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六味地黄加味胶囊对糖尿病肾病大鼠肾脏蛋白激酶 C活性
及结缔组织生长因子的影响
唐　庆1 ,胡 　慧1 ,王全胜1 ,范 　恒1
①
,马晓红2
(11 华中科技大学同济医学院 协和医院 ,湖北 武汉 　430022 ; 21 湖北中医学院 ,湖北 武汉 　430065)
摘 　要 :目的 　观察六味地黄加味胶囊对糖尿病肾病 (DN) 大鼠肾脏的保护作用 ,对肾脏蛋白激酶 C ( P KC) 活性
及结缔组织生长因子 (CT GF) 表达的影响。方法 　ip 链脲佐菌素 (STZ) 建立大鼠 DN 模型 ,模型成功后随机分
为 5 组 :对照组、模型组、洛汀新组、六味地黄加味胶囊组、洛汀新与六味地黄加味胶囊合用组 ,药物干预 12 周后 ,
透射电镜观察各组大鼠肾脏超微结构 ,免疫组织化学法检查肾皮质 CT GF 表达 ,检测相对肾质量、血糖、尿白蛋白
排泄率 (U PER) 、血肌酐 (SCr) 、尿肌酐 (UCr) 、内生肌酐清除率 (CCr) 、肾脏 P KC 活性等。结果 　DN 大鼠肾脏
胶原沉积明显 ,相对肾质量、血糖、U PER、CCr、肾脏 P KC 活性、肾皮质 CT GF 表达等显著升高 ,洛汀新、六味地黄
加味胶囊及两药合用均可降低肾脏 P KC 活性和肾皮质 CT GF 的表达 ,改善 DN 大鼠蛋白尿、肾功能 ,减轻肾脏胶
原沉积 ,两药合用能更显著降低肾脏 P KC 活性、肾皮质 CT GF 的表达 ,降低蛋白尿和改善肾功能作用更强。结论
洛汀新、六味地黄加味胶囊及两药合用均能保护 DN 大鼠肾脏 ,且两药合用较单用洛汀新作用更强。
关键词 :六味地黄加味胶囊 ; 糖尿病肾病 ; 蛋白激酶 C ; 结缔组织生长因子
中图分类号 :R28515 　　　文献标识码 :A 　　　文章编号 :0253 - 2670 (2010) 01 - 0077 - 05
Effects of Liuwei Dihuang Jia wei Capsula on renal protein kinase C activity
and connective tissue growth factor of diabetic nephropathy rats
TAN G Qing1 , HU Hui1 , WAN G Quan2sheng1 , FAN Heng1 , MA Xiao2hong2
(11 Union Hospital , Tongji Medical College , Huazhong University of Science and Technology , Wuhan 430022 , China ;
2. Hubei College of Traditional Chinese Medicine , Wuhan 430065 , China)
Abstract : Objective 　To investigate t he p rotection of Liuwei Dihuang J iawei Cap sula (LDJ Cap sula ,
Rehmanniae Cap sula of Six Ingredient s) on diabetic nep hropathy (DN) rat s′kidney and effect on renal p ro2
tein kinase C ( P KC) activity and connective tissue growth factor (CT GF) of DN rat s. Methods 　The DN
rat models were induced by ip injection of st rep tozotocin (STZ) . The rat s were randomly divided into five
group s : cont rol group ; DN model group ; Lotensin group ; LDJ Cap sula group ; and Lotensis and LDJ Cap2
