全 文 ：Vol. 30 , No. 11
pp. 1152 - 1158 　Nov. , 2004
作 　物 　学 　报
ACTA AGRONOMICA SINICA
第 30 卷 第 11 期
2004 年 11 月 　1152～1158 页
水稻苯达松敏感致死基因 ( ben)的电子杂交定位和基因预测
杨剑波1 　向太和1 　李　莉1 　王永杰1 　黄大年2 Ξ
(1 安徽省农业科学院水稻研究所 ,安徽合肥 230031 ;2 中国水稻研究所 ,浙江杭州 310006)
摘　要 　来自水稻突变体的苯达松敏感致死基因 ( ben) 能够作为一种除草剂筛选标志用于杂交水稻种子的安全生产。
本研究利用我们已得到的与 BenΠben 基因紧密连锁的两个 RAPD 标记 (OPG18Π972 ,OPG18Π943) 以及与该标记高度同源的
跨叠克隆 Contig10968(来自中国水稻基因组框架序列 ,全长 8 273 bp)的序列信息 ,沿标记的两端设计新的 PCR 引物 ,以携
带苯达松抗性基因 ( Ben)和苯达松敏感基因 ( ben)的水稻近等基因系为模板 ,通过对扩增产物的序列拼接和比对 ,成功地
将 OPG18Π972 和 OPG18Π943 标记从 972 bp 和 943 bp 步移延伸到 8 138 bp 和 8 103 bp (提交到 GenBank 的登记号分别为
AY181204 和 AY181203) 。并利用电子杂交将延伸后的序列定位于水稻第 2 染色体上 15015 cM处 ,在对标记两端及其附
近的序列进行生物信息学分析后 ,我们初步预测 Ben 基因可能是编码某种受体蛋白的基因或催化 62OH2苯达松与葡萄糖
缀合的淀粉合成酶类似基因。
关键词 　水稻 ;苯达松敏感致死基因 ;定位 ;预测 ;电子杂交
中图分类号 :S511
Location of Bentazon Sensitive Lethality Gene ( ben) on Rice Chromosome and
Its Gene Forecast in silico
YANGJian2Bo1 , XIANG Tai2He1 , LI Li1 , WANG Yong2Jie1 , HUANG Da2Nian2
(1 Rice Research Institution ,Anhui Academy of Agricultural Sciences , Hefei 230031 , Anhui ;2 China National Rice Institution , Hangzhou 310006 , Zhejiang ,
China)
Abstract A bentazon sensitive lethality gene obtained from rice mutant can be used as a herbicide selection marker to en2
sure safe production of hybrid rice seeds. In our previous study ,two RAPD markers OPG18Π972 and OPG18Π943 closely
linked to BenΠben gene were anchored on Contig 10968 based upon homology comparison of the sequence. Here a set of new
PCR primers were designed in series according to Contig 10986 sequence around the markers. By alignment and comparison
of PCR fragments amplified on with the template DNA from BenΠben near2isogenic lines of rice ,the markers OPG18Π972
and OPG18Π943 were successfully walked and elongated from 972 bp and 943 bp to 8 138 bp and 8 103 bp ( GenBank ac2
cession :AY181204 and AY181203 respectively) which were anchored to chromosome 2 at 15015 cM in silico. Bioinformat2
ics analysis displayed a clue that Ben gene might code a receptor protein or a certain starch synthase2like protein which cat2
alyzed 62hydroxybentazon (62OH2bentazon) into the glucose conjugate.
