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探析接近临床剂量的甘遂半夏汤加减甘遂甘草对腹水模型大鼠肾脏及免疫系统的影响



全 文 :• 3781 •中华中医药杂志(原中国医药学报)2014年12月第29卷第12期 CJTCMP , December 2014, Vol . 29, No. 12
参 考 文 献
[1] 张允岭,高芳,孟繁兴,等.从转化医学的理念谈血管性
痴 呆 和 轻 度 认 知 障 碍 的 中 医 防 控 . 中 华 中 医 药 杂 志 ,
2011,26(12):2766-2770
[2] Zhang Z X,Zahner G E,Roman G C,et al.Dementia subtypes in
China:prevalence in Beijing,Xi’an,Shanghai,and Chengdu.Arch
Neurol,2005,62(3):447-453
[3] Zhang M Y,Katzman R,Salmon D,et al.The prevalence of
dementia and Alzheimer’s disease in Shanghai,China:impact of
age,gender,and education.Ann Neurol,1990,27(4):428-437
[4] CFDA.中药新药临床研究指导原则.北京:中国医药科技出版社,
2002:91-98
[5] 唐农.对血管性痴呆从肺论治的思考.广西中医学院学报,
2004,7(4):1-3
[6] 唐农,黄立武,莫新民.益肺宣肺降浊法对血管性痴呆大鼠海
马CA1区LTP的影响.中国老年病杂志,2004,1(4):220-222
[7] 魏录翠,唐农.从肺的生理功能论肺与老年性痴呆的关系.江
苏中医药,2010,42(8):3-4
[8] Li W Z,Wu W Y,Huang H,et al.Protective effect of bilobalide on
learning and memory impairment in rats with vascular dementia.
Mol Med Rep,2013,8(3):935-941
[9] 罗云,赵海平,张婧,等.阿魏酸对血管性痴呆大鼠学习记忆障
碍的改善作用及其机制研究.药学学报,2012,47(2):256-260
[10] 赵志坤,贾凤新,李桂,等.益智聪明方对血管性痴呆患者T
细胞亚群及血浆SOD、MDA含量的影响.辽宁中医杂志,
2008,35(10):1444-1446
(收稿日期:2013年10月26日)
探析接近临床剂量的甘遂半夏汤加减甘遂甘草
对腹水模型大鼠肾脏及免疫系统的影响
柳海艳1,钟赣生1,刘云翔1,刘佳1,欧丽娜1,王茜2
(1北京中医药大学基础医学院,北京 100029;2河北中医学院,石家庄 050091)
摘要:目的:观察甘遂半夏汤加减甘遂甘草反药组合对腹水模型大鼠肾脏及免疫系统的影响,探讨药效或
毒性反应是否与反药组合相关。方法:将Wistar大鼠按体质量随机分为空白组、模型组、阳性药组、甘遂半夏汤
全方组(低剂量全方组)、低剂量全方去醋甘遂组、低剂量全方去炙甘草组和低剂量全方去草遂组,除正常喂养
外,每天上午各给药组灌胃给药,空白组和模型组灌胃蒸馏水,给药9d后,所有大鼠禁食不禁水12h,取血,离
心,检测肾脏及免疫系统相关指标。结果:与空白组比较,模型组CD3、CD4相对计数降低(P<0.05,P<0.01),
IgA、IgG、IgM、尿β2-微球蛋白(β2-MG)、尿表皮生长因子(EGF)含量升高(P<0.05,P<0.01);与模型组
比较,各给药组对所检测的免疫系统及肾脏相关指标具有一定的改善作用,其中以低剂量全方组的作用较好。结
论:低剂量全方组和低剂量全方去掉方中一味反药或两味反药组在腹水模型大鼠细胞免疫、体液免疫和肾脏系统
方面未显示出毒性,同时低剂量全方组具有一定的调节腹水模型大鼠细胞免疫、体液免疫和保护肾脏的作用,并
且其疗效优于低剂量全方去掉其中一味反药或两味反药组。
关键词:接近临床剂量;甘遂半夏汤;甘遂甘草反药组合;癌性腹水;肾脏;免疫系统
