全 文 :[Abstract] Objective:TostudythechemicalconstituentsofthewholeplantCaraganaspinifera.Method:Thechemicalcon
stituentswereisolatedandrepeatedlypurifiedonsilicagelcolumn.ThestructureswereelucidatedbytheNMRspectraandphysico
chemicalproperties.Result:Sixcompoundswereisolatedandidentifiedas(6aR,11aR)4,9dimethoxy3hydroxypterocarpan,
(6aR,11aR)4,9dihydroxy3methoxypterocarpan(melilotocarpaneB),5,4′dihydroxy7methoxyisoflavone,7hydroxy4′methox
yisoflavone,6,7dihydroxy4′methoxyisoflavone,βsitosterolrespectively.Conclusion:Alcompoundswereisolatedfromtheplant
forthefirsttime.
[Keywords] Caraganaspinifera;pterocarpan;isoflavone
[责任编辑 王亚君]
[收稿日期] 20070724
[通讯作者] 苏亚伦,Tel:(010)63165327,Fax:(010)63017757,
Email:suyalun@imm.ac.cn
光叶珙桐化学成分的研究
杨建波,吉腾飞,王爱国,苏亚伦
(中国医学科学院 中国协和医科大学 药物研究所,北京 100050)
[摘要] 目的:研究光叶珙桐 Davidiainvolucratavar.vilmoriniana枝叶的化学成分。方法:采用薄层色谱,硅
胶柱色谱,SephadexLH-20凝胶柱色谱等方法进行分离纯化,使用波谱分析技术和理化常数对照等方法对得到的
化合物进行结构鉴定。结果:从光叶珙桐的醋酸乙酯部位分离得到7个化合物,分别为没食子酸(3,4,5trihydroxy
benzoicacid1),鞣花酸(elagicacid2),顺丁烯二酸(maleicacid3),槲皮素(quercetin4),3OβD吡喃半乳糖基槲
皮素苷(quercetin3OβDgalactoside5),2α,3α,19α,23tetrahydroxyurs12en28oicacid28OβDglucopyranosyl
ester(6),短叶苏木酚酸乙酯(ethylbrevifolincarbosylate7)。结论:化合物1~7均为首次从该植物中分离得到。
[关键词] 珙桐属;光叶珙桐;化学成分
[中图分类号]R284.1 [文献标识码]A [文章编号]10015302(2008)07077703
光叶珙桐 Davidiainvolucratavar.vilmoriniana
是中国特有的单型科珙桐科(Li,1954),仅有1属1
种和1变种,即珙桐 D.involucrataBail和变种光
叶珙桐D.involucratavarvilmoriniane,外观酷似珙桐
树,为国家二级保护植物。主要分布于云南、贵州、
四川、湖北、湖南、陕西等地的亚热带山地,以四川盆
地西北缘的邛崃山地卧龙保护区和西南缘的大小凉
山以及川鄂湘黔交界的武艺山地,例如贵州梵净山,
比较集中,这一地区应是珙桐的多度中心[1]。目前
对于光叶珙桐的研究主要集中在生态方面[2],而对
于其化学成分的研究还没有文献报道。近20年来,
从该科植物中分离得到几十种天然化合物,不少化
合物具有抗癌、抗病毒等生物活性[3]。为了寻找光
叶珙桐中抗肿瘤和抗病毒成分,作者对该植物进行
了系统的化学成分研究。从醋酸乙酯部位分离得到
7个化合物,皆为首次从该植物中分离得到。
1 仪器与试剂
Boetius显微熔点测定仪(温度未校正);IM-
PACT400型傅立叶变换红外光谱仪(美国,尼高力
公司);VGZAB-2F型质谱仪测定 EIMS,Agi
lent1100系列 LC/MSDTrapSP型质谱仪测定 ESI
