全 文 ：中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 43 卷 第 7 期 2012 年 7 月

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铁皮石斛快繁技术体系研究
常美花 1，金亚征 1，王 莉 2
1. 河北北方学院 园艺系，河北 张家口 075000
2. 唐山师范学院滦州分校，河北 唐山 063700
摘 要：目的 以铁皮石斛 Dendrobium officinale 带芽茎段为材料，对铁皮石斛的组织培养进行系统研究，以期建立铁皮石
斛的快繁技术体系。方法 采用植物组织培养的方法对铁皮石斛外植体的消毒方法、原球茎的诱导、增殖、分化、幼苗生根
及瓶苗移栽等进行研究。结果 铁皮石斛外植体最佳的消毒方式为 75%乙醇消毒 30 s，再用 0.1% HgCl2消毒 10 min；铁皮
石斛带芽茎段原球茎诱导的最佳培养基为 MS＋1.0 mg/L 6-BA＋0.5 mg/L NAA＋2 g/L AC，诱导率达到 34.98%；原球茎增殖
的最佳培养基为 MS＋0.5 mg/L 6-BA＋0.8 mg/L 2, 4-D＋2 g/L AC，增殖率达到 89.6%；原球茎分化的最佳培养基为 MS＋1.2
mg/L 6-BA＋0.2 mg/L IBA＋2 g/L AC，分化率达到 89.6%；幼苗生根的最佳培养基配方为 1/2 MS＋2.5 mg/L NAA＋15%土豆
汁＋2 g/L AC，生根率达到 90.4%～92.8%；瓶苗移栽最佳方式为大苗、树皮块苔藓草做基质、基质中添加 0.03 mg/L 赤霉素，
并接种适量菌根真菌 Epulorhiza sp.。结论 建立了铁皮石斛的快繁技术体系，为铁皮石斛的工业化生产奠定技术基础。
关键词：铁皮石斛；快繁技术；幼苗移栽；增殖；分化
中图分类号：R282.21 文献标志码：A 文章编号：0253 - 2670(2012)07 - 1412 - 06
Rapid propagation technique system of Dendrobium officinale
CHANG Mei-hua1, JIN Ya-zheng1, WANG Li2
1. Department of Horticulture, Hebei North University, Zhangjiakou 075000, China
2. Luanzhou Branch, Tangshan Normal College, Tangshan 063700, China
Abstract: Objective Budding stems of Dendrobium officinale were used as the test materials to systematically investigate tissue
culture and establish a rapid propagation technique system. Methods Disinfectant method of explants, induction, proliferation,
differentiation, seedling rooting, and transplanting of protocorm in D. officinale were researched with tissue culture. Results The best
disinfectant method of explants is to disinfect by 75% ethanol for 30 s and then by 0.1% HgCl2 for 10 min. The best culture medium of
budding stems induction was MS + 1.0 mg/L 6-BA + 0.5 mg/L NAA + 2 g/L AC with inductivity of 34.98%. The best culture medium
of proliferation was MS + 0.5 mg/L 6-BA + 0.8 mg/L 2, 4-D + 2 g/L AC of which proliferation rate could be up to 89.6%. The best
culture medium for protocorm differentiation was MS + 1.2 mg/L 6-BA + 0.2 mg/L IBA + 2 g/L AC with differentiation rate at 89.6%.
The best culture medium for seedling rooting was 1/2 MS + 2.5 mg/L NAA + 15% potato juice + 2 g/L AC with rooting rate at
90.4%―92.8%. The best way for seedling transplanting was to adopt substratum of big seedling and bark moss as base with 0.03 mg/L
gibberellin and Epulorhiza sp. Conclusion Rapid propagation technique system is established in order to lay technique foundation for
industrial production of D. officinale.
