全 文 ：正交试验优选阿胶、龟甲胶、鹿角胶的微波炮制胶珠工艺的研究
程一帆 ,苟 　虹 ,谭淇文
①
(重庆市中医研究院 ,重庆 　400021)
摘 　要 :目的 　优选微波炮制阿胶、龟甲胶、鹿角胶胶珠的工艺参数 ,规范胶类药材制珠工艺 ,提高并稳定胶珠质
量。方法 　用多项指标评价胶珠质量 ,采用 L 4 (23 ) 正交优选法对炮制胶珠工艺参数进行筛选。结果 　获得了阿
胶、龟甲胶、鹿角胶优化的炮制胶珠工艺参数。结论 　不同种类的胶材或不同批号、不同生产厂家的同类胶材都有
其最适的工艺参数 ,可用正交试验优选法快速筛选。
关键词 :阿胶 ;龟甲胶 ;鹿角胶 ;微波炮制 ;正交试验
中图分类号 :R28412 ; R286102 　　　文献标识码 :A 　　　文章编号 :0253 - 2670 (2010) 01 - 0045 - 04
Orthogonal optimization of plastic beads microwave processing of Colla Corii Asini ,
Colla Ca ra pacis et Plast ri Testudinis , and Colla Cor nus Cervi
CH EN G Yi2fan , GOU Hong , TAN Qi2wen
(Chongqing Institute of Traditional Chinese Medicine , Chongqing 400021 , China)
Abstract : Objective 　Col l a Cori i A si ni , Col l a Cara p acis et Pl ast ri Test u di nis , Col l a Cornus Cervi ,
t hree types of plastic bead microwave process parameters were optimized in order to standardize the pro2
duction of t he types of plastic beads and to enhance t he stability of t he quality of plastic beads1 Methods
U sing a number of quality indicators to evaluate the quality of plastic beads and ort hogonal test to optimize
the plastic bead process parameters1 Results 　The microwave process parameters of Col l a Cori i A si ni ,
Col l a Cara p acis et Pl ast ri Test u di nis , Col l a Cornus Cerv i , t hree types of plastic beads were obtained
through ort hogonal optimization1 Conclusion 　Different types of plastic type drugs , different p roduction
lot , and different manufact urers of similar plastic herbs have t heir own optimum process parameters1 L 4
(23 ) orthogonal optimization can be used to screen out the plastic type drugs rapidly1
Key words : Col l a Cori i A si ni ; Col l a Cara p acis et Pl ast ri Test u di nis ; Col l a Cornus Cerv i ; microwave
process ; ort hogonal test
　　阿胶、龟甲胶、鹿角胶是《中国药典》2005 年版
一部收载的胶类药材 ,也是中医临床常用胶类药材。
胶类药材的炙珠自汉代起历经千年 ,是我国独特的
制药技术 ,至今仍以直火加热、手工操作为主 ,炙珠
时火候及胶珠的品质均凭操作者的感观和经验予以
掌控和判断。要把炙珠时出现的色泽不一、表面焦
糊、质地不疏脆、溏心等控制在较稳定的范围 ,传统
