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图 3 固体 A的 FAM 部分 GC2MS色谱图
Fig13 GC2MS for FAM part of solid A
1 n = 9 2 n = 10 3 n = 11
图 4 化合物 1～3 的结构
Fig14 Structure of compunds 1 - 3
基2正二十烷基)2正十六碳酰胺 (1) 、(2 S , 3 S , 4 R)222
N2(1 ,3 ,42三羟基2正二十烷基)2正十七碳酰胺 (2)
和 (2 S , 3 S , 4 R) 222N2(1 ,3 ,42三羟基2正二十烷基)2
正十八碳酰胺 (3) ,其中化合物 2 未见文献报道 (通
过 CA 检索未见化合物 1 和 3 的核磁数据报道所以
只能是和类似的神经酰胺进行比较) 。另外通过二
维NMR分析 ,加之与文献数据[2 ] C22′和C22″的碳
谱数据 ,之所以有差异应该和链长有关。
5 物理常数与波谱数据
化合物 1～3 : C36 H73 NO4 (1) , C37 H75 NO4 (2) ,
C38 H77 NO4 ( 3 ) , 无 色 针 晶 , mp 129～ 130 ℃
(C5 H5 N ) ; 1 H2NMR ( C5 D5 N/ TMS)δ: 8152 ( 1 H ,
brd) ,5107～5112 (1 H , m) ,4148～4150 (2 H , dd) ,
4138～4141 (1 H ,t) ,4127～4130 (1 H ,t) ,4149 (1 H ,
brs , H21) , 21 44～2148 (2 H , t ) , 1194～1196 (2 H ,
m) , 1124 ( 52 H) , 0183～ 0187 ( 6 H , t ) 。13 C2NMR
(C5 D5 N/ TMS)δ:17314 (s) ,7617 (d) ,7311 (d) ,6212
(t) ,5318 (d) ,3619 (t) ,3410 (t) ,3211 (t) ,3010 (nt) ,
2617 ( t ) , 2614 ( t ) , 2310 ( t ) , 1413 ( q ) 。IR νKBrmax
(cm - 1 ) : 3 340 , 3 219 , 2 850 , 1 621 , 1 548 , 1 467 ,
1 131 ,1 066 , 1 023 , 721 cm - 1 。ESI2MS m/ z : 584
[ M + H ] + (1) ; 598 [ M + H ] + (2) ; 612 [ M + H ] +
(3) 。
参考文献 :
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al1 Xant hyletin and xant hoxyletin f rom a gorgonian , Echino2
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[2 ] Safwat A A , Sherief I K , Mark T H1 Antiepileptic ceramides
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(2) : 1391
四逆散冻干粉化学成分变化的研究
李越峰1 ,严兴科1 ,李廷利2
①
黄玉新2
(甘肃中医学院 ,甘肃 兰州 730000 ; 21 黑龙江中医药大学 ,黑龙江 哈尔滨 150040)
摘 要 :目的 采用 RP2HPLC 法分析四逆散冻干粉的化学成分变化 ,为其工艺控制和配伍规律提供可靠依据。方
法 采用高效液相色谱法 ,色谱条件 : Kromasil C18柱 (250 mm ×416 mm ,5μm) ,体积流量 110 mL/ min ,柱温 28
℃,流动相 A 为乙腈 ;B 为磷酸水 (p H = 3) ,在检测波长为 210 nm 和 240 nm 条件下 ,构建四逆散冻干粉、缺味四逆
散及单味药冻干粉的 HPLC 色谱图 ,分析其化学成分的变化。结果 四逆散冻干粉 240 nm 波长下高效液相色谱
图 21 个成分峰中 ,确认了有 2 个组分来自柴胡 ,有 3 个组分来自白芍 ,有 10 个组分来自枳实 ,有 5 个组分来自甘
草 ,1 个组分为新物质。210 nm 波长下高效液相色谱图 24 个成分峰中 ,确认了有 1 个组分来自柴胡 ,有 4 个组分
来自白芍 ,有 14 个组分来自枳实 ,有 5 个组分来自甘草。结论 本方法稳定可控 ,可用于四逆散冻干粉指纹图谱
测定 ,可全面地反映其化学成分变化。
