全 文 :蔺 经,李晓刚,李 慧,等. 沙梨新品种苏翠 1 号组培快繁体系研究[J]. 江苏农业科学,2014,42(11):66 - 67.
doi:10. 15889 / j. issn. 1002 - 1302. 2014. 11. 019
沙梨新品种苏翠 1 号组培快繁体系研究
蔺 经,李晓刚,李 慧,杨青松,王中华,常有宏
(江苏省农业科学院园艺研究所,江苏南京 210014)
摘要:为了加快沙梨新品种苏翠 1 号的繁殖过程,本试验以该品种的嫩梢作为外植体,建立了离体快繁技术体系。
研究结果表明:苏翠 1 号组培苗的适宜增殖培养基为 MS + 6 - BA 1. 5 mg /L + NAA 0. 2 mg /L,增值系数可达到 5. 6;在
该培养基上继代 2 次后转入生根培养基(1 /2MS + IBA 1. 5 mg /L),诱导生根 30 d后移栽,植株于温室生长半年后即可
用于嫁接,可极大缩短育苗时间。
关键词:沙梨品种;培养基;激素;组织培养;快繁技术;移栽
中图分类号:S661. 204 + 3 文献标志码:A 文章编号:1002 - 1302(2014)11 - 0066 - 02
收稿日期:2014 - 09 - 02
基金项目:江苏省农业科技自主创新资金[编号:CX(14)2020];国家
农业科技成果转化资金(编号:2013GB2C100170)。
作者简介:蔺 经(1970—),男,陕西吴起人,硕士,研究员,主要从事
梨品种选育与栽培技术研究。Tel:(025)84390224;E - mail:
lj84390224@ 126. com。
梨为蔷薇科(Rosacmeae)梨亚科(Romoideae)梨属
(Pyrus)多年生果树,是中国四大水果之一。中国的梨产量和
面积超过世界总量的 60%,生产上主要的栽培种有白梨、沙
梨、秋子梨、新疆梨和西洋梨[1 - 3]。长江流域是中国沙梨优势
产区,发展早熟梨的经济效益显著,目前主栽品种较少(翠
冠、爱甘水、喜水等),迫切需要选育优质早熟沙梨品种,丰富
生产多样化的需求。江苏省农业科学院园艺研究所以早熟梨
华酥为母本、翠冠为父本,选育出成熟早、品质优、外观好的沙
梨新品种苏翠 1 号,该品种果面光洁,果形端正,肉质细脆,丰
产稳产,具备良好的发展前景[4]。为加快品种繁育过程,推
进其在生产上的应用,本研究以苏翠 1 号嫩梢为材料,探讨不
同培养基及激素配比对苏翠 1 号试管苗生长的影响,并建立
其离体快繁体系,旨在为大面积推广该品种提供种苗。
1 材料与方法
1. 1 试验材料
苏翠 1 号嫩梢取自江苏省农业科学院园艺研究所梨种质
资源圃。
1. 2 试验方法
1. 2. 1 初代培养 苏翠 1 号嫩梢于实验室剪去叶片,用洗涤
剂轻轻刷洗枝条表面,流水冲洗 3 h,吸干表面水分后,在超净
工作台上用 75% 乙醇消毒 30 s,再用 0. 1% 氯化汞消毒
8 min,无菌水漂洗 5 次,接种到无激素添加的 MS培养基上进
行初代培养。
1. 2. 2 增殖培养 (1)不同激素配比对增殖的影响。初代
培养后,以生长一致的芽为增殖材料,MS 为基本培养基,分
别添加不同浓度的 6 - BA 或 NAA,进行激素浓度筛选试验。
(2)基本培养基的筛选。初代培养后,以生长一致的芽为增
殖材料,选用 MS、1 /2MS、AS、WPM 等 4 种基本培养基,添加
6 - BA 1. 5 mg /L 和 NAA 0. 2 mg /L,进行适宜培养基筛选
试验。
1. 2. 3 组培苗生根 切取长约 3 cm 的茎段为生根材料,转
入以 1 /2MS 为基本培养基、添加不同浓度 NAA 或 IBA 的生
根培养基中,30 d 后统计生根情况。