Key words: Dendrobium officinale Kimura et Migo; rapid propagation; seedling transplanting; proliferation; differentiation

铁皮石斛 Dendrobium officinale Kimura et Migo
是我国的名贵中药材，素有“中华仙草”、“药中黄
金”之美称，是《中国药典》2010 年版收载的主要
石斛品种，具有滋阴清热、生津益胃、润肺止咳、
润喉明目、延年益寿之功效。现代研究表明，铁皮
石斛对治疗咽喉疾病、白内障、糖尿病和抑制肿瘤

收稿日期：2012-01-15
基金项目：河北省科技攻关计划项目（052201124）
作者简介：常美花（1968—），女，河北涿鹿人，硕士，副教授，主要从事花卉学和组织培养的教学与科研工作。
Tel: 18931318563 E-mail: cmhzjk@163.com
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生长具有显著疗效。铁皮石斛是生产石斛夜光丸、
脉络宁注射液、通塞脉片、清睛粉等数十种中成药
及保健品的必要原料，以铁皮石斛加工成的枫斗在
国内外享有很高的声誉[1-2]。过去我国的铁皮石斛药
材主要来自野生资源，过度采集使野生资源量急剧
下降，濒临灭绝。同时铁皮石斛采用传统的分株繁
殖法，繁殖速度比较慢，难以满足日益增长的市场
需求，因此通过组织培养技术，对铁皮石斛进行快
速繁殖是保护和利用铁皮石斛资源的必要途径。本
实验筛选出铁皮石斛最佳外植体消毒方式、最佳培
养基配方，最佳瓶苗移栽方式从而建立稳定、高效
的铁皮石斛组织培养快繁技术体系，以便定时、定
量、定质出苗，满足市场需求。
1 材料与方法
1.1 材料
选取我国云南省普洱市山区野生铁皮石斛
Dendrobium officinale Kimura et Migo 种苗，由河北
北方学院药物研究所张进顺教授鉴定，在河北北方
学院园艺温室进行栽培。选取一年生茎段作为外植
体进行组织培养研究。
1.2 方法
1.2.1 外殖体的消毒 选取生长旺盛、无病害的铁
皮石斛健康植株的一年生茎段，每 2 节为一段，放
入 500 mL 的烧杯中，用纱布单层棚口，扎紧，冲
洗 30 min，冲水量调整到能使铁皮石斛茎段在水中
漂动为好。
将上述预处理后的材料带到无菌室超净工作台
上，并将带茎段的腋芽的苞叶拨去，分别采用 3 种
消毒方式进行消毒灭菌 2 次，3 种消毒方式见表 1。
1.2.2 无菌体系的建立 将上述材料剪成每 1 节为
一段，去掉药物浸透的茎段部分，最后将茎段接种
到培养基（MS＋6-BA 2.5 mg/L）[3]试管中，每试管
接种一个茎段，进行培养。培养条件为温度 26 ℃，
光照时间 12 h，光照强度 2 000 Lx。建立铁皮石斛
的无菌体系，待侧芽萌发后，再进行铁皮石斛原球
茎诱导、增殖、分化、生根和瓶苗移栽等试验。每
天记录铁皮石斛污染率，统计 45 d。
污染率＝污染的个数/接种的个数
1.2.3 原球茎的诱导 用得到的无菌体系进行培
养，待苗长至 3～4 节茎段时，剪取其带芽茎段，叶
片去掉，作为外植体，进行原球茎的诱导培养。
原球茎诱导培养基设计见表 2，基本培养基为
MS＋2%活性炭（AC），激素配方采用 6-BA 和 NAA
的完全随机设计，共 8 个处理，每个处理 5 个重复，
每个重复 5 瓶培养基，每瓶接入 5 个茎段。45 d 调
查原球茎的诱导率及原球茎数量。
原球茎的诱导率＝产生原球茎的茎段数/接种茎段数
1.2.4 原球茎增殖 将诱导形成的原球茎接种在原
球茎增殖培养基上。基本培养基为 MS＋2%活性炭
（AC），激素配方采用BA和 2, 4-D的完全随机设计，
处理方法见表 3，共 9 个处理，每个处理 5 个重复，
