全 文 ：中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 47卷 第 16期 2016年 8月

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皂角刺中黄酮类成分及其抗肿瘤活性研究
李 岗 1，王召平 1，仙云霞 2，周洪雷 2，王 晓 1, 2，刘 伟 1，于金倩 1*
1. 山东省中药质量控制技术重点实验室，山东省分析测试中心，山东 济南 250014
2. 山东中医药大学药学院，山东 济南 250014
摘 要：目的 研究皂角刺 Gleditsiae Spina 中黄酮类化学成分及其抗肿瘤活性。方法 采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20
柱色谱及半制备 HPLC 等方法对皂角刺中黄酮类化学成分进行分离纯化，并根据理化性质和波谱学数据分析鉴定化合物结
构；采用 SRB法测定化合物 7～16对人乳腺癌细胞 MCF-7的细胞毒活性。结果 从皂角刺醋酸乙酯部位中分离得到 16个
黄酮类化合物，分别鉴定为 tricin（1）、甘草素（2）、7,4′-二羟基-5,3′-二甲氧基黄酮醇（3）、鹰嘴豆醇（4）、7,3′,5′-三羟基
二氢黄酮（5）、7,4′-二羟基黄酮醇（6）、双氢山柰素（7）、紫铆查耳酮（8）、(2S)-5,7,3′,5′-四羟基二氢黄酮（9）、7,3′,5′-三
羟基-5-甲氧基黄酮醇（10）、槲皮素（11）、黄颜木素（12）、fisetin（13）、leucorobinetinidin（14）、thevetiaflavon（15）、异
牡荆素（16）；其中化合物 8对MCF-7细胞的 IC50值为 28.53 μmol/L。结论 化合物 1～6、8～10、14、15为首次从该属植
物中分离得到，化合物 8对MCF-7细胞具有明显细胞毒活性。
关键词：皂角刺；黄酮类；7,4′-二羟基-5,3′-二甲氧基黄酮醇；紫铆查耳酮；7,3′,5′-三羟基-5-甲氧基黄酮醇；抗肿瘤活性
中图分类号：R284.1 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2016)16 - 2812 - 05
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2016.16.005
Flavonoids from Gleditsiae Spina and their antitumor activities
LI Gang1, WANG Zhao-ping1, XIAN Yun-xia2, ZHOU Hong-lei2, WANG Xiao1, 2 , LIU Wei1, YU Jin-qian1
1. Shandong Key Laboratory of TCM Quality Control Technology, Shandong Analysis and Test Center, Jinan 250014, China
2. College of Pharmacy, Shandong University of Traditional Chinese Medicine, Jinan 250014, China
Abstract: Objective To investigate the flavonoids from Gleditsiae Spina (thorns of Gleditsia sinensis) and their antitumor activities.
Methods The chemical constituents in the EtOAc fraction from Gleditsiae Spina were isolated and purified by the chromatography on
silica gel, Sephadex LH-20 columns, and semi-preparative HPLC. Their structures were identified by various spectroscopic analyses,
and the cytotoxicity of compounds 7—16 were evaluated in vitro against MCF-7 cell lines by SRB method. Results Sixteen
compounds were isolated from the extracts of Gleditsiae Spina and identified as tricin (1), liquiritigenin (2),
7,4′-dihydroxy-5,3′-dimethoxyflavanonol (3), garbanzol (4), 7,3′,5′-trihydroxyflavanone (5), 7,4′-dihydroxyflavonol (6), dihydrokaempferol
(7), butein (8), (2S)-5,7,3′,5′- tetrahydroxyflavanone (9), 7,3′,5′-trihydroxy-5-methoxyflavanonol (10), quercetin (11), fustin (12), fisetin (13),
leucorobinetinidin (14), thevetiaflavon (15), and isovitexin (16). Compound 8 showed the inhibitory effect against MCF-7 cells with IC50
value of 28.53 μmol/L. Conclusion Compounds 1—6, 8—10, 14 and 15 are isolated from the plants of Gleditsia L. for the first time,
compound 8 shows the significant cytotoxic activity against MCF-7 cells.
Key words: Gleditsiae Spina; flavonoids; 7,4′-dihydroxy-5,3′-dimethoxyflavanonol; butein; 7,3′,5′-trihydroxy-5-methoxyflavanonol;
antitumor activity

皂角刺 Gleditsiae Spina又名皂荚刺、皂角针、
天丁等，为豆科（Leguminosae）皂荚属 Gleditsia L.
