全 文 ：中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 44 卷 第 15 期 2013 年 8 月

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不同品种川贝母对小鼠复发性哮喘的疗效比较
杨仕军，祖承哲，赵 欣，黄林芳，蔡大勇，陈士林*
中国医学科学院药用植物研究所，北京 100193
摘 要：目的 比较 5 个基源 6 个品种川贝母防治小鼠复发性哮喘的疗效。方法 81 只雌性昆明小鼠按体质量均衡随机分
为 9 组：模型组、对照组、地塞米松阳性对照组、6 个品种川贝母醇提物给药组。除对照组外，其他各组小鼠于第 1、7、14
天 sc 卵白蛋白佐剂致敏，第 22～28 天以卵白蛋白生理盐水溶液雾化发敏。在造模同时，地塞米松组每天给药 1 次，每次
0.6 mg/kg；川贝母醇提物每天给药 1 次，每次生药 830 mg/kg 均连续给药 28 d，对照组给药同量 0.1%羧甲基纤维素。检测
肺泡灌洗液表面张力；HE 染色法镜下观察肺组织病理变化，形态计量细支气管狭窄和肺泡体积差。结果 与对照组比较，
模型组小鼠气管狭窄，肺泡体积差与肺洗液表面张力增加（P＜0.01）；细支气管管壁充血、水肿、炎细胞浸润，腺体增生，
黏液分泌亢进。川贝母各组小鼠病变减轻（P＜0.01）；在增加肺表面活性物质、维持肺表面张力与肺泡体积差异上，暗紫贝
母（松贝）和梭砂贝母作用突出；在减轻细支气管狭窄上，暗紫贝母（松贝）和太白贝母作用突出；减少炎性细胞浸润上，
暗紫贝母（松贝）和甘肃贝母作用突出；在减轻腺体增生、内膜增厚上，暗紫贝母（松贝）和太白贝母作用突出。总体效果
以暗紫贝母（松贝）最好。结论 6 种川贝母在防治小鼠复发哮喘总体效果和作用环节上各有特色，应保护药用川贝母的品
种多样性。
关键词：川贝母；药材品种；复发性哮喘；疗效比较；品种保护
中图分类号：R282.710.5；R974.3 文献标志码：A 文章编号：0253-2670(2013)15 - 2124 - 06
DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2013.15.018
Curative effect comparison of Fritillariae Cirrhosae Bulbus in different species
on recurrent asthma in mice
YANG Shi-jun, ZU Cheng-zhe, ZHAO Xin, HUANG Lin-fang, CAI Da-yong, CHEN Shi-lin
Institute of Medicinal Plant Development, Chinese Academy of Medical Sciences, Peking Union Medical College, Beijing 100193,
China
Abstract: Objective To compare the curative effect of Fritillariae Cirrhosae Bulbus (FCB) in six species from five origins on
recurrent asthma in mice. Methods Eighty one female Kunming mice were randomly divided into nine groups with equal weights,
such as model, control, Dexamethasone (DEX, positive control), and six FCB groups. The mice in the model, DEX, and FCB groups
were sc injected with ovalbumin (OVA) on days 1, 7, and 14, then challenged with the aerosols of normal saline contained OVA on
days 22－28. The mice in DEX and FCB groups were ig administered with DEX (0.6 mg/kg) and FCB (830 mg/kg) respectively for
28 d, and the mice in the control group were given 0.1% carboxymethyl cellulose. The surface tension of bronchoalveolar lavage was
measured, the lung tissues were taken for hematoxylin-eosin (HE) staining, and the tracheal stenosis and volume difference of
pulmonary alveolus were analyzed by the microphotograph. Results Compared with the control group, the tracheal stenosis, surface
tension, and volume difference of pulmonary alveolus were increased obviously in the model group (P < 0.01). The pathological
section revealed vessel wall thickening in bronchiole, inflammatory cell infiltrating, gland hyperplasia, and mucus hypersecretion, but
FCB could reverse these pathological changes (P < 0.01). Each FCB had its feature to cure asthma. F. unibracteata and F. delavayi had
the most potency on increasing alveolar surfactant; F. unibracteata and F. taipaiensis had the most potency on attenuating tracheal
stenosis; F. unibracteata and F. przewalskii had the most potency on relieving the inflammation; F. unibracteata and F. taipaiensis had
the most potency on reducing glandular hyperplasia or intimal thickening. Each FCB had its feature to cure asthma, but F. unibracteata
was the best. Conclusion FCB has the best potency to prevent and cure the recurrent asthma in mice, but each FCB has its feature.