的炙珠方法是难以掌控的。20 世纪末对阿胶的炙
珠工艺及设备改革有了较多的研究[1～3 ] 。笔者在对
阿胶、龟甲胶、鹿角胶炙珠工艺的规范及胶珠质量标
准的研究中发现 ,用微波炮制的 3 种胶珠质量均优
于其他普通热传导方式设备的胶珠质量 ,并可借助
L 4 (23 )正交试验方法有效快速筛选最适工艺参数来
实现胶珠质量的稳定。
1 　仪器与药材
　　WD800 ( M G—5304DS) 型微波炉 (L G 电子电
器有限公司) ;梅特勒2托利多 A E200 电子分析天平
(上海梅特勒厂) ;UV —752 型紫外可见分光光度计
(上海电子光学技术研究所) ; CS101 型电热干燥箱
(重庆试验设备厂) ;80 —2 型离心沉淀器 (上海手术
器械厂) ; H HS112 —B 型电热恒温水浴 (上海医疗
器械五厂) ;凯氏定氮装置。
　　阿胶 , 山东东阿阿胶股份有限公司 , 批号
061228 ;龟甲胶 ,河南老君堂制药有限公司 ,批号
·54·中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 41 卷第 1 期 2010 年 1 月
①　　收稿日期 :2009203212
　　基金项目 :重庆市卫生局科研项目 (20052B208)
　　作者简介 :程一帆 (1963 —) ,女 ,四川大竹人 ,主任中药师 ,贵阳中医学院硕士生导师 , 重庆市中医药学会中药专家委员会副主任委员 ,
重庆市卫生技术评审委员会委员 ,重庆中医医疗机构等级评审专家组成员 ,1985 年毕业于成都中医药大学药学系 ,研究方向
为中药新技术应用、医院药学。Tel :13752834399 　E2mail :dzx21963 @1261com
040118 ;鹿角胶 ,河南老君堂制药有限公司 ,批号
041221。3 种胶材均购于重庆市中药材公司 ,由成
都中医药大学冷静博士按《中国药典》2005 年版一
部各药材的鉴别项下方法进行鉴定 ,结果符合规定。
明胶 ,天津市大茂化学试剂厂 ,批号 070412。
2 　方法与结果
211 　试验设计因素水平的确定 :因素的选择是建立
在炮制实践经验和前期单因素比较试验基础之上
的。微波炮制胶珠的预试验显示阿胶、龟甲胶、鹿角
胶均可选择高微波强度 ,其炙珠的工艺效果明显优
于中、低强度的微波 ,加热时间 6～8 min ,胶丁大小
6～10 mm。因此考察微波强度只需设 100 %、80 %
水平 ,选用 L4 (23 )正交表。借助 L 4 (23 ) 正交方法对
预试验获得的较高评价值的因素进一步优选 ,不仅
可大大减少试验数和工作量 ,而且有利于实际炮制
的应用。以微波强度、时间、胶丁大小为考察因素 ,
每个因素取 2 个水平 ,见表 1。
表 1 　因素与水平
Table 1 　Factors and levels
水平
因　素
A 微波强度/ % B 时间/ min C 胶丁大小/ mm
1 100 　　　 6 6 　　　
2 80 　　　 8 10 　　　
212 　胶珠质量指标及评分标准 :以性状、水不溶物
和胶原蛋白的量来评价胶珠的质量。水不溶物的测
定按《中国药典》2005 年版一部附录方法[2 ] ;胶原蛋
白的测定采用紫外分光光度法[4 ] ,其标准品明胶的
蛋白质测定按照《中国药典》2005 年版一部附录
ⅨL氮测定法测定 ,由重庆中药研究院 ,重庆市中医
研究院共同测定 ,含氮量测定值为 1516 %。综合评
分标准为 :性状占 30 % ,性状评分以外观、质地、气
味进行评价 ,性状评分见表 2 ;水不溶物占 30 % ;蛋
白质的量占 40 %。其中水不溶物以最小者定为 100
分 ,蛋白质的量以最高者定为 100 分 ,其他试验结果
与其相比较计分 ,3 项测定得分相加 ,则为各项试验
的综合得分。
表 2 　性状评分
Table 2 　Character score
评分 外观 质地 气味
9 分 圆整均匀黄色 蜂窝状 ,无溏心 气香、味淡
6 分 较圆整、色深、偶有焦斑 部分未酥脆、偶有溏心 气较香
3 分 棕黄色、较多焦斑 较多部分未酥脆、较多溏心 气淡、有焦糊味
213 　胶珠的制备 :取阿胶、龟甲胶、鹿角胶 ,经干燥
箱 80 ℃烘软后 ,按表 1 的设计切丁。分别取阿胶
丁、龟甲胶丁、鹿角胶丁约 50 g ,均匀平铺于微波炉
的器皿中 (以相互间有约 1 cm 间距为宜) ,将器皿置
于炉内架子上 ,按 L 4 (23 ) 设计的试验选择微波强
度、炙珠时间、胶丁大小 ,进行炙珠。
214 　胶珠的性状检测 :按表 2 胶珠性状评分表对 3