Key words Rice ( Oryza sativa L1) ;Bentazon susceptible lethality gene ;Location ;Forecast ; in silico
　　水稻苯达松敏感致死基因分别由日本学者 Mori
从农林 8 号诱变的突变体农林 8 号 m[1 ] 和我国张集
文等从 W6154S诱变的突变体 8077S中发现[2 ] ,研究
表明两种来源的水稻苯达松敏感致死基因均由单个
隐性核基因控制[1～3 ] ,因此苯达松敏感致死基因在
杂交水稻生产中具有广阔的应用前景[4 ] ,其利用价
值表现在 : ①转育不育系 ,保证杂交水稻种子纯度。
将其转入雄性不育系 ,利用这样的不育系进行两系
或三系杂交稻制种即使杂交稻种中含有部分不育系
自交种子 ,在苗期通过喷施苯达松即可将其清除 ,从
而确保杂交稻种纯度。②转育恢复系 ,革新杂交水
稻制种方法。将其转入恢复系 ,则可实现杂交稻制
基金项目 :国家高技术研究发展计划 (2001AA211061)和国家攻关计划 (2001BA302B)资助项目。
作者简介 :杨剑波 (1957 - ) ,男 ,安徽太和人 ,博士 ,研究员 ,主要从事农业生物技术研究。E2mail :yjianbo @mail1hf1ah1cn Tel1 (0551) 2160212
Received(收稿日期) :2003206218 ,Accepted(接受日期) :20032122031

种中 ,父母本混播混种 ,在自由授粉后 ,通过喷施苯
达松杀死父本 ,从而简化制种过程中繁杂的人工劳
动 ,有利于实现机械化操作。随着生物信息学的发
展使快速克隆相关基因成为可能 ,特别是 2002 年 4
月中国科学院生物基因组研究中心和华大基因公司
以及瑞士的 Syngenta 公司同时公布了水稻全基因组
的框架序列[5 ,6 ] ,利用生物信息学提供的技术平台及
分析技术可大大加速水稻基因组及功能基因组研究
进程 ,利用网上的生物信息学资源进行基因的定位
和新基因的电子克隆 ( in silico cloning) 也成为一种
新兴的基因克隆的策略和手段。在前文中[7 ,8 ] ,我们
报道了与水稻苯达松敏感致死基因 ( ben) 和其等位
水稻苯达松抗性基因 ( Ben) 紧密连锁的 RAPD 共显
性标 记 OPG18Π943 及 OPG18Π972 , 并 分 析 证 实 OPG18Π943 和 OPG18Π972 的核苷酸序列与中国水稻基因组计划公布的水稻全基因组框架序列中跨叠克隆 Contig10968 (全长 8 273 bp)中的一部分高度同源。本研究依据 Contig10968 序列设计 PCR 引物 ,将多态性标记 OPG18Π943 和 OPG18Π972 向两端步移 ,并利用生物信息学技术对水稻苯达松敏感致死基因进行染色体定位和基因预测。1 　材料与方法111 　PCR引物的设计　　根据跨叠克隆 Contig10968 序列[9 ] ,从 5′→3′端依次人工并结合软件 Primer (Version 510) 辅助设计引物。引物设计结果见表 1 和图 1 ,设计的引物由上海 Sangon 公司合成。
表 1 根据 Contig10968 序列设计引物在农林 8 号和农林 8 号 m中分别扩增出的序列长度
Table 1 The PCR amplificated results from Norin and Norin 8m with primers which design on the basis of sequence of Contig10968
引物编号
No1 of prime 引物序列Primer sequence(5′→3′) 根据 Contig10968 推测序列长度Predictive length(bp) 实际测定序列长度Actual length (bp)农林 8 号
Norin 8
农林 8 号 m
Norin 8m
W1 GCATTTTCAACGTAAAATAAGCATAGGGCAGTTAGGGCTGTTG 1 054 1 013 1 013
OPG18 GGCTCATGTG 2 972 943
W2 TCCTACTCCCCTGGACACTGTCACATGTGTGGAATCGAGC 1 001 1 006 1 005
W3
TCCTAGCTCGATTCCACACAT
GGCGACATCGACATGACA 1 013 848 848
W4
CATGTCATGTCGATGTCGC
CTGCTCACACAGTGCTCCAT 806 934 933
W5 TGAGCAGCACACAACTACACCTGCTCAGCTACATGCCTACG 1 057 1 041 1 041
W6
TCACAGGCAATGACAGGAAG
ACACGCATGAAGCAGTATCG 969 971 970
W7
CGATACTGCTTCATGCGTGT
