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Cloning and sequence analysis of phenylalanine ammonia-lyase gene from Curcuma longa

姜黄苯丙氨酸解氨酶基因的克隆与序列分析



全 文 :中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 45 卷 第 21 期 2014 年 11 月

·3141·
• 药材与资源 •
姜黄苯丙氨酸解氨酶基因的克隆与序列分析
刘建福 1, 2,钟书淳 2,王明元 2,唐源江 2,范燕萍 1*,陈 钦 2
1. 华南农业大学园艺学院,广东 广州 510642
2. 华侨大学 生物工程与技术系,福建 厦门 361021
摘 要:目的 对姜黄 Curcuma longa 苯丙氨酸解氨酶(phenylalanine ammonia-lyase,PAL)基因(CurPAL)全长进行克隆
并开展生物信息学分析,为姜黄次生代谢产物的生物合成机制研究奠定基础。方法 利用 RT-PCR 和 RACE 相结合的方法,
以姜黄叶片 cDNA 为模板,克隆获得 CurPAL 全长,进行生物信息学分析。结果 克隆的 CurPAL(登录号为 KJ780359)全
长 cDNA 为 1 293 bp,其中包括 5’-UTR 243 bp,3’-UTR 123 bp,含有 1 个 927 bp 的完整开放阅读框(opening reading frame,
ORF),编码 308 个氨基酸;预测蛋白质相对分子质量为 33 000,理论等电点 pI 为 5.76;CurPAL 蛋白性质稳定,为可溶性
蛋白;CurPAL 编码的蛋白质序列包含与夹竹桃 PAL 蛋白质相同的脱氨基位点和催化活性位点,氨基酸序列多重比较发现,
CurPAL 编码的氨基酸序列与中国李、浙江红山茶、拟南芥、辣椒、小果野蕉 PAL 氨基酸序列的同源性达到 75%以上;与姜
目类的植物(如小果野蕉)的 PAL 聚为一支,说明两者亲缘关系较近;通过蛋白质二维、三维结构的预测,表明 CurPAL
蛋白为全 α型蛋白,由同源四聚体构成。结论 首次克隆并获得 CurPAL 基因全长 cDNA,为姜黄素生物合成途径的阐明和
改善中药材品质提供科学依据。
关键词:姜黄;CurPAL;苯丙氨酸解氨酶;基因克隆;序列分析;RT-PCR;RACE
中图分类号:R282.12 文献标志码:A 文章编号:0253 - 2670(2014)21 - 3141 - 08
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2014.21.019
Cloning and sequence analysis of phenylalanine ammonia-lyase gene from
Curcuma longa
LIU Jian-fu1, 2, ZHONG Shu-chun2, WANG Ming-yuan2, TANG Yuan-jiang2, FAN Yan-ping1, CHEN Qin2
1. College of Horticulture, South China Agricultural University, Guangzhou 510642, China
2. Department of Biological Engineering and Technology, Huaqiao University, Xiamen 361021, China
Abstract: Objective This study aimed at cloning the phenylalanine ammonia-lyase (PAL) gene from Curcuma longa (CurPAL) and
analyzing the bioinformatics. Methods PAL gene was cloned by RT-PCR and RACE strategy with the template of RNA extracted
from C. longa leaves. The bioinformatic analysis of this gene and its corresponding protein were performed. Results One unique
sequence of PAL, named as CurPAL (GenBank NO. KJ780359), was cloned from C. longa. The full-length of CurPAL cDNA was 1 293
bp, including 243 bp of 5’-UTR, 123 bp of 3’-UTR, and 927 bp of ORF encoding 308 amino acids. The molecular weight and
theroretical isoelectric point (pI) of the deduced CurPAL protein were 33 000 and 5.76, respectively. The protein of CurPAL was stable
and soluble. The domination sites and catalytic active sites in PAL protein of Nerium oleander were also found in CurPAL. It was found
that the amino acid sequence of CurPAL had more than 75% homology with PAL of Prunus salicina, Camellia chekiangoleosa,
Capsicum chinense, and Musa acuminate via multiple alignments. It revealed that CurPAL had closer relationship with PALs from
Zingiberales plants than from other plants by phylogenetic tree analysis. Secondary and tertiary structures indicate that CurPAL is a full α
protein contained by homotetramer. Conclusion The cDNA encoding PAL from C. longa is cloned and reported for the first time. This
work provides a scientific basis for exploring the biosynthetic pathway of the medicinal ingredient and improving its quality in C. longa.
Key words: Curcuma longa L.; CurPAL; phenylalanine ammonia-lyase; gene cloning; sequence analysis; RT-PCR; RACE