收稿日期：2012-09-24
基金项目：国家自然科学基金资助项目（81130069，81274013）
作者简介：杨仕军，主要研究方向为中药药理学。Tel: (010)57833465 E-mail: chn1111@163.com
*通信作者 陈士林 Tel: (010)57833011 E-mail: slchen@implad.ac.cn
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The diversity of FCB species should be protected.
Key words: Fritillariae Cirrhosae Bulbus; medicinal material species; recurrent asthma; curative effect comparison; variety protection
哮喘是发病率和死亡率呈逐年上升趋势的常
见病 [1-2]。川贝母 Fritillariae Cirrhosae Bulbus
（FCB）是防治复发性哮喘的首选中药，具有润肺、
止咳、平喘等功效，临床疗效肯定，药理作用明
确[3-6]。野生川贝母由于资源匮乏致使价格昂贵。
陈士林等[7-10]对川贝母资源、化学成分做了大量
研究。本实验建立哮喘小鼠模型，ig 给予 6 种川
贝母醇提物，形态计量对复发性哮喘的药效环节，
比较川贝母各品种的相对疗效，为发挥川贝母防
治哮喘的品种特色，保护其品种的多样性提供实
验依据。
1 材料
1.1 药材与试剂
地塞米松片（批号 111045），浙江仙琚制药股
份有限公司；卵白蛋白（25 g/瓶）、弗氏不完全佐
剂（10 mL/支），Sigma 公司；0.1%羧甲基纤维素
（CMC），天津市恒兴化学试剂制造有限公司；参照
《中国药典》2010 年版中川贝母采集制作标准[11]，
暗紫贝母 Fritillaria unibracteata Hsiao et K. C. Hsia
（松贝，产地四川松潘；青贝，产地四川甘孜）、甘
肃贝母 F. przewalskii Maxim.（产地甘肃岷县）、梭
砂贝母 F. delavayi Franch.（产地四川康定）、太白贝
母 F. taipaiensis P. Y. Li（产地重庆巫溪县）、卷叶贝
母 F. cirrhosa D. Don（产地四川九龙），以上药材由
中国医学科学院药用植物研究所林余霖研究员和黄
林芳副研究员鉴定为正品。
1.2 动物
雌性昆明种小鼠，体质量（21.3±1.7）g，购自
北京维通利华公司，合格证号：SCXK（京）
2012-0029。
1.3 仪器
AL104 性电子分析天平，梅特勒公司；SMB—
1 型雾化仪，日本樱花公司；自制雾化箱（26 cm×
18 cm×35 cm，四周密封，顶部留一 0.50 cm2 圆形
缺口，连接雾化仪气管，底部为网格使卵白蛋白雾
液均匀排出）；FD-NST—B 型液体表面张力系数测
量实验仪，上海复旦天欣科教有限公司；EG1150
石蜡包埋机、RM2245 石蜡切片机，莱卡公司；Bx53
显微镜，日本 Olympus 公司；IPP 图像分析软件, 苏
州易微光学有限公司。
2 方法
2.1 醇提物制备
药材在 45 ℃下干燥 24 h，称质量，粉碎过 200
目筛，以等量纯水浸泡 12 h，再以 10 倍原药材质量
的预热 60%乙醇回流提取，收集热醇回流液，回收
乙醇，最后以蒸馏水定容，使最终质量浓度为生药
2.0 g/mL。依据《中国药典》2010 年版中川贝母用
药剂量为 3～9 g，按成人体质量 70 kg、服用川贝母
饮片 3 g 或 9 g 计，根据小鼠与人的等效剂量换算系
数为 11.2，计算得小鼠给药剂量为 0.48 g/kg 或 1.44
g/kg，两数据的几何平均数为（0.48×1.44）1/2＝0.83
g/kg，因此确定给药剂量为 0.83 g/kg。
2.2 模型制备、分组与给药
小鼠适应性饲养 3 d，禁食 12 h，称体质量，按
体质量均衡随机分为 9 组，分别为模型组、对照组、
地塞米松阳性对照组、6 个品种川贝母醇提物给药
组。除对照组外，其他各组小鼠以卵白蛋白（用 0.8
mg/mL 生理盐水与等体积弗氏不完全佐剂于研钵
捻匀得卵白蛋白佐剂）制备小鼠哮喘模型[12-13]。在
