全 文 ：作物学报 ACTA AGRONOMICA SINICA 2010, 36(10): 1691−1697 http://www.chinacrops.org/zwxb/
ISSN 0496-3490; CODEN TSHPA9 E-mail: xbzw@chinajournal.net.cn

本研究由现代农业产业技术体系建设专项(nycytx-34), 国家自然科学基金项目(30960322), 中国热带农业科学院橡胶研究所基本科研业务费专
项资金(XJSYWFZX2008-01)和国际科技合作项目(2008DFA32020)资助。
*
通讯作者(Corresponding author): 黄华孙, E-mail: xjshhs@163.com
第一作者联系方式: E-mail: tdhuang1986@tom.com
Received(收稿日期): 2010-02-05; Accepted(接受日期): 2010-04-20.
DOI: 10.3724/SP.J.1006.2010.01691
根癌农杆菌介导的橡胶树花药愈伤组织遗传转化体系的建立
黄天带 李 哲 孙爱花 周权男 华玉伟 黄华孙*
中国热带农业科学院橡胶研究所 / 国家橡胶树育种中心 / 农业部橡胶树生物学重点开放实验室 / 省部共建国家重点实验室培育基
地 / 海南省热带作物栽培生理学重点实验室, 海南儋州 571737
摘 要: 为建立根癌农杆菌介导的橡胶树遗传转化体系, 以花药愈伤组织为受体, 研究了农杆菌菌株、共培养温度、
共培养时间、乙酰丁香酮(AS)等因素对遗传转化效率的影响。结果表明, 农杆菌菌株、共培养温度和共培养时间对
转化效率具有显著影响, AS不影响转化效率。2.2万个花药愈伤组织经 EHA105菌株侵染后, 转入未添加 AS的培养
基, 22℃共培养 6 d, 通过 50 mg L–1卡那霉素抗性筛选、叶片 GUS染色、uidA和 Npt II基因 PCR特异扩增、PCR产
物测序及 Npt II基因 Southern检测, 鉴定出 11株转基因植株, 并通过嫁接和次生体胚发生, 获得来自 8个转基因株
系的 681株转基因植株, 移栽成活 253株。
关键词: 橡胶树; 根癌农杆菌; 花药愈伤组织; 遗传转化; 次生体胚发生
Establishment of Agrobacterium tumefaciens-mediated Anther Calli Transfor-
mation System in Hevea brasiliensis
HUANG Tian-Dai, LI Zhe, SUN Ai-Hua, ZHOU Quan-Nan, HUA Yu-Wei, and HUANG Hua-Sun*
Rubber Research Institute of Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences / National Rubber Tree Breeding Centre / Key Laboratory of Rub-
ber Biology, Ministry of Agriculture / State Key Laboratory Breeding Base of Cultivation ＆ Physiology of Tropical Crops, Danzhou 571737, China
Abstract: Developping a new Hevea variety by crossing breeding will take 20−30 years, but genetic transformation provides an
effective alternative for shortening breeding cycle. At present, two kinds of recipient materials, anther compact embryogenic calli
(ACEC) and maintained friable embryogenic calli (MFEC), have been used successfully in Hevea genetic transformation. How-
ever, few transformed plants are produced from ACEC-derived embyos, and plants regenerated from MFEC are abnormal, show-
ing that they have poorer performance in growth, yield, and disease resistance than the budded control. In order to establish Agro-
bacterium tumefaciens-mediated Hevea anther calli transformation system, we surveyed the factors influencing transformation
frequency, including strains of Agrobacterium, co-culture temperature/time and acetosyringone (AS), and the methods for em-
bryos regeneration. GUS transient expression frequency was significantly affected by Agrobacterium strains and co-culture tem-
perature/time, which was 5.07 blue spots/callus for EHA105, higher than that for GV3101 and LBA4404. The highest GUS tran-
sient expression frequency was 8.43 and 19.10 blue spots/callus under 22 co℃ -cultured temperature and 6 d co-cultured time
respectively. Twenty-two thousand ACEC were transformed by the strain EHA105 with pCAMBIA2301, and then transferred to
the medium without AS and incubated at 22 for 6 d in the dark. Subsequently, ℃ 11 transformants were identified by GUS staining,
PCR amplification of target genes, sequencing of PCR products and Southern hybridization. Among them, three planted died di-
rectly in the field; three as scions were budded onto seedlings, producing five budded transgenic plants; five were multiplicated at
embryo phase by secondary embryogenesis, producing 676 transgenic plantlets, among which 248 survived in the field. The re-
sults showed that the present transformation system and the plant propagation by transgenic embryos secondary embryogenesis
are efficient for the production of transgenic rubber plants.
Keywords: Hevea brasiliensis; Agrobacterium tumefaciens; Anther calli; Genetic transformation; Secondary embryogenesis
天然橡胶具有合成橡胶无法比拟的弹性、延展
性及导热性 , 是重要的工业原料 [1], 主要来源于巴
西橡胶树(Hevea brasiliensis Muëll. Arg.)。巴西橡胶
树为多年生异花授粉木本作物, 童期长达 5~6 年,
1692 作 物 学 报 第 36卷