收稿日期:2014-07-03
基金项目:国家自然科学基金资助项目(31101512);中央高校基本科研业务费专项基金项目(JB-ZR1151);泉州市科技计划项目(2014Z111)
作者简介:刘建福(1975—),男,福建泉州人,博士研究生,副教授,硕士生导师,从事植物生理及代谢调控研究。E-mail: jianfu@hqu.edu.cn
*通信作者 范燕萍,教授,博士生导师。Tel:(021) 85288266 E-mail: fanyanping@scau.edu.cn
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 45 卷 第 21 期 2014 年 11 月

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姜黄 Curcuma longa L. 是我国传统中药,是姜
科姜黄属多年生草本植物。姜黄属植物全世界有 60
多种,盛产于东南亚和澳大利亚北部[1],中国主要
分布在东南至西南部。姜黄属植物主要包含挥发油
和姜黄素类,其中姜黄素是姜黄的主要成分[2]。研
究表明,姜黄素具有抗炎、抗氧化、抗癌等药理作
用[3-5],可以改善糖尿病、代谢性疾病、自身免疫疾
病、动脉粥样硬化、关节炎、中风、外周神经病、
肠炎和脑外伤等多种疾病症状[6]。姜黄素对阿尔茨
海默病等神经变性病具有很强的神经保护作用[7]。
苯丙烷类代谢途径是一切含苯丙烷骨架物质的
直接或间接合成途径。苯丙烷类代谢可生成类黄酮、
木质素等多种次生代谢产物,这些次生产物在植物
的生长发育、抗病、抗逆反应中起着重要的作用[8]。
姜黄素的生物合成是通过苯丙烷代谢途径进行的,
苯丙氨酸解氨酶(PAL)是植物苯丙烷类代谢第一
步反应的关键酶和限速酶,它催化 L-苯丙氨酸解氨
酶生成反式肉桂酸,再由反式肉桂酸生成香豆酸、
阿魏酸、芥子酸等中间产物,进一步形成对香豆酸
辅酶 A 和阿魏酸辅酶 A,然后在姜黄素合成酶催化
下与丙二酰辅酶 A 生成姜黄素[9-10]。
PAL 基因与植物酚类、类黄酮、木质素等次生代
谢产物的合成密切相关[11]。植物 PAL 基因为多基因家
族所编码,PAL 基因的表达受发育和环境信号(如温
度、光质、机械损伤、激素和营养等)的调节,表现
出严格的组织和发育特异性[12-13]。目前已从多种植物
中克隆到 PAL 基因并进行了表达分析[14-15],但在姜黄
中尚未见到包括 PAL 基因在内的苯丙烷类代谢途径
中相关酶基因的报道。本研究以姜黄叶片为材料,开
展姜黄 PAL 基因(CurPAL)全长 cDNA 的克隆,并
进行序列分析和系统进化等生物信息学方面的研究,
为 PAL 基因功能分析和遗传转化奠定基础,为姜黄次
生代谢产物的生物合成机制提供理论依据。
1 材料
姜黄叶片于 2013 年 10 月采自华侨大学温室,
经唐源江副研究员鉴定为姜黄 Curcuma longa L.,
清洗干净后迅速放入液氮中冷冻,置于−80 ℃保存
备用。
M-MLV RTase cDNA Synthesis Kit,pMD19-T
载体,LA Taq Polymerase,DH5α感受态,DNA 标
准相对分子质量 DNA Marker DL2000,Takara
5’-Full RACE Kit with TAP,Takara 3’-Full RACE
Core Set with PrimeScriptTM RTase 均购于宝生物工
程(大连)有限公司;各引物均由上海生工生物工
程技术服务有限公司合成。柱式植物 RNAout 试剂
盒购于北京天恩泽基因科技有限公司,TIANScript
cDNA 第一链合成试剂盒购自天根生化科技有限公
司,逆转录引物为试剂盒提供的 oligo (dT)15。
2 方法
2.1 总 RNA 提取及 cDNA 第一链合成
取叶样品液氮中研磨,根据北京天恩泽基因科技
有限公司的柱式植物 RNAout 试剂盒说明书提取姜黄
总 RNA,−80 ℃保存,分别用紫外分光光度计和电
泳检测其浓度和纯度。以姜黄总 RNA 为模板,根据
TIANScript cDNA 第一链合成试剂盒进行反转录,合
成 cDNA 第一链,反转录产物置于−80 ℃保存,备用。
2.2 PAL 基因 cDNA 片段的扩增
根据小果野蕉 Musa acuminata Colla、生姜
Zingiber officinale Rosc 等芭蕉目植物 PAL 基因的序
列,设计一对保守序列引物 PAL-F 和 PAL-R(表 1),
以上述合成的 cDNA 第一链为模板,进行 PCR 扩
增。RT-PCR 反应体系为 0.4 μL 的 TaKaRa LA Taq
(5 U/μL),引物 PAL-F(10 μmol/L)和 PAL-R(10
μmol/L)各 1.0 μL,cDNA 1.0 μL,2.0 μL 的 dNTP
(2.5 mmol/L),2.5 μL 的 10×缓冲液,17.1 μL 的
ddH2O。PCR 反应条件:94 ℃预变性 5 min;94 ℃
变性 30 s,53 ℃退火 30 s,72 ℃延伸 70 s,30 个循
环;72 ℃延伸 7 min。
2.3 PAL 基因 cDNA 的 RACE 扩增
姜黄 PAL 全长 cDNA 的 5’、3’端的克隆采用
RACE 的方法。根据测序得到的 PAL 片段序列信息
设计 RACE 引物,在 cDNA 5’和 3’端分别设计 2 条
特异性引物(表 1),并利用 Takara 5’-Full RACE Kit
with TAP 和 Takara 3’-Full RACE Core Set with
PrimeScriptTM RTase分别进行2次巢式扩增获得姜黄
PAL 基因的 5’和 3’末端序列,按照试剂盒使用说明
书进行实验操作。RACE 反应体系为 cDNA 1.0 μL、
dNTP(2.5 mmol/L)2.0 μL、上、下游引物(10 μmol/L)
各 1.0 μL、缓冲液(10×)2.5 μL、Dream Taq 酶 0.15
μL 和 ddH2O 17.35 μL。PCR 反应条件为 95 ℃预变
性 5 min;95 ℃变性 35 s,58 ℃退火 40 s,72 ℃延
伸 2.5 min,35 个循环,72 ℃延伸 10 min。
2.4 PAL 基因 ORF 扩增
根据拼接全长的 ORF 区域,设计一对保守序列
引物 ORF-F 和 ORF-R(表 1),以上述合成的 cDNA
第一链为模板,进行 PCR 扩增。反应体系为 0.75 μL
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 45 卷 第 21 期 2014 年 11 月