MS;Mercury300,400和 Inova500核磁共振仪(美
国,Varian公司)。液相型号为岛津 SPD-20A230
V,YMCPackODS色谱柱。薄层色谱用硅胶 GF254
为青岛海洋化工厂出品;薄层聚酰胺(聚酰胺6薄
膜)为浙江台州市路桥四青生化材料厂生产;正相
柱色谱用硅胶(140~160目,200~300目,硅胶 H)
均为青岛海洋化工厂出品;葡聚糖凝胶为Pharmacia
公司SephadexLH-20。其他试剂均为分析纯。
光叶珙桐采自湖北神农架,由北京中医药大学
常章富教授鉴定。
·777·
第33卷第7期
2008年4月
中 国 中 药 杂 志
ChinaJournalofChineseMateriaMedica
Vol.33,Issue 7
April,2008
2 提取分离
光叶珙桐枝叶2kg,95%乙醇回流提取3次,每
次加热回流2h,合并提取液,减压浓缩,得到浸膏
(226g),加2500mL蒸馏水溶解,依次用石油醚,
氯仿,醋酸乙酯,正丁醇萃取,减压回收溶剂后得到
4种不同极性部分:石油醚部分(47g),氯仿部分
(20g),醋酸乙酯部分(30g),正丁醇部分(33g)。
醋酸乙酯部分(30g)过 SephedexLH-20,用60%
甲醇洗脱,每20mL接1流分,Fr.24~28有淡黄色
固体析出,合并,上聚酰胺,不同浓度的乙醇梯度洗
脱,得到化合物4,5;Fr.42~49有淡黄色固体析出,
过滤得固体,用甲醇超声溶解,过045μm滤膜,甲
醇重结晶,得化合物 2;Fr.31~40合并,硅胶柱色
谱,用氯仿甲醇冰醋酸(9∶1∶1%冰醋酸)系统梯度
洗脱,每30mL接1流分,Fr.17~21有淡黄色针状
晶体析出,得化合物1;合并 Fr.25~50,用氯仿甲
醇冰醋酸(9∶1∶1%冰醋酸)系统洗脱和 Sephedex
LH-20柱纯化,得到化合物3,7。样品经过反复硅
胶柱色谱和 SephedexLH-20柱后,用 HPLC,70%
甲醇分离纯化,选择流速为 6mL·min-1,波长为
210nm。在液相1209min出峰,纯化,得化合物6。
3 结构鉴定
化合物1 淡黄色针状晶体,mp234~236℃。
FeCl3反应呈阳性,与没食子酸对照品薄层比较,比
移值相同,其 EIMS,1HNMR均与参考文献[4]一
致,确定化合物1为没食子酸。
化合物2 淡黄色针状晶体,mp344~348℃。
FeCl3反应呈阳性。ESIMSm/z301[M-1]
+,1H
NMR(DMSOd6,500MHz)δ:745(2H,s,H5,H
5′),与鞣花酸对照品薄层比较,比移值相同。其波
谱数据与文献[5]一致,确定化合物2为鞣花酸。
化合物3 无色针状晶体,mp130~132℃。1H
NMR(DMSOd6,500MHz)δ:661(2H,s,H2,3),
130(羧基氢质子信号)。13CNMR(DMSOd6,125
MHz)δ:1340(C2,C3),1660(C1,C4)。参考文
献[6]确定化合物3为顺丁烯二酸。
化合物 4 黄色粉末,mp300~302℃,盐酸镁
粉反应呈阳性。EIMSm/z302,286,137,69。1H
NMR(DMSOd6,500MHz)与参考文献[7,8]一致,
故确定化合物4为槲皮素。
化合物5 黄色粉末,mp246~250℃。盐酸镁
粉反应呈阳性,Molish反应呈阳性。ESIMSm/z
465[M+1]+,487[M+Na]+,503[M+K]+。1H
NMR(DMSOd6,500MHz)δ:1262(s,OH5),1084
(s,OH7),971(s,OH3′),913(s,OH4′),766
(1H,dd,J=85,20Hz,H6′),751(1H,d,J=20
Hz,H2′),680(1H,d,J=80Hz,H5′),639(1H,
d,J=20Hz,H8),619(1H,d,J=20Hz,H6),
537(1H,d,J=75Hz,Gal1)。13CNMR(DMSOd6,
125MHz)δ:1775(C4),1641(C7),1612(C5),
1563(C9),1562(C2),1484(C2′),1448(C3′),
1335(C3),1219(C6′),1211(C1′),1159(C