基金资助:国家重点基础研究发展计划(973计划)项目(No.2011CB505300,No.2011CB505306)
Effects of Gansui Banxia Decoction modified with Gansui and Gancao anti-drug
combination at preferred dose close to clinical application on kidney and
immune system functions in ascites rats model
LIU Hai-yan1, ZHONG Gan-sheng1, LIU Yun-xiang1, LIU Jia1, OU Li-na1, WANG Xi2
( 1School of Basic Medical Sciences, Beijing University of Chinese Medicine, Beijing 100029, China; 2Hebei University of
Chinese Medicine, Shijiazhuang 050091, China )
·论著·
通讯作者:钟赣生,北京市北三环东路11号北京中医药大学基础医学院68号信箱,邮编:100029,电话:010-64287006
E-mail:zhonggansheng@sohu.com
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中医在用药方面讲究配伍应用,而配伍禁忌是其
中比较重要的一个方面,十八反即属于中医的配伍禁
忌范畴。一些医家认为反药同用相反相激,可以治疗
沉疴痼疾,但另外一些医家认为反药同用会对人体造
成伤害,应该避免使用。那么,十八反到底能否同用有
待于我们去进一步验证。鉴于临床应用中,“相反”
药物配伍多用于特定的病理条件下,因此,本课题选
择有临床应用基础的经方——甘遂半夏汤(含甘遂甘
草),针对特定的病理条件,即腹水模型进行相关研
究。课题前期已经对含甘遂甘草反药组合的高、中、
低剂量的甘遂半夏汤全方进行了探讨,结果表明甘遂
半夏汤中醋甘遂与炙甘草配伍的高、中、低剂量组均
有较好的利尿效果,但高、中剂量组肝损伤较重;低
剂量组肝损伤较轻,提示在相同配比情况下,低剂量
组有效且未显示出明显毒性,较适合配伍应用[1]。同
时低剂量组的醋甘遂用量转化成人的用量为3.08g,
《中华人民共和国药典(一部)》中规定甘遂的用量为
0.5-1.5g,甘草用量转换成人的用量为18.7g,《中华人
民共和国药典(一部)》中规定炙甘草的用量为2-10g,
因此,低剂量甘遂半夏汤中甘遂甘草用量均较接近
《中华人民共和国药典(一部)》中规定的临床人的用
量范围。因此,本研究选择低剂量的甘遂半夏汤来进
行进一步的实验。那么,低剂量组显示出的“效”是否
与甘遂甘草反药组合相关,全方去掉甘遂甘草反药组
合中的一味或两味是否会对药效产生影响,有待于实
验的进一步验证,因此,本研究观察含甘遂甘草反药
组合低剂量的甘遂半夏汤及其去掉其中的一味反药
或两味反药对癌性腹水模型大鼠的影响,探讨“效”
是否与反药组合相关。
材料
1. 动物 153只Wistar大鼠,SPF级,体质量210-
230g,雄性。由斯贝福(北京)实验动物科技有限公
司提供,许可证号:SCXK(京)2011-0004。
2. 药物 法半夏(贵州长顺),由安徽丰原铜
陵中药饮片厂提供,批号:100701,为天南星科植物
半夏Pinellia ternata(Thunb)Breit的块茎,经甘草
和石灰炮制的炮制品。白芍(浙江磐安),由磐安科
信中药材生产力促进中心提供,自行浸泡、切片、烘
干制备实验所需饮片,为毛茛科植物芍药Paeonia
lactif lora Pall.的根。醋甘遂,由安徽丰原铜陵中
药饮片厂提供,批号:120301,为大戟科植物甘遂
Euphorbia kansui T. N. Liou ex T. P. Wang的干燥块
根。炙甘草,由安徽丰原铜陵中药饮片厂提供,批号:
120201,为豆科植物甘草Glycyrrhiza uralensis Fisch.