通过常规杂交育种手段, 培育一个新品种需要 20~
30年。转基因技术是缩短橡胶树育种周期、加快新
品种培育十分有效的途径。
农杆菌 (Agrobacterium tumefaciens)介导的橡
胶树遗传转化研究, 始于 20世纪 90年代。Arokiaraj
等[2-3]以花药致密胚性愈伤组织为受体, 首次成功建
立农杆菌介导的橡胶树遗传转化体系, 获得 3 株转
Npt II基因和 uidA基因植株。Montoro等[4-5]和 Blanc
等 [6]以内珠被长期继代易碎胚性愈伤组织为受体 ,
通过研究钙、共培养温度等因子对农杆菌介导遗传
转化效率的影响, 获得 374 株转 Npt II 基因和 uidA
基因橡胶树。橡胶树遗传转化体系的成功建立为功
能基因转化橡胶树奠定了基础。Arokiaraj 等 [7]和
Jayashree等[8]均以花药致密胚性愈伤组织为受体, 分
别获得 102株转人血清白蛋白基因(HSA)植株和 3株
转抗死皮的橡胶树超氧化物歧化酶基因(HbSOD)植
株。Leclercq等[9]将另一抗死皮基因铜锌超氧化物歧
化酶基因(CuZnSOD)转入橡胶树内珠被长期继代易
碎胚性愈伤组织, 获得 90个转化愈伤系, 其中 13个
高表达 CuZnSOD基因。
刘志昕等 [10]和赵辉等 [11]分别以花药致密胚性
愈伤组织和长期继代的花药易碎胚性愈伤组织为受
体, 均获得 PCR 检测阳性胚状体, 但未再生转基因
植株, 主要原因在于受体的体胚发生和转化胚状体
再生能力低。本研究以花药致密胚性愈伤组织为农
杆菌侵染受体, 研究影响遗传转化效率因素的同时,
探讨转化胚状体再生及增殖方式, 以期建立农杆菌
介导的橡胶树遗传转化体系。
1 材料与方法
1.1 植物材料
将橡胶树大规模推广品种热研 7-33-97 单核靠
边期花药接种于胚性愈伤组织诱导培养基上, 培养
30 d后用于农杆菌侵染。
1.2 质粒
实验质粒为 pCAMBIA2301, 其 T-DNA 区域含
有 CaMV 35S启动子及其调控的 Npt II基因和带一
段内含子的 uidA基因(图 1)。
1.3 培养基
诱导愈伤培养基为MS培养基添加 3.0 mmol L–1
CaCl2、7.0 μmol L–1 KT、8.1 μmol L–1 NAA、6.8 μmol
L–1 2,4-D、204.5 mmol L–1蔗糖和 2.2 g L–1 Phytagel;
分化培养基为 MS培养基添加 2.2 μmol L–1 6-BA、
14.0 μmol L–1 KT、1.4 μmol L–1GA3、0.1 μmol L–1
NAA、3.8 μmol L–1 ABA、204.5 mmol L–1蔗糖和 2.2
g L–1 Phytagel; 植株再生培养基为 MS 培养基添加
0.23 μmol L–1 KT、0.11 μmol L–1 IAA、8.7 μmol L–1
GA3和 4.5 μmol L–1 2,4-D。
1.4 侵染与转化
将愈伤组织在 3 个不同农杆菌菌株(EHA105、
GV3101 和 LBA4404)悬浮液中侵染 5 min 后, 转入
添加不同浓度(0、5、10、50、100、500 μmol L–1)
乙酰丁香酮(AS)和 10 mg L–1硝酸银共培养基(诱导
愈伤培养基 pH 5.2)上培养, 20~28℃暗培养 1~9 d。
每个处理 3次重复。结果用 SAS9.0进行统计分析。
将共培养后的愈伤组织转移到添加 10 mg L–1 硝酸
银和 500 mg L–1特泯丁的愈伤诱导培养基上进行恢
复培养, 25℃暗培养 7~10 d。继而转入添加 10 mg L–1
硝酸银、50 mg L–1卡那霉素和 500 mg L–1特泯丁的
愈伤诱导培养基进行抗性愈伤筛选, 每 20 d继代一
次, 继代 2次后将抗性愈伤组织转入添加 500 mg L–1
特泯丁和 50 mg L–1 卡那霉素的分化培养基上诱导
体细胞胚胎发生。最后, 将体细胞胚转入添加 50 mg
L–1卡那霉素的植株再生培养基诱导植株再生。
1.5 GUS的瞬时表达及稳定表达
将共培养愈伤组织及抗性愈伤组织、胚状体和
植株叶片放入 X-Gluc染色液并抽真空 5~10 min后,
置 37℃培养箱中过夜培养。用体视显微镜观察 GUS