每个重复 5 瓶培养基，每瓶接入原球茎 5 块。然后
在无菌条件下进行增殖试验 30 d 后统计增殖率。
原球茎增殖率[4]＝增殖的原球茎块数/接种原球茎块数
1.2.5 原球茎分化 将增殖的充分成熟的较大原球
茎块切割成直径 3～8 mm 左右的小块，接种在芽分
化培养基上。基本培养基为 MS＋2% AC，激素配
方采用 6-BA 和 NAA 的完全随机设计，处理方法见
表 4，共 10 个处理，每个处理 5 个重复，每个重复
5 瓶培养基，每瓶接入原球茎 5 块，然后在无菌条
件下进行分化培养，第 45 天统计分化率。
幼苗分化率[4]＝分化出幼苗的原球茎块数/接种原球茎块数
1.2.6 幼苗生根 将原球茎分化出的幼苗接种于生
根培养基上，基本培养基为 1/2 MS＋15%土豆汁＋
2% AC，激素配方采用 NAA 的完全随机设计，处
理方法见表 5，共 6 个处理，每个处理 5 个重复，
每个重复 5 瓶培养基。然后在无菌条件下进行生根
培养，第 45 天统计幼苗生根率。
幼苗生根率＝生根幼苗数/接种幼苗数
1.2.7 瓶苗的移栽 将生根瓶苗在移栽前放在温室
大棚中炼苗 15～20 d 后，洗净组培苗根上培养基，
用0.1%灭菌灵消毒，以防栽培后的石斛苗根腐烂[5]。
1.2.8 考察不同栽培基质对铁皮石斛瓶苗移栽成活
率的影响 将组培苗分为大、中、小 3 类[6]。选择
大苗，基质主要应用不同的材料和不同的组合方法，
其次基质中加 0.03 mg/L 赤霉素（GA），处理方法
见表 6。12 个月后调查不同基质铁皮石斛移栽成活
率及高度和长度。
1.2.9 GA 和菌根真菌对铁皮石斛移栽成活率的影
响 选择大苗，基质中添加 GA 和菌根真菌，处理
方法见表 7。12 个月后调查不同基质铁皮石斛移栽
成活率及高度和长度。
1.2.10 考察瓶苗大小对移栽成活率的影响 选择
大、中、小 3 种瓶苗进行移栽试验，基质为树皮块
加苔藓草，基质中添加 0.03 mg/L GA 和菌根真菌，
处理方法见表 8。12 个月后调查不同基质铁皮石斛
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移栽成活率及高度和长度。
1.2.11 培养条件 培养基 pH 值在 5.4～5.8，琼脂
粉 0.6%～0.8%，并加入 0.2% AC 防止褐变，培养
室温度控制在（25±1）℃，相对湿度 40%，光照
12 h/d，光照强度为 2 000 Lx。
2 结果与分析
2.1 不同消毒方式对外殖体污染率的影响
由表 1 可知，铁皮石斛带芽茎段经单一消毒剂
消毒后，污染率较高；而经复合消毒剂处理后污染
率显著降低。所以建立铁皮石斛无菌体系较好的消
毒方式为70%乙醇处理30 s后再用0.1% HgCl2处理
10 min。用这种消毒方式处理铁皮石斛带芽茎段可
大量获得铁皮石斛的无菌苗。
表 1 不同消毒方式对外植体污染率的影响
Table 1 Effects of different disinfectant methods
on pollution rate of explants
处理方式 接种茎段数 污染茎段数 污染率 / %
75%乙醇 100 86 86 aA
75%乙醇＋2% NaClO 100 57 57 bB
75%乙醇＋0.1% HgCl2 100 29 31 cC
小写字母表示差异显著（P＜0.05），大写字母表示差异很显著（P＜
0.01），下同
Lowercase letters mean significant difference (P < 0.05), uppercase
letters mean very singnificant difference (P < 0.01), same as below
2.2 不同激素配方对铁皮石斛原球茎诱导的影响
从结果可以看出（表 2），不加激素的 MS 培养基