AGCGAGCGAGAAATCCAGTA 967 963 963
W8 TACTGGATTTCTCGCTCGCTGTCTCAAGAGCCGTCCAGC 891 894 894
合计 Total 8 220 8 138 8 103
图 1 标记 OPG18Π943、OPG18Π972 ,跨叠克隆 Contig 10968 , BAC克隆 OJ15202C09、OJ11122G06 的相互关系
Fig1 1 Alignment of relationship among markers of OPG18Π943 and OPG18Π972 ,
Contig 10968 , BAC clones OJ15202C09 and OJ11122G06
3511　11 期 杨剑波等 :水稻苯达松敏感致死基因 ( ben)的电子杂交定位和基因预测 　　　

112 　PCR反应
用表 1 新合成的引物 ,以携带苯达松抗性基因
( Ben)的日本粳稻品种农林 8 号和由农林 8 号诱变
得到的苯达松敏感致死突变体 ( ben) 农林 8 号 m 的
成熟种子为材料 ,30 ℃发芽培养 12 d ,分别提取 DNA
作为模板 ,进行 PCR 扩增反应。
PCR 反应体系是每 35μL 反应体积中含 ddH2O
2313μL ,10 ×反应缓冲液 315μL ,dNTP(2 mmolΠL ,美
国 Promega 公司) 2μL ,正、反向引物 (1 pmolΠμL ,上海
Sangon 公司)各 2μL ,Pfu DNA 聚合酶 (10 UΠμL ,上海
Sangon 公司) 012μL ,模板 DNA (约 50 ngΠμL) 2μL。
反应程序为 94 ℃变性 5 min 后 ,按 94 ℃45 s、58 ℃45
s、72 ℃90 s 进行 35 个循环 ,最后在 72 ℃延伸 5 min ,
反应结束后立即在每 35μL 反应体积中直接加入 1
U Taq DNA 聚合酶 (加拿大 Biostar 公司 ) ,在 72 ℃
继续延伸 10 min ,以便给 PCR 产物加上“dA”尾。
114 %琼脂糖凝胶电泳 115～2 h、5 VΠcm ,溴化乙锭
染色 ,在紫外光下用凝胶成像系统 (美国 Bio2Rad 公
司)观察拍照记录结果。
113 　PCR产物的纯化、克隆及序列的测定
从琼脂糖凝胶中切下特异性扩增条带 ,用 QI2 AEXⅡDNA 提取试剂盒 (美国 Qiagene 公司产品) 纯化 DNA ,与载体 pCRTM211 (美国 Invitrogen 公司产品)连接 ,转化 InVαF′感受态细胞 ,取白色单菌落 ,提取质粒 DNA ,经 EcoR Ⅰ或 BstX Ⅰ酶切验证 ,阳性克隆的序列由上海基康生物技术公司用 ABI3700 型 DNA自动序列分析仪测定。114 　电子杂交定位和基因预测与有关水稻基因组研究的网络进行联网[10～21 ] ,将步移后的序列与不同的 BAC、PAC、EST、STS 等网络数据库进行电子杂交 ,最后将序列锚定到水稻染色体特定的标记上 (sequences anchored to rice markersin silico) ,并利用基因预测软件 (Rice HMM 210)对序列进行基因预测。2 　结果211 　PCR扩增　　8 对设计的引物均扩增出清晰的特征条带 ,其中 W1 、W2 、W5 、W6 、W7 和 W8 六对引物扩增出与预期分子量大体一致的产物 ,而 W3 引物扩增出的PCR 产物比预期的分子量小 ,W4 引物扩增出的 PCR产物比预期分子量大 (表 1 和图 2) 。
图 2 　PCR扩增结果
Fig12 　The results of PCR amplification
M:λDNA + EcoR Ⅰ+ Hind Ⅲ分子量标记 ;N8 :农林 8 号 ;N8m :农林 8 号 m
M:λDNA + EcoR Ⅰ+ Hind Ⅲmolecular marker ;N8 :Norin 8 ;N8m :Norin 8m
212 　PCR产物的克隆和测序
PCR 产物经纯化克隆 ,获得了白色单菌落 ,提取
质粒 DNA 经 EcoR Ⅰ或者 BstXⅠ酶切鉴定均为阳性
克隆 (图 3) 。序列分析指出 PCR 产物的两端序列与
扩增的引物相同或者反向互补。除去重叠序列拼接
后 ,农林 8 号的序列 (Norin 8 walking sequence ,简称
N8WS)总长为 8 138 bp ( GenBank 登记号 :AY 181204
) ,农林 8 号 m 的序列 (Norin 8m walking sequence ,简
称 N8mWS) 总长为 8 103 bp ( GenBank 登记号 :
AY181203) 。
4511 　　　作 　　物 　　学 　　报 30 卷 　

图 3 　转化克隆质粒 DNA的酶切鉴定
