全 文 ：半边旗二萜化合物５Ｆ对 ＨＯ８９１０ＰＭ细胞中
Ｎｒ１ｄ１表达的影响
何太平１，吴科锋２，吕应年２，龚先玲２，ＧｅｏｒｇｅＧｏｎｇＣｈｅｎ３，梁念慈２
（１．广东医学院 检验学院，广东 湛江 ５２４０２３；
２．广东天然药物研究与开发重点实验室，广东 湛江 ５２４０２３；
３．香港中文大学 威尔士亲王医院 外科系，香港 沙田）
［摘要］　目的：研究半边旗二萜化合物５Ｆ（５ＦｆｒｏｍＰｔｅｒｉｓｓｅｍｉｐｉｎｎａｔａＬ，ＰｓＬ５Ｆ）对人高转移卵巢癌 ＨＯ８９１０ＰＭ细胞中核
受体超家族成员１ｄ１（ｎｕｃｌｅａｒｒｅｃｅｐｔｏｒｓｕｂｆａｍｉｌｙ１，ｇｒｏｕｐＤ，ｍｅｍｂｅｒ１，Ｎｒ１ｄ１）表达的影响，探讨其抗肿瘤的可能作用机制。方
法：培养ＨＯ８９１０ＰＭ细胞，用０１％ＤＭＳＯ，１００μｍｏｌ·Ｌ－１ＰｓＬ５Ｆ分别处理ＨＯ８９１０ＰＭ细胞２４ｈ后，提取ＲＮＡ和总蛋白，应用
肿瘤基因芯片和荧光定量实时ＰＣＲ检测ＰｓＬ５Ｆ对Ｎｒ１ｄ１ｍＲＮＡ表达的影响；Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ法分析 ＰｓＬ５Ｆ对 Ｎｒ１ｄ１蛋白表达水
平的影响。结果：肿瘤基因芯片结果显示，１００μｍｏｌ·Ｌ－１ＰｓＬ５Ｆ处理组中 Ｎｒ１ｄ１ｍＲＮＡ表达水平是对照组的２６１７倍，荧光
定量实时ＰＣＲ结果与芯片结果吻合，ＰｓＬ５Ｆ处理组中 Ｎｒ１ｄ１ｍＲＮＡ表达水平是对照组的（３５３４±１０７）倍（Ｐ＜００１），并且
ＰｓＬ５Ｆ处理组中Ｎｒ１ｄ１蛋白表达水平是对照组的（７７１±０４３）倍（Ｐ＜００１）。结论：ＰｓＬ５Ｆ能明显上调 ＨＯ８９１０ＰＭ细胞中
Ｎｒ１ｄ１的表达，提示其与ＰｓＬ５Ｆ抗肿瘤作用密切相关。
［关键词］　半边旗；卵巢癌；Ｎｒ１ｄ１
［收稿日期］　２００８１０３０
［基金项目］　国家自然科学基金项目（３９８７０９９）；粤港科技合作项
目（ＧＨＰ／０２２／０６）
［通信作者］　梁念慈，Ｔｅｌ：（０７５９）２３８８５０１，Ｅｍａｉｌ：ｎｃｌｉａｎｇ＠ｇｄｍｃ．
ｅｄｕ．ｃｎ
　　半边旗（ＰｔｅｒｉｓｓｅｍｉｐｉｎｎａｔａＬ．ＰｓＬ）为凤尾属蕨
类植物，广泛分布于中国南方各省，民间常用于治疗
蛇伤、外伤出血、细菌性痢疾、肠炎、肝炎等。梁念慈
等发现其具有明显的抗肿瘤作用［１］，并分离和鉴定
了几种有效成分，其化学结构皆为二萜类化合
物［２］。其中之一 ５Ｆ（化学结构为 １１α羟基１５氧
１６烯对映贝壳杉烷１９酸，简称 ＰｓＬ５Ｆ）含量最高。
ＰｓＬ５Ｆ在体外可致人多种癌细胞死亡，其作用机制
主要是通过线粒体途径诱导癌细胞凋亡［３］。近期
本课题组研究结果表明，ＰｓＬ５Ｆ抑制人高转移卵巢
癌ＨＯ８９１０ＰＭ细胞生长与核因子κＢ（ｎｕｃｌｅａｒｆａｃ
ｔｏｒｋａｐｐａＢ，ＮＦκＢ）的活性［３］及细胞周期演进［４］等
相关，并用肿瘤基因芯片研究 ＰｓＬ５Ｆ抗肿瘤机制时
发现其明显诱导 ＨＯ８９１０ＰＭ细胞中核受体超家族
成员 １ｄ１（ｎｕｃｌｅａｒｒｅｃｅｐｔｏｒｓｕｂｆａｍｉｌｙ１，ｇｒｏｕｐＤ，
ｍｅｍｂｅｒ１，Ｎｒ１ｄ１）高表达，并分别用荧光定量实时
ＰＣＲ和蛋白印迹方法验证其对 Ｎｒ１ｄ１表达的影响，
并探讨其抗肿瘤的可能作用机制。
１　材料
１．１　细胞株　人高转移卵巢癌ＨＯ８９１０ＰＭ细胞购
