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Study on processing technology of deep-fried Atractylodis Rhizoma

焦苍术炮制工艺研究



全 文 :中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46卷 第 4期 2015年 2月

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焦苍术炮制工艺研究
孙雄杰,蒋 濛,涂济源,陈琪瑶,刘苗苗,付 伟,刘艳菊*
湖北中医药大学,湖北 武汉 430065
摘 要:目的 优化苍术炒焦最佳炮制工艺。方法 采用 L9(34) 正交试验法,以苍术中鞣质质量分数和小鼠腹泻指数为考
察指标,通过多指标综合加权评分法,考察各因素(炒制温度、炒制时间、翻炒频率)对苍术炒焦工艺的影响。结果 苍术
炒焦最佳工艺为 220~230 ℃,翻炒频率 50次/min,炒制 6 min。结论 该炮制工艺稳定可行,可为焦苍术的质量研究奠定
基础。
关键词:苍术;炒焦;炮制工艺;正交试验;腹泻指数
中图分类号:R283.1 文献标志码:A 文章编号:0253 - 2670(2015)04 - 0526 - 04
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2015.04.012
Study on processing technology of deep-fried Atractylodis Rhizoma
SUN Xiong-jie, JIANG Meng, TU Ji-yuan, CHEN Qi-yao, LIU Miao-miao, FU Wei, LIU Yan-ju
Hubei University of Chinese Medicine, Wuhan 430065, China
Abstract: Objective To optimize the processing technology for deep-fried Atractylodis Rhizoma. Methods Taking the contents of
tannin and diarrheal index of mice as the indexes, the affecting factors (stir-frying temperature, stir-frying time, and turning frequency)
on the processing technology of deep-fried Atractylodis Rhizoma was investigated by L9(34) orthogonal test and multi-index
comprehensive weighted mark method. Results The best deep-fried technology was as following: the processing temperature
was 220—230 ℃, turning frequency was 50 times/min, and stir-frying time was 6 min. Conclusion The processing technology is
stable and feasible, and could lay the foundation for the research on the quality of deep-fried Atractylodis Rhizoma.
Key words: Atractylodis Rhizoma; deep-fried; processing technology; orthogonal tests; diarrheal index

苍术 Atractylodis Rhizoma是菊科(Compositae)
植物茅苍术 Atractylodes lancea (Thunb.) DC. 或北
苍术 A. chinensis (DC.) Koidz. 的干燥根茎。苍术始
载于《神农本草经》,列为上品,其性味辛、苦、温,
归脾、胃、肝经,具有燥湿健脾、祛风、散寒、明
目功能[1],为临床常用中药。苍术生品温燥而辛烈,
燥湿、祛风、散寒能力强;焦品辛燥之性大减,以
固肠止泻为主,主治脾虚泄泻[2]。
苍术炮制方法历史悠久,沿至近代主要有麸炒、
炒焦、米泔水制。全国各地的炮制规范除了个别地
区保留了土炒苍术、米泔水制之外,焦苍术、麸炒
苍术为常用饮片种类。而现代研究中苍术麸炒工艺
的研究颇多,鲜有苍术炒焦炮制工艺的报道。因腹
泻指数能直接反映苍术固肠止泻的药理作用,且鞣
质具有收敛作用[2],是止泻的主要成分之一。因此
本实验将腹泻指数和鞣质质量分数作为评价指标,
运用正交试验法对苍术的传统炒焦方法进行优选,
获取最佳工艺参数,以期得到更为科学的苍术炒焦
工艺,为指导生产提供科学依据。
1 仪器与材料
UV-1800型紫外-可见分光光度计,日本岛津;
SK7200HP 超声清洗器,上海科导超声仪器有限公
司;KDM 型调温电热套,山东邺城水电仪器厂;
万分之一电子天平,赛多利斯科学仪器北京有限公
司;HXICC2Z电子天平,慈溪市天东衡器厂;电子
万用炉,北京市水光医疗仪器厂;Q-250A3高速多
功能粉碎机,上海冰都电器有限公司;ST30便携式
红外非接触测温仪,上海自动化仪器三厂。

收稿日期:2014-09-15
基金项目:国家自然科学基金资助项目(81073051);国家“十五”重大科技专项(2001BA701A55-23)
作者简介:孙雄杰(1990—),女,在读硕士研究生,研究方向为中药炮制。Tel: 15071055681 E-mail: 120143484@qq.com
*通信作者 刘艳菊,女,博士,教授,博士生导师,主要从事中药炮制研究。Tel: 18971537161 E-mail: lyj1965954@sohu.com
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46卷 第 4期 2015年 2月

