全 文 ：酸对照品各 3份,按 2 3项下方法制备并测定量, 计
算得平均回收率为 100 26%, RSD 值为 1 26%
( n= 9)。
2 9 样品测定:取不同菌种的茯苓粉末各 3份, 制
备供试品溶液, 用 0 45 m 微孔滤膜滤过, 滤液密
封备用,分别精密吸取各供试品溶液 10 L,注入液
相色谱仪,按上述色谱条件测定,计算样品溶液中茯
苓酸的量,结果见表 1。
3 讨论
3 1 采用高效液相色谱分析技术,对我国不同地区
使用的 27种菌株培育的茯苓的主要有效成分,即茯
苓酸的量进行了分析研究, 建立了可靠性强的定量
测定方法。中国药典2005年版收载茯苓药材的
质量标准中缺少定量测定项, 本研究结果为完善茯
苓药材的质量标准提供了参考依据。
3 2 茯苓是通过菌种依附松木繁殖的菌类中药材,
菌种对茯苓药材质量起着至关重要的作用。27种
菌种茯苓中有效成分茯苓酸的量分析比较研究表
明,不同菌种培育的茯苓中茯苓酸量有较大差异,其
中 ACCC50864、5 78和 SC 3个菌种茯苓中茯苓酸
的量明显高于其他菌种茯苓。本研究结果为规范茯
苓的栽培提供了一定科学依据。
参考文献:
[ 1] 杨 冉,李建军,屈凌波,等 茯苓萜类的高效液相色谱指纹图
谱研究[ J]中草药, 2004, 35( 3) : 273-275
[ 2] 胡 斌, 杨益平, 叶 阳 茯苓化学成分研究 [ J] 中草药,
2006, 37( 5) : 655-658
[ 3] 王克勤,方 红,苏 玮,等 茯苓规范化种植及产业化发展对
策[ J]世界科学技术 中医药现代化, 2002, 4( 3) : 691
紫背金盘的生药学鉴定
易刚强,李云耀,陈晓阳,蔡俊龙,王 珏
(湖南中医药大学药学院, 湖南 长沙 410208)
摘 要:目的 对紫背金盘进行生药学鉴定, 为其鉴别及应用提供科学依据。方法 采用原植物鉴别, 显微鉴别,
薄层鉴别的方法。结果 紫背金盘在原植物,显微, 薄层等具有专属性特征。结论 通过原植物, 显微, 薄层能够
很好地鉴别紫背金盘。
关键词:紫背金盘; 原植物; 生药学鉴定; 显微鉴定; 薄层鉴别
中图分类号: R282 21 文献标识码: A 文章编号: 0253-2670( 2010) 04-0649-04
紫背金盘为唇形科植物紫背金盘 Aj ugae nip-
ponensi s Makino 的全草,又名白毛夏枯草,破血丹,
筋骨草,石灰菜,九味菜, 散瘀草,散血丹,退血草, 散
血草,具有清热解毒,凉血散瘀,消肿止痛之功效, 有
收缩血管, 降血糖、降脂和降压,抗肿瘤作用, 抗炎、
抑菌和抗病毒, 促进创伤愈合等药理作用,该植物主
要分布在我国东部、南部及西南各省,西北至秦岭南
坡,此外, 日本, 朝鲜亦有分布[ 1, 2]。在我国由于紫
背金盘、筋骨草 A . ci l iatae Bunge、金疮小草 A .
