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Vol.34，Issue 2
January，2009
第 34 卷第 2 期
2009 年 1 月
荭叶心通软胶囊中川芎超临界流体萃取工艺研究
兰燕宇，郑 林，黄 勇，王爱民，李勇军，何 迅，王永林*
（贵阳医学院 药学院，贵州 贵阳 550004）
[摘要] 目的：采用超临界流体萃取法，探讨荭叶心通软胶囊中川芎提取工艺的合理性。方法：以藁苯内酯转移率和得
油率为指标，用正交试验优化超临界流体萃取川芎的工艺条件。并以川芎超临界流体萃取物和传统蒸馏法提取物分别组成的
复方进行大鼠冠脉结扎所致心肌缺血试验比较。结果：超临界流体萃取川芎的最佳工艺条件为萃取压力 30 MPa，萃取温度
50 ℃，萃取时间 4 h；解析压力 10 MPa、解析温度 40 ℃。结论：超临界流体可有效萃取川芎中活性成分。
[关键词] 荭叶心通软胶囊；川芎；超临界流体萃取；工艺研究；药效学评价
7荭叶心通软胶囊由荭草、川芎全列出等 4 味中
药组成，具有活血化瘀，通脉止痛的功效，临床用
于冠心病心绞痛心血瘀阻证。文献资料报道川芎主
要活性成分为挥发油（主要含苯酞类藁本内酯、川
芎内酯）、生物碱类等。其中川芎内酯有明显的强
心、增加冠脉流量作用[1]。临床及动物实验证明
川芎挥发性成分能抑制血小板活化，改善血微
循环，降低血管阻力，对缺血性疾病有显著疗
效 [2]，苯酞类化合物被证明是川芎中对心脑血
管系统作用的主要成分 [3]。为保证川芎中活性
成分的有效富集，作者采用正交试验研究荭叶心
通软胶囊中川芎超临界流体萃取工艺，以藁苯内酯
转移率、得油率为指标，考察荭叶心通软胶囊中川
芎超临界流体萃取工艺的可行性，并以超临界流体
萃取物和水蒸气蒸馏法提取物分别组成的复方进
行大鼠冠脉结扎所致心肌缺血试验比较，考察川芎
超临界流体萃取工艺的合理性。
1 材料
岛津 SHIMADZU LC-10AVP 高效液相色谱
仪系统；HL-2L/50Mpa- AⅡ 型超临界流体萃取装
置（杭州华黎泵业有限公司）；挥发油提取器（上
海医用分析仪器厂）；721 分光光度计（上海第三
分析仪器厂）；心电图机（广东科思美医用器械厂）；
乙腈为色谱纯，甲醇为分析纯，水为重蒸水；藁

[收稿日期] 2008-03-27
[基金项目] 国家科技支撑计划课题（2006BAI06A01-03）；贵州省中
药现代化科技产业项目[黔科合中药专字（2003）12 号]
[通讯作者] *王永林，Tel：（0851）6908899，E-mail：gywyl@gmc.edu.cn

本内酯对照品（自制，系从川芎药材中提取分离，
并经 UV，IR，NMR 光谱鉴定，HPLC 归一化含
量为 95.2％）；川芎 Ligustricum chuanxiong 由贵阳
医学院药物研究所生药学研究室鉴定。乌拉坦
（中国医药上海化学试剂公司，批号 20020808）；
肌酸磷酸激酶（CK）测定试剂盒（南京建成生物工
程研究所，批号 20020317）；乳酸脱氢酶（LDH）
测定试剂盒（南京建成生物工程研究所，批号
20020410）；三苯基氯化四氮唑（TTC，中国医药上
海化学试剂公司，批号 990930）；复方丹参片（广
州白云山中药厂，批号 021015）。
清洁级 SD 大鼠，雌雄兼用。合格证号 SCXK
（黔）2002-0001，由贵阳医学院实验动物中心提供。
2 方法与结果
2.1 藁苯内酯含量测定[4]
2.1.1 色谱条件 Diamonsil C18（4.6 mm×250 mm，
5 μm），流动相甲醇-水（75∶25），流速 1 mL·min-1，
检测波长 280 nm，柱温 40 ℃，进样量 5 μL。
2.1.2 标准曲线的绘制 配制藁苯内酯 0.068，
0.136，0.204，0.276，0.340 g·L-1 系列溶液，在上
述色谱条件下进样分析，以对照品峰面积与纵坐
标，藁本内酯浓度为横坐标绘制标准曲线，回归方
程 Y=6 976 351X–11 900，r=0.999 9（n=5）。表明
藁本内酯溶液在 0.068 ～0.340 g·L-1 线性关系良
好。
2.1.3 稳定性试验 取同一样品溶液，按上述色谱
条件分别在 0，2，4，6 h 测定，测得峰面积积分值
的 RSD 1.8％，表明供试品溶液在 6 h 内稳定。


