生殖阶段和有性生殖阶段; E~H: 油菜菌核病无性生殖阶段和有性生殖阶段; A、E: 2种病原菌无性生
殖生长差异; B、F: 2种病原菌子实体生长差异; C、G: 2种病原菌子实体在大田中生长差异; D、H: 2种病原菌子囊盘外囊盘被切面。
A–D: asexual reproduction and sexual reproduction of pathogen of hypertrophy sorosis sclerotenisis from mulberry; E–H: asexual reproduc-
tion and sexual reproduction of pathogen of sclerotinia stem rot from oilseed rape; A, E: asexual reproductive growth differences of two
pathogens; B, F: fruit body growth differences of two pathogens; C, G: fruit body growth differences of two pathogens in the field; D, H: the
crosscutting structure of capsule ascus of the two pathogens.
图 2 油菜接种果桑肥大性菌核病菌子囊孢子后植株发病症状
Fig. 2 Symptoms in oilseed rape inoculated with ascospores of pathogen of hypertrophy sorosis sclerotenisis from mulberry
A: 5 d; B: 10 d; C: 15 d; D: 阳性对照; E: 阴性对照。
A: the 15th day; B: the 18th day; C: the 20th day; D: positive control; E: negative control.
积扩大, 并开始干枯(图2-B); 第15天时, 叶柄底部、
根的上部及茎干里面均长满黑色的菌核(图2-C), 油
菜整株干枯; 与阳性对照结果相同(图2-D), 无菌水
对照组生长正常(图2-E)。
2.4.2 以油菜菌核病菌子囊孢子传染果桑 人工
接种油菜菌核病菌子囊孢子的果桑15 d后开始表现
发病症状, 病椹膨大, 小核果变色发黄(图3-A); 接
种18 d 后花被肿厚, 部分小核果开始膨大、呈灰色
(图3-B), 弄破病果后散发出臭味, 里面生有大量的
分生孢子梗和分生孢子; 接种20 d 后, 整个桑椹的
小核果全部被感染, 开始转变为灰白色(图3-C), 每
个小核果里面含有一个坚硬的菌核, 其发病症状与
接种果桑肥大性菌核病菌子囊孢子的病桑椹症状相
同(图3-D), 而接种无菌水的阴性对照, 桑椹表现正
常(图3-E)。取油菜核盘菌感染桑椹20 d的桑椹观察
发现, 发病的桑椹中生有分生孢子梗和大量的分生
孢子, 分生孢子梗的分枝基部稍粗, 先端细小, 分
生孢子卵形, 无色(图3-F), 这与果桑菌核病病果里面
观察到的分生孢子和分生孢子梗基本相同(图3-G)。
2.5 遗传关系分析
从已有的 72对引物组合中筛选出 4条前引物和
5 条后引物, 组成 10 对引物组合对 9 个样品进行扩
增, 共扩增出 83个条带 , 其中有多态性条带 74条,
占总条带的 88.1% (图 4)。据此绘制聚类图(图 5)。
共聚为两大类, I 类大部分为油菜菌核病菌, 其遗传
相似系数(GS)在 0.60~0.95 之间, 平均为 0.77, 种间
遗传差异较大 ; II 类为果桑菌核病菌 , 其 GS 在
0.68~0.92 之间, 平均为 0.80, 品种间的遗传基础相
46 作 物 学 报 第 41卷
图 3 桑椹接种油菜菌核病菌子囊孢子后植株发病症状症状
Fig. 3 Mulberry fruit symptoms after inoculated with ascospores of pathogens of sclerotinia stem rot from oilseed rape
A: 15 d; B:18 d; C: 20 d; D: 阳性对照; E: 阴性对照; F: 油菜菌核病菌接种桑椹后, 感病桑椹内的分生孢子梗和分生孢子; G: 接种果
桑肥大性菌核病菌后, 感病桑椹内的分生孢子梗和分生孢子。
A: the 15th day; B: the 18th day; C: the 20th day; D: positive control; E: negative control; F: conidia and conidiophores in sorosis inoculated
with pathogen of sclerotinia stem rot from oilseed rape; G: conidia and conidiophores in sorosis inoculated with the pathogens of hypertrophy
Sorosis sclerotenisis from mulberry.