5′),1152(C4′),1039(C10),986(C6),935(C
8),Gal:1018(C1),758(C5),732(C3),712(C
2),679(C4),601(C6)。参考文献[810]确定化
合物5为3OβD吡喃半乳糖基槲皮素苷。
化合物6 白色粉末,mp226~228℃。ESIMS
m/z689[M +Na]+,665[M -H]-。1HNMR
(C5D5N,500MHz)δ:630(1H,d,J=80Hz,H
1′),554(1H,brs,H12),421~450(m,Hsug
ar),412(1H,brs,H3β),405(1H,m,H2β),389
(1H,d,J=105Hz,Ha23),372(1H,d,J=105
Hz,Hb23),291(1H,s,H18),162,134,122,
106,086(each,3H,s,Me23,25,26,27,29),104
(3H,d,J=70Hz,Me30)。13CNMR和 DEPT
(C5D5N,125MHz)δ:419(C1,CH2),663(C2,
CH),789(C3,CH),435(C4,C),428(C5,
CH),185(C6,CH2),332(C7,CH2),407(C8,
C),478(C9,CH),384(C10,C),242(C11,
CH2),1284(C12,CH),1393(C13,C),422(C
14,C),292(C15,CH2),261(C16,CH2),486
(C17,C),544(C18,CH),726(C19,C),421
(C20,CH),267(C21,CH2),377(C22,CH2),
712(C23,CH2),178(C24,CH3),176(C25,
CH3),172(C26,CH3),246(C27,C),1769(C
28,C),269(C29,CH3),167(C30,CH3),gluC:
959(C1′),741(C2′),793(C3′),713(C4′),
789(C5′),623(C6′)。参考文献[1113]确定化
合物 6为:2α,3α,19α,23tetrahydroxyurs12en28
oicacid28OβDglucopyranosylester。
化合物7 淡黄色针状晶体。ESIMSm/z321
[M+H]+,343[M+Na]+,359[M+K]+,319[M-
H]-。1HNMR(DMSOd6,500MHz)δ:729(1H,s,H
7),439(1H,dd,J=78,18Hz,H9),408(2H,q,
·877·
第33卷第7期
2008年4月
中 国 中 药 杂 志
ChinaJournalofChineseMateriaMedica
Vol.33,Issue 7
April,2008
J=69Hz,H2′),297(1H,dd,J=186,78Hz,H
10),243(1H,dd,J=186,21Hz,H10),116(3H,
t,J=69Hz,H3′)。13CNMR(DMSOd6,125MHz)δ:
1931(C11),1721(C1′),1602(C8),1497(C
6),1458(C2),1437(C4),1403(C5),1386(C
3),1149(C3α),1129(C7α),1080(C7),606(C
2′),407(C9),370(C10),139(C3′)。参考文献
[14,15]确定化合物7为短叶苏木酚酸乙酯。
[参考文献]
[1] 彭玉兰,胡云乾,孙 航.光叶珙桐的等位酶分析及其生物地
理学意义[J].云南植物研究,2003,25(1):55.
[2] 杨心兵,刘胜祥,杨福生.湖北省后河自然保护区光叶珙桐种
群结构的研究[J].生物学杂志,2000,17(1):15.
[3] 黄 江,刘 荣,王从周,欧阳明安.珙桐科植物化学成分研
究进展(综述)[J].亚热带植物科学,2005,34(2):70.
[4] 唐 萍,吴海燕.中药川赤芍的化学成分研究[J].中药材,
2005,28(9):775.
[5] 向桂琼,卢馥荪.中国特有植物珙桐化学成分研究[J].植物
学报,1989,31(7):540.
[6] 李 彬,陈万生,杨根金,等.四倍体板蓝根中的有机酸类成
分[J].第二军医大学学报,2000,21(3):207.
