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Study on fingerprint of HPLC of crud drug, intermediate, and finished products of Wuweizi Syrup

五味子糖浆原药材、中间体及成品的HPLC指纹图谱相关性研究



全 文 :中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 47卷 第 17期 2016年 9月

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五味子糖浆原药材、中间体及成品的 HPLC指纹图谱相关性研究
佟志军 1,魏晓雨 2,王美慧 2,李铁锡 1,王安波 1,曲佳乐 2,姜文月 2*
1. 吉林天力泰药业有限公司,吉林 白山 134400
2. 吉林省现代中药工程研究中心有限公司,吉林 长春 130012
摘 要:目的 建立五味子糖浆原药材、中间体、成品的 HPLC指纹图谱,并分析三者的相关性。方法 采用 ACE5-C18色
谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);以乙腈-水为流动相梯度洗脱,体积流量 1.0 mL/min,检测波长 218 nm,柱温 30 ℃。结
果 对长白山产地的五味子药材、五味子糖浆中间体及成品进行了测定,建立了相应的 HPLC 指纹图谱,并标定了五味子
药材含有 18 个共有峰,中间体及成品含有 12 个共有峰。10批长白山地区五味子药材的化学成分及质量稳定;同厂家不同
批号五味子糖浆中间体及成品相似度较大,药材与中间体及成品的相关性良好。结论 建立的 HPLC 指纹图谱方法简便、
可靠、重复性好,为科学评价及有效控制五味子糖浆质量提供了依据。
关键词:五味子;五味子糖浆;中间体;HPLC;指纹图谱;相关性
中图分类号:R286.02 文献标志码:A 文章编号:0253 - 2670(2016)17 - 3032 - 07
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2016.17.012
Study on fingerprint of HPLC of crud drug, intermediate, and finished products
of Wuweizi Syrup
TONG Zhi-jun
1
, WEI Xiao-yu
2
, WANG Mei-hui
2
, LI Tie-xi
1
, WANG An-bo
1
, QU Jia-le
2
, JIANG Wen-yue
2

1. Jilin Tianlitai Pharmaceutical Co., Ltd., Baishan 134400, China
2. Jilin Modern Chinese Medicine Engineering and Research Center Co., Ltd., Changchun 130012, China
Abstract: Objective To establish the HPLC fingerprint and analyze the correlation of Schisandrae Fructus (SF), intermediate, and
finished products of Wuweizi Syrup. Methods The HPLC method was used with the condition that the column was ACE5-C18 (250
mm × 4.6 mm, 5 μm); The mobile phase was eluted with gradient by acetonitrile-water; The flow rate was 1.0 mL/min; The column
temperature was 30 ℃; The detection wavelength was set at 218 nm. Results The content was determined and the fingerprint was
established for SF from Changbai Mountain, intermediate, and finished products of Wuweizi Syrup; Eighteen common peaks of SF and
12 common peaks in intermediate and finished products of Wuweizi Syrup were marked. The chemical composition and content in ten
batches of SF from Changbai Mountain were stability; The similarity from the same manufacturer, but different batches of the
intermediate and finished product is greater; The correlation between medicinal materials and intermediates as well as finished
products is better. Conclusion The established fingerprints have better reproducibility, which can be used for the quality control of
Wuweizi syrup with good precision, accuracy, and reproducibility.
Key words: Schisandrae Fructus; Wuweizi Syrup; intermediate; HPLC; fingerprint; correlation

五味子糖浆为中国药品标准中药成方制剂第二
册收载的品种,是由单味五味子经渗漉制成流浸膏
后,加入到单糖浆中而制成的糖浆剂,具有收敛固涩、
益气生津、补肾宁心之效[1-2]。临床上用于治疗久咳虚
喘、梦遗滑精、遗尿尿频、久泻不止、自汗、盗汗、
津伤口渴、气短脉虚、内热消渴、心悸失眠等症[3]。
五味子 Schisandrae Fructus(SF)为木兰科
(Magnoliaceae)五味子属 Schisandra Michx.植物五
味子 Schisandra chinensis (Turcz.) Baill. 的干燥成熟
果实,习称北五味子。其有效成分主要包括五味子
醇甲、五味子酯甲、五味子甲素、五味子乙素等成
分,具有广泛的药理作用[4-8]。北五味子主要产于东