关键词 :四逆散冻干粉 ;指纹图谱 ;化学成分变化
中图分类号 :R28411 文献标识码 :A 文章编号 :0253 - 2670 (2010) 06 - 0854 - 06
·458· 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 41 卷第 6 期 2010 年 6 月
①收稿日期 :2010201221
基金项目 :国家自然科学基金资助项目 (C03050205)
作者简介 :李越峰 (1975 —) ,女 ,博士 ,工程师 ,研究方向是中药及复方有效成分的研究。 Tel :136193493643 通讯作者 李廷利 Tel : (0451) 82196294 E2mail :lyfyxk @1261com
Studies on chemical components of lyophil ized powder of Sinisan
L I Yue2feng1 , YAN Xing2ke1 , L I Ting2li2 , HUAN G Yu2xin2
(11 Gansu University of Traditional Chinese Medicine , Lanzhou 730000 , China ; 21 Heilongjiang University
of Traditional Chinese Medicine , Harbin 150040 , China)
Abstract : Objective The chemical component s of lyop hilized powder of Sinisan were analyzed by the
method of RP2HPL C1 Methods HPL C Met hod was applied for quality assessment on lyop hilized powder
of Sinisan1 Column : Kromasil C18 column (250 mm × 416 mm , 5μm) ; wavelengt h : 210 and 240 nm ;
flow2rate : 110 mL/ min ; column temperat ure : 28 ℃1 Mobile p hase : acetonit rile (A) and H2 O (acidified to
p H = 3 wit h p hosp horic acid) (B)1 Concent ration of lyop hilized powder of Sinisan was resolved into differ2
ent part s and analyzed by t he same met hod , the variation of t he chemical component s was analyzed1 Results
At 240 nm , 21 peaks were detected and two of them were confirmed to be f rom B u pleurum chi nense , t hree
f rom Paeonl a l acti f lora , ten f rom Cit rus auranti um , and five f rom Gl ycy rrhi z a uralensis1 At 210 nm , 24
peaks were detected and one of t hem was confirmed to be f rom B . chi nense , four f rom P. l acti f lora , four2
teen f rom C1 auranti um , and five form G. uralensis1 Conclusion This met hod can be used to establish the
fingerp rint chromatograp h of lyop hilized powder of Sinisan and elucidate t he variation of chemical compo2
nent s completely1
Key words : lyop hilized powder of Sinisan ; fingerp rinting ; varation of chemical component s
四逆散为东汉张仲景《伤寒论》首载 ,由柴胡、白
芍、枳实、甘草 4 味药物组成。为和解少阳 ,调和肝
脾的基础方剂 ,具有解郁透热、疏肝理脾、宣散气血
郁滞之功。中药复方是中医临床用药的主要形式 ,
化学成分是中药复方发挥药效作用的物质基础。中
