全 文 ：水平式离心机效果较好, 且离心速度及时间对微型
凝胶柱的分离能力有很大影响, 转速过低则醇质体
的洗脱速度较慢, 稀释倍数增大, 造成药物的泄露;
转速过高则容易引起凝胶柱的断裂而导致分离效果
不好。经实验证实, 3 000 r/ min离心 3 min 能够达
到理想的分离效果。
洗脱游离药物过程中,为加快速率,将洗脱体积
加大至每次 0
5 mL,既节约了时间又达到了较好的
分离效果。
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银杏内酯注射液的 HPLC指纹图谱研究
章晨峰1, 2 ,付小环2 , 毕宇安2 , 尚
强2 ,王振中2 ,盛龙生1 * 
( 1
中国药科大学,江苏 南京
210009; 2
江苏康缘药业股份有限公司, 江苏 连云港
222001)
摘
要:目的
建立银杏内酯注射液的合适质量控制方法。方法
采用 H PLC/ ELSD 法, 指纹图谱相似度用中药
色谱指纹图谱相似度评价系统(版本 2004A )计算。结果
10 批注射液的指纹图谱相似度均大于 0
95,确定了 4 个
共有峰,建立了该注射液的指纹图谱。结论
本法可作为银杏内酯注射液的质量控制方法。
关键词:银杏内酯注射液; 指纹图谱; H PLC/ ELSD
中图分类号: R286
02


文献标识码: A


文章编号: 02532670( 2010) 10163703
HPLC Fingerprint of Ginkgolide Injection
ZHANG Chenfeng1, 2 , FU Xiaohuan2 , BI Yuan2 , SHANG Q iang2 , WANG Zhenzhong2 ,
SHENG Longsheng1
( 1
China Pharmaceutical U niversit y, Nanjing 210009, China; 2
Jiangsu Kanion Pha rmaceutica l Co
, L td
,
L ianyungang 222001, China)
Abstract: Objective
T o establish the proper quality cont ro l method for Ginkgo lide Inject ion
Methods
The Ginkgo lide Injection w as analyzed by using HPLC/ ELSD technolog y
The sim ilar ity of f ing erprints
w as calculated by the S imi lar ity Ev aluation Sy stem f or Chromatographic Fingerp rint of Chinese T radi
tional M edicine ( Version 2004A )
Results
Similarity o f ten batches of inject ions w as all over 0
95
The
fingerprint for Ginkgo lide Inject ion was established and four common peaks w ere indicated
Conclusion

This method is suitable for the quality cont rol of Ginkgolide Inject ion

Key words: Ginkgo lide Injection; fingerprint ; HPLC/ ELSD


银杏内酯是银杏叶中含有的一组具有较强生物 活性的萜类化合物, 已分离得到的包括银杏内酯
1637 中草药
Chinese Traditional and Herbal Drugs
第 41 卷第 10 期 2010 年 10月
收稿日期: 20100415





















