免费文献传递   相关文献

Overexpression of WRKY25 Causes Early Flowering in Arabidopsis under Longday Conditions

WRKY25过量表达导致拟南芥在长光照下开花提前



全 文 :WRKY25 过量表达导致拟南芥在长光照下开花提前
王芳秀1,2, 黎舒佳1,3, 余迪求1*
(1 中国科学院西双版纳热带植物园, 云南 昆明摇 650223; 2 中国科学院研究生院, 北京摇 100049;
3 中国科学院遗传与发育生物学研究所, 北京摇 100101)
摘要: WRKY基因家族是主要存在于植物中的一大类转录调控因子, 拥有很多家族成员。 拟南芥 WRKY25
属于第 I类 WRKY蛋白, 参与植物生物和非生物胁迫反应。 通过 GUS染色和 qRT鄄PCR发现 WRKY25 基因
主要在根, 叶和茎生叶中表达。 过量表达 WRKY25 的转基因植株在长光照下比野生型拟南芥提前开花。 通
过 RT鄄PCR检测与开花时间相关基因发现, AP1 基因的表达量在培养 21 d和 27 d的 WRKY25 过量表达植株
中上调, 由此推测 WRKY25 很可能通过增强 AP1 的表达来影响开花。
关键词: WRKY25; 过量表达; 长光照; AP1; 提前开花
中图分类号: Q 78摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 文献标识码: A摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 文章编号: 2095-0845(2011)06-653-07
Overexpression of WRKY25 Causes Early Flowering
in Arabidopsis under Long鄄day Conditions
WANG Fang鄄Xiu1,2, LI Shu鄄Jia1,3, YU Di鄄Qiu1*
(1 Xishuangbanna Tropical Botanical Garden, Chinese Academy of Sciences, Kunming 650223, China;
2 Graduate University of Chinese Academy of Sciences, Beijing 100049, China; 3 Institute of Genetics
and Developmental Biology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China)
Abstract: The WRKY gene superfamily is one of the largest transcriptional regulators which mainly exists in plants.
Arabidopsis WRKY25 is one of the group I WRKY proteins and responds to both biotic and abiotic stresses. GUS
staining and qRT鄄PCR analysis show that the expression of WRKY25 mainly focuses on roots, rosette leaves and cau鄄
line leaves. Transgenic plants over鄄expressing WRKY25 show early flowering under long鄄day conditions when com鄄
pared with wild鄄type plants. RT鄄PCR analysis demonstrates that the expression of AP1 is up鄄regulated in 21 d鄄old
and 27 d鄄old transgenic plants. Thus, it is possible that WRKY25 affects flowering through up鄄regulation of AP1 di鄄
rectly or indirectly.
Key words: WRKY25; Over鄄expressing; Long鄄day conditions; AP1; Early flowering
摇 高等植物生活周期需要经过种子萌发、 营
养生长、 开花、 受精、 胚胎发育、 种子形成等一
系列发育阶段。 其中, 开花是植物由营养生长向
生殖生长转变的重要过程。 植物的开花时间由自
身遗传因子和外界环境因素共同决定。
过去 20 年里, 以拟南芥为实验材料, 对高
等植物开花时间的调控进行了大量研究, 确定了
四条主要调控开花时间的信号途径: 光周期途
径、 春化途径、 自主途径和赤霉素 (GA) 途径
(Mouradov 等, 2002)。 光周期途径中相关基因
的突变体, 仅在长光照条件下开花时间会延迟。
春化途径, 通过抑制开花抑制子 FLOWERING
LOCUS C (FLC) 的转录, 从而促进开花 (Mi鄄
chaels和 Amasino, 1999; Sheldon 等, 1999)。 自
植 物 分 类 与 资 源 学 报摇 2011, 33 (6): 653 ~ 659