药指纹图谱技术是一种综合的、可量化的化学分析
鉴定手段 ,它的出现为分析中药复方化学成分提供
了技术手段 ,因此 ,复方指纹图谱反映的不仅是所含
药物本身的信息 ,也反映了复方整体的天然组合化
学库[1 ,2 ] 。近年来 ,经过本实验对中药复方四逆散
冻干粉的镇静催眠作用药效学研究发现 ,其在改善
睡眠、提高睡眠质量方面具有独特的疗效[3 ] ,采用
RP2HPL C 法构建四逆散冻干粉指纹图谱[4 ] ,并进
行了拆方对比分析 ,对四逆散冻干粉化学成分变化
的分析研究 ,为揭示其改善睡眠作用药效物质提供
可靠依据。
1 仪器与试药
111 仪器 :日本岛津 2010 —A 高效液相色谱仪、电
子分析天平 A E240 (十万分之一 ,瑞士 M ET TL ER2
TOL EDO Co1 ) 、CQ250 超声波清洗器 (上海超声波
仪器厂) 。
112 对照品与试药 :对照品柴胡皂苷 a、柴胡皂苷
d、甘草酸单铵盐 (质量分数均为 98 %以上 ,由成都
思科华生物技术有限公司提供) ;甘草次酸 (批号
1107232200310) 、橙皮苷 (批号 1107212200211) 、柚
皮苷 (批号 1107222200309) 、芍药苷 (批号 1107362
200422)由中国药品生物制品检定所提供。柴胡 (伞
形科植物柴胡 B u pleurum chi nense DC1 ) 购于河北
省安国市康信义药材行 ,产地为陕西 ;白芍 (毛茛科
植物芍药 Paeonl a l acti f lora Pall1 ) 、炙枳实 (芸香
科植物酸橙 Cit urs auranti um L1 ) 、炙甘草 (豆科植
物甘草 Gl ycy rrhi z a uralensis Fisch1 ) 购于哈尔滨
市世一堂中药饮片厂。以上药材均由黑龙江中医药
大学生药学教研室都晓伟教授鉴定。乙腈 ( HPL C
级 ,美国 DI KMA 公司提供) ,水 ( Millipore water
p urification systems 制备) 、磷酸 (优级纯 ,北京益利
精细化学品有限公司提供) 。
2 方法与结果
211 对照品溶液的制备 :取芍药苷 ,柚皮苷 ,橙皮
苷 ,甘草酸 ,柴胡皂苷 a、d ,甘草次酸混合对照品 3
mg 精密称定 ,置 5 mL 量瓶中 ,加 75 %甲醇溶解并
稀释至刻度 ,摇匀。精密吸取上述溶液 015 mL 置
10 mL 量瓶中 ,用 75 %甲醇定容 ,即得。
212 四逆散的四味药材、缺味四逆散及四逆散冻干
粉的制备 :精密称取组成四逆散的 4 味药材、缺味四
逆散 (四逆散缺白芍、四逆散缺枳实、四逆散缺柴胡、
四逆散缺甘草)及四逆散药材适量 ,加入 10 倍量水 ,
煎煮 2 次 ,每次 1 h ,滤过 ,合并滤液 ,减压浓缩至稠
膏状 ,并于 70 ℃水浴浓缩至 018 g 生药/ mL 。采用
先煎煮后冷冻干燥工艺制备四逆散冻干粉备用。工
艺如下 : - 40 ℃制冷 , - 20 ℃保冻 2 h , - 10 ℃保冻
16 h ,20 ℃干燥 5 h ,35 ℃二次干燥 2 h。此工艺条
·558·中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 41 卷第 6 期 2010 年 6 月
件下 ,获得的四逆散冻干粉冻型饱满 ,复水性好 ,呈
淡黄色 ,网状疏松 ,水分小于 1 %。
213 供试品溶液制备 :精密称取四逆散冻干粉
12015 mg (相当于每味生药 10518 mg) 置于 25 mL
量瓶中 ,加入 75 %甲醇 20 mL ,密闭超声 40 min ,定
容至刻度 ,0145μm 滤膜过滤待测。同法 ,分别精密
称取柴胡冻干粉 1518 mg (相当于 15416 mg 柴胡生
药) 、拆方 1 (去柴胡)冻干粉 9715 mg (相当于每味生
药 9910 mg) 、白芍冻干粉 414 mg (相当于 17113 mg
白芍生药) 、拆方 2 (去白芍)冻干粉 8715 mg (相当于
每味生药 10012 mg) 、枳实冻干粉 3913 mg (相当于
10315 mg 枳实生药) 、拆方 3 (去枳实) 冻干粉 7217
mg (相当于每味生药 10418 mg) 、甘草冻干粉 4111
mg (相当于 10214 mg 甘草生药) 、拆方 4 (去甘草)
冻干粉 7113 mg (相当于每味生药 10215 mg) 制成
供试品溶液待测。
214 色 谱 条 件 : 色 谱 柱 为 Kromasil C18 柱
(250 mm ×416 mm , 5 μm) ;流动相 :乙腈2磷酸水
(p H 3) (梯度见表 1) ;检测波长 :210、240 nm ;体积