收稿日期:2016-04-06
基金项目:吉林省科技发展计划重点科技成果转化项目(20140307024YY)
作者简介:佟志军(1976—),男,硕士,研究方向为中药二次开发。E-mail: 529742181@qq.com
*通信作者 姜文月(1987—),女,博士,研究方向为新药及保健食品开发。E-mail: 542030923@qq.com
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 47卷 第 17期 2016年 9月

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北三省及内蒙古地区,由于野生资源逐年下降,产
区已进行人工种植[9]。目前市售的五味子有野五味
子、北五味子和南五味子等。而北五味子的药用价
值高于其他品种,加之外观相似,价格悬殊等,市
场上以次充好现象十分普遍。有研究表明,东北地
区的辽宁、吉林、黑龙江 3省的五味子药材中木脂
素成分的量均有较大差异,且很多市售五味子药材
中五味子醇甲的量均低于《中国药典》2015年版质
量标准[10-11]。不同品质的五味子药材生产出的糖浆
制品,品质也各不相同,因此建立原料药材和成品
的质控方法势在必行。
中药指纹图谱是一种多指标的质控方法,可比
较全面地反映制剂中的化学成分信息,现已日益成
为国内外广泛采用的中药质量评价模式[12-15]。本研
究采用HPLC指纹图谱法对长白山地区的五味子药
材、五味子糖浆中间体及成品进行质控研究,并进
行相关性分析,从药材-中间体-成品全过程控制五
味子糖浆的产品质量,完善该制剂的质量评价体系,
以保证该药的质量和临床疗效稳定。
1 仪器与材料
Agilent 1200型液相色谱仪及紫外检测器,美国
Agilent公司;Uitimate 3000型液相色谱仪及紫外检
测器,美国戴安公司;Mettler ME204E双量程电子
天平,梅特勒-托利多仪器有限公司。
对照品五味子醇甲(批号 110857-201412,质
量分数 99.46%)、五味子酯甲(批号 111529-200604,
质量分数 95.3%)、五味子甲素(批号 110764-
201312,质量分数 99.6%)、五味子乙素(批号
110765-201311,质量分数 98.8%)均购自中国食品
药品检定研究院。乙腈为美国 Fisher,水为娃哈哈
纯净水。
10批长白山地区五味子药材编号为 Y1~Y10,
由吉林农业大学中药材学院张连学教授鉴定为木兰
科五味子属植物五味子 Schisandra chinensis
(Turcz.) Baill. 的干燥成熟果实;由 10批药材分别
制备成对应的五味子糖浆中间体及成品,所得 10
批五味子糖浆中间体及成品编号及批号见表 1,均
由吉林天力泰药业有限公司提供。

表 1 样品编号及批号
Table 1 Sample number and batch number
药材编号 批号 产地 中间体编号 批号 成品编号 批号
Y1 131201 长白县二十一道沟 Z1 150601 S1 150601
Y2 140301 长白县二十一道沟 Z2 150602 S2 150602
Y3 140401 长白县十六道沟 Z3 150901 S3 150901
Y4 140501 长白山二道岗村 Z4 150902 S4 150902
Y5 140701 长白县十九道沟 Z5 150903 S5 150903
Y6 150501 长白县十八道沟 Z6 150904 S6 150904
Y7 150701 长白县十七道沟 Z7 150905 S7 150905
Y8 150801 长白县十三道沟 Z8 150906 S8 150906
Y9 150802 长白县十三道沟 Z9 151101 S9 151101
Y10 151001 长白山湾沟县 Z10 151102 S10 151102

2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱为 ACE5-C18柱(250 mm×4.6 mm,5
μm);流动相为乙腈-水,梯度洗脱:0~20 min,
40%~55%乙腈;20~35 min,55%~60%乙腈;35~
44 min,60%~65%乙腈;44~50 min,65%~75%
乙腈;50~60 min,75%乙腈;柱温 30 ℃;检测波
长 218 nm;体积流量 1.0 mL/min;进样量 10 μL。
2.2 对照品溶液的制备
精密称定五味子醇甲、五味子酯甲、五味子甲
素、五味子乙素的对照品适量,加甲醇制成含五味
子醇甲 57.68 μg/mL、五味子酯甲 58.72 μg/mL、五
味子甲素 55.36 μg/mL、五味子乙素 56.08 μg/mL的
混合对照品溶液。
2.3 供试品溶液的制备
2.3.1 五味子药材溶液的制备 分别精密称取长白
山产地不同批次药材粉末(过 3号筛)0.5 g于具塞
锥形瓶中,精密加入 25 mL甲醇,称质量,超声提
取 30 min,放置室温,补足减失质量,滤过,取续
滤液,即得。
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 47卷 第 17期 2016年 9月