干燥根和根茎。以上药物均经北京中医药大学李伟
老师鉴定。呋噻米片:北京优你特药液有限公司分
装,批号为:1211089
3. 药物制备 甘遂半夏汤处方:甘遂(研末)0.11g,
法半夏0.9g,白芍1.5g,炙甘草1.67g,蜂蜜1.5g。
3.1 甘遂半夏汤药液的制备(低剂量全方) 将
法半夏、白芍、炙甘草加10倍量水浸泡1h,煮沸后小
火继续煎煮1h,第2次加8倍量水煎煮,沸腾后小火继
续煎煮1h,将2次煎煮的药液合并,加入蜂蜜,放置水
浴锅上浓缩至1.14g/mL,临用时按比例加入醋甘遂粉
Abstract: Objective: Observation of the effects of Gansui Banxia Decoction modified Gansui and Gancao anti-drug
combination at preferred dose close to clinical application on kidney and immune system functions in ascites rats mode, to
explore whether the efficacy or toxicity associated with the anti-drug combination. Methods: Wistar rats were randomly divided
into blank group, model group, furosemide group, Gansui Banxia Decoction group, Gansui Banxia Decoction without Cugansui
group, Gansui Banxia Decoction without Zhigancao group, Gansui Banxia Decoction without Zhigancao nor Cugansui group.
The drug groups were respectively received the drugs by gavage, while the blank group and model group were received distilled
water. After gavage for 9 days, all the rats were fasted for 12 hours to collect blood. The relevant indicators of kidney and immune
system function were detected. Results: Compared with the blank group, the counts of CD3 and CD4 in the model group were both
lower (P<0.05, P<0.01), and the contents of IgA, IgG, IgM, β2-MG and EGF in model group were all higher (P<0.05, P<0.01).
Compared with the model group, the relevant indicators of kidney and immune system function in all drug groups were improved,
especially in the low dosage Gansui Banxia Decoction group. Conclusion: There is no toxicity in low dosage of Gansui Banxia
Decoction and low dosage of Gansui Banxia Decoction minus one or two drugs of anti-drug combination in rats cellular immunity,
humoral immunity and kidney function. The low dosage of Gansui Banxia decoction can regulate the rats cellular immunity,