Plant Diversity and Resources摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 DOI: 10. 3724 / SP. J. 1143. 2011. 11046
* 通讯作者: Author for correspondence; E鄄mail: ydq@ xtbg. ac. cn
收稿日期: 2011-03-15, 2011-04-26 接受发表
作者简介: 王芳秀 (1986-) 女, 在读硕士研究生, 主要研究方向: 植物分子生物学。 E鄄mail: corona1986@ 163. com
主途径, 独立于光周期途径, 使得那些在长光照
下迅速开花的植物, 如拟南芥, 在短光照条件下
最终也能够开花。 自主途径中的相关复合物通过
限制 FLC mRNA 的积累, 从而促使开花 (Mi鄄
chaels和 Amasino, 1999; Sheldon等, 1999)。 GA
途径中, GA合成及 GA信号转导相关的突变体,
在短光照条件下, 开花会延迟很长时间, 说明在
没有长光照促使开花的情况下, GA 是一种刺激
植物开花的重要物质 (Wilson 等, 1992)。 尽管
上述四条途径可以独立地调控开花过程, 但它们
有着共同的下游目标基因 CONSTANS (CO) 和
FLOWERING LOCUS C (FLC)。 位于 CO 和 FLC
下游的开花整合因子 FLOWERING LOCUS T (FT),
LEAFY ( LFY ) 和 SUPPRESSOR OF OVEREX鄄
PRESSION OF CO 1 (SOC1), 通过整合开花途
径输出的信号, 激活花分生组织特性基因 LFY
和 APETALA1 ( AP1 ) 的表达, 从而启动开花
(Bl佗zquez和 Weigel, 2000; Borner 等, 2000; Lee
等, 2000; Samach等, 2000)。 其中, FT 是一个
长距离信号, 其蛋白通过韧皮部从叶片转移到茎
端 (Corbesier等, 2007; Jaeger和 Wigge, 2007),
与 FLOWERING LOCUS D (FD) 蛋白相互作用,
激活 AP1 的表达 ( Abe 等, 2005; Turck 等,
2008; Wigge 等, 2005)。 LFY 既是开花时间基
因, 又是花分生组织特性基因, 直接调控靶基因
AP1 的表达。 SOC1 受四条开花途径的正调控,
并认为 SOC1 可能是这四条途径的一个整合子
(Borner 等, 2000; Lee 等, 2000; Samach 等,
2000; Moon等, 2003), SOC1 可被 CO的过量表
达诱导和 FT的过量表达快速激活 (Michaels等,
2005; Moon等, 2005; Yoo等, 2005)。
转录调控因子 WRKY基因家族是植物特有的
超级基因家族, 因在其蛋白质氨基端含有高度保
守的氨基酸序列 WRKYGQK 而得名, 同时在其
羧基端含有一个 Cys2His2 或 Cys2His / Cys锌指型
结构 (Eulgem等, 2000; Dong等, 2003)。 WRKY
蛋白质通过特异性结合靶基因启动子区域的
(T) TGAC (C / T) (W鄄box) 序列来调控相应基
因的表达, 从而在植物生长发育、 形态建成、 物
质代谢和耐逆抗病等方面发挥生物学功能 (Eul鄄
gem等, 2000; Yu 等, 2001; 余迪求等, 2006)。
根据 WRKY 结构域的数目和锌指结构的类型,
可以将 WRKY 蛋白分为 3 大类 ( Eulgem 等,
2000), 拟南芥 WRKY25 就属于第 I 类, 即含有
两个 WRKY 结构域和 Cys2His2 锌指型结构。 已
有研究证实, WRKY25 蛋白依赖于锌指蛋白
Zat12 参与氧化胁迫反应 (Rizhsky 等, 2004),
拟南芥 MPK4 亚基 MKS1 在蛋白水平上可以和
WRKY25 蛋白相互作用 (Andreasson 等, 2005)。
在植物抗病性方面, WRKY25 负调控水杨酸介导
的 PR1 基因的表达和 Pseudomonas syringae 抗性
(Zheng等, 2007)。 WRKY25在转录水平上的表达
受 NaCl的诱导, 也受甘露醇、 冷 (4益) 和 ABA
的影响 ( Jiang 和 Deyholos, 2009), WRKY25 还
受高温胁迫诱导, 过量表达 WRKY25 的拟南芥植
株具有耐高温性 ( Li 等, 2009), 最近研究表
明, 拟南芥 WRKY25, WRKY26 和 WRKY33 共
同参与诱导植物的热耐性 (Li等, 2011)。
本文以拟南芥 (Arabidopsis thaliana) 为材料,
通过比较拟南芥野生型 (WT) 植株与 WRKY25
过量表达植株在开花时间上的差异, 利用 RT鄄
PCR检测 LFY, AP1, FT 和 FD 基因的表达量,
分析 WRKY25 的过量表达导致拟南芥在长光照下
开花时间提前的原因。
1摇 材料和方法
1. 1摇 植物材料和生长条件
选用拟南芥哥伦比亚生态型 (Col鄄0) 为实验材料,
种子表面消毒后均匀散布在 1 / 2MS 培养基上 (含 0. 6%
Agar), 4益春化 3 d后转移到 22益温室培养 7 d, 移栽到
土中, 长光照 (光照 16 h, 黑暗 8 h) 生长。
1. 2摇 wrky25 突变体的验证及转基因植株获得
从 Arabidopsis Biological Resource Center (ABRC) 购
