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鸡血藤与阿胶升白细胞作用的比较研究



全 文 :中药新药与临床药理 2011年 3月第 22卷第 2期
收稿日期:2010-09-10
作者简介:应军,男,副主任中药师,从事中药新药研发及管理工作。Email:yingj@gpc.com.cn。通讯作者:杨威,博士研究生,主要从事药理毒
理研究,Email:yangwei0719@163.com。
基金项目:粤港关键领域重点突破项目“华南创新中药研究开发与技术服务中心(平台)”(2006A35003001)。
鸡血藤与阿胶升白细胞作用的比较研究
应 军,肖百全,杨 威,曾祥腾,郭健敏,肖 元(广州医药工业研究院,广州 510240)
摘要:目的 比较鸡血藤有效部位与阿胶升白细胞的功效。方法 采用环磷酰胺(100 mg/kg)单次皮下注射的方
法制备大鼠白细胞低下模型,在给予鸡血藤有效部位和阿胶后第 7,9,11天,分别采集各组大鼠的血液,测
定白细胞总数及分类。结果 鸡血藤有效部位高、中剂量组(12.15,4.05 g/kg) 具有明显的升白细胞作用,阿
胶高、低剂量组(7.29,2.43 g/kg)亦有明显的升白细胞作用,两药临床等效量的对应倍数的剂量组之间白细胞
数无统计学意义。结论 鸡血藤有效部位与阿胶均有明显的对抗化疗药物引起的白细胞降低的功效,且作用强
度相当。
关键词:鸡血藤;阿胶;环磷酰胺;升白细胞作用
中图分类号:R285.5 文献标识码:A 文章编号:1003-9783(2011)02-0175-04
Leukocytopoiesis -promoting Action Comparison of Effective Components from Caulis Spatholobi and Colla
Corii Asini in Leukopenia Rats
YING Jun,XIAO Baiquan,YANG Wei,ZENG Xiangteng,GUO Jianmin,XIAO Yuan(Guangzhou Institute of
Pharmaceutical Industry,Guangzhou 510240 ,China)
Abstract: Objective To compare the leukocytopoiesis-promoting action of effective components from Caulis Spatholo-
bi and Colla Corii Asini in rats with leukopenia induced by cyclophosphamide(CTX). Methods The leukopenia model
of rat was established by a single-dose subcutaneous injection of CTX(100 mg/kg). All experiment groups were ad-
ministrated according the experiment scheme. The blood samples of each group were collected on the 7th,9th,11th
day of administration,and the white blood cell(WBC)count and classification were determined and analyzed. Re-
到峰值;夜间浓度下降,凌晨 1:00左右达到最低并
维持到清晨 5:00,昼高夜低。与假手术组相比,肝
阳上亢组血浆 AngⅡ和 CA 的 24 h 浓度呈反杓型昼
夜节律:24 h内各时间点的血浓度均显著增高,在
凌晨 1:00左右达到最高并维持到上午 9:00,昼低夜
高。二者血浓度中值上升明显,24 h波动振幅较大,
峰值相位位移提早出现。在本研究中,血压昼夜节
律特征不同的 3组大鼠(杓型、反杓型)之间,其血
液中 AngⅡ、CA的水平及(或)昼夜节律特征有明显
不同。这结果可能进一步证实这两种体液因素在血
压昼夜节律的调节方面所起的重要作用[9]。但其具体
机制和相互关系有待于深入研究,从而进一步揭示
高血压肝阳上亢证的时间生物学调节机制及其时间
治疗学机制。
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(编辑:梁进权)
·175·
Traditional Chinese Drug Research & Clinical Pharmacology,2011 March,Vol.22 No.2
鸡血藤为豆科植物密花豆的干燥藤茎,性味苦
甘,苦泄温通,甘温补益,入血分,走经络,具有补
血活血之功效,同时,其归属肝经,通过调节肝经的
功能以助血滋生[1-3],研究发现 [2,4]其具有对抗化疗药
物引起的白细胞降低的功效。阿胶系我国名贵药材,
与人参、鹿茸并称为“中药三宝”, 其补血药效已得
到大量研究证明[6-7],临床研究表明阿胶有升白作用[8]。
本研究比较鸡血藤有效部位与阿胶对化疗药物引起的
白细胞降低的影响。
1 材料与方法
1.1 动物 SPF级 SD大鼠 70只,雌雄各半,广东省