种胶珠的性状、颜色、质地、气、味等指标进行检查和
质量认定。
215 　胶珠的水不溶物检测 :分别精密称取阿胶珠、
龟甲胶珠、鹿角胶珠各 110 g ,照《中国药典》2005 年
版一部阿胶、龟甲胶、鹿角胶项下的水不溶物检测方
法进行测定。
216 　胶珠的胶原蛋白检测 :胶原蛋白是胶类药材比
较明确的主要有效成分之一。蛋白质的测定一般采
用氮测定法。试验对胶材中蛋白质的测定方法学研
究中发现 ,采用紫外分光光度法测定胶原蛋白更能
反映炮制成胶珠后蛋白质变化的实际情况 ,不但方
法可靠且较简便快速 ,更适用于炮制生产中的质量
检测。
21611 　明胶标准溶液的制备 :取已恒重的明胶 100
mg ,精密称定 ,置 100 mL 量瓶中加纯化水至刻度 ,
摇匀 ,即得。
21612 　胶珠溶液的制备 :取胶珠粉 100 mg ,精密称
定 ,置 100 mL 量瓶中加纯化水至刻度 ,摇匀 ,即得。
21613 　标准曲线的绘制 :精密量取明胶标准溶液
0100、0120、0140、0160、0180 mL ,分别置 10 mL 量
瓶中 ,加水至刻度 ,摇匀。以纯化水为空白对照 ,照
分光光度法分别在 215、225 nm 波长处测定吸光度
( A) 值 ,以吸光度差值 (ΔA = A 215 - A 225 ) 为纵坐标 ,
质量浓度为横坐标 ,绘制标准曲线 ,将所得数据回归
计算 ,得回归方程 Y = 01015 6 X + 01028 0 , r =
01997 8 ,线性范围为 20～80μg/ mL 。
21614 　测定 :精密吸取胶珠制备溶液 014 mL ,置
10mL 量瓶中 ,照标准曲线的绘制项下的方法 ,测定
ΔA 值 ,从回归方程计算蛋白质值的量 ,即得。
217 　试验结果及方差分析 :胶珠的性状结果见表
3 ,正交试验结果见表 4 ,方差分析见表 5。
　　结果显示 ,直观得出各因素对试验结果的影响
程度是 A > B > C。在给定的显著性水平中 ,通过和
F 分布统计量的概率比较 ,可得出微波强度和时间
对胶珠品质有显著影响 ( P < 0105) 。100 %的强微
波适于阿胶、龟甲胶、鹿角胶的胶珠炮制 ,可获得较
好的胶珠质量。胶丁的体积对胶珠品质的影响小 ,
在 6～10 mm 选择胶丁切制的规格 ,以炮制成胶珠
后的体积适于服用、包装为宜。
·64· 中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 41 卷第 1 期 2010 年 1 月
表 3 　胶珠性状评价表
Table 3 　Characters of plastic bead
胶珠 试验号 性状 得分
阿胶珠　 1 外圆整、色浅黄棕 ;内呈蜂窝状 ,偶有溏心 ;气香味淡。 8
2 外圆整、色黄棕 ;内呈蜂窝状无溏心 ;气香味淡。 8
3 外较圆整、色黄棕 ;内部分未酥脆 ;气香味淡。 7
4 外圆整、色黄棕、色不均 ;内呈蜂窝状 ,无溏心 ;气香味淡。 8
龟甲胶珠 1 外圆整、色黄且均匀 ;内呈蜂窝状无溏心 ;味淡。 9
2 外较圆整、色浅黄棕 ;内未充分膨胀有少量溏心 ;味淡。 6
3 外较圆整、色黄、部分色泽不均 ;内部分未酥脆无溏心 ;味淡。 7
4 外较圆整、色黄棕且部分色泽不均 ;内未充分膨胀 ;味淡。 7
鹿角胶珠 1 外较圆整、色浅棕、偶色泽不均 ;少数内未充分膨胀 ;味淡。 7
2 外圆整、色浅棕 ;内呈蜂窝状无溏心 ;味淡。 9
3 外较圆整、色棕 ;内未充分膨胀无溏心 ;味淡。 7
4 外圆整、色棕 ;内呈蜂窝状无溏心 ;味淡。 8
表 4 　胶类药材正交试验结果分析
Table 4 　Results of L4 ( 23 ) orthogonal test analysis
药材种类 试验号 A B C
评价指标
性状 水不溶物/ % 蛋白质/ % 综合评分
阿胶　 1 1 1 1 8 0169 94170 961 67
2 2 1 2 8 0184 92130 901 29
3 1 2 2 7 0174 93134 901 72
4 2 2 1 8 0195 91162 871 16
龟甲胶 1 1 1 1 9 0166 90110 991 00
2 2 1 2 6 0179 92140 851 06
3 1 2 2 7 0177 89122 871 66
4 2 2 1 7 1101 92140 821 93
鹿角胶 1 1 1 1 7 1174 93102 811 83
2 2 1 2 9 1137 94132 941 26