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的 Trans TaqTM HiFi DNA polymerase,引物 ORF-F
(10 μmol/L)和 ORF-R(10 μmol/L)各 1.0 μL,cDNA
2.0 μL,4.0 μL 的 dNTP(2.5 mmol/L),5.0 μL 的
10×Trans TaqTM HiFi 缓冲液 II,36.25 μL 的
ddH2O。PCR 反应条件:94 ℃预变性 3 min;94 ℃
变性 30 s,65 ℃退火 30 s,72 ℃延伸 60 s,30 个循
环;72 ℃延伸 7 min。
2.5 PCR 产物的回收、克隆与测序
用 DNA 纯化试剂盒回收 PCR 产物并与
PMD19-T 载体(Takara,日本)进行连接,然后将
连接产物转化大肠杆菌 DH5α,37 ℃过夜培养,通
过在含有 Amp 的 LB 培养基上进行蓝白斑筛选,随
机挑取白色菌落进行 PCR 鉴定,将获得的阳性克隆
进一步提取质粒进行酶切鉴定后送上海生工生物工
程技术服务有限公司进行测序。
表 1 姜黄 PAL 基因克隆的引物序列
Table 1 Primer sequence for PAL cloing of C. longa
引物名称 引物序列 (5’-3’)
PAL-F ATTGCAAAAGCCGAAGCAGGAC
PAL-R ACCGGATTGCCCAGAAACTGG
3’-PAL-Outer ACACCCATCGGCGTCTCCAT
3’-PAL-Inner GCTTCGCCACCAAATCCATC
5’-PAL-Outer AGGGCAATCCGTTGTTGTAAAAGTCG
5’-PAL-Inner TGAGGGGATTATCGTTCACGGAGTTG
ORF-F GCGCGGATCCATGGACAACACTCGTCTCGCGATC
下划线为 BamHI 酶切位点
ORF-R GCGCAAGCTTTTAGCAGATGGGAATTGGAGCGCC
下划线为 HindIII 酶切位点