图 1 质粒 pCAMBIA2301 T-DNA区段示意图
Fig. 1 T-DNA structure of pCAMBIA2301 vector
LB: T-DNA左边界; RB: T-DNA右边界; 35S-t : 35S终止子; 35S-p: 35S启动子; Nos-t: Nos终止子; Npt II: 新霉素磷酸转移酶 II基因;
uidA: β-葡糖醛酸酶基因。
LB: left border; RB: right border; 35S-t: 35S terminator; 35S-p: 35S promoter; Nos-t: nopaline synthase gene terminator; Npt II: neomycinphos-
photransferase II gene; uidA: β-glucuronidase gene.

第 10期 黄天带等: 根癌农杆菌介导的橡胶树花药愈伤组织遗传转化体系的建立 1693


表达情况, 对每个处理愈伤组织的蓝色斑点进行计
数。X-Gluc染色液的组成为 100 mmol L–1 NaH2PO4·
2H2O, 100 mmol L–1 Na2HPO4·12H2O, 10 mmol L–1
Na2EDTA, 1 mmol L–1 K3[Fe(CN)6], 1 mmol L–1
K4[Fe(CN)6], 0.5%(V/V) TritonX-100, 20% (V/V)甲醇,
0.5 mg mL–1 X-Gluc。
1.6 转化子 PCR检测及产物序列分析
以抗性胚状体及 GUS 染色为阳性植株叶片
DNA为模板, 利用 Npt II和 uidA基因特异引物, 进
行 PCR检测。提取 DNA参照 Varghese等[12]方法。
Npt II特异扩增引物为 5′-AAGCACGAGGAAGCGG
TCAGC-3′和 5′-TGGAGAGGACACGCTGAAATCA
CC-3′, uidA 特异扩增引物为 5′-GGTGGGAAAGCG
CGTTACAAG-3′和 5′-GTTTACGCGTTGCTTCCGC
CA-3′。Npt II、uidA引物预期扩增片段长度分别为
812和 1 203 bp。PCR程序为 94℃预变性 2 min, 1个
循环; 94 40 s, 60 1 min, 72 1 min, 35℃ ℃ ℃ 个循环;
72 10 min, 1℃ 个循环; 4℃保存。用 1.0%琼脂糖凝胶
电泳分析扩增产物。利用 ABI3730X对 PCR检测为
阳性拟转化子产物进行测序后, 通过 Blastx 进行序
列比对分析。
1.7 转化子 Southern鉴定
按照 DIG High Prime DNA Labeling and Detec-
tion Starter Kit II (Roche, Germany)试剂盒, 以 EcoR I
过夜消化 PCR检测阳性植株的总 DNA (20 μg)为模
板 , 以随机引物法标记 Npt II 基因为探针 , 进行
Southern杂交鉴定。
1.8 转化植株移栽
将转基因植株直接移栽或通过两种方式增殖后
移栽, 其一利用次生体胚发生对获得的转化体细胞
胚进行增殖, 然后诱导体胚植株再生; 其二通过籽
苗芽接, 将转基因植株顶芽或芽片嫁接到籽苗, 成
活后进行移栽。参照 Hua等[13]的次生体胚发生方法
和黄守锋[14]的籽苗芽接法。
2 结果与分析
2.1 不同处理对 GUS瞬时表达的影响
农杆菌菌株、共培养温度和共培养时间等对橡
胶树花药愈伤组织的转化效率具有显著影响, EHA105
菌株侵染力最强, GUS 瞬时表达率为每个愈伤组织
块 5.07个蓝色斑点, 分别是 GV3101和 LBA4404菌