基金项目:国家 863计划课题( 2002AA2Z3215, 2005AA2Z3E60)作者简介:章晨峰( 1976 ! ) ,男,江西抚州市人,工程师,博士,主要从事中药质量控制方法研究。
T el : ( 0518)85521955
Email: zh angchen f@ 163
com
* 通讯作者
盛龙生
T el: ( 025) 83307338
Email: sh englsh@ yahoo
com
cn
( ginkgolide) A, B, C, J, M , K, L 和白果内酯( bilob
alide) [ 13] ,研究发现它们是很强的血小管活化因子
( PAF)拮抗剂 [ 4] , 具有较好的应用前景。国外已有
BN52063(银杏内酯混合物)和 BN52021(银杏内酯
B)进入临床试验阶段 [ 5]。银杏内酯注射液是以银
杏总内酯为原料制成的注射液, 用于治疗缺血性中
风。内酯类化合物的一个特征是在碱性条件下开环
生成酸(羧酸型) ,与碱成盐;开环化合物在酸性条件
下又闭合成为内酯(内酯型)。现有的注射剂中银杏
内酯质量控制方法,在供试品溶液制备过程中主要
采用酸化后提取银杏内酯的方法[ 68] , 不能反映注射
剂中银杏内酯的实际存在状态。指纹图谱在中药的
质量控制方面优势显著 [ 910]。为了更好的控制银杏
内酯注射液的质量,本实验对银杏内酯注射液指纹
图谱进行了研究。
1
仪器与试药
高效液相色谱仪( Ag ilent 1100) , 配自动进样
器,双泵, 柱温箱; 蒸发光检测器( A lltech 2000) ; 电
子分析天平( M ett ler A E240)。
银杏内酯注射液( 25 mg/ 5 mL, 江苏康缘药业
股份有限公司) ; 银杏内酯 B(中国药品生物制品检
定所,批号 110863200305) ;甲醇、异丙醇(色谱纯,
美国天地公司) ;乙酸铵、乙酸(分析纯, 南京化学试
剂有限公司) ;水(超纯水)。
2
方法与结果
2
1
色谱条件: T hermo Hyper sil ODS 色谱柱( 250
mm ∀ 4
6 mm , 5 m) ;流动相: 甲醇50 mmol/ L 乙
酸铵水溶液( 10 #90) ,加乙酸调 pH 值为 7; 柱温 30
∃ ;气体流速 2
5 L/ m in;漂移管温度 110 ∃ ; 进样
量 10 L。
2
2
参照物溶液制备方法: 取银杏内酯 B对照品适
量,精密称定, 加 5%的葡甲胺溶液加热( 70 ∃ )使溶
解,滤过,取续滤液,制成 0
5 mg/ mL 的溶液,即得。
2
3
供试品溶液制备方法:取银杏内酯注射液直接
进样。
2
4
阴性样品溶液制备方法:除银杏总内酯原料外,
按注射液处方和制备工艺制成 100 mL 阴性样品。
2
5
阴性样品的影响: 取阴性样品溶液, 注入液相
色谱仪, 记录 40 m in色谱图,结果在保留时间 5 m in
前有多个峰出现,故选择中药指纹图谱相似度评价
系统(版本 2004A)处理图谱时,将 5 m in 前峰扣除。
2
6
记录时间的确定: 取供试品溶液, 注入液相色
谱仪,记录 60 m in色谱图,结果后 20 min 未见峰出
现,故记录时间确定为 40 min。
2
7
方法学考察
2
7
1
精密度试验:取批号为 060525的供试品溶
液,连续进样 6次测定, 结果表明, 供试液中各共有
峰的相对保留时间及主要峰的相对峰面积的 RSD
小于 3%。
2
7
2
稳定性试验:取批号为 060525的供试品溶
液,分别于 0、2、4、6、12 h测定,结果表明,供试品溶
液中各共有峰的相对保留时间及主要峰的相对峰面
积的 RSD小于 3%。
2
7
3
重复性试验:取批号为 060525的供试品溶
液五份,分别测定,结果表明,供试液中各共有峰的
相对 保 留 时 间及 主 要 峰 的 相 对 峰面 积 的
RSD小于 3%。
2
8
对照指纹图谱的建立与相似度分析: 取 10批
银杏内酯注射液和参照物溶液进行指纹图谱的测
定,把 10批注射液色谱图导入中药色谱指纹图谱相
似度评价系统 (版本 2004A) ,选择时间窗 0
1, 生成
色谱的方法为平均值, 对保留时间 5~ 40 min的色
谱峰进行自动匹配,匹配后色谱图见图 1, 生成的注
射液对照指纹图谱见图 2, 有 4 个共有峰( 1~ 3和
S) ,其中 S为银杏内酯 B 参照峰, 1号峰为银杏内酯
A。各批注射液与对照指纹图谱比较相似度在
0
977~ 0
994,平均值为 0
985, RSD为 0
48%, 见
表 1。
图 1
10 批样品匹配后的色谱图
Fig
1
Matched chromatograms for ten batches of samples
表 1
10 批注射液与注射液对照指纹图谱比较的相似度
Table 1
Similarity of fingerprint between ten batches
of injections and reference Ginkgolide Injection
批号 相似度 批号 相似度
060413 0
984 060720 0
988
060421 0
977 060818 0
982
060511 0
989 060906 0
984
060525 0
994 061112 0
982
060607 0
983 070103 0
988
3
讨论
色谱柱的选择: 选用了 3根不同厂家生产的 3
1638 中草药
Chinese Traditional and Herbal Drugs
第 41 卷第 10 期 2010 年 10月
图 2
银杏内酯注射液的对照指纹图谱
Fig
2
HPLCReference fingerprint
of Ginkgolide Injections
种色谱柱, Thermo Hyper sil ODS ( 250 mm ∀ 4
6
mm, 5 m) (美国 T hermo HypersilKeystone 公
司) ; Luna C18 ( 250 mm ∀ 4
6 mm, 5 m) (美国
Phenomenenex 公司) ; Zorbax SB C8 ( 250 mm ∀ 4
6
mm, 5 m) (美国 Agilent公司)进行实验筛选, 比
较分离度、峰型和柱效,结果 T hermo Hypersil ODS
( 250 mm ∀ 4
6 mm, 5 m)色谱柱较为适合。


