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Simultaneous determination of α-pinene, β-pinene, eucalyptol and α-terpineolin in essential oil from Alpinia officinarum Hance by GC

GC同时测定高良姜挥发油中α-蒎烯、β-蒎烯、桉油精和α-松油醇的含量



全 文 :GC同时测定高良姜挥发油中 α蒎烯、β蒎烯、
桉油精和 α松油醇的含量
赵晓
!
,陈晓辉,谭晓婧,毕开顺
(沈阳药科大学 药学院,辽宁 沈阳 110016)
[摘要] 目的:建立同时测定高良姜挥发油中α蒎烯、β蒎烯、桉油精和α松油醇4种成分含量的气相色谱方法。方法:
采用水蒸气蒸馏法进行挥发油的提取,采用GC对挥发油中α蒎烯、β蒎烯、桉油精和α松油醇4种成分进行含量测定。采用
DB1石英毛细管柱(025mm×30m,025μm)为分析柱;柱温以50℃为起始温度,保持2min,以8℃·min-1升温至130℃,
保持3min。检测器为FID;进样口温度230℃;检测器温度250℃;载气氮气,流速12mL·min-1;进样方式为分流进样,分
流比10∶1;进样量1μL。结果:α蒎烯、β蒎烯、桉油精和α松油醇的进样质量浓度分别在0009~0090(r=09998),0009
~0091(r=09998),00604~0604(r=09997),00374~0374g·L-1(r=09995)呈良好线性关系;平均回收率(n=
9)分别为962%(RSD08%),967%(RSD11%),987%(RSD11%),967%(RSD22%)。结论:方法简便、快速、准确,
可为高良姜药材质量控制提供依据。
[关键词] 高良姜;挥发油;α蒎烯;β蒎烯;桉油精;α松油醇;气相色谱法
[收稿日期] 20090309
[通信作者] 毕开顺,Tel:(024)23986259,Email:bikaishun@ya
hoo.com
[作者简介] 赵晓
#
,硕士研究生,Email:candy1982316@163.com
  高良姜为姜科山姜属植物高良姜 Alpiniaofici
narumHance的干燥根茎[1],收载于历版《中国药
典》。主产于福建、台湾、广东、广西、海南、云南等
地。具有温胃、祛风、散寒、行气、止痛的功效,临床
常用于治疗脘腹冷痛、胃寒呕吐、消化不良、嗳气吞
酸等病症。高良姜主要含有挥发油、黄酮类和二苯
基庚烷类等化学成分。现代药理学研究表明高良姜
具有抗溃疡、抗氧化、抗病毒、抗菌、抗炎、抗肿瘤等
多种活性[2]。目前高良姜挥发油的研究多集中于
化学成分的鉴别[35]和指纹图谱[6]。在文献[7]和
《中国药典》2005年版[1]采用 GC法测定了挥发油
中桉油精的含量,但未见多成分的定量分析。本研
究同时测定了高良姜挥发油中4种有效成分的含
量,以期为更加全面的控制高良姜药材的质量提供
依据。
1 材料
Agilent6890毛细管气相色谱仪,HPCORE色
谱工作站,氢火焰离子检测器(FID),AGBP210S电
子分析天平(Sartorius公司)。α蒎烯对照品(上海
友思生物技术公司,批号070202,含量 >96%),β
蒎烯(上海友思生物技术公司,批号070203,含量 >
96%),桉油精对照品(中国药品生物制品检定所,
批号110788,含量 >99%),α松油醇(ACROSOR
GANICS,批号301610250,含量 >99%),环己酮(沈
阳正信高科技研究所试剂部,含量 >99%),正己烷
(分析纯),无水硫酸钠(分析纯,天津大茂化学试剂
厂)。高良姜药材共16批,经沈阳药科大学孙启时
教授鉴定为姜科山姜属植物高良姜 A.oficinarum
Hance的干燥根茎。
2 溶液制备
2.1 对照品溶液 分别取对照品 α蒎烯、β蒎烯、
桉油精和α松油醇适量,精密称定,置10mL量瓶
中,分别加正己烷制成浓度为2040,2070,7544,
3599g·L-1的溶液。
2.2 内标溶液 精密称取环己酮适量,置100mL
量瓶中,加正己烷定容至刻度,制成质量浓度为
119g·L-1的溶液。
2.3 供试品溶液 取临用前粉碎过20目筛的药材
约5g,精密称定,置500mL圆底烧瓶中,加入200
mL蒸馏水,按《中国药典》2005年版(一部)附录Ⅹ
D甲法提取各样品的挥发油[1],加适量无水硫酸钠
脱水,振摇,静置,过夜。将脱水后的挥发油置 25
mL量瓶中,加入内标溶液25mL,加正己烷定容至