humoral immunity and protect the rat kidney function, which is superior to the low dosage of Gansui Banxia Decoction minus one
or two drugs of anti-drug combination.
Key words: Preferred dose close to clinical application; Gansui Banxia Decoction; Anti-drug combination of Gansui
and Gancao; Malignant ascites; Kidney; Immune system
Fund assistance: National Key Basic Research Program of China (973 Program) (No.2011CB505300,
No.2011CB505306)
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末,加入适量水至0.568g/mL。
3.2 甘遂半夏汤去醋甘遂药液的制备(低剂量全
方去醋甘遂) 同甘遂半夏汤药液的制备,临用时不
加入醋甘遂,加水稀释至0.557g/mL。
3.3 甘遂半夏汤去炙甘草药液的制备(低剂量全
方去炙甘草) 将法半夏、白芍加10倍量水浸泡1h,
煮沸后小火继续煎煮1h,第2次加8倍量水煎煮,沸腾
后小火继续煎煮1h,将2次煎煮的药液合并,加入蜂
蜜,放置水浴锅上浓缩至0.78g/mL,临用时按比例加
入适量醋甘遂,加水稀释至0.401g/mL。
3.4 甘遂半夏汤去炙甘草醋甘遂药液的制备(低
剂量全方去草遂) 同甘遂半夏汤去炙甘草药液的
制备,临用时不加入醋甘遂,加水稀释至0.39g/mL。
4. 试剂 CD3APC,批号:17031;CD4PE,批号:
65607;CD8aFITC,批号:11170;FC受体阻断剂,
批号:20111130。Mouse IgG1 FITC,批号:73487;
Mouse IgG2a PE,批号:82969;Mouse IgM APC,
批号:0 03 49,以上由北京茂扬生物技 术有限公
司提。免疫球蛋白试剂盒(IgA)批号:20121011;
免疫球蛋白试剂盒(IgG),批号:20121015;免疫
球蛋白试剂盒(IgM),批号:20121020。白介素-2
(interleukin-2,IL-2)放免试剂盒,批号:20121123;
白介素-6(interleukin-6,IL-6)放免试剂盒,批号:
20121130。尿乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,
LDH)检测试剂盒,批号:20121125。尿β2-微球蛋
白(β2 microglobulin,β2-MG)检测试剂盒,批号:
20121130。尿表皮生长因子(epidermal growth factor,
EGF),批号:20121126。
5. 仪器 台式高速冷冻离心机:型号为TGL -
16A,长沙平凡仪器仪表有限公司;全自动放免计数
仪,型号为r-911,中国科技大学实业总公司;日本日立
7160全自动生化仪,日立高新技术(上海)国际贸易有
限公司;FACSCalibur流式细胞仪,美国BD公司。
方法
1. 模型复制方法 将冻存于-70℃冰箱中的
walker-256细胞于37℃水浴复苏,分为0.5、0.8、
1.0mL剂量注入大鼠体内,长出腹水后再以每只1mL
的剂量注入正常大鼠体内进行二次传代,二次传代
的大鼠长出腹水后,选取淡黄色的腹水进行细胞计
数,以1.68×106个细胞/mL注入正式实验的大鼠体
内,每只注射1mL。
2. 分组及给药方法 将Wistar大鼠按体质量随
机分为空白组、模型组、呋塞米阳性药组(阳性药
组)、甘遂半夏汤全方组(低剂量全方组)、甘遂半夏
汤去醋甘遂组(低剂量全方去醋甘遂组)、甘遂半夏
汤去炙甘草组(低剂量全方去炙甘草组),甘遂半夏
汤去炙甘草醋甘遂组(低剂量全方去草遂组),空白
组20只,低剂量全方组23只,其余各组各22只。除正
常喂养外,每天上午除空白组、模型组外,其余各组
灌胃给药,空白组和模型组灌胃蒸馏水,灌胃体积均
为1mL/100g。
3. 观察指标 检测尿中LDH、β2-MG、EGF:给
药5d后,将大鼠放入代谢笼,禁食不禁水,收集24h
尿液,用高速冷冻离心机3 000r/min离心10min,取上