买的突变体 wrky25 (SALK_136966), 是 T鄄DNA 插入型
突变体。 根据插入位点的不同, 设计 T鄄DNA一端的边界
引物和一对基因特异引物, 首先用 T鄄DNA一端的边界引
物和其中一个 WRKY25 基因特异引物配对, PCR 明确 T鄄
DNA的插入, 然后再用一对基因特异引物验证 WRKY25
T鄄DNA插入的纯合突变体。 根据 NCBI公布的 AT2G30250
序列设计两对引物, 通过 PCR 从野生型拟南芥 (WT)
基因组扩增分别获得 WRKY25 全长 cDNA 序列和启动子
序列。 将 WRKY25 全长 cDNA 序列连接到高表达载体
pOCA30 上 35S启动子之后, 记为 35S 颐 颐 WRKY25 cDNA。
将启动子序列插入到 pJS131B中 GUS报告基因表达框之
前, 经测序验证后进一步克隆到表达载体 pOCA28 上,
456摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 植 物 分 类 与 资 源 学 报摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 第 33 卷
标记为 PWRKY25 鄄GUS。 将构建好的重组载体转化到农杆菌
GV3101 中, 采用花序浸染法转化 WT 植株 (Clough 和
Bent, 1998)。 通过 1 / 2MS鄄Kan板 (Kanamycin 浓度为 50
滋g·ml-1) 筛选转基因植株。
1. 3摇 GUS染色
GUS染色方法参考文献 (Molier 等, 1995) 进行。
用预冷的 90%丙酮于冰上固定材料 20 min, 用 GUS Stai鄄
ning solution (without X鄄Gluc) 漂洗固定后的材料 3 次
(于冰上进行), 然后将材料放入 GUS Staining solution
(with X鄄Gluc) 中, 并于冰上避光抽真空 10 min, 最后于
37益放置 12 h。 最后用 70%酒精脱色后拍照。
1. 4摇 Northern杂交
采用 Trizol reagent ( Invitrogen) 法提取 RNA。 使用
1. 5%甲醛鄄MOPS 琼脂糖凝胶电泳分离 10 ~ 20 滋g RNA
后, 转移到尼龙膜上。 杂交温度为 68益, 杂交液选用
PerfectHybTM Plus hybridization buffer ( Sigma鄄Aldrich)。 探
针通过 Klenow fragment (Takara) 进行32P鄄dATP标记。 洗
膜: 2伊SSC和 0. 5% SDS, 1次, 每次 10 min; 0. 5伊SSC和
0. 1% SDS, 2次, 每次 20 min; 0. 1伊SSC和 0. 1% SDS, 1
次, 每次 20 min, 最后压片放射自显影。 WRKY25 探针是
通过引物 PCR扩增得到的 WRKY25 全长 cDNA序列。
1. 5摇 RT鄄PCR
取 1 滋g 经 DNase I 消化的 RNA, 根据 RevertAidTM
First Strand cDNA Synthesis Kit (Fermentas) 进行反转录:
反转录酶随机引物 1 滋L, 5伊Buffer 4 滋L, RNA酶抑制剂
1 滋L, 10 mmol·L-1 dNTP Mix 2 滋L, 反转录体系 20 滋L;
反应条件为 37益 5 min, 42益 60 min, 70益 10 min; 取 1
滋L cDNA用作后续 PCR模板。 先用内标基因 Actin2 进行
PCR, 将其表达水平调成一致, 然后进行目的基因表达
水平的检测。 用于半定量 RT鄄PCR 的 Actin2 和各目的基
因的引物为:
Actin2: 5忆鄄TGTGCCAATCTACGAGGGTTT鄄3忆,
摇 摇 摇 5忆鄄TTTCCCGCTCTGCTGTTGT鄄3忆;
LFY: 5忆鄄TTACATAAACAAGCCTAAAATGC鄄3忆,
摇 摇 摇 5忆鄄TTTGTTGGAACATACCAAATAG鄄3忆;
AP1: 5忆鄄GCACATCCGCACTAGAAAAAA鄄3忆,
摇 摇 摇 5忆鄄CTTCTTGATACAGACCACCCA鄄3忆;
FT: 5忆鄄TACGAAAATCCAAGTCCCACTG鄄3忆,
摇 摇 摇 5忆鄄AAACTCGCGAGTGTTGAAGTTC鄄3忆;
FD: 5忆鄄TAATCTTCATACCCACCATCAC鄄3忆,
摇 摇 摇 5忆鄄CAATCCCCAAAAGAGAAACAAG鄄3忆。
反应条件为: Actin2: 94益 5 min; 94益 45 s, 63益
45 s, 72益 30 s, 24 个循环; 72益, 10 min。 LFY: 94益
5 min; 94益 45 s, 60. 5益 45 s, 72益 35 s, 36 个循环;
72益, 10 min。 AP1: 94益 5 min; 94益 45 s, 63益 45 s,
72益 35 s, 29 个循环; 72益, 10 min。
FT: 94益 5 min; 94益 45 s, 66益 45 s, 72益 30 s,
34 个循环; 72益, 10 min。
FD: 94益 5 min; 94益 45 s, 63益 45 s, 72益 45 s,
30 个循环; 72益, 10 min。
荧光定量 RT鄄PCR (qRT鄄PCR) 反应在 Roche Light鄄
Cycler 480 仪器上进行, Actin2 作为内参基因, 目的基因