铁皮石斛的原球茎诱导率为 0，培养基中加入 6-BA
表 2 不同激素配方对铁皮石斛原球茎诱导的影响
Table 2 Effects of different hormone formulas on protocorm induction of D. officinale
组 别 6-BA / (mg·L−1) NAA / (mg·L−1) 接种茎段数 诱导出原球茎的茎段数 原球茎诱导率 / % 原球茎数量
1 (CK) 0.0 0.0 0 0 0 gF
2 0.2 0.5 125 20 16.0 fE +
3 0.4 0.5 125 24 19.6 eD +
4 0.6 0.5 125 25 20.8 dD ++
5 0.8 0.5 125 32 25.6 cC +++
6 1.0 0.5 125 44 35.2 aA ++++
7 1.2 0.5 125 34 27.2 bB +++
8 1.4 0.5 125 32 25.6 cC +
“++++”-表示形成的原球茎数量最多 “+++”-表示形成的原球茎数量较多 “++”-表示形成的原球茎数量多 “+”-原球茎数量较少
“++++”-protocorm formation with the largest number “+++”-protocorm formation with more number “++”-protocorm formation with reasonable
number “+”-protocorm formation with undesirable number
和 NAA 的各处理都有不同数量的原球茎产生，经
方差分析配方 6：MS＋1.0 mg/L 6-BA＋0.5 mg/L
NAA＋2 g/L AC 原球茎诱导率显著的高于其他处
理，且诱导率达到 35.2%，6-BA 的质量浓度在 0.2～
1.0 mg/L，随着质量浓度的提高原球茎的诱导率升
高，6-BA 在 1.0～1.4 mg/L，随质量浓度的提高原
球茎的诱导率逐渐降低。培养基加入 2 g/L AC 可以
有效的降低褐变率。
2.3 不同激素配方对铁皮石斛原球茎增殖的影响
从表 3 可以看出，不加任何激素的 MS 培养
基铁皮石斛的原球茎增殖率为 16.8%，加 6-BA 和
2, 4-D对铁皮石斛原球茎增殖有显著的促进作用，
经方差分析配方 2：MS＋BA 0.5 mg/L＋2, 4-D 0.8
mg/L＋2 g/L AC 增殖率显著的高于其他处理，且增殖
率达到 89.6%。其次是配方 5：MS＋BA 1.0 mg/L＋
2, 4-D 0.8 mg/L＋2 g/L AC 增殖率为 72.0%。
从本实验结果来看，2, 4-D 和 6-BA 促进铁皮
石斛原球茎的增殖效果非常好。试验中还观察到，
在原球茎增殖的继代培养中，20～25 d 原球茎未充
分成熟，增殖率较高，且颜色为鲜绿色；30 d 以后
原球茎增殖率有所降低，颜色转为深绿色；原球茎
切割块的大小以直径 0.5 cm 为适宜，过小易死亡降
低增殖率，过大增殖率也有所降低。
2.4 不同激素配方对铁皮石斛原球茎分化的影响
从结果可以看出（表 4），不加任何激素的 MS
培养基铁皮石斛的原球茎分化率为 0，加入 6-BA 和
IBA 以后，各处理均有不同程度的分化，说明 6-BA
和 IBA 对铁皮石斛原球茎分化有促进作用。在 IBA
质量浓度一定时，铁皮石斛原球茎的分化率随着
6-BA 质量浓度的升高而升高，当 6-BA 质量浓度为
1.2 mg/L 时，其分化率最高为 89.9%，当 6-BA 质量
浓度超过 1.2 mg/L随质量浓度的升高分化率逐渐降
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表 3 不同激素配方对铁皮石斛原球茎增殖的影响