2.6 生物信息学分析
用 DNAstar 进行基因片段拼接,利用 NCBI-
protein blast在线分析软件分析姜黄PAL基因与其他
物种的同源性;用在线网站(http://isoelectric. ovh.-
org/)预测基因编码氨基酸的等电点和蛋白质相对分
子质量;利用 NCBI/ORFfinder 的 ORF 分析核酸序列
的开放阅读框架,用 ExPASy 软件预测编码蛋白
的基本性质和疏水性;应用 TM-HMM 软件分析
编码蛋白的跨膜区;用 SignalP 软件预测编码蛋白
信号肽;用 COILS Server 软件进行 Coil 区分析;
用 TargetP 软件预测编码蛋白的亚细胞定位;用
PORTER 软 件 预 测 蛋 白 质 二 维 结 构 ; 用
SWISS-MODEL 软件预测蛋白质三维结构;用
Mega 5.0 软件中的 Clustal W 软件对不同 PAL 氨
基酸序列进行多重序列比对以后,再使用最大简
约法构建系统发育树。
3 结果与分析
3.1 姜黄叶片总 RNA 的提取和检测
取 5 μL 提取后的总 RNA,在 1.0%的琼脂糖凝
胶上进行电泳检测,由图 1 可以看出提取的姜黄叶
片总 RNA 完整性好;总 RNA 在波长 260 nm 和 280
nm 处吸光度比值为 2.0,纯度比较高。DNA 污染少,
可以进行后续的反转录反应。
3.2 姜黄 PAL 基因克隆及序列特征
根据小果野蕉、生姜等姜科植物 PAL 基因的序
列,设计一对引物,从姜黄叶片 cDNA 中扩增出一条
250~500 bp 长的特异性条带(图 2),经测序该片段
长度为 419 bp;Blastx 比对分析表明其与多个 PAL 基
因有较高的同源性,确认为姜黄 PAL 基因序列。


M-Marker 1-姜黄总 RNA 的 PCR 产物
M-Marker 1-PCR product of total RNA
图 1 姜黄叶片总 RNA
Fig. 1 Total RNA of C. longa leaves

M-Marker 1-CurPAL 基因的 PCR 产物
M-Marker 1-PCR product of CurPAL
图 2 CurPAL 基因保守序列
Fig. 2 Conserved sequence of CurPAL

M 1
2 000 bp
1 000 bp
750 bp
500 bp
250 bp
100 bp
28 S
18 S

5 S
M 1
2 000 bp
1 000 bp
750 bp
500 bp
250 bp
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采用 RACE 技术进行 cDNA 两端序列的扩
增,经过 3’-RACE 获得 1 条 1 204 bp 的片段(图
3-A),经过 5’-RACE 获得了 1 条在 212 bp 的片段
(图 3-B),测序和拼接结果表明其为 PAL 基因的 3’
端和 5’端序列。姜黄 PAL 基因的 cDNA 全长序列