引物为: WRKY25: 5忆鄄TTTCCCGCTC鄄TGCTGTTGT鄄3忆, 5忆鄄
GTTCCATTAA AG CCTTGC鄄3忆。 qRT鄄PCR 反应体系 20
滋L: cDNA模板 1 滋L, 10 滋M基因特异性引物各 0. 4 滋L,
2伊SYBR Premix Ex Taq 10 滋L, ddH2O 8. 2 滋L。
2摇 结果与分析
2. 1摇 WRKY25 基因的表达模式
通过农杆菌介导法, 并用 1 / 2MS鄄Kan 板筛
选获得含有 PWRKY25 鄄GUS 融合表达载体的转基因
植株, 经过繁殖, 再次筛选获得 T2代纯合转基
因植株, 用于后续试验。 GUS 染色结果表明
(图 1), WRKY25 启动子驱动的 GUS 基因在根、
叶和茎生叶中的表达量较高, 在茎和花序中也有
少量表达。 分别收集 WT植株的根、 茎、 叶、 茎
生叶、 花序和果荚, 提取 RNA, qRT鄄PCR 检测
WRKY25在上述各部位的表达量 (图 2), 与 GUS
染色结果基本一致。
2. 2摇 WRKY25 的过量表达促使植株在长光照下
提前开花
建好的重组载体 35S 颐 颐WRKY25 cDNA, 通过
农杆菌介导法和 1 / 2MS鄄Kan 板筛选得到转基因
植株 16 株, 移至土壤中, 提取生长 3 周植株叶
片中的 RNA, 选择 9 个株系进行 Northern blot杂
交检测, WT 作为对照。 Northern blot 杂交检测
结果 (图 3: A) 表明, 9 株转基因植株中有 6 株
过量表达了 WRKY25, 我们挑选表达量较高的株
系 Line 1, Line 8 (L1, L8) 及表达量不是很高
的株系 Line 5 (L5), 进一步筛选获得纯合转基
因植株, 进行后续实验。 让过量表达 WRKY25 的
植株与 WT, wrky25 在同等条件下生长, 观察它
们在开花时间方面的差异。 结果发现, 当各植株
在短光照 (光照 8 h, 黑暗 16 h) 下生长时,
L1, L5, L8 与 WT, wrky25 在开花时间上没有
差异; 但是当它们在长光照下生长时, L1, L5,
L8 要比 WT, wrky25 提前开花, L8 与 L1 的提前
时间更为明显 (图 3: B)。 为了更确切地表明各
植株在长光照条件下开花时间上的差异, 在各植
5566 期摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 王芳秀等: WRKY25 过量表达导致拟南芥在长光照下开花提前摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇
图 1摇 PWRKY25 鄄GUS转基因植株的 GUS染色
A. 7 天大的幼苗; B. 20 天大的植株; C. 茎; D. 茎生叶和花序 E. 荚果
Fig. 1摇 GUS staining of PWRKY25 鄄GUS transgenic plants
A. 7 d鄄old seedling; B. 20 d鄄old seedling; C. stem; D. cauline leaf and flower buds; E. silique
图 2摇 WRKY25 在 WT各个组织中的表达量
Fig. 2摇 qRT鄄PCR analysis of WRKY25 expression
patterns in different tissues of WT
R, roots from 7 d鄄old seedlings; L, rosette leaves; CL, cauline leaves;
St, stem; F, flower buds; Si, young siliques. The expression levels
are shown relative to which in the roots. Data were from three
biological replicates with S. E. shown as error bars
株抽苔后, 茎长度约为 1 cm 的时候, 分别统计
了它们莲座叶的数目 (图 3: C), 结果表明, 过
量表达 WRKY25 的株系比 WT, wrky25 植株要少
0. 5~ 2 片莲座叶。 在长光照下, L8, L1 和 L5 在
播种 21 ~ 25 d 后就开始抽苔了, 而 WT, wrky25
则要在播种 25 ~ 29 d后才开始抽苔。 提取各植株
在播种后 21 d, 27 d 及 33 d 的 RNA, RT鄄PCR 检
测了开花时间相关基因 LFY, AP1, FT 和 FD 的
表达量, 只有 AP1 基因随着植株生长时间的不
同, 在各植株中的表达量呈现出规律性的差异
(图 4)。 在播种后 21 d, 各植株正处于开花的早期
图 3摇 35S 颐颐WRKY25 cDNA转基因植株的分析
A. Northern杂交检测 WT和转基因植株中 WRKY25 的表达量;
B. WRKY25 过量表达植株的表型; C. WT, wrky25 和
WRKY25 过量表达植株的莲座叶数目
Fig. 3摇 Analysis of 35S 颐颐WRKY25 cDNA transgenic plants
A. Northern blot analysis of WRKY25 in WT and transgenic plants.
B. Phenotype of plants over鄄expressing WRKY25. C. The number