Table 3 Effects of different hormone formulas on protocorm proliferation of D. officinale
组别 6-BA / (mg·L−1) 2, 4-D / (mg·L−1) 接种块数 增殖块数 增殖率 / %
0 0.0 0.0 125 21 16.8 gF
1 0.5 0.4 125 85 68.0 cC
2 0.5 0.8 125 112 89.6 aA
3 0.5 1.2 125 83 66.5 cA
4 1.0 0.4 125 68 54.4 dD
5 1.0 0.8 125 90 72.0 bB
6 1.0 1.2 125 66 52.8 eD
7 1.5 0.4 125 31 24.8 fE
8 1.5 0.8 125 29 23.6 fE
9 1.5 1.2 125 26 20.8 gfEF
表 4 不同激素配方对铁皮石斛原球茎分化的影响
Table 4 Effects of different hormone formulas on protocorm differentiation of D. officinale
组别 6-BA / (mg·L−1) IBA / (mg·L−1) 接种块数 丛芽分化数 丛芽分化率 / %
0 0.0 0.0 125 0 0 eE
1 0.6 0.2 125 98 78.4 dD
2 0.9 0.2 125 101 80.8 cC
3 1.2 0.2 125 112 89.6 aA
4 1.5 0.2 125 109 87.4 bB
5 1.8 0.2 125 97 77.6 dD

低。经方差分析配方 3：MS＋6-BA 1.2 mg/L＋IBA
0.2 mg/L＋2 g/L AC 的分化率显著高于其他处理。
从试验中还可以看到分化培养时原球茎切割的块越
大分化的越早，幼苗长得越壮；同一培养基中培养
的时间越长分化率越高。在分化培养的过程中有少
部分幼苗已经生根。
2.5 不同激素配方对铁皮石斛丛生苗生根的影响
由表 5 可以看出，不加任何激素的 1/2 MS 培养
基铁皮石斛丛生芽的生根率为 18.4%，加入 NAA
以后，各处理丛芽的生根率均有不同程度提高，生
根时间有不同程度的提前。说明 NAA 对铁皮石斛
丛芽生根有促进作用，而且 NAA 的质量浓度在一
定程度上影响着铁皮石斛组培苗的生根时间、生
根率和瓶苗生长情况等。经方差分析配方 4 和 5：
1/2 MS＋2～2.5 mg/L NAA＋15%土豆汁＋2 g/L
AC 的生根率显著高于其他处理，且生根率达到
90.4%～92.8%，生根时间最早，接种后第 5～7 d；
根系发达，苗木生长健壮。加入 15%土豆汁有利于
促进生根及幼根的生长[7]，加入 2 g/L AC 有利于减
轻褐化。用茎段外植体繁育的瓶苗在分化期间就有
根系出现，进入生根培养基培养后，基部的气生根
更发达，根系数量多达 20～30 条，且在根系上有白
色粉末状，瓶苗叶片光亮，茎粗，节多，有利移栽。
2.6 铁皮石斛瓶苗移栽成活率
2.6.1 不同基质对铁皮石斛移栽成活率的影响 目
前铁皮石斛瓶苗移栽成活率低，极大地制约着铁皮
石斛生产规模的扩大和生产水平的提高。本试验从
不同的栽培基质，不同的添加剂，不同规格的瓶苗
3 个方面研究了影响铁皮石斛瓶苗移栽成活率的主
要因素。
从表 6 中可看出，在几种不同的基质中，不论
成活率、粗壮程度和茎长，都是木块与苔藓的组合
极显著的高于其他处理。生长良好的依次是：树皮
块与苔藓＞树皮块与锯末＞树皮块与腐叶土＞锯末
与河沙＞锯末与腐叶土。
2.6.2 基质中添加 GA 和菌根真菌对铁皮石斛移栽
成活率的影响 从表 7 可以看出，0.03 mg/L GA 和
菌根真菌对提高铁皮石斛瓶苗移栽的成活率及促进
幼苗生长有良好调节作用。与对照相比使用 0.03
mg/L GA，铁皮石斛瓶苗成活率提高 10.6%～
