全 文 ：金花石蒜离体培养及快速繁殖
郑晓峰，黄 刚
（黔东南民族职业技术学院，贵州 凯里 ５５６０００）
［收稿日期］ ２００８０７３０
［通信作者］ 郑晓峰，Ｔｅｌ：１３９８５２９６７６５，Ｆａｘ：（０８５５）２１００３０３，Ｅ
ｍａｉｌ：ｚｘｆ５６７８＠１２６．ｃｏｍ
金花石蒜ＬｙｃｏｒｉｓａｕｒｅａＨｅｒｂ属石蒜科石蒜属多
年生草本植物，别名忽地笑、龙爪花、大毒蒜。其鳞
茎有毒性，含有石蒜碱、石蒜胺碱、加兰他敏、多花水
仙碱等１０多种生物碱，具有较高的药用价值［１］。石
蒜属植物主要靠野生繁殖为主，其繁殖系数低，极大
地制约了石蒜的引种、驯化及扩大生产。而组织培
养可以有效地提高繁殖系数［２］，同时也是种子保存
（超低温保存）、诱变育种及遗传转化的基础［３］。近
年来，关于石蒜、红花石蒜的组培研究已有报道［２５］，
但由于石蒜属植物品种较多，研究结果也各不相同，
目前关于贵州金花石蒜的组培技术研究尚未见报
道。因此，深入研究不同因素对金花石蒜试管鳞茎
诱导的影响，从中筛选出适宜的培养基，对金花石蒜
的快速繁殖和规模化生产具有重要的现实意义。
１ 材料与方法
１．１ 金花石蒜
金花石蒜鳞茎取自黔东南民族职业技术学院科
技示范园苗圃，由周定生高级农艺师鉴定。
１．２ 培养条件
以ＭＳ为基本培养基，用０４％的琼脂固化，ｐＨ
５８～６０，蔗糖３０ｇ·Ｌ－１，附加不同浓度的植物生
长物质，分装于瓶中，在 １２１℃湿热灭菌 １２～１５
ｍｉｎ，备用。培养温度（２５±１）℃，光照强度１５００～
２０００ｌｘ，光照时间１２ｈ·ｄ－１。
１．３ 方法
１．３．１ 外植体的获取 取出金花石蒜球茎，用手术
刀除去外层鳞片、根，先用洗涤剂浸泡１０ｍｉｎ，再用
自来水冲洗１～２ｈ，后用７０％的乙醇浸泡１ｍｉｎ，再
用０１％的升汞消毒１０～１５ｍｉｎ，然后用无菌水反
复冲洗数次，直至干净为止。先将球茎切成４块，再
切剥带鳞茎盘的双鳞片和带４～５层的鳞片，接种于
鳞茎诱导培养基上。
１．３．２ 鳞茎诱导 采用Ｌ９（３
４）正交试验方案配制
培养基，将经消毒处理过的外植体接种于鳞茎诱导
培养基上，每种处理接种１０瓶，每瓶接种２苗，９０ｄ
后统计实验结果，重复３次。
１．３．３ 鳞茎增殖培养 采用Ｌ９（３
４）正交试验方案
配制培养基，将诱导出的金花石蒜鳞茎每个切割成
４块，分别接种在增殖培养基中。每种处理接种１０
瓶，每瓶接种２苗，６０ｄ后分析统计结果，重复３次。
１．３．４ 生根诱导培养 将生长健壮的无根小苗，接
种于诱根培养基上，每种处理接种１０瓶，每瓶接种
２苗，定期观察记录，６０ｄ后分析统计结果。
２ 结果与分析
２．１ 鳞茎的诱导
接种的鳞片，均可诱导鳞茎的分化（表 １）。４
周后鳞片卷缩增厚膨胀，同时可见米粒状突起。进
而尖端显绿，形成绿色小芽，８～１０周后进一步生长
分化形成小鳞茎。
表１ 植物生长物质对鳞茎诱导、增殖的影响
培养基
因素
Ａ
６ＢＡ
／ｍｇ·Ｌ－１
Ｂ
ＮＡＡ
／ｍｇ·Ｌ－１
Ｃ
ＫＴ