清,待检测相关指标。
腹水中IL -2,IL - 6:给药9d后,各组大鼠禁食
不禁水12h,进行取材,取材前称量大鼠体质量,麻
醉后抽取腹水,用高速冷冻离心机3 000r/min离心
10min,取上清,待检测相关指标。
免疫球蛋白IgA、IgG、IgM,CD3、CD4、CD8:取
完腹水后进行腹主动脉取血,肝素抗凝用高速冷冻
离心机3 000r/min离心10min,分离血清,待检测相关
指标。
4. 统计学方法 采用SPSS 11.5软件进行数据分
析,分析方法采用方差分析,方差齐选用LSD法,方
差不齐选用Dunnett T3。数据用x-±s表示,以P<0.05
为差异有统计学意义。
结果
1. 接近临床剂量的甘遂半夏汤加减甘遂甘草对
腹水模型大鼠免疫系统的影响
1.1 接近临床剂量的甘遂半夏汤加减甘遂甘草对
腹水模型大鼠血中CD3、CD4、CD8的影响 见表1。与
空白组比较,模型组、低剂量全方去炙甘草组、低剂
量全方去醋甘遂组和低剂量全方去草遂组大鼠全血
中CD3相对计数降低(P<0.05,P<0.01);与模型组
比较,各给药组无统计学差异;与低剂量全方组比
较,低剂量全方去炙甘草组和低剂量全方去草遂组
大鼠全血CD3相对计数降低(P<0.05)。与空白组比
较,模型组及各给药组大鼠全血CD4相对计数降低
(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,各给药组无统
计学差异;与低剂量全方组比较,低剂量全方去炙甘
草组、低剂量全方去醋甘遂组和低剂量全方去草遂
组有降低趋势但差异无统计学意义。各组大鼠全血
中CD8相对计数无统计学差异;与低剂量全方组比
较,低剂量全方去炙甘草组、低剂量全方去醋甘遂组
和低剂量全方去草遂组有降低趋势但差异无统计学
意义。
1.2 接近临床剂量的甘遂半夏汤加减甘遂甘草
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对腹水模型大鼠血中IgA、IgG、IgM的影响 见表2。
与空白组比较,模型组及各给药组大鼠血中IgA的含
量均升高(P<0.01);与模型组比较,各给药组无统
计学差异;与低剂量全方组比较,低剂量全方去炙甘
草组和低剂量全方去草遂组大鼠血中IgA的含量升
高(P<0.05)。与空白组比较,模型组、低剂量全方去
炙甘草组、低剂量全方去醋甘遂组和低剂量全方去
草遂组大鼠血中IgG的含量升高(P<0.05,P<0.01);
与模型组比较,各给药组无统计学差异;与低剂量
全方组比较,低剂量全方去醋甘遂组和低剂量全方
去草遂组大鼠血中IgG含量升高(P<0.01)。与空白组
比较,模型组、阳性药组、低剂量全方去炙甘草组、
低剂量全方去醋甘遂组和低剂量全方去草遂组大鼠
血中IgM的含量升高(P<0.05,P<0.01);与模型组比
较,低剂量全方组血中IgM的含量降低(P<0.05);与
低剂量全方组比较,低剂量全方去草遂组大鼠血中
IgM的含量升高(P<0.01)。
1.3 接近临床剂量的甘遂半夏汤加减甘遂甘草对
腹水模型大鼠腹水中IL-2和IL-6的影响 见表3。与
模型组比较,低剂量全方组大鼠腹水中IL-6的含量
降低(P<0.05),其余各组大鼠腹水中IL-6的含量无
统计学差异;与低剂量全方组比较,低剂量全方去草
遂组大鼠腹水中IL-6升高(P<0.01)。与模型组比较,
低剂量全方组腹水中IL-2的含量升高(P<0.05);与
低剂量全方组比较,低剂量全方去醋甘遂组腹水中
IL-2含量降低(P<0.05)。
表3 接近临床剂量的甘遂半夏汤加减甘遂甘草对腹水模型
大鼠腹水中IL-2和IL-6的影响(x-±s,ng/mL)
组别 n IL-6 n IL-2
空白组 - - -
模型组 11 35.23±5.95 10 0.96±0.24
阳性药组 13 29.52±11.11 13 1.15±0.54
低剂量全方组 14 24.54±11.32* 14 1.34±0.31*
低剂量全方去炙甘草组 16 30.20±12.54 16 1.28±0.42
低剂量全方去醋甘遂组 13 30.76±11.64 13 0.92±0.56△
低剂量全方去草遂组 16 39.09±14.67△△ 18 1.11±0.45
注:与模型组比较,*P<0.05;与低剂量全方组比较,△P<0.05,
△△P<0.01。
2. 接近临床剂量的甘遂半夏汤加减甘遂甘草对