Fig13 　The plasmid DNA of recombinants digested with restrict endonucleases
M:λDNA + EcoR Ⅰ+ Hind Ⅲ分子量标记 ;N8 :农林 8 号 ;N8m :农林 8 号 m ;W1 ,W3 ,W4 ,W5 ,W6 ,W7 :
克隆质粒 DNA + EcoR Ⅰ;W2 ,W8 :克隆质粒 DNA + BstXⅠ.
M:λDNA + EcoR Ⅰ+ Hind Ⅲmolecular marker ;N8 :Norin8 ;N8m :Norin8m ;W1 ,W3 ,W4 ,W5 ,W6 ,W7 :Plasmid
DNA of recombinants cut with EcoR Ⅰ;W2 ,W8 :Plasmid DNA of recombinants cut with BstXⅠ.
213 　同源性比较
经与国际核酸数据库搜索比较[21 ] ,同 OPG18Π
972 和 OPG18Π943 一样 ,N8WS 和 N8mWS 也未搜索
到同源性较高的序列和功能基因。此外 ,将 N8WS
和 N8mWS与 NCBI 专门建立的水稻基因组二级数
据库进行比较 (比较参数设定为默认值) [22 ] ,N8WS
和N8mWS 均与序列登记号 AAAA 0100726611 高度
同源 ,进一步通过比较可知 Contig10968 即为 AAAA
0100726611 中的 4 737 bp 起始至末端序列 (表 2) 。
表 2 农林 8 号和农林 8 号 m DNA步移序列与 NCBI中水稻基因组二级数据库的比较 3
Table 2 Comparison between Norin 8 and Norin 8m DNA walking sequences blast with the Contigs database of rice in NCBI
序号
No1 数据库检索号Accession 长度Length 高分片段配对计分HSP score 偶然选中片段的可能性E value 相似性Identities
1 AAAA0100726611 13 009 7 0816 960 010 3 728Π3 766(98 %)3 723Π3 767(98 %)
2 AAAA0100126011 30 520 1 6001 561 010 816Π819(99 %)833Π842(98 %)
3 AAAA0102367011 3 226 1 3101 302 010 691Π697(98 %)
4 AAAA103913611 1 215 1 2151 192 010 638Π646(98 %)
5 AAAA0101808711 5 170 1 0271 244 010 833Π924(90 %)842Π932(90 %)
6 AAAA0103507811 1 504 613617 e2172e2173 334Π340(98 %)344Π354(97 %)
7 AAAA0102446811 3 035 393385 e2105e2103 201Π202(99 %)205Π207(99 %)
8 AAAA0101658411 5 869 165198 5e2374e237 129Π143(90 %)159Π185(85 %)
　注 : 3 两排数据中 ,上排为 N8WS ,下排为 N8mWS ,一排数据表示二者相同。
Notes : 3 Between two data in one location ,upper line is for N8WS ,lower line is for N8mWS1 One datum in one location means the equal value for N8WS and
N8mWS1
214 　电子杂交、染色体定位及基因预测
将 N8WS和 N8mWS 分别与 RGP、TIGR、Gramene
等 12 个研究水稻的国际组织提供的 BAC、PAC、
EST、STS 等数据库进行电子杂交[10～21 ] ,其结果之一
是 N8WS 和 N8mWS 与 RGP 提供的 BAC 克隆
OJ1520
-
CO9 (147 325 bp , accession : AP00406411) 和
OJ1112
-
G06 ( 122885 bp , accession : AP003996) 相杂
交 ,N8WS 与二者杂交的 score 值均高达 18 123 ,
5511　11 期 杨剑波等 :水稻苯达松敏感致死基因 ( ben)的电子杂交定位和基因预测 　　　

N8mWS 与二者杂交的 score 值也高达 17 943 (杂交参
数设定为默认值) 。
利用 TIGR 数据库 ,将上述两个杂交上的 BAC
克隆与 Cornell Rice Genes Database 提供的 649 个标
记序列和 RGP 提供的 13 246 个标记序列 ,共13 895