植物皂荚 Gleditsia sinensis Lam. 的干燥棘刺，在我
国分布广泛，以江苏和湖北为主要产地。全年均可
采收，以 9月至次年 3月间为宜。其味辛、性温，
归肝、胃经，具有消肿托毒、排脓、杀虫等功效[1]。
现代研究表明，皂角刺中主要含有黄酮类、酚酸类、
萜类、甾体类等多种化学成分，具有抗肿瘤、抗炎、
抗病毒、免疫调节等作用[2]。其中，皂角刺总黄酮对
结肠癌[3]、肺癌[4]、肝癌[5]等癌细胞具有一定的抑制

收稿日期：2016-03-10
基金项目：山东省科学院科学技术发展计划项目（2014QN02)；山东省科学院—枣庄产学研联合基金资助项目
作者简介：李 岗（1990—），男，硕士研究生，研究方向为中药及复方活性成分与质量控制研究。E-mail: ligang2010@126.com
*通信作者 于金倩，女，博士，助理研究员，研究方向为天然产物化学。E-mail: yujinqian87528@126.com
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作用。为深入探究皂角刺抗肿瘤的药效物质基础，
本实验对其化学成分进行系统研究，从皂角刺醋酸
乙酯部位分离得到 16 个黄酮类化合物，分别鉴定
为 tricin（1）、甘草素（liquiritigenin，2）、7,4′-二羟
基 -5,3′-二 甲 氧 基 黄 酮 醇 （ 7,4′-dihydroxy-5,3′-
dimethoxyflavanonol，3）、鹰嘴豆醇（garbanzol，4）、
7,3′,5′-三羟基二氢黄酮（7,3′,5′-trihydroxyflavanone，
5）、7,4′-二羟基黄酮醇（7,4′-dihydroxyflavonol，6）、
双氢山柰素（dihydrokaempferol，7）、紫铆查耳酮
（ butein， 8）、 (2S)-5,7,3′,5′-四羟基 -二氢黄酮
[(2S)-5,7,3′,5′-tetrahydroxyflavanone，9]、7,3′,5′-三
羟 基 -5- 甲 氧 基 黄 酮 醇 （ 7,3′,5′-trihydroxy-5-
methoxyflavanonol，10）、槲皮素（quercetin，11）、
黄颜木素（fustin，12）、fisetin（13）、leucorobinetinidin
（14）、thevetiaflavon（15）、异牡荆素（isovitexin，
16）。化合物 1～6、8～10、14～15 为首次从该属
植物中分离得到，其中化合物 8 对 MCF-7 细胞具
有明显的细胞毒活性。
1 仪器与材料
Bruker AVIIIHD-600核磁共振波谱仪、Bruker-400
核磁共振波谱仪（瑞士 Bruker公司）；Waters 2695高
效液相色谱仪（美国Waters公司）；EYELA N-1200A
型旋转蒸发器（日本东京理化）；半制备 HPLC 分析
仪器为岛津 LC-20A（日本岛津公司）；薄层硅胶
GF254、柱色谱硅胶（青岛海洋化工厂）；HPLC 用甲
醇、乙腈为色谱纯（美国 Tedia公司），娃哈哈纯净水；
其余试剂均为分析纯；人乳腺癌细胞MCF-7（中国科
学院上海生命科学院细胞库）。
皂角刺Gleditsiae Spina药材采购于安徽亳州市
场，经山东中医药大学周洪雷教授鉴定为豆科皂荚
属植物皂荚 Gleditsia sinensis Lam. 的干燥棘刺。样
品标本（20130820）保存于山东省分析测试中心山
东省中药质量控制技术重点实验室。
2 提取与分离
干燥皂角刺 8 kg粉碎，过 40目筛。用 95%乙
醇 64 L回流提取 3次，每次 2 h，合并、浓缩提取
液。依次用等体积石油醚、醋酸乙酯萃取 3次，浓
缩得醋酸乙酯部位浸膏约 230 g。醋酸乙酯部位经
硅胶柱色谱分离，采用二氯甲烷-甲醇（100∶0→0∶
100）梯度洗脱，经 TLC 检识合并得到 15 个馏份
Fr. 1～15。
Fr. 6经硅胶柱色谱、Sephadex LH-20、HPLC
制备液相色谱分离得到化合物 1（8.5 mg）；Fr. 7经
硅胶柱色谱结合HPLC制备液相色谱分离得到化合
物 2（8.0 mg）、3（14.5 mg）；Fr. 8经硅胶柱色谱、
Sephadex LH-20，结合 HPLC制备液相色谱、重结
晶等手段得到化合物 4（31.4 mg）、6（5.2 mg）、7
（26.2 mg）、9（4.0 mg）；Fr. 9 经硅胶柱色谱结合
Sephadex LH-20、HPLC 制备液相色谱分离得到化
合物 5（33.4 mg）、6（5.2 mg）、8（8.0 mg）、9（6.0
mg）；Fr. 10经硅胶柱色谱结合 Sephadex LH-20分
离得到化合物 10（8.2 mg）、11（8.5 mg）；Fr. 12