自上海细胞生物研究所，由广东医学院生物化学与
分子生物学教研室保存。
１．２　药物　半边旗二萜化合物５Ｆ（纯度≥９５％，批
号０７０９１３）由广东天然药物研究与开发重点实验室
提供，实验前用二甲基亚砜（ｄｉｍｅｔｈｙｌｓｕｌｆｏｘｉｄｅ，ＤＭ
ＳＯ）溶解，培养基稀释，ＤＭＳＯ最终体积分数为
０１％（实验证明该体积分数对细胞无影响［２，４］）。
１．３　试剂　ＲＰＭＩ１６４０培养基（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，批号
Ｐ１５０２）；Ｎｒ１ｄ１兔多克隆抗体（ｃｅｌｓｉｇｎａｌｉｎｇ，批号
ＳＤ０５０６２３Ａ）；βａｃｔｉｎ兔 ＩｇＧ多抗（ＳａｎｔａＣｒｕｚ，批号
Ｄ０４２６）；辣根过氧化物酶标记抗兔ＩｇＧ（中杉金桥生
物，批号６９０６３）。
１．４　仪器　人肿瘤基因 ＯＨＳ８０２芯片（ＳＡＢｉｏ
ｓｃｉｅｎｃｅｓ）。ＣＫＸ３１Ａ１２ＰＨＰ型双目倒置显微镜（奥
林巴斯）；ＭｉｎｉＰｒｏｔｅｉｎＩ电泳槽和转移电泳槽（Ｂｉｏ
Ｒａｄ公司）；ＲｏｔｏｒＧｅｎｅ３０００ＲｅａｌｔｉｍｅＰＣＲ仪（Ｃｏｒ
ｂｅｔＲｅｓｅａｒｃｈ公司）。
２　方法
２．１　肿瘤基因芯片检测 ＰｓＬ５Ｆ对 Ｎｒ１ｄ１表达的影
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响　培养ＨＯ８９１０ＰＭ细胞，实验浓度参照参考文献
［４］，分别用０１％ ＤＭＳＯ，１００μｍｏｌ·Ｌ－１ＰｓＬ５Ｆ处
理ＨＯ８９１０ＰＭ细胞２４ｈ，加 Ｔｒｉｚｏｌ试剂裂解细胞，
干冰运输至上海康成生物公司按芯片操作步骤进行
检测，并由上海康成生物公司出具检测报告。
２．２　荧光定量实时ＰＣＲ验证Ｎｒ１ｄ１表达　参照荧
光定量实时 ＰＣＲ要求，设计引物。Ｎｒ１ｄ１：５′
ＧＧＧＣＴＴＣＴＣＣＣＡＧＴＴＴＣＣＡ３′（上 游），５′ＡＧＡＣ
ＣＡＴＴＴＡＧＧＧＣＣＴＣＧＴＴＡＴ３′（下 游）；βａｃｔｉｎ：５′
ＣＣＴＧＴＡＣＧＣＣＡＡＣＡＣＡＧＴＧＣ３′ （上 游 ）， ５′
ＡＴＡＣＴＣＣＴＧＣＴＴＧＣＴＧＡＴＣＣ３′（下游）。用 ０１％
ＤＭＳＯ，１００μｍｏｌ·Ｌ－１ＰｓＬ５Ｆ处理ＨＯ８９１０ＰＭ细胞
２４ｈ提取 ＨＯ８９１０ＰＭ细胞总 ＲＮＡ，变性琼脂糖凝
胶电泳检测 ＲＮＡ质量。取２５μｇ总 ＲＮＡ反转录
形成ｃＤＮＡ，配ＰＣＲ反应体系，置于ＲｏｔｏｒＧｅｎｅ３０００
荧光定量实时 ＰＣＲ仪上进行扩增，扩增条件如下：
Ｎｒ１ｄ１：９５℃，５ｍｉｎ；３５个循环（９５℃，１０ｓ；６０℃，１５
ｓ；７２℃，２０ｓ；８５℃，５ｓ）；βａｃｔｉｎ：９５℃，５ｍｉｎ；３５个
循环（９５℃，１０ｓ；５７℃，１５ｓ；７２℃，２０ｓ；８５５℃，５
ｓ）。７２℃至９９℃绘制溶解曲线，然后采用比较阈
值法对实时定量ＲＴＰＣＲ结果进行定量分析。
２．３　Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分析Ｎｒ１ｄ１蛋白表达　取对数生
长期的ＨＯ８９１０ＰＭ细胞，稀释１×１０６个／ｍＬ，接种
于５０ｍｍ的培养皿中培养，每皿５ｍＬ。待细胞贴
壁后，分别以 ＰＢＳ，０１％ＤＭＳＯ和２５，５０，１００μｍｏｌ
·Ｌ－１ＰｓＬ５Ｆ处理 ＨＯ８９１０ＰＭ细胞 ２４ｈ，收集细