流量 :110 mL/ min ;柱温 :28 ℃。
表 1 梯度程序
Table 1 Gradient program
时间/ min 乙腈/ % 磷酸水 (p H 3) / %
0 10 90
10 10 90
30 15 85
35 18 82
40 18 82
42 20 80
62 28 72
70 28 72
75 30 70
80 33 67
85 33 67
95 50 50
105 50 50
125 90 10
215 方法学考察
21511 精密度试验 :取对照品混合溶液 ,连续进样
6 次 ,测定芍药苷、柚皮苷、橙皮苷、甘草酸、甘草次
酸峰面积 RSD 分别为 0198 %、1102 %、1112 %、
0195 %、1124 %。
21512 稳定性试验 :取同一份供试品溶液在上述色
谱条件下 ,分别在 0、6、12、24、36、72 h 各进样 10
μL ,测定芍药苷、柚皮苷、橙皮苷、甘草酸、甘草次酸
峰面 积 RSD 分 别 为 1101 %、0195 %、1112 %、
1135 %、0198 %。表明样品在 72 h 内稳定。
21513 重现性试验 :按“供试品溶液的制备”方法 ,
取同一批样品分别制备 6 份供试品溶液 ,各吸取 10
μL 进样测定 ,测得芍药苷、柚皮苷、橙皮苷、甘草酸
量的 RSD 分别为 1123 %、1144 %、1101 %、1145 %。
21514 回收率试验 :采用加样回收测定法。分别精
密称取已知量的样品共 6 份 ,分别加入一定量的芍
药苷、柚皮苷、柴胡皂苷 a、甘草次酸对照品 ,按供试
液制备方法制备样品 6 份 ,进样量 10 μL ,进行
H PL C 测定 ,测得芍药苷、柚皮苷、柴胡皂苷 a、甘草
次酸的平均回收率分别为 99196 %、98175 %、
99102 %、100108 % ; RSD 分别为 1137 %、1165 %、
2104 %、1196 %。
216 四逆散拆方化学成分研究
21611 拆方 1 化学成分研究 (去柴胡) :取柴胡、拆方
1、四逆散冻干粉供试品溶液 ,进样量 10μL , HPLC 检
测 ,同波长下进行图谱比对 ,并比较芍药苷、柚皮苷、
橙皮苷、甘草酸的量。结果见图 1 和表 2。
在 240 nm 检测波长下 ,四逆散冻干粉色谱图
中 15和19号成分峰与柴胡冻干粉中相对应峰的保
t/ min
a2芍药苷 b2柚皮苷 c2橙皮苷 d2甘草酸 e2柴胡皂苷 a
f2柴胡皂苷 d g2甘草次酸
12空白 22混合对照品 32柴胡冻干粉 42拆方 1
52四逆散冻干粉
a2peoniflorin b2naringin c2aurantiamarin d2glycyrrhizic acid
e2saikoside a f2saikoside d g2enoxolone
12blank 22mixed standard preparation 32Radi x B upleuri
lyophilized powder 42formula 1 52Sinisan lyophilized powder
图 1 拆方 1 化学成分分析
Fig11 Analysis on chemical component in separated
prescription 1 by removing Radix Bupleuri
·658· 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 41 卷第 6 期 2010 年 6 月
表 2 拆方 1 化学成分的分析测定
Table 2 Analysis and determination of chemical components in separated prescription 1
样 品
芍药苷
峰面积
溶出量/
(mg·g - 1白芍生药)
柚皮苷
峰面积
溶出量/
(mg·g - 1枳实生药)
橙皮苷
峰面积
溶出量/
(mg·g - 1枳实生药)
甘草酸
峰面积
溶出量/
(mg·g - 1甘草生药)
柴胡冻干粉 0 0 0 0 0 0 0 0
拆方 1 460 734 101 008 5 1 070 633 531 056 1 212 876 41253 3 172 077 31 844 9
四逆散冻干粉 474 876 91 780 9 1 199 003 561 810 02 234 486 41356 9 218 875 41 534 1
留时间及紫外吸收光谱均相同 ,但四逆散冻干粉色
谱图中“3 ”号成分峰 ,在拆方 1 煎煮物及柴胡煎煮
物图谱中未出现 ,提示在四逆散合方煎煮过程中产
生了新的化学成分。结果表明 ,四逆散中柚皮苷、甘
草酸的量高于拆方 1 的量 ,提示柴胡的加入对这两
