全 文 ：ＨＰＬＣ研究檀香对丹参素组织分布的影响
张前１，唐一梅１，王锐２，王世祥１，房敏峰１，张亚军１，郑晓晖１
（１．西北大学 生命科学学院，陕西 西安 ７１００６９；
２．西安交通大学 医学院 第一附属医院，陕西 西安 ７１００６１）
［摘要］　目的：采用ＨＰＬＣ研究“丹参饮”中君药丹参与使药檀香合用前后水溶性成分丹参素在家兔体内组织分布的变
化。方法：家兔分别灌服丹参单煎液和丹参檀香合煎液，于３０，５０，７０ｍｉｎ取心、脑、肝、肾，以１０％的高氯酸为蛋白沉淀剂，醋
酸乙酯为萃取剂，４羟基苯甲酸为内标，测定君药丹参中丹参素在各组织中的含量。结果：丹参素在心、脑、肝、肾中的达峰时
间均接近５０ｍｉｎ。丹参单煎和丹参、檀香合煎给药５０ｍｉｎ后，对应组织中丹参素的平均浓度分别为：Ｃ肾 ＞Ｃ心 ＞Ｃ脑 ＞Ｃ肝和
Ｃ肾 ＞Ｃ肝 ＞Ｃ脑 ＞Ｃ心，合煎给药后，心、脑、肝、肾各组织中丹参素含量均大于丹参单煎给药时的含量。结论：“丹参饮”中使药檀
香可显著提高丹参素在靶器官的含量，从而增强君药丹参对心脑血管疾病的治疗作用。
［关键词］　丹参；檀香；组织分布；“君使”对药
［收稿日期］　２００８１２１０
［基金项目］　教育部重点项目（２０７１５１）；陕西省教育厅自然科学项
目（０７ＪＫ３９９，０８ＪＫ４７６）；陕西省中医管理局项目（２００７２５０６）
［通信作者］　郑晓晖，Ｔｅｌ：（０２９）８８３０２６８６，Ｅｍａｉｌ：ｚｈｅｎｇｘｈ＠ｎｗｕ．
ｅｄｕ．ｃｎ
　　经方“丹参饮”近年来广泛用于气滞血瘀所致
的心绞痛、胃炎等疾病，具有良好的疗效。方中丹参
和檀香为“君使”对药，丹参活血祛瘀，檀香引药归
经、行气止痛［１］。目前已有文献报道了活血化瘀方
中丹参的有效成分丹参素在兔体内的组织分布［２３］，
但对“丹参饮”中檀香对丹参素组织分布的影响尚
未见报道。在课题组前期研究檀香对丹参素在家兔
体内药代动力学影响的基础上，本实验采用 ＨＰＬＣ
ＤＡＤ法检测家兔心、脑、肝、肾中丹参素的含量，通
过观察檀香对丹参中的水溶性成分丹参素在家兔体
内分布的影响，进一步完善和丰富“君使”对药研
究，并为经方“丹参饮”作用机制的阐明提供依据。
１　材料
１．１　仪器
Ａｇｉｌｅｎｔ１１００系列高效液相色谱仪（美国Ａｇｉｌｅｎｔ
公司）；ＡｎｋｅＴＧＬ１６Ｇ型高速离心机（上海安宁科学
仪器公司）；ＤＹ８９Ⅱ型电动玻璃匀浆机（宁波新芝
生物科技股份有限公司）；ＢＰ２２１Ｓ型万分之一天平
（德国Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ公司）。
１．２　药品与试剂
丹参、檀香（均购自陕西省药材公司，丹参产地
为河南，檀香产地为海南，经西安交通大学医学院王
军宪教授鉴定分别为唇形科植物 Ｓａｌｖｉａｍｌｔｉｏｒｈｉｚａ
Ｂｇｅ．的干燥根和檀香科植物ＳａｎｔａｌｕｍａｌｂｕｍＬ．的树
干心材；丹参素对照品（中国药品生物制品检定所，
批号１１０８５５２００５０６，纯度 ＞９９％）；甲醇（色谱纯，
美国Ｆｉｓｈｅｒ公司）；４羟基苯甲酸（北京化工厂，批号
９２０７２８），实验用水为自制超纯水；其余试剂均为分
析纯。
１．３　动物
新西兰家兔３６只，雌雄各半，体重１７０～２４０
ｋｇ。西安交通大学实验动物中心提供，合格证号 陕
医动证字第０８０１８号。
２　方法
２．１　分析条件
色谱柱 ＡｇｉｌｅｎｔＴＣＣ１８（４６ｍｍ×１５０ｍｍ，５
μｍ）；流动相甲醇０２％甲酸水溶液（１０∶９０）；柱温
２５℃；流速０８ｍＬ·ｍｉｎ－１；检测波长２８０ｎｍ。
２．２　药材的提取
准确称取丹参药材粗粉１５００ｇ，８倍量水冷浸
３０ｍｉｎ，加热回流提取 ２次，每次 １５ｈ，合并提取
液，抽滤，滤液旋转蒸发浓缩至含丹参生药量２ｇ·
ｍＬ－１，４℃冷藏备用。同法制备丹参（１５００ｇ）檀
香（３００ｇ）合煎液。给家兔灌胃前均以生理盐水稀