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2.3.2 五味子糖浆成品及中间体供试品溶液的制备
分别精密量取不同批次五味子糖浆成品 10 mL、中
间体 5 mL于分液漏斗中,成品精密加入 10 mL水,
中间体精密加入 5 mL 水,混匀,用正己烷振摇 3
次,成品每次 20 mL,中间体每次 10 mL,合并正
己烷液,回收溶剂至干,残渣用甲醇使溶解,转移
至 10 mL量瓶中,定容至刻度,摇匀,滤过,取续
滤液,即得。
2.4 方法学考察
2.4.1 精密度试验 取 Y3 样品,按“2.3.1”项下
方法制备,连续进样 6次,记录色谱图。计算各共
有峰的相对保留时间和相对峰面积。结果显示,各
共有峰的相对保留时间的 RSD在 1%以内,相对峰
面积的 RSD在 5%以内,表明仪器精密度良好。
2.4.2 重复性试验 取 Y3 样品,按“2.3.1”项下
方法制备供试品溶液 6份,记录色谱图。计算各共
有峰的相对保留时间和相对峰面积。结果显示,各
共有峰的相对保留时间的 RSD在 1%以内,相对峰
面积的 RSD在 5%以内,表明仪器方法重复性良好。
2.4.3 稳定性试验 取 Y3 样品 1 份,按“2.3.1”
项下方法制备,分别在 0、2、4、6、8、10、12、
16、20、24 h按“2.1”项下色谱条件测定,记录色
谱图。计算各共有峰的相对保留时间和相对峰面积。
结果显示,各共有峰的相对保留时间的 RSD在 1%
以内,相对峰面积的 RSD在 5%以内,表明供试品
溶液在 24 h内稳定。
2.5 指纹图谱的研究
2.5.1 参照峰的选择[16-17] 按照“2.1”项色谱方法
分离混合对照品,由图 1可见五味子醇甲、五味子
酯甲、五味子甲素、五味子乙素的峰型分离效果较
好,作为五味子糖浆原药材、中间体、成品研究的
参照峰。
2.5.2 五味子药材指纹图谱的建立 取 10 批长白
山不同产地的药材按“2.3.1”项下方法制备供试品
溶液。精密吸取 5 μL,注入液相色谱仪,按“2.1”
项下色谱条件进行测定,得到 10批次五味子药材的
HPLC指纹图谱。由图 2可知,共确定 18个色谱峰
为五味子药材的指纹图谱共有峰,且共有峰的峰面
积占总峰面积的 90%以上。通过与混合对照品对比
分析,确定 1号峰为五味子醇甲,11号峰为五味子



图 1 混合对照品的 HPLC色谱图
Fig. 1 HPLC of mixed reference substances



1-五味子醇甲 11-五味子酯甲 13-五味子甲素 16-五味子乙素,下同
1-schisandrin 11-schisantherin A 13-deoxyschizandrin 16-schisandrin B, same as below

图 2 五味子药材指纹图谱及对照指纹图谱 (YR)
Fig. 2 Fingerprint and control fingerprint (YR) of SF
五味子醇甲 五味子乙素
五味子甲素
五味子酯甲
0 10 20 30 40 50 60
t/min
YR
Y10
Y9
Y8
Y7
Y6
Y5
Y4
Y3
Y2
Y1
0 10 20 30 40 50 60
t/min
1
2 3
4
5
6
7 8 9 10 12
13
14
15
16
17
18
11
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酯甲,13号峰为五味子甲素,16号峰为五味子乙素。
采用国家药典委员会“中药色谱指纹图谱相似
度评价系统(2004A)”对所得的 HPLC指纹图谱全
谱进行相似度分析,其相似度均达到 0.998以上(表
2)。说明长白山产地五味子药材质量及成分稳定,
以其作为制备五味子糖浆制剂的原料,可以保证制
剂的药效稳定性。
2.5.3 五味子糖浆成品及中间体指纹图谱的建立
分别取 10批成品及中间体按“2.3.2”项下制备供试
品溶液。分别精密吸取成品 10 μL,中间体 5 μL注
入液相色谱仪,按“2.1”项下色谱条件进行测定,
得到 10 批次五味子糖浆成品和中间体的 HPLC 指
纹图谱。由图 3、4可知,五味子糖浆中间体及成品
分别含有 12个共有色谱峰,且共有峰的峰面积占总
峰面积的 90%以上。通过与混合对照品对比分析,
确定五味子糖浆中间体和成品的指纹图谱中的 1号
峰为五味子醇甲、9号峰为五味子酯甲、11号峰为
五味子甲素、12号峰为五味子乙素。
采用国家药典委员会“中药色谱指纹图谱相似
度评价系统(2004A)”对所得的 HPLC指纹图谱全
谱进行相似度分析,其中间体及成品的相似度均在
0.998以上(表 3、4),相对保留时间及相对峰面积
的 RSD差异不明显,说明不同批次的中间体及成品
的化学成分具有较好的一致性及稳定性。
2.6 五味子糖浆原药材-中间体-成品指纹图谱的相
关性分析
2.6.1 色谱条件 同“2.1”项下色谱条件。混合对
照品溶液色谱图见图 1。
2.6.2 对照品溶液的制备 精密称取五味子醇甲、
五味子酯甲、五味子甲素、五味子乙素各 7 mg,置
量瓶中,各加甲醇定容至 25 mL。制成质量浓度均
为 0.28 mg/mL的对照品母液。再各取 5 mL与量瓶
中,加甲醇定容至 25 mL,稀释成质量浓度为 0.056
mg/mL的混合对照品溶液,即得。

