全 文 ：·研究报告·
云南黄连不同部位有效成分及生物量的比较研究
张金渝，王 波，金 航，潘 俊，张智慧，赵振玲，杨维泽，李晚谊
（云南省农业科学院 药用植物研究所，云南 昆明 ６５０２３１）
［收稿日期］ ２００６１２２０
［基金项目］ 云南省自然科学基金项目（２００７Ｃ１１９Ｍ）；农业科
学院资助项目（２３００９）
［通讯作者］ 金航，Ｔｅｌ：（０８７１）８０６０００３，Ｅｍａｉｌ：ｊｉｎｈａｎｇ１５１６
＠ｓｉｎａ．ｃｏｍ
云南黄连 ＣｏｐｔｉｓｔｅｅｔａＷａｌ．为毛茛科黄连属植
物，也称云连或云黄连，主产于云南省怒江地区。植
株含药根碱、小檗碱、巴马亭等多种生物碱，其含量
和抗菌消炎药效比川黄连（味连）好［１］。云南黄连
为多年生宿根草本，植株寿命长达１０年以上，其有
性生殖退化，而无性生殖发达，具有发达的地下营养
繁殖体（觅养体），一般在其植株形成根系后，每年
产生一定数量的觅养体，而觅养体又可以分化出二
级觅养体，最后形成多级的分支无性系。目前云南
黄连为粗放式半野生栽培，通常在移栽３～４年后开
始采割，在每年１１月左右，当地药农对符合标准的
根茎用小刀割下，而不破坏其他觅养体，这样就保证
云南黄连年复一年地持续采割［２，３］。尽管云南黄连
为国家药典收录品种，但有关其不同部位有效成分
含量的分布及生物量积累状况等方面的研究较少，
这对云黄连的 ＧＡＰ种植和质量控制极为不利。因
此本研究利用液相高效色谱对云南黄连不同部位的
药效成分含量进行分析，并测定其生物量，为合理采
收云南黄连，实现云黄连的ＧＡＰ种植和质量控制提
供理论依据。
１ 材料与方法
１．１ 材料 实验材料于２００３年１０月采自云南省
怒江州福贡县上帕镇珠明林村黄连地，海拔２５００～
２６００ｍ，湿度８０％以上，年均温度在７～９℃，郁蔽
度７５％左右，年降雨量为２２００～２８００ｍｍ。为林
下半野生栽培的１～４年生云南黄连植株。
１．２ 仪器与药品 美国 Ｗａｔｅｒｓ高效液相色谱仪
（配６００泵，９９６二极管阵列检测器，７１７自动进样
器，Ｍｉｌｅｎｎｉｕｍ３２软件）。盐酸小檗碱、盐酸药根碱、
盐酸巴马亭对照品购自中国药品生物制品检定所；
乙腈为色谱纯；水为超纯水；其余试剂为分析纯。
１．３ 生物量的测定 随机采取１～４年生云南黄连
样各５０株（不包括觅养枝），洗净泥沙，分出根茎、
叶、须根、叶柄后烘干，分别用电子天平称重，记录。
１．４ 药效成分的测定 测定方法参照文献［４６］
等。色谱条件：色谱柱为 ｌｕｎａＣ１８（４６ｍｍ×２５０
ｍｍ，５μｍ）；流动相００５ｍｏｌ·Ｌ－１ＫＨ２ＰＯ４（含２％
三乙胺，０１％庚烷磺酸钠，用 Ｈ３ＰＯ４调 ｐＨ３０）乙
腈（７０∶３０），检测波长３４６ｎｍ，流速１２ｍＬ·ｍｉｎ－１，
柱温２５℃。
对照品制备及标准曲线：精密称取盐酸小檗碱、
盐酸药根碱、盐酸巴马亭，用甲醇配成 ０６４ｍｇ·
ｍＬ－１（盐酸小檗碱）、０１８ｍｇ·ｍＬ－１（盐酸巴马亭）
及０２４ｍｇ·ｍＬ－１（盐酸药根碱）的混合对照品溶
液。从中精密吸取 ０２，０４，０８，１６，２０ｍＬ于
１０ｌｍＬ量瓶中，用甲醇稀释至刻度，按上述色谱条
件进样１０μＬ，测定峰面积。以进样量为横坐标（Ｘ）
峰面积为纵坐标（Ｙ）计算回归方程；盐酸小檗碱为
Ｙ＝２０２９１５６Ｘ－１００２３７，ｒ＝０９９９８；盐酸药根碱为