sula combination group . Drug intervention term was 12 weeks. Renal ult rast ruct ure was observed by
t ransmission elect ron microscope and Masson staining. Relative kidney weight , blood glucose level , serum
and urine creatinine content , creatinine clearance , excretion rate of t he 24 hour urine p rotein , renal P KC
activity , and CT GF expression in renal cortex were measured by immunohistochemist ry. Results 　Deposi2
tion of collagen in renal of DN rat s was conspicuous. Relative kidney weight , blood glucose level , serum
and urine creatinine content , creatinine clearance , excretion rate of 24 h urine p rotein , renal P KC activity
and CT GF expression of DN rat s increased obviously. All Lotensin , LDJ Cap sula , and t he combination of
these two drugs could decrease renal P KC activity and CT GF expression and ameliorate p roteinuria and
renal f unction of DN rat s. At t he same time t hey all could abate t he deposition of collagen in renal of DN
rat s. Combination of t hese two drugs could decrease renal P KC activity and CT GF expression more ob2
viously and at t he same time had more notable p rotective effect on kidney of DN rat s. Conclusion 　All
·77·中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 41 卷第 1 期 2010 年 1 月
①　　收稿日期 :2009203216
　　基金项目 :国家自然科学基金资助项目 (30600810)
　　作者简介 :唐　庆 (1976 —) ,男 ,湖北人 ,主治医师 ,讲师 ,博士 ,主要从事中西医结合治疗肾脏疾病研究。
Tel : (027) 85726395 　E2mail : tqing405 @yahoo. com. cn
　　3 通讯作者　范　恒　Tel : (027) 63889899 　E2mail : Fanheng @yahoo. com. cn
Lotensin , LDJ Cap sula , and t he combination of these two drugs could protect kidney of DN rat s. The
combination of t hese two drugs has more obviously p rotective effect t han using Lotensin only.
Key words : Liuwei Dihuang J iawei Cap sula (LDJ Cap sula ) ; diabetic nep hropat hy ( DN ) ; p rotein
