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Chemical constituents of Galium verum

蓬子菜化学成分研究



全 文 :蓬子菜化学成分研究
赵春超1,邵建华1,曹丹丹1,张玉伟2,李铣2
(1.扬州大学 生物科学与技术学院,江苏 扬州 225009;
2.沈阳药科大学 中药学院,辽宁 沈阳 110016)
[摘要] 目的:对茜草科拉拉藤属植物蓬子菜Galiumverum全草的95%乙醇提取物进行分离并鉴定。方法:经反复纯化
制备化合物,并根据化合物的理化性质分析、波谱解析、对照品比较及与文献报道对比鉴定化合物的化学结构。结果:从95%
乙醇提取物中分离得到11个化合物,分别鉴定为(+)松脂素4,4′O二βD吡喃葡萄苷(1),表松脂醇(2),右旋杜仲树脂酚
(3),异鼠李素(4),异鼠李素3OαL吡喃鼠李糖基(16)βD吡喃葡萄苷(5),香叶木素(6),香叶木素7OβD吡喃葡萄糖
苷(7),异槲皮苷(8),熊果酸(9),熊果醛(10),茜草萜酸(11)。结论:化合物1~5,9~11为从本属植物中首次分离得到。
[关键词] 茜草科;蓬子菜;化学成分;结构鉴定
[收稿日期] 20090506
[通信作者] 邵建华,Tel/Fax:(0514)87825791,Email:jhshao@
yzu.edu.cn
  蓬子菜 GaliumverumL.为茜草科 Rubiaceae拉
拉藤属植物蓬子菜的全草。具有清热解毒、利胆、行
瘀、止痒等作用,主治急性荨麻疹、肝炎、腹水、咽喉
肿疼、妇女闭经、水田皮疹、静脉炎、跌打损伤等。近
年研究表明,蓬子菜具有较好的治疗心脑血管疾病
的作用,组成的复方制剂已经在临床应用中取得了
不错的疗效[1]。蓬子菜在我国资源丰富,但是化学
成分研究并不多见,为了进一步合理利用和开发蓬
子菜资源,作者对蓬子菜化学成分进行了研究,从
95%的乙醇回流提物中分离得到11个化合物,根据
理化常数、化学方法及谱学分析确定了它们的结构,
化合物1~5,9~11为首次从本属中分离得到。
1 材料
日本产YanacoMPS3显微熔点测定仪(温度计
未校正),BrukerARX300(或600)型核磁共振波谱
仪(瑞士),JASCOP1010旋光仪,Agilent1100液质
联用仪测定,TLC用硅胶 GF254(10~40μm)、柱色
谱硅胶H(200~300目)均为青岛海洋化工有限公
司生产。SephadexLH20(Pharmacia),色谱试剂为
分析纯。
蓬子菜采自黑龙江省虎林县,并由沈阳药科大
学药用植物教研室孙启时教授鉴定为拉拉藤属植物
蓬子菜G.verum的全草。凭证标本(20040715)存
放在沈阳药科大学天然药物标本室。
2 提取与分离
干燥蓬子菜全草(200kg)的95%乙醇回流提
取物,依次用是石油醚、氯仿和正丁醇萃取,其中氯
仿萃取物(50g),500g硅胶装柱,以石油醚丙酮梯
度洗脱,得5个流分,Fr.3(100∶10)得到化合物 2
(16mg),Fr.4(100∶18)得化合物3(9mg)。氯仿萃
取乳化部分(150g),500g硅胶装柱,以石油醚丙
酮梯度洗脱,得6个流分,Fr.3(100∶9)经 Sephadex
LH20,以氯仿甲醇(3∶1)为洗脱剂得到化合物10
(12mg),Fr.4(100∶11)得化合物 9(13g),Fr.5
(100∶30)得化合物 11(124mg)。正丁醇萃取物
(650g),25kg硅胶装柱,以氯仿甲醇梯度洗脱,
得9个流分,Fr.1(100∶1)得到化合物6(114mg),
Fr.2(100∶2)得化合物4(60mg),Fr.6(100∶8)得到
化合物7(24g),8(450mg);Fr.7(100∶13)得化合
物1(325mg),Fr.8(100∶15)得到化合物 5(703
mg)。
3 结构鉴定
化合物1 白色粉末,mp252~254℃(氯仿甲
醇),Molish反应呈阳性,酸水解检出 D葡萄糖。
ESIMSm/z7051[M+Na]+,6810[M-H]-,
5189[M-glucose-H]-,5431[M-glucose+
Na]+。1HNMR(DMSOd6,600MHz)δ:703(2H,
brd,J=83Hz,H5,5′),695(2H,brs,H2,2′),
685(2H,d,J=83Hz,H6,6′),487(2H,d,J=
55Hz,H1″,1),467(2H,d,J=33Hz,H7,7′),
445(2H,m,H9eq,9′eq),414(2H,m,H9ax,9′
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ax),377(6H,s,3,3′OCH3),315(2H,m,H8,
8′)。13CNMR(DMSOd6,150MHz)δ:1490(C3,
