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半夏种内各变异类型总生物碱含量的变异规律



全 文 :厚朴酚含量差别不大;不同种植地的厚朴,其含量不
尽相同,但厚朴酚与和厚朴酚的比值具有一定规律
性:湖北、四川产小凸尖叶型厚朴的比值较小,在
12左右;湖南和四川产凹叶厚朴比较相似,在20
左右;而广西、浙江所产凹叶厚朴比值较大,超过
40,这说明其有效成分含量的差异主要与药材原植
物物种、生长环境等有关。
由质量分级结果可以看出,厚朴的质量优劣有
物种差异,即小凸尖叶型厚朴质量较凹叶厚朴优。
传统的质量判别主要依据产地、胸径、树龄、皮厚、粉
末颜色、油性等,通常以树龄高、胸径粗、皮厚、粉末
颜色深、有油性者为佳。据此得出的判别结果的确
是以四川和湖北所产小凸尖叶型厚朴质量为优,其
他产地的凹叶厚朴质量则明显逊色。本研究与传统
的判别结果相一致,在物质基础方面为传统质量判
别方法提供了更为量化的依据。
运用化学模式识别技术对中药材进行质量评
价,促进了中药材传统评价方法的深化和发展,顺应
了中药现代化的客观要求,具有广阔的应用前景。
[参考文献]
[1] 中国药典[S].一部.2005:176.
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[责任编辑 张宁宁]
[收稿日期] 20061010
[基金项目] 四川省重点学科建设项目(SZD0420)
[通讯作者] 彭正松,Tel:(0817)2568011,Email:pzs8833@
163.com
半夏种内各变异类型总生物碱含量的变异规律
魏淑红,彭正松,王祖秀
(西华师范大学 生命科学学院,四川 南充 637002)
  半夏 Pineliaternata(Thunb.)Breit系天南星
科半夏属多年生草本植物,以块茎入药,主要含有
半夏蛋白、生物碱、多糖、β谷甾醇、亚油酸、琥珀酸
等有效成分[1,2]。近年来,栽培半夏在驯化过程
中,种内出现了许多性状变异。虽然已有不少关
于半夏性状变异的研究,但主要集中于居群间、居
群内半夏形态特征研究[35]、细胞学研究[6]以及同
工酶研究[7],而对种内各变异类型的有效成分方
面的研究尚未见报道。本研究通过测定并比较半
夏种内各变异类型总生物碱含量和单株产量,初
步探讨了半夏种内各变异类型在品质方面的差
异,为进一步的半夏优良品种的选育提供一定的
理论依据。
1 材料、仪器和试剂
1.1 材料 所有材料均来自本校生命科学学院随
机区组试验小区中的半夏,原植物经生命科学学院
秦自生研究员鉴定为天南星科半夏属植物半夏 P.
ternata。
1.2  仪器和试药   紫外可见分光光度计
(GBC916,澳大利亚 GBC科学仪器有限公司)。盐
酸麻黄碱(中国药品生物制品检定所,批号 714
9903),其他试剂均为分析纯。
2 方法
2.1 样品处理 各小区随机取样10株,块茎去皮,
60℃干燥后,研磨过 60目筛,粉末置干燥器内备
用。
2.2 样品供试液的制备 精密称取干燥至恒重的
生药粉适量,加6mol·L-1的氨水润湿后,加入10
倍量氯仿,冷浸3h,回流提取2次,每次3h,过滤,
残渣用氯仿分3次洗涤,每次10mL,最后定容至50
mL。精确量取2mL,待氯仿挥发后,加入柠檬酸柠
檬酸钠缓冲液(pH60)5mL,氯仿10mL,01%溴
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第33卷第2期
2008年1月
         
