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Research traditional Chinese medicine properties by detectingrats‘ monoamine neurotransmitter after given two differenttraditional Chinese medicine

从莪术、郁金两味中药探讨寒热药性对大鼠大脑不同部位单胺类神经递质的影响



全 文 :·药理·
从莪术、郁金两味中药探讨寒热药性对大鼠大脑
不同部位单胺类神经递质的影响
李俊青,张德芹,张潇,王茜,曾森
(天津中医药大学,天津 300193)
[摘要] 目的:从中枢单胺类神经递质的含量差异探讨中药寒热药性的科学内涵。方法:将莪术、郁金2味药性相反的
中药给大鼠灌胃给药1个月后,用HPLCECD检测大鼠大脑不同部位单胺类神经递质的含量。结果:温热药莪术明显促进大
鼠大脑不同部位单胺类神经递质的分泌,与对照组相比有统计学差异(P<005,P<001);寒凉药郁金明显抑制大鼠大脑不
同部位单胺类神经递质的分泌,与对照组相比有统计学差异(P<005,P<001)。结论:中药的寒热药性与中枢单胺类神经
递质存在一定的相关性。
[关键词] 莪术;郁金;中药寒热药性;单胺类神经递质;HPLCECD
[收稿日期] 20090910
[基金项目] 国家重点基础研究发展“973”计划(2006CB504703)
[通信作者] 张德芹,教授,Tel:(022)23050210,Email:deqin123
@163com
[作者简介] 李俊青,Tel:(022)23050210,Email:lijunqingcool@
163com
  中药药性理论是中医药理论的基础,如何运用
现代科学手段和方法揭示中药药性的内在规律及共
同属性已成当务之急。有研究报道寒凉药、温热药
复方对下丘脑单胺类递质有着不同影响[1],本实验
运用HPLCECD对寒热药性相反的2味中药进行了
研究,进一步探讨寒热药性的本质。莪术为姜科植
物蓬莪术 Curcumaphaeocaulis、广西莪术 Ckwang
siensis或温郁金 Cwenyujin的干燥根茎[2],辛、苦,
温。郁金为姜科植物温郁金、姜黄Clonga、广西莪
术或蓬莪术的干燥块根,辛、苦,寒[2]。这2味中药
来源于同属植物,部位不同,功效相近,药性却截然
相反,这点对寒热药性的研究具有一定意义。为了
与临床用药相仿,本实验药物采用水煎浓缩液,尽量
保留药物所有成分。本实验室具备成熟的单胺类神
经递质检测方法,见文献[3]。
1 材料
11 动物 Wistar大鼠56只,雄性,体重190~210
g,北京协和实验动物技术有限公司提供,合格证号
SCXK(京)20070001。
12 仪器 Agilent1100高效液相色谱电化学检测
器,低温高速离心机。
13 试剂与药材 B8离子对试剂(天津市大茂化
学试剂厂),EDTA(天津市化学试剂一厂),磷酸二
氢钾(天津市北方天医化学试剂厂),磷酸、高氯酸
(天津市康科德科技有限公司),甲醇、乙腈(色谱
纯,天津市康科德科技有限公司);单胺类神经递质
及其代谢产物对照品:去钾肾上腺素,多巴胺,5羟
色胺,高香草酸,5羟吲哚乙酸,肾上腺素均购于西
格玛奥德里奇(上海)贸易有限公司。莪术、郁金购
于安徽新兴中药材饮片有限公司。
2 方法
21 药物配制及给药方法 根据2005年版药典用
药量及体表面积折算系数计算用药剂量,莪术、郁金
低、中、高生药给药量均为 081,243,729g·
kg-1。药物配制方法:实验前称取1100g饮片,粉
碎,将药材粗粉置于圆底烧瓶中加12倍水浸泡1h,
文火煎煮05h,趁热抽滤,收集滤液,然后再加入
10倍水,再煎05h,合并2次滤液,浓缩至一定体
积,实验前用蒸馏水配成 0729,0243,0081g·
mL-1的药液。将所进大鼠随机分为对照组、莪术
高、中、低剂量组、郁金高、中、低剂量组,每组8只。
对照组每日灌胃蒸馏水 10mL·kg-1;莪术、郁金
高、中、低剂量组按729,243,081g·kg-1大鼠灌
胃给药。
22 标本制作 灌胃给药30d,禁食(不禁水)10
h,最后1次灌胃给药1h后,35%水合氯醛腹腔注
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第35卷第8期
2010年4月
                             
Vol35,Issue 8
April,2010
射麻醉(10mL·kg-1),腹主动脉取血,分3部分装
入3套离心管中(其中一套预先装人肝素,一套预
