全 文 ：36 9( C1) , 29 41 ( C2) , 76 90 ( C3) , 38 6 ( C4) ,
140 0( C5) , 121 4( C6) , 31 7( C7) , 29 40( C8) ,
49 7( C9) , 36 4( C10) , 20 7( C11) , 28 9( C12) ,
42 0( C13) , 56 3( C14) , 25 6( C15) , 38 7( C16) ,
55 6( C17) , 11 8( C18) , 19 8( C19) , 35 6( C20) ,
19 1( C21) , 33 5( C22) , 25 6( C23) , 49 7( C24) ,
28 9( C25) , 19 2( C26) , 18 7( C27) , 27 7( C28) ,
11 9( C29) , 100 9( C1) , 73 6( C2) , 77 1( C3) ,
70 1( C4) , 76 9( C5) , 61 3( C6)。与胡萝卜苷
对照品薄层色谱对照, Rf 值及显色行为均一致, 且
与对照品的混合熔点不下降。1HNMR、13CNMR
数据与文献数据对照一致[ 13] , 鉴定化合物 9为 胡
萝卜苷。
参考文献:
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玉簪花的抗肿瘤活性甾体皂苷成分研究
刘接卿1, 2 , 王翠芳2 , 邱明华2 ,胡文祥1 *
( 1 首都师范大学 化学系,北京 100048; 2 中国科学院昆明植物研究所 植物化学与西部植物资源持续利用
国家重点实验室,云南 昆明 650204)
摘 要:目的 为实现对药用植物的可持续利用 ,对玉簪 H os ta p lantaginea 的花进行了甾体皂苷类成分及其体外
抗肿瘤作用的研究。方法 应用常规柱色谱(包括正相、反相和凝胶柱色谱)分离和波谱分析方法对玉簪花进行分
离和结构鉴定;以 3 种悬浮肿瘤细胞白血病肿瘤细胞株 ( H L60、Jurkat、K562)和 3 种贴壁实体瘤细胞株(肝癌
HepG2、乳腺癌 M CF7、胃癌 SGC7901)为研究对象, 采用 MT T 法对化合物进行体外抗肿瘤活性筛选研究。结果
从玉簪花中分离鉴定了 10 个化合物, 其中 3 个化合物为首次从该植物中分离得到, 分别为吉托皂苷元( 1)、吉托皂
苷元3OD葡萄糖( 1! 4)D半乳糖苷 ( 3)、吉托皂苷元3O{D木糖( 1! 4)D葡萄糖 ( 1! 2)[D木糖
( 1! 3) ]OD葡萄糖( 1! 4)D半乳糖苷} ( 10) ; 7 个已知化合物, 分别是吉托皂苷元3OD半乳糖苷( 2)、吉
托皂苷元3O L鼠李糖( 1! 2)D半乳糖苷( 4)、吉托皂苷元3OD葡萄糖( 1! 2)D葡萄糖( 1! 4)D半
乳糖苷( 5)、吉托皂苷元3OD葡萄糖( 1! 4)O[L鼠李糖 ( 1! 2) ]D半乳糖苷( 6)、替告皂苷元3OD葡
萄糖( 1!4)O[L鼠李糖( 1! 2) ]D半乳糖苷( 7)、吉托皂苷元3O{D葡萄糖 ( 1! 2)O[D木糖( 1! 3) ]
OD葡萄糖( 1! 4)D半乳糖苷} ( 8)、吉托皂苷元3OD葡萄糖( 1! 2)O[L鼠李糖( 1! 4)D木糖( 1!
3) ]OD葡萄糖( 1! 4)D半乳糖苷( 9)。体外抗肿瘤活性实验结果显示化合物 5, 6, 8~ 10 对肝癌 HepG2、乳
腺癌 MCF7 和胃癌 SGC7901 肿瘤细胞毒活性较强。结论 玉簪花中的甾体化合物对不同肿瘤细胞具有细胞毒选
择性,有一定的抗癌活性, 同时利用地上部分的花作为药用资源, 可以实现对该药用植物的可持续利用。
关键词:玉簪花; 甾体皂苷;抗肿瘤活性
中图分类号: R284 1 文献标识码: A 文章编号: 02532670( 2010) 04052007
∀520∀ 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 41 卷第 4 期 2010 年 4 月
收稿日期: 20090713 基金项目:北京市政府专项基金资助项目( 0090653071)
* 通讯作者 胡文祥 T el: ( 010) 68904756 Email: huw x66@ 163 com
Steroidal saponins from flowers of Hosta plantaginea and their antitumor activities
LIU Jieqing1, 2 , WANG Cuifang2 , QIU M inghua2 , HU Wenx iang1
( 1 Depar tment of Chemistry, Capital Normal University, Beijing 100048, China; 2 State Key Laboratory of Phytochemistry
and Plant Resources in West China, Kunming Institute of Bo tany, Chinese Academy of Sciences, Kunming 650204, China)
Abstract: Objective T o study the chem ical constituents in the f low er of H osta p lantaginea and the
ant itumo r activity in v it ro Methods Various chromatogr aphic techniques w er e used to separate and puri
fy the const ituents and their structures w ere elucidated on the basis of spect roscopic analysis T he inhibito
r y effects of these compounds on HL60, Jurkat , K562, HepG2, MCF7, and SGC7901 cell lines w ere test
ed in v it ro by M TT method Results Ten compounds w ere isolated including three, the f irstfound ones
( 1, 3, 10) and seven known compounds ( 2, 4 # 9) in this plant There ar e g ito genin ( 1) , gitogenin 3O
