全 文 :钩吻非生物碱类化学成分研究
张彬锋1,2,鱺桂新1,2,王峥涛1,2
(1.上海中医药大学 中药研究所 中药标准化教育部重点实验室,上海 201203;
2.上海中药标准化研究中心,上海 201203)
[摘要] 目的:对钩吻Gelsemiumelegans的非生物碱类化学成分进行研究。方法:采用不同柱色谱技术进行分离,通过波
谱分析确定化合物结构。结果:分离鉴定了10个化合物,其中3个酚酸类化合物,2个黄酮类化合物,2个香豆素,2个果糖衍
生物,1个核苷类化合物。分别为tamarixin(1),tamarixetin3OβDgalactopyranoside(2),东莨菪苷(3),东莨菪内酯(4),尿嘧
啶核苷(5),咖啡酸(6),咖啡酸乙酯(7),阿魏酸乙酯(8),乙基αD呋喃果糖苷(9),和乙基βD吡喃果糖苷(10)。结论:化
合物1~3,5~10均为首次从该植物中分离得到,其中化合物1,2,5~10为首次从该属植物中分离得到。
[关键词] 钩吻;非生物碱;化学成分
[收稿日期] 20090402
[基金项目] 上海市复方中药重点实验室开放课题基金(09DZ2270
900)
[通信作者] 鱺桂新,Tel:(021)508055223032,Email:chouguixin
@yahoo.com.cn
钩吻 Gelsemiumelegans(Gardn.etChamp.)
Benth.为马钱科 Loganiaceae钩吻属植物,分布于
我国南部至西南部地区。味辛、苦,性温,大毒。
能祛风攻毒,散结消肿,止痛。用于治疗疥癞,湿
疹,瘰疬,痈肿,疔疮,跌打损伤,风湿痹痛,神
经痛等[1]。文献报道已从该植物分离得到生物
碱[2]、环烯醚萜[3]、三萜[4]及苯丙素类[5]等化合
物。为更好的开发和利用钩吻资源,笔者对钩吻非
生物碱类化学成分进行研究,从中分离得到10个
化合物。
1 材料
BüCHIMetingPointB540型熔点测定仪(温
度未校正),LCQDECAXPplus质谱仪,BrukerAV
500或 BrukerAV400型核磁共振仪(TMS为内
标),柱色谱硅胶(200~300目)和薄层色谱硅胶
(青岛海洋化工厂),凝胶 SephadexLH20(GE
HealthcareBioSciencesAB,Uppsala,Sweden),其
余试剂为分析纯。
钩吻于2006年12月由刘瑞枝采于福建省福安
市,经上海中医药大学中药所吴立宏副教授鉴定其
原植物为钩吻 G.elegans,凭证标本(No.GW
061229)存于上海中药标准化研究中心。
2 提取与分离
钩吻藤59kg用95%乙醇加热回流提取(60L×
4次×3h)。提取液减压回收溶剂后,加适量蒸馏
水浑悬,用稀盐酸调pH约为1,二氯甲烷萃取4次,
回收溶剂得二氯甲烷部位。酸水层用氨水调 pH约
为10,三氯甲烷萃取5次,回收溶剂得三氯甲烷部
位。碱水层加酸调至中性用正丁醇萃取,回收溶剂
得正丁醇部位。二氯甲烷部位硅胶反复柱色谱石油
醚(60~90℃)醋酸乙酯(5∶1)等度洗脱得到化合
物4(647mg)。三氯甲烷部位上硅胶柱色谱,石油
醚(60~90℃)醋酸乙酯梯度洗脱,然后用醋酸乙
酯甲醇梯度洗脱。将得到的含有化合物7的流分、
含有化合物8的流分分别合并,硅胶反复柱色谱环
己烷醋酸乙酯(4∶1)等度洗脱得到化合物 7(90
mg),化合物8(55mg)。正丁醇部位经反复硅胶
柱色谱,二氯甲烷甲醇洗脱得到化合物3和化合物
6,SephadexLH20柱色谱(甲醇)纯化,得3(5mg),
6(549mg)。
钩吻叶11kg用工业甲醇渗漉,渗漉液减压回
收溶剂后的浸膏,加适量蒸馏水浑悬后用稀 HCl调
pH约为1,二氯甲烷萃取除去叶绿素,将酸水层加
碳酸钠调pH约为10,三氯甲烷萃取5次,碱水部分
加酸调至中性49℃回收溶剂得叶的水部位(非生
物碱部位)。叶的水部位经硅胶柱色谱,二氯甲烷
甲醇梯度洗脱得到41个流分(Fr.1~41)。反复硅
胶柱色谱二氯甲烷甲醇洗脱,从Fr.24得化合物9;
Fr.28~29得化合物 5,Fr.3135得化合物 1,2和
·4332·
第34卷第18期
2009年9月
Vol.34,Issue 18
September,2009
10。所得化合物用 SephadexLH20柱色谱(甲醇)
纯化,得到1(245mg),2(116mg),5(73mg),9
(333mg),10(74mg)。
3 结构鉴定
化合物 1 黄色粉末(甲醇),ESIMSm/z
47739[M-H]-;1HNMR(CD3OD,500MHz)δ:
783(1H,d,J=18Hz,H2′),749(1H,dd,J=
84,18Hz,H6′),681(1H,d,J=84Hz,H5′),
628(1H,d,J=16Hz,H8),609(1H,d,J=16
Hz,H6),527(1H,d,J=73Hz,H1″),385(3H,
s,4′OMe),339~331(3H,m,H2″,H3″,H4″),