胞，ＰＢＳ洗涤 ２次，加入预冷的细胞裂解液 １００
μＬ，用细胞刮将细胞刮下，并转移至预冷的 １５
ｍＬ离心管中。置于碎冰上冰育 ２０ｍｉｎ后，于 ４
℃，１２０００×ｇ离心１５ｍｉｎ。ＢＣＡ法测定上清液中
蛋白含量。加上样缓冲液和蛋白样品混合，１００℃
水中煮沸５ｍｉｎ使蛋白质变性。ＳＤＳＰＡＧＥ电泳后
电转移至 ＰＶＤＦ膜上，５％脱脂牛奶封闭后加入
Ｎｒ１ｄ１抗体于室温孵育２ｈ，用 ＴＢＳ缓冲液洗涤３
次、每次１０ｍｉｎ，加入 ＨＲＰａｎｔｉＲａｂｂｉｔＩｇＧ于室温
孵育２ｈ，再用 ＴＢＳ缓冲液洗涤３次、每次１０ｍｉｎ，
加超敏发光试剂显影；再用洗膜液（２％ ＳＤＳ，６５５
ｍｍｏｌ·Ｌ－１ＴｒｉｓＨＣｌ，ｐＨ６８，１００ｍｍｏｌ·Ｌ－１β巯
基乙醇）室温洗膜３０ｍｉｎ，加 βａｃｔｉｎ多克隆兔抗体
室温孵育 ２ｈ，用 ＴＢＳ洗 ３次，每次 １０ｍｉｎ，加入
ＨＲＰａｎｔｉＲａｂｂｉｔＩｇＧ于室温孵育２ｈ，ＴＢＳ洗３次，
每次１０ｍｉｎ，加超敏发光试剂再显影；以 βａｃｔｉｎ作
内参，用图像分析软件 ＳｃｉｏｎＩｍａｇｅ进行吸光度
（Ａ）分析。
２．４　统计学处理　实验数据以 珋ｘ±ｓ表示，两样本
均数比较采用 ｔ检验，多个样本均数比较采用方差
分析与 Ｂｏｎｆｅｒｏｎｉ（方差齐）或 Ｔａｍｈａｎｅ＇ｓＴ２（方差
不齐）检验。Ｐ＜００５表示差异有显著意义，Ｐ＜
００１表示差异有非常显著意义。所有数据采用
ＳＰＳＳ１１０软件进行统计处理。
３　结果
３．１　肿瘤基因芯片检测结果　芯片检测结果表明
ＰｓＬ５Ｆ能明显上调ＨＯ８９１０ＰＭ细胞中Ｎｒ１ｄ１ｍＲＮＡ
的表达（图 １），１００μｍｏｌ·Ｌ－１ ＰｓＬ５Ｆ处理组中
Ｎｒ１ｄ１ｍＲＮＡ表达水平是对照组的２６１７倍。
图１　ＰｓＬ５Ｆ对 Ｎｒ１ｄ１ｍＲＮＡ表达的影响
３．２　荧光定量实时ＰＣＲ分析结果　 ＰｓＬ５Ｆ能明显
上调Ｎｒ１ｄ１ｍＲＮＡ表达，１００μｍｏｌ·Ｌ－１ＰｓＬ５Ｆ处理
组中Ｎｒ１ｄ１ｍＲＮＡ表达水平是对照组的（３５３４±
１０７）倍（图２），与芯片检测结果基本吻合。
与对照组比较Ｐ＜００１。
图２　ＰｓＬ５Ｆ对 Ｎｒ１ｄ１ｍＲＮＡ表达的影响（珋ｘ±ｓ，ｎ＝３）
３．３　Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分析结果　ＰｓＬ５Ｆ同样能明显上
调Ｎｒ１ｄ１蛋白表达（图３），５０，１００μｍｏｌ·Ｌ－１ＰｓＬ５Ｆ
处理组中 Ｎｒ１ｄ１蛋白表达水平分别是对照组的
（６１４±０１４）倍和（７７１±０４３）倍（表１）。
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１．ＰＢＳ；２．０１％ＤＭＳＯ；３．２５μｍｏｌ·Ｌ－１ＰｓＬ５Ｆ；
４．５０μｍｏｌ·Ｌ－１ＰｓＬ５Ｆ；５．１００μｍｏｌ·Ｌ－１ＰｓＬ５Ｆ。
图３　ＰｓＬ５Ｆ对Ｎｒ１ｄ１蛋白表达的影响
４　讨论
Ｎｒ１ｄ１又名 Ｒｅｖｅｒｂα或 ＥＡＲ１，是孤儿核受体
家族蛋白成员之一。在脂肪组织、骨骼肌、大脑和肝
中广泛表达，参与调控细胞的增殖和分化（特别是
与脂肪细胞的分化相关）。同时作为众多基因转录
的抑制物，在核内信号转导过程中起着重要的作用。
研究表明 Ｎｒ１ｄ１还与炎症发生密切相关，主要作用