Dgalactopy ranoside ( 2) , g itog enin 3ODglucopyr anosyl ( 1! 4)Dgalactopy ranoside ( 3) , g ito genin
3OLrhamnopyrano sy l ( 1! 2)Dgalactopyranoside ( 4) , gitog enin 3ODg lucopyranosy l ( 1! 2)
Dg lucopyranosy l ( 1 !4)Dgalactopyranoside ( 5) , gitogenin 3ODg lucopyranosy l ( 1! 4)O[Lrh
amnopyr anosyl ( 1!2) ]Dgalactopy rano side ( 6) , ( 25R)5spirostane3o l ( t igog enin) 3ODgluco
pyr anosyl ( 1!4)O[Lr hamnopyranosy ( 1 !2) ]Dgalactopyranoside ( 7) , gitogenin 3O{Dgluco
pyr anosyl ( 1 !2)O[Dxy lopyranosy l ( 1! 3) ]ODg lucoy ranosyl ( 1 !4)Dgalactopyr anoside} ( 8) ,
gitogenin 3O{Dglucopy ranosyl ( 1!2)O[Lr hamnopyranosy l ( 1! 4)Dxy lopyranosy l ( 1! 3) ]O
Dg lucopyranosy l ( 1! 4)Dgalactopyranoside} ( 9) , and gitog enin 3O{Dxylopyranosy l ( 1 ! 4)
Dg lucopyranosy l ( 1 ! 2)[ Dxy lopy rano syl ( 1 ! 3) ]ODglucopyr anosyl ( 1 ! 4)Dgalactopy rano
side} ( 10) Compounds 5, 6, 8 # 10 show ed the fav orable inhibitor y effectss on HepG2, MCF7, and
SGC7901 cell g row th Conclusion The study suggests that the steroidal saponins f rom the flower of H .
p lantaginea have the ant itumor ef fects and these cyto to xic act iv ities on different tumor cell lines are vari
ous and select iv e
Key words: H osta p lantaginea ( Lam ) Aschers ; s teroid saponin; ant itumor act iv ity
玉簪花是百合科玉簪属玉簪 H osta p lantag
inea ( Lam ) Aschers 的花, 广泛分布于中国南方
地区。全草在民间可用于治疗乳腺炎、中耳炎、溃疡
和痈等疾病 [ 1]。玉簪属植物中的化学成分主要包括
黄酮苷类、甾体皂苷类和生物碱类。20世纪 90 年
代,日本对玉簪属中的 4个种 H . siebold ii 的全草
和H . p lantaginea、H . j aponica、H . longip es 的
地下部分进行了化学成分和相关抗肿瘤活性的研
究[ 2~ 4] , 研究表明其中的某些甾体皂苷类化合物对
HL60细胞有细胞毒活性。
2007年, Wang 等 [ 5, 6]对玉簪的全草部分继续进
行了研究,从中分离出一系列新的生物碱化合物, 并
且研究发现对烟草镶嵌病毒( TMV)有很好的活性。
玉簪属于名贵药材, 是多年生草本植物,为了实现可
持续利用植物资源并发现其具抗肿瘤活性的化合
物,笔者对玉簪的花进行了化学成分及抗肿瘤活性
体外筛选研究。本实验对该种植物的花的化学成分
及体外抗肿瘤活性进行了进一步研究, 从中分离出
10个甾体类化合物, 其中化合物 1、3、10 为首次从
该植物中分离得到。分别是吉托皂苷元( g itog enin,
1)、吉托皂苷元3OD葡萄糖( 1 ! 4)D半乳糖
苷[ g ito genin 3ODg lucopyranosy l ( 1 ! 4)D
galactopy ranoside, 3]、吉托皂苷元3O{D木糖
( 1 !4)D葡萄糖( 1 ! 2)[ D木糖( 1! 3) ]O
D葡萄糖( 1 !4)D半乳糖苷} [ g ito genin 3O{
Dxy lopyrano sy l ( 1 ! 4)Dg lucopyrano sy l ( 1 !
2)[ Dxylopyr anosyl ( 1 ! 3) ]ODglucopy r
ano sy l ( 1! 4)Dgalactopyranoside} , 10] ; 另外分
得其他 7个已知化合物: 吉托皂苷元3OD半乳
糖苷 ( gitogenin 3ODgalactopy rano side, 2)、吉
托皂苷元3OL鼠李糖( 1!2)D半乳糖苷[ g i
togenin 3OLrhamnopyr anosyl ( 1 ! 2)Dga
lactopyranoside, 4]、吉托皂苷元3OD葡萄糖
( 1 !2)D葡萄糖( 1!4)D半乳糖苷[ g ito genin
3ODg lucopyranosy l ( 1 ! 2)Dg lucopy rano
sy l ( 1 !4)Dgalactopyrano side, 5]、吉托皂苷元
3OD葡萄糖( 1 ! 4)O[L鼠李糖( 1 ! 2) ]
D半乳 糖 苷 [ gitog enin 3ODg lucopyranosy l
∀521∀中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 41 卷第 4 期 2010 年 4 月
( 1! 4)O[ Lrhamnopyrano sy l ( 1 ! 2) ]Dga
lactopy ranoside, 6]、替告皂苷元3OD葡萄糖
( 1! 4)O[ L鼠李糖 ( 1 ! 2) ]D半乳糖苷
[ ( 25R )5spir ostane3ol ( tig ogenin ) 3OD
glucopyr anosyl ( 1 ! 4 )O[ Lrhamnopy ranosy
( 1! 2) ]Dgalactopy ranoside, 7]、吉托皂苷元3
O{D葡萄糖( 1! 2)O[ D木糖( 1 !3) ]OD
葡萄糖( 1 !4)D半乳糖苷} [ g ito genin 3O{D
glucopyr anosyl ( 1!2)O[ Dxy lopyranosy l ( 1 !
