全 文 ：中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 45 卷 第 13 期 2014 年 7 月

·1816·
• 化学成分 •
山楝中 1 个新的链状二萜
吴海峰 1，张婷婷 1, 2，吴佳妮 1, 2，马国需 1，张小坡 1, 3，杨峻山 1，许旭东 1*
1. 中国医学科学院 北京协和医学院药用植物研究所，中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室，北京 100193
2. 哈尔滨商业大学 生命科学与环境科学研究中心，黑龙江 哈尔滨 150076
3. 海南医学院药学院，海南 海口 571101
摘 要：目的 研究山楝 Aphanamixis polystachya 茎皮的化学成分。方法 采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20、ODS 柱色谱
及高效液相制备色谱等方法进行分离纯化，根据理化性质及波谱数据鉴定化合物的结构。结果 从山楝茎皮 95%乙醇提取
物中分离得到 3 个链状二萜，分别鉴定为 (2Z, 6E, 10E)-12, 14, 15-三羟基-3, 7, 11, 15-四甲基十六碳三烯酸甲酯（1）、melidianolic
acid A（2）、陵水暗罗素 H（3）。结论 化合物 1 为新化合物，命名为山楝定；化合物 2 为首次从山楝属植物中分离得到，
化合物 3 为首次从该植物中分离得到。
关键词：山楝；链状二萜；山楝定；melidianolic acid A；陵水暗罗素 H
中图分类号：R284.1 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2014)13 - 1816 - 04
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2014.13.002
A new linear diterpene from stem barks of Aphanamixis polystachya
WU Hai-feng1, ZHANG Ting-ting1, 2, WU Jia-ni1, 2, MA Guo-xu1, ZHANG Xiao-po1, 3, YANG Jun-shan1,
XU Xu-dong1
1. Key Laboratory of Bioactive Substances and Resources Utilization of Chinese Herbal Medicine, Ministry of Education, Institute
of Medicinal Plant Development, Peking Union Medical College and Chinese Academy of Medical Sciences, Beijing 100193,
China
2. Research Center on Life Sciences and Environmental Sciences, Harbin University of Commerce, Harbin 150076, China
3. School of Pharmaceutical Science, Hainan Medical University, Haikou 571101, China
Abstract: Objective To study the chemical constituents from the stem barks of Aphanamixis polystachya. Methods The
constituents were isolated and purified by silica gel, Sephadex LH-20, ODS column chromatography, and preparative HPLC, and their
structures were elucidated on the basis of their physicochemical properties and spectral data. Results Three diterpenes were obtained
from the ethanol extract of the stem bark of A. polystachya and identified as (2Z, 6E, 10E)-methyl 12, 14, 15-trihydroxy-3, 7, 11, 15-
tetramethylhexadeca-2, 6, 10-trienoate (1), melidianolic acid A (2), and nemoralisin H (3), respectively. Conclusion Compound 1 is a
new linear diterpene named nemoralisin K, compound 2 is isolated from the plants of Aphanamixis Bl., and compound 3 is obtained
from the species for the first time, respectively.
Key words: Aphanamixis polystachya (Wall.) R. N. Parker; linear diterpenes; aphanamidin; melidianolic acid A; nemoralisin H

山楝 Aphanamixis polystachya (Wall.) R. N.
Parker 为楝科（Meliaceae）山楝属 Aphanamixis Bl.