M-Marker A-CurPAL 基因 3’-RACE 产物 B-CurPAL 基因
5’-RACE 产物 C-CurPAL 基因 ORF 产物
M-Marker A-PCR product of 3’-RACE B-PCR product of
5’-RACE C-PCR product of ORF
图 3 RACE 扩增的 CurPAL 基因
Fig. 3 Result of RACE amplification of CurPAL gene
为 1 293 bp,Blastp 比对结果表明,该基因推测的
氨基酸序列与小果野蕉、菠萝 Ananas comosus
(Linn.) Merr. 的苯 PAL 有 90%以上的相似性,推测
其为姜黄的 PAL 基因。
姜黄 PAL 基因全长 cDNA 命名为 CurPAL,经
DNAstar 及 ORF finder 软件分析表明,CurPAL 的
cDNA 由 243 bp 的 5’-UTR、123 bp 的 3’-UTR,包
括 12 bp 的 polyA 结构及 927 bp 编码 308 个氨基酸
的开放阅读框(ORF)组成(图 4)。244~246 bp
的 ATG 及邻近序列(GCGATGG)符合真核生物
起始密码 ATG 预测保守序(A/GXXTGG);在
3’-UTR 处有典型的加尾信号“AATAAA”(图 4);
在 CurPAL 序列中,包含 L6、V23、A7 和 L22 等
脱氨基氨基酸残基(图 4);它们催化活性位点 N29、
G30、N145、G146、N300、G301、HNQDV(78~
82),这些活性位点与夹竹桃 Nerium oleander L.[16]
中报道的相同,说明 CurPAL 是 PAL 蛋白质家族成
员之一。该基因序列在 GenBank 数据库的登陆号
为 KJ780359。
3.3 CurPAL 氨基酸序列同源性分析及进化树分析
通过 NCBI 上的蛋白序列 Blastp 和 ClustalW 软
件分析表明,CurPAL 的氨基酸与其他植物 PAL 编码
的氨基酸序列具有较高的同源性(大于 75%,图 5),
如与中国李 Prunus salicina Lindl.、浙江红山茶
Camellia chekiangoleosa Hu 和拟南芥 Arabidopsis
thaliana (L.) Heynh. 氨基酸序列的一致性达到 78%,
与辣椒 Capsicum annuum L. 的一致性达到 79%,与
小果野蕉的一致性达到 84%。
为研究 CurPAL 与其他植物 PAL 之间的亲缘
关系,用 Clastal W 对氨基酸序列比对后,利用
Mega 5.0 软件通过 Neighbor-Joining(NJ)法构
建氨基酸序列的进化树(图 6),结果显示,姜黄
与野蕉 Musa balbisiana Colla 和小果野蕉聚为一
支,均为芭蕉目,其与野蕉的亲缘关系最近;双
子叶植物中罂粟目、大戟目、蔷薇目、管状花目、
侧膜胎座目聚为另一支。从进化树上看,相同科
或类群的植物聚为一类,但不同植物间 PAL 也有
很高的同源性,这也可推测 PAL 在进化过程中是
相当保守的,CurPAL 与野蕉在结构和功能上具有
一定的相似性。
3.4 CurPAL 蛋白理化性质分析
运用ProtParam工具分析CurPAL编码蛋白的理
化性质,结果表明,CurPAL 编码蛋白相对分子质量
2 000 bp

1 000 bp
750 bp
500 bp

250 bp
100 bp
M PAL C

2 000 bp

1 000 bp
750 bp
500 bp

250 bp
100 bp
M PAL B

2 000 bp

1 000 bp
750 bp
500 bp

250 bp
100 bp
M PAL A
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粗、斜体表示起始密码子(ATG);粗体加*表示终止密码子(TAA);脱氨基位点为方框加粗体;催化激活位点为粗体加下划线;左侧数字为
核苷酸序号
Start codon is in bold and italics, stop codon is indicated by an asterisk and bold, and the deamination site are boxed and in bold, the catalytic active sites
are underlined and in bold, nubers on the left margins represent nucleotide sequences
图 4 CurPAL 基因的核苷酸序列和推测的氨基酸序列
Fig. 4 Nucleotide and deduced amino acid sequences of CurPAL
约为 33 000,理论等电点为 5.76,总共包括 4 728
个原子,分子式为 C1484H2376N410O445S13。CurPAL
的负电荷氨基酸残基(Asp+Glu)数为 38,正电荷
氨基酸残基(Arg+Lys)数为 31;在组成 CurPAL
蛋白的 20 种氨基酸中,丙氨酸所占的比例最高,达
到 13%,色氨酸所占的比例最低。CurPAL 蛋白的
不稳定指数为 29.55,脂肪指数为 100.49,根据
Guruprasad 方法表明 CurPAL 蛋白稳定;Grand
average of hydropathicity(GRAVY)值为−0.022,
肽链表现为亲水性;TM-HMM 预测结果显示该蛋
白不是膜蛋白,无跨膜结构域,定位于细胞质中,
且 N 端不含有蛋白定位信号肽,说明 CurPAL 是一
个可溶性蛋白。
3.5 CurPAL 蛋白二维和三维结构的预测
运用 PORTER 在线软件进行姜黄 PAL 蛋白二
维结构的预测(图 7),由预测的结果来看,CurPAL
蛋白二维结构组分中,α-螺旋(H)占 65.91%>45%,
β-折叠(E)占 0.65%<5%,无规则卷曲(C)占
34.44%,α-螺旋和无规则卷曲是其蛋白质二级结构
中量最大的结构元件,故 CurPAL 属于全 α型蛋白。
运用 SWISS-MODEL 在线软件进行 CurPAL 蛋白三
维结构的预测(图 8),由预测的结果来看,本实验
中的姜黄 PAL 蛋白是基于荷兰芹 [Petroselinum
crispum (Mill.) Hill] PAL 蛋白原子结构 1w27.1 的 A
链建模的,两者序列一致性达到 78.57%,CurPAL 蛋
白由同源四聚体构成,与其他植物相同[17]。表明本
实验克隆得到的 PAL 基因是正确的。
4 讨论
苯丙氨酸解氨酶广泛存在于各种植物和少数微
生物中。它是连接生物初级代谢和苯丙烷类代谢、
催化苯丙烷类代谢第一步反应的酶,是苯丙烷类代
谢的关键酶和限速酶,也是苯丙烷类代谢途径中研
究最多的酶。它在类黄酮、木质素、香豆素、水杨
酸、鞣质等次生代谢产物的合成过程中也起着很重
1
61
121
181
241
301
361
421
481
541
601
661
721
781
841
901
961
1 021
1 081
1 141
1 201
1 261
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AET 41698.1-中国李 NP_181241-拟南芥 AAN32867.1-中粒咖啡 AEX32790.1-葡萄 AFC372-浙江红山茶 AAC33966.1-辣椒
AFG2632-土肉桂 ACG56648.1-小果野蕉 KJ780359-姜黄
AET 41698.1-P. salicina NP_181241-A. thaliana AAN32867.1-C. canephora. AEX32790.1-V.vinifera AFC372-C. chekiangoleosa
AAC33966.1-C. annuum AFG2632-C. osmophloeum ACG56648.1-M. acuminata KJ780359-C. longa
图 5 CurPAL 与其他植物 PAL 氨基酸序列多重比对
Fig. 5 Multiple alignments of amino acid sequence between CurPAL and PAL from other plants
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图 6 CurPAL 与其他植物 PAL 氨基酸序列的系统进化分析
Fig. 6 Phylogentic relationship of amino acid sequences
between CurPAL and PAL from other plants