经硅胶柱色谱、Sephadex LH-20、制备液相色谱分
离得到化合物 10（7.6 mg）、11（7.4 mg）、12（27 mg）、
13（32.9 mg）、14（9.6 mg）、15（9.2 mg）；Fr. 14
经硅胶柱色谱结合 RP-C18中压柱色谱、制备液相色
谱分离得到化合物 16（6.2 mg）。
3 结构鉴定
化合物 1：黄色针晶（CH3OH），ESI-MS m/z: 331.0
[M＋H]+ (C17H14O7)；1H-NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ:
12.97 (1H, s, 5-OH), 7.33 (2H, s, H-2′, 6′), 6.99 (1H, s,
H-3), 6.57 (1H, d, J = 1.2 Hz, H-8), 6.21 (1H, d, J = 1.2
Hz, H-6), 3.89 (6H, s, 3′, 5′-OCH3)；13C-NMR (150
MHz, DMSO-d6) δ: 182.2 (C-4), 164.6 (C-7), 164.1
(C-2), 161.8 (C-5), 157.8 (C-9), 148.6 (C-3′, 5′), 140.3
(C-4′), 120.8 (C-1′), 109.9 (C-2′, 6′), 104.8 (C-10), 104.2
(C-3), 104.0 (C-6), 94.6 (C-8), 56.8 (3′, 5′-OCH3)。以上
数据与文献报道一致[6]，故鉴定化合物 1为 tricin。
化合物 2：黄色结晶（CH3OH），ESI-MS m/z:
256.8 [M＋H]+ (C15H12O4)； 1H-NMR (400 MHz,
DMSO-d6) δ: 10.56 (1H, s, 7-OH), 9.58 (1H, s,
4′-OH), 7.65 (1H, d, J = 8.8 Hz, H-5), 7.32 (2H, dd,
J = 2.4, 8.8 Hz, H-2′, 6′), 6.79 (2H, dd, J = 2.0, 8.4
Hz, H-3′, 5′), 6.51 (1H, dd, J = 2.4, 8.8 Hz, H-6), 6.33
(1H, d, J = 2.4 Hz, H-8), 5.44 (1H, dd, J = 2.8, 12.8
Hz, H-2), 3.16 (1H, dd, J = 3.6, 16.8 Hz, H-3a), 2.62
(1H, dd, J = 2.8, 16.8 Hz, H-3b)；13C-NMR (100
MHz, DMSO-d6) δ: 190.5 (C-4), 165.1 (C-7), 163.6
(C-9), 158.1 (C-4′), 129.8 (C-1′), 128.9 (C-5), 128.7
(C-2′, 6′), 115.6 (C-3′, 5′), 114.0 (C-10), 110.9 (C-6),
103.0 (C-8), 79.4 (C-2), 43.6 (C-3)。以上数据与文献
报道一致[7]，故鉴定化合物 2为甘草素。
化合物 3：黄色针晶（CH3OH），ESI-MS m/z: 333
[M＋H]+；1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 7.06
(1H, d, J = 2.0 Hz, H-2′), 6.88 (1H, dd, J = 2.0, 8.0
Hz, H-6′), 6.77 (1H, d, J = 8.0 Hz, H-5′), 6.04 (1H, d,
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J = 1.6 Hz, H-6), 5.88 (1H, d, J = 1.6 Hz, H-8), 4.91
(1H, d, J = 11.6 Hz, H-2), 4.35 (1H, d, J = 11.2 Hz,
H-3), 3.77 (6H, s, 5, 3′-OCH3)；13C-NMR (100 MHz,
DMSO-d6) δ: 190.2 (C-4), 165.2 (C-7), 164.2 (C-9),
162.6 (C-5), 147.8 (C-3′), 147.4 (C-4′), 130.1 (C-1′),
121.4 (C-6′), 115.4 (C-5′), 112.6 (C-2′), 102.1 (C-10),
96.1 (C-8), 94.1 (C-6), 83.0 (C-2), 72.8 (C-3), 56.1 (5,
3′-OCH3)。以上数据与文献报道一致[8]，故鉴定化
合物 3为 7,4′-二羟基-5,3′-二甲氧基黄酮醇。