释４倍，即灌胃量为５ｍＬ·ｋｇ－１。
２．３　对照品溶液的制备
精密称定丹参素对照品０００４０ｇ，用甲醇溶解
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并定容至１００ｍＬ棕色量瓶中，配制成０４０ｇ·Ｌ－１
的丹参素对照品溶液。
２．４　空白组织样品供试品溶液的制备
称取定量的空白心脏、脑、肝脏、肾脏，加入１５
倍量生理盐水，４００ｒ·ｍｉｎ－１匀浆 １０ｍｉｎ，匀浆液
８０００ｒ·ｍｉｎ－１离心１０ｍｉｎ，取上清液１５ｍＬ，加入
１０％高氯酸水溶液５０μＬ沉淀蛋白，离心后取上清
液，用３倍量醋酸乙酯萃取３次，合并醋酸乙酯层，
氮气吹干，残渣用流动相溶解，０４５μｍ微孔滤膜滤
过，４℃ 冷藏备用。
２．５　含药组织样品供试品溶液的制备
健康家兔３６只，随机平均分为２组，一组以１０
ｇ·ｋｇ－１剂量灌服丹参单煎液，于给药后３０，５０，７０
ｍｉｎ后处死，迅速摘取心、脑、肝、肾，液氮冷冻，按
“２．４”项方法制备丹参单煎液的含药组织供试品溶
液。另一组以１０ｇ·ｋｇ－１剂量灌服丹参檀香合煎
液，按相同方法制得丹参檀香合煎液的含药组织供
试品溶液。
３　结果
３．１　方法学考察
丹参素在心、脑、肝、肾中的线性范围分别为
０１０～４０００，００１～４０００，００２～４０００，０２０～
４０００ｍｇ·Ｌ－１线性关系良好；方法检测限分别为
１０２，１８５，１６２，２２５ｎｇ。方法专属性良好，回收
率、精密度、冻融稳定性、短期室温稳定性等指标均
达到实验要求，结果见表１。
表１　组织样品中丹参素的浓度、回收率、精密度和稳定性
（珋ｘ±ｓ）
组织
丹参素
／ｍｇ·Ｌ－１
回收率
／％
精密度
ＲＳＤ／％
冻融稳定
ＲＳＤ／％
短期室温稳定
性ＲＳＤ／％
心 ０５０ ７３１７±１１２ ４８８ ５６７ ５３０
　 ２００ ７２６９±４２４ １２５３ １１７４ １１０７
　 ２０００ ９９７５±２３１ ４８３ ５６４ ５９３
脑 ００５ ９１５２±３２０ ６２４ ６６２ ５３２
　 １００ ９９２３±２２６ １２４８ ９５２ ７２１
　 １０００ ９６４９±４２０ ８５１ ７３８ ３７８
肝 ００４ ９２５±１７２ ６５７ ６１２ ６５７
　 ４００ ９５０±２３３ ５９５ ５４８ ５６１
　 ４０００ ９３０±３６４ ４７６ ４７７ ２８１
肾 ０４０ ９７５±４３５ ５９２ ５９２ ５９２
　 ８００ ９１５±３３４ ４２５ ３６２ ３６６
　 ８０００ ９９１±２７３ ４５９ ２０１ １９１
３．２　样品的测定
３．２．１　丹参单煎液和丹参檀香合煎液中丹参素含
量的测定　将按“２．２”项方法制得的丹参单煎液和
丹参檀香合煎液稀释，按２．１项条件进样分析，测
得丹参单煎药材中丹参素的含量为５７７ｍｇ·ｇ－１，
合煎药材中丹参素的含量为４６５ｍｇ·ｇ－１。
３．２．２　丹参及丹参檀香含药组织样品的测定　精
密吸取按“２．５”项方法制得的丹参单煎液和丹参檀
香合煎液含药组织样品溶液５００μＬ，按２．１项条
件进样分析，测定各组织中丹参素的浓度。家兔灌
服丹参单煎液，丹参素的组织分布情况为 Ｃ肾 ＞
Ｃ心 ＞Ｃ脑 ＞Ｃ肝；灌服丹参檀香合煎液，丹参素的组
织分布情况为 Ｃ肾 ＞Ｃ肝 ＞Ｃ脑 ＞Ｃ心，且合煎给药后，
相应组织中丹参素含量均大于丹参单煎给药时丹参
素的含量。结果见表２。
表２　不同时间家兔心、脑、肝、肾中丹参素的含量
（珋ｘ±ｓ，ｎ＝６）
时间
／ｍｉｎ
组织
丹参素／ｍｇ·Ｌ－１
丹参 丹参檀香
３０ 心 ０１６７±００２２ ０１９２±００１１
　 脑 ０１２１±００２７ ０５８６±０１８５
　 肝 ００８７±００１４ １０４９±０２４７
　 肾 １３４９±０１８９ ３１２１±１０８６
５０ 心 ０２０９±００６３ ０２７６±００１６１）