C-无规则卷曲 H-α-螺旋 E-β-折叠
C-coil H-α-helix E-β-extend
图 7 CurPAL 蛋白二维结构预测
Fig. 7 Forecast for 2D structure of CurPAL protein

图 8 CurPAL 蛋白三维结构预测
Fig. 8 Forecast for 3D structure of CurPAL protein
要的作用。这些次生物质对植物生长发育、抗病害、
防御紫外线等方面都有帮助。近年来,有关 PAL 基
因的研究也成为研究热点。
本研究以姜黄的近缘物种的PAL基因序列设计
简并引物,从姜黄成熟叶片中克隆了 1 个 PAL 基因
片段并结合 RACE 的方法获得了 5’和 3’端序列,首
次从姜黄中获得了 1 个 PAL 基因全长的 cDNA 序
列,命名为 CurPAL 基因。生物信息学分析表明,
CurPAL 基因推测的氨基酸序列与已报道植物的
PAL 基因氨基酸序列有很高的一致性(大于 75%),
基于推导氨基酸序列与其他已报道植物PAL基因氨
基酸序列多重比对和系统进化树分析,CurPAL 基因
和小果野蕉聚为一支,CurPAL 序列包含 L180、
V181、L230、A231 等脱氨基氨基酸残基,其催化
活性位点分别为 N234、G235、N356、D357、N358、
H370、HNQDV(460~464),这些活性位点与水稻
和玉米的相同,说明它们在结构和功能上有一定的
相似性。可见,克隆得到的 CurPAL 基因是苯丙氨
酸解氨酶基因。通过预测二维和三维结构表明
CurPAL 与荷兰芹 PAL 蛋白的结构一致性达到
78.57%,由同源四聚体构成,不存在导肽和信号肽,
无跨膜结构域,定位于细胞质中,肽链表现为亲水
性;α-螺旋和无规则卷曲是其蛋白质二级结构中量
最大的结构元件,β-转角和延伸链散布于整个蛋白
质中。
姜黄素是通过苯丙烷代谢途径生成的,而苯丙
氨酸解氨酶是苯丙烷代谢途径的一个关键酶和限速
酶,其表达强度和酶活性将会影响姜黄素的合成。
因此,本研究结果可为姜黄素类化合物代谢的分子
调控机制奠定基础,为提高姜黄素含量以及姜黄遗
传改良提供理论依据。
参考文献
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102-107.
[6] Aggarwal B B, Harikumar K B. Potential therapeutic
effects of curcumin, the anti-inflammatory agent, against
neurodegenerative, cardiovascular, pulmonary, metabolic,

苹果
中国李
紫苏
拟南芥
麻风树
胡萝卜

浙江红山茶
辣椒
毛白杨
葡萄
中粒咖啡
土肉桂
小果野蕉
姜黄
野蕉
0.02
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 45 卷 第 21 期 2014 年 11 月

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