[7] 张雷红,张现涛,叶文才,等.宽叶大戟化学成分的研究[J].
天然产物研究与开发,2006,18:58.
[8] 郭 澄,郑清明,郑汉臣.元宝草的化学成分研究[J].药学服
务与研究,2005,5(4):341.
[9] 欧阳明安,周剑宁.珙桐叶中黄酮甙成分[J].广西植物,
2003,23(6):568.
[10] 张 莉,阿依别克·马力克.糙叶酸模化学成分研究[J].中
草药,2006,37(6):829.
[11] 王 英,陈四宝,倪 洁,等.亮叶杨桐的化学成分研究[J].
中国药科大学学报,2003,34(5):407.
[12] 李延芳,胡立宏,楼凤昌.野蔷薇根的化学成分研究[J].中国
药科大学学报,2002,33(3):184.
[13] TakashiS,TakashiT,OsamuT.βglucosylestersof19α
hydroxyursolicacidderivativesinleavesofrubusspecies[J].
Phytochemistry,1984,23(12):2829.
[14] NazneenP,NizamaK,Tinoue,etal.Ethylbrevifolincarboxyl
ateandotherconstituentsfromAceroblongumleaves[J].Phyto
chemistry,1988,27(12):3990.
[15] 石心红,杜晓犁,孔令义.准噶尔大戟根化学成分的研究[J].
中国中药杂志,2006,31(18):1503.
StudiesonchemicalconstituentsfromDavidiainvolucratavar.vilmoriniana
YANGJianbo,JITengfei,WANGAiguo,SUYalun
(InstituteofMateriaMedica,ChineseAcademyofMedicalSciencesandPekingUnionMedicalColege,Beijing100050,China)
[Abstract] Objective:TostudythechemicalconstituentsofDavidiainvolucratavar.vilmoriniana.Method:Thechemical
constituentswereisolatedbycolumnchromatographyonsilicalgelandsephadexLH-20.Theirstructureswereelucidatedonthebasis
ofspectralanalysisandphysicalconstants.Result:Sevencompoundswereisolatedfromthisplantandthestructuresofthemwerei
dentifiedas3,4,5trihydroxybenzoicacid(1),elagicacid(2),maleicacid(3),quercetin(4),quercetin3OβDgalactoside
(5),2α,3α,19α,23tetrahydroxyurs12en28oicacid28OβDglucopyranosylester(6),ethylbrevifolincarbosylate(7),re
spectively.Conclusion:Compounds17wereisolatedfromthisplantforthefirsttime.
[Keywords] Davidia;Davidiainvolucratavar.vilmoriniana;chemicalconsitituents [责任编辑 王亚君]
(上接第759页)
thequalityofflavone.Method:TheextractwashydrolyzedandtheflavonoidcomponentsweredeterminedbyRPHPLC.Resultand
Conclusion:InthesamplesfromTongxiang,Tezhongbojushowedthehighestflavonoidscontentwiththetotalflavone9.81%,querce
tin4.17‰ andapigenin17.02‰.InthesamplesfromSheyang,Hongxinjushowedthehighestcontentofluteolinwith6.84‰Inthe
samplesfromJiangning,Tezhongbojushowedthehighestcontentoftotalflavonewith7.59%,Yizhongdabaijushowedthehighestcon
tentofquercetinwith2.78‰,Sheyangxiaobaijushowedthehighestcontentofluteolinwith4.27‰,Sheyanghongxinjushowedthe
highestcontentofapigeninwith11.20‰.Therewerediferencesinthecontentofflavonoidsamongthediferentcultivars,andthe
samecultivarsshowedalsodiferentwhenplantedindiferentareas.
[Keywords] Chrysanthemummorifoliumformedicine;cultivars;flavone;luteolin;apigenin;quercetin
[责任编辑 张宁宁]
·977·
第33卷第7期
2008年4月
中 国 中 药 杂 志
ChinaJournalofChineseMateriaMedica
Vol.33,Issue 7
April,2008