全 文 ：ＧＣ同时测定高良姜挥发油中 α蒎烯、β蒎烯、
桉油精和 α松油醇的含量
赵晓
!
，陈晓辉，谭晓婧，毕开顺
（沈阳药科大学 药学院，辽宁 沈阳 １１００１６）
［摘要］ 目的：建立同时测定高良姜挥发油中α蒎烯、β蒎烯、桉油精和α松油醇４种成分含量的气相色谱方法。方法：
采用水蒸气蒸馏法进行挥发油的提取，采用ＧＣ对挥发油中α蒎烯、β蒎烯、桉油精和α松油醇４种成分进行含量测定。采用
ＤＢ１石英毛细管柱（０２５ｍｍ×３０ｍ，０２５μｍ）为分析柱；柱温以５０℃为起始温度，保持２ｍｉｎ，以８℃·ｍｉｎ－１升温至１３０℃，
保持３ｍｉｎ。检测器为ＦＩＤ；进样口温度２３０℃；检测器温度２５０℃；载气氮气，流速１２ｍＬ·ｍｉｎ－１；进样方式为分流进样，分
流比１０∶１；进样量１μＬ。结果：α蒎烯、β蒎烯、桉油精和α松油醇的进样质量浓度分别在０００９～００９０（ｒ＝０９９９８），０００９
～００９１（ｒ＝０９９９８），００６０４～０６０４（ｒ＝０９９９７），００３７４～０３７４ｇ·Ｌ－１（ｒ＝０９９９５）呈良好线性关系；平均回收率（ｎ＝
９）分别为９６２％（ＲＳＤ０８％），９６７％（ＲＳＤ１１％），９８７％（ＲＳＤ１１％），９６７％（ＲＳＤ２２％）。结论：方法简便、快速、准确，
可为高良姜药材质量控制提供依据。
［关键词］ 高良姜；挥发油；α蒎烯；β蒎烯；桉油精；α松油醇；气相色谱法
［收稿日期］ ２００９０３０９
［通信作者］ 毕开顺，Ｔｅｌ：（０２４）２３９８６２５９，Ｅｍａｉｌ：ｂｉｋａｉｓｈｕｎ＠ｙａ
ｈｏｏ．ｃｏｍ
［作者简介］ 赵晓
#
，硕士研究生，Ｅｍａｉｌ：ｃａｎｄｙ１９８２３１６＠１６３．ｃｏｍ
高良姜为姜科山姜属植物高良姜 Ａｌｐｉｎｉａｏｆｉｃｉ
ｎａｒｕｍＨａｎｃｅ的干燥根茎［１］，收载于历版《中国药
典》。主产于福建、台湾、广东、广西、海南、云南等
地。具有温胃、祛风、散寒、行气、止痛的功效，临床
常用于治疗脘腹冷痛、胃寒呕吐、消化不良、嗳气吞
酸等病症。高良姜主要含有挥发油、黄酮类和二苯
基庚烷类等化学成分。现代药理学研究表明高良姜
具有抗溃疡、抗氧化、抗病毒、抗菌、抗炎、抗肿瘤等
多种活性［２］。目前高良姜挥发油的研究多集中于
化学成分的鉴别［３５］和指纹图谱［６］。在文献［７］和
《中国药典》２００５年版［１］采用 ＧＣ法测定了挥发油
中桉油精的含量，但未见多成分的定量分析。本研
究同时测定了高良姜挥发油中４种有效成分的含
量，以期为更加全面的控制高良姜药材的质量提供
依据。
１ 材料
Ａｇｉｌｅｎｔ６８９０毛细管气相色谱仪，ＨＰＣＯＲＥ色
谱工作站，氢火焰离子检测器（ＦＩＤ），ＡＧＢＰ２１０Ｓ电
子分析天平（Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ公司）。α蒎烯对照品（上海
友思生物技术公司，批号０７０２０２，含量 ＞９６％），β
蒎烯（上海友思生物技术公司，批号０７０２０３，含量 ＞
９６％），桉油精对照品（中国药品生物制品检定所，
批号１１０７８８，含量 ＞９９％），α松油醇（ＡＣＲＯＳＯＲ
ＧＡＮＩＣＳ，批号３０１６１０２５０，含量 ＞９９％），环己酮（沈
阳正信高科技研究所试剂部，含量 ＞９９％），正己烷
（分析纯），无水硫酸钠（分析纯，天津大茂化学试剂
厂）。高良姜药材共１６批，经沈阳药科大学孙启时
教授鉴定为姜科山姜属植物高良姜 Ａ．ｏｆｉｃｉｎａｒｕｍ
Ｈａｎｃｅ的干燥根茎。
２ 溶液制备
２．１ 对照品溶液 分别取对照品 α蒎烯、β蒎烯、
桉油精和α松油醇适量，精密称定，置１０ｍＬ量瓶
中，分别加正己烷制成浓度为２０４０，２０７０，７５４４，
３５９９ｇ·Ｌ－１的溶液。
２．２ 内标溶液 精密称取环己酮适量，置１００ｍＬ