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2.1.4 精密度试验 取标准曲线项下对照品溶液
按上述色谱条件，重复进样 5 次，对照品峰面积积
分值的 RSD 0.8％（n=5）。
2.1.5 加样回收试验 精密称取已测得藁本内
酯含量的药材粉末，按样品分析的方法同法操作
5次，测得藁本内酯的平均回收率为 94.76%，RSD
1.9%。
2.1.6 样品溶液制备 药材：称取川芎药材（过 40
目）0.3 g，置具塞三角瓶中，精密加甲醇 25 mL，
称定质量，避光放置 12 h ，超声处理 30 min，放
冷，用甲醇补足减失的质量，摇匀，滤过，即得。
超临界萃取物：取本品 50 mg，置 50 mL 棕色
量瓶中，精密称定，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇
匀，即得。
水蒸气蒸馏提取物：取本品 50 mg，置 50 mL
棕色量瓶中，精密称定，加甲醇溶解并稀释至刻度，
摇匀，即得。
2.2 超临界流体萃取实验方法与结果
2.2.1 萃取方法 将川芎药材粉碎后过 40 目筛，
装入萃取釜，调整萃取温度和压力，依法萃取，收
集萃取物。
2.2.2 正交试验设计 影响超临界流体萃取的因
素较多，根据文献[5]资料报道萃取及解析压力、
温度、时间、药材粉碎度等因素均影响萃取效率。
在预试验的基础上，作者以影响超临界流体萃取
的主要因素压力和温度为考察因素进行 4 因素 3
水平的正交试验设计（表 2），以藁本内酯提取
率及得油率为考察指标进行试验。在所选的各
因素水平条件下，萃取 4 h。
表1 因素水平
A B C D
水平 萃取压力
/MPa
萃取温度
/℃
解析压力
/MPa
解析温度
/℃
1
2
3
20
30
40
40
50
60
5
10
15
40
50
60

2.2.3 正交试验方法和结果 选用 L9（34）正交表
安排试验，称取川芎药材粗粉（40 目筛）300 g，
共 18 份，按正交试验表进行试验（每个条件重复 1
次），收集提取物，测定藁本内酯含量和得油量。
以藁本内酯提取率、得油率为评价指标进行综合评
价（表 2，3）。
表 2 正交试验结果 %
No. 藁本内酯转移率 得油率
1
2
3
4
5
6
7
8
9
118.06
141.40
126.24
156.97
171.27
160.84
139.83
147.28
157.80
6.92
10.79
7.68
11.23
12.21
11.04
10.82
12.28
11.47

表 3 方差分析
指标 方差 来源
离均差
平和 自由度 均方 F P
藁本内酯 A 896.90 2 448.45 689.92 <0.01
转移率 B 175.63 2 87.82 135.11 <0.01
C 76.58 2 38.29 58.91 <0.01
D 24.26 2 12.13 18.66 <0.01
E(误差） 5.85 9 0.65
得油率 A 9.27 2 4.64 69.25 <0.01
B 3.37 2 1.68 25.07 <0.01
C 1.03 2 0.52 7.76 <0.05
D 0.37 2 0.18 2.69
E(误差） 0.60 9 0.067
注：F0.05 (2，9)＝4.26；F0.01 (2，9)＝8.02

