全 文 ：(1 H ,d ,J = 119 Hz , H28) ,6144 (1 H ,d , J = 119 Hz ,
H26) , 5154 ( 1 H , s , H21Ê) , 5138 ( 1 H , s , H21″) ,
4122～3128 (8 H ,m , H22″～5″,2Ê～5Ê) ,1125 (3 H ,
d , J = 611 Hz , H26″) , 0192 ( 3 H , d , J = 515 Hz ,
H26Ê) 。13 C2NMR (CD3 OD)δ:15810 (C22) ,13615 (C2
3) ,17917 (C24) ,16219 ( C25) ,9918 ( C26) ,16315 ( C2
7) ,9516 (C28) ,16118 (C29) ,10715 (C210) ,12214 (C2
1′) ,13210 (C22′,6′) ,11616 (C23′,5′) ,15918 (C24′) ,
10315 ( C21″) ,10015 ( C21Ê) ,7316～7113 ( C22″～5″,
2Ê～5Ê) ,18016 ( C26″) , 1717 (2C26Ê) 。以上光谱数
据均与文献报道[10 ] 一致 ,故鉴定化合物 11 为山柰
酚23 ,72O2α2L2二鼠李糖苷。
化合物 12 :黄色粉末 (甲醇) , TL C 喷 AlCl32乙
醇液 ,紫外 (365 nm) 下显黄色荧光 ,盐酸2镁粉反应
阳性 ,Molish 反应阳性 ,提示该化合物为黄酮苷类
化合物。mp 180～ 181 ℃, 分子式为 C21 H20 O11 。
1 H2NMR (DMSO2d6 )δ:12162 (1 H ,s ,52O H) ,10181
(1 H , brs , 72O H ) , 10115 ( 1 H , brs , 4′2O H ) , 8105
(2 H ,dd , J = 219 ,916 Hz , H22′,6′) ,6188 (2 H , dd ,
J = 219 , 916 Hz , H23′,5′) , 6142 ( 1 H , d , J =
211 Hz , H28) ,6120 (1 H ,d , J = 211 Hz , H26) ,5145
(1 H ,d , J = 715 Hz , H21″糖端基质子 ,示苷键为β
构型) 。13 C2NMR (DMSO2d6 )δ:17714 (C24) ,16411
(C27) , 16112 ( C25 ) , 15918 ( C24′) , 15613 ( C29 ) ,
15612 ( C22) , 13311 ( C23) , 13018 ( C22′, 6′) , 12018
(C21′) , 11510 ( C23′, 5′) , 10319 ( C210) , 10018 ( C2
1″) ,9816 ( C26) , 9316 ( C28) , 7715 ( C25″) , 7614 ( C2
3″) ,7411 ( C22″) ,6919 ( C24″) ,6016 ( C26″) 。综合各
光谱数据及与文献对比鉴定为山柰酚232O2β2D2葡
萄糖苷[11 ] 。
参考文献 :
[1 ] 　龙运光1 侗族常用药物图鉴 [ M ]1 贵阳 : 贵州科技出版社 ,
20071
[2 ] 　魏友霞 , 陈　立 , 王军宪1 狭叶米口袋化学成分研究 [J ]1 中
药材 , 2007 , 30 (8) : 95429561
[3 ] 　唐　丽 , 李国玉 , 杨炳友 , 等1 广枣化学成分的研究 [J ]1 中
草药 , 2009 , 40 (4) : 54125431
[4 ] 　秦　波 , 鲁润华 , 汪汉卿 , 等 1 地涌金莲化学成分的研究
[J ]1 天然产物研究与开发 , 2000 , 12 (2) : 411
[5 ] 　刘有强 , 孔令义1 闹羊花中黄酮类成分研究 [J ]1 中草药 ,
2009 , 40 (2) : 19922011
[6 ] 　Markham K R , Ternal B , Stanley R , et al1 Carbon213 NMR