化合物 4：黄色粉末，ESI-MS m/z: 273 [M＋H]+
(C15H12O5)；1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 7.64
(1H, d, J = 8.4 Hz, H-5), 7.32 (2H, d, J = 8.4 Hz, H-2′,
6′), 6.79 (2H, d, J = 8.4 Hz, H-3′, 5′), 6.53 (1H, dd, J =
2.0, 8.4 Hz, H-6), 6.29 (1H, d, J = 2.0 Hz, H-8), 5.03
(1H, d, J = 11.6 Hz, H-2), 4.49 (1H, d, J = 11.6 Hz,
H-3)；13C-NMR (100 MHz, DMSO-d6) δ: 192.9 (C-4),
165.5 (C-7), 163.3 (C-9), 158.1 (C-4′), 130.0 (C-2′,
6′), 129.1 (C-5), 128.4 (C-1′), 115.3 (C-3′, 5′), 112.5
(C-10), 111.4 (C-6), 102.9 (C-8), 83.8 (C-2), 72.9
(C-3)。以上数据与文献报道一致[9]，故鉴定化合物
4为鹰嘴豆醇。
化合物 5：黄色结晶（CH3OH），ESI-MS m/z: 273
[M＋H]+ (C15H12O5)；1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6)
δ: 7.63 (1H, d, J = 8.8 Hz, H-5), 6.89 (1H, brs, H-4′),
6.75 (2H, brs, H-2′, 6′), 6.49 (1H, d, J = 9.2 Hz, H-6),
6.33 (1H, brs, H-8), 5.38 (1H, dd, J = 2.0, 12.4 Hz,
H-2a), 3.05 (1H, dd, J = 12.7, 16.7 Hz, H-3a), 2.63
(1H, dd, J = 2.2, 16.7 Hz, H-3e)；13C-NMR (100 MHz,
DMSO-d6) δ: 190.5 (C-4), 165.5 (C-9), 163.6 (C-7),
146.1 (C-5′), 145.7 (C-3′), 130.4 (C-1′), 128.8 (C-5),
118.3 (C-2′), 115.8 (C-6′), 114.7 (C-10), 113.8 (C-4′),
111.1 (C-6), 103.1 (C-8), 79.4 (C-2), 43.7 (C-3)。以上
数据与文献报道一致[10]，故鉴定化合物 5为 7,3′,5′-
三羟基二氢黄酮。
化合物 6：黄色粉末，ESI-MS m/z: 271 [M＋H]+
(C15H10O5)；1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 10.08
(1H, s, 4′-OH), 9.09 (1H, s, 7-OH), 7.92 (1H, d, J =
8.4 Hz, H-5), 8.51 (1H, s, 3-OH), 8.05 (2H, d, J = 8.8
Hz, H-2′, 6′), 6.93 (2H, d, J = 8.6 Hz, H-3′, 5′), 6.92
(1H, d, J = 1.2 Hz, H-8), 6.88 (1H, dd, J = 1.2, 8.4 Hz,
H-6)；13C-NMR (100 MHz, DMSO-d6) δ: 172.5 (C-4),
162.8 (C-7), 159.3 (C-4′), 156.8 (C-9), 145.5 (C-2),
137.6 (C-3), 129.7 (C-2′, 6′), 126.9 (C-5), 122.7 (C-1′),
115.8 (C-3′, 5′), 115.2 (C-6), 114.7 (C-10), 102.4 (C-8)。
以上数据与文献报道一致[11]，故鉴定化合物 6为 7,4′-
二羟基黄酮醇。
化合物 7：黄色粉末，ESI-MS m/z: 289 [M＋H]+
(C15H12O6)；1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 11.93
(1H, s, 5-OH), 7.31 (2H, d, J = 8.4 Hz, H-2′, 6′), 6.78
(2H, d, J = 8.4 Hz, H-3′, 5′), 5.88 (1H, brs, H-8), 5.83
(1H, brs, H-6), 5.03 (1H, d, J = 11.4 Hz, H-2), 4.57