株的 11.8倍和 72.4倍; 随共培养温度的升高和共培
养时间的延长, 转化效率先升高再下降, 共培养温
度 22 , ℃ 共培养 6 d, 使 GUS瞬时表达率最高, 每个
愈伤组织块分别达到 8.43 个和 19.10 个蓝色斑点。
共培养基中添加 AS 无助于橡胶树花药愈伤组织转
化效率的提高, 随添加AS浓度的升高, 转化效率显著
下降, 并且, 当添加AS浓度高于50 μmol L–1时, 愈伤
组织生长开始受到抑制(表 1)。
2.2 转化植株的获得及其分子生物学鉴定
利用优化后转化体系, 即以 EHA105 为侵染菌
株, 侵染 5 min后, 转入未添加 AS的共培养基 22℃
暗培养 6 d, 转化 2.2 万个花药愈伤组织, 经 2 个周
期抗性愈伤组织筛选和 3个半月愈伤组织分化后, 共
获得 541个抗性胚状体。随机取 13个抗性胚状体部
分胚块进行 PCR检测, 其中 4 个抗性胚状体检测到
Npt II基因特异片段, PCR检测阳性率为 30.78%。取
其中一个 PCR阳性胚状体进行GUS染色, 可看到整
个胚状体被染成蓝色(图 2-A)。
诱导 540个胚状体再生植株, 共获得 99株抗性
植株(图 2-D), 植株再生率为 18.33%, 其中 11 株叶
片 GUS染色呈现蓝色(图 2-B)且 uidA基因与 Npt II
基因均扩增出与阳性对照相同的 PCR特异扩增片段
(图 3), PCR 特异扩增片段序列与 pCAMBIA2301
(gi:7638149)中 Npt II 和 uidA 基因序列相似率均为
97%以上。随机挑取其中 4株拟转化植株进行 Southern
杂交, 结果 3株植株具有明显杂交信号, 2株为单拷
贝插入, 1株为三拷贝插入(图 3), 另一单株杂交信号
较弱。
2.3 转化植株的繁殖及移栽
获得 11株转基因植株后, 3株(1~3)未经增殖直
接移栽到大田, 均未成活; 3株(4~6)通过籽苗芽接进
行一轮室外嫁接繁殖(图 2-E), 获得 5 株转基因单株
(图 2-G); 其余 5株转基因植株在胚状体阶段通过橡
胶树次生体胚发生进行繁殖研究(图 2-C)。5 个转基
因胚状体(7~11)进行 3 次次生体胚发生增殖后诱导
植株再生, 最终获得 676 株转基因单株, 增殖系数
为 135.20, 移栽成活 248株(图 2-F), 成活率为 36.69%,
5个转基因胚状体来源的植株均移栽成活(表 2)。
3 讨论
3.1 农杆菌介导橡胶树遗传转化体系建立
农杆菌介导的遗传转化在水稻[15]、玉米[16-17]、
番茄[18]等作物已经成为常规的转基因手段, 但是对
一些重要的木本植物仍然比较困难。自 20 世纪 90
年代以来, 世界各主要植胶国家如马来西亚、印度
及法国, 相继开展农杆菌介导的橡胶树遗传转化研
1694 作 物 学 报 第 36卷

表 1 不同处理对 GUS瞬时表达的影响
Table 1 Effects of different treatments on GUS transient expression
处理
Treatment
愈伤数(块)
No. of calli
斑点数(个)
No. of blue spots
斑点数(个)/愈伤
Blue spots per callus
EHA105 30 152 5.07 a
GV3101 30 13 0.43 b
菌株
Strain
LBA4404 30 2 0.07 b

0 30 142 4.73 a
5 30 96 3.20 ab
10 30 65 2.17 abc
50 30 39 1.30 bc
100 30 12 0.40 bc
乙酰丁香酮
AS (μmol L–1)
500 30 0 0.00 c