kinase C ( P KC) ; connective tissue growt h factor (CT GF)
　　糖尿病肾病 (diabetic nep hropat hy , DN) 是糖
尿病最常见的合并症 ,在多种炎症因子的作用下
DN 患者出现肾脏纤维化 ,最终导致肾功能衰竭 ,是
糖尿病患者死亡的主要原因之一。在因肾衰竭而进
行透析或肾移植治疗中 ,DN 占 25 %～30 % ,是终
末期肾病的最常见原因。因此及早治疗对改善 DN
预后至关重要。大量实验及临床研究表明中药经典
方剂六味地黄丸及其相关改良剂型对糖尿病具有治
疗作用 ,同时对糖尿病并发症 DN 等具有明显的保
护作用[1 ,2 ] ,临床应用也比较广泛。本实验继续研
究六味地黄加味胶囊治疗 DN 作用 ,并探讨其作用
机制 ,进一步从实验角度证实该方疗效及其作用机
制 ,为六味地黄加味胶囊的临床应用提供理论依据。
1 　材料
111 　实验动物 : 雄性 SD 大鼠 60 只 , 体质量
(180 ±20) g ,由华中科技大学同济医学院实验动物
中心提供[合格证号 :SCXK(鄂) 2004220028 ]。
112 　实验用药 :六味地黄加味胶囊组方为熟地、山
萸肉、山药、泽泻、丹皮、茯苓、黄芪、丹参、金樱子 ,以
上中药材饮片由湖北省金新龙中药饮片有限公司提
供 ,六味地黄加味胶囊由湖北省中医院药剂科制备 ,
相当于生药 311 g/ g ,其中含熊果酸 > 0103 % ,含丹
皮酚 > 0115 % (使用前用生理盐水配成混悬液) 。
洛汀新由北京诺华制药有限公司生产 ,批号 04024。
113 　主要试剂 :链脲佐菌素 ( STZ) 购自 Sigma 公
司 ;兔抗大鼠结缔组织生长因子 (CT GF) 多克隆抗
体及 SP 免疫试剂盒 (北京博奥森生物技术有限公
司) 。蛋白激酶 C ( P KC) 测定试剂盒购自 Gibco 公
司 ;γ—32 P —A TP 购自 DuPond N EN ,转化生长因
子2β1 ( T GF2β1 ) EL ISA 试剂盒购自 Genzyme
公司。
114 　主要仪器 :自动生化分析仪 (美国 Beckman
公司) ; H —600 型透射电镜 ; 754 型紫外2可见光分
光光度计 (上海第三分析仪器厂) ; SPR —960 型自
动酶标分析仪 (长春赛诺迈德公司) 。
2 　方法
211 　模型制备、分组及给药 :随机将 60 只大鼠分
为 5 个组 (每组 12 只) ,分别为对照组、模型组、洛
汀新组、六味地黄加味胶囊组、洛汀新与六味地黄加
味胶囊合用组。造模方法 :动物适应性喂养 1 周后 ,
禁食 12 h ,将 STZ 溶解于 011 mol/ L 枸橼酸钠缓
冲液 (p H 4. 5) 中 ,按 65 mg/ kg 一次性 ip 给药制
备糖尿病大鼠模型。造模后称体质量 ,观察 24 h 尿
量、饮食量、饮水量 ,并每日检测血糖、尿糖 ,连续 3
d 空腹血糖值 > 16. 7 mmol/ L 、尿糖定性 + + 以上、
尿量增加 1 倍以上为糖尿病模型形成。再继续喂养
1 周 ,随机抽取两只动物测尿微量白蛋白 ,尿微量白
蛋白 > 15μg/ mL ,确定 DN 模型形成。造模成功后
进行药物干预。洛汀新组 :将洛汀新研磨溶于生理
盐水中 ,按 10 mg/ kg ig 给药 ;六味地黄加味胶囊
组 :按成人与大鼠药物剂量比[3 ] ,大鼠 ig 六味地黄
加味胶囊生药 1515 g/ kg ;洛汀新与六味地黄加味
服囊合用组 :早晨 ig 10 mg/ kg 洛汀新 ,中午 ig 生
药 1515 g/ kg 六味地黄加味胶囊 ;对照组和模型组
ig 生理盐水 (体积为 2 mL/ 200 g) ,药物干预时间
为 12 周。干预期间全部大鼠标准饮食 ,不使用胰岛
素及其他降糖药物。
212 　标本收集
21211 　收集尿液、血清、肾脏标本 :实验结束前 1
天 ,用代谢笼收集 24 h 尿液 ,记录 24 h 尿量及饮水
量。药物干预结束后用 10 % 水合氯醛 ip 麻醉大
鼠 ,称体质量 ,腹主动脉取血 ,分离血清 , - 20 ℃保
存备用 ;取肾脏 ,左肾用于病理切片 ,右侧肾脏去包
膜清洗后称质量 ,置液氮保存 ,备测 P KC 活性。空