10.8%。与对照相比接种菌根真菌，铁皮石斛瓶苗
成活率提高 11.7%～12.9%。尤其是接菌的铁皮石斛
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表 5 不同激素配方对铁皮石斛丛生苗生根的影响
Table 5 Effects of different hormone formulas on seedling rooting of D. officinale
组别 NAA / (mg·L−1) 接种丛芽数 始根时间 / d 生根的丛芽数 生根率 / % 生根瓶苗生长情况
0 0.0 125 15 23 18.4 fF 苗绿，根少、细小
1 0.5 125 12 85 68.0 eE 根少，细小，弱长
2 1.0 125 9 90 72.0 dD 根长，苗易黄化
3 1.5 125 9 108 86.4 bB 根长，细小，伴有黄化
4 2.0 125 5 116 92.8 aA 根系发达，粗壮，茎粗、长，节多
5 2.5 125 7 113 90.4 aA 根系发达，粗壮，茎粗、长，节多
6 3.0 125 10 94 75.2 cC 苗绿，根多、细小
表 6 不同基质对铁皮石斛瓶苗移栽成活率的影响
Table 6 Effects of different substrata on seeding transplanting survival rate of D. officinale
基 质 空气湿度 / % 成活率 / % 茎最长 / cm 茎最粗 / cm
树皮块苔藓 90 92.6 aA 16.8 aA 1.15 aA
树皮块锯末 90 74.3 bB 12.7 bB 0.74 bB
树皮块腐叶土 90 50.2 cC 8.6 cC 0.45 cC
锯沫腐叶土 90 48.5 cC 5.4 eD 0.37 dD
锯沫河沙 90 43.9 dD 6.8 dD 0.38 dD

表 7 基质中加入赤霉素和菌根真菌对铁皮石斛移栽成活率的影响
Table 7 Effects of gibberellin with Epulorhiza sp. added in substrata on transplanting survival rate of D. officinale
基 质 空气湿度 / % 成活率 / % 茎最长 / cm 茎最粗 / cm
树皮块苔藓 90 81.5 cB 12.8 dCD 0.83 bB
树皮块苔藓＋0.03 mg/L GA 90 92.3 bA 16.9 bB 1.25 aA
树皮块苔藓＋菌根真菌 90 93.2 aA 18.2 aA 1.34 aA
树皮块锯末 90 64.9 eD 8.9 dD 0.51 dD
树皮块锯末＋0.03 mg/L GA 90 75.5 deC 12.7 eE 0.72 cC
树皮块锯末＋菌根真菌 90 77.8 dBC 13.4 cC 0.81 bB

苗生长势旺盛，苗色浓绿，茎粗壮呈红紫色，产生
新根多，根系发达。
2.6.3 试管苗大小对铁皮石斛成活率的影响 从表
8 可以看出，瓶苗的大小与移栽成活率、茎长、茎
粗关系极为明显。大苗的移栽成活率最高，达
97.6%，茎长达 23.5 cm，茎粗达 1.52 cm，极显著
高于中苗和小苗。因此提高铁皮石斛瓶苗移栽成活
率培养壮苗是关键技术之一。综上所述，铁皮石斛
瓶苗移栽最佳方式为：大苗、树皮块苔藓草做基质、
基质中添加 0.03 mg/L GA，并接种适量菌根真菌。
3 讨论
目前对于铁皮石斛组织培养快繁技术的研究很
多，但是真正能够用于商品化生产的技术很少，因
此目前铁皮石斛人工生产量很少，远远不能满足市
场的需要。其原因主要是在于铁皮石斛组织培养过
程中存在着许多的问题。
第一，若用种子做外植体进行组培繁育，无法
预计培育的后代性状是否优良。而以铁皮石斛茎段
表 8 试管苗的大小对成活率的影响