of rossete of WT, wrky25 and plants over鄄expressing WRKY25.
To measure flowering time, 20 plants were used to count
the number of rossete leaves when bloting reached 1 cm
656摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 植 物 分 类 与 资 源 学 报摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 第 33 卷
图 4摇 开花时间相关基因在 WT, wrky25 及 WRKY25 过量表达植株 L1, L5 和 L8 中的表达量
Fig. 4摇 Expression of flowering time鄄related genes in WT, wrky25 and WRKY25 over鄄expressing plants L1, L5 and L8 LFY, AP1, FT and FD
were detected using RT鄄PCR after RNA was digested with DNase I. RNA was extracted from 21 d鄄old, 27 d鄄old and 33 d鄄old plants
阶段, 株系 L8 和 L1 已开始抽苔, 其它植株仍未
抽苔的情况下, AP1 在 L8 和 L1 中的表达量明显
高于其它植株的表达量; 27 d, 株系 L8 和 L1 已
经开花, 其它植株也已经抽苔或即将抽苔, AP1
在 L8和 L1中的表达量比其它植株中的要高, 但没
有 21 d的明显; 33 d, 由于各个植株都已经开花,
AP1的表达量在各植株中的表达量相同 (图 4)。
3摇 讨论
在前人总结的四条主要调控开花时间的信号
途径中 (图 5) (Jack, 2004), 光周期途径中的
LFY和 FT基因处于 AP1 的上游, 并且 LFY直接
调控 AP1 的表达, FT蛋白要和 FD 联合在一块,
才能起到调控 AP1 的作用。 本文中的实验材料
仅在长光照下才能得到 WRKY25 过量表达导致拟
南芥开花提前的结论, 看似和光周期途径紧密联
系。 然而, 被检测的四个基因中, 只有 AP1 基因
的表达量受到 WRKY25过量表达的影响 (图 4)。
AP1 基因属于花分生组织特征基因, 调控花
序分生组织向花分生组织的转变。 过量表达 AP1
的转基因拟南芥植株的开花时间要早于野生型
(Mandel等, 1992)。 AP1 基因又是花器官形态特
征基因, 在花发育的 ABC 模型、 ABCD 模型和
ABCDE模型中, AP1 基因属于 A 类基因, 是萼
片和花瓣正常发育所必需的, 同时也能激活 B
类基因 ( Jack, 2004)。 因此, AP1 基因既具有
促进植物开花的作用, 又在花器官发育上起关键
作用。 张利平和余迪求 (2010) 的研究结果显示,
在 AP1 基因启动子上存在 9 个 TGAC 核心序列,
其中 7个为完整的 TTGAC序列 (W鄄box) (图 6);
并且在理论上, 靶基因启动子区域内的单个 W鄄
box序列就能有效满足WRKY蛋白质调控所需
图 5摇 主要的开花诱导途径 (Jack, 2004)
Fig. 5摇 Major floral inductive pathways
图 6摇 AP1 基因启动子上的顺式作用元件 (TTGAC序列标记为黑色)
Fig. 6摇 Cis鄄acting elements of the AP1 gene promoter (TTGAC sequences are indicated in black)
7566 期摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 王芳秀等: WRKY25 过量表达导致拟南芥在长光照下开花提前摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇
(Eulgem 等, 1999), 所以我们可以推测, AP1
很可能受到 WRKY25 的调控, 这就能很好地解
释图 4 中的结果。 处于开花前期的 21 d 的植株
中, WRKY25 过量表达使得 AP1 在 L1 和 L8 中的
表达量明显高于其它植株, 而 AP1 既是花分生
组织特征基因又是花器官形态特征基因, AP1 的
表达量达到一定程度, 必然促进植株 L1 和 L8 中
花的出现 (图 4: A); 27 d 的 WT, L5 和 wrky5
植株处于即将开花的状态, 那么这些植株中 AP1
的表达量自然也会相应升高, 与 L1 和 L8 植株中
AP1 的表达量的差异也就有所减小 (图 4: B);
33 d 的植株都处于开花的状态, 所以各植株中
AP1 的表达量又趋于一致 (图 4: C)。 根据以上
结果可知, 过量表达 WRKY25 使 AP1 基因的表
达量在开花前期急剧增加, 最终导致 WRKY25 过
量表达植株出现提前开花的表型, 所以我们推测
拟南芥 WRKY25 通过调控 AP1 基因从而参与调
控植物开花过程。
也参摇 考摇 文摇 献页
Abe M, Kobayashi Y, Yamamoto S et al., 2005. FD, a bZIP protein