3′),1460(C4,4′),1351(C1,1′),1182(C6,
6′),1152(C5,5′),1106(C2,2′),1002(C1″,
1),850(C7,7′),772(C3″,3),769(C5″,
5),733(C2″,2),711(C9,9′),710(C4″,
4),607(C6″,6),557(OCH3),538(C8,8′)。
以上核磁数据与文献[2]报道基本一致,故鉴定化
合物1为(+)松脂素4,4′O二βD吡喃葡萄苷。
化合物2 白色针晶,mp150~153℃(氯仿甲
醇),三氯化铁铁氰化钾反应阳性。ESIMSm/z
3813[M+Na]+,3593[M+H]+,3572[M-
H]-。1HNMR(CDCl3,600MHz)δ:695(1H,d,J=
15Hz,H2′),691(3H,m,H2,5,5′),686(1H,
dd,J=82,15Hz,H6),680(1H,ddd,J=80,
15,07Hz,H6′),486(1H,d,J=52Hz,H7′),
443(1H,d,J=72Hz,H7),413(1H,brd,J=
98Hz,H9ax),392(3H,s,3OCH3),390(3H,s,
3′OCH3),380~385(2H,m,H9′eq,9eq),327~
338(2H,m,H8′,9′ax),290(1H,m,H8)。13C
NMR(CDCl3,150MHz)δ:1467(C3),1464(C
3′),1453(C4),1446(C4′),1331(C1),1304
(C1′),1192(C6),1184(C6′),1142(C5,5′),
1087(C2),1082(C2′),878(C7),821(C
7′),716(C9),697(C9′),560(OCH3×2),
545(C8),502(C8′)。以上数据与文献[3]报道
基本一致,故鉴定化合物2为表松脂醇。
化合物3 白色粉末,mp160~163℃(氯仿甲
醇),三氯化铁铁氰化钾反应阳性。[α]23D +125°
(c005,CHCl3)。ESIMSm/z4111[M+Na]
+,
3870[M-H]-。参照文献[4],结合 2DNMR
(HSQC和HMBC),对化合物3的1DNMR数据进行
归属。1HNMR(CDCl3,600MHz)δ:689(1H,brs,
H2′),688(1H,brd,J=82Hz,H5′),682(1H,
d,J=82Hz,H6′),659(2H,s,H2,6),475(1H,
d,J=47Hz,H7′),472(1H,d,J=47Hz,H7),
427(2H,m,H9eq,9′eq),389(9H,s,3×OCH3),
388(2H,m,H9ax,9′ax),310(2H,m,H8,8′)。
13CNMR(150MHz,CDCl3)δ:1471(C3,5),1467
(C3′),1452(C4′),1342(C4),1328(C1′),
1320(C1),1185(C6′),1142(C5′),1086(C
2′),1026(C2,6),861(C7′),858(C7),718
(C9′),715(C9),560(3×OCH3),543(C8′),
540(C8)。以上碳谱数据、ESIMS值和[α]值与
文献[4]报道基本一致,故鉴定化合物3为右旋杜
仲树脂酚。
化合物4 黄色粉末,盐酸镁粉反应阳性。1H
NMR(DMSOd6,300MHz)δ:1247(1H,s,5OH),
777(1H,brs,H2′),770(1H,brd,J=85Hz,H
6′),695(1H,d,J=85Hz,H5′),648(1H,d,J=
19Hz,H8),620(1H,d,J=19Hz,H6),385
(3H,s,OCH3)。
13CNMR(DMSOd6,75MHz)δ:
1760(C4),1647(C7),1603(C5),1560(C
9),1496(C4′),1468(C2),1464(C3′),1364
(C3),1216(C6′),1213(C1′),1146(C2′),
1115(C5′),1035(C10),978(C6),938(C
8),560(OCH3)。与异鼠李素标准品色谱行为一
致。以上数据与文献[5]报道基本一致,故鉴定化
合物4为异鼠李素。
化合物5 黄色粉末,盐酸镁粉反应阳性,Mol
ish反应阳性,酸水解检测出 D葡萄糖和 L鼠李糖,
苷元与化合物 4的理化性质、色谱行为完全一致。
ESIMSm/z6472[M+Na]+,6229[M-H]-。1H
NMR(DMSOd6,300MHz)δ:1253(1H,s,5OH),
784(1H,brs,H2′),749(1H,brd,J=85Hz,H
6′),689(1H,d,J=85Hz,H5′),619(1H,brs,