decumbens Thunb. 3种植物近缘, 均属唇形科筋骨
属,统称 白毛夏枯草的名称, 都作为筋骨草使
用[ 3, 4] , 据文献报道筋骨草、金疮小草均含有木犀草
素活性成分,而紫背金盘未见其报道,为此笔者将木
犀草素作为该植物的鉴别手段[ 5, 6] 。本实验主要对
紫背金盘性状鉴别、组织、粉末的显微鉴别以及木犀
草素薄层色谱鉴别等进行研究, 为其资源研究奠定
一定的基础。
1 实验部分
1 1 材料与方法
1 1 1 药材与仪器:紫背金盘由民间赤脚医生在湖
南省宁乡县草地、林地及阳坡地采集,经湖南中医药
大学药学院彭菲教授鉴定)。普通刀片;植物粉碎机
(天津市泰斯特仪器有限公司) ; 数码相机( Sony ) ;
数码显微镜( SXJ 2)。
1 2 方法
1 2 1 取部分新鲜药材, 按常规制片法制作切片,
在显微镜下观察, 成像系统成像。
1 2 2 取部分干燥药材,粉碎成粉末,制成装片,在
显微镜下观察,成像系统成像。
1 2 3 将硅胶与 0 5% 的 CMC-Na 按 3 1 的比
649中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 41 卷第 4 期 2010 年 4 月
收稿日期: 2009-07-16 基金项目:湖南省教育厅科研项目 ( 08C630) ; 2009湖南省大学生研究性学习和创新性实验计划项目作者简介:易刚强( 1965 ) ,男,副教授。Tel: ( 0731) 88458227 E- mail: yigangqiang2005@ yah oo. com . cn
例混合制成硅胶板, 干燥后活化,备用。
2 结果
2 1 原植物鉴定:紫背金盘为唇形科植物紫背金盘
的全草,一年或两年生草本,高 10~ 30 cm 以上, 茎
方形,通常直立,稀匍匐, 茎常带紫色,常从基部分枝
而无基生叶, 全体被疏白色柔毛。单叶对生, 具柄,
柄长 1~ 4. 5 cm, 叶片椭圆形或倒卵状椭圆形, 长
3~ 6 cm,宽 2~ 4 cm, 边缘具不整齐的波状圆齿或
近圆齿,叶背常带紫色。花轮向上渐密集成顶生假
穗状轮伞花序, 腋生,苞片小, 卵形至宽披针形,有时
呈紫绿色。花萼钟形, 10 脉, 萼齿 5, 齿狭三角形或
三角形。花冠管状, 淡蓝色或蓝紫色,稀白色或白绿
色,具深色条纹,里面近基部具毛环,外面具短柔毛,
檐部近二唇形,上唇半圆形,短,二浅裂, 下唇三裂,
中裂片扇形,雄蕊 4,二强, 花丝无毛, 着生于花冠筒
上略伸出筒外, 雌蕊 1, 子房 4裂, 花柱丝状,柱头 2
裂, 花盘环状。小坚果灰黄色, 卵状三棱形, 背部具
网状皱纹, 合生面占腹面 3/ 5。花期在我国东部者
为 4~ 6月,西南部者为 12 月至第二年 3月。果期
前者为 5~ 6月,后者为 1~ 5月[ 5 ]。
2 2 显微鉴别[ 6]
2 2 1 根横切面:表皮由单细胞组成,排列整齐,紧
密,无细胞间隙, 细胞壁薄;皮层由多层薄壁细胞组
成,排列疏松,有明显的细胞间隙;内皮层明显, 由一
层细胞构成,为厚壁组织;木质部和韧皮部相间呈辐
射状排列;髓射线较宽,由 5~ 7 列薄壁细胞组成。
见图 1。
2 2 2 茎横切面:呈四方形, 表皮为 1列类圆形不
规则细胞,排列紧密,外被有类球形腺鳞和非腺毛。
皮层为数列薄壁细胞, 排列疏松,四棱脊处有厚角细
胞,内皮层明显。韧皮部细胞较小, 形成层成环状,
1~ 2 列扁平细胞。木质部在四棱处发达, 导管圆
形,射线宽窄不一。髓部发达, 由大型薄壁细胞组
成,薄壁细胞中含有淡黄色结晶物。见图 2。
1-根横切面整体观 2-根横切面部分观 3-髓射线
1- overall observat ion of t rans erve s ect ion of root 2-sect ion observat ion of t ran serve section of root 3- pith ray
图 1 根横切面
Fig. 1 Transerve section of root
1-茎横切面部分观 2-非腺毛 3-腺鳞及结晶物
1- section observation of t ranserve sect ion of stem 2-nonglandular 3-glandular scale and crystal s
图 2 茎横切面
Fig. 2 Transerve section of stem