／ｍｇ·Ｌ－１
平均
诱导率
／％
平均
增殖
倍数
Ａ１Ｂ１Ｃ１ １０ １０ ００ ３３０６ ３６
Ａ１Ｂ２Ｃ２ １０ ２０ １０ ３１８３ ３５
Ａ１Ｂ３Ｃ３ １０ ３０ ２０ ３１５０ ４４
Ａ２Ｂ１Ｃ２ ３０ １０ １０ ４３１８ ３９
Ａ２Ｂ２Ｃ３ ３０ ２０ ２０ ３９７６ ４６
Ａ２Ｂ３Ｃ１ ３０ ３０ ００ ４８０８ ４０
Ａ３Ｂ１Ｃ３ ５０ １０ ２０ ４６１９ ４２
Ａ３Ｂ２Ｃ１ ５０ ２０ ００ ５３８１ ５８
Ａ３Ｂ３Ｃ２ ５０ ３０ １０ ５００１ ５０
直观分析表明，６ＢＡ的均值 Ｋ３＞Ｋ２＞Ｋ１，说明
１～５ｍｇ·Ｌ－１对鳞茎诱导起促进作用，且６ＢＡ的极
差Ｒ值最大，说明６ＢＡ是鳞茎诱导的主要影响因
素。ＮＡＡ的均值Ｋ３＞Ｋ２＞Ｋ１，说明 ＮＡＡ对鳞茎的
诱导在１～３ｍｇ·Ｌ－１时，也有促进作用，因此，３０
ｍｇ·Ｌ－１的 ＮＡＡ为诱导鳞茎的适宜质量浓度。ＫＴ
的均值Ｋ１＞Ｋ２＞Ｋ３，说明 ＫＴ对鳞茎诱导起抑制作
·０５５·
第３４卷第５期
２００９年３月
Ｖｏｌ．３４，Ｉｓｓｕｅ ５
Ｍａｒｃｈ，２００９
用。综合表１的直观分析，诱导鳞茎形成时，６ＢＡ，
ＮＡＡ，ＫＴ的最佳质量浓度分别为５０，３０，００ｍｇ·
Ｌ－１，则获最佳实验方案Ａ３Ｂ３Ｃ１，配制Ａ３Ｂ３Ｃ１培养基
进行验证，结果显示鳞茎诱导率高达７６３％，显著
高于正交表中的９种培养基，从而验证了 Ａ３Ｂ３Ｃ１这
个组合即ＭＳ＋６ＢＡ５０ｍｇ·Ｌ－１＋ＮＡＡ３０ｍｇ·
Ｌ－１为鳞茎诱导的适宜培养基。
２．２ 鳞茎的增殖培养
６ＢＡ的均值为Ｋ３＞Ｋ２＞Ｋ１，说明６ＢＡ在１～３
ｍｇ·Ｌ－１时，对鳞茎的增殖有促进作用。ＮＡＡ的均值
则为Ｋ２＞Ｋ３＞Ｋ１，说明在０５～１０ｍｇ·Ｌ
－１，ＮＡＡ起
促进作用，其中以１０ｍｇ·Ｌ－１为最好。ＩＢＡ均值为
Ｋ１＞Ｋ３＞Ｋ２，说明ＩＢＡ对鳞茎增殖没有促进作用。直
观分析表明，鳞茎增殖时，６ＢＡ，ＮＡＡ，ＩＢＡ的最佳质
量浓度分别３０，１０，００ｍｇ·Ｌ－１，则获培养基ＭＳ＋
６ＢＡ３０ｍｇ·Ｌ－１＋ＮＡＡ１０ｍｇ·Ｌ－１＋ＩＢＡ００ｍｇ
·Ｌ－１，正好是正交试验的最佳组合 Ａ３Ｂ２Ｃ１。另外，
通过观察，该组合的继代苗生长健壮（表１）。
各处理组合间的差异达极显著水平，处理组合
内，６ＢＡ对鳞茎增殖的影响效果达极显著水平
（Ｐ＜００１），ＮＡＡ的影响效应达显著水平（Ｐ＜００５），
而ＩＢＡ未达显著水平，即 ＩＢＡ对试验结果的影响较
小，则在培养基配方中可以不考虑ＩＢＡ因素。
２．３ 生根培养 小鳞茎在继代过程中随时间的延
长，也有少量根系的产生，但移栽后成活率不高。将无
根小苗及老根切去后移入诱根培养基中。在①～⑦号
培养基，均可产生新根，但以添加ＮＡＡ２０ｍｇ·Ｌ－１的
培养基生根较多，较粗壮。因此，以ＭＳ＋ＮＡＡ２０ｍｇ
·Ｌ－１为金花石蒜生根诱导的适宜培养基（表２）。
表２ 植物生长物质对生根的影响
培养基 培养基／ｍｇ·Ｌ－１ 单株根茎重／ｇ单株根数／条
① ＭＳ ０４０ ４