腹水模型大鼠肾脏系统的影响 见表4。与空白组
比较,模型组大鼠尿中LDH含量有升高趋势,但差
异无统计学意义;与模型组比较,阳性药组、低剂量
全方组和低剂量全方去草遂组大鼠尿中LDH的含量
降低(P<0.05);与低剂量全方组比较,低剂量全方
去醋甘遂组大鼠尿中LDH含量有升高趋势但差异无
统计学意义,低剂量全方去炙甘草组大鼠尿中LDH
的含量升高(P<0.01)。与空白组比较,模型组、低剂
量全方去炙甘草组、低剂量全方去醋甘遂组大鼠尿
中β2-MG的含量升高(P<0.05,P<0.01);与模型组
比较,阳性药组、低剂量全方组和低剂量全方去草遂
组大鼠尿中β2-MG的含量降低(P<0.05,P<0.01);
与低剂量全方组比较,低剂量全方去炙甘草组、去
醋甘遂组和去草遂组尿中β2-MG的含量有升高趋
势,但只有低剂量全方去炙甘草组具有统计学意义
(P<0.05)。与空白组比较,模型组和低剂量全方去
醋甘遂组大鼠尿中EGF的含量升高(P<0.05);与模
表1 接近临床剂量的甘遂半夏汤加减甘遂甘草对腹水模型
大鼠血中CD3、CD4、CD8的影响(x-±s,%)
组别 n CD3 CD4 CD8
空白组 6 55.67±7.32 33.22±3.69 23.92±6.53
模型组 5 40.63±11.90* 20.97±3.18** 20.88±13.7
阳性药组 6 46.86±5.69 23.56±6.03* 24.65±7.38
低剂量全方组 6 50.82±10.16 25.41±9.71* 26.91±16.25
低剂量全方去炙甘草组 6 37.66±11.41**△22.54±6.56** 16.12±6.55
低剂量全方去醋甘遂组 6 41.23±5.00* 24.40±5.96* 18.66±5.44
低剂量全方去草遂组 6 35.57±16.14**△18.05±7.54** 18.05±7.54
注:与空白组比较,*P<0.05,**P<0.01;与低剂量全方组比较,
△P<0.05。
表2 接近临床剂量的甘遂半夏汤加减甘遂甘草对腹水模型大鼠血中IgA、IgG、IgM的影响(x-±s,g/L)
组别 n IgA n IgG n IgM
空白组 14 0.43±0.03 13 5.24±0.46 14 0.40±0.02
模型组 15 0.52±0.07** 11 5.86±0.37* 12 0.51±0.06**
阳性药组 14 0.56±0.08** 14 5.57±0.61 13 0.50±0.06**
低剂量全方组 16 0.52±0.09** 15 5.41±0.49 10 0.43±0.04△
低剂量全方去炙甘草组 15 0.57±0.08**▲ 17 5.76±0.83* 13 0.49±0.07*
低剂量全方去醋甘遂组 12 0.55±0.07** 12 6.13±0.64**▲▲ 12 0.51±0.07**
低剂量全方去草遂组 13 0.57±0.06**▲ 14 6.26±0.43**▲▲ 15 0.53±0.04**▲▲
注:与空白组比较,*P<0.05,*P<0.01;与模型组比较,△P<0.05,△△P<0.01;与低剂量全方组比较,▲P<0.05,▲▲P<0.01。表4同。
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表4 接近临床剂量的甘遂半夏汤加减甘遂甘草对腹水模型大鼠尿LDH、β2-MG、EGF的影响(x-±s)
组别 n 尿LDH(U/L) n 尿β2-MG(μg/L) n 尿EGF(ng/L)
空白组 8 32.31±11.89 9 0.83±0.06 8 0.77±0.18
模型组 8 39.20±5.56 10 0.94±0.12** 9 0.91±0.13*
阳性药组 9 24.59±17.26△ 9 0.83±0.08△△ 9 0.77±0.09△
低剂量全方组 7 24.15±7.51△ 10 0.83±0.06△△ 7 0.70±0.10△△
低剂量全方去炙甘草组 10 41.72±13.61▲▲ 10 0.93±0.08*▲ 10 0.72±0.13△△
低剂量全方去醋甘遂组 9 27.36±13.79 8 0.92±0.10* 8 0.91±0.10*▲▲
低剂量全方去草遂组 8 23.63±15.56△ 8 0.84±0.10△ 9 0.65±0.11△△