Table 8 Effects of tube seedling size on survival rate of D. officinale
苗型 空气湿度 / % 成活率 / % 茎最长 / cm 茎最粗 / cm
大苗 90 97.6 aA 23.5 aA 1.52 aA
中苗 90 82.5 bB 17.6 bB 0.74 bB
小苗 90 58.7 cC 8.9 cC 0.39 cC
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作为外植体，可以防止新一代幼苗发生变异能使幼
株有效地保持母株的优良性状[8]，且诱导出的原球
茎繁殖系数极高，2 个月内的增殖倍数达到 20～30，
原球茎较粗壮。
第二，李进进等[9]研究发现，铁皮石斛特殊的基
因型及固有的生理特性导致试管苗在培养过程中易
衰老退化，原球茎增殖 4 代以后或者茎段丛芽增殖
6 代以后会逐渐衰老并影响生根率和移栽成活率。
在本试验过程中也发现类似的现象。所以以茎段诱
导的原球茎增殖继代培养不能超过 5 代，否则生根
率和移栽成活率都会降低。此外，在原球茎增殖的
继代培养中，20～25 d 产生的原球茎未充分成熟，
增殖率较高；30 d 以后产生的原球茎增殖率会有所
降低，因此 20～25 d 继代 1 次较为合适；原球茎切
割块的大小以直径 0.5 cm 为适宜，过小易死亡降低
增殖率，过大增殖率也有所降低。所以在铁皮石斛
组织培养过程中不光是培养基配方影响试验的成
败，一些操作细节也会影响试验结果。
第三，李宏博等[1]认为，铁皮石斛快繁过程中，
转接培养次数多（至少 3 次），周期长，消耗了大量
人力和原材料。因此，在生产上，应在保证苗的质
量的前提下，从各个方面降低成本。本试验过程中
发现在分化培养的过程中有少部分幼苗已经生根。
若调节培养基配方使得分化和生根同步进行，将四
步培养成苗变为三步成苗，即缩短了培养时间又降
低了成本。
第四，瓶苗移栽成活率低是限制铁皮石斛规模
化栽培的关键问题。要想解决这个问题，必须从以
下几个方面入手：优化各个环节的培养条件，获得
健壮的瓶苗，尤其瓶苗根系要发达（3～5 条 5 cm
以上的根系）。出瓶前炼苗（15～20 d）不可忽视。
选择合适的栽培基质，并添加适当的菌根真菌[10]和
GA，本试验中发现同时添加菌根真菌和 GA 能显著
的提高瓶苗移栽成活率。栽培环境的空气湿度也是
影响移栽成活率的关键因素之一，本试验中发现栽
培环境的空气相对湿度为 90%以上，有利于提高瓶
苗的成活率，这可能是和铁皮石斛原产在高湿的环
境有关。
本研究只在铁皮石斛繁殖方面做了分析，还有
待于进行组培苗成年个体的性状差异跟踪调查，组
培成品苗有效成分含量、提取及分析等方面进行全
面的、更详细的研究。
从本试验结果可以看出，在铁皮石斛组培快繁
过程中：铁皮石斛外殖体最佳的消毒方式为 75%乙
醇消毒 30 s，0.1% HgCl2，消毒 10 min；铁皮石斛
带芽茎段原球茎诱导的最佳培养基为 MS＋1.0
mg/L 6-BA＋0.5 mg/L NAA＋2 g/L AC 且诱导率达
到 34.98%；原球茎增殖的最佳培养基为 MS＋0.5
mg/L 6-BA＋0.8 mg/L 2, 4-D＋2 g/L AC，且增殖率
达到 89.6%；原球茎分化的最佳培养基为 MS＋1.2
mg/L 6-BA＋0.2 mg/L IBA＋2 g/L AC；且分化率达
到 89.6%；幼苗生根的最佳培养基配方：1/2 MS＋2～
2.5 mg/L NAA＋15%土豆汁＋2 g/L AC，且生根率
达到 90.4%～92.8%；瓶苗移栽最佳方式为：大苗、
树皮块苔藓草做基质、基质中添加 0.03 mg/L GA，
并接种菌根真菌。
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