对狭窄。但在 I类群体中, 采自重庆市北碚区斑竹村
西大油菜试验地的菌核病菌(Sclerotinia 1)和北碚区
斑竹村西大桑树资源圃(Ciboria 2) 的果桑菌核病菌
聚为一个小的分支, 表现特别。
3 讨论
果桑肥大性菌核病菌和油菜菌核病的病原菌同
属于核盘菌科(Sclerotiniaceae), 其病原菌的传染发
病始于其子囊孢子侵染被感植株的易感组织(如桑
椹和油菜花瓣), 重庆市和四川省的桑树雌花开放与
油菜开花时间都在 2 月下旬到 3 月下旬, 此时也正
是果桑菌核病和油菜菌核病的越冬菌核萌发子实体
及子囊盘的盛期, 这就为果桑肥大性菌核病菌和油
菜菌核病菌的子囊孢子相互交叉传染果桑和油菜奠
定了吻合的时间基础。本研究发现, 这 2 种病原菌
能相互传染果桑和油菜。这为 2 种作物菌核病的农
业防控提供了有用的依据, 即在果桑种植区域不要
间套种植油菜, 在油菜种植区域也不要间套种植果
桑和开雌花的桑树; 也为果桑肥大性菌核病的流行
病学研究提供了实验依据。在生产中, 初次种植果
桑的农户第 1 年的果桑均能丰产, 第 2 年可能发生
菌核病导致减产, 如缺乏科学防控措施, 第 3 年将
会被菌核病严重危害, 甚至绝收。初次种植果桑的
农户或地区, 逐年发生和加重菌核病危害, 其初始
病源一直深受关注？本试验结果表明, 该病原可能
图 4 部分引物在 9个样品中的多态性表现
Fig. 4 Polymorphism of partial primers used in nine samples
图 5 采自中国西南地区 9个不同菌株的 SRAP基因型聚类分析树状图
Fig. 5 Dendrogram for SRAP genotypes of nine strains from southwest area of China
第 1期 吕蕊花等: 果桑肥大性菌核病菌和油菜菌核病菌的交叉侵染、生物学特性及遗传关系 47
来自油菜等十字花科的菌核病菌的交叉感染, 可能
是果桑肥大性菌核病的病源和加重原因之一。
2007年 Sung 等[20]研究果桑菌核病菌时, 提出菌
丝在 PDA 培养基上面生长到后期阶段可以产生大量
的小分生孢子。Kimura[19]在发病的果桑肥大性菌核病
病果中发现有分生孢子梗和分生孢子, 这也与《中国
桑树栽培学》[18]的论述一致。在 PDA 培养基上, 果
桑肥大性菌核病菌在菌丝形成菌核的整个过程中始
终未观察到有分生孢子梗与分生孢子的产生。庄文
颖 [7]在油菜菌核病菌的菌核形成过程中没有观察到
分生孢子梗和分生孢子, 本研究观察油菜秆内的油
菜菌核病菌也无分生孢子梗和分生孢子的产生。但是,
用油菜菌核病菌接种到桑椹上, 却在桑果中发现了
分生孢子梗和分生孢子。这一研究结果提示, 大田中
桑椹感染菌核病在形成菌核的过程中, 因果桑菌核
的形成需有基物存在以形成基物子座, 即果桑菌核
是由寄主组织和菌丝组成, 使菌丝在生长中产生分
生孢子梗和分生孢子。然而, 菌核病菌在油菜中及在
培养基上生长, 由菌丝形成菌核的过程中没有基物,
菌核只为菌丝单独组成, 属于菌核子座, 所以不能产
生分生孢子梗和分生孢子, 这也是果桑、油菜菌核病
菌在田间由菌丝形成菌核过程中的一个显著区别。
果桑肥大性菌核病菌子囊盘外囊被的横切细胞
解剖结构是由圆胞组织构成, 其结果与《中国真菌
志》[7]核盘菌科分类中的杯盘菌属所述一致; 油菜菌
核病菌子囊盘外囊盘被的横切细胞解剖结构则是由
角胞组织组成; 与庄文颖 [7]给出的油菜核盘菌子囊
盘外囊盘被的解剖图相一致, 这也是核盘菌属与杯
盘菌属在分类上的一个最大区别。从而使得在分类