3) ]ODg lucoyr anosyl ( 1 ! 4)Dgalactopyr
ano side} , 8]、吉托皂苷元3OD葡萄糖( 1 ! 2)
O[L鼠李糖( 1 ! 4)D木糖 ( 1 ! 3) ]OD葡
萄糖( 1 !4)D半乳糖苷[ gitog enin 3O{Dg lu
copyr anosyl ( 1 ! 2)O[Lrhamnopy ranosyl ( 1!
4)Dxylopyranosy l ( 1 ! 3) ]ODg lucopy rano
sy l ( 1 ! 4)Dgalactopyr anoside} , 9]。有文献报
道[ 2 ~ 4]化合物 9和 10对悬浮细胞 HL60有细胞毒
活性,但对 HepG2、乳腺癌 MCF7和胃癌 SGC7901
3种贴壁实体瘤细胞毒活性均为首次报道。化合物
1~ 10的化学结构式见图 1。
( rh a= rhamnopyranosyl ; glu = glucopyranosyl; xyl= x ylopyran osyl)
图 1 化合物 1~ 10的结构
Fig 1 Structures of compounds 1- 10
1 仪器与材料
FABMS用 VG Autospec # 3000型质谱仪测
定; NMR 用 Bruker AM # 400 和 DRX # 500 核磁
共振仪(以 TM S 为内标)测定; 柱色谱硅胶 ( 200~
300 目)和薄层色谱硅胶 GF 254均为青岛海洋化工厂
生产。Thermo H EPA CLA SS100 CO2 恒温培养
箱, Thermo LUM IN OSKAN A SCENT 酶标仪,
BIORAD 680数据分析器, NIKON ECLIPSE TiS
倒置显微镜, M TT 试剂( Sigma公司)。玉簪花经吉
林大学药学院王广树教授鉴定为百合科玉簪属玉簪
H osta p lantag inea ( Lam ) Ascher s 的花, 标本存
放于吉林大学药学院。
2 提取和分离
玉簪干燥花 2 8 kg, 粉碎,用 95%乙醇渗漉提
取,减压回收溶剂, 得浸膏。依次用石油醚( 60~ 90
∃ )、醋酸乙酯和正丁醇进行萃取, 得到石油醚部分
约 150 g (油状物)、醋酸乙酯部分 51 g、正丁醇部分
97 g。将正丁醇部分经硅胶柱色谱分离, 用氯仿甲
醇( 0% 1、100%1、20% 1、10 %1、5%1、1% 1、0% 1)进
行梯度洗脱,得 7 个组分, F r &( 7 5 g )用氯仿甲
醇( 30% 1)洗脱同时利用(氯仿甲醇系统)重结晶的
方法得到化合物 1( 510 mg ) , Fr ∋( 5 2 g)用氯仿
甲醇( 15 %1)洗脱同时利用(氯仿甲醇系统)重结晶
的方法得到化合物 2( 42 mg) , Fr (( 25 6 g)用氯
仿甲醇( 8 %1)洗脱同时利用(氯仿甲醇系统)重结
晶的方法得到化合物 3( 70 mg )、4( 18 mg) , Fr )
( 45 5 g )用氯仿甲醇( 4 % 1, 3 % 1, 2% 1)反复柱色
谱分离得到化合物 5 ( 293 mg )、6 ( 31 mg )、7 ( 34
mg)、8( 890 mg)、9( 1 51 g )、10( 22 mg )。
3 结构鉴定
∀522∀ 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 41 卷第 4 期 2010 年 4 月
化合物 1: C27H 44O 4 ; 无色柱状结晶( CH 3OH
CH Cl3 ) ; negat ive FABMS: m/ z 431 [ M - H ] - ;
1HNMR( C5D5N, 500 MH z) : 3 96( 1H , br s, H
3) , 3 76 ( 1H , br d, J= 11 0 Hz, H2) , 3 57( 1H ,
dd, J= 10 5, 3 1 Hz, H26a) , 3 50 ( 1H , dd, J =
10 5, 10 5 Hz, H26b) , 1 15 ( 3H , d, J= 6 8 Hz,
H21) , 0 90 ( 3H , s, H19) , 0 80 ( 3H , s, H18 ) ,
0 70( 3H , d, J= 5 5 Hz, H27) ; 13CNMR( C5D 5N,
100 MH z) : 44 5( t , C1) , 72 3( d, C2) , 75 7( d, C
3) , 34 1( t , C4) , 44 5( d, C5) , 27 5( t , C6) , 31 8
( t , C7) , 35 1( d, C8) , 54 0 ( d, C9) , 37 1 ( s, C
10) , 20 9( t , C11) , 40 3( t , C12) , 39 7( s, C13) ,
55 9( d, C14) , 31 3( t , C15) , 80 7( d, C16) , 61 8
( d, C17) , 16 2( q, C18) , 13 1( q, C19) , 41 4( d, C
20) , 14 1( q, C21) , 109 3( s, C22) , 31 0( t, C23) ,
284( t , C24) , 29 9( t, C25) , 666( t, C26) , 16 8( q,
C27)。根据以上数据及文献报道的 MS、1HNMR、
13 CNMR数据[ 7, 8] ,鉴定化合物1为吉托皂苷元。
化合 物 2: C33H 54O9 ; 无色针 晶 ( CH 3OH
CH Cl3 ) ; negat ive FABMS: m/ z 593 [ M - H ] - ;
1HNMR( C5D5N, 500 MHz) : 4 96 ( 1H , d, J =
7 8 Hz, H1) , 1 14 ( 3H , d, J = 6 7 Hz, H21) ,
0 91( 3H , s, H19) , 0 80( 3H , s, H18) , 0 71( 3H ,
d, J = 5 5 Hz, H27) ; 13 CNMR( C5D 5N, 100 MH z)
: 45 7( t , C1) , 70 6( d, C2) , 85 0( d, C3) , 34 1
( t , C4) , 44 6( d, C5) , 28 1( t , C6) , 32 1( t , C7) ,
34 5( d, C8) , 54 3( d, C9) , 36 8( s, C10) , 21 4( t ,