20 30 148 4.93 ab
22 30 253 8.43 a
24 30 106 3.53 bc
26 30 160 5.33 ab
共培养温度
Culture temp. ( )℃
28 30 9 0.30 c

1 30 3 0.10 c
2 30 0 0.00 c
3 30 16 0.53 c
4 30 225 7.50 bc
5 30 211 7.03 bc
6 30 573 19.10 a
7 30 316 10.53 b
8 30 164 5.47 bc
共培养时间
Culture time (d)
9 30 116 3.87 bc
数据后不同小写字母表示不同处理间在 0.05水平上差异显著(Duncan法)。
The small letters followed the data in the last colume mean significantly different between the treatments at the 0.05 probability level
(Duncan’s method).



图 2 转基因胚状体、植株 GUS检测、植株再生及移栽
Fig. 2 GUS staining for transformed embryos and plantlets, plant regeneration and transplantation
A: 子叶形胚 GUS染色(右边为对照); B: 转基因植株叶片 GUS染色(右边为对照); C: 转基因胚状体次生体胚发生; D: 转基因再生植
株; E: 籽苗芽接法嫁接转化植株; F: 直接移栽转化植株; G: 嫁接成活转化植株。
A: GUS staining for cotyledonary embryo (right is control); B: GUS staining for leaf of transformed plantlet (right is control); C: transformed
embryo secondary embryogenesis; D: regenerated Hevea; E: budded transgenic Hevea by mini-seedling budding; F: transgenic Hevea in soil;
G: growing budded transgenic Hevea.
第 10期 黄天带等: 根癌农杆菌介导的橡胶树花药愈伤组织遗传转化体系的建立 1695




图 3 转基因植株分子检测
Fig. 3 Molecular detection of transgenic plantlets
左: uidA基因 PCR特异扩增; 中: Npt II基因 PCR特异扩增; 右: Npt II基因 Southern检测; M: marker; +: 阳性对照, 质粒
pCAMBIA2301; –: 阴性对照, 非转化植株; 0: 空白对照, 水; 1~11: 转基因单株。
Left: PCR analysis of uidA gene; middle: PCR analysis of Npt II gene; right: Southern analysis of Npt II gene; M: marker; +: positive control,
pCAMBIA2301; –: negative control, untransformed plantlet; 0: blank control, water; 1–11: transgenic plantlets.

表 2 转基因植株的增殖及移栽结果
Table 2 Results of multiplication and transplantation for transgenic Hevea
株号
No.
增殖方式
Multiplication methods
增殖前株数
No. prior to
multiplication
增殖后株数
No. after
multiplication
增殖系数
Multiplication
index
移栽成活株数
Survived No.
移栽成活率
Survived
frequency (%)
1–3 未增殖
Non-multiplication
3 3 1 0 0
4 1 2 2 2 100.00
5 1 1 1 1 100.00
6
籽苗芽接
Mini-seedling budding
1 2 2 2 100.00
7 1 272 272 27 9.93
8 1 178 178 110 61.80
9 1 18 18 6 33.33
10 1 199 199 103 51.76
11
次生体胚发生
Secondary embryogenesis