型组比较,阳性药组、低剂量全方组、低剂量全方去
炙甘草组、低剂量全方去草遂组大鼠尿中EGF的含
量降低(P<0.05,P<0.01);与低剂量全方组比较,
低剂量全方去醋甘遂组大鼠尿中EGF的含量升高
(P<0.01)。
讨论
CD3、CD4、CD8属于T淋巴细胞亚群,反映机体细
胞免疫的状况。CD3主要反映机体细胞免疫的总体水
平,CD4主要是辅助T细胞和其他细胞参与免疫应答,
CD8为免疫抑制细胞,主要功能是抑制其他免疫细胞
的功能同时CD8又能通过细胞毒作用来杀伤肿瘤细
胞[1]。本研究结果显示,各给药组与模型组比较CD3、
CD4、CD8相对计数有升高趋势但无统计学差异,说
明各给药组对腹水大鼠细胞免疫有一定的增强作用,
但药效不是很显著。在各给药组中低剂量全方组大
鼠血中CD3、CD4 、CD8的相对计数较低剂量全方去炙
甘草组、低剂量全方去醋甘遂组和低剂量全方去草
遂组有升高趋势,其中低剂量全方组CD3的相对计数
高于低剂量全方去炙甘草组和低剂量全方去草遂组
(P<0.05),由此说明低剂量全方组在提高机体细胞
免疫功能方面优于低剂量全方去炙甘草组、低剂量全
方去醋甘遂组和低剂量全方去草遂组。
免疫球蛋白指具有抗体活性的动物蛋白,主要
存在于血浆中,也见于其他体液、组织液和一些分泌
液中。当机体受到抗原刺激后,淋巴细胞特别是浆细
胞会合成一种与进入机体的相应抗原发生特异性结
合的抗体,即免疫球蛋白(Ig),Ig对体液免疫应答起
主要作用[2]。Ig包括IgG、IgA、IgM、IgD、IgE 5类,但
是IgD、IgE含量较少,因此,临床通过检测IgG、IgA、
IgM来查看机体的体液免疫功能。IgG和IgM是正常人
体血清中含量较多的Ig,分别占血清Ig总量的75%和
10%,在特异性免疫如抗病毒、抗感染方面发挥主要
作用,而IgM也参与自身免疫相关的疾病,IgA在抗感
染方面具有重要作用。Ig在正常人体中保持适当含
量,其含量过高和过低对机体均不利。在本研究中
模型组IgA、IgG、IgM的含量均高于空白组(P<0.05,
P<0.01),这与文献报道的趋势一致,其原因可能是
注射到大鼠体内的肿瘤细胞和生成的腹水激活了大
鼠的免疫系统,产生了针对肿瘤抗原相应的抗体进
而导致大鼠体液免疫的增强。在各给药组中,低剂量
全方组IgA、IgG、IgM的含量较其它给药组有降低趋
势,其中低剂量全方组IgA的含量低于低剂量全方去
炙甘草组和低剂量全方去草遂组(P<0.05),同时低
剂量全方组IgG的含量低于低剂量全方去醋甘遂组
和低剂量全方去草遂组(P<0.01),并且低剂量全方
组IgM的含量低于低剂量全方去草遂组(P<0.01)。由
此推断低剂量全方组在降低腹水及肿瘤细胞引起的
大鼠体液免疫增强方面的效果优于低剂量全方去掉
其中的一味反药或两味反药组。
IL-2具有抗肿瘤、抗病毒的作用,同时在保障机
体发挥正常免疫功能方面具有重要的作用。有研究
显示,IL-2的活性在癌性渗出液中的含量会显著降
低,其原因可能是肿瘤细胞影响了机体内源性IL-2
的产生[3]。而肿瘤患者体内的肿瘤细胞对于IL -2反
应能力的降低可能是导致肿瘤恶化转移的重要原
因[4]。IL-6主要是由T、B淋巴细胞、成纤维细胞、单
核细胞及某些恶性肿瘤细胞产生,肿瘤细胞和肿瘤
相关巨噬细胞可以释放高水平的IL-6,同时IL-6还
可以促进肿瘤细胞的生长[5]。本研究结果显示,模
型组大鼠腹水中IL-6有含量升高趋势而IL-2有含量
降低趋势,这与文献报道相一致。与模型组比较,
各给药组大鼠腹水中IL - 6的含量有降低趋势同时
IL-2的含量有升高趋势,但只有低剂量全方组与模
型组比较差异具有统计学意义。与低剂量全方组比
较,低剂量全方去草遂组大鼠腹水中IL-6含量升高
(P<0.01),低剂量全方去醋甘遂组大鼠腹水中IL-2
的含量降低(P<0.05)。由此说明各给药组中低剂量
全方组在提高腹水模型大鼠腹水中IL-2含量,降低
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IL-6含量的效果优于低剂量全方去掉其中一味反药
或两味反药组。
LDH是临床常用的检测项目,但是大多检测血中
的LDH,以此来判断心肌损伤和肝脏损伤的情况。而
尿LDH在肾脏肿瘤及肾脏其他疾病的相关检查也有
一定的应用。LDH存在于人体的心、肝、肾等组织器官
中,而肾脏中以肾小管的含量最高[6]。因此,当各种原
因引起肾小管上皮细胞通透性增强,就会导致尿液中