个标记序列进行搜索 ,除去其中末端含 Poly AΠPoly T 或为 Ns(未知序列) 的标记 ,并选择至少有 74 bp 且相似性指数 ( Identities) 大于 97 %的标记 ,结果 BAC克隆 OJ1520 C09 和 OJ1112 - G06 均被定位于第 2染色体上离短臂顶端 15015 cM 处[23 ,24 ] , 据此将N8WS和 N8mWS也定位于第 2 染色体上距短臂顶端 15015 cM 处 (表 3) 。
表 3 OJ1520
-
C09 和 OJ1112
-
G06 的电子杂交定位
Table 3 Anchore of OJ1520
-
C09 and OJ1112
-
G06 to the markers of chromosome in silico
标记来源
Marker source
染色体
Chromosome
遗传距离
Genetic distance (cM)
位点
Locus
标记号
Marker accession
OJ1520
-
C09 RGP 2 15015 C1137A AU091640
RGP 2 15015 C1137A AU091641
RGP 2 15015 C63223 AU161456
RGP 2 15015 E61503 AU031403
RGP 2 15015 L1011 D25488
RGP 2 15015 R0424 AU101606
RGP 2 15015 S824 AU032997
RGP 2 15015 S824 D39474
RGP 2 15113 C1137B AU091640
RGP 2 15113 C1137B AU091641
OJ1112
-
G06 RGP 2 15015 C1137A AU091640
RGP 2 15015 C1137A AU091641
RGP 2 15015 C63223 AU161456
RGP 2 15015 L1011 D25488
RGP 2 15015 S824 AU032997
RGP 2 15015 S824 D39474
RGP 2 15113 C1137B AU091640
RGP 2 15113 C1137B AU091641
Cornell 2 17516 RZ446 AA231784
　　此外 ,TIGR 数据库对 BAC 克隆 OJ1520
-
C09 和
OJ1112
-
G06 进行了基因预测 (表 4) ,其中与 N8WS
和 N8mWS同源的区段预测的基因为 receptor protein2
like2related (OJ1520
-
C09 中的编号 2) 和 similar to Ar2
abikopsis thaliana chromosome 1 F14K14115 (OJ1520
-
C09 中的编号 3) ,这与我们利用 Rice HMM 软件[25 ]
预测的结果一致 (资料未出示) 。
3 　讨论
本研究依据与 RAPD 标记 OPG18Π972 和 OPG18Π
943 高度同源的中国水稻全基因组框架序列中跨叠
克隆 Contig10968 ,成功地将与 BenΠben 基因共分离
的标记OPG18Π972 和OPG18Π943 步移延伸至 8 138bp
和 8103 bp。通过电子杂交 ,将多态性标记步移后的
序列定位于第 2 染色体上距短臂顶端 15015 cM 处 ,
由于多态性标记 OPG18Π972 和 OPG18Π943 与 Ben 和
ben 基因共分离 ,据此 ,将 ben 和 Ben 基因也定位于
第 2 染色体上距短臂顶端 15015 cM (图 4) 。另外 ,
Zhang J 等报道 ,利用 SSR 标记对其选育的水稻苯达
松敏感致死突变体 8077S进行了苯达松敏感致死基
因的标记 ,并将苯达松敏感致死基因 (命名为 bel) 定
位于第 3 染色体距 SSR 标记 RM168 711 cM 处[26 ] 。
而本研究将来源于农林 8 号 m 的苯达松敏感致死
基因 ( ben) 定位于第 2 染色体上距短臂顶端 15015
cM处。由于 ben 和 bel 基因是来源于两个不同的突
变体 ,我们的研究表明农林 8 号 m 比 8077S 对苯达
松的敏感程度高 ,二者相差近一倍左右 (资料未出
示) ,据此 ,我们认为 ben 基因和 bel 基因是位于不同
染色体上的两个不同的基因。
6511 　　　作 　　物 　　学 　　报 30 卷 　

表 4 OJ1520
-
C09 和 OJ1112
-
G06 的基因预测
Table 4 Gene forecast of OJ1520C09 and OJ1112 G06
基因编号
Gene No1 正负链PlusΠminus
strand
起始碱基
From
终止碱基
To
基因名称
Gene name
OJ1520
-
C09 1 + 25 845 Conserved hypothetical protein