    中 国 中 药 杂 志
ChinaJournalofChineseMateriaMedica
       
Vol.33,Issue 2
January,2008
麝香草酚蓝溶液1mL,充分振摇,静置05h后,于
60mL分液漏斗中分出氯仿层,作为样品供试液。
2.3 测定波长的确定 按样品供试液的制备方法
操作,在不加入半夏生药粉的前提下,制备空白对照
液。将对照品溶液、样品供试液和空白对照液在
300~600nm进行测定。结果前两者最大吸收值均
在418nm处,而空白对照液最大吸收值不在 418
nm处,故含量测定实验选定418nm作为测定波长。
2.4 线性关系考察 精密称取干燥至恒重的盐酸
麻黄碱对照品0005g,置于100mL量瓶中,加水至
刻度,摇匀,使为50μg·mL-1对照品溶液。精密称
取上述对照品溶液 1,2,3,4,5mL,分别加水至 5
mL,再加入柠檬酸柠檬酸钠缓冲液(pH60)5mL,
精密加入氯仿 10mL,01%溴麝香草酚蓝溶液 1
mL,振摇1min,放置分层,分别取氯仿液1mL置10
mL量瓶中,用氯仿定容至刻度,摇匀。另取 5mL
水,以同样的方法操作,作空白对照液,在418nm波
长处进行测定,以浓度为横坐标,吸收值为纵坐标,
计算得回归方程为 Y=02837X+00792(n=5,
r=09992)。盐酸麻黄碱在050~250μg与吸收
度呈良好的线性关系。
2.5 精密度试验 取对照品溶液2mL,照2.2方
法制备对照品供试液和空白对照液,在418nm波长
处进行测定,重复5次,RSD11%。
2.6 稳定性试验 将待测样品供试液在波长418
nm处进行测定,并在室温下测定,每隔1h测1次,
结果表明样品在5h内稳定,RSD23%(n=6)。
2.7 回收率试验 取30mL圆底烧瓶6只,各精密
称取已知含量的同一变异类型半夏粉末约1g,在
1,2号瓶中加入50μg·mL-1的对照品溶液4mL,
3,4号瓶中加入5mL,5,6号瓶中加入6mL。同含
量测定项下的方法制备样品供试液,于418nm处测
定样品。经测定,平均回收率为 986%,RSD
14%。结果见表1。
表1 盐酸麻黄碱回收率(n=6)
取样量
/g
样品中含量
/mg
加入量
/mg
测得量
/mg
回收率
/%
平均值
/%
RSD
/%
09899 0258 020 0454 980
09762 0255 020 0456 1005
10014 0261 025 0507 984 986 14
10200 0266 025 0507 964
09981 0260 030 0557 990
10035 0262 030 0559 990
2.8 样品的测定 分别称取不同变异类型各试验
小区的半夏生药材粉末,按2.2方法分别制备样品
供试液及空白对照液,在418nm波长处分别测定其
吸收度,并计算总生物碱含量和单株产量。
3 结果与分析
各变异类型总生物碱含量和单株产量结果见表2。
对各变异类型总生物碱含量和单株产量进行了单因子
方差分析,结果见表3。由于各变异类型的总生物碱含
量和单株产量差异性极显著,因此又采用两两比较
(SNKq检验)法进一步分析各变异类型在总生物碱含
量和单株产量上的差异性。结果见表4。
表2 各变异类型总生物碱含量和单株产量
变异
类型
区组
总生物碱
质量分数/%
平均
/%
单株产量
/mg
平均单株
产量/mg
阔叶  1 00310 00293 0183 0183
  2 00291   0179  
  3 00279   0186  
细叶  1 00475 00462 0294 0284
  2 00479   0286  
  3 00431   0272  
柳叶  1 00251 00274 0168 0185
  2 00290   0193  
  3 00280   0193  
4~5叶 1 00451 00536 0301 0333
  2 00499   0339  
  3 00657   0358  
双珠芽 1 00323 00245 0204 0167
  2 00255   0171  
  3 00156   0125  
表3 各变异类型总生物碱含量和单株产量单因子方差分析
变异来源 离均差平方和 自由度 均平方和 F
总生物碱量  变异类型 2035×10-3 4 5087×10-4 12425
       误差   3969×10-4 10 3969×10-5
       总变异  2432×10-3 14  
单株产量   变异类型 6602×10-2 4 1651×10-2 29482
       误差   5546×10-3 10 5456×10-4  
       总变异  7148×10-2 14  
  注:F001=599
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表4 各变异类型总生物碱含量和单株产量
SNKq检验(F001)
变异类型 自由度
总生物碱
1 2 3
单株产量
1 2
双珠芽 3 00245     0167  
柳叶  3 0027400274   0183  
阔叶  3 0029300293   0185  
细叶  3   0046200462   0284
4~5叶 3     00530   0333
  从表2可以看出,半夏各变异类型总生物碱含
量和单株产量呈现一定的相同变异规律。总生物碱
含量和单株产量均以4~5叶半夏最高,其次是细叶
半夏。表3方差分析表明,总生物碱含量和单株产
量在各变异类型之间存在极显著的差异。通过
SNKq检验进一步得出,总生物碱含量在4~5叶半
夏与其他各变异类型之间均存在极显著的差异,细
叶半夏与双珠芽半夏之间也存在极显著的差异。
4~5叶半夏和细叶半夏与阔叶、柳叶半夏、双珠芽半
夏在单株产量上存在极显著差异,而4~5叶半夏与
细叶半夏的单株产量不存在极显著的差异,阔叶、柳
叶半夏、双珠芽半夏之间在单株产量上也不存在极
显著的差异。这表明,4~5叶半夏和细叶半夏与
其他变异类型相比较,具有较高的总生物碱含量和
单株产量。
4 讨论
各变异类型栽培于同一实验地中,其生长年限、
生长环境及管理措施相同,以及采用随机区组实验
设计,随机取样,因此就避免了环境差异和人为因素
造成的影响,总生物碱含量和单株产量的测定结果
是可靠和真实的。
半夏药材中,总生物碱是主要有效成分之一,因
此研究半夏总生物碱含量有着重要的意义。本实验
分别计算和比较了各变异类型总生物碱含量和单株
产量。其中,总生物碱含量是从大量植株,从整体上
反映半夏各变异类型总生物碱含量的差别,而单株
产量则从单个植株,从个体上反映各变异类型总生
物碱含量的差异。实验结果表明,4~5叶半夏总
生物碱含量和单株产量均达到最高,细叶半夏也较
高。因此,该实验结果可从一个方面反映出各变异
类型品质上的差异,也可为进一步的半夏优良种质
的选育以及品质分析提供一定的理论依据。
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[责任编辑 张宁宁]
[收稿日期] 20061020
[通讯作者] 杨文钰,Tel:(0835)2882004
扦插方式对葛根幼苗质量的影响
陈兴福,杨文钰,文 涛,刘卫国,汪晓辉,谭 昕,吴 萍
(四川农业大学 农学院,四川 雅安 625014)
  葛根为豆科植物野葛 Puerarialobata(Wild.)
Ohwi或甘葛藤P.thomsoniBenth.的干燥根。葛根
性甘、辛,凉;具有解肌退热,生津,透疹,升阳止泻等
功效[1]。目前市场上的葛根药材多为野生,但随着
葛根产品的开发应用,野生资源不能满足市场需要,
有的地方多年毁灭性地采挖野生资源,已造成资源
枯竭,全国不少地方已有人工栽培。生产上常用扦
插育苗或直接用藤栽,扦插技术不规范造成成苗率
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