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没食子酸对照品,中国食品药物检定研究院,
批号 0831-9501,质量分数>98%;参苓白术散,沈
阳红药制药股份有限公司,批号 1020534;氯化钠
注射液,武汉滨湖双鹤药业有限责任公司,分析纯,
批号 110412912;水为双蒸水,其他试剂均为分析
纯。磷钼钨酸试液按《中国药典》2010年版附录中
的方法配制[1]。
生品苍术购自刘天保药业股份有限公司,产地
河南桐柏,经湖北中医药大学张秀桥教授鉴定为菊
科苍术属植物茅苍术 Atractylodes lancea (Thunb.)
DC. 的干燥根茎。生大黄饮片购自湖北天济中药饮
片有限公司,经湖北中医药大学张秀桥教授鉴定为
蓼科植物掌叶大黄 Rheum palmatum L. 的干燥根和
根茎。
SD小鼠 120只,体质量 18~22 g,雌雄各半,
由华中科技大学同济医学院提供,许可证号 SCXK
(鄂)2008-0005。
2 方法与结果
2.1 正交试验设计及样品制备
以苍术炒焦的传统炮制工艺为参照,选用直接
影响工艺的炒制温度(A)、炒制时间(B)、翻炒频
率(C)为考察因素。通过预试验各设计 3个水平,
因素水平见表 1。
按 L9(34) 正交表安排试验制备样品。称取每份
苍术饮片 150 g,按表 1条件炒制,分别采用红外非
接触测温仪、节拍器和秒表依次控制炒制温度、翻
炒频率和炒制时间,放凉后置密闭容器内备用。
2.2 腹泻指数的测定[3]
2.2.1 药液制备 苍术生品及焦品煎液:取适量苍
术,水煎煮 2次(第 1次 8倍量水,第 2次 6倍量

表 1 L9(34) 正交试验设计与结果
Table 1 Design and results of L9(34) orthogonal test
试验号 A/℃ B/min C/(次·min−1) D (空白) 腹泻指数 鞣质/% 综合评分
1 180~190 (1) 4 (1) 40 (1) (1) 0.737 0.008 99.642
2 180~190 (1) 5 (2) 50 (2) (2) 0.685 0.013 99.675
3 180~190 (1) 6 (3) 60 (3) (3) 0.259 0.012 99.931
4 200~210 (2) 4 (1) 50 (2) (3) 0.865 0.011 99.567
5 200~210 (2) 5 (2) 60 (3) (1) 0.807 0.009 99.601
6 200~210 (2) 6 (3) 40 (1) (2) 0.752 0.010 99.634
7 220~230 (3) 4 (1) 60 (3) (2) 0.373 0.006 99.860
8 220~230 (3) 5 (2) 40 (1) (3) 0.479 0.014 99.799
9 220~230 (3) 6 (3) 50 (2) (1) 0.156 0.031 100.000
K1 99.749 99.690 99.692 99.748
K2 99.601 99.692 99.747 99.723
K3 99.886 99.885 99.797 99.766
R 0.285 0.165 0.105 0.043

水),每次 30 min,脱脂棉滤过,合并滤液浓缩至
含生药 0.8 g/mL。生大黄煎液[4]:取适量生大黄加 3
倍量的冷水,浸泡 20 min,加热煎煮 15 min,趁热
滤过,滤液浓缩至含生药 2 g/mL。参苓白术散:用
双蒸水配制成 0.4 g/mL药液。将上述药液置于 4 ℃
冰箱保存,使用时水浴加热至 25 ℃。
2.2.2 实验方法 将 120只小鼠随机分 12组,分别
为空白对照组、阳性对照组、生品组和 9种工艺炮
制的焦品组。小鼠饲养 3 d后,禁食不禁水 18 h,
空白组 ig 等容量生理盐水;阳性对照组 ig 参苓白
术散 0.2 mL/只;生品组和焦品组 ig 相应药物 0.2
mL/只。给药 30 min后以大黄液 ig 0.3 mL/只。用烧
杯将小鼠扣于代谢笼内,代谢笼下方放置中速定性
滤纸。30 min后开始计时,连续观察 5 h,每小时
换 1次滤纸,观察给药后大便情况和各组小鼠腹泻
情况,结果见表 2。与空白对照组比较,阳性对照
组、生品组和各焦品组(除 4号工艺外)均具有显
著性差异(P<0.05、0.01),说明以上给药组具有
健脾止泻作用。与生品组比较,3、7、8、9号焦品
组具有非常显著性的差异(P<0.01),说明以上 4
焦品组的止泻作用强于生品,且 3号和 9号焦品组
强于阳性对照组。
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46卷 第 4期 2015年 2月