studies of flavonoids Ⅲ [J ]1 Tet rahedron , 1978 , 34 : 13891
[7 ] 　龚运淮1 天然产物核磁共振碳谱分析 [ M]1 昆明 : 云南科技
出版社 , 19861
[8 ] 　柳建军 , 刘锡葵 1 黄连木食用部位化学成分研究 [J ]1 中草
药 , 2009 , 40 (2) : 18621891
[9 ] 　刘　洋 , 邓玉林 , 张经华 , 等1 白蕊草中黄酮类化合物的研
究 [J ]1 中药材 , 2009 , 32 (4) : 51825191
[ 10 ] 　魏　峰 , 阎文枚 1 山野豌豆黄酮类化学成分的研究 [J ]1 药
学学报 , 1997 , 32 (10) : 76527681
[ 11 ] 　陈　君 , 许小方 , 柴光云1 灰毡毛忍冬花蕾的化学成分 [J ]1
中国天然药物 , 2006 , 4 (5) : 34723511
连翘水提物化学成分研究
栾 　兰1 ,2 ,王钢力2 ,林瑞超2
①
(11 北京中医药大学中药学院 ,北京 　100029 ; 21 中国药品生物制品检定所 ,北京 　100050)
摘 　要 :目的 　分离鉴定连翘 Forsy thia sus pensa 水提物中的化学成分。方法 　采用薄层色谱、硅胶柱色谱、凝胶
柱色谱和制备高效液相色谱进行分离纯化 , 通过理化方法和1 H2NMR、13 C2NMR等谱学技术进行结构鉴定。结果
分离得到 9 个化合物 ,鉴定为β2谷甾醇 (β2sitosterol ,1) 、齐墩果酸 (oleanolic acid ,2) 、丁二酸 ( succinic acid ,3) 、正三
十二烷 ( n2dotriacontane ,4) 、对羟基苯甲醛 (42hydroxybenzaldehyde ,5) 、槲皮素 (quercetin ,6) 、连翘苷 (phillyrin ,7) 、
连翘醇 (rengyol ,8) 、连翘酯苷 A (forsythoside A ,9) 。结论 　化合物 4、5 为首次从该属植物中分得。
关键词 :连翘 ;连翘苷 ;连翘酯苷 A
中图分类号 :R28411 　　　文献标识码 :A 　　　文章编号 :0253 - 2670 (2010) 06 - 0883 - 02
　　连翘为木犀科连翘属植物连翘 Fors y t hi a sus2
pensa ( Thunb1 ) Vahl 的干燥果实 ,具有清热解毒、 消肿散结之功效 ,主治温热、丹毒、斑疹、疮疡肿毒、瘰疬等症[1 ] 。本实验以连翘水提取物为原料 ,通过
·388·中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 41 卷第 6 期 2010 年 6 月
①收稿日期 :2009212230　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
作者简介 :栾　兰 (1978 —) ,女 ,辽宁大连人 ,在读博士研究生 ,研究方向为中药化学成分与质量控制研究。　
Tel : (010) 67095387 　13426061652 　E2mail :luan9896 @1261com3 通讯作者　林瑞超　Tel : (010) 67095307 　Fax : (010) 67023650
柱色谱等手段 ,对其化学成分进行了初步研究。分
离得到 9 个化合物 ,鉴定为β2谷甾醇 (β2sito sterol ,
1) 、齐墩果酸 (oleanolic acid , 2 ) 、丁二酸 ( succinic
acid ,3) 、正三十二烷 ( n2dot riacontane ,4) 、对羟基苯
甲醛 (42hydroxybenzaldehyde , 5) 、槲皮素 ( querce2
tin ,6) 、连翘苷 (p hillyrin ,7) 、连翘醇 (rengyol ,8) 、连
翘酯苷 A (forsyt hoside A ,9) 。其中化合物 4、5 为
首次从该属植物中分得。
1 　仪器与材料
INOVA —500 和 INOVA —400 型核磁共振仪