量瓶中，加正己烷定容至刻度，制成质量浓度为
１１９ｇ·Ｌ－１的溶液。
２．３ 供试品溶液 取临用前粉碎过２０目筛的药材
约５ｇ，精密称定，置５００ｍＬ圆底烧瓶中，加入２００
ｍＬ蒸馏水，按《中国药典》２００５年版（一部）附录Ⅹ
Ｄ甲法提取各样品的挥发油［１］，加适量无水硫酸钠
脱水，振摇，静置，过夜。将脱水后的挥发油置 ２５
ｍＬ量瓶中，加入内标溶液２５ｍＬ，加正己烷定容至
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刻度，摇匀，即得。
３ 色谱条件及系统适用性试验
ＤＢ１石英毛细管色谱柱（０２５ｍｍ×３０ｍ，
０２５μｍ）；氢火焰离子化检测器（ＦＩＤ）；进样口温度
２３０℃ ；检测器温度２５０℃ ；柱温以５０℃为起始温
度，保持２ｍｉｎ，以８℃·ｍｉｎ－１升温至１３０℃，保持３
ｍｉｎ；载气氮气，流速１２ｍＬ·ｍｉｎ－１；进样方式为分
流进样，分流比１０∶１；进样量１μＬ。在上述色谱条
件下，理论塔板数按β蒎烯计算大于１００００，各峰与
其相邻色谱峰的分离度均大于１５，各峰拖尾因子
均在０９５～１０５。对照品和样品色谱图见图１。
１．环己酮（内标）；２．α蒎烯；３．β蒎烯；４．桉油精；５．α松油醇。
图１ 对照品（Ａ）和样品（Ｂ）色谱图
４ 方法与结果
４．１ 线性范围考察 分别精密吸取 α蒎烯、β蒎
烯、桉油精和 α松油醇对照品溶液 １１，１１，２６，
２０ｍＬ置同一 １０ｍＬ量瓶中，得到混合对照品溶
液。分别精密吸取混合对照品溶液 ０２，０４，０８，
１２，１６，２０ｍＬ置５ｍＬ量瓶中，精密加入内标溶
液０５ｍＬ，再加正己烷定容至刻度，摇匀，进样１μＬ
测定。以各对照品溶液质量浓度（ｇ·Ｌ－１）为横坐
标（Ｘ），以对照品与内标峰面积的比值为纵坐标
（Ｙ），绘制标准工作曲线。α蒎烯、β蒎烯、桉油精和
α松油醇的进样质量浓度分别在０００９０～００９０，
０００９１～００９１，００６０４～０６０４，００３７４～０３７４ｇ
·Ｌ－１呈良好线性关系，所得回归曲线方程分别为 Ｙ
＝１２２２Ｘ－０００６０，ｒ＝０９９９８；Ｙ＝１１９６Ｘ－０００６
５，ｒ＝０９９９８；Ｙ＝１３１８Ｘ－００４４，ｒ＝０９９９７；Ｙ＝
１１５５Ｘ－００２０，ｒ＝０９９９５。
４．２ 精密度试验 取同一对照品溶液在上述色谱
条件下连续进样６次，以 α蒎烯、β蒎烯、桉油精和
α松油醇与内标峰面积比值计算α蒎烯、β蒎烯、桉
油精和 α松油醇的 ＲＳＤ分别为 ０９％，１１％，
１４％，１６％。
４．３ 重复性试验 取同一批号药材（广东０８０９０４）
５份，按２３项下方法制备供试品溶液，在上述色谱
条件下分析，计算 α蒎烯、β蒎烯、桉油精和 α松油
醇的含量平均值分别为０２０６０，０２５６７，１８０２６，
０４５７１ｍｇ·ｇ－１；ＲＳＤ分别为１１％，１４％，１７％，
１８％。
４．４ 稳定性试验 取同一供试品溶液，室温放置，
于０，２，４，６，８，１０，１２，２４ｈ时间点分别进样，以α蒎
烯、β蒎烯、桉油精和α松油醇与内标峰面积的比值
计算ＲＳＤ分别为１０％，１３％，２１％，２８％。结果
表明，供试品溶液在２４ｈ内稳定性良好。
４．５ 回收率试验 称取已知含量的同一批号高良
姜药材（广东０８０９０４）约２５ｇ，共９份，按低、中、高
浓度分别精密加入各对照品储备液 α蒎烯 ０１３，
０２６，０３９ｍＬ；β蒎烯０１６，０３２，０４８ｍＬ；桉油精
０３，０６，０９ｍＬ；α松油醇 ０１６，０３２，０４８ｍＬ。
每一浓度３份。按照２３项下方法制备供试溶液，
在上述色谱条件下进样，计算回收率。结果低、中、
高３个加入量的平均回收率（ｎ＝３）分别为 α蒎烯