2 2 3 叶横切面: 上表皮细胞长方形, 下表皮细胞
较小,均扁平,具直轴式气孔; 表皮有腺鳞,头为多细
胞,柄为单细胞,且有多细胞非腺毛。叶肉栅栏组织
占叶肉的 2/ 3, 为多列薄壁细胞, 不通过主脉, 与海
绵组织分化明显; 海绵组织由 3~ 6 列不规则的薄
壁细胞组成。主脉维管束外韧形,韧皮部约占 1/ 2,
细胞多角形, 主脉上下表皮内侧有厚角细胞。薄壁
细胞内有大量淡黄色颗粒状结晶物。见图 3。
650 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 41 卷第 4 期 2010 年 4 月
2 2 4 粉末特征:粉末呈黄绿色。韧皮纤维较少,
呈梭形,孔沟明显;木纤维较细长, 壁不甚厚; 木栓细
胞淡黄色,长方形;螺纹导管多见; 淀粉粒多单粒; 腺
鳞的腺头类球形, 多细胞,腺柄单细胞,极短;非腺毛
由多细胞组成,常弯曲, 细胞壁表面粗糙, 细胞之间
界线明显,基部膨大,中部狭长, 先端渐尖。见图 4。
1-叶横切面部分观 2-非腺毛 3-主脉及结晶物
1- overal l ob ser vat ion of trans erve s ect ion of leaf 2-n on glan dular 3-major veins and crystals
图 3 紫背金盘叶横切面
Fig. 3 Transerve section of leaf
1-韧皮纤维 2-非腺毛 3-螺纹导管 4-木纤维 5-腺磷 6-木栓细胞
1-phloem f ibre 2-nonglandular 3-spiral ves sel 4-w ood f ibre 5-glandular scale 6- suberized cell
图 4 粉末图
Fig. 4 Microscopic photo of powder
2 3 木犀草素薄层鉴别
2 3 1 样品的制备 [ 7] : 称取紫背金盘草的粗粉
13 5 g 于 1 000 mL 圆底烧瓶中,加 95% 乙醇浸没
药材, 第一次回流提取 40 m in, 趁热滤过, 药渣第 2
次回流提取 30 m in同上;第 3次 20 m in 同上,合并
滤液并减压浓缩至 50 mL; 取其中 40 mL 制成浸
膏,加 20 mL 水溶解,先用 60 mL 乙醚萃取3次, 20
mL/次, 合并乙醚层并减压浓缩至 10 mL,然后用醋
酸乙酯萃取同上。
精密称取木犀草素对照品 5 mg ,加甲醇溶解并
于 10 mL 量瓶中定容成 0 5 mg / mL 的木犀草素对
照品。
2 3 2 薄层色谱法鉴别: 硅胶 G-0 5% CMC-Na
板 ( 20 cm 4 cm ) , 105 活化 1 h,展开剂为苯-醋
酸乙酯-甲酸 ( 3 2 0 5) , 将醋酸乙酯萃取液、对
照品、乙醚萃取液与乙醇提取液依次点于同一薄层
板上,展开, 晾干, 喷 5% AlCl3的乙醇溶液显色, 置
于紫外灯 ( 254 nm) 下分别观察供试品和对照品的
斑点。供试品中没有与对照品颜色相同并且 Rf值
相同的斑点,表明紫背金盘中不含木犀草素,因而紫
背金盘不能与筋骨草、金疮小草混用[ 8, 9] 。
3 结论
本实验鉴别方法简便易行, 各种显微特征明显,
薄层色谱鉴别试验分离效果和重现性好, 适用于对
651中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 41 卷第 4 期 2010 年 4 月
紫背金盘的鉴别,可为紫背金盘的开发利用、质量控
制提供方法和依据。
参考文献:
[ 1] 国家中药管理局中华本草编委会 中华本草 [ M ] 上海:
上海科学技术出版社, 1998
[ 2] 中国科学院植物研究所主编 中国高等植物图鉴 [ M ] 第三
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[ 4] 褚小兰, 王汉章 筋骨草的本草考证 [ J] 中药材, 1997, 20
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[ 5] 蔡光先主编 湖南药物志 [ M ] 第七册 长沙: 湖南科学技
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[ J] 安徽医药, 2009, 13( 3) : 329- 336