表 2 五味子药材指纹图谱相似度
Table 2 Similarity of fingerprints of SF
样品 Y1 Y2 Y3 Y4 Y5 Y6 Y7 Y8 Y9 Y10 YR 样品 Y1 Y2 Y3 Y4 Y5 Y6 Y7 Y8 Y9 Y10 YR
Y1 1.000 0.999 0.999 1.000 0.999 0.999 1.000 0.999 1.000 0.999 0.999 Y7 1.000 1.000 1.000 0.999 1.000 1.000 1.000 0.998 1.000 1.000 1.000
Y2 0.999 1.000 1.000 0.999 1.000 0.999 1.000 1.000 0.999 0.999 1.000 Y8 0.999 1.000 1.000 1.000 0.999 1.000 0.998 1.000 0.999 1.000 1.000
Y3 0.999 1.000 1.000 0.999 0.999 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 Y9 1.000 0.999 1.000 0.999 1.000 0.999 1.000 0.999 1.000 1.000 1.000
Y4 1.000 0.999 0.999 1.000 1.000 0.999 0.999 1.000 0.999 1.000 0.999 Y10 0.999 0.999 1.000 1.000 0.999 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 0.999
Y5 0.999 1.000 0.999 1.000 1.000 0.999 1.000 0.999 1.000 0.999 0.999 YR 0.999 1.000 1.000 0.999 0.999 1.000 1.000 1.000 1.000 0.999 1.000
Y6 0.999 0.999 1.000 0.999 0.999 1.000 1.000 1.000 0.999 1.000 1.000




图 3 五味子糖浆中间体指纹图谱及对照指纹图谱 (ZR)
Fig. 3 Fingerprint and control fingerprint (ZR) of intermediates of Wuweizi Syrup
0 10 20 30 40 50 60
t/min
ZR
Z10
Z9
Z8
Z7
Z6
Z5
Z4
Z3
Z2
Z1
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10 11
12
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 47卷 第 17期 2016年 9月

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图 4 五味子糖浆成品指纹图谱及对照指纹图谱 (SR)
Fig. 4 Fingerprint and control fingerprint (SR) of finished products of Wuweizi Syrup

表 3 五味子糖浆中间体指纹图谱相似度
Table 3 Similarity of fingerprints of intermediate of Wuweizi Syrup
样品 Z1 Z2 Z3 Z4 Z5 Z6 Z7 Z8 Z9 Z10 ZR 样品 Z1 Z2 Z3 Z4 Z5 Z6 Z7 Z8 Z9 Z10 ZR
Z1 1.000 0.999 0.999 0.998 0.998 0.999 0.999 0.999 0.999 0.999 0.999 Z7 0.999 1.000 1.000 0.999 0.999 1.000 1.000 0.998 1.000 1.000 1.000
Z2 0.999 1.000 1.000 0.999 1.000 0.999 1.000 1.000 0.999 0.999 1.000 Z8 0.999 1.000 1.000 0.999 0.999 1.000 0.998 1.000 0.999 1.000 1.000
Z3 0.999 1.000 1.000 0.999 0.999 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 Z9 0.999 0.999 1.000 0.999 0.999 0.998 1.000 0.999 1.000 1.000 1.000
Z4 0.998 0.999 0.999 1.000 1.000 0.999 0.999 0.999 0.999 0.999 0.999 Z10 0.999 0.999 1.000 0.999 0.999 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 0.999
Z5 0.998 1.000 0.999 1.000 1.000 0.999 0.999 0.999 0.999 0.999 0.999 ZR 0.999 1.000 1.000 0.999 0.999 1.000 1.000 1.000 1.000 0.999 1.000
Z6 0.999 0.999 1.000 0.999 0.999 1.000 1.000 1.000 0.998 1.000 1.000