Ｙ＝２１６６９８８Ｘ－１６０８７，ｒ＝０９９９７；盐酸巴马汀为
Ｙ＝１７５４７９８Ｘ－１８１０５，ｒ＝０９９９８。上述生物碱精
度试验ＲＳＤ％分别为１２６，１１０，１０７（ｎ＝６）。
样品处理：随机采取３年生成熟云南黄连样３０
株，洗净泥沙，分出根茎、叶、须根、叶柄后烘干后，粉
碎后分别称取０２ｇ，加入２５ｍＬ甲醇，称重，超声提
取后，补足损失甲醇，摇匀，用微孔滤膜（０４５μｍ）
滤过，按上述色谱条件进样１０μＬ。
２ 结果与分析
２．１ 云南黄连不同生长年限不同部位的生物量变
化 从表１可见，云黄连总的生物量均很低，即使四
年生单株重也只有５５ｇ，从各部位的生物量看，药
用部位（根茎）的生物量仅占总生物量的 ８７％ ～
２３４％，而非药用部位的副产物却占总生物量的
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第３３卷第３期
２００８年２月
中 国 中 药 杂 志
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７６６％～９１３％，说明传统的利用方式对资源的利
用率还不到１／４。从生长速度看，云南黄连在第１，２
年总的生物量增加较少，第２年仅比第１年增加了
１０５％；但第３年增加最多，比第２年增加了
１０５３％；第４年生物量增长速度减缓，比第３年增
加５８５％。说明到了第３年是云南黄连的生物量
进入快速增长的时期。
从各部位在不同生长年限的生物量可以看出，
表１ 云南黄连不同生长年限不同部位生物量比较
生长
年代
根茎
质量
／ｇ
占总生物量
的比重／％
须根
质量
／ｇ
占总生物量
的比重／％
叶柄
质量
／ｇ
占总生物量
的比重／％
叶片
质量
／ｇ
占总生物量
的比重／％
总生物量
／ｇ
一年生 ０１３±００３ ８７０ ０３５±０１０ ２２８３ ０４２±００３ ２７１７ ０６３±０１５ ４１３０ １５３±０２３
二年生 ０２７±００６ １５９８ ０４３±０２２ ２５４４ ０３９±００７ ２３０８ ０５９±０１８ ３４９１ １６９±０２５
三年生 ０７８±０１０ ２２４８ ０７３±０２６ ２１０４ ０７５±０１２ ２１６１ １２０±０１７ ３４５８ ３４７±０５６
四年生 １２９±０２３ ２３４０ １１６±０３４ ２１０９ １１９±０２２ ２１５６ １８７±０２５ ３３９３ ５５０±０７６
第１年，根茎在总生物量中的比例是最小的，仅占总
生物量的８７％；随着云黄连的生长，营养物质开始
在根茎积累，第２年根茎在总生物量中的比例就几
乎翻了１倍达到１５９８％，第３年达到２２４８％后增
加的速度减慢；而叶片在第１年在总生物量中的比
例是最高的，达到４１３％，第２年降到３４９１％，以
后逐渐减少，但变化不大；叶柄也是随着云黄连的生
长，在总生物量中的比例逐渐下降，但到第３年就基
本稳定；而须根则有所不同，第２年其生物量在总生
物量中的比例反而增加，第３年有有所下降。
２．２ 云南黄连不同部位药效成分含量 从表２得
知，与其他非传统用药部位相比，云南黄连传统药用
部位（根茎）的盐酸小檗碱含量最高，达到９２７％，
巴马亭和药根碱含量以及总生物碱也是所有部位最
高的，说明根茎是云南黄连生物碱积累的主要部位。
在非传统用药部位中，各种生物碱的分布不均，须根
和叶柄的盐酸小檗碱含量达到１２１％和１１３％，叶
片的盐酸小檗碱含量较低但也有０８４％；而叶柄中