的乔木，生长在低海拔地区的杂木林中，主要分布
于广西、广东、海南等省[1]，具有显著的抗肿瘤和
抗菌活性[2]。国内外学者从山楝中分离得到一些具
有昆虫拒食活性的柠檬苦素[3-8]和倍半萜类化合物[9]，
以及其他的一些次生代谢产物[10-15]。本课题组从山
楝茎皮的 95%乙醇提取物中分离得到一些新的二萜
类化合物[16-17]，进一步分离又得到 3 个链状二萜，
分别鉴定为 (2Z, 6E, 10E)-12, 14, 15-三羟基-3, 7,
11, 15-四甲基十六碳三烯酸甲酯 [(2Z, 6E, 10E)-
methyl 12, 14, 15-trihydroxy-3, 7, 11, 15-tetramethyl-

收稿日期：2014-05-21
基金项目：“重大新药创制”科技重大专项“十二五”计划（综合性新药研究开发技术大平台）（2012ZX09301-002-001-026）；中国博士后科学
基金（2012M510361）
作者简介：吴海峰（1979—），男，博士后，助理研究员，研究方向为天然药物化学。
*通信作者 许旭东，男，博士，研究员，博士生导师，主要从事天然药物化学研究与新药研发。Tel: (010)57833296 E-mail: xdxu@implad.ac.cn
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 45 卷 第 13 期 2014 年 7 月

·1817·
hexadeca-2, 6, 10-trienoate，1）、melidianolic acid A（2）、
陵水暗罗素 H（nemoralisin H，3）。化合物 1 为未见
文献报道的新化合物，命名为山楝定（aphanamidin）；
化合物 2 为首次从该属植物中分离得到，化合物 3
为首次从该植物中分离得到。
1 仪器与材料
Bruker AVШ 600 型核磁共振波谱仪（德国
Bruker 公司）；LTQ-Obitrap XL 质谱仪（美国 Thermo
Fisher 公司）；Perkin-Elmer 341 旋光仪（美国
Perkin-Elmer 公司）；Shimadzu UV2550 紫外可见分
光光度计（日本岛津公司）；JASCO J—815 圆二色
光谱仪（日本 JASCO 公司）；FTIR—8400S 红外光
谱仪（日本岛津公司）；LUMTECH 半制备型高效
液相色谱仪（德国 KNAUER 公司）；ZORAX
SB-phenyl 半制备色谱柱（250 mm×10 mm，5 μm）
（美国 Agilent 公司)；薄层色谱用硅胶 GF254 和柱色
谱用硅胶（青岛海洋化工有限公司）；Sephadex
LH-20 凝胶为 Pharmacia 公司产品；常规试剂均为
分析纯。
山楝于 2013 年 8 月采于海南屯昌县，由海南
医学院药学院田建平教授鉴定为楝科山楝属植物
山楝 Aphanamixis polystachya (Wall.) R. N. Parker。
2 提取与分离
山楝茎皮 3.0 kg，粉碎，用 10 倍量的 95%乙醇
加热回流提取 3 次，每次 2 h，提取液减压回收溶剂
后得浸膏 80.3 g，分散于水中，依次用石油醚（2 L）
和氯仿（2 L）分别萃取 3 次，回收溶剂后得到氯仿
萃取物 35.7 g。氯仿萃取物经硅胶（100～200 目）
柱色谱，石油醚-醋酸乙酯（100∶0→0∶100）梯度
洗脱，合并相同组分，得到为 6 个流分（Fr. A～F）。
流分 Fr. D（1.7 g）经硅胶柱色谱，石油醚-丙酮（50∶
1→0∶100）梯度洗脱，再经半制备型高效液相色
谱分离纯化得到化合物 1（2.3 mg）；流分 Fr. E（2.1
g）经 Sephadex LH-20 柱色谱，氯仿-甲醇（1∶1）
洗脱，得到 3 个流分（Fr. E1～E3）。Fr. E2（175 mg）
经半制备型高效液相色谱分离纯化得到化合物 2
（3.2 mg）。流分 Fr. F （1.9 g）经过反相中压色谱，
甲醇- 水（50∶50→0∶100）梯度洗脱，得到 4 个
流分 Fr. F1～F4。Fr. F3（180 mg）经半制备型高效
液相色谱分离纯化，得到化合物 3（4.5 mg）。
3 结构鉴定
化合物 1：无色油状物，10%硫酸-乙醇溶液显
紫红色。[α]25D −26.0° (c 0.1, MeOH)。IR 光谱给出羟
基（3 407 cm−1）和酯羰基（1 707 cm−1）特征吸收
峰 。 HR-ESI-MS m/z: 391.245 5 [M ＋ Na]+
（C21H36O5Na，计算值 391.246 0），从而确定分子式
为 C21H36O5。1H-NMR (600 MHz, CD3OD) 谱（表 1）