HPLC法同时测定不同产地广陈皮中 5种活性黄酮成分
郑国栋1, 2 ,蒋 林1 * ,杨得坡1 ,周 芳3 ,杨 雪1 , 林乐维1
( 1 中山大学药学院 生药与天然药物化学实验室,广东 广州 510006; 2 广州医学院 基础学院药学系,
广东 广州 510182; 3 湖南中医药大学药学院 天然药物化学实验室,湖南 长沙 410208)
摘 要:目的 建立 H PLC 法测定 12 批不同产地广陈皮中 5 种活性黄酮的量。方法 采用超声法提取药材, 通过
对提取工艺及色谱条件进行优化建立测定方法,同时测定不同产地广陈皮中橙皮苷( 1)、川陈皮素( 2)、3, 5, 6, 7, 8,
3, 4-七甲氧基黄酮( 3)、橘皮素( 4)和 5-羟基-6, 7, 8, 3, 4-五甲氧基黄酮( 5) 5 种活性黄酮的量。结果 12 批广陈
皮中橙皮苷的量在 38 021~ 70 735 mg / g ,均符合药典标准 ( 35 mg / g ) ,其中, 产于新会的广陈皮中橙皮苷的量
低于广东其他两个产地(高要和龙门 ) ; 另外, 广陈皮中多甲氧基黄酮类成分的量以川陈皮素、橘皮素为高。结论
该方法简单、准确, 其结果可为广陈皮质量标准的制定提供一定的依据。
关键词:广陈皮; 高效液相色谱; 橙皮苷; 多甲氧基黄酮
中图分类号: R282 6 文献标识码: A 文章编号: 0253-2670( 2010) 04-0652-04
广陈皮是我国岭南地区著名的道地药材, 位列
十大广药之一。中国药典( 2005年版)记载, 陈皮
为芸香科柑橘属植物橘 Cit rus r et iculata Blanco 及
其栽培变种的干燥成熟果皮, 其药材可分为陈皮及
广陈皮,质量以广陈皮为优。目前对广陈皮药材质
量控制已有报道 [ 1]。广陈皮药材来源较广, 正品为
茶枝柑 Citr us reti culata Chachi (当地叫大红柑)
的干燥成熟果皮, 主产于广东新会, 又名新会陈皮。
具有理气健脾、和胃止呕、燥湿化痰等多种功效 [ 2]。
除挥发油外,广陈皮主含黄酮类成分。其黄酮类成
分有两大类型: 一类是黄酮苷类,主要为二氢黄酮类
成分,如橙皮苷、柚皮苷等;一类是多甲氧基黄酮类,
主要有川陈皮素、橘皮素、3, 5, 6, 7, 8, 3, 4-七甲氧
基黄酮等。研究结果表明, 多甲氧基黄酮类成分具
有抗癌[ 3]、抗氧化[ 4] 、抗诱变[ 5]、抗炎[ 6] 及心血管保
护[ 7 ]等多种作用。多甲氧基黄酮类成分广泛存在于
芸香科柑橘属类植物中,随植物来源不同,该类植物
所含多甲氧基黄酮类成分有较大差异 [ 8-11]。
中国药典2005 年版是以橙皮苷作为陈皮及
广陈皮质量控制的指标成分。然而, 资料及预实验
结果表明,广陈皮中橙皮苷的量往往低于其他陈皮,
仅通过单一指标成分已无法说明广陈皮的特色。鉴
于此,除橙皮苷外,本实验还选择了 4个多甲氧基黄
酮 (川陈皮素、3, 5, 6, 7, 8, 3, 4-七甲氧基黄酮、橘
皮素、5-羟基-6, 7, 8, 3, 4-五甲氧基黄酮) 作为指标
对来自不同产地的 12批广陈皮样品进行了测定,其
结果可为广陈皮质量标准的研究提供一定的参考。
1 仪器与材料
1 1 仪器: 高效液相色谱系统: Shimadzu LC-20AT
高效液相色谱仪, SPD-20A 紫外-可见分光检测器,
652 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 41 卷第 4 期 2010 年 4 月
收稿日期: 2009-07-20 基金项目:国家博士后特别资助项目 岭南柑橘属道地药材的 DNA 条形码研究 ( 200902353) ; 广东省自然科学基金博士科研启动项目 广陈皮及其近缘类群的 DNA 条形码研究 ; 国家科技部十一五支撑项目子课题 砂仁等 5种中药材规范化生产关键技术研究
( 2006BAI06A11-02) 广陈皮子项目作者简介:郑国栋( 1979 ) ,男,湖北省宜昌市人,博士,讲师,主要从事生药学与天然药物化学方向的研究与开发。
T el : 15918518120 Fax : ( 020) 39943043 E-mail: gd200237@ 126. com
* 通讯作者 T el : ( 020) 39943041 E-mail: linderson_jiang@ 163. com