全 文 :中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 42 卷 第 9 期 2011 年 9 月
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丹参注射液对急性心肌梗死犬血清微量元素和心肌形态学的影响
岳海涛 1,吕铭洋 2,吕文伟 3,杨 煜 4*
1. 白求恩医科大学制药厂,吉林 长春 130012
2. 吉林大学珠海学院 化学与药学系,广东 珠海 519041
3. 吉林大学白求恩医学院 机能科学实验中心,吉林 长春 130021
4. 吉林大学白求恩医学院 医学生物学实验中心,吉林 长春 130021
摘 要:目的 观察丹参注射液对急性心肌梗死犬血清微量元素和心肌形态学的影响。方法 杂种犬 24 只随机分为 4 组(每
组 6 只),分别为模型组、刺五加注射液(10.0 mg/kg)阳性对照组、丹参注射液低剂量和高剂量(5.5、11.0 mg/kg)组。结
扎犬左冠状动脉前降支,制备急性心肌梗死模型,观察丹参注射液对血清微量元素(Cu2+、Zn2+、Ca2+)水平的影响;通过
HE 染色,观察心肌细胞形态学的变化。结果 与模型组比较,丹参注射液组血清微量元素 Cu2+的量明显降低(P<0.05、
0.01),Zn2+、Ca2+的量明显增加(P<0.05、0.01),病理形态学观察可见缺血心肌细胞损伤程度明显减轻。结论 丹参注射
液对心肌梗死犬的心肌具有明显的保护作用。
关键词:丹参注射液;心肌梗死;微量元素;心肌细胞;病理形态学
中图分类号:R285.5 文献标志码:A 文章编号:0253 - 2670(2011)09 - 1799 - 03
Effects of Danshen Injection on serum trace elements and myocardial
pathomorphology in dogs with acute myocardial infarction
YUE Hai-tao1, LV Ming-yang2, LV Wen-wei3, YANG Yu4
1. Pharmaceutical Factory of Norman Bethune University, Changchun 130012, China
2. Department of Chemistry and Pharmaceutical Sciences, Zhuhai College, Jilin University, Zhuhai 519041, China
3. Experimental Center of Functional Sciences, Norman Bethune Medical College of Jilin University, Changchun 130021, China
4. Experimental Center in Medical Biology, Norman Bethune Medical College of Jilin University, Changchun 130021, China
Key words: Danshen Injection; myocardial infarction; trace elements; myocardial cells; pathomorphology
丹参为唇形科植物丹参 Salivia miltiorrhiza
Bunge 的干燥根和根茎,是我国传统中药,具有活
血通经,祛瘀止痛的功效,丹参的活性成分、提取
物及制剂药理作用广泛[1-6]。现代药理学研究表明,
丹参注射液能减轻急性心肌缺血模型犬心肌缺血程
度和缺血范围,缩小心肌梗死面积[7];降低外周血
管阻力,增加心肌收缩力和心输出量[8]。本实验采
用结扎犬左冠状动脉前降支造成急性心肌梗死模
型,检测丹参注射液对模型犬血清微量元素和病理
形态学的影响,以进一步探讨其对犬急性心肌梗死
的保护作用及机制。
1 材料与方法
1.1 动物
健康成年杂种犬,体质量 12~16 kg,雌雄兼用,
由吉林大学实验动物中心提供。
1.2 药品
丹参注射液由白求恩医科大学制药厂提供,批
号 0802006,规格 10 mL/支;刺五加注射液,上海
第九制药厂生产,批号 0312066,规格 20 mL/支(含
总黄酮 100 mg)。
1.3 仪器
SC—3 型电动呼吸机,上海医疗器械厂生产;
SSW 电热恒温水槽,上海博迅实业有限公司生产;
LD25—2 离心机,北京离心机厂生产;PE—503 型
原子吸收分光光度计,美国;日产 Olympus BX50
显微镜。
1.4 分组、给药和模型的制备
杂种犬 24 只,随机分为 4 组,每组 6 只。模型
收稿日期:2011-03-07
作者简介:岳海涛(1961—),男,吉林长春人,工程师,主要从事新药开发研究。.