９６０％（ＲＳＤ１０％），９６２％（ＲＳＤ０７％），９６５％
（ＲＳＤ１０％）；β蒎烯９７６％（ＲＳＤ０７％），９６２％
（ＲＳＤ１０％），９６３％（ＲＳＤ１３％）；桉油精９９７％
（ＲＳＤ０５％），９８６％（ＲＳＤ１１％），９７７％（ＲＳＤ
０３％）；α松油醇 ９６２％ （ＲＳＤ２５％），９７６％
（ＲＳＤ２４％），９６４％（ＲＳＤ２２％）。
４．６ 样品测定 取高良姜药材粉末约５ｇ，精密称
定，按２３项下方法制备供试品溶液，在上述色谱条
件下进行分析，用内标对比法计算高良姜中 α蒎
烯、β蒎烯、桉油精和 α松油醇的含量，测定结果见
表１。
５ 结果与讨论
本实验采用水蒸气蒸馏法进行挥发油的提取，
利用ＧＣ对挥发油中α蒎烯、β蒎烯、桉油精和α松
油醇４种成分进行了同时含量测定。方法简便，快
速，准确，可为高良姜挥发油成分质量控制提供理论
依据和方法基础。
对１６批样品测定的结果表明，不同产地的高良
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表１ 样品含量测定（ｎ＝３） ｍｇ·ｇ－１
样品号 产地 α蒎烯 β蒎烯 桉油精 α松油醇
１ 广东０８０９０４ ０２０５４ ０２５５１ １７６４ ０４４７２
２ 广东０８０９０６ ０１６３５ ０１４５７ １３６６ ０３８９０
３ 广东０７０９２５ ０１１２３ ０１１８１ １３３２ ０３２１０
４ 广东０８０３０２ ０２３０２ ０３６４４ ２４０５ ０６６２６
５ 广东０８０９０１ ０２９６６ ０１６４８ １８３８ ０４６９３
６ 广西０８０３０３ ０２０４２ ０２４７８ １９２７ ０３４４６
７ 广西０８０３０４ ０２６５０ ０１３６８ ２４７０ ０４９３２
８ 云南 ０２５５１ ０３５０５ ２８５９ ０４５９２
９ 上海 ０３１００ ０３８４３ ２４９８ ０４１４３
１０ 南京 ０２２９７ ０１９４６ ２２１３ ０４３１４
１１ 河南 ０１５５３ ０１１５４ １７１５ ０３８３２
１２ 浙江 ０２８６７ ０４３０９ ２５３４ ０４３１５
１３ 宁夏 ０２８６３ ０２９１８ ２８９２ ０４９７１
１４ 青海 ０１８３８ ０２１７７ １３９３ ０３１１４
１５ 陕西 ０２５６２ ０２７７４ ２３２１ ０４４６６
１６ 四川 ０２５００ ０２０２０ ２７８２ ０４５６０
姜挥发油中，α蒎烯、β蒎烯、桉油精和 α松油醇的
含量存在一定差异，可能与生长条件，自然环境，干
燥方法和贮存时间不同有关。同时，由于这几种成
分都具有挥发性，如果粉碎后放置时间过长，含
量会急剧下降，因此一定要临用前粉碎。
高良姜挥发油中桉油精的含量最高，是高良姜
挥发油中最主要的药效成分。《中国药典》２００５年
版规定桉油精的含量不低于０１５％，本实验收集的
１６批药材中有３批低于此标准，其他１３批符合要
求。
［参考文献］
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良姜挥发油成分气相色谱质谱分析［Ｊ］．新疆医科大学学报，
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Ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆαｐｉｎｅｎｅ，βｐｉｎｅｎｅ，ｅｕｃａｌｙｐｔｏｌａｎｄ
αｔｅｒｐｉｎｅｏｌｉｎｉｎｅｓｓｅｎｔｉａｌｏｉｌｆｒｏｍＡｌｐｉｎｉａｏｆｉｃｉｎａｒｕｍＨａｎｃｅｂｙＧＣ
ＺＨＡＯＸｉａｏｄｉ，ＣＨＥＮＸｉａｏｈｕｉ，ＴＡＮＸｉａｏｊｉｎｇ，ＢＩＫａｉｓｈｕｎ