(1H, d, J = 11.4 Hz, H-3)；13C-NMR (100 MHz,
DMSO-d6) δ: 198.1 (C-4), 168.0 (C-7), 163.8 (C-5),
163.0 (C-9), 158.2 (C-4′), 129.9 (C-2′, 6′), 128.1
(C-1′), 115.4 (C-3′, 5′), 100.7 (C-10), 96.6 (C-6), 95.6
(C-8), 83.3 (C-2), 71.9 (C-3)。以上数据与文献报道
一致[12]，故鉴定化合物 7为双氢山柰素。
化合物 8：桔红色粉末，ESI-MS m/z: 273.2 [M＋
H]+ (C15H12O5)；1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 8.12
(1H, d, J = 8.8 Hz, H-6′), 7.66 (2H, brs, H-α, β), 7.28
(1H, brs, H-2), 7.20 (1H, d, J = 8.0 Hz, H-6), 6.81 (1H,
d, J = 8.0 Hz, H-5), 6.39 (1H, brd, J = 8.8 Hz, H-5′), 6.27
(1H, d, J = 2.0 Hz, H-3′)；13C-NMR (100 MHz,
DMSO-d6) δ: 191.8 (C = O), 166.2 (C-2′), 165.6 (C-4′),
149.5 (C-4), 146.2 (C-3), 145.2 (C-β), 133.2 (C-6′),
126.6 (C-1), 122.9 (C-6), 117.7 (C-α), 116.2 (C-2, 5),
113.4 (C-1′), 108.7 (C-5′), 103.1 (C-3′)。以上数据与文
献报道一致[13]，故鉴定化合物 8为紫铆查耳酮。
化合物 9：黄色粉末，ESI-MS m/z: 289.5 [M＋H]+
(C15H12O6)；1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 12.15
(1H, s, 5-OH), 9.11 (2H, s, 3′, 5′-OH), 6.87 (1H, s, H-4′),
6.74 (2H, s, H-2′, 6′), 5.85 (2H, s, H-6, 8), 5.35 (1H, dd,
J = 3.2, 12.4 Hz, H-2), 3.17 (1H, dd, J = 11.2, 18.4 Hz,
H-3b), 2.67 (1H, dd, J = 3.2, 18.4 Hz, H-3a)；13C-NMR
(100 MHz, DMSO-d6) δ: 196.6 (C-4), 167.6 (C-7), 163.9
(C-5), 163.3 (C-9), 146.2 (C-3′), 145.7 (C-5′), 130.0
(C-1′), 118.4 (C-4′), 115.8 (C-6′), 114.8 (C-2′), 102.1
(C-10), 96.3 (C-6), 95.5 (C-8), 78.9 (C-2), 42.6 (C-3)。以
上数据与文献报道一致 [14]，故鉴定化合物 9 为
(2S)-5,7,3′,5′-四羟基-二氢黄酮。
化合物 10：黄色结晶（CH3OH），ESI-MS m/z:
319.3 [M＋H]+ (C16H14O7)； 1H-NMR (400 MHz,
DMSO-d6) δ: 6.85 (1H, s, H-4′), 6.73 (2H, s, H-2′, 6′),
6.08 (1H, d, J = 1.6 Hz, H-6), 5.92 (1H, s, H-8), 5.19
(1H, brs, 3-OH), 4.87 (1H, d, J = 10.8 Hz, H-2), 4.22
(1H, d, J = 10.8 Hz, H-3), 3.77 (3H, s, 5-OCH3)；
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13C-NMR (100 MHz, DMSO-d6) δ: 190.4 (C-4),
165.2 (C-7), 164.2 (C-9), 162.6 (C-5), 146.1 (C-3′),
145.4 (C-5′), 128.8 (C-1′), 119.8 (C-4′), 115.7 (C-2′),
115.6 (C-6′), 102.9 (C-10), 95.9 (C-8), 93.8 (C-6),
82.9 (C-2), 73.1 (C-3), 56.2 (5-OCH3)。以上数据与
文献报道一致[8]，故鉴定化合物 10 为 7,3′,5′-三羟