造模同时，每天 ig 给药，连续给药 28 d。具体操作
如下。
对照组小鼠每周称体质量 1 次，观察生长曲线，
调节 ig 给药体积。在造模开始第 1、7、14 天，每
日 1 次沿腹股沟多点 sc 弗氏不完全佐剂 0.1 mL，作
为抗原致敏对照；于造模第 22～28 天，每天 16:00～
17:00 雾化吸入生理盐水 1 次，每次 15 min，作为
发敏抗原对照；于造模第 1～28 天，每天 8:00～9:00
ig 给予 0.1% CMC 10.0 mL/kg，作为给药对照。雾
化吸入发敏期间，观察哮喘症状。给药结束后（第
29 天），小鼠 sc 水合氯醛麻醉，腹主动脉放血处死，
取肺称质量。
模型组小鼠在造模开始第 1、7、14 天，每天 1
次沿腹股沟多点 sc 含卵白蛋白 40 μg 的弗氏不完全
佐剂 0.1 mL，抗原致敏；于第 22～28 天，每天雾
化吸入 1% 卵白蛋白生理盐水溶液 1 次，每次 15
min，抗原发敏。其余处理同对照组。
地塞米松片组小鼠造模方法同模型组。以 0.1%
CMC 制备地塞米松片 0.06 mg/mL 悬液，于造模第
1～28 天，每天 ig 给药 10 mL/kg 1 次，其余处理同
模型组。
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川贝母各给药组小鼠造模方法同模型组。各品
种川贝母醇提物以 0.1% CMC 稀释至 83 mg/mL，
于造模第 1～28 天，每天 ig 10 mL/kg 1 次，其余处
理同模型组。
2.3 指标观察
2.3.1 体质量和肺脏指数 取肺组织前禁食 12 h，
称体质量。小鼠麻醉，肺脏灌洗完成后完全剥离肺
组织，生理盐水冲洗残留血液，滤纸稍吸干，称质
量，计算肺指数（肺指数＝肺质量/小鼠体质量）。
2.3.2 肺泡灌洗液表面张力 从颈部分离、暴露气
管做横切口，插入改良的 18 G 气管插管针，用 1 mL
注射器分 3 次、共吸取 3 mL（37 ℃）生理盐水灌
洗肺泡的灌洗液，确保回收率在 80%以上。立即以
1 500 r/min 离心 10 min，取上清液 2 mL 置于 32.48
cm2 圆形平皿，以液体表面张力系数测量实验仪测
量肺泡灌洗液表面张力，测量 5 次，取平均数值。
控制实验条件：温度为（25±0.2）℃，相对湿度为
（40±5）%；风速为 0～0.2 m/s。
2.3.3 肺组织形态学 取小鼠右肺中叶，中性福尔
马林固定 48 h，修块，同步脱水、浸蜡、石蜡包埋，
3 μm 切片，HE 染色，显微镜下观察（×400）肺组
织形态学改变。
2.3.4 细支气管与肺泡形态计量 HE 染色肺组织
镜下拍照（×200），随机选取 5 个细支气管或 10 个
肺泡，用 Ipp 软件分别形态计量细支气管的外管腔面
积（S1）、内管腔面积（S2）、阻塞面积（S3）和肺泡
面积（S4），计算管腔狭窄率（S）和肺泡体积（V）。
S＝ (S1－S2＋S3) / S1
V＝S3/2
以 5 个细支气管 S 平均值表示小鼠细支气管管
腔狭窄程度，以 10 个肺泡的体积方差表示肺泡体积
差异。
2.4 统计学分析
原始数据以 ±x s 表示，组间差别比较采用 t 检
验。效能数据：分别以对照组（MC）与模型组（MM）
的原始数据平均数，对各组数据（Xi）进行效能转
化（XP），即 XP＝(Xi－MC) / (MM－MC)，则对照组
与模型组的效能均值分别为 0 与 1.0，效能数据以矩
形图表示，组间差别比较采用 t 检验。
3 结果
3.1 对哮喘小鼠体质量和肺脏器指数的影响
模型组与对照组小鼠体质量无显著差异。与模
型组相比，地塞米松组小鼠体质量显著降低（P＜
0.01）；与对照组和模型组相比，6 个品种川贝母醇
提物组小鼠体质量明显降低（P＜0.01）。各组小鼠
肺脏器指数无显著差异。结果见表 1。
3.2 对哮喘小鼠肺泡灌洗液表面张力的影响
与对照组相比，模型组小鼠肺泡灌洗液表面张力明
显增加（P＜0.01）。用川贝母醇提物干预后，小
鼠肺泡灌洗液表面张力不同程度地下降（P＜0.05、
0.01），以暗紫贝母作用最强，且作用强度与地塞米
松相当。结果见表 1。
3.3 对哮喘小鼠肺组织形态学的影响
对照组小鼠支气管黏膜内皮完整，外膜层次清
表 1 各品种川贝母醇提物对哮喘小鼠体质量、肺脏器指数、肺泡及细支气管病变的影响 ( ± = 9x s , n )