种成分有一定的增溶作用。
在 210 nm 检测波长下 ,17 号峰来自柴胡 ,四逆
散色谱图未出现柴胡皂苷 a、d 成分峰 ,根据以往文
献报道 ,柴胡皂苷类成分不稳定 ,易发生次生化反应
而转化 ,因此 ,四逆散中未检测到柴胡皂苷类成分。
210 nm 波长色谱图中 17 号峰为 240 nm 波长色谱
图 15 号峰保留时间及紫外吸收光谱图一致 ,说明二
者为同一成分 ,只是在不同波长下的响应值不同
而已。
21612 拆方 2 化学成分研究 (去白芍) :取白芍、拆
方 2、四逆散供试品溶液 ,进样量 10μL , HPL C 检
测 ,同波长下进行图谱比对 ,并比较芍药苷、柚皮苷、
橙皮苷、甘草酸的量。结果见图 2 和表 3。
在 240 nm 波长下 ,通过比较分析发现 ,四逆散
冻干粉色谱图 1、5 和 6 号峰与白芍中相应位置处成
分的保留时间及紫外吸收光谱相同 ,因此 1、5 和 6
号峰均来自白芍 ,其中 6 号峰为芍药苷 ;测定结果表
明 ,在方剂配伍后 ,芍药苷溶出量明显高于其单煎物
的溶出量 ,约是其8倍 ,提示其他3种药物对白芍成
t/ min
a2芍药苷 b2柚皮苷 c2橙皮苷 d2甘草酸单铵盐 e2柴胡皂苷 a
f2柴胡皂苷 d g2甘草次酸
12空白 22混合对照品 32白芍冻干粉 42拆方 2
52四逆散冻干粉
a2peoniflorin b2naringin c2aurantiamarin d2ammonium
glycyrrhizinate salt e2saikoside a f2saikoside d g2enoxolone
12blank 22mixed standard preparation 32Radi x Paeoniae A lba
lyophilized powder 42formula 2 52Sinisan lyophilized powder
图 2 拆方 2 化学成分分析
Fig12 Analysis on chemical components in separated pre2
scription 2 by removing Radix Paeoniae Alaba
表 3 拆方 2 化学成分的分析测定
Table 3 Analysis and determination of chemical components in separated prescription 2
样 品
芍药苷
峰面积
溶出量/
(mg·g - 1白芍生药)
柚皮苷
峰面积
溶出量/
(mg·g - 1枳实生药)
橙皮苷
峰面积
溶出量/
(mg·g - 1枳实生药)
甘草酸
峰面积
溶出量/
(mg·g - 1甘草生药)
白芍冻干粉 67 843 11324 5 0 0 0 0 0 0
拆方 2 0 0 1 044 576 521 012 4 211 435 31876 9 198 877 41 557 8
四逆散冻干粉 458 723 91812 3 1 277 525 561 823 5 243 376 41200 1 208 879 41 583 3
分具有较强的增溶作用。四逆散冻干粉中柚皮苷、
橙皮苷、甘草酸的量均高于其拆方 2 冻干粉中的量 ,
说明白芍对其他药物成分也有一定的助溶作用。
在 210 nm 检测波长下 ,经过比较后发现 ,四逆
散冻干粉色谱图中 1、6、7、11 号峰均来自白芍。其
中 7 号峰成分为芍药苷 ;210 nm 下的 1 号峰成分与
240 nm 下的 1 号峰成分保留时间及紫外吸收光谱
图一致属同一成分 ;210 nm 下的 6 号峰成分与 240
nm 下的 5 号峰成分为同一物质 ;210 nm 下的 11 号
峰成分在 240 nm 下无吸收。
·758·中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 41 卷第 6 期 2010 年 6 月
21613 拆方 3 化学成分研究 (去枳实) :取枳实、拆方
3、四逆散冻干粉供试品溶液 ,进样量 10μL , HPLC检
测 ,同波长下进行图谱比对 ,并比较芍药苷、柚皮苷、
橙皮苷、甘草酸的量。结果见图 3 和表 4。
在 240 nm 波长下 ,四逆散冻干粉色谱图中 2、
3、4、8、9、10、11、12、13、20 号成分峰保留时间及紫
外吸收光谱与枳实冻干粉中相应位置成分峰均相
同 ,说明这些成分峰来自枳实 ,其中 11 号峰为柚皮
苷 ,12 号峰为橙皮苷 ;测定结果表明 ,全方煎煮后 ,
枳实中柚皮苷、橙皮苷成分溶出量比枳实单煎物高 ;
同时 ,配伍枳实的四逆散冻干粉甘草酸量高于缺少
枳实的拆方冻干粉中的量 ,提示四逆散中其他药物
对枳实中成分起到增溶作用 ,枳实对甘草中甘草酸
的溶出亦具促进作用。