(Varian 公司) 。Waters L C2MS Q Z2000 型质谱仪
( Waters 公司 ) 和 Autospec2Ultima ETO F 型质谱
仪。高效液相制备色谱 ( Waters 公司) , Pharmadex
L H220 (安发玛西亚生物技术上海有限公司) 。薄层
色谱硅胶 (烟台市化学工业研究所) 和柱色谱硅胶
(青岛海洋化工厂) 。连翘水提取物由哈药集团中药
二厂提供。
2 　提取与分离
连翘水提取物 266 g ,加入 10 倍量水分散 ,经不
同体积的氯仿、醋酸乙酯、正丁醇萃取 3 次 ,得醋酸
乙酯部位 (约 72 g) 、正丁醇部位 (约 196 g) 。醋酸乙
酯部位以硅胶柱色谱 ,二氯甲烷2甲醇系统梯度洗
脱 ,得化合物 1 (312 mg) 、3 (3010 mg) 、5 (1012 mg) 、
8 (2010 mg) ;部分流份再分别以凝胶柱色谱分离 ,
甲醇2水系统梯度洗脱 ,得化合物 6 (918 mg) ;正丁
醇部分以硅胶柱色谱 ,二氯甲烷2甲醇系统梯度洗
脱 ,得化合物 2 (213 mg) 、4 (817 mg) 、7 (40 mg) 、8
(100 mg) ,部分流份再经高效液相制备色谱 ,甲醇2
水系统梯度洗脱 ,得化合物 9 (413 mg) 。
3 　结构鉴定
化合物 1 : 白色针晶 (二氯甲烷2甲醇 ) , mp
138～140 ℃,Liebermann2Burchard 反应阳性 ,推测
为甾体类物质 , EI 给出分子离子峰m/ z 414 [ M ] + ,
TL C 检测 ,与β2谷甾醇有相同的 Rf 值 ,且混合后其
熔点不下降 ,故确定该化合物为β2谷甾醇。
化合物 2 :白色簇晶 (二氯甲烷2甲醇) ,Lieber2
mann2Burchard 反应阳性 ,1 H2NMR、13 C2NMR谱显
示 ,该化合物可能属于三萜类化合物 ,结构中含有 7
个 CH3 ,薄层色谱与齐墩果酸对照品一致 ,其光谱
数据与文献报道[2 ] 基本一致 ,故确定该化合物为齐
墩果酸。
化合物 3 :白色片状结晶 (甲醇) ,从1 H2NMR上
看δ2151 为 2 H 的单峰 ,在溶剂甲醇峰处有羟基信
号 ,结合13 C2NMR中δ17612 羰基峰 ,推测化合物可
能为丁二酸 ,薄层色谱与对照品一致 ,确定该化合物
为丁二酸。
化合物 4 :白色固体 (二氯甲烷) 。EI2MS m/ z :
450 ,437 ,423 ,408 ,394 ,127 ,113 ,99 ,85 ,71 ,57 显示
出长链烷烃的典型质谱图 ; 1 H2NMR ( 500 M Hz ,
CDCl3 )δ: 0188 ( 6 H , t , J = 615 Hz , 2CH3 ) , 1125
(30 ×CH2 ) ;与文献对照[ 3 ]基本一致 ,故确定该化合
物为正三十二烷。
化合物 5 :淡黄色固体 (甲醇) 。1 H2NMR (500
M Hz ,CD3 OD)在δ9171 (1 H ,s) 处提示该化合物含
有一个醛基氢 ,δ6185 (2 H , dd , J = 814 Hz) , 7171
(2 H ,dd ,J = 814 Hz) ,在1 H2NMR中没有其他的氢
信号 ,结合13 C2NMR提示该化合物为对位或邻位取代
苯结构 ,将光谱数据与对羟基苯甲醛的文献数据[4 ]对
比 ,完全一致 ,故确定该化合物为对羟基苯甲醛。
化合物 6 :黄色粉末 (甲醇2水) 。1 H2NMR (400
M Hz ,DMSO)在δ12148 (1 H ,s)的氢信号为黄酮类
化合物典型的 5 位羟基信号 ;δ10175 (1 H ,s) ,9156
(1 H ,s) ,91 34 (1 H ,s) 和 9128 (1 H ,s) 的 4 个单峰为
另外 4 个羟基信号 ;δ 7166 ( 1 H , d , J = 210 Hz) ,
7152 (1 H , dd , J = 210 , 814 Hz) 与 618 ( 1 H , d , J =
814 Hz)的 3 个氢原子彼此偶合信号 ,应为黄酮母