mediating signals from the floral pathway integrator FT at the
shoot apex [J] . Science, 309 (5737): 1052—1056
Andreasson E, Jenkins T, Brodersen P et al., 2005. The MAP kinase
substrate MKS1 is a regulator of plant defense responses [ J] .
The EMBO Journal, 24 (14): 2579—2589
Bl佗zquez MA, Weigel D, 2000. Integration of floral inductive signals
in Arabidopsis [J] . Nature, 404 (6780): 889—892
Borner R, Kampmann G, Chandler J et al., 2000. A MADS domain
gene involved in the transition to flowering in Arabidopsis [ J] .
The Plant Journal, 24 (5): 591—599
Clough SJ, Bent AF, 1998. Floral dip: a simplified method for
Agrobacterium鄄mediated transformation of Arabidopsis thaliana
[J] . The Plant Journal, 16 (6): 735—743
Corbesier L, Vincent C, Jang S et al., 2007. FT protein movement
contributes to long鄄distance signaling in floral induction of Arabi鄄
dopsis [J] . Science, 316 (5827): 1030—1033
Dong JX, Chen CH, Chen ZX et al., 2003. Expression profiles of the
Arabidopsis WRKY gene superfamily during plant defense re鄄
sponse [J] . Plant Molecular Biology, 51 (1): 21—37
Eulgem T, Rushton PJ, Robatzek S et al., 2000. The WRKY super鄄
family of plant transcription factors [J] . Trends in Plant Science,
5 (5): 199—205
Eulgem T, Rushton PJ, Schmelzer E et al., 1999. Early nuclear events
in plant defence signaling: rapid gene activation by WRKY tran鄄
scription factors [J]. The EMBO Journal, 18 (17): 4689—4699
Jack T, 2004. Molecular and genetic mechanisms of floral control
[J] . The Plant Cell, 16: S1—S17
Jaeger KE, Wigge PA, 2007. FT protein acts as a long鄄range signal
in Arabidopsis [J] . Current Biology, 17 (12): 1050—1054
Jiang Y, Deyholos MK, 2009. Functional characterization of Arabi鄄
dopsis NaCl鄄inducible WRKY25 and WRKY33 transcription factors
in abiotic stresses [ J] . Plant Molecular Biology, 69 (1 - 2):
91—105
Lee H, Suh SS, Park E et al., 2000. The AGAMOUS鄄LIKE 20
MADS domain protein integrates floral inductive pathways in Ara鄄
bidopsis [J] . Genes & Development, 14 (18): 2366—2376
Li SJ, Fu QT, Chen LG et al., 2011. Arabidopsis thaliana WRKY25,
WRKY26, and WRKY33 coordinate induction of plant thermotol鄄
erance [J] . Planta, doi 10. 1007 / s00425鄄011鄄1375鄄2
Li SJ, Fu QT, Huang WD et al., 2009. Functional analysis of an Ar鄄
abidopsis transcription factor WRKY25 in heat stress [ J] . Plant
Cell Reports, 28 (4): 683—693
Mandel MA, Gustafson鄄Brown C, Savidge B et al., 1992. Molecular