的巴马亭和药根碱含量均比须根高出近１倍，而叶
片的巴马亭含量也比须根中的高。
表２ ３年生云南黄连不同部位生物碱质量分数比较 ％
生物碱 根茎 须根 叶柄 叶片
盐酸小檗碱 ９２７±１２０ １２１±０１８ １１３±０２２ ０８４±００８
巴马亭 ０４４±０２１ ００２６±０００７ ００５６±０００８ ００３４±００１１
药根碱 ０５４±００８ ０１２±００２ ０２３±００４ ００６±００２
总生物碱 １３２１±２２１ ６４６±０２２ ４１３±０２７ ２６７±０１３
３ 讨论
通过本研究可知，云南黄连的生长速度和生物
量的积累速度较为缓慢，其生长速度与其生物规律
相关。由于云黄连高度的无性繁殖，使其有性繁殖
退化，在第１年的生长实际为觅养枝的生长，并且根
系才开始发育，营养基本靠母体通过觅养枝供给，因
此营养物质在根茎积累得少，叶片和叶柄在总生物
量中的比例较大。到了第２年结束，根系发育完全，
须根在总生物量中所占的比重在四年中是最高的，
随着营养物质开始在根茎积累，根茎在总生物量中
的比例开始增加，须根在总生物量中所占的比重减
少，并保持在一定比例。本研究也发现，到了第３年
由于吸收系统发育完全，能够通过自己的根系吸收
营养，已经不用母株供给营养，因此这一阶段也是云
南黄连生长速度最快的时期。
从不同部位在总生物量的比例来看，传统用药
部位根茎的比例不到总生物量的１／４，而叶、叶柄和
须根等非药用部位所占的比例非常高。与中国黄连
相比，四年生云黄连总的生物量和根茎的生物量仅
为四年生中国黄连生物量的２６１％和１７８％（根据
濮社班等的数据得出）［７］。其单产最高也仅仅为
１５０ｋｇ·ｈｍ－２左右［３］，远远低于中国黄连的３１２０～
４５３０ｋｇ·ｈｍ－２［８］。造成云黄连产量过低的一个主
要原因可能是云黄连在生长到第２年以后每年都会
形成新的觅养枝，其营养被大量消耗，致使产量无法
提高。
从三年生云南黄连不同部位的化学成分含量来
看，传统用药部位（根茎）是云南黄连药用化学成分
富集的主要部位。但占其总生物量的７５％以上的
非传统用药部位，也有一定含量的药用化学成分，其
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第３３卷第３期
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盐酸小檗碱的含量甚至达到或超过一些小檗属植物
根的含量［９］。因此作者在利用云南黄连根茎的同
时，也要积极开发利用其非传统药用部位，通过提取
其生物碱减少资源的浪费，实现可持续发展。
［参考文献］
［１］ 黄 骥，龙春林．云南黄连的传统种植及其在生物多样性保
护中的价值［Ｊ］．生物多样性，２００６，１４（１）：７９．
［２］ 黄 骥，裴盛基，张明宇，等．云南黄连的生物学、生态学特性
与地理分布研究［Ｊ］．云南植物研究，２００４，２６（３）：２５５．
［３］ 赵永生．怒江州云黄连生产经营状况［Ｊ］．中国民族民间医药
杂志，２００２，５６：１５９．
［４］ 刘 岱，杨立新，崔淑莲，等．不同品种和产地黄连的生物碱
含量测定［Ｊ］．中国中药杂志，１９９７，２２（２）：７９．
［５］ 吴春红，谢 颖．ＲＰＨＰＬＣ法测定黄连中小檗碱含量的研究
［Ｊ］．华西医学，２００６，２１（３）：４６７．