H8),600(1H,brs,H6),538(1H,d,J=68Hz,
H1″),440(1H,brs,H1),383(3H,s),097
(3H,d,J=69Hz,H6)。13CNMR(DMSOd6,75
MHz)δ:1764(C4),1641(C7),1611(C5),
1571(C2),1556(C9),1502(C4′),1471(C
3′),1328(C3),1223(C6′),1208(C1′),1155
(C5′),1132(C2′),1040(C10),1011(C1″),
1005(C1),986(C6),938(C8),760(C
5″),746(C3″),745(C2″),720(C4),707(C
3),704(C4″),701(C2),685(C5),670
(C6″),557(OCH3),179(C6)。以上数据与文
献[6]报道基本一致,故鉴定化合物5为异鼠李素
3OαL吡喃鼠李糖基(1→6)βD吡喃葡萄苷。
化合物6 黄色粉末,盐酸镁粉反应阳性。1H
NMR(DMSOd6,300MHz)δ:1296(1H,s,5OH),
754(1H,brd,J=83Hz,H6′),744(1H,brs,H
2′),708(1H,d,J=83Hz,H5′),676(1H,s,H
3),648(1H,brs,H8),621(1H,brs,H6),388
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(3H,s,OCH3)。
13CNMR(DMSOd6,75MHz)数据
与文献[7]报道基本一致,故鉴定化合物6为香叶
木素。
化合物7 黄色粉末,盐酸镁粉反应阳性,Mol
ish反应呈阳性,酸水解检测出 D葡萄糖。ESIMS
m/z4852[M +Na]+。1HNMR(DMSOd6,300
MHz)δ:1295(1H,s,5OH),758(1H,brd,J=86
Hz,H6′),746(1H,brs,H2′),711(1H,d,J=
86Hz,H5′),685(1H,s,H3),682(1H,d,J=
17Hz,H8),646(1H,d,J=17Hz,H6),510
(1H,d,J=72Hz,H1″),388(3H,s,4′OCH3)。
13CNMR(DMSOd6,75MHz)δ:1821(C4),1641
(C7),1632(C2),1612(C5),1571(C9),
1514(C4′),1469(C3′),1230(C1′),1190(C
6′),1132(C2′),1122(C5′),1049(C10),
1039(C3),1000(C1″),997(C6),949(C8),
775(C5″),762(C3″),732(C2″),697(C4″),
607(C6″),559(OCH3)。以上数据与文献[8]报
道基本一致,故鉴定化合物7为香叶木素7OβD
吡喃葡萄糖苷。
化合物8 黄色粉末,盐酸镁粉反应阳性,Mol
ish反应阳性,酸水解检测出 D葡萄糖。1HNMR
(DMSOd6,300MHz)δ:1260(1H,s,5OH),761
(1H,brd,J=90Hz,H6′),752(1H,brs,H2′),
682(1H,d,J=90Hz,H5′),641(1H,d,J=18
Hz,H8),620(1H,d,J=18Hz,H6),549(1H,
d,J=75Hz,H1″)。13CNMR(DMSOd6,75MHz)
δ:1785(C4),1649(C7),1624(C5),1569(C
9),1568(C2),1495(C4′),1459(C3′),1343
(C3),1237(C6′),1220(C1′),1171(C5′),
1164(C2′),1051(C10),1029(C1″),997(C
6),945(C8),773(C5″),744(C3″),729(C
2″),701(C4″),612(C6″)。以上数据与文献[9]
报道基本一致,故鉴定8为异槲皮苷。
化合物9 白色针状结晶,mp278~280℃(氯
仿醋酸乙酯)。LiebermannBurchard反应呈阳性。
1HNMR(C5D5N,300MHz)δ:548(1H,brs,H12),
345(1H,dd,J=98,61Hz,H3),125(3H,s,H
23),123(3H,s,H27),105(3H,s,H26),102
(3H,s,H24),101(3H,d,J=62Hz,H30),099
(3H,d,J=65Hz,H29),089(3H,s,H25)。13C
NMR(C5D5N,75MHz)数据与文献[10]报道基本一
致,故鉴定化合物9为熊果酸。
化合物 10 白色粉末,mp218~220℃(氯
仿),LiebermannBurchard反应呈阳性。1HNMR
(CDCl3,300MHz)δ:933(1H,s,H28),531(1H,