医学实验动物中心提供,许可证号:SCXK(粤)2008-
0002。
1.2 药物与试剂 鸡血藤有效部位提取物(先用 50 %
乙醇提取,然后用 70 %乙醇洗脱,总黄酮含量大于
55 %),自制;阿胶,东阿阿胶公司,批号:091206;
注射用环磷酰胺(CTX),山西普德药业有限公司,批
号:20090901;0.9 %氯化钠注射液,广西裕源药业
有限公司,批号:B09082801。
1.3 仪器 XT-2000iv 动物专用全自动血液分析仪,
日本 SYSMEX公司;BP2100电子天平,北京赛多利
斯仪器系统有限公司。
1.4 实验方法 取 SD大鼠 70只,雌雄各半,实验前
眼眶静脉丛采血测定白细胞及其分类,根据白细胞总
数随机均衡分成 7 组,每组 10只,即空白对照组,
模型组,鸡血藤高剂量组、中剂量组、低剂量组
(840, 280, 90 mg/kg, 按 生 药 量 计 算 分 别 为
12.15,4.05,1.35 g/kg,约为成人日用量的 9,3,1
倍),阿胶高、低剂量组(7.29,2.43 g/kg,相当于成
人临床用量的 9,3倍),分组后除空白对照组外,各
组大鼠一次性皮下注射 CTX 100 mg/kg进行造模,空
白对照组皮下注射等容积的生理盐水。造模后各给药
组均根据设定剂量开始给药,每天 1次,连续 11 d,
空白对照组、模型组给予等容积的 0.5 % CMC-Na。
实验第 1天、第 4天、第 7天、第 9天、第 11天分
别称量大鼠体重,并根据体重调整给药剂量。在第 7
天、第 9天、第 11天给药后约 2 h采血,测定大鼠
白细胞及分类。
1.5 统计分析方法 所有数据用“x±s”描述,各组先
进行组间方差齐性分析,当组间方差齐时,组间比较
采用非配对的 T检验,组间方差不齐时,采用校正的
Student-T检验;给药前后比较采用配对的 T检验。
2 结果
2.1 造模前各组大鼠白细胞数及其分类比例 各试验
组白细胞总数(WBC)相近,淋巴细胞(LYMPH)、中
性粒细胞(NEUT)、单核细胞(MONO)、嗜酸性粒细
胞(EO)及嗜碱性粒细胞(BASO)比例也未见统计学意
义,提示组间均衡性好,见表 1。
表 1 造模前各组大鼠外周血白细胞情况(x± s,n=10)
Table 1 WBC count and proportion of leukocyte differential
count in rats blood of each group before CTX injection
2.2 给药第7天各组白细胞数及其分类比例 模型组
大鼠白细胞总数远低于空白对照组(P < 0.01),白细
胞分类比例失调,中性粒细胞比例明显降低,提示模
型复制成功。与模型组相比,鸡血藤和阿胶各剂量组
中性粒细胞的比例均有回升的趋势,但无显著性差异
(P > 0.05),见表 2。
2.3 给药第9天各组白细胞数及其分类比例 模型组
大鼠白细胞总数仍远低于空白对照组,白细胞分类比
例失调。与模型组相比,鸡血藤和阿胶各剂量组大鼠
白细胞数和分类比例均未见统计学意义(P > 0.05),
结合第 7天检测结果,可以看出鸡血藤高、中剂量组
和和阿胶高、低剂量组大鼠白细胞总数回升的趋势优
于模型组,见表 3。
组 别
空白对照组
模型对照组
阿胶高剂量组
阿胶低剂量组
鸡血藤高剂量组
鸡血藤中剂量组
鸡血藤低剂量组
WBC(×109)/L-1
10.07±2.94
9.92±2.21
9.92±1.29
10.01±2.03
9.98±1.58
9.93±1.40
9.90±1.37
NEUT/%
11.96±2.60
11.15±3.54
9.80±1.57
10.74±3.62
10.38±3.15
11.78±4.86
10.73±2.43
LYMPH/%
82.87±3.04
82.36±4.85
85.65±2.51
85.00±4.23
85.19±4.40
82.44±7.49
83.81±3.11
MONO/%
3.57±0.81
3.76±1.65
3.31±0.78
3.01±0.87
3.44±1.16
3.53±0.81
2.90±0.73
EO/%
1.53±1.55
2.69±2.18
1.19±0.71
1.21±0.63
1.96±0.52
2.21±3.64
2.55±3.01
BASO/%
0.07±0.05
0.04±0.05
0.05±0.05
0.04±0.05
0.04±0.05
0.05±0.05
0.04±0.04
sults Obvious leukocytopoiesis-promoting action was shown in the high-and middle-dose Caulis Spatholobi effective
component groups and in the high-and low-dose Colla Corii Asini groups. The difference of WBC count was insignifi-
cant between Caulis Spatholobi group and Colla Corii Asini group at the same multiple clinical equivalent doses.