LDH的含量升高。本研究结果显示,模型组大鼠尿液
中LDH的含量较空白组有升高趋势,但差异无统计学
意义。而与模型组比较,各给药组大鼠尿中LDH的含
量有降低的趋势,但只有阳性药组、低剂量全方组和
低剂量全方去草遂组大鼠尿中LDH含量较模型组降
低(P<0.05)。与低剂量全方组比较,低剂量全方去炙
甘草组和低剂量全方去醋甘遂组有升高趋势,且低剂
量全方去炙甘草组大鼠尿中LDH含量差异具有统计
学意义(P<0.01)。由此说明低剂量全方组在降低大
鼠尿LDH含量,保护肾小管方面的效果优于低剂量全
方去炙甘草组和低剂量全方去醋甘遂组。尿EGF具有
通过促进细胞外基质形成而达到促进受损伤组织修
复的作用,但是过度的尿EGF的表达则会导致细胞外
基质的大量沉积,使组织出现纤维化[7]。尿EGF主要
来源于肾脏,其分布以肾小球上皮细胞、间质细胞、系
膜细胞等部位最多,同时尿EGF具有调节肾脏细胞代
谢、肾内血流,影响肾小管离子转运等作用[8]。因此,
近年来尿EGF与肾脏损伤的关系成为研究热点。本
研究结果显示,模型组尿EGF含量较空白组显著升高
(P<0.05),而各给药组中除低剂量全方去醋甘遂组
外,均较模型组降低(P<0.05,P<0.01),与低剂量全
方组比较,低剂量全方去炙甘草组和低剂量全方去醋
甘遂组大鼠尿EGF的含量有升高趋势,且低剂量全方
去醋甘遂组尿EGF的含量较低剂量全方组升高,差异
具有统计学意义(P<0.01)。因此,说明低剂量全方组
在降低尿EGF含量保护肾脏方面的效果优于低剂量
全方去炙甘草组和低剂量全方去醋甘遂组。β2-MG主
要由淋巴细胞产生,经肾小球滤过后被近端小管重吸
收并分解,但当肾小管由于各种原因受到损伤后,就
会导致β2-MG重吸收减少,尿中β2-MG含量升高。本
研究结果显示,模型组大鼠尿中β2-MG的含量较空白
组显著升高(P<0.01),而与模型组比较,各给药组大
鼠尿中β2-MG含量均有降低趋势,且阳性药组、低剂
量全方组和低剂量全方去草遂组大鼠尿中β2-MG的
含量降低,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);与
低剂量全方组比较,低剂量全方去炙甘草组、低剂量
全方去醋甘遂组和低剂量全方去草遂组尿中β2-MG
的含量均具有升高的趋势,且与低剂量全方去炙甘草
组差异具有统计学意义(P<0.05),由此说明低剂量
全方组在保护肾小管,降低尿β2-MG含量方面的效果
优于低剂量全方去炙甘草组且较低剂量全方去醋甘
遂组和低剂量全方去草遂组有降低趋势。
综合上述分析,可以看出低剂量全方组和低剂量
全方去掉方中一味反药或两味反药组在腹水模型大
鼠细胞免疫、体液免疫和肾脏系统方面未显示出毒
性,同时低剂量全方组具有一定的调节腹水模型大鼠
细胞免疫、体液免疫和保护肾脏的作用,并且其疗效
优于低剂量全方炙甘草组且较低剂量全方去醋甘遂组
和低剂量全方去草遂组有降低趋势。
参 考 文 献
[1] 余霞.参麦注射液对早期子宫颈癌手术患者免疫功能的影
响.中国实验方剂学杂志,2010,16(5):218-219
[2] 王耿新,张美莲,陈传刚.786例恶性肿瘤患者免疫球蛋白检测
结果分析.华中医学杂志,2005,29(4):302-303
[3] 吴家明,王立敏.血清及胸水中ADA、IL-2、IL-6、IL-10联检
对结核性和癌性胸膜炎患者的诊断价值.放射免疫学杂志,
2005,28(2):97-99
[4] 李晓诗,孙亚荣,丰立忠,等.癌性渗出液中IL-2、IL-6、IL-8、
TNFα和IFNγ活性分析.中国肿瘤临床与康复,1999,6(2):
22-24
[5] 张国蓉,张程,刘安军,等.软骨多糖对荷瘤小鼠体液免疫功能
的影响.现代食品科技,2009,25(5):466-468
[6] 赵景颇,赵艳阳,马红.尿乳酸脱氢酶与肾脏疾病相关性实验
研究.中原医刊,2006,33(21):88
[7] 时军,陈芳,赵清,等.慢性肾炎患者血、尿表皮生长因子的检
测及意义.海南医学,2006,17(11):66-67
[8] 张慧玉,田玲,王兰英,等.尿微量清蛋白、β2微球蛋白及尿
表皮生长因子与儿童过敏性紫癜早期肾损伤的相关性研
究.临床荟萃,2013,28(11):1259-1260
(收稿日期:2013年12月2日)
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