Table 1 Effects of extracts in each FCB species on weight, pulmonary indexes, and pathological changes of bronchiole
and pulmonary alveolus in mice with asthma ( ± = 9x s , n )
组 别 剂量 / (g·kg−1) 体质量 / g 肺脏器指数 / % 表面张力 / g 细支气管管腔狭窄率 肺泡体积差异 / 像素
对照 － 31.27±2.97 2.18±0.33 0.81±0.07 0.40±0.05 661.4±108.1
模型 － 32.22±2.22 1.77±0.35 1.36±0.11aa 0.61±0.07aa 4 340.7±792.0aa
暗紫贝母（松贝） 0.83 31.61±3.69cc 2.22±0.37 0.96±0.15aabb 0.47±0.03aabb 1 548.2±844.0aabb
暗紫贝母（青贝） 0.83 32.18±3.01cc 2.12±0.38 1.10±0.14aabbcd 0.51±0.06aabbccd 1 860.0±695.4aabbc
甘肃贝母 0.83 30.51±3.10cc 2.09±0.46 1.10±0.18aabbc 0.52±0.06aabbccdd 2 572.2±1 196.2aabbc
梭砂贝母 0.83 33.19±3.42cc 2.36±0.44 1.02±0.17aabb 0.53±0.06aabbccdd 1 610.9±479.3aabb
太白贝母 0.83 30.79±3.47cc 2.20±0.32 1.03±0.13aabb 0.51±0.04aabbccdd 1 788.0±675.0aabb
卷叶贝母 0.83 32.47±2.30cc 1.75±0.32 1.11±0.19aabbc 0.58±0.02aabbccddeefggh 2 809.3±1 125.7aabbc
地塞米松 0.000 6 24.94±3.89aabb 1.88±0.48 0.93±0.16abb 0.45±0.04aabb 995.0±283.9abb
与对照组比较：aP＜0.05 aaP＜0.01；与模型组比较：bbP＜0.01；与地塞米松组比较：cP＜0.05 ccP＜0.01；与松贝组比较：dP＜0.05
ddP＜0.01；与青贝组比较：eeP＜0.01；与甘肃贝母组比较：fP＜0.05；与梭砂贝母组比较：ggP＜0.01；与太白贝母组比较：hP＜0.05，图 2 同
aP < 0.05 aaP＜0.01 vs control group; bbP < 0.01 vs model group; cP < 0.05 ccP < 0.01 vs DEX group; dP < 0.05 ddP < 0.01 vs Songbei group;
eeP < 0.01 vs Qingbei group; fP < 0.05 vs F. przewalskii group; ggP < 0.01 vs F. delavayi group; hP < 0.05 vs F. taipaiensis group, same as Fig. 2
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楚无炎症反应，管腔无分泌物。模型组小鼠支气管
黏膜层变厚，管腔狭窄，腔内存在渗出物和脱落上
皮，黏膜层充血、水肿和大量炎细胞浸润，腺体增
生肥大，黏液化。地塞米松组小鼠支气管管壁结构
较完整，黏膜病变减轻，接近对照组，但支气管与
血管周围轻度炎细胞浸润，水肿较为明显。川贝母
醇提物各组小鼠支气管黏膜病变好转，水肿减轻，
炎细胞浸润减少。在减少炎性细胞浸润方面，暗紫
贝母（松贝）和甘肃贝母效果最佳；在减轻腺体增
生、内膜增厚方面，暗紫贝母（松贝）和太白贝母
具疗效最好。结果见图 1。
3.4 对细支气管病变与肺泡形态计量的影响
与对照组相比，模型组小鼠细支气管狭窄，肺
泡体积差明显增加（P＜0.01），川贝母醇提物各组
小鼠病变减轻（P＜0.01），暗紫贝母（松贝）疗效
最好，效能接近地塞米松。结果见表 1 和图 2。
3 讨论
哮喘反复发作会导致支气管重构病变，如充血、