314(1H,m,H5″),363(1H,dd,J=119,20Hz,
H6″),346(1H,dd,J=119,54Hz,H6″);13C
NMR(CD3OD,100MHz)δ:17803(C4),16559(C
7),16160(C5),15715(C9),15708(C2),
14944(C4′),14700(C3′),13384(C3),12212
(C6′),12171(C1′),11459(C5′),11290(C
2′),10402(C10),9875(C6),9357(C8),
5533(4′OMe),10221(C1″),7716(C5″),7667
(C3″),7451(C2″),7005(C4″),6109(C6″)。
以上数据与文献[6]报道的 tamarixin一致,故确定
化合物1为tamarixin。
化合物 2 黄色粉末(甲醇),ESIMSm/z
47730[M-H]-;1HNMR(CD3OD,500MHz)δ:
793(1H,d,J=18Hz,H2′),748(1H,dd,J=
85,18Hz,H6′),680(1H,d,J=85Hz,H5′),
628(1H,d,J=14Hz,H8),609(1H,d,J=14
Hz,H6);522(1H,d,J=78Hz,H1″),386(3H,
s,4′OMe),373(1H,dd,J=117,35Hz,H6″),
371(1H,brdd,J=78,15Hz,H2″),356(1H,
dd,J=117,58Hz,H6″),349(1H,d,J=56Hz,
H3″),347(1H,dd,J=95,32Hz,H4″),338
(1H,m,H5″);13CNMR(CD3OD,100MHz)δ:
17801(C4),16556(C7),16164(C5),15712
(C9),15705(C2),14941(C4′),14702(C
3′),13394(C3),12212(C6′),12162(C1′),
11452(C5′),11305(C2′),10406(C10),9876
(C6),9351C8),5550(4′OMe);10299(C
1″),7587(C5″),7360(C3″),7175(C2″),
6859(C4″),6076(C6″)。以上数据与文献[7]报
道的 tamarixetin3OβDgalactopyranoside一致,故
确定化合物 2为 tamarixetin3OβDgalactopyrano
side。
化合物 3 白色粉末(甲醇),ESIMSm/z
39920[M+HCOO]-,38924[M+Cl]-;1HNMR
(D2O,500MHz)δ:786(1H,d,J=96Hz,H4),
712(1H,s,H8),711(1H,s,H5),635(1H,d,
J=96Hz,H3),392(3H,s,6OMe),524(1H,d,
J=74Hz,H1′),401(1H,dd,J=125,20Hz,H
6′),384(1H,dd,J=125,54Hz,H6′),368~
375(3H,m,H2′,3′,4′),357~361(1H,m,H
5′);13CNMR(D2O,125MHz)δ:16478(C2),14912
(C7),14879(C9),14610(C6),14576(C4),
11388(C10),11325(C3),10984(C5),10350
(C8),10002(C1′),7639(C5′),7558(C3′),
7281(C2′),6938(C4′),6055(C6′),5632(6
OMe)。综合以上数据及与文献[8]对比,鉴定化合
物3为东莨菪苷(scopolin)。
化合物4 无色针晶(醋酸乙酯),mp2042~
2078℃,ESIMSm/z19124[M-H]-;1HNMR
(DMSOd6,400MHz)δ:790(1H,d,J=95Hz,H
4),721(1H,s,H5),678(1H,s,H8),621(1H,
d,J=95Hz,H3),381(3H,s,6OMe);13CNMR
(DMSOd6,100MHz)δ:16060(C2),15112(C
7),14947(C9),14521(C6),14440(C4),
11163(C3),11046(C10),10958(C5),10273
(C8),5597(6OMe)。以上数据与文献[9]报道
的东莨菪内酯(scopoletin)一致,故确定化合物4为
东莨菪内酯。
化合物5 白色针晶(甲醇),mp1677~1698
℃,ESIMSm/z30320(100%)[M+CH3COO]
-,
24325(15%)[M-H]-;1HNMR(CD3OD,500
MHz)δ:790(1H,d,J=81Hz),560(1H,d,J=
81Hz),580(1H,d,J=47Hz),405(1H,dd,J=
51Hz),408(1H,dd,J=51,49Hz),391(1H,
m),374(1H,dd,J=122,27Hz),363(1H,dd,