低场区给出3个烯氢信号 δH 5.68 (1H, s), 5.43 (1H, t,
J = 6.6 Hz) 和 5.19 (1H, t, J = 6.6 Hz)，2 个连氧次甲
基质子信号 δH 4.21 (1H, t, J = 6.6 Hz) 和 3.29 (1H,
dd, J = 10.8, 1.2 Hz)，1 个甲氧基信号 δ 3.65 (3H, s)；
高场区给出 5 个甲基单峰信号 δH 1.12 (3H, s), 1.15
(3H, s), 1.61 (3H, s), 1.64 (3H, s) 和 1.90 (3H, s)。
13C-NMR (150 MHz, CD3OD) 谱中给出 21 个碳信
号，高场区给出5个甲基信号δC 11.2, 16.3, 25.2, 25.6
和 25.9，5 个亚甲基信号 δC 27.5, 27.9, 34.5, 37.1 和
40.6，2 个连氧亚甲基信号 δC 78.2 和 78.3，1 个连
氧季碳信号 δC 73.6，1 个甲氧基信号 δC 51.4。低场
区给出 3 组烯碳信号 δC 162.4, 137.9, 136.9, 128.2,
125.0 和 116.9，1 个羰基信号 δC 168.6。根据以上数
据，推测化合物 1 为无环链状二萜类化合物，并与
melidianolic acid A（2）具有相同的骨架。将 1 和 2
表 1 化合物 1 的 1H-NMR (600 MHz, CD3OD)、13C-NMR
(150 MHz, CD3OD) 数据和 HMBC 相关
Table 1 1H-NMR (600 MHz, CD3OD), 13C-NMR (150 MHz,
CD3OD) data and HMBC correlations of compound 1
碳位 δH δC HMBC (H→C)
1 168.6
2 5.68 (1H, s) 116.9 C-1, 3, 20
3 162.4
4 2.66 (2H, t, J = 7.8 Hz) 34.5 C-2, 3, 6
5 2.18 (2H, m) 27.5 C-3, 4, 6, 7
6 5.19 (1H, t, J = 6.6 Hz) 125.0 C-4, 5, 7, 8, 19
7 137.0
8 2.03 (1H, m), 2.13 (1H, m) 40.6 C-6, 7, 9, 10, 19
9 2.03 (1H, m), 2.13 (1H, m) 27.9 C-7, 8, 10 ,11, 18
10 5.43 (1H, t, J = 6.6 Hz) 128.2 C-8, 9, 11 ,12, 18
11 137.9
12 4.21 (1H, t, J = 6.6 Hz) 78.2 C-10, 11, 13 ,14, 18
13 1.54 (1H, m), 1.79 (1H, m) 37.1 C-11, 12, 14 ,15
14 3.29 (1H, dd, J = 10.8, 1.2 Hz) 78.3 C-12, 13, 15 ,16, 17
15 73.6
16 1.12 (3H, s) 25.2 C-14, 15, 17
17 1.15 (3H, s) 25.6 C-14, 15, 16
18 1.61 (3H, s) 11.2 C-10, 11, 12
19 1.64 (3H, s) 16.3 C-6, 7, 8
20 1.91 (3H, s) 25.9 C-2, 3, 4
OCH3 3.65 (3H, s) 51.4 C-1
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 45 卷 第 13 期 2014 年 7 月

·1818·
的 NMR 数据比较发现，化合物 1 除了比 2 多 1 个
甲氧基外，在碳谱中，C-10～13 及 C-18 数据相差
较大，C-12 的化学位移由 2 中的 δC 36.6 向低场位
移到 1 中的 δC 78.2；而在氢谱中，C-12 位的亚甲基
质子由 2 中的 δH 2.06 (1H, t, J = 6.6 Hz) 和 δH 2.25
(1H, m) 变为 1 中的次甲基质子 δH 4.21 (1H, t, J =
6.6 Hz)，化学位移和耦合常数的变化均提示化合物
1 结构中 C-12 位连有羟基。在 HMBC 谱（图 1）中，
甲氧基质子信号 δH 3.65 和 C-1 (δC 168.6) 存在远程
相关，而 C-12 上的质子信号与 C-10 (δC 128.2), C-11
(δC 137.9), C-13 (δC 37.1), C-14 (δC 78.3) 和 C-18 (δC
11.2) 存在远程相关，从而确证了化合物 1 中的甲