2 - 4246 1463 Receptor protein2like2related
3 - 6224 4851 Similar to Arabidopsis thaliana chromosomel F14k14115
4 - 19 024 16 307 Hypothetical protein
5 + 39 991 41 514 Gene
-
id :T12B11122related
6 - 44 986 43 224 Hypothetical protein
7 + 50 118 51 539 AP003020 putative cinnamoyl2CoA reductase
8 - 53 931 51 952 Hypothetical protein
9 + 60 000 65 183 Putative reverse transcriptase2related
10 - 70 832 65 923 Putative wall2associated protein kinase
11 - 76 587 75 343 Conserved hypothetical protein
12 + 81 839 84 562 Putative wall2associated kinase2
13 - 94 927 88 949 Putative mutator2like transposase
14 + 97 640 101 956 Putative wall2associated protein kinase
15 + 104 446 107 377 Eukaryotic protein kinase domain ,putative
16 - 116 501 112 805 Hypothetical protein
17 + 118 968 119 872 Putative transposase2related
18 + 123 925 125 333 Wall2associated protein kinase
19 - 129 471 127 348 Hypothetical protein
20 + 132 123 134 608 Putative wall2associated kinase22related
21 - 141 963 135 115 Starch synthase ,isoform V
OJ1112
-
G06 1 - 5 320 1 811 Z97336 kinesin like protein2related
2 + 13 961 17 411 Conserved hypothetical protein
3 + 18 904 22 349 Conserved hypothetical protein
4 - 25 750 22 967 Receptor protein2like2related
5 - 27 728 26 355 Similar to Arabidopsis thaliana chromesomel chromosomel ,F14K14115
6 - 40 528 37 811 Hypothetical protein
7 + 61 451 62 654 Similar to unknown protein ,putative
8 - 66 126 64 364 hypothetical protein
9 + 71 761 73 183 AP003020 putative cinnamoyl2CoA reductas
10 - 75 575 73 596 hypothetical protein
11 + 81 644 86 827 Putative reverse transcriptase2related
12 - 92 476 87 567 Putative wall2associated protein kinase
13 - 98 231 96 987 Conserved hypothetical protein
14 + 103 483 106 206 Putative wall2associated kinase2
15 - 116 076 110 098 Putative mutator2like transposase
16 + 118 330 122 646 Putative wall2associated protein kinase
　　另一方面 , 利用 RiceHMM 软件对 N8WS 和
N8mWS序列预测的基因与 BAC 克隆 OJ1520
-
C09
和 OJ1112
-
G06 预测的基因一致 ,在同源区中都有
一个受体相关蛋白 (receptor protein2like2related) 。宋
凤鸣等报道苯并噻二唑 (benzothiadiazole ,BTH) 能诱
导水稻对白叶枯病的抗性[27 ] ,葛秀春等研究发现苯
并噻二唑能诱导水稻稻瘟病抗性中的苯丙氨酸解氨