② ＭＳ＋ＮＡＡ１０ ０７５ ７
③ ＭＳ＋ＮＡＡ２０ ０９０ ８
④ ＭＳ＋ＮＡＡ１０＋ＩＢＡ１０ ０８０ ６
⑤ ＭＳ＋ＮＡＡ２０＋ＩＢＡ１０ ０７６ ６
⑥ ＭＳ＋ＩＢＡ１０ ０６０ ４
⑦ ＭＳ＋ＩＢＡ２０ ０６５ ５
２．４ 试管苗的移栽
将带根健壮的试管苗炼苗３～４ｄ后，洗净琼脂
于３～４月份分别移至珍珠岩 ＋河沙（１／１）及腐殖
质土２种基质中。遮荫保湿培养２周，２周后喷施
营养液 ２次／周，连喷 ２周。第 ４周后，每周喷施
０１％的磷酸二氢钾和 ０１％的尿素混合液 １～２
次。６０ｄ后，腐殖质基质的成活率高达９０％以上。
并且植株生长健壮。而珍珠岩 ＋河沙基质的，成活
率为６０％ ～７０％，小植株矮小、黄弱。因此金花石
蒜试管苗移栽基质以腐殖质基质为好。
３ 小结与讨论
金花石蒜小鳞茎诱导时，所取材的鳞片，曾有报
道，鳞茎内层的鳞片比外层鳞片诱导率高［４］，但在
本试验中，内层与外层鳞片诱导差异不明显。这可
能是所取材的基因型差异所致。本实验发现带２层
的双鳞片接种后，大部分褐化死亡，而带４～５层的
鳞片大部分均能产生不定芽并形成鳞茎，该结论与
王光萍报道相一致［５］。
细胞分裂素６ＢＡ对鳞茎的诱导影响明显，并随
６ＢＡ质量浓度（１～５ｍｇ·Ｌ－１）的增加而增加，以ＭＳ
＋６ＢＡ５０ｍｇ·Ｌ－１＋ＮＡＡ３０ｍｇ·Ｌ－１为较好的鳞
茎诱导培养基配方。在金花石蒜继代增殖过程中，细
胞分裂素６ＢＡ能加速细胞分裂和组织分化，是金花
石蒜增殖的主要因素，随着６ＢＡ浓度的增加，鳞茎的
增殖也在增加。同时细胞分裂素和生长素的合理搭
配能使试管苗得到有效增殖。本试验，６ＢＡ３０ｍｇ
·Ｌ－１和ＮＡＡ１０ｍｇ·Ｌ－１的激素组合可使小鳞茎的
增殖率达到最高，并且规格较整齐，生长、生理状态较
一致。适于商品苗生产的需要。
在生根培养中，去掉细胞分裂素６ＢＡ，有利于
根的生长。其中较好的组合为ＭＳ＋ＮＡＡ２０ｍｇ·
Ｌ－１。移栽基质以腐殖质为好，移栽成活率高达
９０％以上。在金花石蒜继代增殖中，虽然鳞茎切割
增殖倍数可达 ４～５倍，但继代时间过长（５０～６０
ｄ），鳞茎球较小。因此，缩短继代时间和提高大种
球获得率，有待于进一步研究。
［参考文献］
［１］ 赵天荣，施永泰，蔡建岗，等．石蒜属植物的研究进展［Ｊ］．北方
园艺，２００８（４）：６５．
［２］ 何树兰，束晓春，姚青菊，等．石蒜的组织培养［Ｊ］．江苏林业科
技，２００３，３０（４）：１８．
［３］ 林 田，刘灶长，李天菲，等．红花石蒜茎尖的玻璃化超低温保
存［Ｊ］．植物生理学通讯，２００６，４２（６）：１０６３．
［４］ 朱 锦，诸葛强，余水生，等．石蒜组培繁殖技术研究［Ｊ］．浙江
林业科技，２００２，２２（４）：４５．
［５］ 王光萍，陈 英，周 坚，等．长筒石蒜鳞片诱导及植株再生
［Ｊ］．植物生理学通讯，２００５，４１（４）：４５７．
［责任编辑 吕冬梅］
·１５５·
第３４卷第５期
２００９年３月
Ｖｏｌ．３４，Ｉｓｓｕｅ ５
Ｍａｒｃｈ，２００９