C11) , 40 0 ( t , C12) , 40 7 ( s, C13) , 56 3 ( d, C
14) , 32 2( t, C15) , 81 1( d, C16) , 62 9( d, C17) ,
16 6( q, C18) , 13 4( q, C19) , 41 9( d, C20) , 15 0
( q, C21) , 109 2( s, C22) , 31 8( t , C23) , 29 2( t ,
C24) , 30 6( t , C25) , 66 8( t , C26) , 17 3( q, C27) ,
1040( d, C1) , 72 4( d, C2) , 75 3( d, C3) , 70 2( d,
C4) , 77 3( d, C5) , 62 4( t, C6)。根据以上数据及
文献报道的 MS、1HNMR、13CNMR数据[ 3] ,鉴定化
合物 2为吉托皂苷元3OD半乳糖苷。
化合物 3: C39H 64O14 ; 无色针晶 ( CH 3OH
CH Cl3 ) ; negat ive FABMS: m/ z 755 [ M - H ] - ;
1
HNMR( C5D 5N, 500 MHz) ; : 5 31( 1H , d, J =
7 8 Hz, H1∗) , 4 93 ( 1H , d, J= 7 7 Hz, H1) ,
4 15( 1H , s, H2) , 3 87 ( 1H , m, H3) , 3 56 ( 1H ,
dd, J= 10 5, 3 1 Hz, H26a) , 3 50 ( 1H , dd, J =
10 5, 10 5 Hz, H26b) , 1 13 ( 3H , d, J= 6 6 Hz,
H21) , 0 90 ( 3H , s, H19) , 0 81 ( 3H , s, H18 ) ,
0 70( 3H , d, J = 5 8 Hz, H27) ; 13 CNMR( C5D5N,
100 MHz) : 45 7( t, C1) , 70 4( d, C2) , 84 6( d, C
3) , 34 0( t , C4) , 44 6( d, C5) , 28 1( t, C6) , 32 1
( t , C7) , 34 6 ( d, C8) , 54 3 ( d, C9) , 36 9 ( s, C
10) , 21 4( t, C11) , 40 1( t , C12) , 40 8( s, C13) ,
56 3( d, C14) , 32 2( t , C15) , 81 1( d, C16) , 63 0
( d, C17) , 16 6( q, C18) , 13 4( q, C19) , 42 0( d, C
20) , 15 1( q, C21) , 109 3( s, C22) , 31 8( t, C23) ,
29 3( t , C24) , 30 6( t , C25) , 66 9( t , C26) , 17 4
( q, C27) , 103 4( d, C1) , 72 2( d, C2) , 75 2( d,
C3) , 80 2( d, C4) , 76 0( d, C5) , 61 0( t, C6) ,
107 1( d, C1∗) , 75 8( d, C2∗) , 78 5( d, C3∗) , 73 1
( d, C4∗) , 78 7( d, C5∗) , 63 1( t, C6∗)。根据以上
数据及文献报道的 MS、1HNMR、13CNMR数
据[ 9 ] ,鉴定化合物 3为吉托皂苷元3OD 葡萄糖
( 1 !4)D半乳糖苷。
化合物 4: C39H 64O13 ;白色粉末( CH 3OH) ; neg
at iv e FABMS: m/ z 739 [ M - H ] - ; 1HNMR
( C5D5N, 500 MHz) : 6 30( 1H , br s, H1∗) , 5 01
( 1H , d, J= 7 7 Hz, H1) , 4 15( 1H , m, H2) , 3 89
( 1H , ddd, J= 11 2, 8 6, 5 3 H z, H3) , 3 59( 1H ,
dd, J= 10 4, 3 1 Hz, H26a) , 3 50 ( 1H , dd, J=
10 4, 10 3 Hz, H26b) , 1 61 ( 3H , d, J = 6 2 Hz,
H6∗) , 1 13( 3H , d, J = 6 2 Hz, H21) , 0 90( 3H ,
s, H19) , 0 81 ( 3H , s, H18) , 0 70 ( 3H , d, J=
5 4 Hz, H27) ; 13CNMR ( C5N 5N, 100 MHz ) :
45 8( t, C1) , 70 7( d, C2) , 85 5( d, C3) , 33 6( t,
C4) , 44 6( d, C5) , 28 2 ( t , C6) , 32 2 ( t , C7) ,
34 6( d, C8) , 54 5( d, C9) , 37 0( s, C10) , 21 6( t,
C11) , 40 1 ( t , C12) , 40 8 ( s, C13) , 56 5 ( d, C
14) , 32 3( t , C15) , 81 1( d, C16) , 63 2( d, C17) ,
16 6( q, C18) , 13 5( q, C19) , 42 0( d, C20) , 14 9
( q, C21) , 109 2( s, C22) , 32 0( t, C23) , 29 2( t,
C24) , 30 6 ( d, C25) , 77 0( t , C26) , 17 4 ( q, C
27) , 101 6( d, C1) , 77 1( d, C2) , 76 5( d, C3) ,
71 0( d, C4) , 76 1( d, C5) , 62 2( t , C6) , 102 2
( d, C1∗) , 72 4( d, C2∗) , 72 6( d, C3∗) , 74 2( d, C
4∗) , 69 5( d, C5∗) , 18 6( q, C6∗)。根据以上数据及
文献报道的 MS、1HNMR、13 CNMR数据[ 4] , 鉴定
化合物 4 为吉托皂苷元3OL鼠李糖 ( 1 ! 2)
D半乳糖苷。
化合物 5: C45H 74O19 ;白色粉末( CH 3OH) ; neg
at iv e FABMS: m/ z 917 [ M - H ] - ; 1HNMR
( C5D5N, 500 MHz) : 5 25 ( 1H , d, J= 7 8 Hz,