腹血糖值低于 1111 mmol/ L 的大鼠从糖尿病各组
中排除 ,实验结束时 ,糖尿病各组共排除 4 只大鼠 ,
另有 4 只大鼠死亡 ,最终共 52 只大鼠纳入实验。
21212 　肾皮质细胞胞液和膜成分的分离 :分离肾皮
质 ,每 100 mg 肾皮质组织加入 110 mL 缓冲液 1
(20 mmol/ L Tris 、0. 5 mmol/ L EGTA 、0. 5 mmol/ L
ED TA、10 mmol/ L β2巯基乙醇、01025 mg/ mL 牛
胰蛋白酶抑制剂、01025 mg/ mL 亮抑蛋白肽 ,p H
7. 5) ,在冰上充分匀浆 ,匀浆液于 4 ℃、2 000 ×g 离
心 15 min ,弃沉淀物 (去除细胞核、未破碎的细胞及
组织) 。再于 4 ℃、10 000 ×g 离心 60 min ,上清液
即为胞液成分 ,用于检测胞液 P KC 活性。于冰浴
中沉淀物用缓冲液 2 (含 015 % Triton X —100 的
缓冲液 1 ,p H 7. 5) 匀浆 ,匀浆液于 4 ℃、2 000 ×g
·87· 中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 41 卷第 1 期 2010 年 1 月
离心 15 min ,所得上清液即为去污剂溶解的膜制
剂 ,用于检测胞膜 P KC 活性。
213 　观察指标和测定方法
21311 　相对肾质量、血液及尿液生化指标测定 :取
大鼠左肾 ,精确称质量 ,按下式计算相对肾质量 (肾
质量/ 体质量) ;血糖、尿白蛋白排泄率 ( U PER) 、血
肌酐 (SCr) 、尿肌酐 ( UCr) 采用 Beckman 自动生
化分析仪检测 ,并按下式计算内生肌酐清除率
(CCr , CCr = UCr (μmol/ L ) ×尿量 ( mL/ min) /
SCr (μmol/ L) ; EL ISA 法检测血清 T GF2β1 水平。
21312 　肾脏超微病理结构观察 :取肾皮质 ,剪成 1
mm
3大小。21 5 % 戊二醛预固定、1 % 锇酸固定、脱
水、环氧树脂包埋、切片、枸橼酸铅染色、装片 ,8 000
倍透射电镜下观察肾小球毛细血管基底膜、足细胞
等超微结构改变并摄片。
21313 　免疫组织化学法检测肾皮质 CT GF 表达 :
采用 SP 法检测肾皮质中的 CT GF 表达 ,按 SP 试
剂盒说明书进行。每张肾脏切片随机选取 10 个高
倍镜视野 (400 倍) ,用 HMIAS 2000 高清晰度彩色
病理图文分析系统对所选视野内的棕黄色阳性信号
进行图像灰度值分析 ,计算各组大鼠肾组织 CT GF
的平均阳性表达率。
21314 　P KC 活性测定 :取肾皮质细胞胞液和胞膜
制备剂分别用 Lowry 法进行蛋白定量后 ,采用
P KC 试剂盒方法测定胞液和胞膜中 P KC 活性 ,底
物为 髓 鞘 碱 性 蛋 白 肽 MBP4214 ( G1n2L ys22
Arg2Pro2Ser2 Gln2Arg2Ser2Lys2 Tyr2Leu ) , P KC
活性以单位时间内每毫克蛋白质催化 A TP 的
p mol 数表示。
214 　统计方法 :实验资料用 x ±s 表示 ,采用方差
分析 ,结果用 SPSS 1210 统计软件包处理。
3 　结果
311 　各组大鼠相对肾质量、血糖、U PER、CCr、血清
T GF2β1、肾皮质 CT GF 表达情况 :实验结束时 ,模
型组大鼠相对肾质量、血糖、U PER、CCr、血清
T GF2β1 水平均明显高于对照组 ( P < 0105、0101) ;
药物干预后 ,3 个药物组相对肾质量、U PER、CCr、
血清 T GF2β1 水平、肾皮质 CT GF 表达较模型组显
著降低 ( P < 0105、0101) ,血糖与模型组无明显差
异 ,洛汀新与六味地黄加味胶囊合用组 U PER、血
清 T GF2β1、肾皮质 CT GF 表达与洛汀新组比较显
著降低 ( P < 0105) 。见表 1。
312 　各组大鼠肾脏超微结构形态观察 :对照组大鼠
肾脏肾小球基底膜薄厚均匀 ,足细胞及内皮细胞结
构完整 ,足细胞足突排列整齐清晰。模型组肾小球