3 1 2 2 7 1170 93174 851 58
4 2 2 1 8 1112 94195 961 67
阿胶　 K1 1871 39 1861 96 1831 83
K2 1771 45 1771 88 1811 01
R 　91 94 　91 08 　21 82
龟甲胶 K1 1861 66 1841 06 1811 93
K2 1671 99 1701 59 1721 72
R 181 67 131 47 　91 21
鹿角胶 K1 1671 41 1761 09 1781 50
K2 1901 93 1821 25 1791 84
R 231 52 　61 16 　11 34
表 5 　方差分析
Table 5 　Analysis of variance
胶材种类
方差
来源
离均差
平方和
自由度 方差 F 值 显著性
阿胶　 A 24170 2 12135 1 235 P < 01 05
B 20160 2 10130 1 030 P < 01 05
C 1198 2 0199 99
龟甲胶 A 87114 2 43157 4 357 P < 01 05
B 45136 2 22168 2 268 P < 01 05
C 21120 2 10160 1 060 P < 01 05
鹿角胶 A 138130 2 69115 6 915 P < 01 05
B 9148 2 4174 474 P < 01 05
C 0145 2 0122 22
e 0101 1 0101
　　F0105 (2 ,1) = 200 3 　讨论　　在研究中发现 ,不同胶材 ,不同的生产厂家或同一厂家生产的同种胶材因批号不同其含水量也可能不同。不同的微波设备或同一微波设备其微波强度也可能受外环境温湿度、使用次数、微波强度的衰减等因素的影响而变化。因此 ,微波炮制胶珠的最佳工艺条件并不是固定不变的。当 100 %的强微波和胶丁规格已确定 ,在炮制胶珠前可通过小量试验来选择最适合的时间参数才能保证胶珠的质量稳定 ,也有利于胶珠质量标准的制定与统一。　　微波技术用于阿胶、龟甲胶、鹿角胶的炙珠是胶
·74·中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 41 卷第 1 期 2010 年 1 月
类药材炙珠的代表性应用。这种可靠的、低成本、高
效、环保的炮制胶珠的方法也可在其他中药胶材中
推广应用。
参考文献 :
[ 1 ] 　张保国1 阿胶的现代炮制研究[J ]1 河南大学学报 :医学科学 版 ,2003 ,2 (2) :1241[ 2 ] 　中国药典[ S]1 一部1 20051[ 3 ] 　李光甫 ,任玉珍 1 中药炮制工程学 [ M ]1 北京 :化学工业出版社 ,20071[ 4 ] 　樊绘曾 ,刘或曦1 阿胶蛋白质定量方法的比较 [J ]1 中国中药杂志 ,1994 ,19 (4) :2241
六味地黄丸的 HPLC指纹图谱和模式识别研究
赵洪芝1 ,2 ,孟宪生3 3 ,叶挺祥1 ,2 ,刘征辉1 ,2 ,程 　奕1 ,2 ,罗国安3①
(11 天津海世达检测技术有限公司 ,天津 　300381 ; 21 天津市现代中药质量检验中心 ,天津 300381 ;
31 清华大学 化学系 ,北京 　100084)
摘 　要 :目的 　研究六味地黄丸的质量控制方法。方法 　采用高效液相色谱法 ,色谱柱为 Agilent Zorbax SB C18
(250 mm ×416 mm ,5μm) ,乙腈2水梯度洗脱 ,柱温 :30 ℃,体积流量 :110 mL/ min ,检测波长为 236 nm ,并利用聚类
分析法和主成分分析法分析结果。结果 　通过聚类分析将不同厂家和批次的 25 个样品分为 3 类 ,不同剂型的六
味地黄制剂 HPLC 指纹图谱存在明显的差异。主成分分析分类结果与聚类分析分类结果一致 ,经主成分分析 ,8
个共有峰可综合为 3 个主成分 ,其累积贡献率达 821844 % ,马钱苷的相对峰面积为六味地黄丸指纹图谱中影响比
较大的指标。结论 　此方法可较系统地用于六味地黄丸的质量控制。
关键词 :六味地黄丸 ;指纹图谱 ;模式识别
中图分类号 :R28412 ;R286102 　　　文献标识码 :A 　　　文章编号 :0253 - 2670 (2010) 01 - 0048 - 04
HPLC Fingerprint and chemical pattern recognition of Liuwei Dihuang Pills