J=122,32Hz)。以上数据与文献[10]报道的尿
嘧啶核苷(uridine)一致,故确定化合物5为尿嘧啶
核苷。
化合物6 浅棕色颗粒状(醋酸乙酯),mp196~
198℃,ESIMSm/z17919[M-H]-,35896[2M-
H]-;1HNMR(MeOD,400MHz)δ:755(1H,d,J=
158Hz,H7),706(1H,d,J=18Hz,H2),694
(1H,dd,J=82,18Hz,H6),680(1H,d,J=82
·5332·
第34卷第18期
2009年9月
Vol.34,Issue 18
September,2009
Hz,H5),624(1H,d,J=158Hz,H8)。综合以上
数据及与文献[11]对比,鉴定化合物 6为咖啡酸
(cafeicacid)。
化合物7 无色片状(甲醇),mp1346~1369
℃,ESIMSm/z20925[M+H]+;1HNMR(MeOD,
400MHz)δ:752(1H,d,J=159Hz,H7),703
(1H,d,J=20Hz,H2),693(1H,dd,J=82,20
Hz,H6),677(1H,d,J=82Hz,H5),623(1H,
d,J=159Hz,H8),420(2H,q,J=71Hz,H
1′),129(3H,t,J=71Hz,H2′);13CNMR
(MeOD,100MHz)δ:17056(C9),15075(C4),
14804(C3),14795(C7),12899(C1),12411
(C6),11774(C5),11653(C8),11636(C2),
6264(C1′),1586(C2′)。综合以上数据及与文
献[11]对比鉴定化合物 7为咖啡酸乙酯(cafeic
acidethylester)。
化合物8 无色油状物;1HNMR(CD3OD,500
MHz)δ:750(1H,d,J=159Hz,H7),708(1H,d,
J=19Hz,H2),697(1H,dd,J=82,19Hz,H
6),671(1H,d,J=82Hz,H5),625(1H,d,J=
159Hz,H8),412(2H,q,J=71Hz,H1′),379
(3H,s,3OMe),122(3H,t,J=71Hz,H2′)。以
上数据与文献[12]报道的阿魏酸乙酯(ferulicacid
ethylester)一致,故确定化合物8为阿魏酸乙酯。
化合物9 白色鳞片状结晶(甲醇),mp1507~
1555℃,ESIMSm/z2310[M+Na]+;1HNMR
(CD3OD,500MHz)δ:381(1H,d,J=99Hz,H
3′),375(1H,m,H5′),369(1H,dd,J=99,35
Hz,H4′),366(1H,dd,J=129,17Hz,H6′),
365(1H,d,J=116Hz,H1′),360(1H,d,J=
116Hz,H1′),357(1H,dd,J=129,17Hz,H
6′),349(2H,m,CH21),109(3H,t,J=703Hz,
CH32);
13CNMR(CD3OD,500MHz)δ:10922(C
2′),8440(C3′),8342(C5′),7891(C4′),
6302(C6′),6186(C1′),5799(C1),1631(C
2)。以上数据与文献[13]报道的乙基αD呋喃果
糖苷(ethylαDfructofuranoside)数据一致,故确定
化合物9为乙基αD呋喃果糖苷。
化合物 10 白色针晶(丙酮),mp1531~
1560℃,ESIMSm/z2310[M +Na]+,4391
[2M+Na]+;1HNMR(CD3OD,500MHz)δ:381
(d,J=99Hz,H3′),375(m,H5′),369(dd,J=
99,35Hz,H4′),366(dd,J=123,14Hz,H6′
b),365(d,J=113Hz,H1′b),360(d,J=113
Hz,H1′a),356(dd,J=123,19Hz,H6′a),349
(2H,dq,J=72,22Hz,CH21),108(3H,t,J=
72Hz,CH32);
13CNMR(CD3OD,125MHz)δ:
10298(C2′),7279(C3′),7232(C4′),7177
(C5′),6639(C6′),6473(C1′),5855(C1),
1705(C2)。以上数据与文献[14]报道的乙基β
D吡喃果糖苷(ethylβDfructopyranoside)数据一
致,故确定化合物10为乙基βD吡喃果糖苷。
[参考文献]
[1] 国家中医药管理局中华本草编委会.中华本草.第 16卷
[M].上海:上海科学技术出版社,1999:213.
[2] KitajimaM.Chemicalstudiesonmonoterpenoidindolealkaloids
frommedicalplantresourcesGelsemiumandOphiorhiza[J].J
NatMed,2007,61:14.