∀523∀中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 41 卷第 4 期 2010 年 4 月
H1∗) , 5 00 ( 1H , d, J= 8 0 Hz, H1 ) , 4 56( 1H ,
d, J = 7 8 Hz, H1) , 4 14( 1H , m , H2) , 3 86( 1H ,
m, H3) , 3 56( 1H , dd, J= 10 3, 3 2 Hz, H26a) ,
3 50 ( 1H , dd, J = 10 3, 10 3 Hz, H26b) , 1 13
( 3H , d, J= 6 7 Hz, H21) , 0 92 ( 3H , s, H19 ) ,
0 81 ( 3H , s, H18 ) , 0 70 ( 3H , d, J = 5 5 Hz,
H27) ; 13CNMR ( C5D5N, 100 MHz) : 45 6 ( t, C
1) , 70 5( d, C2) , 84 7( d, C3) , 34 1( t, C4) , 44 7
( d, C5) , 28 1( t, C6) , 32 2( t , C7) , 34 6( d, C8) ,
54 4( d, C9) , 36 9( s, C10) , 21 4( t , C11) , 40 1
( t , C12) , 40 8( s, C13) , 56 3( d, C14) , 32 1( t , C
15) , 81 1( d, C16) , 63 0( d, C17) , 16 6( q, C18) ,
13 4( q, C19) , 42 0( d, C20) , 15 0( q, C21) , 109 3
( s, C22) , 31 8( t , C23) , 29 3( t , C24) , 30 6( t , C
25) , 66 9( t , C26) , 17 3( q, C27) , 103 4( d, C1) ,
72 8( d, C2) , 75 5( d, C3) , 80 9( d, C4) , 75 5
( d, C5) , 60 4( t , C6) , 105 1( d, C1∗) , 86 0( d, C
2∗) , 78 5( d, C3∗) , 71 8 ( d, C4∗) , 78 2 ( d, C5∗) ,
63 1( t, C6∗) , 106 9( d, C1 ) , 76 6( d, C2 ) , 77 8
( d, C3 ) , 70 5( d, C4 ) , 79 0( d, C5 ) , 61 8( t, C
6 )。根据以上数据及文献报道的 MS、1HNMR、
13 CNMR数据[ 2] ,鉴定化合物 5为吉托皂苷元3O
D葡萄糖( 1!2)D葡萄糖( 1!4)D半乳糖苷。
化合物 6: C45H 74O 18 ;白色粉末( CH3OH ) ; neg
at ive FABMS: m/ z 901 [ M - H ] - ; 1HNMR
( C5D5N, 500 MHz) : 6 20 ( 1H , br s, H1∗) , 5 17
( 1H , d, J= 7 8 Hz, H1 ) , 4 95 ( 1H , d, J =
7 7 Hz, H1) , 4 15( 1H , m, H2) , 3 86( 1H , m, H
3) , 3 58 ( 1H , dd, J= 10 5, 3 1 Hz, H26a) , 3 51
( 1H , dd, J= 10 5, 10 5 Hz, H26b) , 1 62( 3H , d,
J= 6 0 Hz, H6∗) , 1 13( 3H , d, J = 6 8 Hz, H21) ,
0 92( 3H , s, H19) , 0 81( 3H , s, H18) , 0 70( 3H ,
d, J = 5 4 Hz, H27) ; 13 CNMR( C5D 5N, 100 MH z)
: 45 8( t , C1) , 70 6( d, C2) , 85 3( d, C3) , 33 5
( t , C4) , 44 7( d, C5) , 28 2( t , C6) , 32 2( t , C7) ,
34 6( d, C8) , 54 5( d, C9) , 36 9( s, C10) , 21 5( t ,
C11) , 40 1 ( t , C12) , 40 7 ( s, C13) , 56 4 ( d, C
14) , 32 3( t, C15) , 81 1( d, C16) , 63 1( d, C17) ,
16 6( q, C18) , 13 4( q, C19) , 42 0( d, C20) , 14 9
( q, C21) , 109 2( s, C22) , 31 8( t , C23) , 29 3( t ,
C24) , 30 6 ( d, C25) , 66 9 ( t , C26) , 17 3 ( q, C
27) , 101 2( d, C1) , 76 8( d, C2) , 76 9( d, C3) ,
81 2( d, C4) , 75 5( d, C5) , 61 0( t , C6) , 102 2
( d, C1∗) , 72 4( d, C2∗) , 72 6( d, C3∗) , 74 1( d, C
4∗) , 69 5( d, C5∗) , 18 5( q, C6∗) , 107 2( d, C1 ) ,
75 4( d, C2 ) , 78 8( d, C3 ) , 72 2( d, C4 ) , 78 5
( d, C5 ) , 63 0( t, C6 )。根据以上数据及文献报
道的 MS、1HNMR、13 CNMR数据 [ 4] ,鉴定化合物 6
为吉托皂苷元3OD葡萄糖( 1! 4)O[L鼠李
糖( 1! 2) ]D半乳糖苷。
化合物 7: C45H 74O17 ;白色粉末( CH 3OH) ; neg
at iv e FABMS: m/ z 885 [ M - H ] - ; 1HNMR
( C5D5N, 500 MHz) : 6 22( 1H , br s, H1∗) , 5 18
( 1H , d, J = 7 7 Hz, H1 ) , 4 93 ( 1H , d, J=
7 6 Hz, H1) , 3 36( 1H , m, H3) , 3 59 ( 1H , dd,
J= 10 5, 3 0 Hz, H26a) , 3 50( 1H , dd, J= 10 5,