图 1 贝母对哮喘小鼠细支气管与肺泡病变影响的显微镜观察
Fig. 1 Microscope observation on effect of FCB on pathological changes of bronchiole and pulmonary alveolus in mice with asthma

图 2 贝母降低肺泡灌洗液表面张力的相对效能
Fig. 2 Relative potency of FBC on decreasing surface tension of pulmonary alveolus

1.40
1.20
1.00
0.80
0.60
0.40
0.20
0
表面张力 管腔狭窄 肺泡体积差
相
对
效
能

从左至右依次为：
对照
模型
地塞米松
暗紫贝母（松贝）
暗紫贝母（青贝）
甘肃贝母
梭砂贝母
太白贝母
卷叶贝母
aa

ab
b
aa
bb
ab
bb
cd

ab
bb
c
ab
bb
ab
bb
c
ab
bb

aa

aa
bb

aa
bb
a
ab
bc
cd

aa
bb
cc
dd

aa
bb
cc
dd

aa
bb
cc
dd

ab
bb
cc
dd
ee
fg
gh

aa

ab
b
aa
bb

aa
bb
c
aa
bb
c
aa
bb

aa
bb

aa
bb
c





对照 模型 地塞米松
暗紫贝母（松贝） 暗紫贝母（青贝） 甘肃贝母
梭砂贝母 太白贝母 卷叶贝母
-平滑肌 -内分泌物
-smooth muscle - -secretion
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水肿、炎细胞浸润、腺体增生、黏液分泌与胶原沉
积等[14]。卵白蛋白致复发性哮喘小鼠模型的发病机
制明确，阶段性分明，病变环节清楚，全程给药可
同时分析药效与药理[15]。本实验以治疗复发性哮喘
临床首选药物地塞米松[16]作为阳性对照，连续 ig
给予川贝母醇提物 28 d，观察肺泡灌洗液表面张力、
形态计量细支气管管腔狭窄与肺泡体积差，分析川
贝母各品种药效与作用环节的差别。
肺泡灌洗液表面张力的大小表示了肺泡表面活性物
质的多少。在本实验中，对照组小鼠肺泡灌洗液表
面活性物质丰富；模型组小鼠哮喘病变明显，肺
泡 II 型上皮减少，表面活性物质降低明显，肺泡灌
洗液表面张力较对照组增加 67.9%；地塞米松组该
张力比模型组降低 31.6%；而川贝母醇提物各组小
鼠该项指标比模型组缓解，作用强度依次为松贝暗
紫贝母＞梭砂贝母＞太白贝母＞青贝暗紫贝母＞甘
肃贝母＞卷叶贝母。细支气管狭窄表示肺细支气管
气流阻力增加。在本实验中，对照组小鼠细支气管