ZHAO Hong2zhi1 ,2 , M EN G Xian2sheng3 , YE Ting2xiang1 ,2 , L IU Zheng2hui1 ,2 ,
CH EN G Yi1 ,2 , L UO Guo2an3
(11 Tianjin High2standard Quality Testing Laboratary , Tianjin 300381 , China ; 21 Tianjin Center for Quality Testing
of TCM , Tianjin 300381 , China ; 31Department of Chemist ry , Tsinghua University , Beijing 100084 , China)
Abstract : Objective 　To establish a met hod for t he quality cont rol of Liuwei Dihuang Pills1 Methods
H PL C Met hod was developed to establish t he fingerp rint of Liuwei Dihuang Pills1 The separation was per2
formed on Agilent Zorbax SB C18 (250 mm ×416 mm ,5μm) column gradient eluted with the mobile p hase
consisting acetonit rile and water at t he flow rate of 110 mL/ min1 The detection wavelength was 236
nm1 Hierarchical cluster analysis ( HCA) and p rincipal component analysis ( PCA) were applied to investi2
gating t he test data1 Results 　The HCA result showed t hat 25 samples f rom various manufacturers and va2
rious batches can be divided into t hree group s1 The differences between various dosage forms could be ob2
vious1 The classification result according to PCA was consistent wit h t he HCA1 The PCA showed t hat
eight common peaks were integrated into three p rincipal component s ( PC) and t heir accumulation cont ribu2
ting rate amounted to 821844 %1 The PCA result showed t hat t he relative peak area of loganin was the dis2
criminating factor of t he fingerp rint of Liuwei Dihuang Pills1 Conclusion 　This met hod can be used for
quality cont rol for Liuwei Dihuang Pills1
Key words : Liuwei Dihuang Pills ; fingerp rint ; chemical pattern recognition
·84· 中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 41 卷第 1 期 2010 年 1 月
①　　收稿日期 :2009203210
　　基金项目 :天津市科技发展计划项目 (05SYSYGX25000)
　　作者简介 :赵洪芝 (1981 —) ,女 ,硕士 ,助理研究员 ,主要从事中药质量控制及化学计量学方面的研究。
Tel : (022) 27950255 　Fax : (022) 27950378 　E2mail : zhao hong zhi @1261com
　　3 通讯作者　孟宪生　Tel : (010) 62772263 　Fax : (010) 62781688 　E2mail :mxsvvv @1261com