以上各阶段的培养温度均为(24 ± 2)℃,光周期 12 h /d,
光照度约为 2 500 lx[5]。
1. 2. 4 移栽及温室管理 待组培苗生根 30 d 后进行移栽,
将瓶盖揭开炼苗 3 ~ 5 d,于流水下轻轻冲洗去除根部琼脂,种
植于含蛭石 +珍珠岩(体积比为 1 ∶ 1)基质(预先用 50%多
菌灵可湿性粉剂 500 倍液杀菌)的穴盘中,每 3 d 浇灌 1 /4MS
大量元素母液。温室内保持 20 ~ 26 ℃,遮阴网遮阴,覆膜保
湿,逐渐撤膜,2 周后完全揭膜。
1. 3 数据处理
所得数据用 DPS 软件进行差异显著性分析。
2 结果与分析
2. 1 激素配比对苏翠 1 号增殖的影响
选择 MS作为基本培养基,将初代培养获得的生长一致的
苏翠 1号组培苗转接至 9 个不同浓度的激素配比培养基中,每
处理接种 30 个芽,重复 3 次,继代 4 周后统计增殖情况。表 1
结果表明:不同处理对苏翠 1 号组培苗的增殖影响很大。在
NAA浓度不变的情况下,随着 6 - BA浓度增大,苏翠 1 号组培
苗增殖系数提高,当6 - BA为1. 5 mg /L时,各处理的增殖系数
均在 5. 6以上。6 - BA浓度为 0. 5 mg /L或 1. 0 mg /L 时,随着
NAA浓度增大,苏翠 1号组培苗增殖系数提高;6 - BA 浓度为
1. 5 mg /L时,随着 NAA浓度增大,苏翠 1号组培苗增殖系数先
上升后下降。虽然添加 6 - BA 1. 5 mg /L + NAA 0. 4 mg /L处
理的苏翠 1号组培苗增殖系数最高(达 7. 8),但是部分组培苗
表现出纤细、叶色泛黄的现象。综合考虑不定芽的质量和增殖
系数,认为 MS +6 - BA 1. 5 mg /L + NAA 0. 2 mg /L为苏翠 1号
组培苗增殖的适宜培养基。
2. 2 不同基本培养基对苏翠 1 号增殖的影响
将初代培养获得的生长一致的苏翠1号组培苗转接至含
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表 1 不同激素配比对苏翠 1 号组培苗增殖的影响
处理
6 - BA
(mg /L)
NAA
(mg /L) 增殖系数
1 0. 5 0. 2 2. 1d
2 0. 5 0. 4 2. 4d
3 0. 5 0. 8 3. 0cd
4 1. 0 0. 2 3. 2cd
5 1. 0 0. 4 3. 6c
6 1. 0 0. 8 3. 7c
7 1. 5 0. 2 5. 6b
8 1. 5 0. 4 7. 8a
9 1. 5 0. 8 6. 2b
6 - BA 1. 5 mg /L和 NAA 0. 2 mg /L的基本培养基中,每处理
接种 30 个芽,重复 3 次,每 4 周继代 1 次,继代 2 次后,统计
芽的增殖情况。由表 2 可知,不同培养基对苏翠 1 号增殖情
况存在显著影响。扩繁第 1 代时,组培苗在 1 /2MS培养基上
增殖率最高(6. 5),显著高于其他 3 种培养基上的增殖系数
(高出 12. 3% ~ 18. 5%),在 WPM 培养基上增殖率最低
(5. 3) ,并且在 4 种基本培养基上的苏翠 1 号组培苗均未出
现玻璃化现象。增殖第 2 代,组培苗在 MS 培养基上增殖率
最高(4. 3),显著高于其他 3 种培养基上的增殖系数(高出
4. 7% ~16. 3%),在 1 /2MS培养基上增殖率最低(3. 6)。此
外,组培苗在 4 种基本培养基上均出现不同程度的玻璃化现
象,其中在 MS 培养基上的玻璃化程度最轻(玻璃化率仅为
0. 9%)。综合考虑增殖2代的增殖率和玻璃化程度,将MS
表 2 基本培养基对苏翠 1 号组培苗增殖的影响