characterization of the Arabidopsis floral homeotic鄄gene, APETA鄄
LA1 [J] . Nature, 360: 273—277
Michaels SD, Amasino RM, 1999. FLOWERING LOCUS C encodes a
novel MADS domain protein that acts as a repressor of flowering
[J] . The Plant Cell, 11 (5): 949—956
Michaels SD, Himelblau E, Kim SY et al., 2005. Integration of flow鄄
ering signals in winter鄄annual Arabidopsis [ J] . Plant Physiolo鄄
gy, 137 (1): 149—156
Mollier P, Montoro P, Delarue M et al., 1995. Promoterless gusA ex鄄
pression in a large number of Arabidopsis thaliana transformants
obtained by the in planta infiltration method [ J] . Comptes Ren鄄
dus de l Acad佴mie des sciences de Pairs, Sciences de la vie, 318
(4): 465—474
Moon J, Lee H, Kim M et al., 2005. Analysis of flowering pathway
integrators in Arabidopsis [ J] . Plant and Cell Physiology, 46
(2): 292—299
Moon J, Suh SS, Lee H et al., 2003. The SOC1 MADS鄄box gene in鄄
tegrates vernalization and gibberellin signals for flowering in Ara鄄
bidopsis [J] . The Plant Journal, 35 (5): 613—623
Mouradov A, Cremer F, Coupland G, 2002. Control of flowering
time: interacting pathways as a basis for diversity [ J] . The
Plant Cell, 14: S111—S130
Rizhsky L, Davletova S, Liang H et al., 2004. The zinc finger pro鄄
tein Zat12 is required for cytosolic ascorbate peroxidase 1 expres鄄
sion during oxidative stress in Arabidopsis [ J] . Journal of Bio鄄
logical Chemistry, 279 (12): 11736—11743
Samach A, Onouchi H, Gold SE et al., 2000. Distinct roles of CON鄄
STANS target genes in reproductive development of Arabidopsis
[J] . Science, 288 (5471): 1613—1616
Sheldon CC, Burn JE, Perez PP et al., 1999. The FLF MADS box
gene: a repressor of flowering in Arabidopsis regulated by vernali鄄
856摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 植 物 分 类 与 资 源 学 报摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 第 33 卷
zation and methylation [J] . The Plant Cell, 11 (3): 445—458
Turck F, Fornara F, Coupland G, 2008. Regulation and identity of
florigen: FLOWERING LOCUS T moves center stage [J] . Plant
Biology, 59: 573—594
Wigge PA, Kim MC, Jaeger KE et al., 2005. Integration of spatial
and temporal information during floral induction in Arabidopsis
[J] . Science, 309 (5737): 1056—1059
Wilson RN, Heckman JW, Somerville CR, 1992. Gibberellin is re鄄
quired for flowering in Arabidopsis thaliana under short days
[J] . Plant Physiology, 100 (1): 403—408