先加入EDTA,离心前摇匀),3500r·min-1离心10
min,分离血清、血浆,-80℃低温保存待检。采血
后,迅速剖取大鼠下丘脑,皮质,海马,装入冻存管,
投入液氮中待检。
23 检测指标及方法 使用 Agilent1100高效液相
色谱仪电化学检测器检测大鼠下丘脑单胺神经递
质及其代谢产物(NE,HVA,5HIAA,DA,5HT)。
24  数据统计 实验数据以 珋x±s表示,采用
SPSS110软件包进行统计学处理,计量资料用单因素
方差分析进行各组间比较,等级资料用raddit分析。
3 结果
31 对大鼠下丘脑神经递质的影响 在下丘脑里
可检测出NE,DA,5HT3种神经递质及5HT的代
谢产物5HIAA。与对照组相比,温性药莪术总体上
促进下丘脑 CA的分泌,寒凉药郁金显著抑制下丘
脑CA的分泌(表1)。
表1 2味中药对大鼠下丘脑神经递质的影响(珋x±s,n=8) ng·g-1
组别 剂量/g·kg-1 NE 5HIAA DA 5HT
对照 - 251269±14491 68927±6522 58449±6519 317125±17894
莪术 729 314066±298842) 76964±10397 70763±105751) 35162±260642)
243 30852±345212) 65971±9059 59199±16652 60871±303292)
081 242826±19921 61917±4527 63581±14051 244824±214432)
郁金 729 149071±214462) 55335±94982) 38785±100562) 200546±280692)
243 145545±158262) 59839±107381) 37145±69062) 197474±158552)
081 180726±290662) 61487±11836 45901±57311) 224085±219072)
  注:与对照组比较1)P<005,2)P<001(表2,3同)。
32 对大鼠皮质神经递质的影响 在皮质里可检测
出NE,DA,5HIAA,5HT,HVA5种神经递质及代谢产
物(HVA是DA的代谢产物,由于皮质里DA的含量高
出下丘脑4倍左右,故能检测出其代谢产物HVA)。与
对照组相比,莪术有促进大鼠皮质神经递质分泌的趋
势,但无统计学意义,仅高剂量组对NE有明显促进作
用(P<005)。郁金则显著抑制大鼠皮质相关神经递
质的分泌,抑制程度较下丘脑稍弱(表2)。
表2 2味中药对大鼠皮质神经递质的影响(珋x±s,n=8) ng·g-1
组别 剂量/g·kg-1 NE 5HIAA HVA DA 5HT
对照 - 401.5±47.42 393.53±50.79 135.1±19.2 1936.64±167.75 1230.49±165.39
莪术 7.29 518.01±62.121) 427.72±47.63 148.96±7.97 2025.99±231.88 1385.26±207.43
2.43 452.88±26.14 380.73±37.61 132.92±20.99 2077.61±287.69 1380.11±214.21
0.81 473.52±29.69 370.28±39.78 125.93±15.63 2043.36±303.52 1329.13±157.28
郁金 7.29 224.65±20.652) 305.55±33.981) 91.95±10.842) 1354.89±224.712) 823.39±67.682)
2.43 239.16±34.652) 325.99±23.64 107.51±7.52 1665.27±156.191) 937.96±93.571)
0.81 278.02±46.762) 342.22±38.64 108.27±4.79 1851.19±205.57 1066.45±139.32
33 对大鼠海马神经递质的影响 在海马里可检
测出NE,5HIAA,5HT3种神经递质及代谢产物。
与对照组相比,莪术高、中剂量组可明显促进 NE的
分泌(P<001),郁金能显著抑制 NE的分泌(P<
001)。而对于5HIAA和5HT,莪术有促进其分泌
趋势而郁金有抑制其分泌的趋势,无统计学意义
(表3)。
4 结论与讨论
从本试验结果可以看出,温热药莪术促进脑组
织不同部位的 CA的分泌,寒凉药郁金抑制脑组织
不同部位的 CA的分泌。莪术由于药性属于温性,
不是热性,所以其对促进NE的分泌比较显著外,对
促进DA分泌作用不是很显著或仅有趋势。而苦寒
药郁金则较全面的表现为显著抑制中枢 CA的分
泌。对于5HT,郁金仍显著抑制下丘脑和皮质的5