基本培养基
增殖 1 代 增殖 2 代
增殖系数 玻璃化率(%) 增殖系数 玻璃化率(%)
MS 5. 6 b 0 4. 3a 0. 9c
1 /2MS 6. 5a 0 3. 6a 4. 8a
AS 5. 7b 0 4. 1ab 4. 4ab
WPM 5. 3c 0 3. 8b 1. 3b
培养基作为苏翠 1 号组培苗扩繁的适宜基本培养基。
2. 3 不同激素对苏翠 1 号生根的影响
比较不同激素处理下苏翠 1 号的生根状况发现:IBA 对
其组培苗的生根效果优于 NAA(表 3)。当 NAA 浓度为
0. 5 ~ 2. 0 mg /L 时,随着其浓度的升高,诱导生根率也逐步升
高,但最高生根率仅为 17. 2%,平均生根数为 3. 7 条,须根无
或很少,并且绝大部分组培苗的基部都有愈伤组织生成,给试
管苗的移栽造成一定困难。在 IBA 诱导培养下,IBA 浓度为
1. 5 mg /L时生根率达到最高,为 45. 3%,平均生根数也最多
(4. 9 条),并且须根较多,虽然有 70%的生根组培苗基部同
时也形成了愈伤组织,但是与 NAA 处理条件下相比,所形成
的愈伤组织比较紧密且体积很小,对组培苗的移栽几乎不存
在影响。当 IBA 浓度进一步增加到 2. 0 mg /L时,生根率有所
下降,平均生根数只有 3. 6 条,且愈伤组织诱导率达到 85%。
综合考虑不同激素处理条件下苏翠 1 号组培苗的愈伤组织诱
导状况、生根率、生根数和生根状态,可以认为 1 /2MS + IBA
1. 5 mg /L 适宜作为苏翠 1 号组培苗生根培养基。
表 3 不同浓度 NAA、IBA 对苏翠 1 号组培苗生根的影响
激素名称
浓度
(mg /L)
愈伤组织诱导率
(%)
生根率
(%)
平均生根数
(条)
生根状态
NAA 0. 5 85 1. 7c 1. 7c 主根较粗短无须根
1. 0 98 8. 1c 2. 5b 须根少
1. 5 100 13. 2b 2. 3b 主须根均较粗
2. 0 100 17. 2a 3. 7a 须根较少
IBA 0. 5 48 9. 6c 3. 3b 主根细而短须根少
1. 0 64 32. 5bc 3. 8ab 主根较长且须根少
1. 5 70 45. 3a 4. 9a 须根较多
2. 0 85 43. 8ab 3. 6b 须根较多
2. 4 移栽
将在 1 /2MS + IBA 1. 5 mg /L 培养基上生根 30 d 后的苏
翠 1 号组培苗进行移栽,通过炼苗、基质消毒、遮阴和覆膜等
方法,能使植株成活率达到 80%以上,移栽 15 d 后可见新叶
长出,移栽 3 个月后可常规管理,半年后可收获枝条用于嫁接
繁苗。
3 结论
为了加快沙梨新品种苏翠 1 号的繁殖过程,本试验建立
了其离体快繁技术体系:苏翠 1 号经过嫩梢初代培养获得无
菌芽,在 MS +6 - BA 1. 5 mg /L + NAA 0. 2 mg /L上继代 2 次,
转入生根培养基(1 /2MS + IBA 1. 5 mg /L),诱导生根 30 d 后
移栽,植株于温室生长 6 个月后即可用于嫁接,极大地缩短了
其育苗时间。在快速繁殖苗木过程中,组培苗生根数量的多
少对苗木移栽驯化的成活率影响很大。有效生根苗的平均生
根数≥3条,其成活率较高[6]。本试验中,苏翠 1 号在 1 /2MS +
IBA 1. 5 mg /L生根培养基上的平均生根数为 4. 9 条(表 3),
根系质量较好,移栽后成活率在 80%以上,6 个月后可收获枝
条用于嫁接繁苗,可以快速地繁育优良品种。
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