dd,J=34,34Hz,H12),321(1H,dd,J=103,
45Hz,H3),109(3H,s,H27),099(3H,s,H
23),096(3H,d,J=63Hz,H30),092(3H,s,H
24),087(3H,d,J=63Hz,H29),078(3H,s,H
25),076(3H,s,H26)。13CNMR(CDCl3,75MHz)
δ:2075(C28),1378(C13),1262(C12),790
(C3),552(C5),526(C18),501(C17),475
(C9),421(C14),398(C8),390(C4),388
(2×C19,20),387(C1),369(C10),331(C
22),318(C7),302(C21),297(C23),281(C
15),272(C2),233(C27),232(C16),230(C
11),211(C30),182(C6),172(C29),167(C
26),156(2×C24,25)。以上数据与文献[10]报
道基本一致,故鉴定化合物10为熊果醛。
化合物11 白色粉末,mp291~293℃(氯仿
甲醇)。LiebermannBurchard反应呈阳性。1HNMR
(C5D5N,300MHz)δ:552(1H,brs,H12),394
(2H,m,H30),124(3H,s),122(3H,s),116
(3H,d,J=63Hz),106(3H,s),101(3H,s),
088(3H,s)。13CNMR(C5D5N,75MHz)δ:1800(C
28),1392(C13),1257(C12),781(C3),652
(C30),558(C5),536(C18),481(2×C9,
17),475(C20),425(C14),400(C8),394(C
4),391(C1),375(C22),373(C10),339(C
19),336(C7),288(C2),287(C23),281(C
15),257(C21),250(C16),239(C27),237
(C11),188(C6),175(C24),173(C29),
157(C25),166(C26)。以上数据与文献[11]报
道基本一致,故鉴定化合物11为茜草萜酸。
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ChemicalconstituentsofGaliumverum
ZHAOChunchao1,SHAOJianhua1,CAODandan1,ZHANGYuwei2,LIXian2
(1.ColegeofBioscienceandBiotechnology,YangzhouUniversity,Yangzhou25009,China;
2.SchoolofTraditionalChineseMateriaMedica,ShenyangPharmaceuticalUniversity,Shenyang110016,China)
[Abstract] Objective:ToinvestigatethechemicalconstituentsoftheextractofGaliumverum.Method:Thecompoundswere
isolatedbychromatographyandidentifiedbyspectraldata.Result:Theelevencompoundsobtainedwereidentifiedas(+)pinores
inol4,4′ObisβDglucopyranoside(1),epipinoresinol(2),(+)medioresinol(3),isorhamnetin(4),isorhamnetin3OαLrh
amnopyranosyl(16)βDglucopyranoside(5),diosmetin(6),diosmetin7OβDglucopyranoside(7),quercetin3OβDgluco
pyranoside(8),ursolicacid(9),ursolicaldehyde(10)andrubifolicacid(11).Conclusion:Compounds15and911wereisola
tedfromthisgenusforthefirsttime.
[Keywords] Rubiaceae;Galiumverum;structuresidentification;chemicalconstituents
[责任编辑 王亚君]
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第34卷第21期
2009年11月
                           
Vol.34,Issue 21
 November,2009