[3] KogureN,IshiN,KobayashiH,etal.Newiridoidsfrom
Gelsemiumspecies[J].ChemPharmBul,2008,56(6):870.
[4] 华威,郭涛,张琳,等.胡蔓藤化学成分的研究[J].中国药物
化学杂志,2007,17(2):108.
[5] HuaW,ZhaoQC,YangJ,etal.Twonewbenzofuranligangly
cosidesfromGelsemiumelegans[J].ChinChemLet,2008,19:
1327.
[6] FicoG,RodondiG,FlaminiG,etal.Comparativephytochemi
calandmorphologicalanalysesofthreeItalianPrimulaspecies
[J].Phytochemistry,2007,68:1683.
[7] BareroAF,HadourA,MuozDoradoM,etal.Polyacety
lenes,terpenoidsandflavonoidsfromBupleurumspinosum[J].
Phytochemistry,1998,48(7):1237.
[8] 陈雨,冯煦,贾晓东,等.灰毡毛忍冬花蕾的化学成分研究
[J].中草药,2008,39(6):823.
[9] KitajimaJ,KamoshitaA,IshikawaT,etal.GlycosidesofAtrac
tylodesovata[J].ChemPharmBul,2003,51(9):1106.
[10] 霍长虹,赵玉英,梁鸿,等.老鼠 化学成分的研究[J].中国
中药杂志,2005,30(10):763.
[11] 尹永芹,孔令义.甘薯的化学成分[J].中国天然药物,2008,6
(1):33.
[12] 戚进,周家宏,陈露,等.魔鬼爪化学成分的研究[J].中国药
学杂志,2006,41(21):3161.
[13] WangZT,XuGJ,HatoriM,etal.Constituentsoftherootsof
Codonopsispilosula[J].ShoyakugakuZasshi,1988,42(4):
339.
[14] 张雷红,张晓琦,江永南,等.宽叶大戟全草化学成分研究
[J].中药材,2008,31(12):1820.
·6332·
第34卷第18期
2009年9月
Vol.34,Issue 18
September,2009
NonalkaloidconstituentsofGelsemiumelegans
ZHANGBinfeng1,2,CHOUGuixin1,2,WANGZhengtao1,2
(1.KeyLaboratoryofStandardizationofChineseMedicines(MinistryofEducation),InstituteofChineseMateriaMedicaof
ShanghaiUniversityofTraditionalChineseMedicine,Shanghai201203,China;
2.ShanghaiR&DCenterforStandardizationofChineseMedicines,Shanghai201203,China)
[Abstract] Objective:TostudythenonalkaloidchemicalconstituentsofGelsemiumelegans.Method:Compoundswereisola
tedandpurifiedbyrepeatedcolumnchromatography,andtheirstructureswereelucidatedbyspectroscopicmethods.Result:Tencom
poundswereisolatedandtheirstructureswereidentifiedastamarixin(1),tamarixetin3OβDgalactopyranoside(2),scopolin(3),
scopoletin(4),uradine(5),cafeicacid(6),cafeicacidethylester(7),ferulicacidethylester(8),ethylαDfructofuranoside
(9),andethylβDfructopyranoside(10).Conclusion:Compounds13,510arefirstlyisolatedfromthisplantandcompounds1,
2,and510areisolatedfromthegenusGelsemiumforthefirsttime.
[Keywords] Gelsemiumelegans;nonalkaloid;chemicalconstituents
[责任编辑 王亚君]
《中国药用植物种子原色图鉴》书讯
由南京农业大学郭巧生教授等国内、外中药学和药用植物学界众多专家、学者及同行的共同努力下,历
时12载,不辞艰辛,精雕细琢而成的《中国药用植物种子原色图鉴》目前已由中国农业出版社正式出版。
该书利用现代生物实体摄影技术制作的药用植物种子原色图谱再配以简要的文字,直观、形象地介绍了
106科434种常用药用植物的种子实物的外部形态和内部结构形态及习性,填补了我国药用植物种子原色
图鉴方面研究的空白。全书有插图572幅。其中果实和种子外形群体图436幅,个体和解剖图136幅。所
用药用植物种子(含果实,下同)皆在成熟后采收,并选择有代表性的完整种子标本,对其主要形状特征进行
实体原色拍摄,根据鉴定研究等工作的实际需要,对部分种子进行相关纵、横切面剖视图像摄影,制作成直
观、原色彩色图,每一种药用植物的彩色照片都附有简要文字说明。
该书既是一本我国药用植物种子学研究方面的专著,对于从事药用植物教学、科研及生产管理人员来说
又是一本实用工具书,也可作为在药用植物研究方面进行国际交流或合作的重要资料。此外,因书中大量精
美的图片,对于海内外读者来说还将是一册极具观赏和收藏价值的珍本。
·7332·
第34卷第18期
2009年9月
Vol.34,Issue 18
September,2009