氧基连在羰基上，羟基位于 C-12。化合物 1 的双键
构型是通过与 2 比较和 NOESY 相关确定的。在
NOESY 图谱（图 1）中，H-2 与 20-CH3，H-6 与
H-8 以及 H-10 与 H-12 存在 NOE 效应，从而可以确
定 6 位和 10 位的双键为反式以及 2 位的双键为顺
式。C-12 和 C-14 的绝对构型未能确定。结合 HSQC、
HMBC、NOESY 谱图，并参考文献报道[18-20]确定
化合物 1为 (2Z, 6E, 10E)-12, 14, 15-三羟基-3, 7, 11,
15-四甲基十六碳三烯酸甲酯，为新化合物，命名为
山楝定，其 NMR 信号归属见表 1。
化合物 2：无色油状物。1H-NMR (600 MHz,
CD3OD) 和 13C-NMR (150 MHz, CD3OD) 数据见表 2。
CO2CH3
1
14
1311
12
10
9
20 19
86
3
2
7
4
5
OH
OH
OH
17
16
15
18
CO2CH3 OH
OH
OH

图 1 化合物 1 的结构及 1H-1H COSY (━)、HMBC (→) 和 NOESY ( ) 相关
Fig. 1 Structures and 1H-1H COSY (━), HMBC (→) and NOESY ( ) correlations of compound 1
表 2 化合物 2 和 3 的 1H-NMR (600 MHz, CD3OD) 和 13C-NMR 数据 (150 MHz, CD3OD)
Table 2 1H-NMR (600 MHz, CD3OD) and 13C-NMR (150 MHz, CD3OD) data of compounds 2 and 3
2 3 碳位
δC δH δC δH
1 170.3 168.2
2 116.0 5.67 (1H, s) 116.7 5.79 (1H, s)
3 162.5 161.0
4 33.2 2.65 (2H, t, J = 7.8 Hz) 36.0 2.35 (1H, dd, J = 18.0, 4.8 Hz)
2.43 (1H, dd, J = 18.0, 12.0 Hz)
5 26.3 2.18 (2H, m) 76.2 5.21 (1H, ddd, J = 12.0, 8.4, 4.8 Hz)
6 123.6 5.17 (1H, t, J = 6.6 Hz) 123.8 5.39 (1H, brd, J = 8.4 Hz)
7 135.2 144.0
8 39.3 2.00 (1H, m), 2.09 (1H, m) 36.8 2.28 (1H, ddd, J = 14.4, 11.4, 4.8 Hz)
2.13 (1H, ddd, J = 14.4, 9.6, 6.0 Hz)
9 25.8 2.00 (1H, m), 2.09 (1H, m) 33.6 1.56 (1H, m), 1.68 (1H, m)
10 124.8 5.17 (1H, t, J = 6.6 Hz) 73.6 3.74 (1H, m)
11 134.6 43.8 2.78 (1H, q, J = 7.2 Hz)
12 36.6 2.08 (1H, m) 197.1
13 29.7 2.19 (1H, m), 1.35 (1H, m), 1.71 (1H, m) 102.4 5.49 (1H, s)
14 78.1 3.23 (1H, brd, J = 12.0 Hz) 210.4
15 73.4 90.0
16 26.3 1.16 (3H, s) 23.3 1.36 (3H, s)
17 23.2 1.12 (3H, s) 23.2 1.36 (3H, s)
18 15.9 1.62 (3H, s) 14.5 1.24 (3H, d, J = 7.2 Hz)
19 15.9 1.62 (3H, s) 17.0 1.76 (3H, d, J = 1.2 Hz)
20 25.3 1.90 (3H, s) 23.2 2.02 (3H, s)

中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 45 卷 第 13 期 2014 年 7 月

·1819·
以上数据与文献报道基本一致[20]，故鉴定化合物 2
为 melidianolic acid A。
化合物 3：无色油状物。1H-NMR (600 MHz,
CD3OD) 和 13C-NMR (150 MHz, CD3OD) 数据见表
2。以上数据与文献报道基本一致[21]，故鉴定化合
物 3 为陵水暗罗素 H。
参考文献
[1] 中国科学院中国植物志编辑委员会. 中国植物志 [M].
北京: 科学出版社, 1997.