上果桑肥大性菌核病菌归为核盘菌科 (Sclerotinia-
ceae), 杯盘菌属 (Ciboria), 桑实杯盘菌 (Ciboria
shiraiana)。而油菜菌核病菌分类归属于核盘菌科
(Sclerotiniaceae), 核盘菌属(Sclerotinia)。
SRAP分子标记结果表明, 10对引物可对果桑、
油菜菌核病菌基因组 DNA 的83个位点扩增出条带,
多态性条带比例为88.1%, 在分子水平上表明, 中国
西南地区桑椹和油菜菌核病菌的亲缘关系比较近 ;
同时表明, 桑果和油菜菌核病菌的DNA存在丰富的
SRAP 多态性, 其遗传多样性与地理来源相关性不
明显, 这与王仲怡等[21]的研究一致。
4 结论
果桑肥大性菌核病菌与油菜菌核病菌的子囊孢
子能相互传染, 提示在栽培中果桑和油菜不能间套
种。菌核病菌的子囊孢子在侵染桑椹的过程中均可
产生分生孢子梗和分生孢子, 而在侵染油菜的过程
中不产生分生孢子梗和分生孢子, 这与其菌核形成
过程中是否有基物存在有关。2 种菌核病菌间具有
丰富的遗传多样性, 其亲缘关系与各自菌种及寄主
种类相关性较显著, 与采集地点相关性不大。
References
[1] 蒯元璋, 吴福安. 桑椹菌核病原及病害防治技术综述. 蚕业科
学, 2012, 38: 1099–1104
Kuai Y Z, Wu F A. A review on pathogens of mulberry fruit scle-
rotiniosis and its control technology. J Sci Sericul, 2012, 38:
1099–1104 (in Chinese with English abstract)
[2] 黄君霆, 朱万民, 夏建国, 向仲怀. 中国蚕丝大全. 成都: 四
川科学技术出版社, 1996. pp 854–855
Huang J T, Zhu W M, Xia J G, Xiang Z H. Complete Works of
Sericultural Technology in China. Chengdu: Sichuan Scientific &
Technical Press, 1996. pp 854–855 (in Chinese)
[3] 陈利锋, 徐敬友. 农业植物病理学(第 3 版). 北京: 中国农业
出版社, 2009. pp 213–215
Chen L F, Xu J Y. Plant Phytopathology in Agriculture, 3rd edn.
Beijing: China Agriculture Press, 2009. pp 213–215 (in Chinese)
[4] Adams P B, Ayers W A. Ecology of Sclerotinia species. Phyto-
pathology, 1979, 69: 896–898
[5] 杨新美. 油菜菌核病在我国的寄主范围及生态特性的调查研
究. 植物病理学报, 1959, 2: 111–122
Yang X M. An investigation on the host range and some ecologi-
cal aspects of the Sclerotinia disease of the rape plant. Acta Phy-
topathol Sin, 1959, 2: 111–122 (in Chinese with English abstract)
[6] 郭文信, 薛春夫, 何来新, 董永强, 高深. 油菜高产栽培技术.