［６］ 刘 芳．黄连品质评价的研究及其应用．四川大学硕士论文
［Ｄ］．２００５：１９．
［７］ 濮社班，张宇和，周雪林．江苏省引种黄连的生长状况及生物
碱积累［Ｊ］．中国中药杂志，１９９８，２３（１１）：６５９．
［８］ 鲁开功，雷青文．林下栽培黄连与棚下栽培黄连综合效益比
较［Ｊ］．时珍国医国药，２００１，１２（８）：７５８．
［９］ 徐文芬，黄勇其，何顺志，等．贵州省小檗属药用植物根中小
檗碱含量的测定［Ｊ］．中国中药杂志，１９９６，２１（３）：１４４．
［责任编辑 张宁宁］
［收稿日期］ ２００７０１０９
［基金项目］ 国家自然科学基金项目（２０５０６０２７）
［通讯作者］ 袁晓凡，Ｔｅｌ：（０１０）６２５７４３７２，Ｅｍａｉｌ：ｙｕａｎｘｆ９９＠
ｙａｈｏｏ．ｃｏｍ．ｃｎ
ＨＰＬＣ分析天山雪莲组培苗与实生苗３种有效成分含量
欧 元１，２，袁晓凡１，陈文浩１，２，赵 兵１，王晓东１，王玉春１
（１．中国科学院 过程工程研究所 生化工程国家重点实验室，北京 １０００８０；
２．中国科学院 研究生院，北京 １０００４９）
菊科植物天山雪莲，又称新疆雪莲Ｓａｕｓｕｒｅａｉｎ
ｖｏｌｕｃｒａｔａＫａｒ．ｅｔＫｉｒ，属多年生的高山草本植物，５～
８年一次开花结实，是我国珍稀名贵中药材，具有极
高的临床应用和食疗保健价值。近年来，天山雪莲
在抗炎镇痛、抗早孕、抗衰老及抑制癌细胞增生方面
的作用备受关注［１］。由于严重的滥采乱挖，野生资
源已经濒临灭绝，远远无法满足市场需求，而且野生
天山雪莲种子自然萌发率极低，难于收集，现已被国
家作为濒危植物受到保护。因此，组织培养与人工
种植成为保护野生天山雪莲资源和解决供需矛盾的
有效途径。目前，国内已开展了不少有关天山雪莲
组织培养的研究［２５］，人工种植天山雪莲也已取得初
步成果［６］。而组培再生植株与人工种植植株的品
质如何，能否真正替代野生天山雪莲，尚缺乏系统的
研究工作。本实验采用 ＨＰＬＣ，测定了天山雪莲组
培苗、实生苗中３种有效成分的含量，并与野生药材
进行比较，进行早期监测，为组织培养和人工种植途
径实现天山雪莲资源的可持续利用提供依据。
１ 仪器与材料
高效液相色谱仪（Ｗａｔｅｒｓ２６９５），配自动进样
器，四元泵，柱温箱，二极管阵列检测器（Ｗａｔｅｒｓ
２９９６），Ｅｍｐｏｗｅｒ色谱工作站；ＴＤＬ－５－Ａ型低速台
式离心机（上海安亭科学仪器厂）；超纯水器（美国
Ｍｉｌｉｐｏｒｅ公司）。
甲醇、乙腈（色谱纯，Ｊ＆ＫＣｈｅｍｉｃａｌ）；无水甲醇、
醋酸（分析纯，北京化工厂）；三乙胺（分析纯，北京
化学试剂公司）；超纯水；芦丁、绿原酸对照品（中国
药品生物制品检定所，批号 ００８０２００１０５，１１０７５
２００３１２）；紫丁香苷（安徽 ＤＥＬＴＡ公司，纯度 ＞
９８％）；天山雪莲对照药材（中国药品生物制品检定
所，批号１２１２０５０１０１）；天山雪莲组培苗、实生苗由
本实验室培育，后经移栽，在新疆天池雪莲种植基地
种植２年以上。
２ 方法与结果
２．１ 色谱条件 ＤｉａｍｏｎｓｉｌＣ１８柱（４６ｍｍ×２５０
ｍｍ，５μｍ）；安谱 Ｃ１８保护柱。流动相甲醇水（含
０８％醋酸，０２％三乙胺，ｐＨ３５～４０）初始条件
（０∶１００）０～５ｍｉｎ线性梯度变至（１０∶９０），５～１５
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