酶 (Phenylalanine ammonialyase , PAL) ,肉桂醇脱氢酶
(cinnamyl2alcohol dehydrogenase ,CAL)及β21 ,32葡聚糖
酶 (β21 ,32glucanase)等的活性增加 ,从而提高水稻的
抗病性[28 ] ;此外 ,OJ1520
-
C09 预测的基因 15 为蛋白
激酶功能域 (protein kinase domain) ,Song W Y等报道
抗白叶枯病 Xa21 基因是一种编码受体激酶样蛋白
(receptor kinase2like protein)基因 ,并认为受体蛋白激
酶在植物对疾病抗性中起重要作用[29 ] 。据此推测 ,
苯达松抗性基因也许是一种编码受体蛋白的基因 ,
而同属于苯并噻二唑类的苯达松可能是作为激活受
体蛋白的诱导因子。另一个值得关注的是 BAC 克
隆OJ1520
-
C09 预测的基因 (表 4 ,No121) 之一淀粉
合成酶同工酶ν基因 ( starch synthase ,isoformν) 。淀
粉合成酶具有催化葡萄糖转移至淀粉引子形成淀粉
的功能 ,联系到苯达松在抗性水稻中的解毒过程首
先是苯达松氧化为 62OH2苯达松 ,然后与葡萄糖进
行缀合形成 62OH2苯达松糖苷而使苯达松的毒性显
著下降 ,从而达到解毒的目的[29 ] ,因此 ,是否突变体
农林 8 号 m 中的某种类似淀粉合成酶基因发生突
变 ,从而不能催化 62OH2苯达松与葡萄糖缀合 ,进而
表现为对苯达松的敏感致死 ? 我们尚不能断定 ,有
待进一步深入研究。
7511　11 期 杨剑波等 :水稻苯达松敏感致死基因 ( ben)的电子杂交定位和基因预测 　　　

图 4 　ben 和 Ben 基因的染色体定位图谱
Fig14 　The genetic map showing location of
BenΠben and linked markers
References
[1 ] Mori K. lnheritance of susceptible mutant in rice plant to herbicide benta2
zon. Jpn J Breed ,1984 ,34 (suppl 1) :421 - 422
[2 ] Zhang J2W (张集文) ,Wu X2Z (武晓智) . Screening and preliminary
study on the chemical lethal mutant in rice photoperiod2temperature sensi2
tive male sterile line. Chinese J Rice Sci (中国水稻科学) ,1999 ,13 (2) :
65 - 68
[3 ] Chen Z2M (陈忠明) ,Zou J2S(邹江石) ,Zeng D2L (曾大力) ,Qian Q
(钱前) . Inheritance of bentazon susceptible lethality of Norin 8m and its
potential use in bybrid rice. Hybrid Rice (杂交水稻) ,1999 ,14 (2) :39
- 40
[4 ] Maruyama K,Kato H ,Araki H. Mechanized production of F1 seeds in rice
by mixed planting. Jpn Agric Res Quart ,1991 ,24 (4) :243 - 252
[5 ] Yu J ,Hu S ,Wang J ,Yuan L P , Yang H M. A draft sequence of the rice
genome ( Oryza sativa L. ssp. indica) . Science ,2002 ,296 :79 - 92
[6 ] Goff S A ,Ricke D ,Lan T H ,Presting G,Briggs S. A draft sequence of the
rice genome ( Oryza sativa L. ssp. japonica) . Science ,2002 ,296 : 92 -
100
[7 ] Xiang T2H ,Yang J2B ,Li L ,Ni D2H ,Yang Q2J ,Zhu Q2S ,Wang X2F ,
Huang D2N. Development of RAPD markers and SCAR markers linked to
bentazon susceptible lethality gene in rice. Acta Bot Sin , 2003 ,45 (2) :
223 - 228
[8 ] Xiang T2H (向太和) ,Yang J2B (杨剑波) , Yang Q2J (杨前进) ,Zhu