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刻度,摇匀,即得。
3 色谱条件及系统适用性试验
DB1石英毛细管色谱柱(025mm×30m,
025μm);氢火焰离子化检测器(FID);进样口温度
230℃ ;检测器温度250℃ ;柱温以50℃为起始温
度,保持2min,以8℃·min-1升温至130℃,保持3
min;载气氮气,流速12mL·min-1;进样方式为分
流进样,分流比10∶1;进样量1μL。在上述色谱条
件下,理论塔板数按β蒎烯计算大于10000,各峰与
其相邻色谱峰的分离度均大于15,各峰拖尾因子
均在095~105。对照品和样品色谱图见图1。
1.环己酮(内标);2.α蒎烯;3.β蒎烯;4.桉油精;5.α松油醇。
图1 对照品(A)和样品(B)色谱图
4 方法与结果
4.1 线性范围考察 分别精密吸取 α蒎烯、β蒎
烯、桉油精和 α松油醇对照品溶液 11,11,26,
20mL置同一 10mL量瓶中,得到混合对照品溶
液。分别精密吸取混合对照品溶液 02,04,08,
12,16,20mL置5mL量瓶中,精密加入内标溶
液05mL,再加正己烷定容至刻度,摇匀,进样1μL
测定。以各对照品溶液质量浓度(g·L-1)为横坐
标(X),以对照品与内标峰面积的比值为纵坐标
(Y),绘制标准工作曲线。α蒎烯、β蒎烯、桉油精和
α松油醇的进样质量浓度分别在00090~0090,
00091~0091,00604~0604,00374~0374g
·L-1呈良好线性关系,所得回归曲线方程分别为 Y
=1222X-00060,r=09998;Y=1196X-0006
5,r=09998;Y=1318X-0044,r=09997;Y=
1155X-0020,r=09995。
4.2 精密度试验 取同一对照品溶液在上述色谱
条件下连续进样6次,以 α蒎烯、β蒎烯、桉油精和
α松油醇与内标峰面积比值计算α蒎烯、β蒎烯、桉
油精和 α松油醇的 RSD分别为 09%,11%,
14%,16%。
4.3 重复性试验 取同一批号药材(广东080904)
5份,按23项下方法制备供试品溶液,在上述色谱
条件下分析,计算 α蒎烯、β蒎烯、桉油精和 α松油
醇的含量平均值分别为02060,02567,18026,
04571mg·g-1;RSD分别为11%,14%,17%,
18%。
4.4 稳定性试验 取同一供试品溶液,室温放置,
于0,2,4,6,8,10,12,24h时间点分别进样,以α蒎
烯、β蒎烯、桉油精和α松油醇与内标峰面积的比值
计算RSD分别为10%,13%,21%,28%。结果
表明,供试品溶液在24h内稳定性良好。
4.5 回收率试验 称取已知含量的同一批号高良
姜药材(广东080904)约25g,共9份,按低、中、高
浓度分别精密加入各对照品储备液 α蒎烯 013,
026,039mL;β蒎烯016,032,048mL;桉油精
03,06,09mL;α松油醇 016,032,048mL。
每一浓度3份。按照23项下方法制备供试溶液,
在上述色谱条件下进样,计算回收率。结果低、中、
高3个加入量的平均回收率(n=3)分别为 α蒎烯
960%(RSD10%),962%(RSD07%),965%
(RSD10%);β蒎烯976%(RSD07%),962%
(RSD10%),963%(RSD13%);桉油精997%
(RSD05%),986%(RSD11%),977%(RSD
03%);α松油醇 962% (RSD25%),976%
(RSD24%),964%(RSD22%)。
4.6 样品测定 取高良姜药材粉末约5g,精密称
定,按23项下方法制备供试品溶液,在上述色谱条
件下进行分析,用内标对比法计算高良姜中 α蒎
烯、β蒎烯、桉油精和 α松油醇的含量,测定结果见
表1。
5 结果与讨论
本实验采用水蒸气蒸馏法进行挥发油的提取,
利用GC对挥发油中α蒎烯、β蒎烯、桉油精和α松
油醇4种成分进行了同时含量测定。方法简便,快
速,准确,可为高良姜挥发油成分质量控制提供理论
依据和方法基础。
对16批样品测定的结果表明,不同产地的高良
  
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表1 样品含量测定(n=3) mg·g-1 
样品号 产地 α蒎烯 β蒎烯 桉油精 α松油醇
1 广东080904 02054 02551 1764 04472
2 广东080906 01635 01457 1366 03890
3 广东070925 01123 01181 1332 03210