Conclusion The effective components from Caulis Spatholobi can significantly promote leukocytopoiesis in rats with
leukopenia induced by chemotherapeutics,and the effect is equivalent with that of Colla Corii Asini.
Keywords:Caulis Spatholobi;Colla Corii Asini;Cyclophosphamide;Leukocytopoiesis-promoting action
·176·
中药新药与临床药理 2011年 3月第 22卷第 2期
组 别
空白对照组
模型对照组
阿胶高剂量组
阿胶低剂量组
鸡血藤高剂量组
鸡血藤中剂量组
鸡血藤低剂量组
WBC(×109)/L-1
8.04±1.97
2.19±0.87**
2.36±0.73**
2.10±0.79**
1.64±0.61**
1.85±0.80**
1.90±0.75**
NEUT/%
14.93±3.86
2.80±3.04**
3.92±3.07**
3.48±2.80**
5.13±6.56**
3.48±3.63**
4.29±2.77**
LYMPH/%
78.43±4.45
79.24±9.25
76.62±8.30
75.74±4.88
76.97±14.76
79.15±5.72
77.34±3.05
MONO/%
4.95±1.65
17.13±7.18**
18.10±5.66**
19.04±3.43**
15.05±6.84*
16.45±4.86**
17.67±3.37**
EO/%
1.64±0.98
0.35±0.34**
0.54±0.34*
0.58±0.34**
2.18±4.10
0.57±0.38**
0.33±0.41**
BASO/%
0.05±0.08
0.49±0.60
0.82±0.69
0.53±0.29**
0.67±0.67
0.35±0.43
0.37±0.37
组 别
空白对照组
模型对照组
阿胶高剂量组
阿胶低剂量组
鸡血藤高剂量组
鸡血藤中剂量组
鸡血藤低剂量组
WBC(×109)/ L-1
10.63±2.14
3.59±0.65**
4.75±1.41**
4.51±1.33**
4.85±1.53**
4.57±1.14**
3.55±0.86**
NEUT/%
12.75±3.03
14.80±6.12
17.34±6.50
16.05±5.70
23.17±15.41
14.30±12.36
15.00±3.21
LYMPH/%
81.41±3.22
69.06±7.77**
67.89±8.47**
69.54±6.15**
59.85±13.48*
70.37±6.82**
67.90±8.82**
MONO/%
4.41±1.03
12.91±4.77**
13.29±3.16**
13.21±3.13**
16.42±3.17**
12.70±7.96
14.89±3.69**
EO/%
1.39±0.45
2.95±4.74
1.36±2.62
0.98±1.35
0.32±0.46**
0.65±0.21**
3.27±6.61
BASO/%
0.04±0.05
0.28±0.12**
0.13±0.19
0.23±0.17*
0.26±0.10**
0.35±0.45
0.13±0.15△
表 3 给药第 9天对白细胞数及其分类比例的影响(x±s,n=10)
Table 3 WBC count and classification in rats blood of each
group at the 9th day of administration
注:与空白组相比, *P < 0.05, **P < 0.01。
2.4 给药第11天各组白细胞数及其分类比例 模型组