机制是其通过影响 ＮＦκＢ信号途径相关基因（ＩＬ６
和Ｃｏｘ２）的转录来调控炎症反应［６］。
表１　ＰｓＬ５Ｆ影响Ｎｒ１ｄ１蛋白表达（Ａ）结果（珋ｘ±ｓ，ｎ＝３）
组别 浓度／μｍｏｌ·Ｌ－１ Ｎｒ１ｄ１ βａｃｔｉｎ Ｎｒ１ｄ１／βａｃｔｉｎ
ＰＢＳ － ６３４５±５４７ ７４４３０±４０１３ ００８±００１
对照 － ５５８９±４１９ ７６９０３±３９０８ ００７±００１
ＰｓＬ５Ｆ ２５ ８２７３±５７８ ８５８５１±４０４３ ０１０±００１
　 ５０ ４３６５４±２３５８ １００７２８±４３８０ ０４３±００２１）
　 １００ ４９２１８±３０１５ ９１１８５±３９６７ ０５４±００３１）
　　注：与对照组比较１）Ｐ＜００１。
　　本研究中ＰｓＬ５Ｆ诱导Ｎｒ１ｄ１高表达与半边旗在
民间具有抗炎功效相符合，同时也能很好地解释
ＰｓＬ５Ｆ在ＨＯ８９１０ＰＭ细胞中通过影响 ＮＦκＢ活性
进而产生抗肿瘤作用的以往实验结果［４］。
Ｎｒ１ｄ１又是细胞中生物钟相关基因，研究表明
Ｎｒ１ｄ１能影响细胞的昼夜节律［７］。ＦｉｌｉｐｓｋｉＥ［８］的研
究表明昼夜节律紊乱可引起肿瘤恶变，另外 Ｄａｖｉｓ
［９］发现 Ｎｒ１ｄ１表达与乳腺癌的复发紧密相关，Ｉｕ
ｒｉｓｃｉＩ研究报道 Ｓｅｌｉｃｉｃｌｉｂ（细胞周期素依赖激酶抑
制物）诱导Ｒｅｖｅｒｂα表达与荷瘤小鼠的昼夜节律相
关，并影响肿瘤细胞的细胞周期演变而发挥抗肿瘤
作用［１０］。本课题组前期研究表明 ＰｓＬ５Ｆ抑制人高
转移卵巢癌 ＨＯ８９１０ＰＭ细胞生长与其调控 ＨＯ
８９１０ＰＭ细胞的细胞周期也相关［５］，但它诱导 Ｎｒ１ｄ１
在ＨＯ８９１０ＰＭ细胞中高表达的调控机制迄今还不
明确。现有文献表明 ＲＯＲα［１１］，ＰＰＡＲγ［１２］信号通
路影响 Ｎｒ１ｄ１表达，但 ＰｓＬ５Ｆ是否通过这些途径调
控Ｎｒ１ｄ１表达有待更深入的研究。
［参考文献］
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及抗肿瘤活性初步研究［Ｊ］．中国药学杂志，１９９９，３４（８）：
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［８］　 ＦｉｌｉｐｓｋｉＥ，ＩｎｎｏｍｉｎａｔｏＰＦ，ＷｕＭ，ｅｔａｌ．Ｅｆｅｃｔｓｏｆｌｉｇｈｔａｎｄ
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ＮａｔｌＣａｎｃｅｒＩｎｓｔ，２００５，９７（７）：５０７．
［９］　 ＤａｖｉｓＬＭ，ＨａｒｉｓＣ，ＴａｎｇＬ，ｅｔａｌ．Ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎｐａｔｅｒｎｓｏｆ
ｔｈｒｅｅｇｅｎｏｍｉｃｒｅｇｉｏｎｓｐｒｅｄｉｃｔｄｉｓｔａｎｔｒｅｃｕｒｅｎｃｅｉｎｂｒｅａｓｔｃａｒｃｉｎｏ
ｍａ［Ｊ］．ＪＭｏｌＤｉａｇｎ，２００７，９（３）：３２７．
［１０］　ＩｕｒｉｓｃｉＩ，ＦｉｌｉｐｓｋｉＥ，ＲｅｉｎｈａｒｄｔＪ，ｅｔａｌ．Ｉｍｐｒｏｖｅｄｔｕｍｏｒｃｏｎｔｒｏｌ
ｔｈｒｏｕｇｈｃｉｒｃａｄｉａｎｃｌｏｃｋｉｎｄｕｃｔｉｏｎｂｙｓｅｌｉｃｉｃｌｉｂ，ａｃｙｃｌｉｎｄｅｐｅｎｄ
ｅｎｔｋｉｎａｓｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒ［Ｊ］．ＣａｎｃｅｒＲｅｓ，２００６，６６（２２）：１０７２０．
［１１］　ＲａｓｐＥ，ＭａｕｔｉｎｏＧ，ＤｕｖａｌＣ，ｅｔａｌ．Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆ
ｈｕｍａｎＲｅｖｅｒｂａｌｐｈａｇｅｎｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｂｙｔｈｅｏｒｐｈａｎｎｕｃｌｅａｒｒｅ
ｃｅｐｔｏｒｒｅｔｉｎｏｉｃａｃｉｄｒｅｌａｔｅｄｏｒｐｈａｎｒｅｃｅｐｔｏｒａｌｐｈａ［Ｊ］．ＪＢｉｏｌ
Ｃｈｅｍ，２００２，２７７（５１）：４９２７５．
［１２］　３〗ＦｏｎｔａｉｎｅＣ，ＤｕｂｏｉｓＧ，ＤｕｇｕａｙＹ，ｅｔａｌ．Ｔｈｅｏｒｐｈａｎｎｕｃｌｅａｒ
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ｒｅｃｅｐｔｏｒＲｅｖｅｒｂａｌｐｈａｉｓａｐｅｒｏｘｉｓｏｍｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｏｒａｃｔｉｖａｔｅｄｒｅ
ｃｅｐｔｏｒ（ＰＰＡＲ）ｇａｍｍａｔａｒｇｅｔｇｅｎｅａｎｄｐｒｏｍｏｔｅｓＰＰＡＲｇａｍｍａ
ｉｎｄｕｃｅｄａｄｉｐｏｃｙｔｅｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ［Ｊ］．ＪＢｉｏｌＣｈｅｍ，２００３，２７８
（３９）：３７６７２．
Ｅｆｅｃｔｏｆ５ＦｆｒｏｍＰｔｅｒｉｓｓｅｍｉｐｉｎｎａｔａｏｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＮｒ１ｄ１ｉｎ
ＨＯ８９１０ＰＭ ｃｅｌｌｉｎｅ
ＨＥＴａｉｐｉｎｇ１，ＷＵＫｅｆｅｎｇ２，ＬＶＹｉｎｇｎｉａｎ２，ＧＯＮＧＸｉａｎｌｉｎｇ２，ＧｅｏｒｇｅＧｏｎｇＣｈｅｎ３，ＬＩＡＮＧＮｉａｎｃｉ２
（１．ＳｃｈｏｏｌｏｆＬａｂｏｒａｔｏｒｙ，ＧｕａｎｇｄｏｎｇＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｅｇｅ，Ｚｈａｎｊｉａｎｇ５２４０２３，Ｃｈｉｎａ；
２．ＧｕａｎｇｄｏｎｇＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｆｏｒＲｅｓｅａｒｃｈａｎｄＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆＮａｔｕｒａｌＤｒｕｇｓ，Ｚｈａｎｊｉａｎｇ５２４０２３，Ｃｈｉｎａ；
３．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＳｕｒｇｅｒｙ，ＰｒｉｎｃｅｏｆＷａｌｅｓＨｏｓｐｉｔａｌ，ＣｈｉｎｅｓｅＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＨｏｎｇｋｏｎｇ，Ｈｏｎｇｋｏｎｇ，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｅｆｅｃｔｓｏｆＰｓＬ５Ｆ（ｅｎｔ１１αｈｙｄｒｏｘｙ１５ｏｘｏｋａｕｒ１６ｅｎ１９ｏｉｃａｃｉｄ，ａｎｅｘｔｒａｃｔｆｒｏｍ