核 B 环上 ABX 偶合的 3 个氢 ;δ6140 (1 H , d , J =
210 Hz)与 6118 (1 H ,d , J = 210 Hz) 的两氢应为 A
环上的两个间位偶合氢。13 C2NMR ( 400 M Hz ,
DMSO) 谱给出 15 个碳信号 ,δ14618 ( C22) ,13517
(C23) ,17518 (C24) ,16017 ( C25) ,9811 ( C26) ,16318
(C27) ,9313 (C28) ,15611 (C29) ,10310 (C210) ,12119
(C21′) , 11516 ( C22′) , 14510 ( C23′) , 14717 ( C24′) ,
11510 (C25′) ,12010 ( C26′) 。上述数据与文献报道
的数据[5 ]对照相一致 ,故确认该化合物为槲皮素。
化合 物 7 : 白 色 粉 末 ( 二 氯 甲 烷2甲 醇 ) 。
1 H2NMR (500 M Hz ,DMSO) 在δ618～710 处有芳
氢信号 ,结合 13 C2NMR ,提示化合物中含有苯环。
13 C2NMR中 ,δ6017 ,7013 ,7312 ,7618 ,7710 ,10011
提示该化合物含有葡萄糖 ;δ 5516 , 5514 结合
1 H2NMR可知为 3 个 OCH3 信号 ;δ 6819 , 6916 ,
8112 ,8616 为 4 个连氧碳信号 ;δ10914～14819 为
12 个芳碳信号 ,且其中 4 个与氧相连 ,经与文献对
照[1 ] ,数据与连翘苷完全一致 ,故确定该化合物为连
翘苷。
化合物 8 : 白色片状结晶 (二氯甲烷2甲醇 ) 。
1 H2NMR ( 4 0 0 M Hz , CD3 OD )δ: 11 3 1～ 11 6 8 、
(下转第 917 页)
·488· 中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 41 卷第 6 期 2010 年 6 月
21116 　精密度试验 :于不同时间精密吸取葛根素对
照品液 10μL 进样 ,测定峰面积 ,计算 ,结果 RSD 为
0181 %。精密吸取葛根素对照品溶液 10μL 注入液
相色谱仪 ,测定峰面积 ,连续测定 5 d ,结果 RSD 为
0151 %。
21117 　稳定性试验 :取本品样品 ,照溶出度测定项
下方法制备供试品溶液 ,分别于 0、1、2、4、6 h ,取样
10μL 注入液相色谱仪 ,分别记录峰面积 ,结果表
明 :供试品溶液在 6 h 内稳定 ,RSD 为 2123 %。
21118 　回收率试验 :取本品阴性 6 片 ,分别加入不
同量的葛根素对照品 ,以脱气的蒸馏水 500 mL 为
溶剂 ,照溶出测定项下的方法 ,测定 ,计算回收率 ,结
果平均回收率为 9818 % ,RSD 为 2114 %。
212 　溶出度的测定
21211 　样品中葛根素测定[5 ] :取本品 10 片 ,精密称
定 ,研细 ,取 0105 g ,精密称定 ,置具塞锥形瓶中 ,精
密加入 30 %乙醇 50 mL ,密塞 ,称定质量 ,超声处理
30 min ,取出 ,放冷 ,再称定质量 ,用 30 %乙醇补足
减失的质量 ,摇匀 ,滤过 ,取续滤液作为供试品溶液 ,
取供试品溶液 10 μL 进样测定 , 并以此量作为
100 %溶出时的参考值。
21212 　溶出曲线的制备 :取本品 6 片 ,以脱气的蒸
馏水 500 mL 为溶出介质 ,温度控制在 37 ℃±015
℃,转速 100 r/ min ,供试品进入释放池瞬间开始记
时 ,分别在 3、5、10、20、30、40、50、60 min 时取样 2
mL (同时补充等体积相同温度的溶出介质) ,立即滤
过 ,续滤液高速离心后 ,取上清液进样 ,测定葛根素
的质量浓度 ,计算相对累积溶出率。以取样时间为
横坐标 ,葛根素累积溶出率为纵坐标作图得愈风宁
心分散片出曲线 ,见图 1 。结果显示 ,愈风宁心分散
片在 50 min 时溶出接近 90 % ,具有良好的溶出度。
图 1 　葛根素溶出曲线图