表 4 五味子糖浆成品指纹图谱相似度
Table 4 Similarity of fingerprints of finished products of Wuweizi Syrup
样品 S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S10 SR 样品 S1 S2 S3 S4 S5 S6 S7 S8 S9 S10 SR
S1 1.000 0.999 0.999 0.998 0.998 0.999 0.999 0.999 0.999 0.999 0.999 S7 0.999 1.000 1.000 0.999 0.999 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000
S2 0.999 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 S8 0.999 1.000 1.000 0.999 0.999 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000
S3 0.999 1.000 1.000 0.999 0.999 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 S9 0.999 1.000 1.000 0.999 0.999 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000
S4 0.998 1.000 0.999 1.000 1.000 0.999 0.999 0.999 0.999 0.999 0.999 S10 0.999 1.000 1.000 0.999 0.999 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000
S5 0.998 1.000 0.999 1.000 1.000 0.999 0.999 0.999 0.999 0.999 0.999 SR 0.999 1.000 1.000 0.999 0.999 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000
S6 0.999 1.000 1.000 0.999 0.999 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000

2.6.3 供试品溶液的制备 同“2.3”项下制备方法。
2.6.4 线性关系的考察 精密量取 2、4、6、8、10
mL混合对照品于 10 mL量瓶中,加甲醇至刻度,
分别吸取 5 μL,注入液相色谱仪,测定,以进样质
量浓度为横坐标(X),峰面积积分值为纵坐标(Y)
绘制标准曲线,得回归方程分别为五味子醇甲 Y=
530.66 X-0.032 8,R2=0.999 9;五味子酯甲 Y=
380.29 X+0.038 6,R2=0.999 5;五味子甲素 Y=
597.91 X-0.442 5,R2=0.998 7;五味子乙素 Y=
547.22 X+0.015 6,R2=0.999 5。结果五味子醇甲、
五味子酯甲、五味子甲素、五味子乙素分别在
5.768~57.68、5.872~58.72、5.536~55.36、5.608~
56.08 μg/mL呈良好的线性关系。
2.6.5 精密度试验 取同一供试品(Y3)溶液连续
进样 6次,以峰面积计算各指标成分的 RSD,分别
为五味子醇甲 0.73%、五味子酯甲 0.79%、五味子
0 10 20 30 40 50 60
t/min
SR
S10
S9
S8
S7
S6
S5
S4
S3
S2
S1
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5
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12
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·3037·
甲素 1.03%、五味子乙素 1.11%。
2.6.6 稳定性试验 取同一供试品(Y3)溶液,分
别于 0、2、4、6、10、18、24 h注入液相色谱仪中,
以峰面积计算各指标成分的 RSD,分别为五味子醇
甲 0.53%、五味子酯甲 1.09%、五味子甲素 0.91%、
五味子乙素 0.75%,结果表明供试品溶液中各成分
在 24 h稳定性良好。
2.6.7 重复性试验 取同一供试品(Y3)0.5 g,精
密称量,按照“2.3”项下方法,平行制备 6份,以
峰面积计算各指标成分的 RSD,分别为五味子醇甲
0.31%、五味子酯甲 0.79%、五味子甲素 0.67%、五
味子乙素 1.01%,结果表明本方法重复性良好。
2.6.8 回收率试验 取同一供试品(Y3)0.25 g,
精密称定 6份,分别置于具塞锥形瓶中,精密量取
“2.6.2”项下混合对照品溶液 5 mL置于以上 6份样
品中,再精密加入甲醇 20 mL,摇匀,称质量,超
声提取 30 min,放置室温,补足减失质量,滤过,
取续滤液 5 μL注入液相色谱中,测定计算回收率。
结果五味子醇甲、五味子酯甲、五味子甲素、五味
子乙素回收率分别为 99.78%、101.34%、98.17%、
102.96%,RSD分别为 0.43%、0.97%、1.09%、1.02%。
2.6.9 相似度分析 分别各取 2批药材(Y1、Y2)、
中间体(Z1、Z2)及成品(S1、S2)按照拟定的方
法绘制 HPLC图谱,并采用相似度评价软件评价三
者图谱的相似度。由图 5可知,药材、中间体、成
品共有 12个共有峰,对比参照峰图谱确定 1号峰为
五味子醇甲、9号峰为五味子酯甲、11号峰为五味
子甲素、12号峰为五味子乙素。通过相似度研究分
析(表 5),药材与中间体及成品的相似度在 0.88~
0.92,相关性较好。由此得证药材中主要成分均在