流动相的选择: 选用不同比例的水/甲醇/四氢
呋喃体系和异丙醇/水体系洗脱,峰分离度不好;用
不同比例的水/甲醇体系洗脱, 分离度和峰型不佳;
故选用甲醇/乙酸铵水溶液体系为流动相,经试验确
定了溶剂比例,峰型、分离度、柱效均满意。
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正交设计优选竹节参总皂苷微波提取工艺的研究
欧阳丽娜1, 2 ,李兰林1, 3 ,吴
雪1, 3 ,向大位1, 3 , 孙晓博1, 3 , 向大雄1, 3 * 
( 1
中南大学湘雅二医院 中药与天然药物研究室, 湖南 长沙
410011; 2
岳阳市一人民医院 药剂科, 湖南 岳阳 414000;
3
中南大学药学院, 湖南 长沙
410013)
摘
要:目的
优选竹节人参总皂苷的微波提取工艺。方法
利用紫外分光光度法测定竹节参中总皂苷, 运用正
交试验设计,以总皂苷转移率为考察指标, 筛选最佳微波提取工艺; 并将其与加热回流提取法及超声提取法进行比
较。结果
微波提取竹节人参总皂苷的最佳提取工艺参数为: 乙醇体积分数 80% ,微波功率 400 W, 料液比 1# 18,
提取 4 次,每次提取 5 min。在此条件下,竹节人参总皂苷的转移率高达 97
77%。结论
微波提取工艺具有效率
高、时间短、能耗低、环保等优点, 为竹节人参总皂苷的工业化生产和新药开发提供了参考。
关键词:竹节人参; 总皂苷;微波提取; 正交设计;含量测定
中图分类号: R286
02


文献标识码: A


文章编号: 02532670( 2010) 10163904


竹节参为五加科植物竹节参 Panax j ap onicus
C
A
Mey
的干燥呈竹鞭状根茎, 广泛分布于日
本及中国西南至中部地区 [ 1] ,存在羽叶三七、狭叶竹
节参及珠子参等变种[ 2]。其性温、味甘、微苦, 具有
滋补强壮,散瘀止痛, 止血祛痰等功效[ 3] ,兼具我国
北药人参和南药三七的功用, 享有%土家族神参&的
美誉。现代药理学研究表明,竹节参中研究最多、功
效最显著的为皂苷类化合物,具有抗炎、抗氧化、抗
1639 中草药
Chinese Traditional and Herbal Drugs
第 41 卷第 10 期 2010 年 10月
收稿日期: 20100227





















基金项目:湖南省中医药科研计划项目( 2009062)作者简介:欧阳丽娜( 1984 ! ) ,女,湖南岳阳人,主要从事药物新资源与新剂型的开发。
T el : ( 0731)5292093
Email: ouyan glina410@ 126
com
* 通讯作者
向大雄
T el: ( 0731) 5292093
Email: xiangdax ion g@ 163
com