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表 2 苍术 (生、焦品) 对小鼠腹泻影响的对比结果 ( x ±s,
n = 10)
Table 2 Comparison on effect of Atractylodis Rhizoma
(between raw and deep-fried products) on diarrhea in mice
( x ±s, n = 10)
组别 剂量/(g·kg−1) 腹泻指数
空白对照 — 0.940±0.054
阳性对照 4 0.335±0.100**
苍术生品 8 0.811±0.111*
苍术焦品 1 8 0.737±0.046**
苍术焦品 2 8 0.685±0.117**
苍术焦品 3 8 0.259±0.054**##
苍术焦品 4 8 0.865±0.098
苍术焦品 5 8 0.807±0.085*
苍术焦品 6 8 0.752±0.077**
苍术焦品 7 8 0.373±0.109**##
苍术焦品 8 8 0.479±0.062**##
苍术焦品 9 8 0.156±0.042**##
与空白对照组比较:*P<0.05 **P<0.01;与生品组比较:##P<0.01
*P < 0.05 **P < 0.01 vs control group; ##P < 0.01 vs raw product group

2.3 鞣质定量测定
2.3.1 测定波长及时间的选择 对照品溶液及供试
品溶液在 200~800 nm内全波长扫描,结果显示在
760 nm处有最大吸收,所以选择在此处测定。对照
品溶液及供试品溶液显色后,于 760 nm 处每隔 2
分钟测定 1次吸光度(A)值。结果表明,鞣质的 A
值在 10~30 min内较稳定。
2.3.2 干酪素用量的选择 根据《中国药典》2010
年版,选用 0.6 g的干酪素可吸附完全。
2.3.3 对照品溶液制备 精密称取没食子酸对照品
12.5 mg,置 25 mL棕色容量瓶中,加水溶解并稀释
至刻度,摇匀。精密量取对照品溶液 10 mL,置 100
mL棕色量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,即得(含
没食子酸 0.05 mg/mL)。
2.3.4 供试品溶液制备 取饮片粉末(50目)0.5 g,
精密称定,置 250 mL棕色量瓶中,加水 50 mL,
放置过夜,超声处理 10 min,放冷,用水稀释至刻
度,摇匀,静置(使固体物沉淀),滤过,弃去初滤
液 50 mL,精密量取续滤液 20 mL,置 100 mL棕色
量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀,即得。
2.3.5 标准曲线的制备 精密量取对照品溶液 0.5、
1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mL分别置 25 mL棕色量瓶
中,各加入磷钼钨酸试液 1 mL,再分别加水 11.5、
11、10、9、8、7 mL,用 29%碳酸钠溶液稀释至刻
度,摇匀,放置 10 min。以相应的试剂为空白,在
760 nm的波长处测定 A值,以 A值为纵坐标(Y),
没食子酸的量为横坐标(X),绘制标准曲线,得回
归方程为 Y=101.42 X+0.06,r=0.998 8,表明没
食子酸在 25.0~250.0 μg呈良好的线性关系。
2.3.6 精密度试验 取对照品溶液,连续测定 6次,
A值的 RSD为 0.35%,结果表明本方法精密度良好。
2.3.7 稳定性试验 取对照品溶液,按“2.3.5”项
下方法,自用 29%碳酸钠溶液稀释至刻度开始,每
2分钟测定 1次,共测定 10次,表明没食子酸对照
品显色后溶液在 30 min 内 A 值稳定,其 RSD 为
0.64%。
2.3.8 重复性试验 取 7号工艺炒制的焦苍术饮片
粉末,依法处理样品 6份,按“2.3.10”和“2.3.11”
项下方法测定总酚与不被吸附酚,并计算供试品中
鞣质的量,表明样品中鞣质平均质量分数为
0.616%,RSD为 0.96%。
2.3.9 加样回收率试验 取 7号工艺炒制的焦苍术
饮片粉末 0.5 g,共 6份,精密称定,每 2份为 1组,
各组分别加入没食子酸对照品溶液(0.5 mg/mL)6、
6.5、7 mL,依法测定,并计算鞣质的平均回收率为
98.86%,RSD为 0.20%。
2.3.10 总酚的测定 精密量取供试品溶液 2 mL,
置 25 mL棕色量瓶中,照“2.3.5”项下方法,自“加
入磷钼钨酸试液 1 mL”起加水 10 mL,依法测定 A
值,从标准曲线中读出供试品溶液中没食子酸的量,
计算,即得。
2.3.11 不被吸附的多酚测定 精密量取供试品溶
液 25 mL,加置已盛有干酪素 0.6 g的 100 mL具塞
锥形瓶中,密塞,置 30 ℃水浴中保温 1 h,时时振
摇,取出放冷,摇匀,滤过,弃去初滤液,精密量
取续滤液 2 mL,置 25 mL棕色瓶中,按照“2.3.5”
项下方法,自“加入磷钼钨酸试液 1 mL”起,加水
10 mL,依法测定 A值,从标准曲线读出供试品溶
液中没食子酸的量,计算,即得。
按下式计算鞣质的量。
鞣质的量=总酚量-不被吸附的多酚量
2.4 加权法综合评价苍术炒焦工艺
采用加权综合评分法考察苍术炒焦最佳工艺,
因腹泻指数能直接反映苍术的药理作用,即药物的
临床疗效,它是炮制目的具体体现;鞣质具有收敛
止泻作用,其量高低与药效呈正相关,是固肠止泻
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 46卷 第 4期 2015年 2月