ＰｔｅｒｉｓｓｅｍｉｐｉｎｎａｔａＬ）ｏｎｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｎｕｃｌｅａｒｒｅｃｅｐｔｏｒｓｕｂｆａｍｉｌｙ１，ｇｒｏｕｐＤ，ｍｅｍｂｅｒ１（Ｎｒ１ｄ１）ｉｎｈｉｇｈｌｙｍｅｔａｓｔａｔｉｃｏｖａｒｉａｎｃａｒ
ｃｉｎｏｍａＨＯ８９１０ＰＭｃｅｌｓ，ａｎｄｉｔｓｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ．Ｍｅｔｈｏｄ：ＭｉｃｒｏａｒａｙＣｈｉｐｗａｓｕｓｅｄｔｏｅｘａｍｉｎｅｔｈｅｌｅｖｅｌｏｆＮｒ１ｄ１ｍＲＮＡｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ
ｏｎＨＯ８９１０ＰＭｃｅｌｓｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈＰｓＬ５Ｆ．ＦｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｒｅａｌｔｉｍｅＰＣＲａｓｓａｙａｎｄＷｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｗｅｒｅｐｅｒｆｏｒｍｅｄｔｏｖｅｒｉｆｙｔｈｅ
ｅｆｅｃｔｓｏｆＰｓＬ５ＦｏｎＮｒ１ｄ１ｍＲＮＡａｎｄｐｒｏｔｅｉｎｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ．Ｒｅｓｕｌｔ：Ａｆｔｅｒ２４ｈｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆ１００μｍｏｌ·Ｌ－１ＰｓＬ５Ｆ，ｔｈｅｍＲＮＡａｎｄｐｒｏ
ｔｅｉｎｌｅｖｅｌｓｏｆＮｒ１ｄ１ｉｎＨＯ８９１０ＰＭｃｅｌｓｗｅｒｅ３５．３４±１．０７ａｎｄ７．７１±０．４３ｔｉｍｅｓｃｏｍｐａｒｅｄｔｏｔｈｏｓｅｏｆｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ（Ｐ＜０．０１，Ｐ＜
０．０１），ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：ＰｓＬ５ＦｃａｎｕｐｒｅｇｕｌａｔｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＮｒ１ｄ１ｉｎＨＯ８９１０ＰＭｃｅｌｓ．Ａｎｔｉｔｕｍｏｒｅｆｅｃｔｓ
ａｎｄｉｔｓｍｅｃｈａｎｉｓｍｓｏｆＰｓＬ５ＦｉｎＨＯ８９１０ＰＭｃｅｌｓｍａｙｂｅｉｎｖｏｌｖｅｄｉｎｔｈｅｕｐｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆＮｒ１ｄ１ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］　Ｐｔｅｒｉｓｓｅｍｉｐｉｎｎａｔａ；ｏｖａｒｉａｎｃａｒｃｉｎｏｍａ；Ｎｒ１ｄ１ ［责任编辑　古云侠］
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