1 9 9 2 22.22
总计 Total 11 684 45.9 253 36.99

究, 先后建立农杆菌介导的遗传转化体系, 并利用
其转化体系获得功能基因转化植株[2-9,19-21]。我国橡
胶树遗传转化研究起步相对较晚, 刘志昕等[10]、赵
辉等[11]、王颖等[22]和洪磊等[23]对橡胶树遗传转化方
法及其影响因素进行研究, 获得了 PCR 检测阳性胚
状体, 但未见 Southern 检测、转化再生植株及转化
效率报道。本研究获得 11 株 GUS 表达、PCR 扩增
和 PCR产物测序检测阳性植株, 随机选取 4 株进行
Southern检测, 结果 3株为阳性植株。
3.2 转化胚状体次生体胚发生是获得转化植株
的有效途径
刘志昕等 [10]、赵辉等 [11]和王颖等 [22]获得 PCR
检测阳性胚状体, 但均未获得转化植株, 特别是赵
辉等[11]以长期继代的花药易碎胚性愈伤组织为受体,
胚状体诱导率达到 30%, 但是绝大部分为畸形胚 ,
无法再生植株。Arokiaraj 等[2]以 GV2260 为侵染菌
株获得 65 个抗性胚状体 , 但仅再生 3 株植株 , 以
LBA4404为侵染菌株获得 38个抗性胚状体, 未获再
生植株。虽然 Blanc 等[24]利用长期继代的易碎胚性
愈伤组织高效增殖特点, 增殖转化愈伤组织后再诱
导体胚发生, 成功获得来自 6个愈伤系的 374株转基
因植株, 但是, 长期继代的胚性愈伤组织再生植株
产量低、长势差、易感病[24], 无法实现通过转基因
改良橡胶树目的。转化胚状体畸形胚比例高、生活
力弱, 无法直接再生植株是橡胶树遗传转化重要技
术瓶颈。
橡胶树次生体胚发生是以胚状体为外植体, 通
过循环体胚发生, 实现胚到胚的循环增殖, 最终实
现体胚植株增殖的方法, 异常胚状体和成熟子叶期
胚状体均能诱导次生体胚发生和产生成熟子叶期胚
状体[13]。本研究中抗性胚状体 PCR检测阳性率高达
30.78%, 但是抗性胚状体植株再生频率仅为 18.33%,
而且, 利用次生体胚发生成功获得 5 个株系 676 株
转基因单株。因此, 利用次生体胚发生将抗性胚状
体增殖后, 再诱导抗性胚状体植株再生和转基因检
测, 不但能降低胚状体无法再生而造成转化胚状体
丢失的风险, 而且可进一步提高遗传转化效率, 在
理论上, 本研究建立遗传转化体系的转化效率, 将
由 0.05%(11/22000)提高到 0.75%(540×30.78%/22000),
这还需在后续研究中验证。
1696 作 物 学 报 第 36卷

由于转基因植株成活频率低丢失大量转化子是
橡胶树遗传转化另一难题, Arokiaraj 等[7]移栽 73 株
只成活 16 株; 本试验直接移栽 3 株, 均未成活。为
此, Arokiaraj 等[3]直接将转基因植株作为芽条嫁接
于室外实生砧木上, 但是, 这种途径不能从根本上
解决转化子的丢失问题, 因为无法确保转化胚状体
全部再生植株; Blanc 等[6]增殖长期继代转化愈伤后
再生植株, 高效获得 6 个株系 374 株转基因橡胶树,
但是, 这类受体再生植株农艺性状差 [24], 与通过转
基因改良橡胶树目的相悖。本研究通过次生体胚发
生成功获得 5个株系 676株转基因单株, 移栽成活 248
株, 每一个转化子均有转化植株移栽成活且室内依
然保存转化胚状体。转化胚状体次生体胚发生是从
胚状体阶段进行转化胚状体的增殖, 大大提高了转
化胚状体进入植株再生阶段的比例, 而且, 由于转
化胚状体的增殖 , 致使再生植株数量也相应增加 ,
因此, 转化胚状体次生体胚发生是获得足够转化植
株, 实现安全移栽的有效途径。
4 结论
以 EHA105为侵染菌株, 侵染 5 min后, 转入未
添加AS的共培养基, 22℃暗培养 6 d, 成功建立了根
癌农杆菌介导的橡胶树花药愈伤组织遗传转化体系,
并证明转化胚状体次生体胚发生是获得转化植株的
有效途径。
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科学出版社生物分社新书推介
《生物序列分析》（生物信息学数据分析丛书）
〔英〕R. Durbin S. Eddy A. Krogh G. Mitchison 编著
王俊 郭一然 单杲 主译
978-7-03-028443-3 ￥60.00 2010年 8月出版
本书在结构上大致可以分为四个部分，每个部分所覆盖的问题分别是：
二序列联配、多序列联配、系统发育树和 RNA 结构。具体分为：二序列联
配、Markov 链与隐马模型、使用 HMM 的二序列联配、用于序列家族的列
型 HMM、多序列联配方法、构造系统发育树和系统发育的概率论方法。本
书介绍的列型 HMM、多序列联配方法、构造系统发育树和系统发育的概率
论方法。本书介绍的一些方法将不同的生物信息来源整合到一般的、清晰且
可操作的序列分析概率论模型中，有助于研究者深入了解生物序列分析的基
础。本书可供生物信息学、分子生物学、数学、计算机科学以及物理学专业
的研究生或高年级本科生及这些领域的老师和研究人员参考。
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