大鼠白细胞总数仍远低于空白对照组,白细胞分类比
例失调。与模型组相比,鸡血藤高、中剂量组 WBC
总数明显增加,具有统计学意义(P < 0.05 或 P <
0.01),提示鸡血藤高、中剂量组WBC回升的速度明
显高于模型组,且高中低剂量间有较好的量效关系,
虽然白细胞分类比例仍然失调,但淋巴细胞、中性粒
细胞绝对数(总数乘以相应的比例)明显高于模型组,
符合外周血白细胞组成的特点。阿胶高、低剂量组组
WBC总数与模型组相比具有统计学意义(P < 0.05或
P < 0.01),淋巴细胞、中性粒细胞绝对数也高于模型
组。同时鸡血藤高、中剂量组与阿胶高、低剂量组作
用相当,与空白组比较均无统计学意义,尤其鸡血藤
与阿胶的高剂量组大鼠白细胞总数基本恢复正常,见
表 4。
3 讨论
恶性肿瘤患者化疗后,由于化疗药物的细胞毒作
用,机体造血多能干细胞受到不同程度的杀伤,造成
骨髓功能低下,三系血细胞生成减少,其中以白细胞
生成的抑制为最甚 [2]。CTX 是临床常见的化疗药,
因其在杀伤肿瘤细胞的同时,也会对人体产生不同
程度的毒副作用,其中最主要的是骨髓抑制和免疫
功能低下,造成白细胞减少症 [5]。因此本研究采用
CTX制备大鼠白细胞低下模型。本研究采用动物专
用血球分析仪进行检测分析,增加了数据的科学性和
可靠性。
本研究表明,鸡血藤有较好的升高 CTX致白细
胞低下大鼠的白细胞的功效,并且具有一定的量效关
系。鸡血藤的成人等效剂量的 9,3倍的大鼠升白细
胞作用与相应倍数的阿胶相当,表明两者均具有较好
的升高白细胞药效。由于鸡血藤资源丰富,价格低
廉,鸡血藤具有良好的开发应用前景。
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(编辑:梁进权)
组 别
空白对照组
模型对照组
阿胶高剂量组
阿胶低剂量组
鸡血藤高剂量组
鸡血藤中剂量组
鸡血藤低剂量组
WBC(×109)/L-1
8.30±2.16
4.64±1.40**
7.68±2.86△△
6.81±2.79△
7.54±3.02△△
6.16±2.28△
5.18±2.35**
NEUT/%
14.94±4.52
37.05±8.80**
40.25±9.43**
38.13±5.90**
35.51±7.43**
37.27±8.91**
38.36±12.74**
LYMPH/%
79.57±5.24
55.53±8.49**
53.81±9.15**
56.08±6.14**
56.18±7.30**
56.83±7.53**
55.88±11.79**
MONO/%
3.86±1.25
5.34±1.01*
5.06±1.06*
4.54±1.14
6.83±1.96**
4.70±1.54
4.58±2.13
EO/%
1.63±0.97
2.05±1.79
0.85±0.43*
1.19±1.08
1.01±1.39
1.11±0.38
1.09±0.77
BASO/%
0.00±0.00
0.04±0.07
0.03±0.07
0.08±0.10*
0.48±1.02
0.09±0.11*
0.10±0.12*
表 4 给药第 11天对白细胞数及其分类比例的影响(x± s,n=10)
Table 4 WBC count and classification in rats blood of each
group at the 11th day of administration
注:与空白组相比, *P < 0.05, **P < 0.01;与模型组相比,△P <
0.05,△△P < 0.01。
表 2 给药第7天对白细胞数及其分类比例的影响(x±s,n=10)
Table 2 WBC count and classification in rats blood of each
group at the 7th day of administration
注:与空白组相比, *P < 0.05, **P < 0.01。
·177·