Yoo SK, Chung KS, Kim J et al., 2005. CONSTANS activates sup鄄
pressor of OVEREXPRESSION of CONSTANS 1 through FLOW鄄
ERING LOCUS T to promote flowering in Arabidopsis [J] . Plant
Physiology, 139 (2): 770—778
Yu DQ, Chen CH, Chen ZX, 2001. Evidence for an important role of
WRKY DNA binding: proteins in the regulation of NPR1 gene
expression [J] . The Plant Cell, 13 (7): 1527—1539
Yu DQ (余迪求), Chen LG (陈利钢), Zhang LP (张利平),
2006. Transcription factor WRKY superfamily: Origin, structure
and function [J] . Acta Botanica Yunnanica (云南植物研究),
28 (1): 69—77
Zhang LP (张利平), Yu DQ (余迪求), 2010. Mutation of APETA鄄
LA1 affects the basal expression of WRKY genes [ J] . Acta Bo鄄
tanica Yunnanica (云南植物研究), 32 (4): 355—360
Zheng Z, Mosher SL, Fan B et al., 2007. Functional analysis of Ara鄄
bidopsis WRKY 25 transcription factor in plant defense against
Pseudomonas syringae [J] . BMC Plant Biology, doi: 10. 1186 /
1471鄄2229鄄7鄄2
筌 筌 筌 筌 筌 筌 筌 筌 筌 筌 筌 筌 筌 筌 筌
2011 全国系统与进化植物学研讨会暨第十届
青年研讨会在昆明成功召开
10月 26 ~ 27 日, 2011 全国系统与进化植物学研讨会暨第十届青年研讨会在昆明顺利举行。 会议由中国植物学会
系统与进化植物学专业委员会和云南省植物学会联合主办, 系统与进化植物学国家重点实验室和中国科学院生物多样
性与生物地理学重点实验室联合承办, 中国科学院昆明植物研究所、 中国科学院昆明分院及西南林业大学、 云南省科
学技术协会、 亚洲绿色文化国际交流促进会协办。
本届会议主题是 “后植物志时代的系统与进化植物学冶, 主要围绕植物分类、 标本馆和数据库; 植物生命之树重建;
生物地理学和气候环境变迁; 物种形成和适应性进化; 分子和基因组进化及进化发育生物学; 植物 DNA条形码; 以及
生物多样性等 7个方面开展研讨。 受中国植物学会秘书长葛颂委托, 开幕式由系统与进化植物学专业委员会汪小全主任
主持, 中国植物学会理事长洪德元、 云南省科协副主席牟双江、 昆明分院院长王庆礼、 昆明植物所所长李德铢分别在开
幕式上致辞。 参加开幕式的还有西南林业大学校长刘惠民、 中科院昆明植物研究所党委书记孙航等 20 多位来宾。
本次研讨会是系统进化研讨会暨青年研讨会停办几年后, 应全国系统进化领域的专家学者强烈呼吁后恢复举办的
第一次研讨会。 本届会议是历届参会及报告人数最多、 报告水平最高、 组织较好的一次大会。 来自全国 23 个省 (直
辖市、 自治区) 70 多家高校和研究机构的 300 多名参会代表参加了此次会议, 包括 1 名院士和 20 多位国内本领域优
秀的学科带头人。 本次研讨会共收到 100 多篇交流论文 (摘要), 在为期两天的会议期间, 大会安排了 11 个特邀报
告、 24 个分组报告、 39 个青年组报告, 共计 70 多个报告, 其中包括复旦大学生命科学学院院长马红教授的 “利用高
度保守的核基因进行真核生命系统发育分析冶、 昆明植物研究所所长李德铢研究员的 “从植物 DNA 条形码到智能植物
志冶、 植物研究所汪小全研究员的 “广义柏科的进化与生物地理学研究冶、 昆明植物研究所副所长孙航研究员的 “古
红河水系变迁对植物地理分布格局的影响冶、 中山大学施苏华教授的 “Ecological genomic analyses revealing differential
adaptation in two plant systems冶 及兰州大学刘建全教授的 “虎榛子属的适应性物种分化、 杂交渗入和杂交物种形成冶
在内的精彩报告, 让参会代表受益匪浅。 大会报告和分会报告代表了我国系统与进化植物学领域目前的研究水平, 受
到与会者的热烈欢迎。 此外, 部分论文在会场进行了墙报展览, 本领域的两种最新的图书也在会议期间向广大参会人
员进行了介绍。
会务组在会场内外还为代表们安排了形式多样的交流活动, 其中青年研讨会安排了以 38 位年轻博士为主体的报
告, 为青年学者们提供了一个重要讲台, 对于在后植物志时代弘扬和发展系统与进化植物学具有重要意义。
云南省植物学会摇 摇
2011 年 10 月 28 日 摇
9566 期摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 王芳秀等: WRKY25 过量表达导致拟南芥在长光照下开花提前摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