10 5 Hz, H26b) , 1 70( 3H , d, J = 6 3 H z, H6∗) ,
1 14 ( 3H , d, J= 6 8 Hz, H21) , 0 87 ( 3H , s, H
19) , 0 82( 3H , s, H18) , 0 70( 3H , d, J= 5 4 Hz,
H27) ; 13 CNMR ( C5D5N, 100 MHz) : 37 4( t , C
1) , 30 0( t , C2) , 77 3( d, C3) , 34 5( t, C4) , 44 7
( d, C5) , 29 2( t , C6) , 32 4( t , C7) , 35 6( d, C8) ,
54 5( d, C9) , 36 0 ( s, C10) , 21 4 ( t, C11) , 40 3
( t , C12) , 40 8( s, C13) , 56 5( d, C14) , 32 2( t , C
15) , 81 1( d, C16) , 63 2( d, C17) , 16 5( q, C18) ,
12 4( q, C19) , 42 0( d, C20) , 15 1( q, C21) , 109 2
( s, C22) , 31 8( t, C23) , 29 3( t, C24) , 30 6( d, C
25) , 66 9( t , C26) , 17 3( q, C27) , 100 2( d, C1) ,
77 0( d, C2) , 76 4 ( d, C3) , 81 3 ( d, C4) , 75 3
( d, C5) , 61 0( t , C6) , 102 2( d, C1∗) , 72 4( d, C
2∗) , 72 7( d, C3∗) , 74 1( d, C4∗) , 69 5( d, C5∗) ,
18 5( q, C6∗) , 107 2( d, C1 ) , 75 5( d, C2 ) , 78 9
( d, C3 ) , 72 2( d, C4 ) , 78 5( d, C5 ) , 63 1( t , C
6 )。根据以上数据及文献报道的 MS、1HNMR、
13
CNMR数据[ 4] ,鉴定化合物 7为替告皂苷元3O
D葡萄糖( 1 ! 4)O[L鼠李糖( 1 ! 2) ]D半
乳糖苷。
化合物 8: C50H 82O23 ;白色粉末( CH 3OH) ; neg
at iv e FABMS: m/ z 1 049 [ M - H ] - ; 1HNMR
( C5D5N, 500 MHz) : 5 18 ( 1H , d, J= 7 5 Hz,
H1∗) , 4 97( 1H , d, J= 7 7 Hz, H1∗∗) , 4 76( 1H ,
d, J= 6 9 H z, H1 ) , 4 66 ( 1H , d, J= 7 8 Hz,
H1, 1) , 4 14( 1H , m, H2) , 3 88 ( 1H , m, H3) ,
3 56( 1H , dd, J= 10 4, 3 0 Hz, H26a) , 3 53( 1H ,
dd, J = 10 4, 10 4 Hz, H26b) , 1 15 ( 3H , d, J=
6 9 Hz, H21) , 0 92( 3H , s, H19) , 0 81( 3H , s, H
18 ) , 0 70 ( 3H , d, J = 5 6 Hz, H27) ; 13CNMR
( C5D5N, 100 MHz) : 45 5( t , C1) , 70 8( d, C2) ,
∀524∀ 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 41 卷第 4 期 2010 年 4 月
84 2( d, C3) , 34 0( t, C4) , 44 5( d, C5) , 28 1( t ,
C6) , 32 1( t , C7) , 34 5( d, C8) , 54 3 ( d, C9) ,
36 8( s, C10) , 21 4 ( t , C11) , 40 0( t, C12) , 40 7
( s, C13) , 56 3( d, C14) , 32 2( t , C15) , 81 3( d, C
16) , 62 9( d, C17) , 16 6( q, C18) , 13 4( q, C19) ,
41 9( d, C20) , 15 0( q, C21) , 109 2( s, C22) , 31 8
( t , C23) , 29 2( t, C24) , 30 6( t, C25) , 66 8( t , C
26) , 17 3( q, C27) , 103 2( d, C1) , 72 5( d, C2) ,
75 7( d, C3) , 79 4( d, C4) , 76 1( d, C5) , 60 6
( t , C6) , 104 8( d, C1∗) , 81 1( d, C2∗) , 86 9( d, C
3∗) , 70 4 ( d, C4∗) , 77 6 ( d, C5∗) , 62 7 ( t , C6∗) ,
104 7( d, C1 ) , 75 1( d, C2 ) , 78 5( d, C3 ) , 71 3
( d, C4 ) , 78 1( d, C5 ) , 62 9( t , C6 ) , 104 9( d,
C1∗∗) , 75 5( d, C2∗∗) , 78 7 ( d, C3∗∗) , 70 8( d, C
4∗∗) , 67 3( t, C6∗∗)。根据以上数据及文献报道的
MS、1HNMR、13 CNMR数据 [ 2] ,鉴定化合物 8为吉
托皂苷元3O{ D葡萄糖 ( 1 ! 2)O[ D木糖
( 1! 3) ]OD葡萄糖( 1! 4)D半乳糖苷}。
化合物 9: C55H 90O 27 ;白色粉末( CH3OH ) ; neg
at ive FA BMS: m/ z 1 181 [ M - H ] - ; 1HNMR
( C5D 5N, 500 MHz) : 5 23 ( 1H , d, J= 7 8 Hz,
H1∗) , 5 10 ( 1H , d, J= 7 5 Hz, H1 ) , 4 96( 1H ,
d, J = 7 5 Hz, H1, 1∗∗) , 4 89 ( 1H , br s, H1∗ ) ,
4 76( 1H , d, J= 7 6 Hz, H1) , 4 13( 1H , m, H2) ,
3 87( 1H , m , H3) , 3 56( 1H , dd, J= 10 4, 3 0 Hz,