基底膜增厚 ,同一肾小球内不同部位基底膜厚薄差
异明显 ,足细胞肿胀 ,部分足突融合、甚至消失 ,部分
足突肥大。3 个给药组基底膜增厚都有所改善 ,肾
小球滤过膜的三层结构较清晰 ,足细胞无明显肿胀 ,
足突的融合减少。见图 1。
表 1 　各组大鼠相对肾质量、血糖、UPER、CCr、血清 TGF2β1、肾皮质 CTGF 表达情况 ( x ±s)
Table 1 　Relative kidney weight , blood glucose , UPER, CCr , TGF2β1 in serum, and CTGF expression
in renal cortex in every group of rats ( x ±s)
组 　别
剂量/
(g ·kg - 1 )
动物/
只
相对肾质量
血糖/
(mmol ·L - 1 )
U PER/
(mg ·24 h - 1 )
CCr/
(mL ·min - 1 )
T GF2β1/
(pg ·mL - 1 )
CTGF/
%
对照 　- 12 31 42 ±01 20 4188 ±01 74 121 5 ±113 21 22 ±01 21 4141 ±01 34 11 86 ±01 23
模型 　- 10 61 85 ±01 76 3 21150 ±41 12 3 3 611 6 ±315 3 3 51 64 ±11 58 3 16121 ±21 32 3 3 41 53 ±01 34 3 3
洛汀新 　01 01 9 31 99 ±01 24 # 22110 ±21 72 361 3 ±314 # 31 45 ±01 32 # 10124 ±21 01 # 31 38 ±01 31 #
六味地黄加味胶囊 151 5 11 31 83 ±01 15 # # 21116 ±21 86 371 8 ±516 # 31 52 ±01 41 # 9155 ±21 30 # 31 45 ±01 41 #
洛汀新 +六味地黄加味胶囊 01 01 + 151 5 10 31 95 ±01 73 # 19151 ±41 18 311 2 ±412 # # △ 31 22 ±01 31 # 6186 ±21 11 # # △31 01 ±01 26 # # △
　　与对照组比较 : 3 P < 01 05 　3 3 P < 01 01 ; 　与模型组比较 : # P < 01 05 　# # P < 0101 ; 　与洛汀新组比较 : △P < 01 05
　　3 P < 0105 　3 3 P < 01 01 vs cont rol group ; # P < 0105 　# # P < 0101 vs model group ; △P < 01 05 vs Lot group
图 1 　各组大鼠肾脏超微结构
Fig. 1 　Ultrastructure of kidney in every group of rats
·97·中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 41 卷第 1 期 2010 年 1 月
313 　各组大鼠肾皮质 CT GF 表达情况 :肾皮质
CT GF 经免疫组化染色呈棕褐色 ,灰度分析显示模
型组肾脏 CT GF 表达较对照组明显增高 ( P <
0101) ,3 个给药组 CT GF 表达较模型组有下降趋
势 ( P < 0105、0101) ,洛汀新与六味地黄加味胶囊合
用组 CT GF 表达与洛汀新组比较更低 ( P < 0105) 。
见图 2 和表 1。
314 　各组大鼠肾皮质组织细胞胞液和膜 P KC 活
性 :模型组胞液 P KC 活性明显低于对照组 ( P <
0105) ,胞膜 P KC 活性显著高于对照组 ( P <
0101) ,胞液 P KC 活性与膜 P KC 活性之比明显低
于对照组 ( P < 0101) ;3 个给药组胞液 P KC 活性较
模型组升高 ( P < 0105) ,胞膜 P KC 活性较模型组
显著降低 ( P < 0101) ,胞液 P KC 活性与膜 P KC 活
性之比高于模型组 ( P < 0105) ;洛汀新与六味地黄