　 脑 ０１９９±００３２ ０８０７±０２１４２）
　 肝 ０１２７±００１５ １３６２±０３５７２）
　 肾 １８５５±０２３１ ４１２５±１２４１２）
７０ 心 ０１４８±００４３ ０２４６±００２３
　 脑 ０１４２±００２５ ０６５４±０１８３
　 肝 ００９２±００１２ １１２５±０２６１
　 肾 １４２１±００４４ ３６１４±１４３４
　　注：与丹参组相比１）Ｐ＜００５，２）Ｐ＜００１。
４　讨论
中医药理论认为丹参归心、肝经，已有文献报道
丹参素是以原形通过肾脏进行排泄［４］，因此本实验
选择了心、脑、肝、肾４个脏器进行研究。实验结果
表明，丹参檀香合煎后（４６５ｍｇ·ｇ－１）丹参素的含
量低于丹参单煎（５７７ｍｇ·ｇ－１），但合煎后心、脑、
肝、肾中丹参素的含量均大于丹参单煎给药时对应
组织的含量（Ｐ＜００１）。而前期药代动力学实验结
果表明，丹参檀香合煎组与丹参单煎组相比，峰浓
度（Ｃｍａｘ）无明显变化
［５］。说明使药檀香对丹参素在
家兔血液中的峰浓度并无显著影响，但可以促进丹
参素从血液向各脏器分布，显著提高丹参素在各脏
器中的含量。
本实验丹参单煎组及丹参檀香合煎组中，５０
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ｍｉｎ时各脏器中丹参素的浓度均显著高于 ３０，７０
ｍｉｎ，提示丹参素在心、脑、肝、肾中的达峰时间均接
近５０ｍｉｎ。前期药代动力学研究结果表明，丹参檀
香合用前后，丹参素在家兔体内代谢均为二室开放
模型，且Ｔｍａｘ均为３０ｍｉｎ
［５］。结合该结果可知，丹参
素在各脏器组织中的达峰时间与血浆相比，存在一
定的时间延迟。
丹参作为活血化瘀的常用中药，可改善微循环，
舒张血管，抑制血小板黏附和聚集，治疗心绞痛、冠
心病、动脉粥样硬化等心脑血管疾病［６］。丹参素是
丹参的水溶性有效成分之一，也是重要的药物转运
体Ｐ糖蛋白（Ｐｇｐ）的底物［９］。有文献报道，萜类成
分可抑制Ｐｇｐ的外排功能［１０］。檀香中主要含 α及
β檀香醇、α及β檀香烯等萜类成分［１１］。本实验中
丹参檀香合用后，心、脑、肝、肾各脏器中丹参素的
含量均显著提高是否与檀香抑制 Ｐｇｐ的转运有关，
将有待今后进一步的研究。
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ＥｆｅｃｔｏｆＳａｎｔａｌｕｍａｌｂｕｍｏｎｔｉｓｓｕｅｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎｏｆ
ｄａｎｓｈｅｎｓｕｉｎｒａｂｂｉｔｓｂｙＨＰＬＣ
ＺＨＡＮＧＱｉａｎ１，ＴＡＮＧＹｉｍｅｉ１，ＷＡＮＧＲｕｉ２，ＷＡＮＧＳｈｉｘｉａｎｇ１，ＦＡＮＧＭｉｎｆｅｎｇ１，ＺＨＡＮＧＹａｊｕｎ１，ＺＨＥＮＧＸｉａｏｈｕｉ１
（１．ＣｏｌｅｇｅｏｆＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅ，ＮｏｒｔｈｗｅｓｔＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｘｉ＇ａｎ７１００６９，Ｃｈｉｎａ；
２．Ｘｉ＇ａｎＪｉａｏｔｏｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＭｅｄｉｃａｌＳｃｈｏｏｌ，Ｘｉ＇ａｎ７１００６１，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｉｎｆｌｕｅｎｃｅｏｆＳｈｉｈｅｒｂ（Ｓａｎｔａｌｕｍａｌｂｕｍ，ＳＡ）ｔｏｔｈｅｔｉｓｓｕｅｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎｏｆｄａｎｓｈｅｎｓｕ