基-5-甲氧基黄酮醇。
化合物 11：黄色结晶（CH3OH），ESI-MS m/z:
303.7 [M＋H]+ (C15H10O7)；1H-NMR (400 MHz,
DMSO-d6) δ: 12.50 (1H, s, 5-OH), 10.70 (1H, s,
7-OH), 9.40 (3H, brs, 3, 3′, 5′-OH), 7.68 (1H, s, H-2′),
7.55 (1H, d, J = 7.2 Hz, H-6′), 6.90 (1H, d, J = 8.0 Hz,
H-5′), 6.41 (1H, s, H-8), 6.19 (1H, s, H-6)；13C-NMR
(100 MHz, DMSO-d6) δ: 176.3 (C-4), 164.4 (C-7),
161.2 (C-9), 156.6 (C-2), 148.2 (C-5), 147.3 (C-4′),
145.5 (C-3′), 136.2 (C-3), 122.4 (C-1′), 120.4 (C-6′),
116.1 (C-5′), 115.5 (C-2′), 103.5 (C-10), 98.7 (C-6),
93.8 (C-8)。以上数据与文献报道一致[15]，故鉴定化
合物 11为槲皮素。
化合物 12：黄色粉末，1H-NMR (400 MHz,
DMSO-d6) δ: 7.63 (1H, d, J = 8.4 Hz, H-5), 6.89 (1H,
s, H-6′), 6.75 (2H, m, H-2′, 5′), 6.52 (1H, d, J = 7.2
Hz, H-6), 6.29 (1H, s, H-8), 4.96 (1H, d, J = 11.2 Hz,
H-2), 4.40 (1H, d, J = 11.6 Hz, H-3)；13C-NMR (100
MHz, DMSO-d6) δ: 192.8 (C-4), 165.7 (C-7), 163.3
(C-9), 146.1 (C-3′), 145.4 (C-4′), 129.1 (C-1′), 128.9
(C-5), 119.8 (C-6′), 115.8 (C-2′), 115.6 (C-5′), 112.4
(C-10), 111.5 (C-6), 102.9 (C-8), 84.0 (C-2), 73.1
(C-3)。以上数据与文献报道一致[16]，故鉴定化合物
12为黄颜木素。
化合物 13：黄色粉末，1H-NMR (400 MHz,
DMSO-d6) δ: 7.93 (1H, d, J = 9.6 Hz, H-5), 7.70 (1H,
s, H-2′), 7.55 (1H, d, J = 8.4 Hz, H-6′), 6.90 (3H, brs,
H-2′, 5′, 6)；13C-NMR (100 MHz, DMSO-d6) δ: 172.4
(C-4), 162.8 (C-7), 156.8 (C-9), 147.7 (C-4′), 145.5
(C-3′), 137.6 (C-3), 126.9 (C-1′), 123.0 (C-5), 120.1
(C-6′), 116.0 (C-5′), 115.4 (C-2′), 115.2 (C-10), 114.6
(C-6), 102.3 (C-8)。以上数据与文献报道一致[16]，
故鉴定化合物 13为 fisetin。
化合物 14：黄色粉末，1H-NMR (400 MHz,
DMSO-d6) δ: 7.09 (1H, d, J = 8.4 Hz, H-5), 6.63
(1H, s, H-6), 6.30 (1H, d, J = 6.8 Hz, H-8), 6.09 (2H,
s, H-2′, 6′), 4.90 (1H, s, H-2), 4.73 (1H, s, H-3), 4.06
(1H, s, H-4)；13C-NMR (100 MHz, DMSO-d6) δ:
159.4 (C-7), 154.1 (C-9), 148.2 (C-5′), 145.7 (C-3′),
140.0 (C-4′), 133.2 (C-1′), 117.2 (C-5), 111.3 (C-2′,
6′), 108.7 (C-10), 103.3 (C-6), 102.5 (C-8), 71.6
(C-2), 70.0 (C-3), 62.7 (C-4)。以上数据与文献报道
一致[17]，故鉴定化合物 14为 leucorobinetinidin。
化合物 15：黄色粉末，1H-NMR (600 MHz,
DMSO-d6) δ: 7.83 (2H, d, J = 8.4 Hz, H-2′, 6′), 6.90
(2H, d, J = 8.4 Hz, H-3′, 5′), 6.53 (1H, d, J = 1.2 Hz,