（ＳｃｈｏｏｌｏｆＰｈａｒｍａｃｙＳｈｅｎｙａｎｇＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈｅｎｙａｎｇ１１００１６，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏｅｓｔａｂｌｉｓｈａｍｅｔｈｏｄｆｏｒｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆαｐｉｎｅｎｅ，βｐｉｎｅｎｅ，ｅｕｃａｌｙｐｔｏｌａｎｄαｔｅｒｐｉｎｅｏ
ｌｉｎｉｎｅｓｓｅｎｔｉａｌｏｉｌｆｒｏｍＡｌｐｉｎｉａｏｆｉｃｉｎａｒｕｍｂｙＧＣ．Ｍｅｔｈｏｄ：Ｔｈｅｅｓｓｅｎｔｉａｌｏｉｌｗａｓｅｘｔｒａｃｔｅｄｂｙｓｔｅａｍｄｉｓｔｉｌａｔｉｏｎ．Ｔｈｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ
ｗａｓｃａｒｉｅｄｏｎｗｉｔｈｃａｐｉｌａｒｙｃｏｌｕｍｎＤＢ１（０２５ｍｍ×３０ｍ，０２５μｍ）；Ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｐｒｏｇｒａｍｓ：５０℃ （ｈｏｌｄ２ｍｉｎ）ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄｔｏ
１３０℃ （ｈｏｌｄ３ｍｉｎ）ａｔ８℃·ｍｉｎ－１．ＴｈｅｄｅｔｅｃｔｏｒｗａｓＦＩＤ；Ｉｎｌｅｔｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｗａｓ２３０℃；Ｔｈｅｄｅｔｅｃｔｏｒｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｗａｓ２５０℃；
Ｃａｒｙｉｎｇｇａｓｗａｓｎｉｔｒｏｇｅｎ（１２ｍＬ·ｍｉｎ－１），ｓｐｌｉｔｉｎｊｅｃｔｉｏｎｗａｓｃｏｎｄｕｃｔｅｄｗｉｔｈｓｐｌｉｔｒａｔｉｏｏｆ１０∶１；Ｉｎｊｅｃｔｉｏｎｖｏｌｕｍｎｗａｓ１μＬ．Ｒｅ
ｓｕｌｔ：Ｔｈｅｌｉｎｅａｒｒａｎｇｅｓｏｆαｐｉｎｅｎｅ，βｐｉｎｅｎｅ，ｅｕｃａｌｙｐｔｏｌａｎｄαｔｅｒｐｉｎｅｏｌｉｎｗｅｒｅ０００９００９０（ｒ＝０９９９８），０００９００９１（ｒ＝
０９９９８），００６０４０６０４（ｒ＝０９９９７），００３７４０３７４ｇ·Ｌ－１（ｒ＝０９９９５），ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ；Ｔｈｅａｖｅｒａｇｅｒｅｃｏｖｅｒｉｅｓ（ｎ＝９）ｏｆα
ｐｉｎｅｎｅ，βｐｉｎｅｎｅ，ｅｕｃａｌｙｐｔｏｌａｎｄαｔｅｒｐｉｎｅｏｌｉｎｗｅｒｅ９６２％ （ＲＳＤ０８％），９６７％ （ＲＳＤ１１％），９８７％ （ＲＳＤ１１％），９６７％
（ＲＳＤ２２％），ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｅｄｅｖｅｌｏｐｅｄｍｅｔｈｏｄｉｓｓｉｍｐｌｅ，ｑｕｉｃｋａｎｄａｃｃｕｒａｔｅ，ｗｈｉｃｈｉｓｈｅｌｐｆｕｌｔｏｃｏｎｔｒｏｌｔｈｅｑｕａｌｉｔｙ
ｏｆＡ．ｏｆｉｃｉｎａｒｕｍ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ Ａｌｐｉｎｉａｏｆｉｃｉｎａｒｕｍ；ｅｓｓｅｎｔｉａｌｏｉｌ；αｐｉｎｅｎｅ；βｐｉｎｅｎｅ；ｅｕｃａｌｙｐｔｏｌ；αｔｅｒｐｉｎｅｏｌｉｎ；ＧＣ
［责任编辑 周驰］
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第３４卷第２１期
２００９年１１月
Ｖｏｌ．３４，Ｉｓｓｕｅ ２１
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