在 210 nm 波长下 ,2、4、5、9、10、12、13、14、15、
18、19、21、22、24 号成分峰保留时间及紫外吸收光
谱与枳实冻干粉中相应位置成分峰均相同 ,说明这
些成分峰均来自枳实 ,其中 13 号峰为柚皮苷 ,14 号
峰为橙皮苷 ;210 nm 波长下 4 号峰与 240 nm 波长
下 2 号峰保留时间及紫外吸收光谱均相同属同一成
分 ;同理可以推断 ,210 nm 下 9 号峰与 240 nm 下 8
号峰亦属同种成分 ;210 nm 下 12 号峰与 240 nm 下
10 号峰为同种成分 ;210 nm 下 15 号峰与 240 nm
下 13 号峰属同一成分 ;210 nm 下 21 号峰与240 nm
t/ min
a2芍药苷 b2柚皮苷 c2橙皮苷 d2甘草酸单铵盐 e2柴胡皂苷 a
f2柴胡皂苷 d g2甘草次酸
12空白 22混合对照品 32枳实冻干粉 42拆方 3
52四逆散冻干粉
a2peoniflorin b2naringin c2aurantiamarin d2ammonium
glycyrrhizinate salt e2saikoside a f2saikoside d g2enoxolone
12blank 22mixed standard preparation 32Fructus A urantii
I mmaturus lyophilized powder 42formula 3
52Sinisan lyophilized powder
图 3 拆方 3 化学成分分析
Fig13 Analysis on chemical components in separated presc2
ription 3 by removing Fructus Aurantii Immaturus
表 4 拆方 3 化学成分的分析测定
Table 4 Analysis and determination of chemical components in separated prescription 3
样 品
芍药苷
峰面积
溶出量/
(mg·g - 1白芍生药)
柚皮苷
峰面积
溶出量/
(mg·g - 1枳实生药)
橙皮苷
峰面积
溶出量/
(mg·g - 1枳实生药)
甘草酸
峰面积
溶出量/
(mg·g - 1甘草生药)
枳实冻干粉 0 0 1 134 785 531 354 7 173 342 31245 5 0 0
拆方 3 470 498 91767 1 0 0 0 0 176 781 31 785 1
四逆散冻干粉 474 104 91710 7 1 188 535 551 746 7 222 696 41211 0 208 737 41 428 4
下 20 号峰为同一物质。
21614 拆方 4 化学成分研究 (去甘草) :取甘草、拆方
4、四逆散冻干粉供试品溶液 ,进样量 10μL , HPLC检
测 ,同波长下进行图谱比对 ,并比较芍药苷、柚皮苷、
橙皮苷、甘草酸的量。结果见图 4 和表 5。
在 240 波长下 ,经过比较分析后发现 ,四逆散冻
干粉色谱图中 7、14、16、17 和 18 号成分峰保留时间
及紫外吸收光谱图与甘草冻干粉中相应峰均相同 ,
可以推断这些成分来自甘草 ,其中 18 号峰为甘草
酸 ;测定结果表明 ,配伍甘草后冻干粉与去掉甘草冻
干粉比较 ,芍药苷、橙皮苷、柚皮苷溶出量均有明显
增多。四逆散冻干粉中甘草酸溶出量较之在甘草冻
干粉中也有一定增加。
在 210 nm 波长下四逆散冻干粉色谱图中 3、8、
16、20 和 23 号成分峰来自于甘草 ,其中 20 号成分
峰为甘草酸峰 ,210 nm 波长下的 8 号峰与 240 nm
波长下的 7 号峰保留时间及紫外吸收光谱图相同 ,
属同一成分 ;210 nm 波长下的 16 号峰与 240 nm 波
长下的 14 号峰为同种物质。
3 讨论
根据以往文献报道[5 ] ,由于柴胡皂苷 a、d 不稳
定在提取过程发生转化 ,致使在四逆散冻干粉色谱
图中未出现柴胡皂苷 a、d 色谱峰 ,对于二者的转化
过程有待进一步研究。指纹图谱测定结果表明 ,各
共有色谱峰的存在与否能够客观地反映四逆散冻干
粉的内在质量 ;四逆散冻干粉的工艺稳定可控 ,能够
·858· 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 41 卷第 6 期 2010 年 6 月
t/ min
a2芍药苷 b2柚皮苷 c2橙皮苷 d2甘草酸单铵盐 e2柴胡皂苷 a f2柴胡皂苷 d g2甘草次酸
12空白 22混合对照品 32甘草冻干粉 42拆方 4 52四逆散冻干粉