图 5 药材-中间体-成品图谱和对照指纹图谱 (R)
Fig. 5 Fingerprint and control fingerprint (R) of SF-intermediate-finshed product

表 5 药材-中间体-成品指纹图谱相似度
Table 5 Similarity of fingerprints of SF-intermediate-
finished products
样品 S1 S2 Z1 Z2 Y1 Y2 R
S1 1.000 0.995 0.976 0.977 0.889 0.890 0.984
S2 0.995 1.000 0.991 0.992 0.905 0.907 0.995
Z1 0.976 0.991 1.000 1.000 0.922 0.923 0.997
Z2 0.977 0.992 1.000 1.000 0.920 0.922 0.997
Y1 0.889 0.905 0.922 0.920 1.000 1.000 0.938
Y2 0.890 0.907 0.923 0.922 1.000 1.000 0.939
R 0.984 0.995 0.997 0.997 0.938 0.939 1.000
中间体及成品中体现,同时中间体与成品的特征峰
在药材中也找到追溯。
2.6.10 主要成分定量变化分析 由表 6可见,中间
体及成品中五味子醇甲、五味子酯甲、五味子甲素、
五味子乙素的量基本稳定,但相对于原料药材其量
相对较小,原因可能与该制剂提取工艺有关。因此
进一步改进和优化提取生产工艺,使药材在提取工
艺中能提取出更多主要成分,是今后研究的重点。
3 讨论
本研究前期曾考察了 Ultimmate XB-C18色谱柱
(250 mm×4.6 mm,5 μm)、TopsilTM-C18色谱柱(250
1
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5
6
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R
Y2
Y1
Z2
Z1
S2
S1
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表 6 主要成分定量结果分析
Table 6 Principal component analysis
样品
质量分数/(mg·g−1)
五味子醇甲 五味子酯甲 五味子甲素 五味子乙素
S1 1.420 0.036 0.136 0.044
S2 1.441 0.041 0.138 0.045
Z1 1.434 0.039 0.139 0.047
Z2 1.471 0.043 0.139 0.048
Y1 4.963 0.159 0.672 0.474
Y2 4.836 0.153 0.678 0.469
药材→中间体
平均转移率/%
29.64 26.28 20.59 10.07
中间体→成品
平均转移率/%
98.48 93.90 98.56 93.68

mm×4.6 mm,5 μm)和 ACE5-C18 色谱柱(250
mm×4.6 mm,5 μm),甲醇-水流动相系统、乙腈-
水流动相,分析药材、中间体、成品三者的液相色
谱图的分离效果,最终选定 ACE5-C18柱、乙腈-水
为流动相系统的分离度好,稳定性好。同时,本研
究考察了正己烷、氯仿、醋酸乙酯萃取成品及中间
体的提取效果,甲醇和乙醇的超声、回流对药材的
提取效果,比较分析认为用正己烷萃取 3次得到的
中间体及成品的色谱峰面积、甲醇超声提取药材得
到的样品的液相色谱峰的峰面积可以达到峰值。通
过一系列的前期实验最终确定选用 ACE5-C18 柱、
乙腈-水流动相、正己烷 3次萃取中间体及成品、甲
醇超声提取药材的分析条件能使五味子糖浆药材、
中间体、成品的液相色谱峰的分离效果达到最佳,
便于建立指纹图谱方法。
本研究首次建立了五味子糖浆从药材至中间
体、成品的全方位的指纹图谱,确定了长白山地区
的五味子药材相似度较高。由其生产的糖浆中间体
和成品的相似度较高、稳定性良好,三者的相关性
好,为生产出安全、药效稳定的五味子糖浆制品提
供了科学依据,为企业大生产建立质量标准提供数
据支撑。
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