加味胶囊合用组胞膜 P KC 活性较洛汀新组低
( P < 0105) ,胞液 P KC 活性与膜 P KC 活性之比高
于洛汀新组 ( P < 0105) 。见表 2。
图 2 　各组大鼠肾脏 CTGF 表达情况
Fig. 2 　Immunohistochemistry micrographs of CTGF expression in renal cortex in every group of rats
表 2 　各组大鼠肾皮质组织细胞胞液、胞膜 PKC 活性 ( x ±s)
Table 2 　PKC Activities of cytosol and cytomembrane
in renal cortex in every group of rats ( x ±s)
组　别
剂量/
(g·kg - 1 )
动物/
只
胞液 PKC 活性/
(pmol ·min - 1 ·
mg - 1 )
胞膜 PKC 活性/
(pmol ·min - 1 ·
mg - 1 )
胞液 PKC 活性/
胞膜 PKC 活性
对照 - 12 62216 ±5613 8518 ± 716 618 ±211
模型 - 10 43619 ±3417 3 37617 ±3618 3 3 112 ±011 3 3
洛汀新 0101 9 49917 ±4312 # 23116 ±1517 # # 312 ±012 #
六味地黄加味胶囊 1515 11 50914 ±5512 # 24814 ±2113 # # 310 ±014 #
洛汀新 +六味地 0101 + 1515 10 52218 ±4115 # 16918 ±1516 # # △ 319 ±011 # △
　黄加味胶囊
　　与对照组比较 : 3 P < 01 05 　3 3 P < 0101 ; 　与模型组比较 :
# P < 0105 　# # P < 0101 ; 　与洛汀新组比较 : △P < 0105
　　3 P < 0105 　3 3 P < 01 01 vs cont rol group ; # P < 0105
# # P < 01 01 vs model group ; △P < 0105 vs Lot group
4 　讨论
　　细胞信号转导异常在糖尿病慢性并发症中的作
用近年日益受到重视 ,近年研究显示 ,糖尿病时高血
糖作为启动因子 ,诱导各种血管活性物质、细胞因子
等相互作用共同影响细胞外基质 ( ECM) 的合成和
降解 ,而这一作用主要通过细胞内信号转导物质
P KC 介导 , P KC 细胞内信号传导系统异常被认为
在 DN 中发挥重要的作用。P KC 是一组密切相关
的有多种亚型的蛋白质家族 ,它可被钙和磷脂激活。
静息状态下 P KC 主要以无活性的形式存在于胞浆
中 ;糖尿病状态下 ,由于持续性高血糖使细胞内葡萄
糖流量增加 ,葡萄糖可通过糖酵解途径从头合成二
酯酰甘油 (DA G) [ 4 ] 。DA G 为 P KC 的内源性激活
剂 ,当细胞内 DA G 的量增加 ,可促使 P KC 移位至
细胞膜而被激活 ,始动因子 P KC 的膜转移现象为
P KC 激活的重要标志[5 ] 。研究显示糖尿病大鼠肾
小球总 P KC 活性与对照组无显著差异 ,但细胞膜
P KC 活性增高了 4 倍 ,而胞浆 P KC 活性则显著下
降 ,提示高糖可引起肾小球细胞内 P KC 由胞浆到
胞膜移位活化 ,此后肾脏 P KC 活化与 DN 的关系
日益受到人们重视[6 ] 。
DN 时肾素2血管紧张素系统 ( RAS) 亢进 ,血
管紧张素 Ⅱ(Ang Ⅱ)产生过多是引起高血糖状态下
T GF2β1 表达增加的一个重要因素[ 7 ] 。另外 DN 时
糖基化产物也可继续刺激 T GF2β1 的表达 ,造成肾
脏损害[8 ] 。沈雯等[9 ] 研究显示 ,高糖导致的 T GF2
β1 和 ECM 高表达可被 P KC 抑制剂 chelerythrine
chloride 所阻断 ,Darren[ 10 ]等的研究也显示 P KC 抑
制剂可以降低实验动物的肾小球 T GF2β1 水平 ,提
示 P KC 活化参与 DN 时 T GF2β1 的高表达。
CT GF 被认为是 T GF2β1 的下游效应分子 ,可通过