*通讯作者 杨 煜 Tel: (0431)85619074 E-mail: yyu@jlu.edu.cn
中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 42 卷 第 9 期 2011 年 9 月
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组给予等量生理盐水,刺五加注射液组给予刺五加
注射液 10.0 mg/kg,2 个丹参注射液组分别给予丹
参注射液 5.0、10.0 mg/kg,各组于造模后股静脉 iv
给药。iv 给予犬戊巴比妥钠 30 mg/kg 麻醉,背位固
定,切开颈部皮肤,气管插管,连接人工呼吸机。
于左侧第四肋间施开胸术,暴露心脏,剪开心包,
做心包术。分离冠状动脉左前降支主干中下 1/3 交
界处,穿线以备结扎。术毕稳定 15 min 后结扎冠状
动脉,制备急性心肌梗死模型。
1.5 指标检测和病理形态观察
结扎冠状动脉 360 min 后,股静脉取血,制备
血清,用原子吸收分光光度计测定血清中 Cu2+、
Zn2+、Ca2+水平。取心脏,置 10%甲醛溶液中固定,
常规石蜡切片,HE 染色,光镜下观察心肌细胞病
理形态[9]。
1.6 统计学方法
数据用 sx ± 表示,多组间比较采用单因素方差
分析。
2 结果
2.1 对急性心肌梗死犬血清中 Cu2+、Zn2+、Ca2+的
影响
与模型组比较,丹参注射液 5.0、10.0 mg/kg 和
刺五加注射液 10.0 mg/kg 均能明显降低急性心肌梗
死犬血清 Cu2+水平(P<0.05);丹参注射液 5.0、10.0
mg/kg 还能升高血清 Zn2+、Ca2+的水平(P<0.05、
0.01)。结果见表 1。
表 1 丹参注射液对急性心肌梗死犬血清 Cu2+、Zn2+和 Ca2+的影响 ( 6=± n , sx )
Table 1 Effects of Danshen Injection on Cu2+, Zn2+, and Ca2+ in serum of dogs with acute myocardial infarction ( 6=± n , sx )
组别 剂量/(mg·kg−1) Cu2+/(mg·L−1) Zn2+/(mg·L−1) Ca2+/(mg·L−1)
模型 - 197.34±52.48 120.00±18.36 4 947.83±1 056.02
丹参注射液 10.0 132.00±22.48* 164.50±32.74* 6 977.33± 852.49**
5.0 141.67±24.36* 159.67±24.62* 6 566.50± 453.05*
刺五加注射液 10.0 140.83±22.97* 166.34±39.03* 6 459.74±1 219.60*
与模型组比较:*P<0.05 **P<0.01
*P<0.05 **P<0.01 vs model group
2.2 对急性心肌梗死犬心肌病理形态学的影响
模型组可见心肌间质明显水肿状,表面为心肌
间质间隙扩大,组织疏松,分布范围广,且主要位
于心室壁的内、中肌层,病灶内可见较多心肌纤维
胞浆嗜伊红浓染,胞核浓缩,部分心肌纤维出现溶
解,破坏;局部炎细胞浸润,部分区域可见出血。
刺五加注射液组可见心肌间质水肿灶较模型组缩
小,多呈小灶状且散在分布于心室壁的内、中层,
可见少部分心肌细胞胞核浓缩,胞浆红染,末见明
显肌纤维溶解破坏及出血改变,局部部分炎细胞浸
润。丹参注射液 10 mg/kg 组心肌间质水肿程度明显
轻于模型组,水肿灶小,散在于室壁内、中肌层,
偶见心肌纤维嗜伊红浓染及肌纤维溶解破坏,局部
未见炎细胞浸润,未见出血改变;丹参注射液 5
mg/kg 组心肌间质水肿程度明显轻于模型组,水肿
灶小,散在于室壁内、中肌层,偶见心肌纤维嗜伊
红浓染及肌纤维溶解破坏,局部未见炎细胞浸润,
未见出血改变。上述结果表明丹参注射液对心肌梗
死犬心肌细胞病理形态学改变有明显的保护作用。
结果见图 1。
3 讨论
丹参注射液主要有效成分为丹参素。丹参素具
有减轻犬心肌缺血程度和缺血范围、缩小心肌梗死
面积、降低外周血管阻力、增加心肌收缩力和心输
图 1 丹参注射液对急性心肌梗死犬心肌病理形态学的影响
Fig. 1 Effect of Danshen Injection on myocardial pathomorphology of dogs with acute myocardial infarction
模型组 刺五加注射液组 丹参注射液 10 mg·kg−1 组 丹参注射液 5 mg·kg−1 组
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出量等作用[7-8],还具有扩张血管、抑制血小板聚集、
降低血黏度、抗凝和抗氧化等作用[10-11]。
心肌缺血时,由于大量细胞缺血、缺氧甚至坏
死导致大量 Cu2+释放入血,Cu2+的增加使血清低密
度脂蛋白(LDL)增加并加重其氧化,使受损心肌
细胞增多,加重心肌缺血及心肌细胞坏死。锌是构
成膜蛋白的成分,可稳定细胞膜的结构和功能,可
以激活体内谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)。锌缺
乏使体内有活性的 GSH-Px 减少,过氧化脂质生成
增加,GSH-Px 消耗增多导致其活性下降,影响体
内自由基清除。当心肌缺血、缺氧时,大量 Ca2+向
细胞内转移,血液中 Ca2+水平下降,进而加重心肌
梗死[12]。本实验结果表明,丹参注射液明显减轻心
肌间质水肿,心肌纤维胞浆嗜伊红浓染消失,这些
作用可能是通过降低急性心肌梗死犬血液中 Cu2+
水平,升高 Zn2+、Ca2+水平,抑制自由基的产生和促
进其清除,减轻心肌梗死时心肌细胞损伤而实现的。
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