分析结果表明，各因素对藁苯内酯转移率均有
显著性影响，最佳工艺条件为 A2B2C2D1。A，B，C
因素对得油率有显著性影响，最佳工艺条件为
A3B2C2D2，从试验数据的极差大小分析，在有显著
性影响的 A 因素中最佳工艺和次佳工艺的极差较
小，D 因素无显著性影响。综合分析选择 A2B2C2D1
工艺。验证试验结果，藁苯内酯平均提取率为
85.15%（RSD 3.3％），平均得油率为 6.04％（RSD
5.1％）。说明优选工艺条件可行。即以压力为 30
MPa、温度为 50 ℃的条件超临界萃取 4 h；以压力
为 10 MPa；温度为 40 ℃进行解析。
2.3 水蒸汽蒸馏和超临界二氧化碳萃取样品制备
2.3.1 水蒸汽蒸馏提取 取川芎 600 g，置挥发油
提取器中，加 8 倍量水，连续提取 8 h[6]，收集提取
物。藁苯内酯的提取率为 13.48％，得油率为 0.31%。
2.3.2 超临界二氧化碳萃取 取已粉碎的川芎 600
g，装入超临界萃取罐中，以压力为 30 MPa、温度
为 50 ℃的条件萃取 4 h；以压力为 10 MPa；温度为
40 ℃进行解析，收集挥发油。藁苯内酯的提取率为


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85.54％，得油率为 5.98％。
2.4 川芎不同提取方法提取物的药效学试验比
较
2.4.1 受试药物 荭草等 3 味药材提取物分别加
入处方量川芎水蒸气蒸馏提取物（A）和超临界
流体提取物（B）。阳性药为复方丹参片。临用前
以生理盐水配制成所需浓度混悬液。
2.4.2 试验方法与结果 取 SD 大鼠 50 只，雌雄
兼用，体重 240～280 g，随机分组，每组 10 只。
为假手术组、模型组、阳性药物组和 A，B 给药
组，采取灌胃给药方式，给药容积 10 mL·kg-1。
每天灌胃 1 次，连续给药 3 d，假手术组和模型
组给于等量生理盐水。第 3 天给药后 30 min，参
照文献方 法[7]，结扎大鼠左冠状动脉前降支。
记录结扎前、结扎后 15，30，60，90，120，180
min 的Ⅱ导联心电图，读取 J 点位移值；结扎后
180 min 股动脉取血，备测心肌酶 LDH，CK；取
心脏以 TTC 溶液染色，计算心肌缺血梗死区百分
率(表 4，5)。
药效学试验结果表明，川芎采用不同提取工艺
制备的样品均能不同程度改善缺血性心肌心电图
（P<0.05，P<0.01），减轻缺血心肌酶学改变
（P<0.05），使心肌缺血区百分率降低（P<0.05），
对急性心肌缺血具有明显保护作用。
表 4 对大鼠结扎左冠状动脉后 ECG 的影响（J 点位移值，mV， x s± ）
结扎后 组别 剂量
/g·kg-1
n 结扎前
15 min 30 min 60 min 90 min 120 min 180 min
假手术 － 10 0.08±0.02 0.10±0.04 0.11±0.04 0.11±0.04 0.09±0.04 0.09±0.03 0.12±0.04
模型■ － 9 0.10±0.03 0.51±0.15 0.46±0.15 0.50±0.13 0.48±0.14 0.45±0.14 0.51±0.13
A 5.0 10 0.09±0.02 0.48±0.15 0.29±0.171) 0.30±0.142) 0.35±0.131) 0.35±0.20 0.44±0.12
B 5.0 9 0.09±0.03 0.34±0.101) 0.32±0.111) 0.28±0.122) 0.27±0.162) 0.24±0.132) 0.35±0.161)
阳性药 1.5 10 0.09±0.03 0.45±0.12 0.31±0.141) 0.35±0.161) 0.35±0.091) 0.42±0.09 0.37±0.18
注：与模型组相比 1)P＜0.05，2)P＜0.01（表 5 同）。