Smads 信号直接参与纤维化过程[ 11 ] ,有研究表明
P KC 活化可以通过 T GF2β1 介导 CT GF 生成 ,导致
DN 肾脏肥大和纤维化[ 12 ] 。
六味地黄加味胶囊是治疗糖尿病肾病的有效组
方 ,本方在六味地黄丸方的基础上加用黄芪、丹参、
金樱子 ,有滋阴补肾 ,益气通络、涩精的功效 ,临床上
与洛汀新合用对早期糖尿病肾病浮肿、蛋白尿有较
好的疗效。本实验结果显示洛汀新、六味地黄加味
·08· 中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 41 卷第 1 期 2010 年 1 月
胶囊及两药合用均可改善 DN 大鼠蛋白尿和肾功
能 ,减轻肾脏胶原沉积 ,且两药合用较单用洛汀新可
以更好控制 DN 大鼠蛋白尿。DN 大鼠肾皮质组织
胞液 P KC 活性较正常大鼠下降 ,胞膜的 P KC 活性
明显增高 ,胞液 P KC 活性与胞膜 P KC 活性之比显
著下降 ,提示 DN 大鼠肾皮质细胞有 P KC 由胞浆
向胞膜转移的过程 ,与文献报道一致[5 ] 。洛汀新与
六味地黄加味胶囊都能提高胞液 P KC 活性 ,降低
胞膜 P KC 活性 ,使胞液 P KC 活性与胞膜 P KC 活
性比显著提高 ,降低血清 T GF2β1 水平和肾皮质
CT GF 表达 ,且两药合用可以更加显著降低 DN 大
鼠肾皮质胞膜 P KC 活性 ,提高胞液 P KC 活性与胞
膜 P KC 活性比 ,两药合用较单用洛汀新更显著降
低血清 T GF2β1 水平和肾皮质 CT GF 的表达 ,说明
洛汀新与六味地黄加味胶囊合用可以更有效抑制肾
脏 P KC 活化 ,降低 T GF2β1 水平和 CT GF 的表达。
综上结果 ,六味地黄加味胶囊对 DN 大鼠肾脏有明
显的保护作用 ,其作用机制与抑制肾脏 P KC 激活、
降低细胞因子 T GF2β1 及抑制肾皮质 CT GF 的表
达有关 ,并且与洛汀新合用有协同保护肾脏的作用 ,
对临床应用六味地黄加味胶囊治疗 DN 有指导
意义。
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双氢青蒿素诱导前列腺癌 PC23 细胞凋亡及其机制研究
高小玲1 ,罗子国1
①
,王丕龙2 ,李庆春1
(11 重庆医科大学生命科学研究院 ,重庆 　400016 ; 21 重庆医科大学附属第一医院 消化内科 ,重庆 　400016)
摘 　要 :目的 　研究双氢青蒿素对前列腺癌 PC23 细胞的凋亡诱导作用 ,并探讨其可能的机制。方法 　M TT 法测
定不同浓度双氢青蒿素对 PC23 细胞增殖的影响 ,流式细胞仪 ( FCM) 、透射电镜 ( TEM) 观察双氢青蒿素对 PC23
细胞的凋亡诱导作用 ,免疫组化 (SP) 检测双氢青蒿素对 PC23 细胞内 Bax、Bcl22 蛋白阳性表达的影响。结果 　双
氢青蒿素对 PC23 细胞有明显增殖抑制效应 ,能诱导 PC23 细胞凋亡且具有浓度2时间依赖性 ,导致 PC23 细胞线粒
体肿胀、核碎裂、凋亡小体形成 ;随着双氢青蒿素浓度的增加 ,Bcl22 蛋白阳性表达降低 ,而 Bax 蛋白阳性表达增加。
结论 　双氢青蒿素可能通过上调 Bax ,下调 Bcl22 蛋白表达诱导前列腺癌 PC23 细胞凋亡。
关键词 :双氢青蒿素 ; 前列腺癌 ; 细胞凋亡
中图分类号 :R97911 ; R73712 　　　文献标识码 :A 　　　文章编号 :0253 - 2670 (2010) 01 - 0081 - 05
·18·中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 41 卷第 1 期 2010 年 1 月
①　　收稿日期 :2009203216
　　作者简介 :高小玲 (1970 —) ,女 ,重庆人 ,主治医师 ,博士在读 ,主要从事抗肿瘤机制研究。
Tel : (023) 68485838 　E2mail : ling2high @163. com
　　3 通讯作者　罗子国　Tel : (023) 68485838 　E2mail : luoliangwen @yahoo. com. cn