全 文 :·研究报告·
金莲花牡荆苷含量的比较研究
严力群,朱殿龙,丁万隆
(中国医学科学院 北京协和医学院 药用植物研究所,北京 100094)
[收稿日期] 20080911
[基金项目] 国家科技攻关项目(2004BA721A16);国家科技支撑
计划子课题(2006BAI06A1303)
[通信作者] 丁万隆,Tel:(010)62899745,Email:wlding@imp
lad.ac.cn
金莲花 TroliuschinensisBge.为毛茛科多年生
草本植物,以花入药,其所含的黄酮类化合物具有清
热解毒、抗菌消炎等功效[12],具备良好的应用价值
和开发前景。牡荆苷作为黄酮类化合物的有效成分
之一,除具有抑菌作用外,还有抗癌、降压、抗炎及解
痉作用[34]。作者分别对金莲花的主要资源分布区
坝上及周边地区、不同种源的金莲花中牡荆苷含量
进行了对比研究,为金莲花的质量评价、品种对比选
育以及适宜种植区的选择提供了有价值的参考。
1 仪器与试药
Waters高效液相色谱仪(600型色谱泵,486检
测器,柱温箱,Empower色谱工作站),FA1004型电
子天平(上海精科天平)、FW400A型倾斜式高速万
能粉碎机(北京中兴伟业仪器有限公司)、KQ-
250E型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公
司)、DHG-9143BS-Ⅲ型电热恒温鼓风干燥箱(无
锡市苏嘉试验设备厂)等。
牡荆苷对照品购于北京禾境科技发展有限公
司,甲醇(色谱纯,天津市四友精细化学品有限公
司),娃哈哈饮用纯净水,金莲花采自河北、北京、大
兴安岭、甘孜、宁夏等地,由本所陈震研究员鉴定为
T.chinensis。
2 方法与结果
2.1 色谱条件 MerkLischrospherRPODS色谱柱
(46mm×250mm,5μm);流动相乙腈(A)水
(B),梯度洗脱:0~60min,AB12∶88~15∶85;60~
65min,AB15∶85~80∶20;AB65~70min;AB
80∶20~80∶20;AB70~75min;AB80∶20~12∶88;
AB75~90min;AB12∶88~12∶88;流速08mL·
min-1;检测波长340nm;柱温25℃;进样量20μL。
2.2 对照品溶液的制备 精密称取牡荆苷对照品
112mg,用甲醇溶解,定容于 10mL量瓶中制成
0112g·L-1标准储备液。
2.3 供试品溶液的制备 取金莲花粉末10g精
密称定,加甲醇50mL超声提取30min,提取液经
045μm微孔滤膜过滤,制成供试品溶液。牡荆苷
对照品与金莲花样品色谱图见图1。
A.对照品;B.样品;1.牡荆苷。
图1 牡荆苷及金莲花样品色谱图
2.4 标准曲线的建立 吸取对照品溶液,分别进样
25,5,10,20,25μL,按上述色谱条件测定,以峰面
积积分值为纵坐标,浓度为横坐标,绘制标准曲线,
回归 方 程 为 Y=327×106X-155×105,
r=09998。结果表明,牡荆苷的进样量在28~28
μg与峰面积呈良好的线性关系。
2.5 精密度试验 取对照品溶液重复进样5次,牡
荆苷的峰面积积分值的RSD17%。
2.6 重现性试验 准确称取同一个金莲花样品,平
行取样5份,每份1g,按供试品溶液制备方法制备,
以上述色谱条件进样,测定峰面积,结果 RSD
17%。
2.7 加样回收率试验 精称已知牡荆苷含量的金
莲花样品10g,加入一定量的牡荆苷对照品,按供
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试品溶液制备方法制备,以上述色谱条件进样,测定
峰面积,结果平均加样回收率为 1008%,RSD
20%。
2.8 样品含量测定 取各地采集的金莲花样品,按
上述方法进行测定,结果见表1,2。
表1 坝上及周边地区金莲花牡荆苷质量分数
No. 采集地 质量分数/%
1 多伦 0406
2 沽源1号 0413
3 三道河口 0297
4 红松洼 0375
5 烟子窑 0305
6 机械林场 0430
7 御道口牧场 0578
8 正兰旗 0523
9 坝上栽培 0498
表2 不同种源金莲花的牡荆苷质量分数
No. 采集地 样品名 质量分数/%
1 围场野生 金莲花 0392
2 围场栽培 金莲花 0498
3 北京栽培 金莲花 0655
4 河北安国 金莲花 0430
5 宁夏银川 短瓣金莲花 0288
6 北京栽培 短瓣金莲花 0523
7 兴安盟 短瓣金莲花 0431
8 大兴安岭 短瓣金莲花 0201
9 黑龙江伊春 长瓣金莲花 0305
10 吉林长白县 长白金莲花 0344
11 新疆霍城 阿尔泰金莲花 0319
12 四川甘孜县 矮金莲花 0236
3 讨论
坝上地区 金 莲 花 的 牡 荆 苷 含 量 浮 动 在
0297%~0578%,平均 0425%。以御道口牧场
含量最高,三道河口最低;后面4个样品的含量比前
面5个高,因此尽管在同一地区,在不同的小区域内
金莲花牡荆苷的含量会存在一定的差异,提示应注
意产地的生态环境如小气候、选地等对药材有效成
分的影响;9号样品是唯一1个栽培金莲花样品,含
牡荆苷0498%,在所有样品中占第三位,高于坝
上地区野生金莲花牡荆苷含量的平均值0416%,
也就是说坝上地区栽培金莲花的牡荆苷含量不低,
证实了人工栽培金莲花的可行性与合理性;在提倡
GAP规范化种植的今天,更加突显出金莲花栽培品
种的优点,不但易于管理且含量高,更为金莲花的规
范化种植提供了很好的理论基础。
由表2可知,不同种源金莲花的牡荆苷质量分
数平均值为0393%,其中以3号样品即北京人工
栽培金莲花最高0655%,8号样品即大兴安岭短瓣
金莲花最低0201%;1~4号样品均为不同产地的
金莲花,5~8号为短瓣金莲花,9~12号为其他品
种。从总体来看,金莲花和短瓣金莲花这2个品种
的总黄酮含量高于其他几个品种,提示品种不同导
致有效成分有所差异;北京(0655%)和坝上
(0498%)地区人工栽培金莲花的牡荆苷含量比原
产地野生金莲花 (0392%)分别高 0263%,
0106%,由于实验样本量的关系,不足以得出北京
和坝上2个地区人工栽培金莲花牡荆苷含量均比野
生金莲花高的结论,但本实验为北京以及坝上地区
适宜人工栽培金莲花提供了理论依据。目前,市场
流通的500种常用中药材中有200种是野生变家种
的。野生资源并非取之不尽,有的品种已近枯竭。
随着我国中药产业的发展,对原料药需要量将不断
增大,大规模开展紧缺中药材的GAP规范化种植势
在必行。
[参考文献]
[1] 邹建华,杨峻山.短瓣金莲花的化学成分研究[J].中国中药杂
志,2005,40(10):733.
[2] 林秋凤,李药兰,冯顺卿,等.金莲花活性成分研究[J].分析试
验室,2003,22(增刊):310.
[3] 黄文哲,梁 旭.HPLC测定短瓣金莲花中两种黄酮苷的含量
[J].中国药学杂志,2000,35(10):658.
[4] BanoH,KumarI,ShamsiMA,etal.Pharmacologicalinvestiga
tionsonvitexin[J].PlantaMed,1981,43(3):396.
[责任编辑 王亚君]
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