Fig. 1 　Stripping curve of puerarin
3 　讨论
愈风宁心分散片由葛根单味药制成 ,葛根中所
含有效成分为葛根异黄酮 ,其中以葛根素为代表 ,因
而将葛根素作为指标 ,对愈风宁心分散片的溶出度
进行检查。
愈风宁心片剂改为分散片后 ,在 50 min 时溶出
接近 90 %。市售愈风宁心片 45 min 时溶出率未到
50 %[ 6 ] ,可见葛根素的溶出速度明显提高。所以将
愈风宁心片改制成分散片后可提高其溶出度 ,提高
生物利用度。
参考文献 :
[ 1 ] 　刘　娜 ,张贵君 ,金哲雄 ,等1 葛根解表药效组分分析 [J ]1 现
代药物与临床 ,2009 ,24 (5) :29422961
[ 2 ] 　金昔陆 ,朱秀垦1 葛根素在大鼠、家兔、犬中的动物动力学[J ]1
中国药理学报 ,1992 ,13 (5) :2841
[ 3 ] 　崔福德1 药剂学[ M ]1 北京 :人民卫生出版社 ,20071
[ 4 ] 　吴素香 ,姜宁华1 葛根芩连分散片的制备和葛根素的体外溶出
度考察[J ]1 中国医院药学杂志 ,2007 ,27 (5) :6401
[ 5 ] 　邱智东 ,董金香 ,王 凯1 康心滴丸中葛根素的 HPLC 测定[J ]1
中草药 ,2005 ,36 (10) :15051
[ 6 ] 　程　静 ,钱一鑫1 愈风宁心分散片的制备及体外溶出度的研究
[J ]1 山地农业生物学报 ,2009 ,28 (1) :931
　　(上接第 884 页)
3144～3170 为脂肪氢信号 ; 13 C2NMR中δ 7018 ,
5912 为连氧碳信号 ,与文献对照[1 ] ,其数据与连翘
醇的数据完全一致 ,故确定该化合物为连翘醇。
化合物 9 :白色粉末 (甲醇2水) 。1 H2NMR (400
M Hz ,CD3 OD)在δ4130 (1 H ,d ,J = 716 Hz)为葡萄
糖的端基氢 ,且为β构型 ,结合13 C2NMR ,该化合物
含有葡萄糖和鼠李糖 ,其中葡萄糖的 C26 化学位移
向低场位移约 7 ,可知鼠李糖连在此位置上 ;δ7156
(1 H ,d , J = 16 Hz) ,6125 (1 H ,d , J = 1519 Hz) 为环
外双键氢。13 C2NMR中 ,δ11417～14917 含有 14 个
双键碳 ,结合1 H2NMR可知该化合物可能含有两个
苯环 ;δ 3616 , 7213 提示含有2CH22CH22O2结构。
13 C2NMR (400 M Hz ,CD3 OD)δ:13114 (C21) ,11711 (C22) ,14611 (C23) ,14417 (C24) ,11613 (C25) ,12113(C26 ) , 3617 ( C27 ) , 12717 ( C21′) , 11512 ( C22′) ,14618 (C23′) ,14917 ( C24′) ,11613 ( C25′) ,12311 ( C26′) ,14717 (C27′) ,11417 ( C28′) 。结合文献 ,推测该化合物可能为连翘酯苷 A ,其数据与文献对照[1 ] ,基本一致 ,故确定该化合物为连翘酯苷 A。参考文献 :[1 ] 　刘　悦1 连翘水提物的化学成分 [ D]1 沈阳 : 沈阳药科大学 ,20031[2 ] 　高　辉 , 马小军 , 温学森1 巴西人参的化学成分研究 [J ]1 中草药 , 2009 , 40 (4) : 52225251[3 ] 　张前军 , 杨小生 , 朱海燕 , 等1 假木豆脂溶性成分研究 [J ]1贵州大学学报 :自然科学版 , 2006 , 23 (3) : 27022711[4 ] 　李药兰 , 戴　杰 , 黄伟欢 , 等1 黄花倒水莲化学成分及其抗病毒活性 [J ]1 中草药 , 2009 , 40 (3) : 34523481[5 ] 　刘有强 , 孔令义1 闹羊花中的黄酮类成分研究 [J ]1 中草药 ,2009 , 40 (2) : 19922011
·719·中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 41 卷第 6 期 2010 年 6 月