a2peoniflorin b2naringin c2aurantiamarin d2ammonium glycyrrhizinate salt e2saikoside a f2saikoside d g2enoxolone
12blank 22mixed standard preparation 32Radi x et R hi zoma Gl ycy rrhiz ae 42formula 3 52Sinisan lyophilized powder
图 4 拆方 4 化学成分分析
Fig14 Analysis on chemical component in separated prescription 4 by removing Radix et Rhizoma Glycyr rhizae
表 5 拆方 4 化学成分的分析测定
Table 5 Analysis and determination of chemical components in separated prescription 4
样 品
芍药苷
峰面积
溶出量/
(mg·g - 1白芍生药)
柚皮苷
峰面积
溶出量/
(mg·g - 1枳实生药)
橙皮苷
峰面积
溶出量/
(mg·g - 1枳实生药)
甘草酸
峰面积
溶出量/
(mg·g - 1甘草生药)
甘草冻干粉 0 0 0 0 0 0 193 345 41 257 7
拆方 4 391 944 81413 3 1 054 650 501 854 4 184 431 31556 9 0 0
四逆散冻干粉 483 255 91757 2 1 188 535 551 746 7 223 359 41212 66 208 811 41 435 9
保证所制四逆散冻干粉的质量均一可靠 ,为四逆散
冻干粉的质控提供了一个宏观的定量指标 ,而且也
为四逆散冻干粉化学成分研究奠定了基础。在进行
中药复方四逆散拆方煎煮化学成分研究后发现 ,在
配伍煎煮的过程中产生了新的成分 ,对于新成分的
确认有待于进一步研究 ;成分溶出量研究结果表明 ,
各成分间存在明显的相互增溶作用。根据这一现
象 ,今后在进行中药复方提取工艺研究过程中 ,不能
将方中各药毫无根据的孤立提取 ,应进行煎煮过程
中的化学成分变化研究 ,以免影响了复方的整体作
用效果。同时 ,通过复方拆方煎煮化学成分分析 ,为
研究复方的配伍规律 ,提供了方法借鉴。
参考文献 :
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图谱研究 [J ]1 中草药 , 2010 , 41 (1) : 562571
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色谱指纹图谱研究 [J ]1 中草药 , 2009 , 40 (4) : 56625681
[3 ] 李廷利 , 朱维莉 , 齐凤琴 , 等1 四逆散催眠作用的实验研究
[J ]1 中医药信息 , 2004 , 21 (1) : 封三1
[4 ] 中药注射剂指纹图谱研究技术要求 (暂行) [ S]1 20001
[5 ] 肖崇厚1 中药化学 [ M ]1 上海 : 上海科学技术出版社 , 19991
祁州漏芦根的化学成分研究
张喜萍1 ,3 ,杨 雁1 ,吴 明1 ,李力更1 ,张嫚丽1 ,霍长虹1 ,顾玉诚2 ,史清文1
①
(11 河北医科大学药学院 天然药物化学教研室 ,河北 石家庄 050017 ; 21 先正达集团 Jealott′s Hill 研究中心 ,
英国 R G42 6 EY 744000 31 甘肃省平凉市药品检验所 ,甘肃 平凉 744000)
摘 要 :目的 研究菊科植物祁州漏芦 R ha ponticum uni f lorum 根的化学成分。方法 采用系统溶剂提取法结合
各种色谱分离技术、理化性质和光谱数据鉴定结构。结果 从祁州漏芦根里分离得到 11 个单体成分 ,其中 6 个噻
吩类 ,2 个甾醇类 ,1 个五环三萜类 ,2 个长链脂肪酸类。结构鉴定为牛蒡子醛 (arctinal ,1) 、牛蒡子酮2b (arctinone2b ,
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①收稿日期 :2009212224
基金项目 :河北省自然科学基金资助项目 (08B032) ;河北省留学回国人员科技活动项目 (2006202) ;河北省中医药管理局和英国先正达研究
基金资助项目 (20082Hebei Medical University2Syngenta202)
作者简介 :张喜萍 (1983 —) ,甘肃平凉 ,女 ,硕士研究生 ,从事天然药物的研究和开发。3 通讯作者 史清文 Tel : (0311) 86265634 E2mail :shiqingwen @hebmu1edu1cn