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的主要成分之一[2,5],故 2个指标分别按 0.6、0.4的
系数计分,评分标准[6-7]:综合评分=(100+腹泻指
数最小值-腹泻指数)×0.6+(100-鞣质质量分数
最大值+鞣质质量分数)×0.4,加权评分结果及方
差分析见表 1、3。
表 3 方差分析表
Table 3 Analysis of variance
方差来源 离均差平方和 自由度 F值 显著性
A 0.122 2 44.490 P<0.05
B 0.054 2 19.622 P<0.05
C 0.017 2 6.090
D (误差) 0.003 2
F0.05(2, 2) = 19.00 F0.01(2, 2) = 99.00

以焦苍术的腹泻指数和鞣质质量分数综合指标
考察,对其炒焦炮制工艺进行优选,由表 1可见,
各因素对炮制品主要药理作用的影响程度主次为
A>B>C;方差分析结果表明,A(炒制温度)和
B(炒制时间)因素的影响差异具有显著性(P<
0.05),而 C(翻炒频率)差异无显著性。以 A3B3C2
组合为最佳,即 150 g苍术,温度 220~230 ℃时投
药,炒制 6 min,翻炒频率 50次/min。
2.5 苍术炒焦最佳工艺的验证试验
按苍术炒焦最佳工艺参数进行 3次平行试验,
分别测定各项指标,结果见表 4,结果显示各批次
鞣质量均较高,腹泻指数均较低,组间无显著性差
异,说明该工艺稳定可行,重现性良好。
收得率=炮制后饮片质量/炮制前饮片质量
表 4 最佳炒焦工艺验证结果
Table 4 Varification of best deep-fried technology
批次 收得率/% 腹泻指数 鞣质/% 综合评分
1 72 0.152 0.029 99.998
2 72 0.149 0.025 99.998
3 73 0.153 0.026 99.996

3 讨论
中药炮制的作用机制复杂,炮制工艺对中药临
床疗效有直接影响,因此选择了能直观反映焦苍术
临床疗效的腹泻指数和其主要有效成分鞣质作为指
标。通过设定多指标研究焦苍术的炮制工艺,确定
临床疗效最佳的工艺参数,为进一步探讨焦苍术炮
制机制奠定基础。
3.1 药物剂量选择
在测定苍术的腹泻指数时,以大黄为致泻药,
以参苓白术散为阳性药,按剂量换算苍术高、中、
低剂量进行预试验,结果中、低剂量无显著性差异,
所以最终只采用了高剂量即 0.8 g/mL进行实验。
3.2 鞣质定量测定条件选择
鞣质又称单宁,是存在于植物体内的一类结构
较复杂的多酚类化合物。通常根据其结构特征可分
为 2 大类即可水解鞣质和缩合鞣质[8],其定量测定
方法有皮粉法[9]、干酪素法、络合滴定法等。本实
验参照《中国药典》2010年版一部附录 X B鞣质定
量测定方法,对焦苍术中鞣质的量进行测定。在测
定鞣质量时[10],所使用的鞣质吸附剂——干酪素含
有干扰试验的物质,会明显影响“不被吸附的多酚”
的定量测定。而《中国药典》2010年版规定方法中,
未明确表示要进行干酪素空白对照试验,未扣除干
酪素空白吸收值,故样品鞣质测定量明显偏低,不
能准确反映鞣质的实际量。所以,在本实验测定“不
被吸附的多酚”的 A值时,制备等量的干酪素空白
溶液作空白试剂,去除了干酪素的影响,从而使结
果更为准确,更能真实反映供试品中鞣质的量。
参考文献
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