[2] Chan L L, George S, Ahmad I, et al. Cytotoxicity effects
of Amoora rohituka and chittagonga on breast and
pancreatic cancer cells [J]. Evid Based Complement
Alternat Med, 2011, 2011: 1-8.
[3] Zhang Y, Wang J S, Wang X B, et al. Limonoids from
the fruits of Aphanamixis polystachya (Meliaceae) and
their biological activities [J]. J Agric Food Chem, 2013,
61(9): 2171-2182.
[4] Cai J Y, Zhang Y, Luo S H, et al. Aphanamixoid A, a
potent defensive limonoid, with a new carbon skeleton
from Aphanamixis polystachya [J]. Org Lett, 2012,
14(10): 2524-2527.
[5] Wang J S, Zhang Y, Wang X B, et al. Aphanalides A—H,
ring A-seco limonoids from the seeds of Aphanamixis
polystachya [J]. Tetrahedron, 2012, 68(21): 3963-3971.
[6] Zhang Y, Wang J S, Wang X B, et al. Aphapolynins A and
B, two new limonoids from the fruits of Aphanamixis
polystachya [J]. Tetrahedron Lett, 2011, 52(20):
2590-2593.
[7] Yang S P, Chen D H, Liao S G, et al. Aphanamolide A, a
new limonid from Aphanamixis polystachya [J]. Org Lett,
2011, 13(1): 150-153.
[8] Mulholland D S, Naidoo N. Limonoids from
Aphanamixis polystacha [J]. Phytochemistry, 1999, 51(7):
927-930.
[9] Chowdhury R, Hasan C M, Rashid M A. Guaiane
sesquiterpenes from Amoora rohituka [J].
Phytochemistry, 2003, 62 (8): 1213-1216.
[10] Chandrasekharan S, Chakraborty T. Aphanamixol, a
diterpene alcohol from Aphanamixis polystacha (Wall)
Parker [J]. J Indian Chem Soc, 1968, 45: 208-210.
[11] Jain S A, Srivastava S K. 8-C-methyl-quercetin-3-O-
β-D-xylopyranoside, a new flavone glycoside from the
roots of Amoora rohituka [J]. J Nat Prod, 1985, 48(2):
299-301.
[12] Sadhu S K, Phattanawasin P, Choudhuri S, et al. A new
lignan from Aphanamixis polystachya [J]. J Nat Med,
2006, 60(4): 258-260.
[13] Harmon A D, Weiss U, Silverton J V. The structure of
rohitukine, the main alkaloid of Amoora rohituka (syn.
Aphanamixis polystachya) (Meliaceae) [J]. Tetrahedron
Lett, 1979, 20(8): 721-724.
[14] Bhatt S K, Saxena V K, Nigam S S. A new saponin from
seeds of Amoora rohituka [J]. Phytochemistry, 1981,
20(7): 1749-1750.
[15] Daulatabad C D, Jamkhandi S A M. A keto fatty acid
from Amoora rohituka [J]. Phytochemistry, 1997, 46(1):
155-156.
[16] Wu H F, Zhang X P, Wang Y, et al. Four new diterpenes
from Aphanamixis polystachya [J]. Fitoterapia, 2013, 90:
126-131.
[17] Zhang X P, Tan Y F, Li Y B, et al. Aphanamixins A–F,
acyclic diterpenoids from the stem bark of Aphanamixis
polystachya [J]. Chem Pharm Bull, 2014, 62(5): 494-498.
[18] Wu S Q, Xu N Y, Zhang J, et al. Three new acyclic
diterpenoids from Eupatorium lindleyanum DC [J]. J
Asian Nat Prod Res, 2012, 14(7): 652-656.
[19] He X F, Wang X N, Fan C Q, et al. Chemical constituents
of Polyalthia nemoralis [J]. Helv Chim Acta, 2007, 90(4):
783-791.
[20] Astulla A, Hirasawa Y, Rahman A, et al. Melidianolic
acid A and B, new antimalarial acyclic diterpenes from
Aphanamixis grandifolia [J]. Nat Prod Commun, 2011,
6(3): 323-326.
[21] Zhang H Y, Yuan C M, Cao M M, et al. New acyclic
diterpenoids from the fruits of Aphanamixis grandifolia
and structure revision of nemoralisin B [J]. Phytochem
Lett, 2014, 8: 81-85.