Q2S(朱启升) ,Li L (李莉) , Huang D2N (黄大年) . Molecular biologi2
cal effect of 60 Co gamma ray irradiation rice genome DNA. Prog Biochem
Biophys (生物化学与生物物理进展) ,2002 ,29 (5) :754 - 759
[9 ] http : ∥btn. genomics. org. cn
[10 ] http : ∥rgp. dna. affrc. go. jp
[11 ] http : ∥genome. cornell . eduΠrice
[12 ] http : ∥www. shigen. nig. ac. jpΠrice
[13 ] http : ∥synteny. nott . ac. uk
[14 ] http : ∥www. rice2research. org
[15 ] http : ∥www. irri . org
[16 ] http : ∥www. ncgr. ac. cn
[17 ] http : ∥www. genomics. org. cn
[18 ] http : ∥www. tigr. orgΠtdbΠrice
[19 ] http : ∥www. genome. clemson. eduΠprojectsΠrice
[20 ] http : ∥www. tmri . org
[21 ] http : ∥www. ncbi. nlm. nih. govΠblast
[22 ] http : ∥www. ncbi. nlm. nih. govΠPMGifsΠGenomesΠriceWGS. html
[23 ] http : ∥www. tigr. orgΠtdbΠe2k1ΠosalΠBACmapingΠdescription. shtml
[24 ] Yuan Q ,Liang F ,Hsiao J . Anchoring of rice BAC clones to the rice ge2
netic map in silico. Nuclei Acids Res ,2000 ,28 (18) :2 636 - 3 641
[25 ] http : ∥rgp. dna. affrc. go. jpΠRiceHMMΠindex. html
[26 ] Zhang J ,Xu J ,Wu X ,Zhu L. A bentazon and sulfonglurea sensitive mu2
tant :breeding ,genetics and potential application in seed production of hy2
brid rice. Theor Apple Genet ,2002 ,105 :16 - 22
[27 ] Song F2M (宋凤鸣) ,Ge X2Q (葛秀青) ,Zheng Z(郑重) , Xie Y(谢
艳) . Benzothiadiazole2induced systemic acquired resistance in rice against
Xanthomonas oryzae pv . oryzae. Chinese J Rice Sci (中国水稻科学) ,
2001 ,15 (4) :323 - 326
[28 ] Ge X2Q(葛秀青) ,Song F2M(宋凤鸣) ,Chen Y2Y(陈永叶) ,Zheng Z
(郑重) . Changes in activities of defense2related enzymes in rice resis2
tance induced by benzothiadiazole to blast fungus ( Magnaporthe grisea) .
Chinese J Rice Sci (中国水稻科学) ,2002 ,16 (2) :171 - 175
[ 29 ] Song W Y,Wang GL ,Chen L L , Kim H ,Pi L Y,Holsten T ,Gardner J ,
Wang B , Zha W , Zhu L. A receptor kinase2like protein encoded by the
rice disease resistance gene , Xa21 . Science ,1995 ,270 :1 804 - 1 806
[30 ] Sterling T M ,Balke N E. Differential bentazon metabolism and retention
of bentazon metabolites by plant cell cultures. Pestic Biochem Physiol ,
1989 ,34 :39 - 48
8511 　　　作 　　物 　　学 　　报 30 卷