4 广东080302 02302 03644 2405 06626
5 广东080901 02966 01648 1838 04693
6 广西080303 02042 02478 1927 03446
7 广西080304 02650 01368 2470 04932
8 云南 02551 03505 2859 04592
9 上海 03100 03843 2498 04143
10 南京 02297 01946 2213 04314
11 河南 01553 01154 1715 03832
12 浙江 02867 04309 2534 04315
13 宁夏 02863 02918 2892 04971
14 青海 01838 02177 1393 03114
15 陕西 02562 02774 2321 04466
16 四川 02500 02020 2782 04560
姜挥发油中,α蒎烯、β蒎烯、桉油精和 α松油醇的
含量存在一定差异,可能与生长条件,自然环境,干
燥方法和贮存时间不同有关。同时,由于这几种成
分都具有挥发性,如果粉碎后放置时间过长,含  
量会急剧下降,因此一定要临用前粉碎。
高良姜挥发油中桉油精的含量最高,是高良姜
挥发油中最主要的药效成分。《中国药典》2005年
版规定桉油精的含量不低于015%,本实验收集的
16批药材中有3批低于此标准,其他13批符合要
求。
[参考文献]
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Simultaneousdeterminationofαpinene,βpinene,eucalyptoland
αterpineolininessentialoilfromAlpiniaoficinarumHancebyGC
ZHAOXiaodi,CHENXiaohui,TANXiaojing,BIKaishun
(SchoolofPharmacyShenyangPharmaceuticalUniversity,Shenyang110016,China)
[Abstract] Objective:Toestablishamethodforsimultaneousdeterminationofαpinene,βpinene,eucalyptolandαterpineo
lininessentialoilfromAlpiniaoficinarumbyGC.Method:Theessentialoilwasextractedbysteamdistilation.Thedetermination
wascariedonwithcapilarycolumnDB1(025mm×30m,025μm);Temperatureprograms:50℃ (hold2min)programmedto
130℃ (hold3min)at8℃·min-1.ThedetectorwasFID;Inlettemperaturewas230℃;Thedetectortemperaturewas250℃;
Caryinggaswasnitrogen(12mL·min-1),splitinjectionwasconductedwithsplitratioof10∶1;Injectionvolumnwas1μL.Re
sult:Thelinearrangesofαpinene,βpinene,eucalyptolandαterpineolinwere00090090(r=09998),00090091(r=
09998),006040604(r=09997),003740374g·L-1(r=09995),respectively;Theaveragerecoveries(n=9)ofα
pinene,βpinene,eucalyptolandαterpineolinwere962% (RSD08%),967% (RSD11%),987% (RSD11%),967%
(RSD22%),respectively.Conclusion:Thedevelopedmethodissimple,quickandaccurate,whichishelpfultocontrolthequality
ofA.oficinarum.
[Keywords] Alpiniaoficinarum;essentialoil;αpinene;βpinene;eucalyptol;αterpineolin;GC
[责任编辑 周驰]
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