HT的分泌,明呈量效关系,但对海马无明显作用;莪
术高剂量组显著促进下丘脑5HT的分泌,而中、低
剂量组却显著抑制下丘脑5HT的分泌,其代谢产
物5HIAA也存在类似的结果。分析其原因可能是
莪术本身是活血化瘀药,在一般剂量下应该是抑制
5HT的分泌,达到舒张血管活血的作用,但在高剂
量使用下才可能表现出温热药促进5HT分泌的作
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第35卷第8期
2010年4月
                             
Vol35,Issue 8
April,2010
   表3 2味中药对大鼠海马神经递质的影响(珋x±s,n=8) ng·g-1
组别 剂量/g·kg-1 NE 5HT 5HIAA
空白 - 338.89±14.85 526.5±100.83 303.7±50.07
莪术 7.29 493.86±20.932) 634.92±71.46 364.09±51.09
2.43 439.93±15.022) 593.24±75.83 341.25±26.59
0.81 376.96±15.56 573.75±88.22 283.2±26.23
郁金 7.29 269.76±17.242) 434.48±43.31 273.67±30.43
2.43 278.84±11.22) 494.02±73.36 285.7±47.34
0.81 305.83±13.84 492.54±38.1 303.78±48.6
用。但也存在另一种可能,就是 5HT与中药的寒
热药性无必然联系,实验的结果可能仅仅是2味药
本身所具有的作用,真实结果有待进一步研究。
本实验得到了寒热药对中枢单胺类神经递质的
不同作用结果,推测寒热药的共同属性可能是作用
于中枢单胺类神经递质上,特别是NE。其内在规律
是温热药起促进作用,寒凉药起抑制作用,其作用机
制有待深入全面研究。当然此规律需要更多药物更
广泛实验的验证。
[参考文献]
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神经递质及其代谢产物[J]天津中医药大学学报,2007,26
(4):192
ResearchtraditionalChinesemedicinepropertiesbydetecting
rats′monoamineneurotransmitteraftergiventwodiferent
traditionalChinesemedicine
LIJunqing,ZHANGDeqin,ZHANGXiao,WANGXi,ZENGSen
(TianjinUniversityofTraditionalChineseMedicine,Tianjin300193,China)
[Abstract] Objective:TofindouttheessenceofthetraditionalChinesemedicinepropertiesfromdetectingtherats′mono
amineneurotransmiteraftergivendiferenttraditionalChinesedrugMethod:Thepropertyofrhizomecurcumaeandradixcurcumaeis
opposite,theyweregiventoratsrespectivelyforonemonthNext,HPLCECDmethodwasusedtodetecttherats′monoamineneuro
transmiterindiferentencephalicregionResult:Rhizomecurcumaecanraisetherats′monoamineneurotransmiter,butradixcur
cumaeinhibitstherats′monoamineneurotransmiterConclusion:TherearecorelationsbetweenthetraditionalChinesemedicine
propertiesandmonoamineneurotransmiter
[Keywords] RhizomeCurcumae;RadixCurcumae;traditionalChinesemedicineproperties;monoamineneurotransmiter;
HPLCECD
doi:10.4268/cjcmm20100818
[责任编辑 张宁宁]
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