表 5 对大鼠结扎左冠状动脉后酶学指标及
心脏梗塞范围的影响（ x s± ）
组别 剂量
/g·kg-1
n
LDH
/U·L-1
CK
/U·L-1
(梗死区/心室)
/%
假手术 － 10 2 278±609 0902±267 0.00±0.00
模型■ － 9 3 871±1 089 1 646±571 20.08±3.24
A 5.0 10 3 108±827 1 153±3801) 15.59±4.751)
B 5.0 9 2 626±1 0091) 1 163±3621) 14.52±5.531)
阳性药 1.5 10 3 193±779 1 496±635 14.88±5.081)

3 讨论
川芎为传统的活血化瘀中药，广泛应用于临床
治疗心脑血管疾病。文献报道较多的活性成分是川
芎嗪，其次对挥发油也有不少的研究报道。作者在
川芎的提取工艺研究中，分别采用了水蒸汽蒸馏法
和超临界二氧化碳萃取，同时使用夹带剂进行超临
界提取以及乙醇提取或碱水提取[8]生物碱，并对样
品中川芎嗪的含量进行了测定。试验结果表明，川
芎药材中川芎嗪含量较低（0.20～9.8 μg·g-1），与文
献报道基本相符[9]；且川芎嗪在提取物中几乎不能
检出；因此本试验未采用川芎嗪为考察指标。
有报道指出，水蒸汽蒸馏法提取川芎挥发油加
热时间长，其中一些热敏性物质易发生氧化、聚合
等反应而变性[10]。而川芎低极性挥发性成分能抑制
血小板活化，改善血液微循环，降低血管阻力，对
缺血性疾病有显著疗效[2]，川芎中多种苯酞类已被
证明是其心脑血管系统作用的主要活性成分[3]。荭
叶心通处方中川芎采取超临界 CO2 萃取，藁苯内
酯提取率明显高于蒸馏法。超临界萃取工作温度
低、耗时短，可减少对热不稳定及易氧化的挥发
性成分的损失，对川芎挥发性成分的提取是一种
极有应用前景的方法。
药材粉碎度和萃取时间对超临界 CO2 萃取有
一定影响，试验对药材粉碎度和萃取时间进行了
单因素考察。结果表明，川芎药材粉碎过 40 目筛，
萃取 4 h，藁苯内酯转移率和得油率较好，藁苯内
酯转移率达 85％以上，得油率可达 6％。
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2001，36(10)：793.


Studies on extraction of Ligusticum chuanxiong in Hongye Xintong
soft capsule by super critical fluid extraction

LAN Yanyu，ZHENG Lin，HUANG Yong，WANG Aimin，LI Yongjun，
HE Xun，WANG Yonglin*
(Schoolt of Pharmacy，Guiyang Medical College，Guiyang 550004，China)

[Abstract] Objective：To study the rationality of extraction prosess for the Ligusticum chuanxiong in Hongye Xintong Soft
Capsule by super critical fluid extraction(SFE). Method：Conditions for the extraction were optimized by orthogonal experimental
design as guided by the extraction rate and content of ligustilid in the extract；Combined with the experiment of rats ligated the left
coronary artery，the two compounds containing different extracts (steam distillation and SFE ) were compared to determine the
extraction prosess. Result：The best extraction conditions were established as following：pressure 30 MPa，temperature 50 ℃，
extracting time 4 h，separate pressure 10 MPa. separate temperature 40 ℃. Compared with steam distillation，the compound
containing SFE extract showed stronger protective effects on rats ligated the left coronary artery. Conclusion：Super critical fluid can
extract active ingredients in Ligusticum chuanxiong effectively.
[Key words] Hongye Xintong soft capsule； Ligusticum chuanxiong；SFE； pharmacodynamical evaluation
[责任编辑 鲍 雷]