H26a) , 3 52( 1H , dd, J= 10 4, 10 4 Hz, H26b) ,
1 27( 3H , d, J = 6 0 Hz, H6∗ ) , 1 16( 3H , d, J =
6 4 Hz, H21) , 0 93( 3H , s, H19) , 0 82( 3H , s, H
18) , 0 72 ( 3H , d, J= 5 3 Hz, H27) ; 13CNMR
( C5D5N, 100 MHz) : 45 6 ( t , C1) , 70 5( d, C2) ,
84 2( d, C3) , 34 1( t, C4) , 44 6( d, C5) , 28 1( t ,
C6) , 32 2( t , C7) , 34 6( d, C8) , 54 4 ( d, C9) ,
36 9( s, C10) , 21 5 ( t , C11) , 40 1( t, C12) , 40 8
( s, C13) , 56 4( d, C14) , 32 3( t , C15) , 81 3( d, C
16) , 63 0( d, C17) , 16 7( q, C18) , 13 5( q, C19) ,
42 0( d, C20) , 15 1( q, C21) , 109 3( s, C22) , 31 9
( t , C23) , 29 3( t, C24) , 30 7( t, C25) , 66 9( t , C
26) , 17 4( q, C27) , 103 3( d, C1) , 72 6( d, C2) ,
75 7( d, C3) , 79 4( d, C4) , 76 1( d, C5) , 60 7
( t , C6) , 104 7( d, C1∗) , 81 2( d, C2∗) , 86 7( d, C
3∗) , 70 4 ( d, C4∗) , 77 5 ( d, C5∗) , 62 7 ( t , C6∗) ,
104 7( d, C1 ) , 75 3( d, C2 ) , 78 5( d, C3 ) , 71 3
( d, C4 ) , 78 1( d, C5 ) , 62 9( t , C6 ) , 106 9( d,
C1∗∗) , 75 5( d, C2∗∗) , 74 7 ( d, C3∗∗) , 76 0( d, C
4∗∗) , 64 1 ( t , C5∗∗) , 99 7 ( d, C1∗ ) , 72 5 ( d, C
2∗ ) , 72 5( d, C3∗ ) , 73 9 ( d, C4∗ ) , 70 0 ( d, C
5∗ ) , 18 7( q, C6∗ )。根据以上数据及文献报道的
MS、1HNMR、13CNMR数据[ 2] , 鉴定化合物 9为吉
托苷元3OD葡萄糖( 1! 2)O[L鼠李糖( 1!
4)D木糖 ( 1 ! 3) ]OD葡萄糖 ( 1 ! 4)D半
乳糖苷。
化合物 10: C55H 90O27 ; 白色粉末 ( CH 3OH ) ;
negativ e FABMS: m/ z 1 181[ M - H ] - ; 1HNMR
( C5D5N, 500 MHz) : 5 05 ( 1H , d, J= 7 7Hz,
H1∗) , 4 90( 1H , d, J = 7 9 Hz, H1 ) , 4 86( 1H ,
d, J= 7 0 Hz, H1∗∗) , 4 75 ( 1H , d, J= 8 0 Hz,
H1∗ ) , 4 36( 1H , d, J = 7 7 Hz, H1) , 4 16( 1H ,
m, H2) , 3 85 ( 1H , m, H3 ) , 3 57 ( 1H , dd, J=
10 4, 3 0 Hz, H26a) , 3 50 ( 1H , dd, J = 10 4,
10 4 Hz, H26b) , 1 14( 3H , d, J = 6 7 Hz, H21) ,
0 91( 3H , s, H19) , 0 80( 3H , s, H18) , 0 71( 3H ,
d, J= 5 5 Hz, H27) ; 13CNMR( C5D5N, 100 MHz)
: 45 5( t, C1) , 70 7( d, C2) , 84 3( d, C3) , 33 8
( t , C4) , 44 7( d, C5) , 28 2( t, C6) , 32 1( t , C7) ,
34 6( d, C8) , 54 5( d, C9) , 36 8( s, C10) , 21 5( t,
C11) , 40 2 ( t , C12) , 40 8 ( s, C13) , 56 4 ( d, C
14) , 32 3( t , C15) , 81 1( d, C16) , 63 1( d, C17) ,
16 6( q, C18) , 13 4( q, C19) , 42 0( d, C20) , 14 9
( q, C21) , 109 2( s, C22) , 31 7( t, C23) , 29 3( t,
C24) , 30 5 ( d, C25) , 66 8( t , C26) , 17 3 ( q, C
27) ; 3Oinner gal : 103 2( d, C1) , 72 5( d, C2) ,
74 9( d, C3) , 79 2 ( d, C4) , 75 5 ( d, C5) , 60 9
( t , C6) ; 3Of irst glu : 103 7( d, C1∗) , 80 4( d,
C2∗) , 87 0( d, C3∗) , 70 4( d, C4∗) , 78 5( d, C5∗) ,
62 9( t , C6∗) ; 3Osecond glu : 104 2 ( d, C1 ) ,
75 0( d, C2 ) , 86 8( d, C3 ) , 70 6( d, C4 ) , 77 5
( d, C5 ) , 62 9( t, C6 ) ; 3Ofirst xy l : 104 7( d,
C1∗∗) , 75 4 ( d, C2∗∗) , 77 8( d, C3∗∗) , 70 7 ( d, C
4∗∗) , 66 8( t, C5∗∗) ; 3Osecond xyl : 105 9( d, C
1∗ ) , 75 3( d, C2∗ ) , 77 8 ( d, C3∗ ) , 69 2 ( d, C
4∗ ) , 67 2( t , C5∗ )。根据以上数据及文献报道的
MS、1HNMR、13CNMR数据 [ 10] ,鉴定化合物 10为
吉托皂苷元3O{D木糖( 1! 4)D葡萄糖( 1!