H-3), 6.51 (1H, s, H-8), 6.37 (1H, d, J = 1.2 Hz,
H-6), 3.79 (3H, s, 5-OCH3)；13C-NMR (150 MHz,
DMSO-d6) δ: 175.6 (C-4), 162.3 (C-7), 160.6 (C-4′),
160.4 (C-2), 159.8 (C-5), 159.0 (C-9), 127.7 (C-2′,
6′), 121.5 (C-1′), 115.8 (C-3′, 5′), 107.1 (C-3), 105.9
(C-10), 96.5 (C-6), 95.2 (C-8), 55.8 (5-OCH3)。以上
数据与文献报道一致 [18]，故鉴定化合物 15 为
thevetiaflavon。
化合物 16：黄色粉末，1H-NMR (600 MHz,
DMSO-d6) δ: 13.56 (1H, s, 5-OH), 10.42 (1H, brs,
7-OH), 7.93 (2H, d, J = 8.4 Hz, H-2′, 6′), 6.93 (2H, d,
J = 8.4 Hz, H-3′, 5′), 6.78 (1H, s, H-3), 6.52 (1H, s,
H-8), 4.59 (1H, d, J = 5.6 Hz, H-1″)；13C-NMR
(DMSO-d6, 150 MHz) δ: 181.9 (C-4), 163.5 (C-7),
163.3 (C-2), 161.2 (C-4′), 160.6 (C-5), 156.2 (C-9),
128.4 (C-2′, 6′), 121.1 (C-1′), 116.0 (C-3′, 5′), 108.9
(C-6), 103.4 (C-10), 102.8 (C-3), 93.6 (C-8), 81.5
(C-5″), 78.9 (C-3″), 73.1 (C-1″), 70.6 (C-2″), 70.2
(C-4″), 61.5 (C-6″)。以上数据与文献报道一致[19]，
故鉴定化合物 16为异牡荆素。
4 细胞毒活性研究
采用SRB法测定细胞毒活性[20]。首先将MCF-7
细胞接种于 96 孔板中培养 24 h，然后同时加入不
同浓度的受试药物（溶解在含 0.3% DMSO的培养
基中）200 μL/孔，使其终质量浓度分别为 0.1
（C1）、1（C2）、10（C3）、25（C4）、50（C5）和
100 μmol/L（C6）。正常对照组加入等量含 0.3%
DMSO 的培养基（C0），同时设顺铂阳性对照组
（DDP），37 ℃，5% CO2培养箱中培养 48 h。细胞
在室温条件下经 SRB 溶液染色 15 min，然后加入
200 μL 的 Tris溶液，震摇至进入细胞的 SRB试剂
完全溶解后，用酶标仪在波长 540 nm 处测定各化
合物的吸光度（A）值，重复测定 3 次，计算相应
的抑制率和 IC50值，见表 1。
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 47卷 第 16期 2016年 8月

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表 1 化合物 7～16对MCF-7细胞活性的影响 ( x±s, n = 6)
Table 1 Effect of compounds 7—16 against MCF-7 cells ( x±s, n = 6)
化合物
抑制率/%
IC50/(μmol·L−1)
C1 C2 C3 C4 C5 C6
7 6.96 10.27 12.45 14.70 18.54 35.95 —
8 0.93 −1.61 16.29 52.46 69.09 76.90 28.53
9 1.84 0.65 3.27 2.23 7.61 18.29 —
10 0.85 0.56 1.40 1.79 2.44 7.78 —
11 11.19 12.46 16.27 23.19 47.86 48.47 —
12 0.19 −0.38 1.45 5.55 10.29 25.82 —
13 8.13 9.62 10.57 13.58 32.48 42.79 —
14 2.89 −1.13 1.41 2.53 4.26 6.95 —
15 9.01 6.43 12.21 6.02 11.08 11.33 —
16 6.14 3.91 11.85 10.28 23.25 24.78 —
DDP 1.79 17.76 63.07 73.16 79.29 83.52 7.23
从表 1可以看出，化合物 8对MCF-7细胞具
有较高的细胞毒活性，其 IC50值为 28.53 μmol/L。
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