通畅，气流阻力低；模型组小鼠细支气管显著狭窄，
管腔内通气面积较对照组明显降低；地塞米松组小
鼠细支气管狭窄程度比模型组降低 26.2%；川贝母
醇提物各组的狭窄程度低于模型组，作用强度依次
为松贝暗紫贝母＞太白贝母＞青贝暗紫贝母＞梭砂
贝母＞甘肃贝母＞卷叶贝母。肺泡体积差表示局部
通气量与肺泡组织的顺应性，主要与肺泡 II 型上皮
细胞分泌表面活性物质有关。在本实验中，对照组
小鼠肺泡体积差异小，提示 II 型上皮细胞活性与功
能正常；模型组组小鼠肺泡体积差明显增加，为对
照组的 6.56 倍；地塞米松组则较模型组降低 77.1%；
川贝母醇提物各组则显著降低，作用强度依次为松
贝暗紫贝母＞梭砂贝母＞太白贝母＞青贝暗紫贝
母＞甘肃贝母＞卷叶贝母。结果还表明，在减少炎
性细胞浸润方面，暗紫贝母（松贝）和甘肃贝母作
用突出；在减轻内膜增厚与腺体增生方面，暗紫贝
母（松贝）和太白贝母作用突出，暗紫贝母（松贝）
抗哮喘的效果明显优于暗紫贝母（青贝），这与传统
观点一致。因此暗紫贝母防治小鼠复发哮喘疗效最
好；《中国药典》2010 年版新增品种太白贝母抗小
鼠哮喘药效最佳；在保护肺泡表面活性物质与细支
气管狭窄上，2 药材均优于市场主流品种卷叶贝母。
哮喘是 I型变态反应性炎症，抗原1次攻击致敏，
再次攻击诱发肥大细胞脱颗粒，引发充血、水肿与
炎细胞渗出，诱发嗜酸性粒细胞浸润，出现气道高
阻力。哮喘反复发作，使支气管平滑肌增厚、腺体
增生、黏液分泌亢进、胶原纤维沉积，形成细支气
管重构，临床表现为气流阻力的增加和高反应性[17]。
贝母有良好的抗炎作用，可降低 I 型变态反应中肥大
细胞颗粒释放诱发的继发炎症，缓解淋巴细胞浸润，
从而缓解支气管内膜充血、水肿，且贝母碱能通过
拮抗胆碱能受体直接舒张支气管，从而可有效防治
哮喘小鼠管腔狭窄[18-19]。在 I 型变态反应中，抗原呈
递细胞处理抗原，将信息呈递给 CD4+T 淋巴细胞，
超氧化物歧化酶（SOD）在该环节起保护作用[20]。
贝母具有抗氧化和增强免疫作用，可调节 SOD，防
治哮喘[21-22]。肺泡表面活性物质可缓解哮喘中气道
慢性炎症和高反应性增高，降低花粉诱导的肥大细
胞脱颗粒[23-24]。本实验表明川贝母能保护肺泡 II 型
上皮细胞，有效增加肺表面活性物质，提示川贝母
可通过保护肺泡 II 型上皮细胞防治哮喘。
总之，各品种川贝母均能不同程度地扩张细支
气管，减轻气道狭窄，保护肺泡 II 型上皮细胞，以
达到防治哮喘的目的。由于不同品种川贝母逆转哮
喘的作用环节不同，在优先维持暗紫贝母资源的同
时，应该考虑保存野生川贝母的品种多样性。
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