2)[ D木糖( 1 ! 3) ]OD葡萄糖( 1 ! 4)D半
乳糖苷}。
4 体外抗肿瘤活性试验
取对数生长期的 6种肿瘤细胞, 用 MTT 法测
量在 595 nm下的吸光度( A )值,用 LOGIT 法计算
∀525∀中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 41 卷第 4 期 2010 年 4 月
半数抑制浓度( IC50 ) , 见表 1。结果表明化合物 5、
6、8 ~ 10 对肝癌 H epG2、乳腺癌 MCF7 和胃癌
SGC7901实体肿瘤细胞生长的抑制作用较强。
表 1 不同化合物对不同肿瘤细胞株的 IC50
Table 1 IC50 of compounds on different tumor cell lines
化合物
悬浮白血病细胞
IC50/ ( !mol∀ L- 1 )
H L60 Ju rkat K562
贴壁实体肿瘤细胞
IC50/ ( !mol∀ L- 1 )
肝癌
H epG2
乳腺癌
MCF7
胃癌
SGC7901
1 > 40 > 40 > 40 9 95 > 40 39 5
2 > 40 > 40 > 40 > 40 > 40 > 40
3 20 58 16 96 17 65 8 17 > 40 9 92
4 18 28 13 46 15 25 7 14 > 40 7 32
5 3 50 3 95 4 35 1 13 1 23 1 85
6 3 11 4 32 5 25 1 14 1 51 1 72
8 2 45 2 84 2 76 0 16 0 56 0 44
9 2 92 4 21 3 14 1 13 0 89 0 34
10 2 41 4 54 3 24 1 16 1 02 0 59
10羟基喜树碱 0 04 0 03 1 60 11 90 16 81 19 80
顺铂 1 92 3 66 17 63 4 58 57 25 5 79
5 讨论
文献报道[ 2~ 4] 从玉簪地下部分分离出的甾体皂
苷类化合物对 HL60肿瘤细胞有较强的抑制活性,
本课题组在此基础上对玉簪的花进行了化学成分和
抗肿瘤活性的研究,研究结果显示化合物 5、6、8~
10对贴壁实体肿瘤细胞 HepG2、乳腺癌 MCF7 和
胃癌 SGC7901有很好的细胞毒活性,并且效果明显
强于阳性对照。同时还发现,以 gitogenin 为母核的
一系列化合物中,当 3位羟基上连的糖苷键的糖数
量达到 3以上时活性才相对较强,而其活性强弱与
所连接糖的顺序及种类关系不大,只与相连的糖数
量有比较密切的关系。在研究中发现, 具有抗肿瘤
活性的化合物在玉簪的花中量较高,特别是抗肿瘤
活性相对较强的化合物 8和 9,在该植物干燥花中
量分别达到 0 03%和 0 05%,这就为该药用植物的
可持续利用提供了依据和基础。
致谢: 中国科学院昆明植物研究所杨艳课题组
给予在抗肿瘤活性筛选上的帮助和支持。
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珍珠莲中的黄酮类化学成分
王学贵1, 2 ,沈丽淘2 ,曾芸芸2 ,田永清1 ,徐汉虹1 *
( 1. 华南农业大学 天然农药与化学生物学教育部重点实验室, 广东 广州 510642;
2 四川农业大学 农学院,四川 雅安 625014)
摘 要:目的 研究珍珠莲 F icus sarmentosa var henry i中的黄酮类化学成分。方法 应用柱色谱技术分离纯化,
核磁共振及质谱鉴定化合物结构。结果 从珍珠莲氯仿和醋酸乙酯层萃取物中分离得到 11 个黄酮类化合物, 分
∀526∀ 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 41 卷第 4 期 2010 年 4 月
收稿日期: 20091115 基金项目:国家自然科学基金资助项目( 30571235)作者简介:王学贵( 1976 # ) ,男,博士,四川乐山人,讲师,博士,主要从事植物化学成分研究。 Em ail : wanderw xg@ sicau edu cn
* 通讯作者 徐汉虹 Email: hhx u@ scau edu cn