现代化农业, 1994, (5): 24–26
Guo W X, Xue C F, He L X, Dong Y Q, Gao S. High yield culti-
vation technoloyg of rape. Mod Agric, 1994, (5): 24–26 (in Chi-
nese with English abstract)
[7] 庄文颖. 中国真菌志. 北京: 科学出版社, 1998. pp 62–64
Zhuang W Y. Flora Fungorum Sinicorum. Beijing: Science Press,
1998. pp 62–64 (in Chinese)
[8] Purdy L H. Sclerotinia sclerotiorum: history, diseases and symp-
tomatology, host range, geographic distribution and impact. Phy-
topathology, 1979, 69: 875–880
[9] Abawi G S, Grogan R G. Epidemiology of diseases caused by
Sclerotinia species. Phythopathology, 1979, 69: 899–904
[10] Schwartz H F, Steadman J R. Factors affecting sclerotium popu-
lations of, and apothecium production by Sclerotinia sclerotiorum.
Phytopathology, 1978, 68: 383–388
[11] Steadman J R. Control of plant diseases caused by Sclerotinia
species. Phytopathology, 1979, 69: 904–907
[12] Hao J J, Subbarao K V, Duniway J M. Germination of Sclerotinia
minor and S. sclerotiorum sclerotia under various soil moisture and
temperature combinations. Phytopathology, 2003, 93: 443–450
[13] Wu B M, Subbarao K V. Effects of soil temperature, moisture,
and burial depths on carpogenic germination of Sclerotinia scle-
rotiorum and S. minor. Ecol Epidemiol, 2008, 98: 1144–1152
48 作 物 学 报 第 41卷
[14] Mila A L, Yang X B. Effects of fluctuating soil temperature and
water potential on sclerotia germination and apothecial produc-
tion of Sclerotinia sclerotiorum. Plant Dis, 2008, 92: 78–82
[15] 方中达 . 植病研究方法 . 北京: 中国农业出版社, 1998. pp
122–126
Fang Z D. Research Methods in Phytopathology. Beijing: China
Agriculture Press, 1998. pp 122–126 (in Chinese)
[16] Mei J, Qian L, Disi J O, Yang X, Li Q, Frauen M, Cai D, Qian W.
Identification of resistant sources against Sclerotinia sclerotiorum
in Brassica species with emphasis on B. oleracea. Euphytica,
2011, 177: 393–399
[17] 吴红发, 黄东益, 黄小龙, 周鑫, 程文杰. 几种内生真菌 DNA
提取方法的比较. 中国农学通报, 2009, 25: 62–64
Wu H F, Huang D Y, Huang X L, Zhou X, Cheng W J. Compar-
ing study on several methods for DNA extraction from endo-
phytic fungi. Chin Agric Sci Bull, 2009, 25: 62–64 (in Chinese
with English abstract)
[18] 中国农业科学院蚕业研究所, 中国桑树栽培学. 上海: 上海科
学技术出版社, 1985. pp 300–301
The Sericultural Research Institute of Chinese Academy of Agricul-
tural Sciences. Cultivation Science of Mulberry Tree in China.
Shanghai: Shanghai Scientific & Technical Publishers, 1985. pp
300–301 (in Chinese)
[19] Kimura K. Mulberry Disease of Japan. Tokyo: Kenpakusha Pub-
lishing House, 1979. pp 109–110 (in Japanese)
[20] Sung K H, Wang G K, Gyoo B S, Sung H N. Identification and
distribution of two fungal species causing sclerotial disease on
mulberry fruits in Korea. Mycobiology, 2007, 35: 87–90
[21] 王仲怡, 包世英, 段灿星, 宗绪晓, 朱振东. 豌豆抗白粉病资
源筛选及分子鉴定. 作物学报, 2013, 39: 1030–1038
Wang Z Y, Bao S Y, Duan C X, Zong X X, Zhu Z D. Screening
and molecular identification of resistance to powdery mildew in
pea germplasm. Acta Agron Sin, 2013, 39: 1030–1038 (in Chi-
nese with English abstract)