（ＤＳＳ）ｗｈｉｃｈｉｓｔｈｅｍａｉｎｈｙｄｒｏｓｏｌｕｂｌｅｃｏｍｐｏｎｅｎｔｏｆＪｕｎｈｅｒｂ（Ｓａｌｖｉａｍｉｌｔｉｏｒｈｉｚａ，ＳＭ）ｉｎｒａｂｂｉｔｓｂｙＨＰＬＣ．Ｍｅｔｈｏｄ：Ｒａｂｂｉｔｓｗｅｒｅ
ｏｒａｌａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｅｄｄｅｃｏｃｔｉｏｎｏｆＳＭａｎｄＳＭＳＡ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｐｅｒｃｈｌｏｒｉｃａｃｉｄ（１０％）ｗａｓｕｓｅｄｔｏｐｒｅｃｉｐｉｔａｔｅｔｈｅｔｉｓｓｕｅｓａｍｐｌｅｓｏｆｒａｂ
ｂｉｔｓ＇ｈｅａｒｔ，ｂｒａｉｎ，ｌｉｖｅｒ，ｋｉｄｎｅｙ，ａｃｅｔｉｃｅｔｈｅｒｗａｓｕｓｅｄｔｏｅｘｔｒａｃｔｅｓｕｐｅｒｎａｔａｎｔ，ａｎｄｔｈｅｉｎｔｅｒｎａｌｓｔａｎｄａｒｄｗａｓｐｈｙｄｒｏｘｙｂｅｎｚｏｉｃａｃｉｄ．
ＴｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆＤＳＳｏｆＳＭｉｎｔｉｓｓｕｅｓｗａｓｄｅｔｅｃｔｅｄ．Ｒｅｓｕｌｔ：ＴｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆＤＳＳｒｅａｃｈｅｄｔｈｅｈｉｇｈｅｓｔｐｏｉｎｔｃｌｏｓｅｔｏ５０ｍｉｎｉｎｔｈｅｍｅｎ
ｔｉｏｎｅｄｔｉｓｓｕｅｓ．Ｂｅｆｏｒｅａｎｄａｆｔｅｒｃｏａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ，ｔｈｅｓｅｑｕｅｎｃｅｓｏｆａｖｅｒａｇｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆＤＳＳｉｎｔｉｓｓｕｅｓｗｅｒｅＣｋｉｄｎｅｙ＞Ｃｈｅａｒｔ＞
Ｃｂｒａｉｎ＞ＣｌｉｖｅｒａｎｄＣｋｉｄｎｅｙ＞Ｃｌｉｖｅｒ＞Ｃｂｒａｉｎ＞Ｃｈｅａｒｔｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．ＣｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈＳＭａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｅｄｓｉｎｇｌｙ，ｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆＤＳＳｉｎｅｖｅｒｙｔｉｓｓｕｅｓ
ｏｆｃｏａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎｗａｓｈｉｇｈｅｒ．Ｃｏｎｌｕｓｉｏｎ：ＩｎＤａｎｓｈｅｎｙｉｎＦｏｒｍｕｌａｅ，ＳＡｃａｎｉｎｃｒｅａｓｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆＤＳＳｉｎｔａｒｇｅｔｔｉｓｓｕｅｓｓｉｇｎｉｆｉ
ｃａｎｔｌｙ，ａｎｄｔｈｅｒｅｆｏｒｅｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｅｆｅｃｔｏｆＳＭｆｏｒｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒｄｉｓｅａｓｅｉｓｒａｉｓｅｄ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］　Ｓａｌｖｉａｍｉｌｔｉｏｒｈｉｚａ；Ｓａｎｔａｌｕｍａｌｂｕｍ；ｔｉｓｓｕｅｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ；ＪｕｎＳｈｉｐａｉｒｈｅｒｂ
［责任编辑　古云侠］
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